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INFORME N 1
Ttulo:
Preparacin de una muestra fija de bacterias para tincin y
Tincin simple con colorantes bsicos.
APELLIDOS Y NOMBRES
20121244
20120431
MESA N 3
INTRODUCCIN
La microbiologa es una ciencia biolgica que se encarga de estudiar a los
microorganismos. Estos microorganismos son seres vivos diminutos que
individualmente suelen ser demasiado pequeos para ser observados a simple vista,
por lo que se usan microscopios para su observacin y unas muestras que se
ensearon a preparar en la prctica de laboratorio. La preparacin de una muestra
fija de bacterias para tincin y tincin simple con colorantes bsicos.
En el informe se explicaran dichas tcnicas de fijacin y tincin, los microorganismos
que se estudiaron, tambin la forma, tamao y agrupaciones del microorganismo.
Objetivos
1.- Aprender los procedimientos para la preparacin de una muestra fija de bacterias
para tincin.
2.- Aprender los procedimientos para la tincin simple con colorantes bsicos.
3.- Observar las diferentes formas, tamaos y agrupaciones que presentan el
microorganismo aplicando el mtodo simple de tincin.
4.- Que colorante bsico es ms reactivo y eficiente al contacto con los
microorganismos.
I)
MATERIALES Y MTODOS
Portaobjetos
Microscopio ptico
Solucin de cristal violeta
Solucion de cloruro de azul de metileno
Solucin de carbolfucsina
Asa de Kolle
Mechero de alcohol
Piseta con agua
Aceite de inmersin
Papel secante
Soporte para tincin
Cultivos: E. coli. , Staphylococus sp. , Bacillus sp.
Metodologa:
-Primero se prepar la muestra:
Se coloc una gota de agua sobre la lmina portaobjeto limpia. Con la
asa de Kolle se coloc la muestra a fijar, se esparci bien hasta que se
form una pelcula delgada. Se sec la lmina al aire y con ayuda del
mechero. Se pas la lmina tres veces sobre el mechero, cuidando que
la pelcula este hacia arriba y que la lmina no se recaliente pues podra
alterar la forma y estructura del microorganismo.
-Luego se hizo la tincin de la muestra:
Se agreg una cantidad razonable de colorante bsico (cristales de
violeta, azul de metileno o carbolfucsina) para la tincin de muestra,
actuando un tiempo correspondiente a cada colorante bsico (10 seg.,
20 seg. o 5 seg.) respectivamente luego se removi con agua de la
piseta, finalmente se sec la muestra sobre el mechero despus de ello
se coloca una gota del aceite de cedro colocndolo as en el
microscopio compuesto a 100 x y se procedi a observar la muestra.
CUESTIONARIO
Pregunta 1
Pregunta 2
(COCOS)
(BACILOS)
(ESPIRALADOS)
Fuente de las
imgenes: Introduccin
a la microbiologa de J.
Tortora, R. Funke y L.
Case (2007) 9 edicin
5.-Qu
importancia le
atribuye a las
diferencias en
reactividad, los
colorantes
empleados?
Los
colorantes
empleados
tienen diferentes
efectos, en el caso de las gram- negativas, son constantes en su reaccin, los
organismos gram positivo pueden presentar respuestas variables, por ejemplo
los cultivos antiguos de algunas bacterias gram positivas pierden la propiedad
de retener el cristal de violeta, y en consecuencia se tien con la safranina.
(PELCZAR, M; REID, R. 1966.)
Los colorantes ms reactivos (como la carbolfucsina), a pesar de ahorrar
tiempo, pueden no ser tiles para determinados tipos de bacterias, adems en
algunos casos pueden teir tanto bacterias como restos de materia orgnica
incluidos en la muestra, o incluso 2 tipos diferentes de bacterias que se quieran
diferenciar, lo que causara confusin e imprecisin. Los colorantes menos
reactivos, o aquellos que tardan mayor tiempo en enlazarse, puede que
presenten mayor dificultad a la hora de entrar en la bacteria, por tanto pueden
ser ms especficos y reaccionen en menor medida con la materia orgnica.
6.- Qu funcin cumple el aceite de cedro?
La funcin del aceite de inmersin es restringir el movimiento de la muestra,
adems de evitar el rozamiento entre el cubre objetos y el objetivo,
generalmente se lo utiliza cuando vamos a observar con el objetivo 100x. Otra
funcin del aceite de inmersin es evitar que la luz se desve; al contrario lo
que se pretende es que la luz llegue concentrada hacia la muestra
Bibliografa