TEMA 4.

Citoplasma y genoma bacteriano

4.1 Matriz citoplasmtica
Es todo lo que hay entre la membrana plasmtica y el nucleoide. En las clulas
procariotas no hay orgnulos delimitados por membranas tpicas. En la matriz
citoplasmtica encontramos ribosomas dispersos (en todas las bacterias); las
inclusiones; el material gentico (nucleoide) donde observamos el cromosoma
bacteriano. Adems, algunas bacterias tambin presentarn plsmidos.
o El protoplasto es el conjunto del contenido citoplasmtico protegido por
la membrana.
Para obtener protoplastos se resuspende el cultivo bacteriano en una
solucin isotnica (para evitar la lisis) y se trata el cultivo de bacterias
con lisozima (degrada pared celular)

4.1.1

Ribosomas
Son estructuras complejas que se
encuentran bien libres en el
citoplasma o bien adheridos a la
membrana plasmtica. Su funcin es
la sntesis de protenas. Los que se
encuentran libres en el citoplasma
sintetizaran protenas que
permanecern en el medio celular;
pero los adheridos sintetizaran
protenas que sern transportadas al
exterior.
Las dos subunidades se unen para la
sntesis, al acabar se vuelven a
separar.
Estn compuestos por ARN y
protenas.
4.1.2 Grnulos de reserva: suelen ser
cmulos de sustancias para que
luego las bacterias las usen de
reserva para poder utilizarlos cuando les falten nutrientes. Pueden estar
rodeados por una membrana de otra composicin.

4.1.2.1 Grnulos de cianoficina

Algunas cianobacterias, cuando hay exceso de
nitrgeno en el medio, ellas lo almacenan en forma
de grnulos. Son pptidos grandes formados por
aminocidos ricos en nitrgeno: Arg y Asp. Poseen
una envuelta lipdica. Se pueden observar por
microscopa ptica de contraste de fases, de campo
claro (algn caso) y electrnica.
4.1.2.2 Grnulos de poli-hidroxibutirato (PHB)
Se trata de polmeros para el almacenamiento
de carbono, de naturaleza lipdica. Estn
compuestos de acido hidroxibutlico. Se tien
con negro sudn.
Aparte, algunas bacterias pueden almacenar
compuestos ricos en carbono de naturaleza
polisacrida, como el glucgeno.
Otras bacterias pueden almacenar compuestos inorgnicos como polifosfatos o
granulos de azufre.
4.1.3 Otras inclusiones
4.1.3.1 Magnetosomas
son orgnulos sensores del campo magntico
terrestre. Se pueden encontrar sobre todo en
bacterias acuticas. Suelen ser cristales de
magnetita (Fe3O4). Las bacterias que lo poseen
se convierten un dipolo magntico permanente.
Estn rodeados de una envuelta lipdica formada
por fosfolpidos, protenas y glucoprotenas, en
forma de semimembrana.
4.1.3.2 Vesculas de gas
Son estructuras huecas, pequeas y cilndricas con una pared muy rigida
(compuesta en su 97% por la protena GvpA,). Esa
rigidez le transfiere la impermeabilidad del agua
pero s permite la entrada de gases atmosfricos.
Van a regular la flotabilidad hasta alcanzar su
nivel optimo para su modo de vida. Cuando las
vesculas se agregan forman las vacuolas de gas.
4.1.4 Chaperonas moleculares

Son protenas en el
citoplasma que facilitan el
plegamiento de los
polipptidos recin
formados. Van a jugar un
papel fundamental en la
matriz citoplasmtica, llena
de cadenas de polipptidos;
y en protenas en proceso
de formacin. Reconocen
los polipptidos no plegados
o las protenas parcialmente
desnaturalizadas. Podran
plegarse de forma inadecuada, creando complejos no funcionales.
4.2 Endospora bacteriana: es una forma de resistencia. Nacen por
diferenciacin celular Esporulacin
4.2.1 Caracteristicas generales y propiedades biolgicas
Se trata de una estructura especial inactiva de resistencia a condiciones
medioambientales estresantes. Son muy resistentes y patgenas, por lo que
adquieren una gran importancia. No tienen carcter reproductor, y solo
aparecen cuando las condiciones son las necesarias. Son nicas en su grado
tan alto de termoresistencia. (para poder observarlas al microscopio ptico,
habra que aplicarle una tincin muy fuerte).
4.2.2 Forma, tamao, y disposicin
Su forma puede ser oval, esfrica o
cilndrica.
El tamao puede ser deformante y no
deformante.
La disposicin puede ser central,
subterminal y terminal.

4.2.3 Estructura y composicin qumica

Protoplasto: es una
membrana citoplasmtica, con un contenido muy deshidratado (20-30%
menos agua que la clula vegetativa), escasos ribosomas y ADN y un
numero reducido de enzimas. Es mayoritario en l el cido dipicolnico,
sobre todo como dipicolinato clcico.
No tienen: ARNm, aminocidos, ni polmeros de reserva
S tienen, polmeros de protenas de bajo peso molecular.

Por lo tanto, son pequeas protenas cido solubles que se unen al ADN para
estabilizarlo y protegerlo en condiciones adversas (alta temperatura, radiacin,
desecacin, etc.)
4.2.4 Germinacin
Es la transformacin de esporas inactivas en clulas vegetales activas. Consta
de tres fases:
1. Activacin: (es reversible) calentamiento de la espora hasta
temperatura subletal o almacenando las esporas semanas o meses a 4oC
o Temperatura ambiente.
2. Germinacin: hinchazn de la espora, rotura o absorcin de la cubierta,
prdida de termorresistencia y resistencia a otros factores, prdida de
refringencia, liberacin de los componentes y aumento del metabolismo.
Desencadenada por muchos metabolitos (aminocidos, azcares...)
3. Crecimiento: sntesis de novo de ARN, protenas y ADN, captacin de
agua (mayor hinchazn)

4.2.5 Aspectos aplicados de las endosporas bacterianas

BIOINSECTICIDAS: Cuando los insectos ingieren cristal en un medio alcalino,

el cristal se disuelve y sueltan la protoxina, que dar lugar a la toxina activa,
que actuar sobre los insectos.

4.3 El nucleoide
Regin irregular del citoplasma en el que se sita el cromosoma procaritico.
ADN (60%) + ARN + protenas en pequea cantidad.
La longitud del ADN es mucho mayor que la de la clula, Pero cabe dentro de
ella gracias a que se empaqueta de forma superenrollada.
4.4 Genomio bacteriano
Es el conjunto de la informacin gentica que posee una bacteria, cromosoma
y plsmidos.
Para que los plsmidos puedan replicarse autnomamente tienen su propio
origen de replicacin.
El cromosoma esta formado por una nica molcula de ADN circular, cerrada
con enlace covalente (aunque haya excepciones).

4.5 Haploida
No hay fases
estables diploides
en su ciclo.
Se trata de un nico
cromosoma en forma de una molcula de ADN bicatenario circular.
4.6 Cromosoma
4.6.1 Tamao
Es proporcional a la complejidad metabolica y morfolgica.
4.6.2 Nmero de genes
Gen: Fragmento de ADN compuesto de una secuencia reguladora que hace
posible la transcripcin y de una regin que se transcribe y que codifica un
polipptido (va ARN mensajero) o una secuencia de ARN ribosmico o de ARN
de transferencia.
4.6.3 Contenido en G + C
Es caracterstico de cada especie, y suele estar entre el 24-25% hasta el 75%.
Necesitan un mnimo de 26% para poder sintetizar todos los aminocidos.
Fue el primer criterio taxonmico basado en argumentos moleculares, pero hoy
da ha sido superado por los anlisis de hibridacin de cidos nucleicos.

4.6.4 Estructura

Superenrollamiento: Se trata de una molcula

de ADN ms compacta que colabora para que el
cromosoma quepa dentro de la clula y permite la
separacin de las cadenas (crucial para muchas
actividades del ADN).
La funcin de las protenas bsicas HL es estabilizar el ADN cuando est
superenrollado, ya que el ADN es cido (tiene muchas cargas negativas que se

repeleran). Las protenas bsicas tienen cargas positivas que ayudan al

plegamiento del ADN, estabilizndolo en la conformacin superenrollada.
4.7 Plsmidos
Pueden estar integrados en el cromosoma o no.
Se denomina episoma cuando el plsmido tiene la capacidad de integrarse en
el cromosoma.
Son casi exclusivos de las clulas procariotas (en mohos y levaduras tambin).
Son portadores de informacin gentica adicional, lo que les confiere una
ventaja selectiva sobre las clulas que no los posean.
No son necesarios para el crecimiento, la reproduccin y la viabilidad.
Son herramientas muy tiles en ingeniera gentica, para los vectores de
clonacin.
Clasificacin plsmidos:
4.7.1 Segn el tamao: Pequeos: 1,5 - 15 kb
Medianos: 15 - 60 kb
Grandes o megaplsmidos: de 60 a cientos de kb
4.7.2 Segn la forma: ADN covalentemente cerrado y superenrrollado.
Plsmidos lineales.
4.7.3 Segn nmero de copias: mnimo de 1 a 3, mximo mas de 100.
Bajo numero de copias (1 a 10)
Alto numero de copias (ms de 100)

4.7.4 Autotransmisin y movilizacin

Existen los plasmidos autotransmisibles o conjugativos: genes tra y oriT.
Y los plsmidos movilizables: plsmidos conjugativos que les ayudan.
Pero hay muchos plsmidos que no son ni conjugativos ni movilizables.

4.7.5 Algunas
caractersticas genticas transmitidas en plasmidos
1. Resistencia a metales pesados y compuestos txicos
2. Resistencia a antibiticos (uno o varios) y otros antimicrobianos 3. Capacidad
de transferir genes cromosmicos
4. Produccin de antibiticos y bacteriocinas
5. Adquisicin de funciones fisiolgicas (p.e., degradacin de
compuestos txicos, crecimiento en otras fuentes de carbono,
etc.)
6. Produccin de toxinas y otros factores de virulencia

Plsmidos crpticos: su funcin no es conocida o no se han detectado o no se

conocen sus efectos fenotpicos.