UNIVERSIDAD DE TALCA

Instituto Biologa vegetal y Biotecnologa

PRACTICO N 1
RECONOCIMIENTO DE MOLECULAS ORGANICAS
PROTEINAS
INTRODUCCION
Las protenas son macromolculas compuestas por carbono, hidrgeno, oxgeno y nitrgeno.
La mayora tambin contienen azufre y fsforo. Las mismas estn formadas por la unin de
varios aminocidos, unidos mediante enlaces peptdicos.
El orden y disposicin de los aminocidos en una protena depende del cdigo gentico, ADN,
de la persona.
Son esenciales para el crecimiento. Las protenas constituyen alrededor del 50% del
peso seco de los tejidos y No existe proceso biolgico alguno que no dependa de la
participacin de este tipo de sustancias.
Proporcionan los aminocidos esenciales fundamentales para la sntesis tisular.
Son materia prima para la formacin de los jugos digestivos, hormonas, protenas plasmticas,
hemoglobina, vitaminas y enzimas. Ms caractersticas de las protenas sern tratadas en clases
tericas
Se clasifican, de forma general, en Holoproteinas y Heteroproteinas segn estn formadas
respectivamente slo por aminocidos o bien por aminocidos ms otras molculas o elementos
adicionales no aminoacdicos.
Son sustancias cristalinas, casi siempre de sabor dulce.
Los aminocidos se caracterizan por poseer un grupo carboxilo (-COOH) y un grupo amino (NH2). Son las unidades elementales constitutivas de las molculas denominadas Protenas.
Los alimentos que ingerimos nos proveen protenas. Pero tales protenas no se absorben
normalmente en tal constitucin sino que, luego de su desdoblamiento ("hidrlisis" o rotura),
causado por el proceso de digestin, atraviesan la pared intestinal en forma de aminocidos y
cadenas cortas de pptidos. Esas sustancias se incorporan inicialmente al torrente sanguneo y,
desde all, son distribuidas hacia los tejidos que las necesitan para formar las protenas,
consumidas durante el ciclo vital.
Se sabe que de los 20 aminocidos proteicos conocidos, 8 resultan indispensables (o esenciales)
para la vida humana y 2 resultan "semiindispensables". Son estos 10 aminocidos los que
requieren ser incorporados al organismo en su cotidiana alimentacin y, con ms razn, en los
momentos en que el organismo ms los necesita: en la disfuncin o enfermedad. Los
aminocidos esenciales ms problemticos son el triptfano, la lisina y la metionina. Es tpica
su carencia en poblaciones en las que los cereales o los tubrculos constituyen la base de la
alimentacin. Los dficit de aminocidos esenciales afectan mucho ms a los nios que a los
adultos.
Hay que destacar que, si falta uno solo de ellos (aminocido esenciales) no ser posible
sintetizar ninguna de las protenas en la que sea requerido dicho aminocido. Esto puede dar
lugar a diferentes tipos de desnutricin, segn cual sea el aminocido limitante.

OBJETIVOS
1.- Reconocer uno de las molculas ms importantes en la formacin de las clulas tanto animal
como vegetal, las protenas
2.- Analizar las caractersticas de las protenas
2.- Reconocer algunos aminocidos que componen las protenas producto de la hidrlisis
alcalina
Reconocimiento de Protenas
Preparacin de solucin diluida de albmina de huevo (ovoalbmina)
En un vaso precipitado bata dos claras de huevo con 6-10 volmenes de agua destilada. El
material se filtra a travs de una gasa para remover el precipitado de ovomucoide, y luego el
filtrado, se filtra nuevamente en papel filtro. El filtrado se usar ms tarde para los diferentes
tests.
1.-Test de Biuret
A 2 3 ml de solucin de albmina de huevo agregue un volumen igual de solucin de
Hidrxido de sodio al 10%, mezcle completamente, y agregue solucin de Sulfato de cobre
al 0,5 % gota a gota, mezcle cada vez hasta que se produzca un anillo violeta prpura o un
violeta rosado (Si se agrega demasiado Sulfato de cobre el color violeta puede ser oscurecido
por un precipitado azul de hidrxido de cobre) El color depende de la naturaleza de la protena:
proteasa y peptonas dan color rosado, la gelatina produce un color casi azul.
Repita esta misma experiencia usando una solucin de gelatina.
2.- Reacciones de precipitacin de las protenas
a) Efecto de los cidos y lcalis fuertes
En un tubo de ensayo coloque 2 ml de cido ntrico. Inclnelo y agregue la albmina de huevo
diluida, lentamente con una pipeta. Note la formacin de un precipitado de protenas en la
zona de contacto de los lquidos. Mezcle el contenido, batiendo cuidadosamente. Observe.
Repita la experiencia usando, cido sulfrico concentrado, cido actico e hidrxido de
sodio concentrado En qu se diferencian las acciones de las sustancias sobre las protenas?
b) Efecto de sales metlicas
A 3 tubos de ensayos agrgueles 3 ml de solucin de albmina diluida
Tubo 1: Agrguele una solucin de Nitrato de plata diluido (1%), gota a gota, lentamente, hasta
que un exceso de reactivo se haya agregado. Anote cambios que puedan observarse. Agregue
gradualmente el reactivo, ya que si no, la formacin del precipitado no se vislumbra debido a
que se puede hacer soluble en el exceso de reactivo. Al siguiente tubo agrguele, siguiendo las
instrucciones dadas para el tubo 1, el siguiente reactivo.
Tubo 2: Sulfato de cobre diluido (1%)
Compare los resultados

3.- Hidrlisis de las protenas con lcali

Coloque 10 ml de clara de huevo en un vaso precipitado y agregue 10 ml de solucin de
Hidrxido de sodio 10 N (40 %). Qu precipita? Coloque el vaso a bao de Mara. Agite
ocasionalmente y observe los cambios de color, condicin de la albmina de huevo, olor, etc.
Siga la hidrlisis durante una hora o ms. Con el hidrolizado puede trabajar en el punto 3.1 a) y
b).
3.1 Identificacin de aminocidos
a) Reconocimiento de aminocidos azufrados (Cistina)
Diluir 3 ml del hidrolizado de ovoalbmina en 3 ml de agua destilada. Agregue gotas de
acetato de plomo. Observar una coloracin parda o negra que evidenciar la presencia del
aminocido (Aa).

b) Reconocimiento de leucina:
Coloque un poco de hidrolizado en un tubo de ensayo seco. Caliente con cuidado a llama
pequea (ojal micro-mechero). Observe la condensacin cristalina en el borde del tubo.
c) Reconocimiento de aminocidos aromticos (Tirosina) Reaccin de Hoffmann o
Xantoproteica (Experiencia optativa)
Agregar en un tubo de ensayo 3 ml de agua destilada y algunas gotas del reactivo Millon.
Agregue enseguida una pequea cantidad del hidrolizado. Caliente hasta que obtenga una
coloracin rojo oscuro, con lo cual se pondr de manifiesto la presencia de tirosina

UNIVERSIDAD DE TALCA
Instituto Biologa vegetal y Biotecnologa

PRACTICO N 2
Reconocimiento de carbohidratos y Lpidos
Reconocimiento de carbohidratos
INTRODUCCION
Los carbohidratos son una gran cantidad de azcares, almidones, celulosa y gomas que
contienen carbono, hidrgeno y oxgeno en cantidades similares. La principal funcin de los
carbohidratos es suministrar energa al cuerpo; especialmente al cerebro y al sistema nervioso.
En cuanto a la carrera de Agronoma es muy importante que los alumnos sepan
reconocer mediante test relativamente sencillo cules son los carbohidratos que componen la
pared celular y membranas de las clulas vegetales o los contenidos en frutos, semillas y en
rganos vegetativos de las plantas encargadas del almacenamiento de estos compuestos.
En los ltimos aos, ha habido grandes avances en lo que respecta a la comprensin de
cmo influyen los carbohidratos en la nutricin y la salud humana. El progreso en las
investigaciones cientficas ha puesto en relieve las diversas funciones que tienen los
carbohidratos en el cuerpo y su importancia para gozar de una buena salud.
OBJETIVOS
1.- Identificar diferentes tipos de carbohidratos en distintos alimentos (jugo de frutas, fideos,
sacarosa, papas, castaa o piones)
2.- Adiestrarse con las principales tcnicas en el reconocimiento de carbohidratos.
Reconocimiento de Carbohidratos (Monosacridos)
Los monosacridos y la mayora de los disacridos (excepto la sacarosa) son azcares
reductores debido a la presencia de un grupo carbonilo libre capaz de oxidarse y pasar a cido.
En medio alcalino, reducen con facilidad a agentes oxidantes suaves como los iones metlicos
Cu2+, Fe3+, Ag+. Estas reacciones redox constituyen la base de las pruebas de Fehling y
Benedict, que permiten identificar, e incluso cuantificar, la presencia de azcares reductores en
un material biolgico y han sido frecuentemente utilizadas en la determinacin del contenido de
glucosa en sangre y orina para el diagnstico de la diabetes mellitus.
Los carbohidratos, tambin llamados glcidos, se pueden encontrar casi de manera
exclusiva en alimentos de origen vegetal. Constituyen uno de los tres principales grupos
qumicos que forman la materia orgnica junto con las grasas y las protenas.
Los carbohidratos son los compuestos orgnicos ms abundantes de la biosfera y a su vez los
ms diversos. Normalmente se los encuentra en las partes estructurales de los vegetales y
tambin en los tejidos animales, como glucosa o glucgeno. Estos sirven como fuente de
energa para todas las actividades celulares vitales.
Aportan 4 Kcal./gramo al igual que las protenas y son considerados macronutrientes
energticos al igual que las grasas. Los podemos encontrar en una innumerable cantidad y
variedad de alimentos y cumplen un rol muy importante en el metabolismo. Por eso deben tener
una muy importante presencia de nuestra alimentacin diaria.
En una alimentacin variada y equilibrada aproximadamente unos 300gr/da de hidratos
de carbono deben provenir de frutas y verduras, las cuales no solo nos brindan carbohidratos,
sino que tambin nos aportan vitaminas, minerales y abundante cantidad de fibras vegetales.
Otros 50 a 100 gr. diarios deben ser complejos, es decir, cereales y sus derivados. Siempre
preferir a todos aquellos cereales que conservan su corteza, los integrales. Los mismos son ricos
en vitaminas del complejo B, minerales, protenas de origen vegetal y obviamente fibra.

Todos los carbohidratos estn formados por unidades estructurales de azcares, que se
pueden clasificar segn el nmero de unidades de azcar que se combinen en una molcula. La
tabla siguiente muestra los principales tipos de carbohidratos alimenticios.

CLASIFICACIN DE LOS CARBOHIDRATOS

Monosacridos

Pentosas (5C): ribosa, desoxiribosa

Hesosas (6C): Glucosa*, fructosa*, galactosa

Disacridos

Sacarosa*, lactosa*, maltosa

Polioles

Isomaltosa, sorbitol, maltitol

Oligosacridos

Maltodextrina, fructo-oligosacridos

Polisacridos

Almidn*: Amilosa, amilopectina

Glucgeno, Posible de reconocer con lugol

Polisacridos

Celulosa, no reconocibles con lugol, Pectinas, hidrocoloides,

Test de Fehling:
Si el azcar es reductor se oxida al reaccionar con el reactivo de Fehling, el carbono
carbonlico se oxida a cido carboxlico, mientras que el in cprico (Cu+2), antes de color azul
intenso, se reduce a in cuproso (Cu+2) que precipita de la disolucin en forma de xido
cuproso (Cu2O) de color rojo ladrillo.
La glucosa es un monosacrido y por tanto reductor. La reaccin positiva se manifiesta
con la formacin de un precipitado de color rojo de xido cuproso. Con el zumo de uva la
reaccin es positiva, contiene azcares reductores (la glucosa y la fructosa abundan en estado
libre en las frutas). La sacarosa no tiene grupo carbonilo libre por lo que no da reaccin positiva
con el Fehling
Experiencia 1
A 4 tubos de ensayos agrgueles las siguientes soluciones
Tubo 1: Coloque en un tubo de ensayo 2 ml de solucin de glucosa al 10 %, agregue 2 gotas
de solucin de Fehling A y luego 2 gotas de solucin de Fehling B. Calentar con cuidado,
flameando el tubo hasta ebullicin. La produccin de un color amarillo o rojo ladrillo de
xido cprico indica que la reduccin ha tenido lugar. Los diferentes colores del precipitado de
xido cprico bajo ciertas condiciones son aparentemente valederas para establecer diferencias
en el tamao de las partculas;
Tubo 2: jugo de fruta
Tubo 3: agua de arroz
Tubo 4: ovoalbmina
Tubo 5: aceite
Indique en cul(es) de los tubos la reaccin result positiva o negativa. Fundamente su
respuesta en cada caso.
Test del Lugol

Lugol: Es una reaccin especifica del almidn, el reactivo de Lugol se intercala por la molcula
de almidn y esto se detecta por la coloracin violeta que toma la mezcla.
Este polisacrido est formado por molcula de glucosa y es exclusivo de las clulas vegetales.
Realmente est formado por dos tipos de polmeros ambos de glucosa: la amilosa que es la que
realmente se tie con el yodo del Lugol y la amilopectina.
Experiencia N2
Recomocimiento de almidn
Test de lugol o del yodo
Coloque 2 3 ml de solucin de almidn en un tubo de ensayo, agregue una gota de solucin de
yodo diluido y observe la produccin de un color azul. Caliente el tubo y note la desaparicin
del color. Enfre bajo el agua y compare. Discuta acerca de lo ocurrido.
En una capsula Petri coloque rebanadas delgadas de papas y agregue una gota de lugol.
Observe que coloracin toma y justifique la razn de esto.
En un tubo de ensayo coloque 2 ml de agua de arroz, y agregue una gota de solucin de yodo
diluida
En un corte transversal de una semilla de castao de India, agregue algunas gotas de lugol y
observe lo que ocurre. Trata de explicar porque razn hay cambio de color o no.
Tome un tubo de ensayo y agregue 2 ml ovoalbmina diluida y agregue una gota de lugol
diluido. Seale si la reaccin es positiva o negativa. En cualquiera de los casos justifique su
respuesta.
Reconocimiento de Lpidos
INTRODUCCION
Son compuestos heterogneos caracterizados por la relativa insolubilidad en agua, pero son
solubles en solventes orgnicos, como el benceno, ter de petrleo, cloroformo, etc
Fisiolgicamente tienen importancia por ser preferentemente reserva energa, por ejemplo, las
grasas y los aceites. Otros se encuentran formando estructuras celulares, como los fosfolpidos
en sistemas de membranas y otros cumplen un gran rol biolgico como esteroides, por ejemplo,
Vitamina D, hormonas sexuales, cidos biliares.

OBJETIVOS
1.- Identificar de lpidos en diferentes alimentos (aceite, semilla oleoginosa)
2.- Experimentar el uso de tcnicas en el reconocimiento de lpidos.
Experiencia N1
Materiales: aceite vegetal, agua destilada, ter.
Verter en un tubo de ensayo 2 ml de aceite y 2 ml de agua destilada. Agitar y observar.

Qu nombre le dara a la solucin formada mientras agita?

Repite la experiencia cambiando el agua por ter? Qu tipo de solucin se forma?
Experiencia N2
Preparacin a fresco de corte de semilla oleoginosa teida con Sudn (colorante especfico
para grasa).

UNIVERSIDAD DE TALCA
Instituto Biologa vegetal y Biotecnologa

PRACTICO N3
USO DEL MICROSCOPIO OPTICA Y LUPA ESTEREOSCOPICA. Tipos celulares: Clula
procaritica y eucaritica, Clula animal y vegetal
1.

INTRODUCCION
En primera instancia, obtenemos la informacin del mundo que nos rodea,
mirndolo. La vista es nuestro sentido dominante y nuestro mundo sensorial reside
principalmente en la visin. Las lentes de aumento y los microscopios proporcionan
extensiones de nuestro sentido de la vista facilitndonos ver, o ver ms claramente, los
objetos pequeos. La invencin y gradual perfeccionamiento de estos instrumentos,
permitiendo la exploracin de regiones del mundo inaccesible a nuestros ojos, constituye un
tema principal y bien conocido en la historia de la ciencia. Muchos de los progresos de la
biologa de los ltimos cien aos estn estrechamente ligados a los avances del microscopio.
El descubrimiento de las bacterias y protozoos, la identificacin de las clulas como
constituyentes fundamentales de las plantas y animales, el reconocimiento de los
cromosomas y su papel en la herencia, el gradual aumento de nuestro conocimiento de la
estructura y desarrollo de los tejidos y rganos, slo por mencionar algunos ejemplos ms
obvios, nicamente se hicieron posible por el desarrollo de microscopios cada vez ms
perfectos, as como de las tcnicas asociadas a la preparacin del espcimen.
En 1590, Zacharas y Francis Janssen, quienes eran constructores de lentes, emplearon
la experiencia de su padre, Hans, famoso por su trabajo de ptica. Ellos descubrieron como
combinar dos lentes convexas en el interior de un tubo, y produjeron el primer instrumento
para aumentar objetos pequeos. Debido a esto, Zacharias Janssen, en particular, es a
menudo referido como el inventor del microscopio compuesto, aunque fue Faber de
Bamberg, un fsico al servicio del Papa Urbano VIII, quien originalmente aplic el trmino
microscopio al instrumento durante la primera mitad del siglo XVII. Tambin, es digno
destacar la figura de Anton van Leeuwenhoek (1632-1723), quin hizo lentes y fabric
microscopios en su tiempo libre, siendo bien conocido por su desarrollo de los microscopios
primitivos. Leeuwenhoek fue el primero en describir bacterias, espermios y otras clulas que
l observaba con sus microscopios, algunos de los cuales podan aumentar ms de 200 veces.

2.

OBJETIVOS
-

3.

Conocer el microscopio compuesto y la lupa estereoscpica.

Aprender la funcin de las piezas principales que lo componen.
Entrenar al alumno en el uso de estos instrumentos y en los cuidados que requieren.
Establecer las diferencias entre una clula procariotica fotosinttica y una
eucaritica fotosinttica
Establecer diferencias entre una clula vegetal eucaritica y una animal eucaritica.

MATERIALES
-

Papel de diario con letras y nmeros

Catfilo de cebolla
Hojas de Elodea
Clulas de la mucosa bucal
Filamentos de Nostoc
Polen de Angiospermas

- Xilol
- Algodn
- Azul de Metileno 2%

4.

Microscopio
Lupa
Portaobjetos
Cubreobjetos
Acido actico al 50%

ACTIVIDADES
4.1.

Reconocimiento de las partes del microscopio ptico

Siguiendo las instrucciones del profesor distinga cada una de las partes del microscopio que
se sealan a continuacin:
El microscopio ptico est formado por tres sistemas:
1.
Sistema ptico
2.
Sistema de iluminacin
3.
Sistema mecnico
Sistema mecnico. Est constituido por varias piezas que en conjunto constituyen el
armazn y sostiene al sistema ptico y de iluminacin. Estas piezas son las siguientes:
base o pi que corresponde al soporte del aparato, la cual se une al brazo o columna.
Este es el pilar que lleva los tornillos de focalizacin (tornillo macromtrico para
hacer el enfoque aproximado del objeto y tornillo micromtrico que sirve para el
enfoque de precisin del objeto).
En la regin superior, el brazo va unido al tubo, pieza que lleva inserta en su
parte inferior el revlver y en la superior el ocular. El revlver lleva atornillados unos o
varios objetivos y puede girarse para cambiar la posicin de los objetivos.
La platina es una superficie plana con un orificio para que pase la luz, y va
sujeta a la columna en su parte media. El objeto a observar se coloca sobre dicho
orificio. Para esto se pone una lmina de vidrio llamada portaobjeto (porta) y se protege
con una laminilla tambin de vidrio denominada cubreobjeto (cubre). La preparacin se
sujeta con las pinzas que lleva la platina, o, en los microscopios ms recientes, en el
carro ubicado sobre la platina es donde se ajusta la preparacin. Este carro puede
moverse en sentido horizontal, de derecha a izquierda y hacia delante y atrs, mediante
tornillos que se encuentran sobre o bajo la platina.
Sistema ptico. Est formado por dos sistemas de lentes, el ocular y objetivo.
El ocular es un conjunto de lentes colocados en el extremo superior del tubo en
forma suelta y donde el observador aplica el ojo. Tiene un nmero grabado (por
ejemplo: 12.5x) que indica el aumento de este lente.
El objetivo se ubica en la parte inferior del tubo y est cerca del objeto a
observar. Lleva grabado varias cifras de las cuales slo una nos interesa por ahora, su
coeficiente de aumento (por ejemplo: 40/0.65, donde 40 es el coeficiente de aumento).
Los objetivos se clasifican segn su poder de aumento en: Objetivo de lupa (3 o 4x),
objetivo menor (10x), objetivo mayor (40x) y objetivo de inmersin (100x).
Sistema de iluminacin. Se ubica bajo la platina y consta de la fuente de luz,
condensador y diafragma.

La fuente de luz se encuentra en la base del microscopio.

El condensador es un sistema de lentes colocado bajo la platina que puede
moverse verticalmente mediante un tornillo. Este sistema de lentes concentra los rayos
luminosos hacia el orificio de la platina y lleva adosado un lente de campo en la parte
superior, el cual se utiliza cuando se enfoca con los objetivos de ms aumento.
El diafragma se encuentra bajo el condensador y regula la cantidad de luz que
llega al condensador a travs de una palanca que permite abrirlo o cerrarlo.
Ahora proceda a rotular las piezas indicadas en el esquema de la figura.

Microscopio ptico binocular

4.2 Manejo del microscopio ptico
4.2.1.

Preparacin del objeto a observar. Coloque sobre un portaobjeto trocitos de papel

que contengan letras y nmeros muy pequeos, sobre ellos agregue una gota de de agua
y ponga encima un cubreobjeto presione suavemente sobre ste para que se adhieren
los vidrios. Seque los bordes con toalla nova y coloque la preparacin al microscopio.
Observe y dibuje.

4.2.2.

Iluminacin del microscopio. A continuacin, usted deber regular la iluminacin del

microscopio, para esto encienda el sistema de iluminacin, ubique el objetivo de lupa en
posicin de observacin y mirando por el ocular mueva el tornillo de iluminacin hasta
que el campo quede iluminado uniformemente. La intensidad de la luz se grada con el
diafragma del condensador.

4.2.3

Montaje de la preparacin. Ahora puede colocar la preparacin sobre el carro que va

en la platina de tal manera que lo que se va a observar quede en el orificio de la misma.

4.2.4

Observacin del objeto. Mediante el tornillo macromtrico y mirando por fuera del
microscopio se baja el objetivo hasta unos 0,5 mm del cubreobjeto. Es importante que
esta operacin se realice con mucho cuidado ya que si el objetivo llega hasta el cubre,
en la mayora de los casos se romper la preparacin. Luego, mirando por el ocular,
suba muy despacio el objetivo mediante el tornillo macromtrico, hasta que se vea el
objeto con claridad. Para afinar el enfoque se gira el tornillo micromtrico lentamente
hacia un lado y hacia el otro.

4.2.5

Esquemas y rtulos. Para completar su observacin Usted debe realizar un esquema

del objeto observado y sealar sus partes (rotulacin). El esquema debe ser grande pero
proporcionado, de trazos claros y bien definidos.

4.2.6

Cambio de objetivo. Una vez hecha la observacin con el objetivo de lupa, observe la
misma muestra con objetivo mayor (40x). Para pasar a un aumento mayor se gira el
revlver hasta el objetivo siguiente. A continuacin, se vuelve a graduar la luz mediante
el diafragma del condensador. El objeto que se desea observar debe estar en el centro
del campo para no perderlo de vista al cambiar el objetivo.

En relacin a la preparacin observada conteste las siguientes preguntas

Cmo es la imagen observada respecto al objeto?
Qu sucede con el campo visual al cambiar a un objetivo de mayor aumento?
4.2.7

Trmino de la observacin. Al finalizar la observacin se gira el revlver hasta

colocar el objetivo de menor aumento (lupa) sobre el orificio de la platina, se levanta el
tubo por medio del tornillo micromtrico y se retira la preparacin.

Lave y seque el porta y cubreobjeto.

4.3 Capacidades o poderes del microscopio ptico
Discuta con su profesor las capacidades o poderes del microscopio ptico, sobre la base
de sus observaciones anteriores:
Poder de aumento. Es la capacidad del instrumento de dar imgenes de mayor tamao
que el objeto mismo. Esto se expresa como la relacin entre el tamao de la imagen
dada por el microscopio y el tamao del objeto observado.
Aumento = Tamao aparente/ tamao real
Esta capacidad est dada por los componentes del sistema ptico, es decir,
objetivo y ocular, de modo que el aumento producido es el producto del aumento de
cada componente.
Aumento del microscopio ptico = Aumento del objetivo x Aumento del ocular.
-

Calcul el aumento para sus observaciones anteriores. Objetivo de lupa

y objetivo mayor. Indquelo en sus esquemas.

Poder de resolucin. Es la capacidad del instrumento de dar imgenes bien definidas
de puntos situados muy prximos entre s. Este poder de resolucin (capacidad
mxima) es el inverso del lmite de resolucin que corresponde a la distancia mnima
que puede existir entre dos puntos para que puedan ser definidos como tales, de manera
que cuanto mayor es el poder de resolucin de un microscopio menor es el lmite de
resolucin que posee
Poder de definicin. Consiste en la capacidad del microscopio de dar imgenes claras,
de contornos precisos. Esto reside en la correccin de las aberraciones causadas por las
lentes.
Poder de penetracin. Es la capacidad del instrumento de dar imgenes de estructuras
situadas en diferentes planos con un mismo enfoque.
4.5. Observacin de la epidermis del catfilo de cebolla u hoja de Elodea
Coloque sobre el portaobjeto un trozo de epidermis del catfilo de cebolla fijado en
cido actico al 50% por 10 minutos y luego teido con azul de metileno u hoja de
Elodea. Agregue sobre ste una gota de agua y encima coloque el cubreobjeto. Seque
los bordes y ponga la preparacin en el microscopio. Observe, realice un esquema y
seale las estructuras celulares que se observan.
Qu componentes de una clula vegetal se pueden visualizar con el objetivo de lupa?
Y con un objetivo mayor?
Cul es la funcin del cido actico y del azul de metileno?
No olvide de colocar el aumento a sus observaciones.

Al trmino de sus observaciones Usted debe:

- Dejar limpios los objetivos y oculares. Para ello utilice un pao de batista que traer
especialmente para esto.
- Dejar limpia y seca la platina.
- Dejar el microscopio en posicin de reposo. Esto es con el objetivo de menor aumento (lupa)

en posicin de enfoque, el diafragma abierto y el condensador en el tope inferior.

4.7 Reconocimiento de otros tipos celulares
Observe adems los siguientes tipos de clulas y de acuerdo a sus estructura interna y externa
deduzca si se trata de una clula procarionte o eucarionte
a) Clulas de la mucosa bucal
b) Hojas de Elodea, planta acutica.
c) Filamentos de Nostoc o de Anabaena azollae proveniente de las hojas un helecho
acutico llamado Azolla
d) Polen de Angiospermas
ANEXO
Algunos principios generales de ptica y propiedades de las lentes convergentes.

Propagacin de la luz. La luz se propaga en lnea recta a travs de los medios

homogneos.
Reflexin de la luz. Cuando un rayo luminoso choca contra una superficie pulida es
rechazado fuera de ella, siendo el ngulo de reflexin igual al ngulo de incidencia.
Refraccin de la luz. Cuando un rayo de luz pasa oblicuamente de un medio a otro de
distinta densidad experimenta un cambio de direccin en su recorrido a la entrada y a la
salida del mismo, es decir, se refracta, De tal manera que al pasar de un medio ms
denso a otro menos denso, se refracta alejndose de la normal. Los rayos que inciden
normalmente a un cuerpo de diferente densidad no cambian de direccin, no son
refractados.
Por otra parte, la refraccin que experimenta un rayo luminoso est en relacin
con la diferencia de densidad de los medios que atraviesa. Para dos medios
determinados, cualquiera sea la oblicuidad del rayo incidente, la relacin entre el seno
del ngulo de incidencia (a) y el ngulo de refraccin (b) es constante.
El valor numrico (n) de esta relacin se llama ndice de refraccin (n)
n = sen a/ sen b
Se dice que un medio es ms refringente que otro cuando su ndice de refraccin
es mayor. Las relaciones se establecen con relacin al aire, cuyo n = 1.
Formacin de imgenes.
Pueden darse varios casos en la formacin de las imgenes por las lentes convergentes
segn la posicin que ocupa el objeto con relacin al foco de las mismas, pero aqu slo se
describirn 2 casos por ser los dos que se presentan en el microscopio ptico.

Caso 1. El objeto est un poco ms all del foco de una lente convergente.
Tenemos una lente biconvexa con su centro ptico (O) y un objeto (ab) situado
ms all del foco (f) de la lente. El eje ptico de la lente es ff. De los rayos que parten
del punto a, el rayo al es paralelo al eje ptico y se refractar al salir de la lente
atravesando el foco f y prolongndose hasta a donde se encuentra con el rayo aa que
por pasar por el centro ptico, no se refracta. Todos los rayos que parten de a se
refractan y se renen en el punto a donde forman la imagen del punto a. Lo mismo pasa

con el punto b. Estos se van a reunir en b para formar una imagen. Todos los puntos
comprendidos entre a y b se comportan de la misma manera y cada uno va a formar su
imagen entre las 2 imgenes anteriores a y b formndose as la imagen del objeto
entero (ab). Como los rayos al atravesar el foco pasan al otro lado del eje ptico, la
imagen de un punto se ve en un lugar opuesto al de origen. Por esto, la imagen estar
invertida con relacin al objeto mismo. Adems, ser aumentada y real, esto es, podr
ser recogida en una pantalla o por una placa fotogrfica. Este caso corresponde al del
OBJETIVO DEL MICROSCOPIO, el cual entrega una imagen INVERTIDA,
REAL y AUMENTADA.
Caso 2. El objeto est situado entre la lente convergente y su foco.
Entre la lente de centro ptico (O) y su foco (f) est situado el objeto (ab). De los rayos
que parten de los puntos a y b, los rayos al y bl se cruzan en el foco f. En cambio los rayos am y
bn no se refractan porque pasan por el centro ptico O y siguen una direccin divergente con
relacin a los rayos lf y lf, respectivamente. De manera que no llegan a cruzarse y no pueden
formar una imagen real. El ojo colocado en ese plano, sigue el trayecto de esos rayos que
parecen converger por detrs del objeto, donde forman una imagen virtual, derecha y
aumentada del objeto observado (ab). Como se comprende, por ser una impresin subjetiva,
no puede ser recogida sobre una pantalla o por una placa fotogrfica. ES EL CASO DE LAS
LUPAS Y LOS OCULARES DEL MICROSCOPIO.

Caso 1

Caso 2

m
n

f
o
l

oO
a

l
b
f

f
a

IMAGEN OBTENIDA EN EL
MICROSCOPIO OPTICO

Cuando 2 lentes convergentes estn centrados, es decir dispuestos en el mismo eje ptico (como
lo estn el objetivo y el ocular en el microscopio ptico), ambos concurren a la formacin de las
imgenes microscpicas. El objeto que se observa (ab) est colocado un poco ms all del foco f
del objetivo (lente o sistemas de lentes convergentes de distancia focal muy corto) y forma una
imagen ab que es real aumentada e invertida, del otro lado de la lente (caso 1). El plano donde
se forma esta imagen est situado entre la lente ocular y su foco f. Los rayos que forman esta
imagen atraviesan el ocular (segunda lente) y luego el ojo del observador percibir una imagen
ab que es virtual, aumentada y derecha respecto de la imagen dada por el objetivo (caso 2).
De esta manera la imagen microscpica observada es una imagen compuesta de tipo
VIRTUAL, AUMENTADA e INVERTIDA con relacin al objeto observado.
Unidades de longitud ms empleadas en microscopa.
Las unidades de longitud ms empleadas en microscopa son:
1 m (micrmetro)
=
10-6m
1 nm (nanmetro)
=
10-9m
1 (Angstrom)
=
10-10m
JERARQUA
MORFOLOGICA
ORGANOS (Organografa)
TEJIDOS (Histologa)
CELULAS (Citologa)

INSTRUMENTO DE
INVESTIGACION
Ojo humano lupa
Microscopio de luz
Inmersin. Contraste de
fase y microscopio de luz
ultravioleta
Microscopio electrnico

ULTRAESTRUCTURA
(Morfologia Ultraestructural)
ESTRUCTURA (Molecular rayos x
Qumica Estructural)

ESCALA

MAGNITUD

Milmetro
>0.1 mm
Micrmetro
>1.0 m
longitud de onda de la >0.1 m
luz
Angstrom

100

longitud de onda de 1
rayos x

PARTES DE UNA LUPA ESTEREOSCPICA

1,- PARTES DE LA LUPA

a)

Parte mecnica:
Platina; de gran densidad, horadada para colocar en ella una placa de contraste.. Igualmente
est provista de dos pinzas de sujecin.
Columna o vstago: perpendicular a la platino. sobre el cual va alojado el bloque de la parte
ptica de la lupa.
Mando de enfoque: tornillo que desplaza en cremallera, para enfocar los objetos. Anillo de
sujecin: anillo que fija la parte ptica (segundo seguro).
b) Parte ptica:
Oculares: situados en la parte superior, aumentan la imagen producida por los objetivos.
Objetivos: en el extremo inferior, situados sobre el objeto a estudiar, producen un aumento de
la imagen.
2.- Imagen
La visin es por reflexin. permitiendo una imagen real y aumentada. La sensacin de relieve o
estereoscpica se consigue con imgenes distintas en cada ocular. presentando para ello la lupa
dos sistemas pticos distintos. Cada ojo recibe una imagen por separado, captada por cada
sistema ptico correspondiente del aparato, y con la convergencia necesaria para producir una
visin correcta.
METODOLOGA
El desarrollo de la prctica consiste en la familiarizacin, por parte del alumno, en el uso de la
lupa llevando a cabo observaciones de cualquier objeto (monedas, trozos de roca, insectos,
etc...), procediendo de la siguiente forma:
- Colocar el objeto que se quiere observar en el centro del crculo de la placa de contraste ms

conveniente.
- Mover el mando del bloqueo y el anillo de sujecin hasta colocarlos en una distancia ptima.
- Enfocar.
- Adaptar los oculares a la pupila de cada observador.
- Si se quiere girar la parte ptica, afljese el mando de bloqueo.
5

BIBLIOGRAFA
Grimstone, A.V. 1981. El microsocpio electrnico en biologa. Cuadernos de Biologa
Ediciones Omega. Barcelona. 62 pp.
Montenegro, G. (ed.) 1985. Manual de Tcnicas de estudio estructural y ultraestructural
en vegetales. Pontificia Universidad Catlica de Chile. 90 pp.
Stern, K.R. 1994. Introductory plant biology. Wm. C. Brown Publishers. USA. 537 pp.

UNIVERSIDAD DE TALCA
Instituto Biologa vegetal y Biotecnologa

PRACTICO N 4
Membranas Biolgicas. Intercambio Medio Clula.
1.

INTRODUCCION

Las clulas vegetales se comunican fundamentalmente por dos vas. Una

va simplastica en que sus contenidos citoplasmticos establecen una
continuidad a travs de plasmodesmos (conexiones citoplasmticas que forman
un continuo intercelular denominado simplasto). Su funcin es el traslado de
solutos, iones, virus y estmulos o seales de una clula a otra. Los
plasmodesmos son poros forrados por plasmalema con un tubo central que se
prolonga de una clula a otra y se conecta en ambos extremos con el RE
(retculo endoplasmtico). El tubo es una conexin de la membrana del RE de
una clula con la adyacente y se llama desmotbulo. Este posee un finsimo
canal central lleno de lpidos. Esta conformacin convierte al simplasto en una
va de transporte regulada por vlvulas en los extremos, donde se angosta en una
regin llamada cuello. En este mecanismo de regulacin interviene el in Ca2+.
Los plasmodesmos estn dispersos por toda la superficie interna de las clulas en
grupos o en reas deprimidas de las paredes, conocidas como punteaduras. Su
nmero es variable segn las especies. El traslado de solutos, iones y virus
puede adems ocurrir sin entrar al simplasto y seguir la va apoplstica, es decir
por entre los espacios celulares y las paredes celulares. Esta es la va que ofrece
la menor resistencia.
El agua entra a las clulas vegetales por un proceso que se llama
osmosis, la que consiste en el paso de agua travs de una membrana
semipermeable. La clula se comporta entonces como un osmmetro: si se le
introduce agua pura sta tender a ingresar a la clula ya que en su interior hay
solutos y coloides responsables de un potencial agua ms negativo. El
protoplasma har presin sobre la pared celular a medida que el agua penetra y,
al mismo tiempo, la pared semielstica se distender
La forma como se
mueven los solutos a muy corta distancia, lento, es decir entre las clulas, o
tejidos (por ejemplo, cuando los nutrientes ingresan a la raz) y a favor de un
gradiente de concentracin (= favor de un gradiente de potencial
electroqumico), se llama difusin. Es un movimiento pasivo; es decir, la planta
no emplea ningn tipo de energa en este movimiento hasta que su elasticidad lo
permita. Desde este momento, la pared celular comienza a ejercer una presin
que impide que prosiga el aumento de volumen. El equilibrio se establecer
cuando los potenciales al interior y exterior de la clula se igualen; es decir
cuando el potencial sea igual al del agua pura. En este estado la clula posee un
turgor mximo. Si por el contrario se sumergen las clulas en una solucin que
tiene ms solutos que la clula, el agua tender a salir, provocando la separacin
de la membrana celular de la pared celular. En estas condiciones las clulas
sufren plasmlisis. Si esta situacin se remedia a tiempo la plasmlisis puede ser
reversible, pero si se mantiene en el tiempo, esto puede pasar a ser un fenmeno
irreversible, y si vemos el fenmeno a nivel del organismo completo, es decir en
una planta, decimos que la planta se ha marchitado.

Si estudiamos como se mueve el agua a grandes distancias en la planta

(como ver en Fisiologa Vegetal), comprobaramos que para que este
movimiento de recorrer el tronco y llegar a los brotes y hojas ocurra, debe haber
una tensin generada por la transpiracin que sucede en las hojas. Este
movimiento continuo o flujo continuo de agua por el cuerpo de la planta se debe
a la cohesin de las molculas que forman los hilos de agua.
Respecto a la solubilidad: Cuando un compuesto soluble en agua es
colocado en sta, desaparece rpidamente en el lquido. Por el contrario, si no es
soluble, entonces permanece donde se le coloca. Si posee una solubilidad
intermedia, entonces se puede dispersar sobre la superficie del agua hasta que se
vuelve invisiblemente delgada.
Lo que determina el comportamiento de un compuesto en una
solucin son las complejas interacciones de tipo elctrico en las superficies de
las molculas. Por ejemplo, la solubilidad de un compuesto qumico en agua
depende de la magnitud de las interacciones de unin entre sus molculas y las
del agua. El grado de solubilidad resulta de una competencia entre los enlaces
que mantienen a cada molcula unida y las oportunidades alternas de unirse con
la otra sustancia.
Los compuestos orgnicos varan grandemente en su solubilidad en
agua. La vida en la Tierra no existira sin esta variabilidad. Los compuestos
orgnicos insolubles tienen grupos componentes de tomos que forman pocas
uniones (ninguna en algunos casos) con molculas de agua. Se dice que tales
grupos son hidrfobos, al igual que la molcula que tenga tales grupos. Este
trmino es confuso ya que implica una repulsin entre la molcula (o el grupo) y
el agua. El efecto no surge de la repulsin sino del hecho de que la unin es tan
dbil que la cohesin del agua mantiene afuera al compuesto hidrfobo.
Sin embargo, muchas molculas orgnicas son parcialmente solubles en
agua debido a que por lo menos algunos de sus grupos atmicos se unen al agua.
Mientras ms de estos grupos tenga el compuesto, ser ms soluble.
Si se tiene una mezcla de soluciones verdaderas y coloidales se pueden separar
sus componentes mediante una dilisis utilizando una membrana artificial porosa
que permite separar las molculas disueltas en funcin de su tamao molecular.
La solucin acuosa que contiene macromolculas y molculas muy pequeas se
colocan al interior de una membrana. Esta se sumerge bien en un tampn o en
agua. Las molculas pequeas no cargadas de soluto pasan libremente a travs
de la membrana hasta alcanzar el equilibrio. El agua tambin pasa libremente a
travs de la membrana siguiendo un gradiente osmtico.
2.

OBJETIVOS

Analizar los factores que influyen en la velocidad de difusin.

3.

Observar los mecanismos de intercambio de soluciones a travs de

membranas fsicas: Dilisis y Osmosis.

Analizar la capacidad de permeabilidad de membranas celulares.

ACTIVIDADES PRACTICAS

3.1. Dilisis.
Consiste en el paso de agua ms soluto de un lugar de mayor concentracin a
un lugar de menor concentracin.
En un vaso de precipitado mezcle 5 ml de albmina y 5 ml de NaCl al 4%.
Coloque esta preparacin en una bolsa de dilisis, amarre bien sus extremos y
suspndala de un soporte universal. Sumerja la bolsa medianamente en un
vaso de precipitado con agua destilada, teniendo cuidado de no humedecer la
amarra superior de la bolsa.
Deje la bolsa sumergida por 20 minutos, despus retire la bolsa y tome
alcuotas de 5 ml del agua del vaso precipitado y colquela en 3 tubos de
ensayo diferentes para verificar la presencia de cloro, sodio y albmina.
Reconocimiento de Cl- (in cloruro). Al tubo que contiene 5 ml de agua del
vaso de precipitado agregue unas gotas de AgNO3 (nitrato de plata). Si la
reaccin es positiva, deber formarse un precipitado de color blanco que
corresponde a cloruro de plata.
Reconocimiento de albmina (protena). Al tubo que contiene 5 ml de agua
del vaso de precipitado agregue reactivo de Biuret (color celeste), el cual se
utiliza para reconocer cualitativamente protenas. Si la solucin toma un color
violeta es positiva si permanece celeste es negativa.
Reconocimiento de Na+ (in sodio). Introduzca un asa de platino en el tubo
que contiene 5 ml de agua del vaso de precipitado y colquela a la llama de
un mechero. Si hay presencia de sodio la llama del mechero deber tomar un
color anaranjado.
Nota: El Test de Biuret, que es especfico para reconocer enlaces peptdicos
utiliza como reactivos hidrxido de sodio (NaOH) y sulfato de cobre
(CuSO4). La forma de operar es que el in Cu 2+ en una solucin alcalina es
capaz de reaccionar con los iones N-3 de los grupos amino formando un
complejo color violeta. Cada tomo de Cu 2+ reacciona con 2 tomos de N
(enlace covalente) y establece una resonancia de electrones con otros dos N,
por lo tanto para que se forme el complejo se necesitan al menos 4
aminocidos; es decir, un tetrapptido.
3.2. Osmosis.

Extraiga un trozo de epidermis del catfilo de cebolla, colquelo sobre un

porta y agregue 2 gotas de NaCl al 4%, encima ponga el cubre y observe al
microscopio con aumento mayor (40x)
Despus de la observacin extraiga el lquido de la preparacin con un trozo
de papel filtro por el lado del cubre, levante el cubre y agregue 2 gotas de
agua destilada y vuelva a observar al microscopio. Explique lo observado.
En otros trozos de epidermis realice la misma observacin agregando en cada
caso gotas de: NaCl 1%, 0.5% y 0.1%.
3.3. La Membrana plasmtica como barrera selectiva.
Lleve unas gotas de suspensin de levadura (Saccharomyces cervisiae) a un
portaobjetos y agregue una gota de azul de metileno al 0.3%. Cubra con un
cubreobjetos y elimine el exceso de colorante con papel absorbente. Observe
al microscopio. Esquematice, rotule e indique el aumento utilizado. Describa
e intrprete los resultados.
Repita el experimento anterior utilizando una suspensin de levadura
previamente hervida por 1-2- minutos. Compare los resultados.
1.4. Difusin
En 5 tubos de ensayo coloque 5 ml de las siguientes soluciones (o reactivos)
Tubo 1: agua destilada
Tubo 2: albmina 10%
Tubo 3: Sacarosa 30 %
Tubo 4: Glicerol
Tubo 5: cido oleico
Ahora a cada tubo agregue una gota de azul de metileno, compare los
resultados expuestos en cada tubo de ensayo y explique cules son los
factores que afectan a la velocidad de difusin.

UNIVERSIDAD DE TALCA

Instituto Biologa vegetal y Biotecnologa

PRACTICO N 5
Plastidios y Fotosntesis
1. INTRODUCCION
PLASTIDIOS
Los plastidios se originan a partir de plastidios ms pequeos e
indiferenciados llamados protoplastidios. Los plastidios son organelos que se
estructuran bsicamente por una doble membrana y en cuyo interior se acumulan
pigmentos u otras sustancias, ubicndose en el citoplasma de la clula
eucaritica de las plantas u otros vegetales como algas unicelulares y
pluricelulares. Tienen la propiedad de multiplicarse por divisin binaria,
pudiendo adems transformarse un tipo de plastidio en otro (interconversin).
Los plastidios se pueden clasificar en fotosintticamente activos: cloroplastos
(predominan pigmentos verdes), feoplastos (predominan pigmentos pardos) y
rodoplastos (predominan pigmentos rojos), que aparecen en algunas algas y
plantas verdes, algas pardas y algas rojas, respectivamente; y en no
fotosintticamente activos: amiloplastos (granos de almidn), cromoplastos
(pigmentos coloreados), oleoplastos (gotas de aceites), y aleuronoplastos
(protenas).
FOTOSINTESIS
La fotosntesis se realiza en dos etapas bien definidas: La primera, se
efecta a nivel de los tilacoides y consiste fundamentalmente en la captacin de
unidades energticas denominadas quanta (singular quantum) por la clorofila.
Con esto existe energa suficiente para la disociacin o ruptura de la molcula de
agua y generar poder reductor a la forma de NADPH para la formacin de ATP.
La segunda etapa ocurre en el estroma, utiliza el ATP y el NADPH formado en
los tilacoides para fijar el CO2 y producir azcares.
2. OBJETIVOS

Reconocer diferentes tipos de Plastidios, tales como cloroplastos,

amiloplastos y cromoplastos.

Analizar las reacciones qumicas que ocurren durante la fase clara de la

fotosntesis mediante la reaccin de Hill y la fase oscura mediante la
reaccin de almidn.

3. ACTIVIDADES PRACTICAS
3.1. Plastidios
3.1.1. Usted dispondr de una preparacin de una hoja de Elodea canadensis
(Planta acutica). Mencione qu nombre reciben los Plastidios que
Ud. est observando. Adems indique Qu forma presentan? y Qu
pigmentos contienen en forma mayoritaria? Dibuje y rotule.

3.1.2. Tome un trozo pequeo de cscara de tomate (Solanum lycopersicum)

o pimentn (Capsicum annuum var. annuum), raspe suavemente el
interior de sta y enseguida observe al microscopio dejando el lado
brilloso hacia arriba al ponerla sobre el portaobjeto y encima coloque
el cubreobjeto. Enseguida observe al microscopio esquematice y
rotule.
3.1.3. Usted dispondr de una preparacin de una semilla de Araucaria
araucana (Pion). Mencione qu nombre reciben los Plastidios que
Ud. est observando. Qu pigmentos contienen en forma
mayoritaria? Dibuje y rotule.
Con respecto a las actividades anteriores responda lo siguiente:
1. Qu organelos se ubican al interior de la clula?
2. Qu tipos de pigmentos se encuentran al interior de dichos
organelos?
3. Alrededor de que organelo se disponen dichos Plastidios?
4. Cul piensa Usted que es su funcin?
3.2. El almidn como indicador de la fotosntesis. Fase Oscura.
La presencia de almidn en las hojas es usado comnmente como
indicador de que el proceso fotosinttico ha ocurrido, aunque el almidn

no es un producto directo del proceso de asimilacin del carbono, en

muchos de los vegetales se forma como producto de reserva de fructosa
producida durante el proceso.
Ud. dispondr de unas hojas de una planta acutica Elodea
canadensis. Remueva los pigmentos (Clorofila) hirviendo por 10 minutos
la hoja en un vaso precipitado con agua destilada. Luego tome los
fragmentos de hoja y colquelos en otro vaso precipitado con alcohol y
llvelo a ebullicin por unos minutos hasta que la hoja pierda su color
verde caracterstico (TENGA LA PRECAUCIN QUE EL ALCOHOL
NO SE INFLAME). Enseguida enjuague la hoja con agua destilada y
extindala sobre una capsula de Petri y agregue unas gotas de una
solucin de Lugol.
Qu indica el color obtenido? Cul es la razn para extraer
previamente los pigmentos?

BIBLIOGRAFA
Alberts, B. Et al. 1996. Biologa Molecular de la clula. Tercera Edicin
Omega.
De Robertis (h). 2000. Biologa Celular y Molecular. 13 Edicin El
Ateneo.

UNIVERSIDAD DE TALCA
Instituto Biologa vegetal y Biotecnologa

PRCTICO N 6
MITOCONDRIAS

1.1.

INTRODUCCIN

La energa solar que es convertida a energa qumica por el proceso de fotosntesis es

almacenada en diversos compuestos orgnicos- por ejemplo, lea o carbn. Si los
compuestos orgnicos son quemados, la energa es liberada muy rpidamente en forma de
calor y luz, y mucha de la energa til es perdida. Sin embargo, los organismos vivos,
queman la energa que contienen sus compuestos en numerosas y pequeas etapas
controladas por enzimas que liberan cantidades minsculas de energa inmediatamente
utilizable, generalmente almacenada en las molculas de ATP, las cuales les permiten que la
energa disponible sea utilizada ms eficientemente y el proceso sea precisamente
controlado.
La respiracin es un proceso de liberacin de energa que tiene lugar en todas las clulas
vivas las 24 horas del da, independientemente de s est o no ocurriendo fotosntesis en las
mismas clulas. La respiracin se inicia en el citoplasma y se completa en la mitocondria. La
energa es liberada de molculas de azcares simples, que son desdobladas durante una serie de
etapas controladas por enzimas. No es necesario el oxgeno para iniciar el proceso, pero en la
respiracin aerbica (la forma de respiracin ms comn), el proceso no se puede completar sin
el oxgeno gaseoso (O2). La liberacin de energa controlada es el evento principal; el dixido
de carbono (CO2) y agua (H2O) son los subproductos. La respiracin aerbica es resumida en la
siguiente ecuacin:
C6H12O6 + 6O2 enzimas 6CO2 + 6H2O + energa
Glucosa oxgeno
dixido agua
de carbono
Respiracin aerbica y fermentacin son dos formas de respiracin llevadas a cabo por
ciertas bacterias y otros organismos (levaduras) en ausencia de oxgeno. Estas formas de
respiracin liberan mucho menos energa que la respiracin aerbica. Las dos formas difieren
una de otra en el modo en que el hidrgeno liberado de la glucosa es combinado con otras
sustancias. La fermentacin es muy importante en la industria, particularmente en la industria
cervecera. Dos formas de fermentacin bien conocidas son ilustradas en las siguientes
ecuaciones:
C6H12O6
glucosa

enzimas C2H5OH + 2CO2 + energa (ATP)

etanol
dixido
de carbono

C6H12O6 enzimas
glucosa

C3H6O3 + energa (ATP)

cido
lctico

En resumen la respiracin se define como la oxidacin de sustancias orgnicas dentro

de las clulas, la cual est acompaada por liberacin de energa. Se ha convenido en subdividir
el proceso de oxidacin de la glucosa hasta CO 2 y H2O en dos etapas principales: Gliclisis y
Respiracin celular:

a) La gliclisis: Proceso en donde la glucosa es convertida a molculas de 3 tomos de

carbono, tiene lugar en el citoplasma y no requiere de oxgeno (O 2). Durante el proceso,
una cantidad pequea de energa es liberada, y algunos tomos de hidrgeno son
removidos de los compuestos derivados de una molcula de glucosa.
b) La respiracin celular: Proceso por el cual se oxidan los productos de la primera
hasta CO2 y H2O, ocurre en las mitocondrias y con participacin de O2 (respiracin
aerbica) e implica el ciclo de Krebs (matriz mitocondrial), la cadena transportadora de
electrones (crestas mitocondriales) y la fosforilacin oxidativa (complejo ATPsintetasa)..
O2
C6

C3
Gliclisis

C
Respiracin

1.2.

OBJETIVOS
Conocer la ultraestructura de las mitocondrias
Relacionar las diferentes etapas del proceso de respiracin celular con la
estructura y ultraestructura de las mitocondrias.

1.3.

ACTIVIDADES

1.3.1.

Ultraestructura de la Mitocondria

1.3.1.1. Observe el esquema de mitocondria y rotule sus partes.

1.3.1.2. Observe la fotomicrografa que muestra la ultraestructura de la mitocondria y

rotule sus partes ayudndose del esquema anterior.

Compare el tamao de las mitocondrias y plastidios. Averiguar tamaos.

Alrededor de que organelo celular aparecen las mitocondrias asociadas? Por qu?

La Respiracin Celular y Fermentacin

2.1. Introduccin
La respiracin celular es el trmino general que mejor describe las reacciones metablicas
implicadas en la formacin de energa til a partir de la ruptura de molculas de nutrientes. En
los organismos vivos, la fuente universal de energa es el Adenosintrifosfato (ATP). La
primera etapa de la respiracin celular es la gliclisis, la ruptura de la glucosa (6C) para formar
dos molculas de piruvato (3C). La glicsis tiene lugar en el citoplasma, especficamente en
citosol de la clula. El piruvato resultante puede pasar a travs de una serie de vas,
dependiendo del organismo en cuestin. En algunos organismos, tales como las levaduras,
ocurre fermentacin.
En este experimento se estudiar el proceso de fermentacin alcohlica que llevan a cabo las
levaduras. Estos organismos llevan a cabo respiracin aerbica en presencia de oxgeno y
respiracin anaerbica en ausencia de ste. La levadura que se usar es Saccharomyces
cerevisiae, la misma que se utiliza para la produccin de pan, cerveza y vino. En la
fermentacin alcohlica se produce dixido de carbono y alcohol etlico (etanol). El dixido de
carbono crea la efervescencia en la cerveza y hace que el pan suba dentro del horno. El etanol
que se produce es el alcohol presente en la cerveza y los vinos.
2.2. Objetivo

A final de completar la siguiente actividad Usted ser capaz de familiarizarse con las reacciones
y productos de la fermentacin.
2.3. Actividades
2.3.1. Demostracin de la produccin de CO2 durante la respiracin anaerbica
(Fermentacin)
Se utilizaran 4 tubos de fermentacin graduados y preparados como se indica a continuacin:
Tubo 1

Tubo2

Tubo3

Tubo4

Suspensin de
levadura un
paquete de
levadura + 100
ml de agua
destilada tibia

Suspensin de
levadura un
paquete de
levadura + 100
ml de agua
destilada tibia

Suspensin de
levadura un
paquete de
levadura + 100
ml de agua
destilada tibia

Suspensin de
levadura un
paquete de
levadura + 100
ml de agua
destilada tibia

25 ml

25 ml

25 ml

25 ml

Glucosa al 5%

Glucosa al 5%

Glucosa al 5%

2,5 ml

2,5 ml

2,5 ml

---------

Cloruro o sulfato
de Magnesio
0,1 M

Fluoruro de Na
(un veneno) 0,1
%

5 ml

5 ml

--------

--------

Durante la fermentacin, el CO2 subir y se acumular en el extremo superior de la pipeta.

Despus los tubos se dejaron fermentar por cerca de 40 minutos, obtenindose los siguientes
resultados.
Sobre la base de los resultados, puede Usted explicar la cantidad relativa de fermentacin
(evidenciado por la altura en el espacio de aire/CO2 en cada tubo?

Tabla 1. Produccin de CO2 en centmetros cbicos a los 40 minutos de fermentacin.

Tubo

CO2 (cc)

1
2
3
4
Cul de los tubos no produce CO2?

Qu compuesto inhibe la fermentacin?

Cmo y dnde acta este compuesto inhibiendo la fermentacin? Ver figura ruta
metablica.

Observando el tubo 1 y 2 cul de los dos produce mayor cantidad de CO2?

Indique la diferencia entre los compuestos del tubo 1 y 2.

Explique cul sera la accin de ste compuesto. Ver figura ruta metablica.

2.3.2. En este experimento se usarn varias soluciones de carbohidratos para determinar

cules pueden metabolizarse mediante la fermentacin.
Prepare una suspensin de levadura mezclando:
Un paquete de levadura
2 g de sacarosa
100 ml de agua tibia

Rotule cuatro tubos del 1 al 4. Aada y mezcle bien lo siguiente:

Tubo 1: 2 ml de solucin de sacarosa y 2 ml de suspensin de levadura
Tubo 3: 2 ml de solucin de maltosa y 2 ml de suspensin de levadura
Anote la produccin de CO2 en cada pipeta a intervalos de 5 minutos durante 20 minutos y
antelo en la siguiente tabla:

Tabla 2. Produccin de CO2 (cc) durante la fermentacin Tiempo (en minutos)

Tiempo

Tubo 1
Sacarosa

Tubo 2
Galactosa

Tubo 3 Maltosa

Tubo 4
Lactosa

5 min.
10 min.
15 min.
20 min.

2.3.3. Observacin microscpica de levadura del pan (Saccharomyces cerevisiae).

Tome una gota del frasco con un gotario y mntela entre portaobjeto y cubreobjeto. Observe
al microscopio, esquematice y rotule.
2.3. 2. Demostracin de la produccin de CO2 durante la respiracin aerbica
Monte el siguiente experimento:
Vaso erlenmeyer 1 (Control) 100 ml

Matraz Erlenmeyer 2 100 ml

Agregue agua destilada 100 ml

Agregue agua destilada 100 ml

-----------Aada una gota de fenoftalena

Agregue NaOH gota a gota hasta que el
contenido se torne rosado
(Solucin de NaOH 0.25 M (para diluir

Coloque una rama de Egeria densa (5 cm

de largo) por 30 minutos y retrela (luz)
Aada una gota de fenoftalena
Agregue NaOH gota a gota hasta que el
contenido se torne rosado

1:100)
La fenoftalena permanece incolora en soluciones cidas, pero se torna rosada en soluciones
alcalinas. Puesto que el CO2 forma un cido dbil, cuando en el agua la mayora de los
organismos respiran, ms CO2, es producido, tornndose ms cida la solucin circundante,
por lo tanto, ms gotas de NaOH son requeridas para volver la solucin rosada, es decir,
alcalina.
Cuente el nmero de gotas de NaOH que se emplean en ambos vasos para virar la
fenoftalena de incolora a rosado.
Matraz Erlenmeyer
1.- Sin Egeria densa (luchecillo)
2.- Con Egeria densa (luchecillo)

En cul vaso se utilizaron ms gotas de NaOH? Explique.

N de gotas de NaOH

UNIVERSIDAD DE TALCA
Instituto Biologa vegetal y Biotecnologa
PRCTICO N 7
Sistema de Endomembranas
1. INTRODUCCION
Las clulas eucariontes, a diferencia de las procariontes, presentan una
compleja red de membranas intracelulares que compartimentalizan su citoplasma.
Entre la membrana externa de la envoltura nuclear y el retculo endoplsmico,
complejo de Golgi y membrana plasmtica se comunican entre si a travs de
vesculas citoplasmticas. Adems existen organelos como los lisosomas que se
forman por vesiculacin del complejo de Golgi.
Las membranas de cada uno de estos compartimentos, si bien tienen un
origen comn, son entre s diferentes tanto estructuralmente como funcionalmente.

2. OBJETIVOS

Identificar en microfotografas electrnicas y esquemas los componentes del

sistema endomembranoso.

Analizar cmo estos componentes del sistema endomembranosos se asocian para

cumplir funciones importantes para la clula.

3. ACTIVIDADES PRACTICAS
3.1.

Observe las microfotografas electrnicas e identifique:

3.1.1.
a) Indicar si es una clula eucariota
procariota.
b) Indicar si es animal vegetal.
c) Indica el nombre de las estructuras
numeradas.

3.1.2.
a) Indicar si es una clula eucariota
procariota.
b) Indicar si es animal vegetal.

3.1.3.

a) Indica que tipo de estructuras u organelos

muestran los nmeros en el dibujo.

3.1.4.
a)
Indica que tipo de
estructuras u organelos muestran
los nmeros en la fotografa a
microscopio electrnico

3.1.5.
Qu tipo de sistema de
endomembrana es? y Cual
es su funcin?

3.1.6.

El nmero 1, Qu tipo de
estructura esta indicando? y
Cual es su funcin?

3.1.7.
Indica que tipo de estructuras
u organelos se muestran en la
imagen

3.1.8.
Observe la imagen e identifique

3.1.9.

Observe la imagen e identifique

3.1.10.
Observe la imagen e identifique

3.1.11.
Observe la imagen e identifique

3.2 Relacione las estructuras celulares con su funcin

Vacuolas
Pared Celular
Ncleo
Centrosoma/Centrolos
Membrana plasmtica
Carioteca o envoltura nuclear
Retculo endoplasmtico liso (REL)
Retculo endoplasmtico rugoso (RER)
Complejo de Golgi

3.2.

Relacione las siguientes columnas

UNIVERSIDAD DE TALCA
Instituto Biologa vegetal y Biotecnologa
PRCTICO N 8
Mitosis- Meiosis
1. INTRODUCCION
Las clulas de los organismos multicelulares, al igual que las de unicelulares,
realizan a lo largo de la existencia un conjunto de procesos. Un gran nmero de
estos procesos est destinado al mantenimiento de la integridad estructural y
funcional de la clula, y son los que contribuyen, de manera fundamental, a la
homostasis. Otros procesos estn destinados a la continuidad celular, y son los
referentes a reproduccin o divisin. Estos procesos caracterizan dos fases que se
suceden alternativamente durante la vida de la clula, constituyendo lo que se
denomina ciclo celular: las etapas reciben el nombre de INTERFASE y DIVISION,
respectivamente.
Un aspecto fundamental del ciclo celular es el que se refiere al material gentico.
Dado que este es el responsable del funcionamiento y de las potencialidades de la
clula, y que las clulas hijas deben heredar idntica autonoma, es indispensable
que el material gentico sea duplicado en forma precisa y sin errores, y que las dos
copias as obtenidas se repartan con exactitud entre las clulas hijas.
Algunas clulas (excepcionales) despus de llegar a su estructura definitiva no
completan su ciclo celular, y quedan detenidas en su periodo de interfase, sin
experimentar ninguna divisin. Este es el caso de algunas clulas muy
especializadas, como las neuronas, las fibras musculares y los glbulos rojos.

2. OBJETIVOS

Comprender las etapas del ciclo celular

Estudiar las etapas del proceso de divisin celular

3. EL CICLO CELULAR (Fig. 1)

INTERFASE
En los estudios sobre ciclo celular con microscopio ptico, se denomin interfase
al periodo que se observaba entre dos divisiones celulares sucesivas. En
comparacin con la actividad desarrollada durante la divisin (Condensacin de los
cromosomas, formacin del aparato mittico, desaparicin y reaparicin de
estructuras nucleares, etc.), la interfase pareca un perodo de relativo descanso
celular.
Sin embargo, actualmente sabemos que la interfase es el perodo de mxima
actividad metablica de la clula: todos los procesos que podramos llamar de rutina
celular, es decir, degradaciones, sntesis, transportes, movimientos, tienen lugar en
la interfase. (Durante el perodo de divisional, salvo en algunas actividades
fundamentales, la clula se dedica exclusivamente a los procesos vinculados con la
divisin.)
La interfase es tambin, por lo general, el perodo de mayor duracin del ciclo
celular. En promedio, slo alrededor de un 10% del tiempo total del ciclo celular
corresponde a los procesos de divisin.
Durante la interfase, el material gentico permanece en el estado ms disperso,
como filamentos sumamente finos, aspecto bajo el cual se le denomina cromatina.
En la cromatina, el ADN est poco espiralizado o condensado, por lo cual significa
que la doble cadena est relativamente estirada.

MITOSIS
CITOCINESIS

G2

G1

Fig. 1. Esquema del ciclo celular y duracin relativa de sus etapas, en clulas de
mamfero en cultivo de tejidos. Interfase: G1= 10 horas S= 9 horas G2= 4 horas,
Divisin: mitosis (M) + citocinesis = 1 hora.
ETAPAS DE LA INTERFASE
1. G1, primer intervalo, o perodo pre-sntesis de ADN
Esta es la etapa en la cual se desarrolla la actividad metablica general:
oxidacin de molculas combustibles, aprovechamiento de la energa para los
diversos trabajos celulares, como los transportadores a travs de la
membrana, la contraccin y otros movimientos celulares, las sntesis de
molculas y macromolculas , la formacin de nuevas membranas, el armado
de nuevos organelos, etc.
En esta fase, aunque no exclusivamente, tienen lugar la transcripcin del
ADN a los diversos ARN (esto es posible gracias a que el ADN se encuentra
poco condensado, permitiendo la copia de su mensaje) y la traduccin o
sntesis de protenas.
Las clulas que no realizan divisin y que se detienen en interfase se
encuentran constantemente en esta etapa G1.
2. S, o perodo de sntesis de ADN:
Durante G1, la clula posee una cierta cantidad de ADN que representa su
material gentico, y donde reside la capacidad de gobernar su actividad. Al
dividirse, debe entregar a cada clula hija una copia de ese material gentico,
para que stas posean esa misma capacidad. La sntesis de las copias de
ADN, que tienen lugar en esta fase, se conoce como duplicacin o
replicacin del ADN.
En este proceso son necesarios:
a) Unidades de construccin: los monmeros que constituirn el polmero,
es decir, los desoxirribonucletidos (de adenina, guanina, citosina y
timina).
b) Fuente de energa: el proceso es anablico y endergnio; la energa que se
requiere es aportada por los mismos desoxirribonucletidos-tri-fosfato
(dATP, dGTP,dCTP,dTTP-la letra d indiac que la azcar del nucletido es
desoxirribosa-).

c) Informacin: el ADN se autoduplica, es decir, a partir de la informacin

que l mismo trae es capaz de ordenar dos nuevas molculas de ADN
idnticas a l, el ADN funciona as como molde para su propia sntesis.
d) Enzima especifica. La polimerizacin de los desoxirribonucletidos para
formar las nuevas cadenas de ADN esta catalizada por una enzima
denominada ADN polimerasa- ADN dependiente.
e) Asiento celular del proceso: la replicacin del ADN durante la etapa S de
la interfase tienen lugar en el ncleo, mientras el material gentico se
encuentra como cromatina, en su grado menor de condensacin
Mecanismo de la duplicacin del ADN
Si una molcula original de ADN abre su doble hlice, y cada una de las
cadenas sirve como molde para la polimerizacin de una cadena
complementaria, las molculas hijas mantienen la misma secuencia de bases
original (y, por lo tanto, la misma informacin gentica). Un modelo de
duplicacin como este, en que cada molcula hija posee una cadena materna
(que sirvi de molde) y una recin polimerizada, se denomina modelo
semiconservativo.
Se supone que el mecanismo de duplicacin del ADN consiste en una
separacin de dos cadenas de la doble hlice, y que luego cada cadena
(materna) sirve como molde para ordenar los desoxirribonucletidos del
medio, de acuerdo a complementariedad ya conocida.
El ADN polimerasa cataliza la polimerizacin de los nucletidos alineados,
formndose uniones entre el primer grupo fosfato y el monosacrido del
nucletido siguiente, y perdindose un grupo pirofosfato inorgnico (PPi).
La cadena recin polimerizada permanece unida a la cadena materna.
Mientras tanto, la cadena materna restante ha copiado de una manera
semejante una complementaria, por lo cual se obtienen dos filamentos hijos
de doble cadena exactamente iguales entre s e iguales a la molcula original.
Sin embargo, dado que el proceso es complejo, en algunas ocasiones se
cometen errores en la duplicacin del ADN: por ejemplo, la insercin de un
nucletido equivocado, la prdida de un nucletido, etc. Estos errores en la
secuencia del ADN significan cambios en la informacin gentica original y
reciben el nombre de mutaciones. Estos cambios son heredados por las
clulas que deriven de aquellas que recibieron ADN con errores (si las
siguientes replicaciones son exactas, deben reproducir tambin las
equivocadas).
Una vez que entra en la etapa S, la clula sigue casi invariablemente hasta
completar el ciclo, es decir, dividirse.
3. G2, segundo intervalo, o perodo post-sntesis de ADN
Es un perodo de preparacin para la divisin celular. Continan las
actividades metablicas normales y es caracterstica la sntesis de algunas

protenas que se utilizarn durante la divisin, como por ejemplo las

protenas de los microtbulos que constituirn el aparato mittico.
DIVISIN CELULAR
El crecimiento de la clula debe preceder obligatoriamente a su divisin. En
muchos casos, la clula parece crecer hasta cierto lmite antes de dividirse. Esto
se debe, en parte, a que en medida que aumenta el tamao de la clula, la relacin
superficie/volumen se hace menos favorable, dado que limita la capacidad de
introducir nutrientes y eliminar desechos. Por otro lado, dado que el volumen del
ncleo permanece constante en tanto aumenta el del citoplasma, la relacin
nucleocitoplasma tambin se hace desfavorable.
Divisin celular en procariontes
En clulas procariontes el proceso de divisin es relativamente sencillo. El
generalmente nico cromosoma de ADN desnudo est ligado a un plegamiento
de la membrana, llamado mesosoma. Una vez replicado el ADN, comienza un
crecimiento de la membrana plasmtica y de la pared celular, frecuentemente en
la zona misma del mesosoma. Las molculas de ADN hijas se separan a medida
que se va formando entre ellas una especie de tabique transversal, que a su vez
divide el citoplasma en dos partes aproximadamente iguales. Esta divisin suele
llamarse divisin directa.
Divisin celular en eucariontes
El problema de la divisin en clulas eucariontes es ms complejo, debido a que
hay un mayor nmero de cromosomas, y a que es imprescindible asegurar su
distribucin exacta entre las clulas hijas.
Como ya se ha visto, durante la interfase el material gentico se presenta en
forma dispersa, denominndose cromatina, y por condensacin de esta, al
comenzar la divisin, se organizan los cuerpos compactos denominados
cromosomas. Dado que ha ocurrido previamente el proceso de replicacin, cada
cromosoma, es en realidad, un cromosoma duplicado, y as se observa cuando
est en su grado de mxima condensacin: constituido por dos cromatidas
idnticas entre s, unidas a nivel del punto llamado centrmero o cinetocoro.
MITOSIS
La mitosis es la divisin celular propiamente dicha. Mediante el proceso
mittico, a partir de una clula se obtienen dos clulas hijas, genticamente
idnticas entre s e idnticas a la progenitora.
Esta divisin puede realizarse en cualquier tipo de clula eucarionte, ya sea
haploide o diploide (Fig. 2). Dado que mantiene invariable el nmero de
cromosomas, resultarn clulas hijas haploides o diploides, respectivamente.

Es un proceso que concierne principalmente al ncleo. La divisin del citoplasma

para dar dos clulas hijas es un mecanismo accesorio, y recibe el nombre de
citocinesis, mientras que la divisin de nuclear es denominada cariocinesis.
Como ya se ha dicho, algunas clulas no experimentan mitosis, y permanecen
siempre en un estado interfsico. En cambio, otras clulas realizan mitosis
frecuentes: por ejemplo, las clulas embrionarias, las de zonas de crecimiento, o
las que pertenecen a tejidos sujetos a continuo desgaste.
En estos casos, la mitosis tiene como objeto el crecimiento y desarrollo del
organismo multicelular, y la reposicin o regeneracin de los tejidos expuestos a
prdida o destruccin de clulas.

Fig. 2. a) Esquema de una clula haploide n=4 b) Esquema de una clula

diploide 2n=8
Etapas de la mitosis
La mitosis es un proceso continuo, pero clsicamente se la divide en 4 etapas
para su mejor estudio. Estas son:
1.
2.
3.
4.

Profase
Metafase
Anafase
Telofase

1. Profase
En esta etapa la cromatina comienza a condensarse para formar los
cromosomas (Fig. 3). Adems se observa que los centriolos se separan y
migran hacia los polos opuestos de la clula, organizando entre ellos un
sistema de microtbulos que permitirn la migracin ms ordenada de los
cromosomas.

Fig. 3. Conformacin de un cromosoma

Recibe el nombre de aparato mittico el sistema de microtbulos que se
extiende a travs de la clula, de un polo a otro, constituido por:
-

Los centriolos, rodeados por una zona clara llamada centrosoma; a

medida que migra, cada centriolo organiza un nuevo centriolo hijo, de
modo que al llegar a los polos, se observan un par de centriolos en
posicin perpendicular;
Los steres, un conjunto de microtbulos ms cortos que se extienden o
irradian desde cada centriolo;
El huso mittico, formado por numerosos microtbulos sin
ramificaciones.

A todo lo largo de la profase contina la condensacin de los cromosomas,

que ahora evidencian estar constituidos por dos cromtidas hermanas cada
uno, unidas al nivel del centrmero.
Mientras tanto la envoltura nuclear se desorganiza y sus fragmentos pasan a
ser indistinguibles del retculo endoplasmtico. Tambin desaparece el
nuclolo, al disgregarse los grnulos que lo constituyen.
2. Metafase
Los cromosomas, son las cromtidas hermanas completamente escindidas y
en su grado de mxima condensacin, se alinean en el plano central o
ecuatorial de la clula. Cada cromosoma, de manera independiente del resto
de los cromosomas, est unido por un centrmero a una fibra del huso
acromtico.
3. Anafase
Es un periodo relativamente rpido, en el cual las dos cromtidas hermanas
que componen cada cromosoma se separan por fisin del centrmero, y se
dirigen hacia los polos opuestos de la clula, con una velocidad que puede
alcanzar los 0,4 / minuto.

Una hiptesis propone que el movimiento de los cromosomas hijos hacia los
polos se debe aparentemente acortamiento de las fibras cromosmicas, que
se desarmaran en los polos, mientras que simultneamente se alargaran
las fibras interzonales, por agregado de microtbulos en la zona central.
4. Telofase
Al terminar la migracin de los dos grupos de cromosomas hijos, el huso
mittico y los steres se desorganizan.
Alrededor de cada grupo cromosmico se organiza una envoltura nuclear, a
partir de fragmentos que parecen provenir del retculo endoplasmtico y que
pueden incluir restos de la envoltura original.
As quedan definidos dos ncleos hijos, los cromosomas se dispersan y
retoman el aspecto de la cromatina que tenan antes de iniciarse la divisin.
Los nuclolos reaparecen en este momento, a partir de los organizadores
nucleolares.
Citocinesis
La citocinesis se hace evidente por un surco que aparece en la membrana
plasmtica, ubicado en un plano ecuatorial perpendicular al huso. Esta
producido por un anillo de microfilamentos unidos a la membrana. El surco
se contrae hasta alcanzar un dimetro pequeo, estrangulando al citoplasma.
Finalmente, las dos clulas hijas se separan, distribuyndose el hialoplasma
y los organelos citoplasmticos de un modo ms o menos equitativo.
No siempre ocurre citocinesis luego de la cariocinesis. En tales casos, los
dos ncleos hijos quedan contenidos en el mismo citoplasma y resulta una
clula binucleada. Por sucesivas cariocinesis sin citocinesis puede formarse
una clula multinucleada.

Fig. 4. Proceso divisional en una clula

animal.
a) Interfase previa a la mitosis
b) Profase temprana de mitosis
c) Profase: constitucin del aparato
mittico
d) Profase tarda
e) Metafase
f) Anafase
g) Telofase temprana
h) Telofase tarda
i) citocinesis

MEIOSIS
La meiosis es considerada como otro tipo de divisin celular, es exclusivo de
clulas eucariontes, no es la multiplicacin celular, sino la intervencin en
ciclos reproductivos sexuales.
As, la meiosis solo se realiza en clulas especficas, y ocurre en ellas una
nica vez (por ello, no es equivalente a la mitosis, que puede repetirse
indefinidamente siempre que la preceda una interfase).
La reproduccin sexual se produce cuando, por fecundacin, se unen a una
gameta (clula sexual o germinal) femenina con una masculina, para formar
una cigota. Esta clula posee, por lo tanto, la suma de los cromosomas de
ambas gametas. Para mantener la constante cromosmica caracterstica de la
especie, debe desarrollarse un mecanismo capaz de reducir el nmero de
cromosomas a la mitad.
La meiosis se lleva a cabo prcticamente slo en clulas diploides (2n), y
consta de divisiones sucesivas:
a)

Etapa reduccional o meiosis I, precedida de una interfase con

duplicacin de ADN;
b) Etapa ecuacional o meiosis II, que se realiza sin duplicacin del ADN
previa.
Por razones del mecanismo de divisin, a partir de una clula diploide la
meiosis origina cuatro clulas haploides, pero este aumento del nmero de
clulas no tiene el significado de una proliferacin celular. De hecho, en
ciertas oportunidades 3 de las 4 clulas degeneran, y slo una resulta el
producto funcional de la divisin meitica.
En lneas generales, durante la meiosis I (Fig. 5) ocurren los siguientes
procesos:

Condensacin de los cromosomas, cada uno compuesto por dos

cromtidas hermanas.
Reconocimiento y apareamiento de los cromosomas homlogos: a
diferencia de la mitosis, donde cada cromosoma se comportaba
independientemente de los dems, en la meiosis se agrupan formando los
distintos pares homlogos. Este apareamiento posibilitar la posterior
separacin ordenada de los cromosomas homlogos.
Separacin de los cromosomas homlogos: cada miembro del par migra a
un polo distinto(o, lo que es equivalente, a una clula hija distinta). Si
cada clula hija posee un solo cromosoma de cada modelo morfolgico,
resulta una clula haploide
En la meiosis I o etapa reduccional se reduce el nmero diploide de
cromosomas a la mitad (haploide), si bien los cromosomas an son
dobles.
En la meiosis II o etapa ecuacional se mantiene el nmero de
cromosmico haploide conseguido en la etapa anterior; los cromosomas
ahora son simples.

Fig. 5. Aspectos principales del comportamiento de los cromosomas en meiosis.

a) Condensacin de los cromosomas (meiosis I)
b) y c) reconocimiento y apareamiento de los cromosomas homlogos (meiosis
I).
d) separacin de los cromosomas homlogos, y formacin de dos clulas hijas
haploides (meiosis I)
e) Cromosoma constituido por dos cromtidas.
f) Formacin de cuatro clulas hijas haploides por meiosis II
g) Cromosoma constituido por una sola cromtida

Etapas de la meiosis

Tanto para la meiosis I como para la II se dividen para su estudio en las

mismas etapas que se describieron para la mitosis.
Meiosis I (Fig. 6)
La meiosis I est precedida por una interfase durante la cual se duplica el
material gentico.
1. Profase I
Es un periodo largo, en el cual los cromosomas presentan un
comportamiento particular, esencialmente diferente del observado en la
mitosis.
Suele dividirse a la profase en cinco etapas:
a) Leptonema: los cromosomas comienzan a condensarse a partir de la
cromatina.
b) Cigonema: los cromosomas homlogos comienzan a aparearse. Este
contacto se denomina sinapsis, es muy exacto, ya que las cromtidas
que se asocian lo hacen especficamente punto por punto. La
estructura resultante se denomina bivalente (porque est constituida
por dos cromosomas). Contina la condensacin de los cromosomas.
c) Paquinema: los cromosomas homlogos completan su apareamiento;
aunque no hay fusin de cromtidas, el contacto es sumamente
estrecho. Los cromosomas se han enrollado ms apretadamente y las
cromtidas se hacen visibles; el par homlogo recibe ahora el nombre
de ttrada (constituido por cuatro cromtidas). En esta etapa ocurre
un fenmeno cromosmico singular denominado entrecruzamiento o
crossing-over.
d) Diplonema: los cromosomas homlogos comienzan a repelerse,
aunque sin separarse por completo. Quedan unidos por ciertos puntos
denominados quiasmas, que parecen ser la expresin morfolgica del
entrecruzamiento.
e) Diacinesis: mientras contina la condensacin de los cromosomas,
los quiasmas se desplazan hacia los extremos de los mismos; los
cromosomas homlogos solo quedan ligados por estos puntos.
2. Metafase I
Los cromosomas se alinean en el plano ecuatorial de la clula. Los dos
cromosomas del bivalente con el aspecto que presentaban en diacinesis
han conservado sus centromeros independientes, y mediante estos se
unen a la misma fibra del huso acromtico.
3. Anafase I

Los cromosomas homlogos unidos a la misma fibra del huso terminan

de repelerse y migran cada uno a un polo diferente de la clula. Debe
observarse que cada cromosoma contina integrado por dos cromtidas.
4. Telofase I
Cuando los cromosomas han llegado a los polos, se desorganizan el huso
acromtico y los steres, se reorganizan la envoltura nuclear y los
nuclolos, y quedan constituidos por dos ncleos hijos. Los cromosomas
pueden permanecer an parcialmente condensados.
Citocinesis
Simultneamente con la telofase se produce la divisin del citoplasma, lo
cual da como resultado dos clulas hijas con un nmero haploide de
cromosomas.
Intercinesis
Se denomina as al perodo que tiene lugar la meiosis I y la meiosis II, dado
que no responde a la descripcin que se ha hecho antes de la interfase: en
este perodo no se realiza la duplicacin la duplicacin del ADN.

Fig. 6. Primera divisin meitica (meiosis I)

a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)
h)
i)
j)

Interfase previa a la meiosis I

Profase I: Leptonema
Profase I: Cigonema
Profase I: Paquinema
Profase I: Diplonema
Profase I: diacinesis
Metafase I
Anafase I
Telofase I
Citocinesis

Meiosis II (Fig. 7)

Los procesos que se realizan durante esta divisin son completamente

semejantes a los de una mitosis que ocurriera en una clula haploide.
Se citarn los principales sucesos de cada etapa:
1. Profase II
-

Condensacin de los cromosomas

Desintegracin de los nuclolos
Migracin de los centriolos a los polos; duplicacin de los centriolos
Formacin del huso acromtico
Desorganizacin de la envoltura nuclear.

2. Metafase II
-

Alineamiento de los cromosomas en la placa ecuatorial

Unin de cada cromosoma a una fibra del huso acromtico

3. Anafase II
-

Fisin del centrmero y separacin de las dos cromtidas que constituan

cada cromosoma
Migracin de cada cromtida a un polo diferente de la clula

4. Telofase II
-

Llegada de los grupos cromosmicos a los polos

Desorganizacin del huso acromtico
Reorganizacin de la envoltura nuclear
Reorganizacin del nuclolo
Dispersin de los cromosomas, transformndose en cromatina

Citocinesis
-

Separacin de los citoplasmas de las clulas hijas.

Dado que la meiosis II se inici a partir de dos clulas haploides, se obtienen

por este proceso cuatro clulas haploides.
El proceso meitico completo, por lo tanto, partiendo de una clula madre
diploide (2n) dar como resultado cuatro clulas hijas haploides (n)

Fig. 7. Segunda divisin meitica (meiosis II)

a)
b)
c)
d)

Profase II
Metafase II
Anafase II
Telofase II

e)

Citocinesis

Bibliografa
CASTRO, R; HANDEL, M; RIVOLTA, G.1981. Actualizaciones en Biologa.
Editorial Universidad de Buenos Aires. 179 p.