CULTIVO IN VITRO DEL TEJIDO VEGETAL

DEL EMBRION DEL FRIJOL

PRESENTADO POR:
Jonathan F. Ochoa Bedoya.
Jeison A. Ziga Pineda.
Brandon Ziga Pineda.
Carlos Ortegn Vergel.
Jorge Castaeda.

PRESENTADO A:
Fabio Morales.
Andrs Sosa.
Dianit Lemus.
Edison Correa.

CURSO:
11-01.

FECHA:
09-11-2011.

INSTITUCION EDUCATIVA DISTRITAL LA AURORA.

PENSAMIENTO EMPRENDEDOR HACIA LA GESTION SOCIAL.

CULTIVO IN VITRO DEL TEJIDO VEGETAL

DEL EMBRION DEL FRIJOL

El frijol comn es uno de los cultivos de mayor importancia econmica y

alimenticia de los seres humanos. Es la principal fuente de protena, hierro y
fibra en la dieta de las personas, la produccin del frijol se enfrenta a varias
limitaciones, tales como enfermedades causadas por hongos, bacterias y virus,
ataque de insectos, deficiencias nutricionales y la prdida de tolerancia a
sequas. Para tratar de solucionar estos problemas, es indispensable buscar
alternativas que permitan el mejoramiento de las variedades existentes por
tcnicas biotecnolgicas. Para tales efectos, es importante desarrollar un
sistema eficiente de cultivo in vitro que permita la regeneracin de plantas del
embrin del frijol, para esto tenemos en cuenta a los diversos mtodos de
cultivo in vitro. Muy pocos grupos en el mundo han logrado desarrollar
procedimientos exitosos de regeneracin de plantas para este cultivo. As
mismo, a pesar del gran nmero de investigaciones sobre la regeneracin de
plantas in vitro, con mtodos de la embriognesis u organognesis, en
numerosas especies vegetales, adems, este estudio busca optimizar el proceso
de organognesis y regeneracin de plantas del frijol. Esa informacin es muy
importante, pues se desconoce la respuesta de las variedades del frijol comn
que se cultivan, a la aplicacin de tcnicas de cultivo de tejidos. Estas tcnicas
pueden ser de gran utilidad para complementar programas de mejoramiento y
de conocimiento.

PREGUNTA-PROBLEMA

Nuestra pregunta problema es:

Cmo conocer las variedades del cultivo in vitro de tejido vegetal del
embrin del frijol y como incrementar con una forma factible la micro
propagacin de las plantas del frijol para as determinar su estructura?

RESUMEN

El frijol es uno de los granos de mayor importancia en la dieta alimenticia de

la poblacin en general, especialmente la de escasos recursos econmicos, y
nos brinda unas protenas muy importantes para nuestro crecimiento. El
presente proyecto se realiz dentro de un programa de investigaciones y de
realizaciones de cultivos. Se tuvo como objeto de estudio la variabilidad
gentica del frijol, con el fin de seleccionar, caracterizar y conservar los
genotipos que presenten la capacidad de regenerar plantas in vitro del embrin
del frijol. El desarrollo se realizo en tres etapas:
La primera la investigacin de todo lo relacionado con los cultivos in vitro.
La segunda fue la realizacin de diferentes cultivos para tener en cuenta
diferentes resultados.
La tercera fue la revisin de los diferentes cultivos para observar cual sali
mejor y escoger los dos mejores para poder tomar similitudes y diferencias de
los dos cultivos.
En los resultados encontramos que los dos cultivos escogidos fueron muy
buenos, que la micro propagacin de estos cultivos fueron excelentes y que
poco a poco pudimos ir descubriendo muchas formas de regeneracin de
plantas en un cultivo in vitro.
Pero se hace necesario continuar con los estudios ya que estos procedimientos
no estn descubiertos en su totalidad y as podramos optimizar los resultados.

ABSTRACT

Beans are one of the most important grains in the diet of the general
population, especially low-income, and give us a very good protein.
This project was conducted within a research program and accomplishments.
The aim was to study the genetic variability of bean, to select, characterize
and conserve the genotypes showing the ability to regenerate plants in vitro
embryo of the bean.
The development was done in three stages:
The first investigation of all matters relating to in vitro cultures.
The second was the realization of different crops to account for different
results.
The third was to review the different cultures that came to look better and
chose the top two in order to make differences and similarities of them.
The results found that the two selected crops were very good, that the micro
propagation of these crops was very good and little by little we can discover
many things that do not know about these crops of beans embryo.
But it is necessary to continue studies as these procedures are not discovered
all and to optimize the results.

OBJETIVO GENERAL

Nuestro objetivo general es que todos los interesados en implementar las

diversas tcnicas de un laboratorio de cultivo in vitro de tejido vegetal, lo
obtengamos a partir de explantes para la multiplicacin de las plantas y
observacin de su mtodo, encontrando mtodos con dichas herramientas para
manipular los tejidos del embrin del frijol y as realizar el cultivo propuesto.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Nuestros objetivos especficos son:

1. Tener conocimiento de los cultivos in vitro de tejidos vegetales del
embrin del frijol.
2. Profundizarnos con los factores de los cultivos in vitro de tejidos
vegetales del embrin del frijol.
3. Aplicar nuestro conocimiento y aprendizaje dentro de los cultivos in
vitro de tejidos vegetales del embrin del frijol.
4. Aplicar la transformacin de plantas para as tomar como prueba el
cultivo in vitro de tejidos vegetales del embrin del frijol.

HIPOTESIS

El cultivo in vitro de tejido vegetal del embrin del frijol es una alternativa
que buscamos que sea viable y eficaz para contribuir con la regeneracin y
conservacin de plantas del frijol, en general de todas las plantas debido a su
bajo potencial. Y dar a conocer las diferentes formas de cultivos para observar
sus factores.

JUSTIFICACION

De acuerdo a los esfuerzos que llevamos a cabo para establecer este

proyecto y sus conservaciones del cultivo in vitro del tejido vegetal del
embrin del frijol, no se ha logrado establecer las causas, los problemas o las
consecuencias de este, debido a esto nace la necesidad de llevar a
cabo estrategias que busquen encontrar de alguna manera la variedad de
tejidos y clulas de la micro propagacin de clulas del embrin del frijol.
Son muy pocas las investigaciones que hemos realizado para encontrar
resultados sobre esta micro propagacin.
Las ventajas que ofrecen las
tcnicas de cultivo in vitro del tejido vegetal del embrin del frijol contribuyen
con un conocimiento de este. Este trabajo lo que busca es establecer las
preguntas del cultivo in vitro del tejido vegetal del embrin del frijol y su
germinacin con el objetivo de promover la micro propagacin masiva de los
tejidos, las bacterias y otras variedades de este cultivo.

MARCO TEORICO

El frijol comn es uno de los cultivos ms viejos del mundo, y el de mayor

consumo a nivel mundial, pertenece a la familia de las legumbres, se conocen
entre 5 especies de frijol: el frijol comn, frijol yearlong, frijol scarlet runner,
frijol terapia y el frijol Lima han sido domesticados, el frijol comn se
encuentra entre las especies ms cultivadas en el mundo, siendo la legumbre
ms importante, el frijol comn se consume como grano maduro, grano
inmaduro o como vegetal, la alta calidad nutricional de los frijoles en trminos
de porcentaje de protena es un importante complemento de los alimentos
almidonados, el alto contenido mineral, especialmente hierro y zinc, as como
fuente de fibra, cido flico, tiamina, magnesio y potasio, son de gran
importancia en regiones donde hay una alta prevalencia de deficiencias de
micronutrientes, la semilla del frijol contiene entre 20-25% de protena,
Contiene biotina la cual es un factor esencial para una variedad de carboxlicas
y descarboxilasas establecidas en diversas vas metablicas de todos los
organismos.
Caractersticas del frijol: El frijol es una planta anual, de crecimiento rpido,
el sistema radicular es poco profundo, est constituido por una raz principal y
gran nmero de races secundarias con elevado grado de ramificacin, el tallo
principal es herbceo, es el eje central de la planta, el cual est formado por
una sucesin de nudos y entrenudos; se origina del meristemo apical del
embrin de la semilla. Las primeras hojas son simples, las dems hojas son
compuestas, trifoliadas y su tamao cambia segn la variedad. La flor presenta
una coloracin que vara de blanco al color lila, segn la variedad, las
inflorescencias presentan de 4 a 8 flores por racimo, cuyos pednculos nacen
en las axilas de las hojas o en las terminales de algunos tallos. El fruto es una
legumbre de color, forma y dimensiones variables, en cuyo interior se
disponen 4-6 semillas.

Distribucin: El frijol se cultiva en gran diversidad de climas entre los 0 a

3000 m.s.n.m. y sus mayores rendimientos se obtienen en zonas donde la
temperatura promedio oscila entre los 15 y 27 C., temperaturas promedio
superiores a 27 C favorecen el desarrollo vegetativo, pero ocasionan el aborto
y desprendimiento de las flores, reduciendo el nmero de vainas y de semillas
por planta.
Origen del frijol: Existe duda sobre cul nombre debe darse a la especie
silvestre cercana, adems los fsiles de frijoles, estn mal representados en los
registros arqueolgicos, como resultado de los mtodos de recoleccin, pues
los agricultores de regiones como Mxico, arrancan las plantas con
crecimiento erecto o arbustivo del suelo cuando maduran y las desgranan en
estelas, por lo tanto, el principal recurso de evidencia disponible para el
anlisis de la distribucin y orgenes del frijol, comprende semillas y
fragmentos de semillas, las cuales pueden ser carbonizadas por la ausencia del
contacto con la humedad.
Cultivo in vitro de tejidos vegetales: Una amplia variedad de tcnicas de
cultivo de tejidos, manipulacin gentica y biologa molecular han sido
desarrolladas en varias especies de plantas, estas tcnicas han tenido profunda
repercusin en las prcticas agrcolas y en el mejoramiento de la calidad y
cantidad de alimentos y plantas cultivables de inters comercial. El cultivo de
tejidos consiste esencialmente en aislar una porcin de la planta (explante) y
obtener as clulas, tejidos u rganos, que se cultivan en condiciones aspticas,
en un medio de cultivo de composicin qumica definida y que se colocan en
condiciones ambientales controladas de luz, fotoperodo, temperatura y
humedad, adecuadas a la fisiologa de la planta. Se pueden obtener diferentes
respuestas dependiendo de la metodologa y de los medios de cultivo
utilizados. Estos van desde la formacin de tejidos organizados
(organognesis) hasta la obtencin de embriones somticos y clulas
embrionarias, el cultivo de tejidos vegetales es una tcnica que puede ser
aplicada para la obtencin y propagacin de plantas libres de patgenos; en
estudios de gentica, ingeniera gentica, fisiologa, biologa molecular,
fitopatologa, en la bioconversin y produccin de compuestos tiles; en el
incremento de la variabilidad gentica de los cultivos; en la conservacin e
intercambio de germoplasma; en la obtencin de mutantes y plantas haploides,

el cultivo in vitro de tejidos vegetales es una herramienta poderosa y verstil

para el estudio de problemas bsicos y para la solucin de problemas
aplicados en el campo de la biotecnologa agrcola del frijol.
Por qu el uso de la biotecnologa para el mejoramiento del frijol: Existe un
considerable inters mundial por el desarrollo de mtodos no convencionales
de mejoramiento gentico en la agricultura, tales como la modificacin
gentica, va transgnesis o por induccin de mutaciones por irradiacin o por
mtodos qumicos. El objetivo es generar plantas tolerantes a factores de
estrs bitico o abitico que no pueden ser obtenidas por mtodos
tradicionales, los cuales pueden utilizar solamente la variabilidad gentica
disponible en los recursos genticos primarios de la especie, tales como
variedades locales, o especies silvestres relacionadas y reproductivamente
compatibles con ella, el incremento de la produccin del frijol se ha debido
principalmente a la alta tasa de compuestos qumicos aplicados, a la
mecanizacin o prcticas de amelioracin. Los mtodos de produccin
tradicional llegan a ser limitados por el bajo potencial de recombinacin como
resultado de la autopolinizacin, la baja capacidad hereditaria de algunas
caractersticas importantes y al aborto de embriones en algunos hbridos nter
especficos. Para utilizar exitosamente la gran variedad de aplicaciones
biotecnolgicas disponibles en mejoramiento gentico, se requiere contar con
metodologas de regeneracin de plantas a partir de clulas somticas
generadas por cultivo in vitro. De otra manera, se obtendran plantas
modificadas genticamente, pero de naturaleza genticamente heterogneas.
La produccin de brotes y la regeneracin de plantas en el frijol bajo
condiciones de cultivo in vitro ha sido descrita por autores como Malik y
Saxena, sin embargo la frecuencia de brotes obtenidos es an limitada, 4-8
brotes por explante. Muy pocos laboratorios en el mundo, particularmente en
Brasil, han desarrollado procedimientos exitosos de cultivo in vitro y
regeneracin de plantas para variedades de frijol de origen andino.

QUE ES EL CULTIVO VEGETAL IN VITRO DEL EMBRION DEL

FRIJOL?

Es un mtodo de micro propagacin del frijol que se realiza en un laboratorio

a condiciones estriles muy mximas.
COMO SE HACE EL CULTIVO VEGETAL IN VITRO DEL EMBRION
DEL FRIJOL?
Este cultivo se hace tomando el embrin del frijol, ponindolo a cultivar en
un tubo de ensayo sobre un medio nutritivo, en condiciones controladas y
estriles con unos materiales especiales para este procedimiento.
PARA QUE SE HACE EL CULTIVO VEGETAL IN VITRO DEL
EMBRION DEL FRIJOL?
Se hace para conocer la conservacin de la planta del frijol y las variedades de
esta planta.
AVANCES:
Los avances los veremos en los resultados encontrados despus de hacer la
investigacin y la prctica del cultivo.

METODOLOGIA

Nuestra metodologa consisto en buscar la micro propagacin de la planta del

frijol partiendo desde el embrin del frijol para as buscar la multiplicacin de
esta planta siguiendo un proceso que se ha llevado a cabo hace mucho tiempo.
A continuacin les presentamos los pasos utilizados dentro de este proyecto.

MATERIALES:
Para realizar el cultivo de tejido vegetal del embrin del frijol nos dimos a la
necesidad de utilizar:
AUTOCLAVE: Aqu esterilizamos todo lo que utilizamos durante el proceso
del cultivo. Es como una olla a presin.
CAMARA DE FLUJO LAMINAR: Aqu manipulamos el embrin del frijol
ya que tiene un ambiente estril.
MEDIO DE CULTIVO: Aqu mantuvimos las protenas y el agua que le
aplicamos al embrin dentro de un tubo de ensayo.
PLANTA: El embrin del frijol lo extraemos de un frijol normal y lo dejamos
reposando unos das antes para que as le salga el embrin.
CAMARA DE CULTIVO: Este es un lugar en el cual mantuvimos el cultivo
del embrin del frijol a unas condiciones mximas.
BATA: Esta nos sirvi para realizar la prevencin de infectar el cultivo.
FUENTE DE CARBONO: Esta nos sirve para que nuestro cultivo coja
nutrientes.
VITAMINAS Y AMINOACIDOS: Estos nos sirvieron para que nuestro
cultivo tenga fuente de crecimiento.
AGENTE GELIFICANTE: Nos sirvi para que se endureciera nuestro
cultivo.
MACRO Y MICRO NUTRIENTES: Nos sirvi para que nuestro cultivo
mantuviera una forma de crecimiento normal dentro de estos van todas las
vitaminas necesarias.
AGUA: Es un nutriente necesario para nuestro cultivo.
MICROSCOPIO: Nos sirvi para observar nuestros cultivos.
BALANZA DE PRESICION: Nos sirvi para pesar los qumicos necesarios.

CONDICIONES EL CULTIVO:
En la cmara de flujo laminar no puede entrar ninguna pieza contaminada.
En la autoclave no podemos meter sustancias como medicamentos, vitaminas,
etc.
El vidrio que cubre el cultivo debe ser muy duro y grueso para que en no deje
meter ninguna clase de contaminacin.
Los ayudantes al crecimiento deben obligatorios ya que sin ellos no puede
crecer el medio de cultivo.
El pH debe ser entre 5 y 6.
Se necesita agar-agar obligatorio para endurecer el cultivo.
El cultivo debe llevar agua, azcar y reguladores de crecimiento.
Segn el medio de cultivo que sea puede tener diferente momento para
prepararse.
En la cmara de cultivo debemos aplicar diferentes grados de calor.

PROCESOS:
PRIMERA ETAPA
INVESTIGACION DEL CULTIVO DE TEJIDO VEGETAL IN VITRO: Lo
primero que realizamos fue investigar todo sobre los cultivos in vitro.
Dentro de ello encontramos tcnicas como; la micro propagacin, la
organognesis, la embriognesis, las suspensiones celulares, el cultivo de
anteras y polen y el cultivo de protoplastos entre otros. Despus de este paso
nos encargamos en conseguir los embriones del frijol e investigamos como los
obtendramos. As de igual forma obtuvimos factores de un cultivo vegetal in
vitro de un embrin de un frijol.
MICRO PROPAGACION: Este es el proceso de la multiplicacin de plantas
cultivadas y producidas vegetativamente a gran escala, producidas por la
reproduccin asexual.
ORGANOGENESIS: Este es el proceso de diferenciacin de rganos como
races, brotes o tallos y se forman directa o indirectamente a partir de otros
tejidos.
EMBRIOGENESIS: Este proceso es el que sucede despus de tener
embriones zigoticos y sexuales inmaduros los cuales inician la formacin del
embrin.
SUSPENCIONES CELULARES: Este proceso se utiliza en medios lquidos a
partir de tallos los cuales se dispersan.
CULTIVO DE ANTERAS Y POLEN: Este proceso es empleado para obtener
mutaciones de especies.
CULTIVO DE PROTOPLASTOS: Este proceso es empleado para obtener
unas mismas especies.
FASES DEL CULTIVO DE TEJIDO VEGETAL IN VITRO:
Se desinfecta el embrin en alcohol se flamea.

Se separa el embrin de la semilla del frijol.

Se introduce dentro del tubo.
A la primera semana se puede ir reconociendo la planta.
Se va dejando crecer y se va pasando por los procesos a seguir.
VENTAJAS DEL CULTIVO DE TEJIDO VEGETAL IN VITRO:
Permite obtener plantas libres de enfermedades hongos, bacterias, virus. La
micro propagacin vegetal nos permite propagar masivamente material
vegetal en cualquier poca del ao y en corto tiempo conservando su potencial
gentico y calidad sanitaria. Permite optimizar el uso de factores ambientales
y nutricionales. Facilita el cultivo de un gran nmero de plantas en una
superficie pequea. Puede conservar material biolgico por periodo de tiempo
prolongados. Adems mediante este mtodo de propagacin se puede incluir
aspectos de fito mejoramiento.
DESVENTAJAS DEL CULTIVO DE TEJIDO VEGETAL IN VITRO:
Requiere de personal especializado, requiere de infraestructura
equipamiento, los productos qumicos son de elevado costo.

SEGUNDA ETAPA

REALIZACION DEL CULTIVO: Lo segundo realizado fue empezar el

proceso del laboratorio.
La realizacin del laboratorio del cultivo se llevo a cabo en el laboratorio del
colegio la aurora y en laboratorio de la universidad nacional con la ayuda de
profesores especializados en el tema, el cual nos sirvieron de guas y a esto le
sumamos los aprovechamientos que tuvimos los aos pasados.
1. OBTENCION DEL EXPLANTE DEL EMBRION DEL FRIJOL:
Dejamos unos cuantos frijoles en agua por unos das a los cuales les
nace el embrin, obteniendo el embrin del frijol procedimos a
desinfectarlo con hipoclorito de sodio y alcohol reuniendo un setenta
por ciento (70%) de solucin antes de introducirlo al medio de cultivo
bajo unas condiciones de asepsia.
2. MEDIO DE CULTIVO DEL EMBRION DEL FRIJOL: El embrin fue
encubado a una temperatura de veinte cuatro grados centgrados (24)
para que fuera mantenido el embrin y no tuviera problemas de
climatizacin.
3. SUSTANCIAS UTILIZADAS EN EL EMBRION DEL FRIJOL:
Thiamina.
Vitaminas.
Sacarosa.
Agar Agar.
PH.
Adenina.
Macro elementos y Micro elementos.
Auxinas.
Cito quininas.
Geberelinas.
Azucares.
4. CLIMATIZACION DEL EMBRION DEL FRIJOL: El embrin lo
adaptamos a una condicin esterilizada para mantenerlo a una
temperatura variada entre veinte y venti cinco grados centgrados,(20 y
25).
5. MULTIPLICACION DE BROTES A PARTIR DEL EMBRION DEL
FRIJOL: En esta parte nos fue necesaria el azcar, los aminocidos y las
vitaminas para regular el crecimiento de nuestro cultivo y as el embrin
se esparciera alrededor del tubo.

6. ENRAIZAMIENTO DEL EMBRION DEL FRIJOL: Nos fue necesario

transferir el cultivo a un medio que contena reguladores especialmente
introducimos auxinas y as nuestros cultivos fueron madurando y
cogiendo su forma.
7. ENDURECIMIENTO DEL EMBRION DEL FRIJOL: Nos fue
necesario para que el cultivo nos quedara listo ya por ltimo en
condiciones hmedas y gelatinosas aumentamos un poco de agar agar y
quedo listo.
8. Por ltimo procedemos a observar su crecimiento y maduracin.

TERCERA ETAPA
REVISION DEL CULTIVO: Lo tercero que realizamos fue observar el
crecimiento y la transformacin que se obtuvieron de los cultivos:
Durante los primeros das el cultivo estuvo endurecido normalmente se fue y
le iban saliendo races por todos los lados del embrin.

A las dos semanas el cultivo ya tuvo sus primeros resultados ya se vea la

planta, as fue creciendo y reproducindose.
Observamos que dentro de los cultivos no hayamos tenido ninguna clase de
contaminacin ya que nos encontraremos en la necesidad de volver a repetir el
cultivo. Si hubiera contaminacin era grave y hay una reaccin que se llama
vitrificacin el cual la planta se ve como un vidrio, si esto pasar nos hubiera
tocado sacar los pedacitos buenos y volver a hacer un sub cultivo.
Para analizar nuestros cultivos del embrin del frijol observamos las
diferencias y las similitudes que tienen entre los dos y se examina todo el
cultivo y as observamos que alguno de los dos tuvo que salir mejor que el
otro aunque no sea perfecto tiene algo ms que el otro.

RESULTADOS

PRIMERA ETAPA
En esta primera etapa encontramos en la investigacin muchos factores
empleados de un cultivo in vitro los cuales nos sirven para diferentes formas
de cultivo. Investigando todo sobre los cultivos in vitro encontramos que a
pesar de que es difcil encontrar resultados de este procedimos a partir de lo
investigado nos basamos en la micro propagacin de un cultivo el cual tena
un proceso fcil, y la realizacin de este nos resulto mejor que todas ya que
hicimos el intento con las otras formas de cultivo este fue el ms fcil y
adems de eso era el que mas sabamos.

SEGUNDA ETAPA
En esta segunda etapa realizamos diferentes cultivos del embrin del frijol con
la intencin de tener diferentes muestras para saber cual sali ms viable
haciendo la prueba y escogiendo las dos mejores de ellos, al escoger los dos

cultivos mejores. Analizamos los dos salieron muy bien y muy similares, claro
que con algunas diferencias las cuales uno se diferencio de otro por las
diferencias y ese fue el que dejamos como muestra.
En la contaminacin de los cultivos se realizo una prueba de los dos para
examinar cual estaba ms contaminado, y el resultado fue que los dos
estaban contaminados; pero en su totalidad solo uno estaba contaminado
totalmente, el otro solo mas o menos la quinta parte ms o menos.
En la obtencin del explante nos fue fcil sacar cada embrin de cada frijol
con utilizacin de una tijeritas prcticas para esta prctica.
Dentro de los medios de cultivo los embriones tuvieron un cincuenta por
ciento (50 %) de respuesta buena pero decidimos realizarlos dentro de otro
subcultivo el cual fue mucho mejor la respuesta.
Las sustancias utilizadas fueron suficientes para que nuestro cultivo tuviera un
crecimiento y desarrollo muy bueno.
La climatizacin fue muy alta y el cultivo se iba descomponiendo nos toco
bajarle los grados centgrados a veinte grados centgrados (20 ) e ir
programndolo entre veinte y veinte cinco por ciento (20 y 25%) para que el
cultivo nos diera un resultado como deba ser y ah si fue lo necesario para el
cultivo.
En la multiplicacin del embrin no fue fcil encontrar la diferencia entre los
dos cultivos ya que los tejidos eran muy parecidos. Se realizaron dos siembras
mas con las mismas cualidades y despus de este intento encontramos muchas
diferencias entre ellos.
En el enraizamiento los dos cultivos fueron muy buenos con las mismas
condiciones nos fue muy bien en dos semanas ya veamos resultados y estos
fueron capaces de desarrollar una gran mayora de races.
En el endurecimiento dentro de los dos cultivos nos fue muy bien, los dos
cultivos a pesar de tantos inconvenientes se endurecieron lo mnimo que
deban endurecersen y tuvieron su proceso de formacin dentro del tubo muy
bueno.

Dentro de los resultados damos a conocer que los cultivos tuvieron su proceso
de etapas de maduracin bueno, sin embargo al comparar los dos cultivos se
notaron las diferencias de ambos y se obtuvo una variabilidad en tiempo y
control de cultivos.

TERCERA ETAPA
En esta tercera etapa logramos revisar los dos cultivos y observamos las
similitudes y diferencias de los dos cultivos y encontrndolas definimos cual

de los dos fue el mejor en la maduracin que era lo ms importante dentro del
proyecto.

DISCUSION DE DATOS Y DE RESULTADOS

En lo referente que se obtiene del cultivo vegetal in vitro del embrin del frijol
se puede dar a conocer que en un cincuenta por ciento (50%) de lo realizado
fue obtenido lo mejor de los dos cultivos escogidos dentro de todos los
realizados y teniendo dificultades con algunos de ellos estos dos fueron los
dos mejores cultivos realizados en las practicas.
En la contaminacin podemos mencionar que de los dos cultivos escogidos
uno totalmente estaba contaminado y el otro en una quinta parte ms o
menos, esto debido a que algn contaminante extrado por cualquier
contaminacin producida en la prctica, por esto es necesario tener en cuenta
las medidas que debemos optar por tener unas buenas condiciones de asepsia,
es decir realizando la desinfeccin y esterilizacin de todos los objetos de
manejo dentro de la prctica y as evitaremos las contaminaciones de los
cultivos.
Los que es la obtencin de explante del embrin del frijol al cabo de 15 das
despus de dejarlo en agua para que el embrin del frijol saliera a la luz,
logramos obtener unos pocos, el medio de cultivo le ayudo al embrin a
desarrollarse por las condiciones ambientales.
Respecto a las sustancias utilizadas estuvieron a favor ya que fueron las
necesarias para obtener un buen cultivo y con las condiciones climticas
fueron beneficiarias en los cultivos.
Para la multiplicacin se mencionan entre uno y dos meses aunque dentro de
dos semana ya iba dandi a luz ciertas races y plantas y despus de esto se
obtuvo resultados buenos, esto nos indica que el factor de brotes y desarrollo
de formacin de enraizamiento con ayuda de fitohormonas.
Sobre el endurecimiento del embrin del frijol es claro decir que el agar-agar
lo ayudo en un noventa por ciento (90%) y as el embrin coge su dureza
normalmente, sobre el crecimiento del embrin se obtuvo un crecimiento
bueno y nos demuestra que los nutrientes tuvieron la reaccin necesaria sobre
ellos.

Referente al cultivo se obtuvo de un cien por ciento (100%) un ochenta por

ciento (80%) de lo necesario de un cultivo contando con las sustancias y las
dems cosas que se tuvieron en cuenta para el cultivo.

CONCLUSIONES

De acuerdo a los resultados, llegamos a las conclusiones que es posible la

regeneracin in vitro de plantas del embrin del frijol, la regeneracin se d

cuando se transfiere el embrin a medios de cultivos. La multiplicacin del

embrin del frijol est relacionada con el frijol y sus orgenes, de tal forma
que explantes provenientes de la semilla del frijol sean multiplicados bajo el
proceso de un cultivo. El resultado aqu descrito muestra una mejor respuesta
organognica con el uso de ejes embrionarios, adems este protocolo puede
adaptarse a otros medios de cultivo. Este procedimiento es reproducible, lo
que lleva al desarrollo de plantas completas partiendo de un pequeo embrin.
Finalmente este proceso es una transformacin de cualquier cultivo para el
mejoramiento de las plantas. De este trabajo se deben destacar los siguientes
aspectos fundamentales: Que la vinculacin entre las instancias productoras de
cultivos, puede lograrsen en la medida en que se establezcan las formas de
apoyo. Los resultados obtenidos permitirn en el futuro aplicar esta
metodologa a otras comunidades con problemas de marginacin con lo cual
se contribuir por una parte a la creacin de empleos y por otra a impulsar
fuertemente la actividad de cultivos, produciendo plantas ornamentales de
calidad para ser ms competitivos en esta rea.

RECOMENDACIONES

Para la regeneracin del cultivo de tejido vegetal in vitro del embrin del
frijol utilizar de base el protocolo desarrollado en el presente proyecto de
investigacin y de prcticas.

Observando esto hay que continuar con estudios que tiendan a optimizar estos
procedimientos para as ampliar nuestro conocimiento.
Tener en cuenta los materiales y os elementos utilizados para obtener un mejor
cultivo.

BIBLIOGRAFIA

Profesores colegio la aurora:

Fabio Morales, Edison Correa y Luz Mary Ballestero. J.M Y J.T. 2011.
Profesor universidad nacional instituto de biotecnologa. 2011.
Allavena, A y Rossetti L Efforts in somatic embryogenesis of Phaseolus
vulgaris. Act Horticulturae. 1983.
Biotecnologas en el sector Forestal. Loewe, V. Chile Forestal. 1995.
HURTADO, D, MERINO, M. Cultivo de tejidos vegetales. Editorial Trillas.
2000.

ANEXOS

TABLAS:
Composicin de medios de cultivo para clulas vegetales:
Componentes
Agua destilada
Fuente de
carbono
Sustancias
inorgnicas
Vitaminas

Hormonas y
reguladores del
crecimiento

Caractersticas y ejemplos
Representa el 95% del medio nutriente.
Generalmente se usa sacarosa. La fuente de carbono se
necesita porque los explantos no son completamente
auttrofos, y no pueden cubrir sus necesidades con la
fotosntesis que pueden realizar in Vitro.
Macro elementos (N, P, K, Ca, Mg, S) y micro
elementos (Fe, Co, zn, Ni, B, Al, Mn, Mo, Cu, I), en
una proporcin adecuada para la planta elegida.
Vitaminas B1, B2, B6, vitamina H, vitamina E, cido
flico, cido nicotnico, entre otras.
Auxinas: promueven la elongacin celular, la
formacin de callos y races adventicias, inhiben la
formacin de brotes axilares adventicios y, a veces,
inhiben la embriognesis.
Cito quininas: promueven la divisin celular, regulan el
crecimiento y el desarrollo de los tejidos vegetales
Otras: giberelinas, cido abscico, etileno.

Mezclas de
sustancias poco
definidas

Ejemplos: extracto de levadura, extractos vegetales.

Materiales inertes

Usados como soporte. Incluyen agar, azarosa, otros

polisacridos, lana de vidrio, papel de filtro, arena.

IMGENES: