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RESUMEN
ABSTRACT
INTRODUCCIN
El tubo digestivo es un rgano especializado que
se extiende desde los labios hasta el ano y representa el rea ms grande de contacto del organismo
con el ambiente externo (1,2).
La mucosa intestinal separa al ser humano de las
bacterias que se encuentran en la luz intestinal en nmero 10 veces mayor que todas las clulas eucariotas
que existen en sus tejidos. Se estima que el organismo
contiene alrededor de 1.014 clulas, de las cuales slo el 10% son de mamfero; por lo tanto, el 90% de
nuestro cuerpo est constituido por bacterias. A este
conjunto de microorganismos que habitan el intestino
se le conoce como microflora, microbiota intestinal o
simplemente como microbiota (1,3-8).
Se define a la microbiota intestinal como un ecosistema abierto que comprende una amplia variedad
de poblaciones microbianas metablicamente activas que coexisten en una regin espacio temporal
definida y que juegan un importante papel en la salud del husped. Estas bacterias en conjunto pueden ser consideradas como un rgano metablico
del cuerpo que, adems, tiene las propiedades de
ser adaptable y rpidamente renovable (2,3,9).
El intestino humano aloja entre 300 y 500 especies de bacterias cultivables pertenecientes a ms de
190 gneros, aunque el 99% de la poblacin total
est representada por tan slo de 30 a 40 de estas
especies (1,2,5,10,11).
En el tracto intestinal se han descrito al menos cuatro diferentes tipos de hbitat: a) el lumen intestinal; b)
el gel o placa de moco que recubre el epitelio en toda
su extensin; c) las capas profundas de moco encontradas en las criptas intestinales; y d) la superficie de
las clulas epiteliales mucosas. En estos sitios radican
bacterias, o se encuentran en trnsito, y aunque siem37
Boca
Peptostreptococcus
Fusobacterium
Bacteroides
Duodeno
103- 104 CFU/ml
Streptococcus
Staphylococcus
Lactobacillus
Estmago
<103 CFU/ml
Streptococcus
Staphylococcus
Lactobacillus
Algunos hongos
leon
106- 1010 CFU/ml
Coliformes
Bacteroides
Bifidobacterium
Clostridium
TABLA I
FACTORES QUE AFECTAN A LA MICROBIOTA
INTESTINAL
ped directa o indirectamente influye sobre la microbiota que habita su intestino, sta tambin tiene un
impacto importante sobre el organismo que la aloja
y estos efectos puede ser beneficiosos o perjudiciales
para la salud del individuo (5), razn por la cual es
necesario conocer estas interacciones para fomentar
el crecimiento de las especies bacterianas que sean
beneficiosas para el ser humano.
El objetivo de esta revisin es dar a conocer algunos
aspectos de la colonizacin, composicin, funciones y
recambio de la microbiota intestinal del nio y los efectos que sobre estos aspectos tienen los componentes
de la dieta ingerida en etapas tempranas de la vida.
COMPOSICIN DE LA MICROBIOTA EN
EL TUBO DIGESTIVO
Colon
1011- 1012 CFU/ml
Bacteroides. Bifidobacterium
Clostridium. Enterococcus
Fig. 1. Microorganismos del sistema gastrointestinal. Modificado de Young y cols. J Pediatr Health Care 2003; 17: 27783.
38
Cavidad bucal
Debido al pH ms o menos alcalino de la boca, la
microbiota es diversa y se estima que existen aproximadamente 500 especies diferentes. La microbiota
encontrada difiere en cada sitio anatmico y su composicin est altamente relacionada con el estado
clnico de las encas y los dientes, por lo que en una
boca sana existen principalmente especies anaerobias Gram (+); en los huecos gingivales se encuentra
una alta proporcin de bacterias anaerobias facultativas Gram (+) (Prevotella spp, Veillonella spp y
Fusobacterioum spp) y en la regin supragingival se
hallan sobre todo bacterias anaerobias facultativas
Gram (+) (Streptococcus spp y Actinomyces spp)
(1011 UFC/g de contenido). En las enfermedades periodontales la microbiota est integrada principalmente por especies Gram (-) anaerobias estrictas.
La lengua es reservorio de especies anaerobias
obligadas y aunque las bacterias no crecen en la saliva, s estn presentes en ella en altas concentraciones (ms de 108 UMF/mL) y la utilizan como medio
de transporte para dirigirse a otros lugares del tracto
digestivo (10).
Estmago y duodeno
La mayora de las bacterias deglutidas no sobreviven en el estmago porque el jugo gstrico es extremadamente cido (2,5 a 3,5) y generalmente est libre de bacterias, no obstante inmediatamente
despus de las comidas el pH aumenta y el recuento
microbiano aumenta hasta 105 UFC/mL con un
descenso posterior a 103 UFC/mL.
Las bacterias que sobreviven al estmago son especies cido-tolerantes e incluyen Gram (-) (Estreptococcus, Lactobacilos y levaduras) y Helicobacter pylori
(10). Debido a lo agresivo de los lquidos intestinales y
el tiempo corto de trnsito, es difcil la colonizacin
estable de las bacterias en el lumen con lo que el duodeno tambin representa un ambiente hostil y contiene un nmero relativamente bajo de microbios meramente de trnsito (103 a 104 UFC/mL) (2,6).
Intestino delgado
Desde el duodeno hacia abajo, la composicin de
la microbiota se conoce poco debido a las dificultades inherentes a la toma de muestras en sujetos sanos, pero dado lo agresivo del medio la microbiota
es escasa y contiene usualmente menos de 105 UFC
por mL. En el intestino delgado proximal, adems
de las especies encontradas en el estmago se aislan
tambin Haemophilus sp, Actinomyces sp, algunos
anaerobios (Veillonella sp y Bacteroides sp) y can-
tidades considerables de lactobacilos, debido al epitelio escamoso estratificado de esta zona y a la capacidad de adhesin de estas bacterias (1).
En el yeyuno e leon existe un incremento continuo
en el nmero (>108/g) y variedad de la microbiota con
lo que, adems de las bacterias cido lcticas, aparecen un nmero considerable de bifidobacterias, grupos
de anaerobios facultativos (Bateroides y Fusobacterium) y los anaerobios estrictos estn presentes en nmero creciente a partir de la vlvula ileocecal (2).
La microbiota en la parte distal del intestino delgado es mucho ms densa (>109 UFC/mL) y se asemeja a la del ciego con gran cantidad de bacterias
anaerobias obligadas y es considerada una zona de
transicin (1,5,10).
Colon y recto
El intestino grueso es considerado el lugar primario de la colonizacin bacteriana y tiene la ms alta
densidad y diversidad de microbios en el cuerpo humano. El estudio de su composicin se realiza en las
heces ya que parece ser que la microbiota que se encuentra en las mismas es muy semejante a la del colon y recto (10). Se han comunicado recuentos totales de 1010 a 1012 UFC/ g de heces y una gran
proporcin de la masa fecal (60% de los slidos) est constituida por bacterias.
No obstante, la verdadera extensin de la microbiota del colon no es conocida debido a que muchos
microorganismos no pueden ser cultivados (5). As
se estima que existen entre 400 y 500 gneros y especies bacterianas en el colon, donde los anaerobios
predominan sobre los aerobios en una razn de
100: 1.000 (6,10,12) y se ha establecido que en los
adultos los Bacteroides son las especies ms comunes (1011), seguidos por microorganismos Gram (+)
no esporulados (109 a 1010) como Eubacterium,
Lactobacillus, cocos anaerobios (Peptostreptococcus, Ruminococcus, Coprococcus, Veillonella,
Acidaminococcus y Streptococcus), y el gnero
Clostridium (107-108 UFC/g).
En el intestino grueso son comunes los microorganismos anaerobios facultativos (Streptococcus y Enterococcus) as mismo, Escherichia coli es la bacteria
anaerobia facultativa Gram (-), la (108/g de heces) que
ms se aisla; otros microorganismos Gram (-) como
Klebsiella pneumoniae y Enterobacter cloacae tienen recuentos menores. Diversos bacilos, Staphilococcus aureus y Candida albicans se aislan en una
concentracin de 105/g de heces (10).
Los pocos estudios realizados en relacin con la
composicin de la microbiota asociada a la mucosa del
colon sugieren que las poblaciones epiteliales son similares a las del lumen aunque en cantidades menores
(106-1010). Las eubacterias, bifidobacterias (B vulgatus,
39
TABLA II
EFECTO DE LOS NUTRIENTES SOBRE LA MICROBIOTA INTESTINAL
Nutrimento
Protenas y aminocidos
Leche humana
Productos hidrolticos de casena
Glicoprotenas
Nitrgeno (proteico y no proteico)
IgAS
Lisozima
Protenas de otros alimentos
Histidina, metionina, valina, isoleucina, prolina y leucina
Nucletidos
Hidratos de carbono
Celulosa, xilano y pectina
Fructooligosacridos
Oligofructuosa, inulina y lactilol
Oligosacridos de leche humana
Maltodextrinas
Fibra diettica
Lpidos
Grasas saturadas y colesterol
Ganglisidos
Minerales
Calcio y fsforo
Hierro: lactoferrina
IMPORTANCIA Y FUNCIONES DE LA
MICROBIOTA INTESTINAL
Se conoce como microbiota normal a todas aquellas especies de microorganismos que se encuentran
en el intestino de individuos sanos y que poseen una
o varias funciones que pueden ser beneficiosas o
perjudiciales para la salud del husped (8). Estas funciones se dividen en metablicas, trficas y de proteccin (5,8).
42
los distintos tipos celulares de la mucosa y la inmunorregulacin sistmica (6). La maduracin ulterior
del GALT requiere de estmulos constantes de bacterias de la microbiota intestinal y numerosos estudios
han mostrado que la supresin o inadecuacin de tales estmulos conduce a una disminucin de la superficie intestinal, alteracin de los patrones enzimticos de la mucosa, defectos en la barrera no inmune
del intestino, capacidad reducida de la respuesta inflamatoria, un sistema defectuoso de IgAs, abrogacin de la tolerancia oral y falta de respuesta a los
antgenos no patgenos previamente encontrados
en las superficies mucosas (1,30). La respuesta inmune a los microbios tiene componentes innatos y
adaptativos; el sistema inmune innato discrimina entre patgenos potenciales y bacterias comensales
mediante el uso de receptores preformados (6). El
GALT responde de dos formas a los antgenos que
llegan al intestino: una positiva (inmunidad contra
organismos patgenos) y otra negativa (a gran cantidad de antgenos alimentarios y de bacterias en el
ambiente mucoso).
La tolerancia a una gran cantidad de antgenos previene al sistema inmune de una respuesta inmune excesiva. Algunos productos de la pared celular bacteriana [el peptidoglicano de las bacterias Gram (+) y
Gram (-) y el lipopolisacrido de las Gram (-)] activan
la inmunidad no especfica y pequeas cantidades de
estos compuestos, adems de una secuencia especfica de DNA bacteriano (CpG), se liberan continuamente en la luz intestinal y parece ser que son importantes
para el mantenimiento, desarrollo, funcin y adquisicin de tolerancia inmune (13,21,27,31).
La microbiota es necesaria para la induccin de tolerancia a los antgenos, lo cual se ha comprobado con
experimentos en ratones gnotobiticos en los cuales la
tolerancia oral slo se obtiene cuando la microbiota intestinal es reconstituida con bifidobacterias durante el
periodo neonatal (31). Cuando el balance establecido
por la microbiota se rompe, se produce la enfermedad
que en el intestino se manifiesta como diarrea y a nivel
sistmico como atopia y asma.
Enfermedad diarreica: las infecciones gastrointestinales generalmente son producidas por virus y bacterias como Escherichia coli, Campilobacter sp, Staphylococcus aureus, Clostridium
perfringens, Salmonella sp, Shigella sp, Listeria
sp, Yersinia y algunos protozoarios, aunque tambin puede ser ocasionadas por oportunistas como
Candida albicans o Clostridium difficile (10).
Algunas cepas bacterianas del intestino, sobre todo los lactobacilos, previenen la aparicin o disminuyen la duracin del cuadro diarreico, sobre todo
cuando es producido por rotavirus ya que estabilizan
la mucosa intestinal, aumentan la actividad fagoctica y reducen la excresin fecal de virus (6,18,32).
La administracin de lactobacilos previene o mejora
el cuadro diarreico, lo que prueba que son unos de
los encargados de evitar la colonizacin por patgenos.
SECUENCIA DE LA COLONIZACIN
BACTERIANA EN EL INTESTINO DEL NIO
Colonizacin inicial
El feto humano y el recin nacido se consideran libres de bacterias (1,5,10). Sin embargo, se encuentran
pequeas cantidades de microorganismos inmediatamente despus del nacimiento (5 x 104 a 5 x 105) y las
bacterias ms frecuentemente aisladas son Staphylococcus, Streptococcus, Propionibacterium y Corynebacterium. Cuando las membranas amniticas se
rompen, las bacterias de la microbiota intestinal y
vaginal materna tambin pueden aislarse (31). Bajo
circunstancias normales, la colonizacin inicial del
intestino del nio ocurre durante el parto al ponerse
en contacto con la microbiota vaginal de su madre y
posteriormente por el contacto con la microbiota
normal de sus padres. Esto lleva a la inoculacin con
bifidobacterias, enterobacterias, bacteroides, Clostridium y cocos Gram positivos (41).
Un hallazgo constante es que todos los nios son
inicialmente colonizados por E. coli y Streptococcus que a veces alcanzan cifras de 108 a 1010 UFC/g
de heces, por lo que se ha propuesto que son las
responsables de la creacin de un ambiente favorable para el establecimiento de los anaerobios de los
gneros bifidobacterium, bacteroides y clostridium
entre los 4 y 7 das de vida (1). As mismo, el tipo de
nacimiento tiene un efecto significativo en el desarrollo de la microbiota intestinal.
Nacimiento vaginal: normalmente la colonizacin se inicia durante el parto por exposicin a la
microbiota de la madre; a esta forma de adquisicin
microbiana se le conoce como transmisin vertical y
a las posteriores como transmisin horizontal (11).
Con el largo proceso del nacimiento por va vaginal se hace ms viable el aislamiento de microbios
en el estmago y la boca del beb. De hecho inmediatamente despus del nacimiento, es posible aislar
de la nasofaringe del 62% de los recin nacidos,
bacterias que fueron aisladas en la vagina de sus madres antes del inicio del parto, y los microorganismos encontrados en el contenido gstrico del neonato entre los 5 y 10 minutos posteriores al
nacimiento, son similares a los aislados en el crvix
de la madre antes del parto (1, 21).
Se han encontrado ms de 18 grupos diferentes
de bacterias en el tracto gastrointestinal inferior de
la mujer embarazada y esas son las principales bacterias a las que est expuesto el recin nacido, siendo la E. coli y el Strepcococcus las que con frecuencia se aislan del tracto digestivo del nio (1).
En los neonatos las bacterias aparecen en las heces durante el primer da de vida, siendo las prime-
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DIVERSIDAD DE LA MICROBIOTA EN
FUNCIN DE LA DIETA
La colonizacin se inicia en el momento del nacimiento y ocurre en pocos das. El tipo de nacimiento (cesrea o parto) y la dieta (pecho o frmula) pueden afectar el patrn de colonizacin (41,49) y entre
los factores involucrados en la colonizacin bacteriana, el tipo de leche juega un factor de primer orden
(10).
12
UCF/g de heces
10
8
Gram (+)
Escherichia coli
4
2
Bifidobacterias
Bacteroides
Lactobacilos
Clostridium
0
Al nacer
1 semana
1 mes
1 ao
2 aos
Edad
Fig. 2. Evolucin de la microbiota en funcin del tiempo.
COMPONENTES ESPECFICOS DE LA
DIETA Y CRECIMIENTO DE LA
MICROBIOTA INTESTINAL
Protenas y aminocidos
Se ha encontrado que varios de los componentes
de la leche humana estimulan el crecimiento de Bifidobacterium, entre ellos destacan los productos hidrolticos de la casena, las glicoprotenas del suero,
el nitrgeno (proteco y no proteco) y la lisozima,
que adems fija los peptidoglicanos de las paredes
celulares de las bacterias y, aunque no produce lisis
de los microorganismos, si potencializa la accin de
los anticuerpos especficos contra estas bacterias.
De la misma manera, la IgAs tiene un efecto antiad45
hesivo contra E. coli (16), Vibrio cholerae, Streptococcus pneumoniae, Salmonella y otras bacterias
(51). Las protenas de la dieta pueden incrementar el
nmero de Clostridium, bacteroides y ciertas fusobacterias (24).
En animales de experimentacin se ha observado
que ms que el origen de la protena dietaria, lo que
influye sobre la microbiota es la composicin total
de la dieta (52), aunque algunos compuestos como
el dipptido aspartato-lisina en unin con el cobre
inhiben la colonizacin por Clostridium perenne
(17). Tambin se ha encontrado que algunos aminocidos (histidina, metionina, valina, isoleucina, prolina y leucina) en concentraciones altas juegan un papel importante en el crecimiento y produccin de
toxinas de varias cepas de Clostridium (26).
Nucletidos: tienen un papel importante en el
funcionamiento normal del intestino, actuando como fuentes de energa en el metabolismo celular
(53). En la leche humana existen al menos 13 nucletidos y se ha sugerido que son cofactores potenciales
para el crecimiento selectivo de bifodobacterias, a
pesar de que su adicin a las frmulas infantiles no
produce un crecimiento de estas bacterias que se
asemeje al de los nios alimentados al pecho. En las
heces de los nios alimentados al seno materno
existe mayor cantidad de bifidobacterias y menor de
lactobacilos y bacteroides que en los alimentados
con frmula lctea. Sin embargo, en las heces de los
lactantes alimentados con frmulas suplementadas
con nucletidos se encuentan valores intermedios en
los recuentos de las bacterias anteriormente mencionadas, aunque ms cercanos a los de aquellos alimentados al pecho; la bacteria ms estimulada en su
crecimiento fue Bifidobacterium adolescentis. Por
ltimo, los nucletidos tambin favorecen la absorcin de hierro e inhiben el crecimiento de algunas
enterobacterias (16).
parte mediante la adopcin de una microbiota intestinal que tiene la propiedad de degradar esas molculas (5). Los hidratos de carbono no digeribles modifican selectivamente la microbiota colnica, estos
efectos han sido demostrados con los fructooligosacridos, que tienen un efecto bifidognico. Otros hidratos de carbono que estimulan el crecimiento de
Bifidobacterium y a la vez mantienen bajas las poblaciones de bacterias potencialmente patgenas (E.
coli y Clostridium) son la oligofructuosa, la inulina y
el lactilol oligosacrido (9,54,55). En perros alimentados con manoligosacridos se aislaron en heces
mayores cantidades de lactobacilos y menores de
anaerobios fecales (56).
Los oligosacridos de la leche humana son inhibidores potentes de la adhesin bacteriana a las superficies epiteliales y las maltodextrinas favorecen el
crecimiento de los enterococos (53). En la leche materna se encuentra una cantidad importante de lactosa que probablemente tenga influencia en el crecimiento de algunos tipos de bacterias, ya que se
absorbe ms lentamente que la lactosa y permite
una mayor fermentacin (16).
La oligofructuosa favorece el crecimiento de las
bifidobacterias, disminuye el de E. coli, Clostridium
perfringens y Clostridium ramnosus en el intestino
de animales gnotobiticos a los que se les administr
microbiota fecal de nios (57). De la misma forma,
algunos componentes de la fibra diettica (goma
arbiga y xilooligosacridos) favorecen el crecimiento de los anaerobios totales y Clostridium; adems,
los fructooligosacridos promueven el crecimiento
de bacterias acidognicas con lo que contribuyen a
la prevencin del crecimiento de Clostridium difficile y a la elaboracin de sus toxinas (24,26).
Lpidos
Hidratos de carbono
La fuente principal de carbono y energa para las
bacterias intestinales son los hidratos de carbono,
junto con pptidos y otras sustancias de bajo peso
molecular que escapan a la digestin y absorcin en
el intestino delgado (13). Los hidratos de carbono
que no son absorbidos ni digeridos en el tracto gastrointestinal superior llegan al colon y son utilizados
por las bifidobacterias residentes (9).
Los hidratos de carbono no absorbibles son metabolizados por las bacterias colnicas en cidos grasos de cadena corta que son rpidamente absorbidos. Entre estos hidratos de carbono no digeridos se
incluyen los polisacridos componentes de clulas
vegetales (celulosa, xilano y pectina), as como almidn no digerido. El problema del husped de obtener beneficio de esos polisacridos se resuelve en
46
Minerales
Calcio y fsforo: producen un efecto trfico
en la microbiota que protege en contra de la infeccin por Salmonella por incremento de la resistencia a la colonizacin y la traslocacin. El calcio tambin estimula la fermentacin por la microbiota
intestinal e incrementa junto con la lactulosa la toxicidad luminal para la Salmonella (16).
Hierro: la lactoferrina reduce la disponibilidad
de Fe y disminuye la proliferacin bacteriana. El sulfato ferroso de la dieta es oxidado a sulfato frrico
que posteriormente puede ser quelado por la lactoferrina y no estar disponible para el crecimiento
bacteriano. Se encontr que los nios alimentados
con frmulas enriquecidas con hierro presentaban
recuentos ms altos de E. coli en las heces y que la
adicin de este microelemento tiene poco efecto sobre el crecimiento de bifidobacterias y no parece
afectar en forma significativa el ecosistema intestinal
en etapas tempranas de la vida. La lactoferrina tiene
un efecto bacteriosttico sobre el crecimiento de E.
coli en medios deficientes de hierro, que es potenciado por la presencia de inmunoglobulinas, y existe
evidencia de que la suplementacin con lactoferrina
es efectiva para el control de algunas cepas de Clostridium (16,25).
De la misma manera, en ratones gnotobiticos
inoculados con microbiota de nios alimentados al
pecho, con leche de vaca o frmula con protenas
del suero, se encontr que, cuando se les adicion
lactoferrina, en los alimentados con la dieta de protenas sricas se incrementaron las cantidades de bifidobacterium, bacteroides, enterococcus y anaerobios totales (25). Se ha observado que la
administracin oral de lactoferrina bovina produce
un efecto bacteriosttico sobre varias cepas de Clostridium (C. ramnosus, C. paraputrificum y C. perfringens) (25)
CORRESPONDENCIA:
ngel Gil Hernndez
Departamento de Bioqumica y Biologa Molecular
Facultad de Farmacia
Campus de Cartuja
18071 Granada
Tel.: 958 243 838
Fax: 958 248 960
e-mail agil@ugr.es
BIBLIOGRAFA
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
47
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
37.
38.
39.
40.
48
41.
42.
43.
44.
45.
46.
47.
48.
49.
50.
51.
52.
53.
54.
55.
56.
57.
58.