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de Parasitologa Veterinaria
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69
NDICE
PORTADA
NDICE
MANUAL PRCTICO
DE PARASITOLOGA VETERINARIA
PORTADA
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MANUALES UEX
69
PORTADA
(E.E.E.S.)
Espacio
Europeo
Educacin
Superior
NDICE
MANUAL PRCTICO
DE PARASITOLOGA VETERINARIA
2010
PORTADA
NDICE
Edita:
Universidad de Extremadura. Servicio de Publicaciones
C/ Caldereros, 2 - Planta 2. 10071 Cceres (Espaa)
Tel. 927 257 041 ; Fax 927 257 046
E-mail: publicac@unex.es
http://www.unex.es/publicaciones
ISSN 1135-870-X
ISBN 978-84-7723-910-9
Depsito Legal M-16.788-2010
Impreso en Espaa - Printed in Spain
Maquetacin, fotomecnica e impresin: Dosgraphic, s.l. 914 786 125
PORTADA
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AUTORES
MANUALES UEX
PORTADA
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PORTADA
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PRLOGO
El manual est diseado para que sea una fuente de consulta til para los alumnos de las
dos asignaturas troncales, antes citadas, as como para la asignatura optativa de Diagnstico
y Clnica de las Enfermedades Parasitarias, por la ventaja que supone tener la informacin
unificada en materias tan relacionadas, as como por la economa de medios que lleva implcita. El manual se divide en tres partes principales. La primera est dedicada a la Parasitologa, de mayor inters para los alumnos de la asignatura del mismo nombre, donde se
describen los principales grupos taxonmicos de los parsitos y especies ms representativas, con as abundantes fotografas y dibujos esquemticos que revelen sus caractersticas
morfolgicas y biolgicas principales. El objetivo principal de este captulo es que el alumno
sea capaz de identificar y reconocer la morfologa de los principales parsitos, as como
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MANUALES UEX
Una forma de proporcionar esta informacin adicional a las clases magistrales, cada vez
ms necesaria, la ofrecen sin dudas las llamadas nuevas tecnologas, pero en entornos
como el laboratorio de prcticas, la consulta veterinaria o las prcticas de campo, no es
la mejor opcin. Una gua o manual de prcticas sigue siendo una fuente de informacin
imprescindible e insustituible para el desarrollo de las mismas, especialmente, en asignaturas
como la Parasitologa y las Enfermedades Parasitarias, que requieren un abundante material
iconogrfico.
MANUALES UEX
Unidad de Parasitologa
Departamento de Sanidad Animal
Facultad de Veterinaria
Universidad de Extremadura
10
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NDICE GENERAL
PRLOGO
N
DI
CE
I. PARASITOLOGA
13
Reino protozoa 14
Reino animalia
21
Phylum Plathyhelmintes 21
Phylum Nematoda 31
Phylum Arthropoda 40
II.
T CNICAS DE DIAGNSTICO
PARASITOLGICO 45
1. Toma de muestras y envo al laboratorio
46
2. Examen coprolgico
47
3. Examen de sangre
56
61
5. Examen de piel
64
6. Examen de vsceras
65
67
68
9. Diagnstico inmunolgico
70
III.
LMINAS DE IDENTIFICACIN
75
IV.
LMINAS DE LESIONES
81
ANEXO 1.
TAXONOMA
89
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103
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
I.PARASITOLOGA
13
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NDICE
Amastigote
Epimastigote
Tripomastigote
Promastigote
Morfologa en Trypanosomatidae
1) Nucleo; 2) Kinetoplasto; 3) Flagelo; 4) Membrana ondulante.
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Oprculo
Cuerpo
de Stieda
Glbulo
refractil
A
grnulo polar
residuo ooqustico
residuo esporocstico
Esporozoito
MEROGONIA
Merozoito
Microgameto
GAMETOGONIA
Macrogameto
Ooquiste
ESPOROGONIA
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Dibujo esquemtico de los oquistes de Eimeria (A) e Isospora (B) y ciclo evolutivo del gnero Eimeria.
Dibujo e imagen microscpica de oquistes esporulados de Eimeria sp. y Cystoisospora sp. esporulando.
PORTADA
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15
trofozoito
microgamentos
merozoitos I
meronte I
ooquiste
ooquiste
esporulado
medio ambiente
MANUALES UEX
16
PORTADA
NDICE
Hospedador definitivo
Esporocistos libres
Hospedador intermediario
PORTADA
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17
NDICE
11
22
33
44
55
66
77
88
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Dibujo esquemtico de algunas de las formas evolutivas del gnero Plasmodium en frotis sanguneos:
Plasmodium malarie: trofozoito (1), esquizonte (2), esquizoitos y cuerpo residual dentro del eritrocito (3)
y libres (4), gametocito (5) y (6).
Plasmodium falciparum: gametocito (7) y (8).
18
PORTADA
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Esporogonia
intestino
Zigoto
Esporocineto
Glndulas
salivares
Gametos
Intestino
Musculatura
Epidermis
T. Malpigi
Hemolinfa
Esporozoito
Gametocitos
Huevo
Larva
Merogonia
Merozoito
Ninfa
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Adulto
PORTADA
19
NDICE
Merogonia
linfocito
eritrocito
Glndulas
salivares
esporocineto
Esporogonia
merozoito
cigoto
intestino
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Gametogonia
20
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vo
in
pg
ac
ov
cd
oo
ut
gm
ce
vd
te
vi
Aparato de fijacin: ventosa oral (vo) ventosa ventral o acetbulo (ac). Aparato digestivo: Boca (rodeada
por la vo), faringe muscular (no representada), esfago e intestinos ciegos ramificados (lneas negras).
Aparato reproductor masculino: 2 testculos (te) ramificados, conductos eferentes (ce), conducto deferente (cd), bolsa del cirro con vescula seminal interna y cirro rodeado de glndulas prostticas (ci) y
poro genital (pg).
Aparato genital femenino: ovario (ov) ramificado, unido mediante un oviducto al ootipo (oo), rodeado de
glndulas de Mehlis (gm) al que tambin desembocan las glndulas vitelgenas (vi) mediante conductos
vitelgenos o viteloductos (vd) transversales, longitudinales y medios. Del ootipo parte el tero y metratermo(ut), repleto de huevos (h) que desemboca en el poro genital (pg) antes citado.
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PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
Se identifican fcilmente ventosa oral (vo), ventosa ventral o acetbulo (ac), testculos (te) ramificados, bolsa
del cirro y cirro (ci), poro genital (pg), ovario (ov), ootipo (oo), glndulas vitelgenas (vi) y tero y repleto
de huevos embrionados en su parte final (detalle). El aparato digestivo consta de boca, rodeada por la
ventosa oral (vo), faringe muscular (engrosamiento visible bajo la vo), esfago y dos intestinos ciegos simples
laterales que llegan hasta el tercio posterior (lneas verde azuladas).
22
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
PORTADA
23
NDICE
1
3
Coenuro
cerebralis
(metacestodo)
Anillo
grvido
A
A
4
Huevo
Hospedador
intermediario
11
BB
Ciclo biolgico de Taenia multiceps.
14
MANUALES UEX
12
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
Ganchos.
Rostelo.
Ventosa.
Proglotis inmaduros.
Canales excretores.
Vagina.
Ootipo.
Ovario.
Glndulas vitelgenas.
tero.
Cirro.
Conducto deferente.
Testculos.
Poro genital.
Huevos.
10
14
15
C
C
24
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13
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mango
guarda
hoja
Esclex
Rostelo
Ganchos
Ventosas
Cuello
Estrbilo
(progltides
inmaduros)
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PORTADA
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Echinococcus granulosus. Dibujo esquemtico y tincin con carmn actico. El ltimo anillo es grvido,
con un tero sacciforme, a diferencia de otros tnidos.
BB
F. serrano 2008
Dibujo esquemtico de un metacestodo de Echinococcus granulosus (quiste hidatdico o Echinococcus
hydatidosus) con dos vesculas hijas, cpsulas prolgeras (A) con protoesclices inviables y viables (B) y
protoesclices libres, en los que se aprecia una corona, de ganchos con forma de pual rabe.
PORTADA
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MANUALES UEX
A
A
27
glndulas
interproglotdeas
B
Hospedador definitivo
Hospedador intermediario
(caro oribtido)
Huevo
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SUBREINO BILATERIA
Phylum Plathyhelminthes
Infraphylum Cercomeromorpha
Clase Cestoidea
Orden Cyclophyllidea
Familia Davaineidae
Gnero Davainea
Gnero Railletina
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Cpsula
ovgera
Adulto
Ctenocephalides
canis
(Hospedador intermediario)
Huevo
Larva
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PORTADA
NDICE
festones
B
cpsula bucal
dientes
esfago
espcula
c. ventroventral
c. lateroventral
tlamon
c. anterolateral
gubernculo
c. mediolateral
c. posterolateral
cloaca
c. externodorsal
bolsa copuladora
c. dorsal
costillas
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MANUALES UEX
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Clase Chromadorea (~ Secernentea)
Orden Rhabditida
Suborden Strongylida
Superfamilia Strongyloidea
Familia Chabertiidae
Gneros Oesophagostomum y Chabertia
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33
PORTADA
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L3 (filariforme)
cutcula
de la L2
muda
cutcula de la L1
Hospedador
L2 (rabditiforme)
muda
huevo
L1 (rabditiforme)
mrula
eclosin
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L3
L1
L2
Superfamilia Metastrongyloidea
Familia Metastrongylidae
Gnero Metastrongylus
Hospedador
intermediario
Hospedador
definitivo
Huevo
larvado
Hospedador
definitivo
Hospedador
intermediario
L1
Familia Protostrongylidae
Gneros Protostrongylus, Muellerius,
Neostrongylus y Cystocaulus
PORTADA
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MANUALES UEX
Superfamilia Heterakoidea
Familia Heterakidae
Gnero Heterakis
Familia Ascaridiidae
Gnero Ascaridia
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MANUALES UEX
37
PORTADA
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MANUALES UEX
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Orden Spirurida (=Spiruromorpha)
Superfamilia Habronematoidea
Gneros Habronema y Draschia
Superfamilia Filarioidea
Gneros Dirofilaria y Onchocerca
Superfamilia Spiruroidea
Gneros Gongylonema, Spirocerca y Ascarops
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PORTADA
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msculo
esqueltico
L1 madura
Larvas
emigrantes
PORTADA
epitelio
intestinal
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quiste
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40
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Demodex canis.
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41
PORTADA
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42
PORTADA
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2.Larvas 1 en esfago.
4.Pupas.
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1.Imago.
PORTADA
43
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PORTADA
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45
PORTADA
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46
PORTADA
NDICE
2. EXAMEN COPROLGICO
2.1.Examen directo de heces frescas
En un portaobjetos, sobre una gota de suero fisiolgico templado (38-40C), se coloca una
pequea cantidad de heces, a ser posible tomada del centro de la masa fecal.
Se mezclan perfectamente hasta conseguir una capa fina. La extensin debe tener un grado
de transparencia suficiente para que un texto, colocado debajo del portaobjetos, se pueda
leer sin dificultad.
Se coloca un cubreobjetos y se observa al microscopio.
Para una mejor visualizacin de protozoos mviles (trofozoitos de Giardia, Chilomastix,etc.)
o sus quistes, alternativamente se puede poner una gota de lugol en el portaobjetos para
hacer la extensin con las heces, as como otras tcnicas de tincin (hematoxilina-cristal
violeta, etctera).
Indicaciones
Esta tcnica permite reconocer cualquier elemento de diseminacin de los parsitos, pero
en caso de no observar ninguna forma parasitaria por este mtodo, no debe descartarse la
posibilidad de una parasitosis, ya que el tamao de la muestra es tan pequeo que el resultado negativo no es excluyente. Sin embargo, no es sustituible por su sencillez, rapidez y
fundamentalmente porque algunos parsitos no son evidenciables por otras tcnicas, que
en general son mucho ms sensibles, siendo de especial utilidad para la deteccin de protozoos mviles.
2.2.Mtodos de enriquecimiento (cualitativos)
PORTADA
NDICE
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2.2.1.Flotacin
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PORTADA
NDICE
Indicaciones
Es la tcnica ms empleada en cualquier laboratorio de parasitologa. Con ella se pueden
observar la mayora de los huevos y larvas de nematodos, los ooquistes de coccidios y algunos huevos de cestodos.
Sin embargo, no flotan los huevos de trematodos, los cestodos seudofilideos, ni las larvas
de nematodos pulmonares, para los que habra que utilizar soluciones de mayor densidad.
b) Otras soluciones empleadas para mtodos de flotacin
Solucin al 33% de Sulfato de Zinc (densidad de 1,33), solucin al 35% de Sulfato Magnsico (densidad de 1,28), solucin de N2O3Na (densidad de 1,360), solucin de sacarosa
(densidad 1,2). Estas soluciones estn recomendadas para el diagnstico de las formas de
diseminacin de mayor densidad, como Fasciola heptica en rumiantes, Metastrongylus en
cerdos, de Spirocerca lupi en el perro, etctera.
2.2.2.Sedimentacin
Se trata de concentrar los posibles elementos de diseminacin existentes en las heces por
simple gravedad.
Tcnica
Se pasa la suspensin a travs de un tamiz (doble gasa) en una copa de 500 cc y se llena
seguidamente de agua hasta aproximadamente 2,5 cm del borde.
Aadir 2-3 gotas de Azul de Metileno o Verde Malaquita (opcional). Esto teir los restos
vegetales, pero no los elementos de diseminacin parasitarios, facilitando en gran medida
su bsqueda al microscopio ptico.
Se deja reposar 30-40 minutos.
PORTADA
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Se mezclan varios gramos de heces con agua hasta que la disgregacin sea completa.
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En una placa de Petri, se mezclan las heces que contienen los ooquistes con una solucin
de dicromato potsico al 2%, el cual, adems de dar humedad al medio, posee accin
bactericida y fungicida.
La placa se introduce en una estufa a temperatura adecuada (20-25C).
Se ventilar a diario para proporcionar a los ooquistes el oxgeno necesario.
PORTADA
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Las larvas son muy activas y presentan hidrotropismo positivo, migrando de las heces y
sedimentndose en el fondo del tubo de goma conectado al embudo.
A partir de 3-6 horas (tiempo mximo necesario 12-24 horas) se depositan sobre un vidrio
de reloj las primeras gotas del sedimento, examinndose al estereomicroscopio.
Con una pipeta se recogen algunas larvas y se depositan entre porta y cubre, examinndose
a microscopa ptica.
La muestra objeto de anlisis se puede mezclar con una o dos gotas de lugol para fijar y
colorear las larvas y hacer as ms fcil su identificacin.
Si no disponemos de aparato Baermann, el aislamiento de las larvas se puede realizar en
una copa de sedimentacin llena de agua templada sobre la que depositaremos un colador
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PORTADA
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MANUALES UEX
Con este mtodo, por tanto, el recuento mnimo es de 100 elementos de diseminacin
por gramo de heces. Esta sensibilidad suele ser suficiente en la prctica, dado que los contajes
inferiores se corresponden a cargas parasitarias muy leves que no suelen tener significacin
clnica.
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MANUALES UEX
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Existen varios mtodos de tincin aceptables, pero es conveniente que vayan precedidos
de un mtodo de concentracin, dado que pueden eliminarse en concentraciones muy bajas
en enfermos leves o portadores. No obstante, por su rapidez, la tincin directa de las heces
puede utilizarse como cuando se trata de comprobar si estn implicados en las diarreas neonatales o diarreas de animales inmunodeprimidos.
2.6.1.Tincin por el Mtodo de Heine
Depositar una pequea porcin de heces sobre un porta y extender un poco.
Teir con fuchsina bsica fenicada durante unos segundos.
PORTADA
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PORTADA
NDICE
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1g
10 ml
5g
100 ml
3. EXAMEN DE SANGRE
3.1.Tcnicas para el diagnstico de microfilarias
3.1.1. Examen en fresco
Se deposita una gota de sangre fresca (con anticoagulante) entre porta y cubre, examinndose a microscopa con luz poco intensa. La existencia de microfilarias (larvas 1) es observada por los activos movimientos de stas entre los elementos formes.
Es una tcnica fcil y que no requiere prcticamente material. Es importante observar
varias preparaciones debido a la poca cantidad de sangre que es observada. La no observacin de microfilarias no es excluyente, habiendo de recurrir a otros mtodos ms fiables
(mtodos de concentracin).
3.1.2. Mtodo del tubo microhematocrito
Este mtodo consiste en realizar un hematocrito con la muestra de sangre. Posteriormente
se observa al microscopio ptico la zona del tubo microhematocrito situada entre los glbulos blancos y plasma, localizacin donde se sitan las microfilarias (Fig. 4).
MANUALES UEX
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PORTADA
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x100
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PORTADA
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0,05 g
5 ml
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Reactivo III (Disolver en agua, calentndolo. Aadir HCl y enfriar. Guardar a 4C)
58
Pararosanilina.................................................................................
Agua destilada................................................................................
HCl................................................................................................
1g
20 ml
5 ml
PORTADA
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4g
100 ml
28,396 g
1.000 ml
21,011 g
1.000 ml
77,1 ml
122,9 ml
2g
Sustrato
20 ml de sol I
50 ml de agua destilada
4 ml de sol II
Mezclar 3,2 ml de sol III y IV y aadir a lo anterior (estables a 4C ms de 6 meses) y
ajustar a pH 5 con sosa 0,1 N. Hacer justo antes de su uso.
Metodologa
Se incuban las muestras utilizando el sustrato 1 h a 37C o 2 h a 25C.
Lavar con agua destilada.
Contratincin con sol V 2 3 minutos (opcional).
Deshidratar con alcohol etlico de 95.
Lavar en xileno y montar.
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
Diferenciacin de microfilarias
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Figura 6. Tinciones
histoqumica
de distintas especies
de microfilarias por mtodo
fosfatasa cida.
Las microfilarias de Dipetalonema reconditum son tambin ms pequeas y con movimientos de progresin rpida a intervalos, con un prominente gancho ceflico y un extremo anterior obtuso. Varios autores sealan solapamiento de tamao con las de D. immitis,
lo que hace interesante su tincin con esta tcnica para demostrar la actividad de fosfatasa cida prcticamente por todo el cuerpo (Fig. 6, dibujo 4), en tres o cuatro reas
extensas, o slo en los dos tercios distales, con mayor intensidad en los poros anales y
excretores.
MANUALES UEX
60
PORTADA
NDICE
El fundamento de la digestin ppsica es simular el proceso fisiolgico al que es sometida la carne en el estmago de un animal, y su objetivo es liberar las larvas musculares de
Trichinella spp. enquistadas en el tejido muscular. Como resultado se obtiene un lquido de
digestin en el que se encuentran las larvas en suspensin. Este mtodo, acorde con el Reglamento 2075/2005, se basa fundamentalmente en una digestin en el agitador magntico, en
el cul se coloca un vaso de precipitado con las siguientes proporciones de reactivos (para
100 g de carne):
PORTADA
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2l
10 g
16 ml
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La tcnica se basa en una digestin trpsica muy suave, simulando la digestin que se
produce en el duodeno de los hospedadores, ya que la tripsina producida en el pncreas se
vierte al duodeno y no al estmago. De esta forma, los quistes de Sarcocystis spp. quedan
libres de las fibras musculares o tejidos en los que se alojen, para que puedan ser observados
al microscopio.
El material necesario para llevar a cabo la tcnica es el siguiente:
Picadora elctrica.
Bscula digital.
PORTADA
NDICE
Agitador orbital.
Embudo.
Gasa o filtro de 600-700 micrmetros.
Tubo de centrfuga de 50 ml con tapadera.
Centrfuga.
Pipetas Pasteur.
Portas y cubres.
Microscopio ptico.
1. El primer paso consiste en preparar la muestra que vamos a digerir, para lo cual, procedemos a triturar aproximadamente 10 gramos (pesados con anterioridad en la bscula) del
tejido muscular o nervioso que queremos someter a estudio. A estos 10 gramos de muestra, le aadimos 0,13 gramos de tripsina y 50 ml de PBS en el recipiente con tapadera, y
lo homogeneizamos adecuadamente.
2. Una vez hecho todo lo anterior, en los casos de musculatura esqueltica y corazn, se
procede a incubar la mezcla a 22C en agitacin suave (100 rpm) durante 8 minutos en
el agitador orbital (simulando las condiciones de la digestin en el hospedador). En el
caso del cerebro, se procede a simple agitacin manual durante slo 4 minutos. En caso
de no disponer de incubador o centrfuga refrigerada, la incubacin puede realizarse a
temperatura ambiente.
3. Pasados los 8 minutos de digestin, se filtra el contenido de la digestin travs de una gasa
de 600-700 micrmetros (aproximadamente doble gasa) y embudo, pasando el material
filtrado al tubo de centrfuga de 50 ml con tapadera. Es conveniente presionar la gasa
una vez filtrado el lquido, para exprimir el jugo e incrementar el nmero de los posibles
quistes de Sarcocystis spp.
4. El lquido de digestin resultante del filtrado se centrifuga a 1.000 rpm durante 10 minutos
a una temperatura baja (entre 1 y 3C) para detener la digestin de la muestra ya que los
quistes son muy lbiles y se rompen con facilidad. Finalmente, se elimina el sobrenadante
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
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5. EXAMEN DE PIEL
La identificacin de los parsitos existentes en la piel, puede verificarse a simple vista
tras su recogida con pinzas o simple cepillado (piojos, pulgas, garrapatas, etc.), o bien tener
que recurrir a exmenes microscpicos despus de un procesamiento en el laboratorio de la
muestra obtenida por el raspado.
5.1.Investigacin microscpica para el diagnstico de caros: raspado de piel
Toma de muestra
El raspado debe realizarse de las zonas enfermas o sospechosas de la piel, a ser posible
de las regiones ltimamente atacadas o bien de los lmites entre zonas sanas y enfermas.
Despus de cortar con las tijeras el pelo o la lana, conviene eliminar las costras o escaras
ms gruesas y superficiales antes de realizar el raspado. Se raspa con la ayuda de un bistur,
hacindolo profundamente hasta que se produzca una leve hemorragia. Este material se
recoger en una placa de Petri u otro recipiente de boca ancha, para asegurarse que nada
del material raspado se pierda. El material debe tomarse, a ser posible, de distintos lugares y
en cantidad suficiente.
Remisin de la muestra
El raspado debe mandarse al laboratorio en la placa de Petri o el recipiente utilizado para
la recoleccin, cerrado e identificado adecuadamente, junto con la hoja de bistur empleada.
MANUALES UEX
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El raspado se coloca en un vidrio de reloj y se aade potasa para ayudar a la disgregacin y aclarado de las costras y restos de la piel, y as poder visualizar ms fcilmente los
posibles caros (huevos, formas larvarias y/o adultas) al estereomicroscopio. Mediante una
pipeta Pasteur, algunos ejemplares deben trasladarse a un portaobjetos para su observacin
microscpica e identificacin morfolgica.
En el caso de posible sarna por Octodectes cynotis (sarna auricular), la muestra se tomar
con un bastoncillo de algodn de los pabellones auditivos afectados.
La mayora de los caros de la sarna se diagnostican con la ayuda del estereomicroscopio. No obstante, ante la dificultad que entraa el diagnstico de la sarna ocasionada por
PORTADA
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6. EXAMEN DE VSCERAS
Mediante ella pretendemos hallar formas parasitarias adultas, larvarias o elementos de
diseminacin de los parsitos en su localizacin orgnica.
6.1.Investigacin de parsitos intestinales
Se procede a la apertura de distintos tramos, tanto del intestino grueso como el delgado.
Adems de esto, se realiza un lavado de la mucosa intestinal filtrndose el contenido y
recogindose en recipientes adecuados.
El material anterior se visualiza al estereomicroscopio, y posteriormente se realiza la identificacin del parsito y contaje.
PORTADA
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MANUALES UEX
Hay casos clnicos en los que es necesario realizar un raspado de la capa mucosa intestinal, e investigar la posible presencia de formas parasitarias al microscopio (Por ejemplo,
los coccidios).
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MANUALES UEX
Cisticerco
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PORTADA
NDICE
7.1.Orina
La vejiga urinaria de los carnvoros es asiento del nematodo Capillaria plica, aunque
ms raramente se puede encontrar en los riones y pelvis renal otro nematodo denominado
Dioctophyma renale.
PORTADA
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MANUALES UEX
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MANUALES UEX
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PORTADA
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Colocar al animal en decbito lateral derecho, con la extremidad izquierda sobre el costillar, para as poder evidenciar el esternn. Tambin puede realizarse sobre la cresta ilaca.
Cortar el pelo, afeitar y desinfectar la zona a intervenir, que suele ser la 2-3 esternebra o la
cresta ilaca, la cual se anestesia localmente por infiltracin en zonas subcutneas prximas
del periostio, el cual es muy sensible.
Desinfectar de nuevo la zona e insertar la aguja hasta alcanzar el hueso.
Retirar el fijador o mandril, conectar la jeringa y retirar el mbolo bruscamente. Brotar en
pequeo chorro fragmentos de mdula sea con algo de sangre.
PORTADA
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MANUALES UEX
Tcnica
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9. DIAGNSTICO INMUNOLGICO
En la actualidad muchas de las enfermedades parasitarias son diagnosticadas gracias a
la utilizacin de tcnicas que ponen de manifiesto la existencia de respuesta inmunolgica
(anticuerpos especficos) en sangre frente a los agentes extraos.
Los parsitos generan desde las primeras semanas una fuerte respuesta de anticuerpos que
pueden ser puestas de manifiesto mediante estas tcnicas de inmunodiagnstico.
La deteccin precoz de las infecciones parasitarias a travs de dichos mtodos, se muestra
como una de las medidas de control ms efectivas, ya que posibilita una mayor efectividad
teraputica de los medicamentos empleados, al ser utilizados en fases precoces de la infeccin. Tambin se consigue una mejor monitorizacin del proceso parasitario a travs del
anlisis de las respuestas inmunolgicas, ya que la evidencia de la efectividad teraputica se
ve reflejada en un descenso de la cantidad de anticuerpos en sangre como consecuencia de
la muerte de los parsitos.
Existen diferentes mtodos de inmunodiagnstico, entre los que se encuentra la tcnica
inmunoenzimtica micro-ELISA indirecto de dobles anticuerpos, que ha demostrado ser
una de las ms eficaces y fiables en multitud de estudios seroepidemiolgicos, permitiendo en diferentes pases el conocimiento de la distribucin de las parasitosis y de su prevalencia.
Su realizacin slo requiere de una pequea muestra de sangre del animal sospechoso
para su anlisis en el laboratorio.
9.1.ELISA indirecto
MANUALES UEX
Mediante la tcnica ELISA indirecto se determinan diferentes tipos y subtipos de inmunoglobulinas (anticuerpos) producidas frente a distintos antgenos del parsito (Fig. 7).
70
As, el antgeno soluble empleado en dicha tcnica puede ser la totalidad de las protenas del parsito (protena total del parsito), determinadas fracciones del mismo o diferentes
protenas recombinantes obtenidas por ingeniera gentica.
Tras tapizar las placas con el antgeno parasitario a la concentracin deseada, a cada
pocillo se le aaden 100 l del fluido problema, diluido a la concentracin adecuada en
buffer carbonato, PBS u otra solucin de pH apropiado, segn el tipo de antgeno. Dichas
PORTADA
NDICE
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
Para comprobar que todos los pasos de la tcnica han sido realizados correctamente,
es necesario reservar unos pocillos en cada placa para realizar los controles de conjugado,
positivos y negativos (Fig. 7).
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MANUALES UEX
72
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
Para comprobar que la prueba ha sido realizada correctamente, se utilizan dos controles
testados previamente. Uno de ellos negativo y el otro positivo. Adems, estos sueros se utilizan como referencia para la determinacin del ttulo del resto de las muestras.
PORTADA
NDICE
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MANUALES UEX
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PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
III.LMINAS DE IDENTIFICACIN
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PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
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PORTADA
NDICE
3
2
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PORTADA
NDICE
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78
PORTADA
NDICE
PORTADA
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Sarcocystis miescheriana.
Trichinella spiralis.
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Demodex canis.
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PORTADA
NDICE
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IV.LMINAS DE LESIONES
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NDICE
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PORTADA
NDICE
PORTADA
MANUALES UEX
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MANUALES UEX
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PORTADA
NDICE
PORTADA
MANUALES UEX
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MANUALES UEX
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PORTADA
NDICE
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
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MANUALES UEX
88
PORTADA
NDICE
ANEXO 1.TAXONOMA
INTRODUCCIN
La clasificacin taxonmica de los parsitos est cambiando considerablemente en las
ltimos aos gracias al desarrollo de la biologa molecular y los estudios ultraestructurales,
que han permitido conocer mucho mejor la filogenia de los eucariotas.
Los protozoos o protistas no se consideran ya una rama separada ni de organismos
celulares autotrficos como las algas o los cromistas, ni de los clsicos reinos Animalia,
Fungi y Plantae. No hay un consenso sobre
la clasificacin concreta de los grandes gruEukaryota
pos taxonmicos, pero en cualquier caso se
Amoebozoa
aceptan diversos grupos, de los que surgen
Archaeplastida
formas de vida hetertrofa, autotrfica o mixta,
Plantae
y en algunos, ramas evolutivas multicelulares
Chromalveolata
en diversos momentos.
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
Excavata
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90
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
91
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
92
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
93
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
94
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
95
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
96
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
97
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
98
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
99
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
100
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
101
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
102
PORTADA
NDICE
RUMIANTES
PORTADA
Teladorsagia
Strongyloides
Trichostrongylus
Trichuris
HGADO
Trematodos
Dicrocoelium
Fasciola
Cestodos
Echinococcus
Cysticercus
APARATO RESPIRATORIO
Cestodos
Echinococcus
Nematodos
Cystocaulus
Dictyocaulus
Muellerius
Neostongylus
NDICE
MANUALES UEX
APARATO DIGESTIVO
Protozoos
Cryptosporidium
Eimeria
Trematodos
Paramphistomum
Cestodos
Avitellina
Moniezia
Stilesia
Thysaniezia
Nematodos
Bunostomun
Capillaria
Chabertia
Cooperia
Gongylonema
Haemonchus
Nematodirus
Neoascaris
Oesophagostomun
103
MANUALES UEX
SACO CONJUNTIVAL
Nematodos
Thelazia
PIEL Y TEJIDO SUBCUTNEO
Nematodos
Onchocerca
Parafilaria
Artrpodos
Arcnidos
caros de la sarna
Chorioptes
Demodex
Psoroptes
Sarcoptes
Dermanyssus
Ixdidos
Boophilus
Dermacentor
Haemaphysalis
Hyalomma
Ixodes
Rhipicephalus
Insectos
Anopluros
Haematopinus
Linognathus
Ischnoceros
Damalinia (Bovicola)
Columbicola
Goniodes
Dpteros
Calliphora
Culex
Haematobia
Hyppobosca
Hypoderma
Lucillia
Melophagus
Sarcophaga
Simulium
Stomoxys
Wohlfahrtia
104
PORTADA
NDICE
APARATO UROGENITAL
Protozoos
Trypanosoma
SANGRE
Protozoos
Babesia
Theileria
Trypanosoma
MSCULO
Protozoos
Sarcocystis
Nematodos
Trichinella
SACO CONJUNTIVAL
Nematodos
Thelazia
APARATO RESPIRATORIO
Cestodos
Echinococcus
Nematodos
Dictyocaulus
Artrpodos
Insectos
Rhinoestrus
MANUALES UEX
CAVIDAD ABDOMINAL
Nematodos
Setaria
HGADO
Trematodos
Dicrocoelium
Fasciola
Cestodos
Echinococcus
105
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
Ixdidos
Dermacentor
Hyalomma
Ixodes
Rhipicephalus
Haemaphysalis
Insectos
Anopluros
Haematopinus
Ischnoceros
Damalinia
Sifonpteros
Ctenocephalides
Pulex
106
PORTADA
NDICE
HGADO
Trematodos
Dicrocoelium
Fasciola
Cestodos
Echinococcus
Cysticercus
APARATO RESPIRATORIO
Cestodos
Echinococcus
Nematodos
Metastrongylus
APARATO UROGENITAL
Nematodos
Stephanurus
SANGRE
Protozoos
Babesia
MSCULO
Protozoos
Sarcocystis
Cestodos
Cysticercus
Nematodos
Trichinella
PIEL Y TEJIDO SUBCUTNEO
Artrpodos
Arcnidos
caros de la sarna
Demodex
Sarcoptes
Argsidos
Ornithodoros
Ixdidos
Boophilus
Dermacentor
Hyalomma
Ixodes
Rhipicephalus
Insectos
Anopluros
Haematopinus
Sifonpteros
Pulex
Ctenocephalides
MANUALES UEX
APARATO DIGESTIVO
Protozoos
Balantidium
Eimeria
Cryptosporidium
Isospora
Cestodos
Diphyllobothrium
Nematodos
Ascaris
Ascarops
Globocephalus
Gongylonema
Hyostrongylus
Oesophagostomun
Physocephalus
Simondsia
Strongyloides
Trichuris
Acantocfalos
Macracanthorhynchus
107
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
APARATO DIGESTIVO
Protozoos
Cystoisospora
Giardia
Sarcocystis
Toxoplasma
Neospora
Entamoeba
Trematodos
Alaria
Plagiorchis
Cestodos
Diphyllobothrium
Diplopylidium
Dipylidium
Echinococcus
Joyeuxiella
Mesocestoides
Multiceps
Taenia
Nematodos
Ancylostoma
Capillaria
Physaloptera
Spirocerca
Strongyloides
Toxascaris
Toxocara
Trichuris
Uncinaria
APARATO RESPIRATORIO
Nematodos
Capillaria
Aelustrongylus
APARATO UROGENITAL
Nematodos
Capillaria
Dioctophyma
SANGRE
Protozoos
Babesia
Nematodos
Dirofilaria
Dipetalonema
SISTEMA MONONUCLEAR FAGOCTICO
Protozoos
Hepatozoon
Leishmania
MSCULO
Nematodos
Trichinella
PIEL Y TEJIDO SUBCUTNEO
Nematodos
Dipetalonema
Dirofilaria
Artrpodos
Arcnidos
caros de la sarna
Cheylletiella
Demodex
Notoedres
Otodectes
Sarcoptes
Ixdidos
Rhipicephalus
108
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
Insectos
Anopluros
Linognathus
Ischnoceros
Trichodectes
Sifonpteros
Ctenocephalides
Pulex
109
PORTADA
NDICE
APARATO RESPIRATORIO
Protozoos
Cryptosporidium
Nematodos
Cyathostoma
Syngamus
Artrpodos
Arcnidos
caros de la sarna
Cytodites
Gamsidos
Sternostoma
APARATO UROGENITAL
Trematodos
Prosthogonimus
SANGRE
Protozoos
Haemoproteus
Leucocytozoon
Plasmodium
MANUALES UEX
HGADO
Protozoos
Histomonas
110
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
111
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
HGADO
Protozoos
Eimeria
Trematodos
Fasciola
Dicrocoelium
Cestodos
Echinococcus
Cysticercus
Nematodos
Capillaria
APARATO UROGENITAL
Nematodos
Capillaria
MSCULO
Protozoos
Sarcocystis
Toxoplasma
PIEL Y TEJIDO SUBCUTNEO
Artrpodos
Arcnidos
caros de la sarna
Notoedres
Psoroptes
Sarcoptes
Cheyletiella
Gamsidos
Ornithonyssus
Ixdidos
Haemaphysalis
Hyalomma
Ixodes
Rhipicephalus
Insectos
Anopluros
Haemodipsus
Sifonpteros
Spilopsyllus
Echidnophaga
Xenopsylla
APARATO RESPIRATORIO
Nematodos
Protostrongylus
112
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
113
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
114
PORTADA
NDICE
MANUALES UEX
APARATO RESPIRATORIO
Artrpodos
Arcnidos
Acarapis
ECTOPARSITOS
Artrpodos
Arcnidos
Varroa
Insectos
Dpteros
Braula
Senotainia
115
PORTADA
NDICE
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