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PROYECTO DE TESIS
AISLAMIENTO Y SELECCIN DE LACTOBACILLUS SP PRODUCTOR
DE BACTERIOCINAS A PARTIR DE QUESO ELABORADO
ARTESANALMENTE PARA USO PROBITICO.
AUTOR:
Microbiologa
Pgina
UNAJMA - EPIA
1. PROYECTO DE INVESTIGACIN
I. GENERALIDADES:
1.
TTULO:
Aislamiento y seleccin de Lactobacillus sp Productor de Bacteriocinas
a partir de queso elaborado artesanalmente para uso probitico.
2.
AUTOR :
2.1 Nombre:
Crdova Ramrez Alex
Talaverano Rojas Abel
Guzman Poma Yori Yoon
Uchupe Ramirez Dennis
2.2 Carrera Profesional:Ingeniera agroindustrial.
3.
ASESORA:
3.1 Nombre: Blga. Luz Azucena Torres Garca.
4.
TIPO DE INVESTIGACIN
4.2. De acuerdo al fin que persigue:
Bsica
4.1 De acuerdo a la tcnica de contrastacin:
Descriptiva.
5.
RGIMEN DE INVESTIGACIN:
Libre.
6.
LOCALIDAD
INSTITUCIN
DONDE
SE
DESARROLLA
PROYECTO:
6.1 Localidad:
Santa Rosa Talavera Andahuaylas Apurmac Per.
Microbiologa
Pgina
EL
UNAJMA - EPIA
6.2 Institucin:
Universidad Nacional Jos Mara Arguedas
7.
CRONOGRAMA DE TRABAJO:
ETAPAS
Fecha
Dedicacin
Trmino
Horas semanales
08/08/2014
3hrs
Fecha Inicio
Recoleccin de datos
01/04/2014
Anlisis de resultados
05/04/2014
08/08/2014
2hrs
Elaboracin de informe
05/04/2014
08/08/2014
2hrs
8.
RECURSOS
8.1 Recursos disponibles:
8.1.1 Personal:
3.2 Profesional: Blga. Luz Azucena Torres Garca.
8.1.2 Bienes:
Materiales para el aislamiento de Lactobacillus sp
(materiales
de
vidrio,
plstico,
equipos,
materia
prima,
reactivos)
Materia prima
Queso
Materiales de vidrio
Placa petri
cantidad
2 unidades
cantidad
5 unidades
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descripcin
Queso artesanal
descripcin
De marca SCHOT
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Mechero
Vaso de licuadora.
Vasos precipitados
Materiales de metal
Cuchillo
Azas bacteriolgicas.
2 unidades
1 unidades
2 unidades
cantidad
2
2
DURAN
De ron de quemar
De 1 litro
De 100 ml
descripcin
Marca facusa
Con terminal de aro y en
cantidad
2
cantidad
1
1
escuadra
descripcin
De tamao mediano
descripcin
Separacin de la muestra
Para Incubacin de la
Materiales de plstico
Lavatorios.
Equipos
Centrifugadora.
Incubadora.
Reactivos y otros.
Caldo MRS.
muestra
descripcin
Medio de cultivo
cantidad
125g del envase
Alcohol
Algodn.
especifico.
Alcohol de 96
Industrial
25ml
100g
8.1.3 Local:
Laboratorio
de
la
escuela
profesional
de
ingeniera
agroindustrial.
PLAN DE INVESTIGACION:
1. REALIDAD PROBLEMTICA:
Las bacterias cido lcticas se utilizan desde hace aproximadamente 4 mil
aos en la elaboracin de alimentos. Comprenden un grupo de bacterias
benignas que como producto final de su fermentacin tienen al cido
lctico. Se
han
identificado
diversas
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tipos
de
bacterias
en
las
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fermentaciones
acido
lcticas, en
las
que
destaca el gnero
tienen
movimiento), de metabolismo
por la
adsorcin
origen
receptores
de
define
bacteriano,
membrana
son
las
siguientes:
naturaleza,
tamao
molecular,
salud humana y animal, por tal motivo estas bacterias pueden ser usadas
en la conservacin de ciertos alimentos usando las bacteriocinas como
antimicrobianos, los cuales
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varias
caractersticas
ventajas
que
las hacen
particularmente
productoras
aisladas
frescos
de
quesos
de
bacteriocinas
artesanales.
Las
cepas
Listeria
(Gonzales,1994).
El Sedano e n el a o 2006,
sp
utilizada como
cepa indicadora
1.2. Justificacin:
Las bacteriocinas, por ser sustancias antagnicas (antimicrobianos que
inhiben el daos de las bacterias) ayudan en las dietas no digeribles y
brindan un buen estado de salud. Se pueden utilizar tambin como
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aslar y se
seleccionar
Lactobacillus
sp. Productor de
3.
HIPTESIS:
Implcita.
4. OBJETIVOS:
4.1. Generales:
Aislar y seleccionar Lactobacillus sp. Productor de bacteriosinas a
partir de queso elaborado artesanalmente para uso probitico.
5. DISEO DE CONTRASTACIN
5.1
Material de estudio:
Queso:
Se recolectaron quince muestras de quesos artesanales elaborados
en Sanmiguel de Llimpe perteneciente a la provincia de Chincheros ,
los cuales lo compramos en la feria dominical de Chincheros.
Las muestras fueron procesadas en el Laboratorio de qumica de la
EPIA. De cada queso se tomar una porcin de aproximadamente
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Tcnicas:
5.2.1. Tcnica para el aislamiento de Lactobacillus sp. productores de
bacteriocinas para uso probitico.
A. PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA:
De cada porcin de queso, realizar dos cortes radiales desde
el centro del queso usando un cuchillo estril.
Tomar de cada muestra,
25 g de
queso
se
B. OBTENCIN DE BACTERIOCINAS:
Despus del tiempo de incubacin, se seleccionara 5
colonias al azar de cada placa.
Anotar las caractersticas morfolgicas de las colonias
como: color, tamao (mm), aspecto y forma.
usando
una
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bacteriocinas
las
pruebas
de caracterizacin
fisicoqumica.
Neutralizar el sobrenadante con NaOH 2.5N hasta llegar a un
pH de 6.5 para descartar que la accin inhibitoria se deba a
cidos orgnicos.
En placas petri estriles colocar 1 ml de inculo de la cepa
indicadora y agregar 20 ml de agar Meller Hinton, licuado a
menos de 50C y luego homogeniz el inculo con el agar.
D. EFECTO DE TEMPERATURA DE CONSERVACIN:
Los sobrenadantes con actividad antibacteriana se deben incubar a 4
C, 15 C y 32 C por 30 das.
Despus del periodo de incubacin, se determinar la actividad
antibacteriana de los sobrenadantes tratados
Para la temperatura de 4 C usar una refrigeradora y para las
temperaturas de 15 C y 32 C usar estufas graduadas a las
temperaturas indicadas.
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6.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
Ratto M.
Control
microbiolgico
lcteos:
Mtodos recomendados.
de
leches
productos
Detection,
bacteriocin
strain
of
dairy
produced
origin.
by
Lactobacillus plantarum
Applied
and
Environmental
Microbiology 1994.
Sedano J. Seleccin de cepas nativas de Lactobacillus
con actividad inhibitoria y tolerantes al etanol aisladas de
masato (Tesis Licenciatura). Lima, Universidad Nacional
Mayor de San Marcos; 2006.
http://www.ugr.es/~anpenet/metodologia.html.
"Queso." Microsoft Encarta 2009.
Zamorano 2002, extrdo de :
zamo-oti-02.zamorano.edu/.../getFicha.asp?...
biblioteca.universia, extrado de:
net/ficha.do?id=44756650
7.
ANEXOS:
Colonias de bacillus sp.
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