UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE NICARAGUA MANAGUA

Recinto Universitario Rubn Daro

Instituto Politcnico de la Salud
Dr. Luis Felipe Moncada

PRUEBAS DIAGNOSTICAS II
HEMATOLOGIA
Tema:
TIPOS DE TUBOS Y ANTICOAGULANTES
Autor:
Carlos Antonio Sols Soza

Profesor:
Msc. Mara Ins Jirn

Managua, Viernes 8 de abril de 2016.

Introduccin

La hematologa es la ciencia que se encarga de estudiar todo los componentes

sanguneos, tales como las clulas (hemates o eritrocitos o glbulos rojos,
leucocitos o glbulos blancos y plaquetas), plasma y de los tejidos formadores de
esas clulas (rganos hematopoyticos: mdula sea, sistema linftico, bazo,).
Cada prueba que se realizan en el laboratorio es para observar el desarrollo y las
alteraciones de los componentes de la sangre o tejidos hematopoyticos. Cuando
se produce dichas alteraciones en el organismo o se modifican los parmetros de
los componentes, que en condiciones normales son constantes, nos indica que
hay una enfermedad o infeccin en el organismo.
La cantidad de sangre necesaria depende de las pruebas que haya que analizar
pero en una extraccin normal suelen ser entre 10-15 ml que se distribuye en
tubos con tapones de diferentes colores que tienen anticoagulantes distintos
adecuados a las pruebas que se vayan a analizar. No obstante, algunos tubos
poseen geles acelerantes de la coagulacin como tambin los que no los llevan.
En este trabajo explicara ms afondo.

Objetivo

Conocer los diferentes anticoagulantes existentes que son empleados en

los laboratorios clnicos.

Mostrar los distintos colores de los tubos y su orden al momento de la toma
de muestra.

Anticoagulantes

1. EDTA (cido etilendiaminotetraactico) o sal disdica, dipotsica o

tripotsica del cido etilendiaminotetraactico, actua mediante un efecto
quelante sobre el calcio (Ca++), impidiendo el proceso de la coagulacin al
fijarlo. Es el anticoagulante de eleccin para hemograma.
Este anticoagulante se utiliza fundamentalmente para la realizacin de
recuentos celulares, sobre todo en los autoanalizadores y permite adems
la realizacin del hematocrito y del frotis sanguneo hasta dos horas
despus de la extraccin de la muestra al mismo tiempo que impide la
aglutinacin de las plaquetas.
Las sales de potasio tienen la ventaja, respecto a las de sodio, de ser ms
fcilmente solubles en sangre cuando las usamos a partir del producto
slido, sin embargo , las tres sales afectan el tamao del eritrocito,
especialmente despus del almacenamiento de la sangre anticoagulada por
espacio de algunas horas.
El International Council for Standardization in Hematology

(ICSH)

recomienda la sal dipotsica como anticoagulante para recolectar muestras

sanguneas destinadas al recuento y caracterizacin del tamao celular y
especialmente cuando los valores del hematocrito se requieren para la
calibracin de los contadores automticos.
El K2 EDTA. 2H2O posee un peso molecular relativo de 404,1g; 1g quela 100
mg de calcio inico y el pH para una solucin al 1% es de 4.8 1,0. La
cantidad de EDTA dihidratado agregada a la sangre debe ser de 1.5-2.2
mg/mL. de sangre total. Esta cantidad es un compromiso entre la cantidad
requerida para evitar la coagulacin y la cantidad a la cual se producen las
alteraciones celulares.

Los productos habitualmente comercializados consisten en una solucin

equilibrada de sales sdicas y potsicas de EDTA (0,342 mol/l) pH 7,2, con
estas la proporcin recomendada es 1/100 Ej: 10 L de anticoagulante para
1 mL de sangre (990 L estrictamente hablando).

2. HEPARINA SDICA. HEPARINA DE LITIO, es un anticoagulante

fisiolgico que acta impidiendo que la protrombina se transforme en
trombina. Estructuralmente es un mucopolisacrido cido. Los frotis
realizados con muestras sanguneas anticoaguladas con heparina producen
en las tinciones panpticas un color azulado y una pseudovacuolizacin
celular por lo tanto no se lo recomienda para tal fin. La proporcin adecuada
es de 15-20 UI (0.1-0.2 mg) de heparina por ml de sangre.
3. CITRATO TRISDICO, C6H5O7Na3, acta impidiendo que el calcio se
ionice, evitando as la coagulacin. Se utiliza para realizar las pruebas de
Hemostasia en una proporcin sangre: anticoagulante 9:1 (Por Ej.:2mL
sangre con 250L anticoagulante); as como para la velocidad de
eritrosedimentacin en una proporcin sangre: anticoagulante 4:1 (Por Ej.:
2 mL sangre con 500 L anticoagulante).
4. ACD (Acido-Citrato-Dextrosa): se emplea fundamentalmente en Bancos
de Sangre para conservar las unidades de sangre y estudios metablicos
eritrocitarios por permitir una buena conservacin de los hemates. Se
utiliza en una proporcin de un volumen de ACD por cada cuatro volmenes
de sangre. La proporcin de la mezcla del anticoagulante es de: cido
Ctrico 0.9 g, Citrato disdico 2 g, Dextrosa 2 g, H2O destilada 120 mL.
Conserva la muestra por 21 das.
5. CPD (Citrato-fosfato-dextrosa): Este tipo de anticoagulante estabiliza el
pH de la sangre en valores cercanos a 7.1 durante el periodo de
almacenamiento, lo que permite que los componentes celulares continen
su metabolismo.
Por otra lado el fosfato presente en la solucin anticoagulante permite
mantener las reservas de ATP, lo que se traduce en una mayor estabilidad
de la membrana celular y por ltimo, conserva niveles elevados de 2,3difosfoglicerato (2,3-DPG) lo que disminuye la afinidad de la hemoglobina
por el oxgeno facilitando su liberacin en los tejidos. Este se puede
conservar hasta 28 das.

6. CTAD: La viabilidad de CTAD (una mezcla de citrato, teofilina, adenosina y

dipiridamol) como un nuevo anticoagulante para uso en laboratorio mdico
se estudi de forma prospectiva.
La sangre total anticoagulada con CTAD exhibi resultados muy similares a
los de sangre anticoagulada con EDTA en el recuento de sangre completa y
diferencial de glbulos blancos automatizado excepto por una ligera
disminucin en el recuento de plaquetas y el volumen medio de plaquetas.
Los datos de prueba qumica para el plasma obtenido a partir de toda
CTAD sangre fueron similares a los obtenidos para sueros pareados.
Entre las pruebas de coagulacin, tiempo de protrombina, el tiempo de
tromboplastina parcial y concentraciones de fibringeno fueron similares a
los obtenidos con plasma de citrato. Basndose en los resultados, CTAD
fue juzgado para ser un buen candidato como un nuevo anticoagulante.
7. Oxalatos
Actan como anticoagulantes removiendo el calcio de la sangre en forma
insoluble de oxalato de calcio. Si se utiliza oxalato de sodio u oxalato de
potasio se produce un encogimiento significativo de los eritrocitos, por lo que
se prefiere usar el anticoagulante de Wintrobe que consiste en una mezcla de
oxalatos de amonio y potasio en relacin 2:1 (la cantidad recomendada es de
2mg por mL de sangre), el cual no afecta el valor corpuscular medio y puede
usarse para la determinacin de hemoglobina, hematocrito, recuentos
globulares y adems no interfiere en la velocidad de eritrosedimentacin.

El uso en las extensiones de sangre est limitado a los primeros minutos, ya

que pueden desarrollarse con rapidez formas dentadas en los eritrocitos,
vacuolizacin en el citoplasma de los granulocitos, fagocitosis de cristales de
oxalato, artefactos en los ncleos de linfocitos y monocitos y otras
deformidades.

Colores

Tapn Rojo

No posee Aditivo (tubos de vidrio)

Se obtiene suero
Anlisis Qumico y Serolgico
Los tubos contienen un activador de coagulacin
aplicada por aspersin (tubos de plstico)
Se necesita 60 minutos para poder coagularse
La inversin en tubos plsticos (5 veces) y en
vidrio nada
Fuerza y tiempo de centrifugacin: < 1300 g; 10
min. a 25C

Tapn Celeste

El aditivo es Citrato de Sodio

Inversiones del tubo previenen la coagulacin (3-4 veces)
Se obtiene Plasma
Determinacin de la coagulacin
Pruebas que se realizan son: Tiempo de
protrombina y Tiempo parcial de tromboplastina
Fuerza y tiempo de centrifugacin: 1500 g; 15 min.
18-22C
El tubo debe permanecer cerrado hasta su anlisis
(podra perder CO2 en contacto con el aire,
incrementndose el pH).

Tapn Lila o Morado

El aditivo es EDTA
Se obtiene Plasma
En pruebas hematolgicas se usa la sangre total, como biometra hemtica
completa (BHC) y recuento plaquetario.
Inversin de estn tubo es de 6 veces
En determinaciones de sangre total,
homogeneizar el tubo previo el anlisis.
En determinaciones de plasma, evitar la
centrifugacin a ms de 1300 g durante 10-15
min.
a 18-22C.

Tapn Anaranjado (RST)

El aditivo es la trombina
Se obtiene Suero

Se realiza exmenes de Qumica Sangunea

La coagulacin completa se produce menos de 5 minutos despus de la
extraccin.
Inversin es de 6 veces
Fuerza y tiempo de centrifugacin: 1000 - 1300 g; 10-15 min. a 18-22C

Tapn Rosa

El aditivo es EDTA
Se obtiene Plasma
Para determinaciones en sangre entera en hematologa, Banco de Sangre
(Compatibilidad Sangunea) y Qumica Sangunea (Estudios de Hormonas).
Inhibe la calicreina
Inversin 8 veces
En determinaciones de sangre total, homogeneizar el tubo
antes del anlisis.
Condiciones de centrifugacin: variables, segn los anlisis.
Evitar la centrifugacin a ms de 1300 g durante 10-15 min. a
18-22C.
Permite la conservacin del plasma, tras la centrifugacin,
durante 48 horas a 4C.

Tapn verde

El aditivo es Heparina
Se obtiene Plasma
Determinaciones Qumicas (Determinacin de amoniaco), Hematolgicas

(fragalidad osmtica)
Fuerza y tiempo de centrifugacin: < 1300 g; 10 min; 18-22C.
Estn disponibles con los siguientes anticoagulantes, en forma
seca: heparina de sodio, heparina de litio o heparina amnica

(todos provienen de la mucosa intestinal porcina.)

La heparina de sodio y la heparina de litio tienen calidad

farmacutica y no contienen conservantes.

Inversin 8 veces

Tapn Gris

El aditivo es Citrato
Se obtiene Plasma

Contiene conservantes que actan como inhibidores glicoliticos: Fluoruro

sdico, fluoruro sdico + oxalato potsico, fluoruro sdico + heparina
sdica, iodo acetato de litio + heparina de litio o fluoruro sdico + EDTA.
El fluoruro y el iodo acetato son los conservantes comnmente
utilizados para prevenir la gliclisis en muestras de
sangre hasta 24 horas a temperatura ambiente.
Tambin pueden utilizarse para determinaciones
de lactato y alcohol en sangre.
Fuerza y tiempo de centrifugacin: < 1300 g
durante 10 min; 18-22C.
Realizar la determinacin de glucosa como
mximo 48h despus de la extraccin de la
muestra.
Realizacin de determinaciones de alcohol en sangre y lactato

Tapn Amarillo

El aditivo es ACD (Acido Citrato Dextrosa) y partculas de slice

Se obtiene Suero
Determinacin Qumica y Serolgica
Se utiliza para la extraccin de muestra para hemocultivo en
microbiologa
Se emplean estudios de Bancos de Sangre, fenotipificacion de
HLA y pruebas de ADN y paternidad.
Fuerza y tiempo de centrifugacin: 1000 - 1300 g; 10-15 min. a
18-22C
No centrifugar el tubo de nuevo una vez formada la barrera de
gel.
Se deben almacenar a 4-25C y proteger de la luz solar.
Activan y aceleran el proceso de coagulacin.
Inversin 6 veces

Tapon Negro

El aditivo es Citrato de Sodio, su funcin es de anticoagulante y

diluyente
Se obtiene Plasma
Determina VSG (Velocidad de Sedimento Globular)
La relacin sangre / aditivo es 4:1, cuando los
tubos estn llenados correctamente segn su
volumen de vaco (Mtodo de Westergren).
Inversion 8 veces

Tapn Blanco

Aditivo EDTA K2
Se obtiene plasma
Determina la carga viral, PCR y pruebas de cidos nucleicos.
Inversin 8 veces
Fuerza y tiempo de centrifugacin: 1100 g; 10 min. a T ambiente
(18-22C) en rotor horizontal

Tapn Azul
Aditivo EDTA K2
Inversin 8 veces
Se obtiene plasma
Posee un activador de coagulacin en el tubo
Determina los elementos traza, toxicologa y determinaciones en qumica
nutricional
Fuerza y tiempo de centrifugacin: 1000 - 1300 g; 10-15
min.
a 18-22C (en suero o plasma).
Tapn Beige
Aditivo es EDTA K2 (Plstico)
Se obtiene plasma
Su inversin es de 8 veces
Determina plomo
El tubo est certificado por contener menos de 0.01 ug/ml (pm) de
partculas contaminantes
La inversin del tubo previene la formacin de cogulos

Otros tipos de tubos

BDTM P100

Contiene spray seco EDTAK2, como anticoagulante y propiedades

estabilizadoras para minimizar la degradacin de protenas.
Se obtiene Plasma

Es usado en investigaciones exclusivamente y adems el uso de este

producto para procesos de diagnstico y gestin de pacientes est
estrictamente prohibido.
Posee un separador mecnico que logra minimizar la contaminacin celular.

Tubos CPT

Contienen un anticoagulante (citrato de sodio o heparina

de sodio) y un medio de separacin de clulas
consistente en un gel y un lquido de gradiente de
densidad (ficoll).
Se utiliza para obtener clulas mononucleares en
elevada concentracin y/o plasma para ensayos.
El procesamiento de clulas para cultivos de
inmunotipaje (ej. Tipaje HLA), estudios de funcin celular,
deteccin de tumores celulares, preparacin de cidos
nuclecos, virologa, y determinaciones de marcadores
genticos son ms rpidos que con mtodos de separacin
manuales con mltiples pasos.
Centrifugacin: 1650 g; 20 min a 18-25 C

Tubos con CTAD

Su aditivo anticoagulante CTAD (citrato, teofilico, adenosina y

dipiridamol), con un pH de 5.
Estos tres aditivos inhiben la liberacin del factor plaquetario 4
(PF4) y previenen su acoplamiento a la heparina, evitando el riesgo de
resultados de pruebas falsamente bajos.
El fin de este tubo es de monitorizar la terapia con heparina y puede ser
utilizado para los estudios de coagulacin de rutina.
Fuerza y tiempo de centrifugacin: 1500 g; 15 min. a 1822C
Los tubos debern almacenarse de 4-25C y protegerse
de la luz natural y artificial.
La estabilidad de la muestra en sangre completa durante
4 horas a temperatura ambiente.

Tubo PST II

Contiene heparina de litio

Se Inhibe el proceso de coagulacin
La inversin es de 9 veces
Fuerza y tiempo de centrifugacin: 2000 g; 10 min. a 18-22C

Se deben almacenar a 4-25C y proteger de la luz solar.

Es utilizado para hacer qumica clnica (pacientes con terapia
anticoagulantes)

Heparina de Litio
Orden recomendado en la extraccin de muestras mltiples
Botella de Hemocultivo
Tubo con EDTA

Tubo sin anticoagulante

Tubo con gel separador

Tubo de coagulacin

VSG

Colores de los tubos

Conclusin
El conocimiento sobre los anticoagulantes es de suma importancia, ya que
podremos obtener el plasma requerido en las pruebas hematolgicas o bien el
suero que brinda informacin valiosa en las reas inmunolgicas y qumicas, lo
cual muestra el metabolismo y determina la concentracin de inmunocomplejos
que posee dicho paciente , y entre otras pruebas.
Para cada prueba antes de extraerla, se debe tener el conocimiento del tipo de
tubo que debe usarse al momento de su extraccin, ya que existen protocolos de
trabajo ya establecidos. Toda prueba que se realice merita una muestra acorde al
estudie que se est realizando. Todo analista clnico debe seguir el protocolo de
extraccin

con el fin de evitar la prdida de tiempo y de volver a puncionar

nuevamente al paciente.

Bibliografa

BD Vacutainer.

BD Diagnsticos Sistemas Preanalticos Catlogo de

productos para la recoleccin de muestra venosa, arterial y de orina.

Citado en: http://bd.com/mexico/vacutainer/pdfs/catalog.pdf

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Citado

http://www.enzifarma.pt/vac/catalogovacu.pdf
Tubos de Extraccin de Sangre, colorantes. EUROTUBE DeltaLab. Citado

en:

en:https://www.interempresas.net/FeriaVirtual/Catalogos_y_documentos/82

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Fernndez, Eduardo & Conde Anguita, Mara frica. Importancia del orden
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en:http://www.nureinvestigacion.es/OJS/index.php/nure/article/viewFile/549/
538