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Manual Prctico

de Parasitologa Veterinaria

Coleccin manuales uex - 69


(E.E.E.S.)

Unidad de Parasitologa. Dpto. de Sanidad Animal


Fac. de Veterinaria. Universidad de Extremadura
PORTADA

NDICE

69
NDICE

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NDICE

MANUAL PRCTICO
DE PARASITOLOGA VETERINARIA

PORTADA

NDICE

MANUALES UEX

69
PORTADA

(E.E.E.S.)
Espacio
Europeo
Educacin
Superior

NDICE

FRANCISCO J. SERRANO AGUILERA (COORD.)

MANUAL PRCTICO
DE PARASITOLOGA VETERINARIA

2010
PORTADA

NDICE

MANUAL prctico de parasitologa veterinaria / Francisco Javier


S errano Aguilera (Coord.). Cceres : Universidad de Extremadura, Servicio de Publicaciones, 2010
120 pp. ; 17 x 24 cm. (Manuales UEX, ISSN 1135-870-X ; 69)
ISBN 978-84-7723-910-9
1. Parasitologa veterinaria. I. Serrano Aguilera, Francisco Javier. II. Tt.
III.Universidad de Extremadura, Servicio de Publicaciones, ed.
576.89
La publicacin del presente manual forma parte de las Acciones para el Desarrollo del Espacio Europeo de
Educacin Superior en la Universidad de Extremadura Curso 2008/09 en el marco de la VI Convocatoria
de Acciones para la Adaptacin de la UEX al Espacio Europeo de Educacin Superior (Proyectos Pilotos:
modalidad A1) del Vicerrectorado de Docencia e Integracin Europea y financiada por la Junta de Extremadura, el Ministerio de Educacin y Ciencia y la Universidad de Extremadura.
Cualquier forma de reproduccin, distribucin, comunicacin pblica o transformacin de esta obra slo
puede ser realizada con la autorizacin de sus titulares, salvo excepcin prevista por la ley. Dirjase a
CEDRO (Centro Espaol de Derechos Reprogrficos, www.cedro.org) si necesita fotocopiar o escanear
algn fragmento de esta obra.
Los autores.
Universidad de Extremadura, para esta 1 edicin.

Edita:
Universidad de Extremadura. Servicio de Publicaciones
C/ Caldereros, 2 - Planta 2. 10071 Cceres (Espaa)
Tel. 927 257 041 ; Fax 927 257 046
E-mail: publicac@unex.es
http://www.unex.es/publicaciones
ISSN 1135-870-X
ISBN 978-84-7723-910-9
Depsito Legal M-16.788-2010
Impreso en Espaa - Printed in Spain
Maquetacin, fotomecnica e impresin: Dosgraphic, s.l. 914 786 125

PORTADA

NDICE

AUTORES

Dr. Francisco Javier Serrano Aguilera


Dra. Eva Mara Frontera Carrin
Dr. Luis Carlos Gmez Nieto
Dr. Miguel ngel Habela Martnez-Estllez
Dr. Juan Enrique Prez Martn
Dr. David Reina Esojo
Ldo. Rafael Calero Bernal
Dr. Jesualdo Carceln Rodrguez
Ldo. Javier Fernndez Cotrina
Ldo. Jos Antonio Gamito Santos
Dra. Virginia Iniesta Orozco
Ldo. Francisco Javier Pariente Palomino
Ldo. Isidro Surez Lpez
Tcnico. Esp. Lab. Manuel Gmez Blzquez
Tcnico Lab. Isabel Monroy Prez
Tcnico Lab. Victoria Baz Agudo

MANUALES UEX

Tcnico Lab. Pablo Pajares del Sol

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PRLOGO

La asignaturas que actualmente imparte nuestro grupo docente tienen un marcado


carcter experimental y prctico, en el que son imprescindibles la adquisicin de diversas
competencias y destrezas prcticas por parte del alumno, que despus debern aplicar en su
quehacer profesional.
Sin embargo, estas competencias se basan con frecuencia en un conocimiento, que
debido a las limitaciones de tiempo, no es posible adquirir previamente a la prctica que
lo requiere. Esta dificultad, se dificultan an ms nuestra adaptacin al Proceso de Bolonia,
y su filosofa tendente a primar ms la adquisicin de habilidades que los conocimientos
exhaustivos, lo que sin duda puede tener efectos positivos, pero tambin plantea retos docentes importantes.
La dificultad para conjuntar conocimiento y prctica, requiere que los alumnos puedan
acceder en tiempo real y de forma efectiva, a fuentes de informacin que puedan que faciliten la adquisicin de las habilidades y destrezas que en ese momento estn desarrollando, y
que esta misma informacin le permita valorar la utilidad y alcance de la competencia que
est adquiriendo. Por ejemplo, adquirir destreza para encontrar un parsito microscpico
es difcil si no se dispone de una informacin bsica sobre la morfologa del parsito que
va a identificar, y si esto es posible, ser una competencia falta de inters y utilidad para el
alumno, si carece de la informacin necesaria para comprender la relevancia y repercusiones
de ese diagnstico en su practica profesional.

El manual est diseado para que sea una fuente de consulta til para los alumnos de las
dos asignaturas troncales, antes citadas, as como para la asignatura optativa de Diagnstico
y Clnica de las Enfermedades Parasitarias, por la ventaja que supone tener la informacin
unificada en materias tan relacionadas, as como por la economa de medios que lleva implcita. El manual se divide en tres partes principales. La primera est dedicada a la Parasitologa, de mayor inters para los alumnos de la asignatura del mismo nombre, donde se
describen los principales grupos taxonmicos de los parsitos y especies ms representativas, con as abundantes fotografas y dibujos esquemticos que revelen sus caractersticas
morfolgicas y biolgicas principales. El objetivo principal de este captulo es que el alumno
sea capaz de identificar y reconocer la morfologa de los principales parsitos, as como

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MANUALES UEX

Una forma de proporcionar esta informacin adicional a las clases magistrales, cada vez
ms necesaria, la ofrecen sin dudas las llamadas nuevas tecnologas, pero en entornos
como el laboratorio de prcticas, la consulta veterinaria o las prcticas de campo, no es
la mejor opcin. Una gua o manual de prcticas sigue siendo una fuente de informacin
imprescindible e insustituible para el desarrollo de las mismas, especialmente, en asignaturas
como la Parasitologa y las Enfermedades Parasitarias, que requieren un abundante material
iconogrfico.

F. J. SERRANO, E. M. FRONTERA, L. C. GMEZ, M. . HABELA, J. E. PREZ, D. REINA


a sociarlos a unos hospedadores y vas de contagio concretos. La segunda parte, dedicada a
las Enfermedades Parasitarias, recoge especialmente la metodologa de tomas de muestras
y tcnicas diagnsticas que permitirn al alumno que ste sea capaz diagnosticar correctamente las enfermedades parasitarias. La parte final recoge material iconogrfico y anexos de
inters comn para todos los alumnos.
Por ltimo, queremos agradecer al Vicerrectorado de Calidad y Formacin Continua por
su Plan de Adaptacin de la UEx al Espacio Europeo de Educacin Superior, que ha hecho
posible la edicin de este libro.
Junio de 2009

MANUALES UEX

Unidad de Parasitologa
Departamento de Sanidad Animal
Facultad de Veterinaria
Universidad de Extremadura

10

PORTADA

NDICE

NDICE GENERAL
PRLOGO

N
DI
CE

I. PARASITOLOGA

13

Reino protozoa 14
Reino animalia
21
Phylum Plathyhelmintes 21
Phylum Nematoda 31
Phylum Arthropoda 40

II.

T CNICAS DE DIAGNSTICO
PARASITOLGICO 45
1. Toma de muestras y envo al laboratorio

46

2. Examen coprolgico

47

3. Examen de sangre

56

4. Examen de tejido muscular

61

5. Examen de piel

64

6. Examen de vsceras

65

7. Examen de orina y secreciones

67

8. Realizacin y examen de biopsias

68

9. Diagnstico inmunolgico

70

III.

LMINAS DE IDENTIFICACIN

75

IV.

LMINAS DE LESIONES

81

ANEXO 1.

TAXONOMA

89

ANEXO 2. PRINCIPALES GNEROS PARSITOS


SEGN HOSPEDADORES
Y LOCALIZACIONES ORGNICAS

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NDICE

103

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I.PARASITOLOGA

13

PORTADA

NDICE

F. J. SERRANO, E. M. FRONTERA, L. C. GMEZ, M. . HABELA, J. E. PREZ, D. REINA


REINO PROTOZOA
SUBREINO BICILIATA
Phylum Euglenozoa
Clase Kinetoplastea
Orden Trypanosomatida
Familia Trypanosomatidae
Gneros Trypanosoma y Leishmania
3

Amastigote

Epimastigote

Tripomastigote

Promastigote
Morfologa en Trypanosomatidae
1) Nucleo; 2) Kinetoplasto; 3) Flagelo; 4) Membrana ondulante.

Trypanosoma brucei (tripomastigote).

MANUALES UEX

14

PORTADA

Leishmania infantum (amastigote).

NDICE

MANUAL PRCTICO DE PARASITOLOGA VETERINARIA


REINO PROTOZOA
SUBREINO BICILIATA
Phylum Myzozoa
Clase Conoidasida
Orden Eucoccidiorida
Suborden Eimeriorina
Familia Eimeriidae
Gneros Eimeria, Isospora y Cystoisospora
Micropilo
esporocisto
esporozoito

Oprculo
Cuerpo
de Stieda
Glbulo
refractil
A

grnulo polar
residuo ooqustico
residuo esporocstico

Esporozoito
MEROGONIA

Merozoito

Microgameto
GAMETOGONIA

Macrogameto

Ooquiste
ESPOROGONIA

MANUALES UEX

Dibujo esquemtico de los oquistes de Eimeria (A) e Isospora (B) y ciclo evolutivo del gnero Eimeria.

Dibujo e imagen microscpica de oquistes esporulados de Eimeria sp. y Cystoisospora sp. esporulando.

PORTADA

NDICE

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F. J. SERRANO, E. M. FRONTERA, L. C. GMEZ, M. . HABELA, J. E. PREZ, D. REINA


REINO PROTOZOA
SUBREINO BICILIATA
Phylum Myzozoa
Clase Conoidasida
Orden Eucoccidiorida
Suborden Eimeriorina
Familia Cryptosporidiidae
Gnero Cryptosporidium
Infeccin endgena (autoinfeccin)
merozoitos II
esporozoito

trofozoito

microgamentos

merozoitos I

meronte I

meronte II microgametocito macrogameto

ooquiste

ooquiste
esporulado

medio ambiente

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Ciclo de Cryptosporidium sp.

Ooquistes de Cryptosporidium sp. (Heine).


Ooquistes de Cryptosporidium sp.


(Ziehl-Neelsen).

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REINO PROTOZOA
SUBREINO BICILIATA
Phylum Myzozoa
Clase Conoidasida
Orden Eucoccidiorida
Suborden Eimeriorina
Familia Sarcocystidae
Gneros Sarcocystis y Toxoplasma
Suborden Adeleorina
Familia Hepatozoidae
Gneros Hepatozoon

Hospedador definitivo

Esporocistos libres
Hospedador intermediario

Ciclo evolutivo de Sarcocystis miescheriana.

Quiste de Sarcocystis miescheriana (corte


histolgico teido con hematoxilina-eosina).

PORTADA

Hepatozoon canis (gametocitos).

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F. J. SERRANO, E. M. FRONTERA, L. C. GMEZ, M. . HABELA, J. E. PREZ, D. REINA


REINO PROTOZOA
SUBREINO BICILIATA
Phylum Myzozoa
Clase Aconoidasida
Orden Haemospororida
Familia Plasmodiidae
Gneros Plasmodium y Haemoproteus

11

22

33

44

55

66

77

88

MANUALES UEX

Dibujo esquemtico de algunas de las formas evolutivas del gnero Plasmodium en frotis sanguneos:
Plasmodium malarie: trofozoito (1), esquizonte (2), esquizoitos y cuerpo residual dentro del eritrocito (3)
y libres (4), gametocito (5) y (6).
Plasmodium falciparum: gametocito (7) y (8).

Haemoproteus columbae (gametocito).

Plasmodium sp. (varias formas evolutivas).

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MANUAL PRCTICO DE PARASITOLOGA VETERINARIA


REINO PROTOZOA
SUBREINO BICILIATA
Phylum Myzozoa
Clase Aconoidasida
Orden Piroplasmorida
Superfamilia Babesioidea
Familia Babesiidae
Gnero Babesia

Babesia caballi (piroplasmas).


Hospedador invertebrado (garrapata)
Gametogonia

Esporogonia

intestino
Zigoto

Esporocineto
Glndulas
salivares

Gametos

Intestino
Musculatura
Epidermis
T. Malpigi

Hemolinfa

Esporozoito

Gametocitos

Huevo

Larva

Merogonia
Merozoito

Ninfa

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Adulto

Ciclo biolgico de Babesia caballi.

PORTADA

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F. J. SERRANO, E. M. FRONTERA, L. C. GMEZ, M. . HABELA, J. E. PREZ, D. REINA


REINO PROTOZOA
SUBREINO BICILIATA
Phylum Myzozoa
Clase Aconoidasida
Orden Piroplasmorida
Superfamilia Babesioidea
Familia Theileriidae
Gnero Theileria

Theileria annulata (piroplasmas).

Merogonia
linfocito

eritrocito
Glndulas
salivares
esporocineto
Esporogonia

merozoito

cigoto

intestino

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Gametogonia

20

Ciclo biolgico de Theileria annulata.

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REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Plathyhelminthes
Infraphylum Trematoda
Clase Digenea
Gnero Fasciola
ci

vo
in

pg

ac
ov

cd

oo

ut

gm

ce

vd

te

vi

Aparato de fijacin: ventosa oral (vo) ventosa ventral o acetbulo (ac). Aparato digestivo: Boca (rodeada
por la vo), faringe muscular (no representada), esfago e intestinos ciegos ramificados (lneas negras).
Aparato reproductor masculino: 2 testculos (te) ramificados, conductos eferentes (ce), conducto deferente (cd), bolsa del cirro con vescula seminal interna y cirro rodeado de glndulas prostticas (ci) y
poro genital (pg).
Aparato genital femenino: ovario (ov) ramificado, unido mediante un oviducto al ootipo (oo), rodeado de
glndulas de Mehlis (gm) al que tambin desembocan las glndulas vitelgenas (vi) mediante conductos
vitelgenos o viteloductos (vd) transversales, longitudinales y medios. Del ootipo parte el tero y metratermo(ut), repleto de huevos (h) que desemboca en el poro genital (pg) antes citado.

MANUALES UEX

Fasciola hepatica. Tincin con carmn actico y dibujo esquemtico:

21

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REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Plathyhelminthes
Infraphylum Trematoda
Clase Digenea
Gnero Dicrocoelium
vo
pg
ci
ac
te
ov
oo
vi
ut

Dicrocoelium dendriticum. Dibujo esquemtico y tincin con carmn actico:

MANUALES UEX

Se identifican fcilmente ventosa oral (vo), ventosa ventral o acetbulo (ac), testculos (te) ramificados, bolsa
del cirro y cirro (ci), poro genital (pg), ovario (ov), ootipo (oo), glndulas vitelgenas (vi) y tero y repleto
de huevos embrionados en su parte final (detalle). El aparato digestivo consta de boca, rodeada por la
ventosa oral (vo), faringe muscular (engrosamiento visible bajo la vo), esfago y dos intestinos ciegos simples
laterales que llegan hasta el tercio posterior (lneas verde azuladas).

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REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Plathyhelminthes
Infraphylum Trematoda
Clase Digenea
Gneros Paramphistomum y Schistosoma

MANUALES UEX

Paramphistomum cervi (dibujo esquemtico y tincin con carmn actico).

Schistosoma bovis (macho).

PORTADA

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F. J. SERRANO, E. M. FRONTERA, L. C. GMEZ, M. . HABELA, J. E. PREZ, D. REINA


REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Plathyhelminthes
Infraphylum Cercomeromorpha
Clase Cestoidea
Orden Ciclophyllidea
Familia Taeniidae
Subfamilia Taeniinae
Gnero Taenia (=Taeniarhynchus, Multiceps, Hydatigera)
Hospedador definitivo

1
3

Coenuro
cerebralis
(metacestodo)

Anillo
grvido

A
A

4
Huevo
Hospedador
intermediario

11

BB
Ciclo biolgico de Taenia multiceps.

14

MANUALES UEX

12

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.

Ganchos.
Rostelo.
Ventosa.
Proglotis inmaduros.
Canales excretores.
Vagina.
Ootipo.
Ovario.
Glndulas vitelgenas.
tero.
Cirro.
Conducto deferente.
Testculos.
Poro genital.
Huevos.

10

14

15
C
C

Dibujo esquemtico de Taenia sp.


(A=esclex; B=proglotis maduro;
C=proglotis grvido).

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PORTADA

13

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MANUAL PRCTICO DE PARASITOLOGA VETERINARIA

Doble corona de ganchos


Forma de pual rabe

mango
guarda

hoja

Esclex

Rostelo
Ganchos
Ventosas
Cuello
Estrbilo
(progltides
inmaduros)

Dibujo esquemtico del extremo anterior de Taenia sp.

MANUALES UEX

Esquema de las formas larvarias de Taenia (sensu lato):


A) Cisticerco. B) Estrobilocerco. C) Coenuro.

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F. J. SERRANO, E. M. FRONTERA, L. C. GMEZ, M. . HABELA, J. E. PREZ, D. REINA

Esclex de Taenia sp.

Proglotis maduros y grvidos de Taenia sp.

MANUALES UEX

Proglotis grvido de Taenia sp. repleto de huevos.

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Cisticerco Taenia hydatgena (evaginado).

PORTADA

Cenuro de Taenia multiceps (detalle).

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REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Plathyhelminthes
Infraphylum Cercomeromorpha
Clase Cestoidea
Orden Cyclophyllidea
Familia Taeniidae
Subfamilia Echinococcinae
Gnero Echinococcus

Echinococcus granulosus. Dibujo esquemtico y tincin con carmn actico. El ltimo anillo es grvido,
con un tero sacciforme, a diferencia de otros tnidos.

BB

F. serrano 2008
Dibujo esquemtico de un metacestodo de Echinococcus granulosus (quiste hidatdico o Echinococcus
hydatidosus) con dos vesculas hijas, cpsulas prolgeras (A) con protoesclices inviables y viables (B) y
protoesclices libres, en los que se aprecia una corona, de ganchos con forma de pual rabe.

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A
A

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F. J. SERRANO, E. M. FRONTERA, L. C. GMEZ, M. . HABELA, J. E. PREZ, D. REINA


REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Plathyhelminthes
Infraphylum Cercomeromorpha
Clase Cestoidea
Orden Cyclophyllidea
Familia Anoplocephalidae
Gnero Moniezia

glndulas
interproglotdeas
B
Hospedador definitivo
Hospedador intermediario
(caro oribtido)

Huevo

Ciclo biolgico de Moniezia sp.

MANUALES UEX

A=Moniezia expansa; B=Moniezia benedeni.

28

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REINO ANIMALIA

Dibujo esquemtico de Davainea proglottina.

Railletina tetragona (proglotis maduros).

MANUALES UEX

SUBREINO BILATERIA
Phylum Plathyhelminthes
Infraphylum Cercomeromorpha
Clase Cestoidea
Orden Cyclophyllidea
Familia Davaineidae
Gnero Davainea
Gnero Railletina

29

PORTADA

NDICE

F. J. SERRANO, E. M. FRONTERA, L. C. GMEZ, M. . HABELA, J. E. PREZ, D. REINA


REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Plathyhelminthes
Infraphylum Cercomeromorpha
Clase Cestoidea
Orden Cyclophyllidea
Familia Dipylidiidae
Gnero Dipylidium
Hospedador
definitivo

Cpsula
ovgera

Adulto
Ctenocephalides
canis
(Hospedador intermediario)

Huevo

Larva

Ciclo biolgico de Dipylidium caninum.

D. caninum (anillos maduros).

MANUALES UEX

30

PORTADA

D. caninum (anillo grvido).

NDICE

MANUAL PRCTICO DE PARASITOLOGA VETERINARIA


REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Clase Chromadorea (~ Secernentea)
Orden Rhabditida
Suborden Strongylida
Superfamilia Strongyloidea
Familia Strongylidae
Gnero Strongylus
corona radiada
A

festones
B

cpsula bucal

surco dorsal de la glndula esofgica


C

dientes

esfago

Strongylus vulgaris (A); S. equinus (B); S. edentatus (C) (vista lateral).

espcula

c. ventroventral
c. lateroventral

tlamon

c. anterolateral

gubernculo

c. mediolateral
c. posterolateral

cloaca

c. externodorsal

bolsa copuladora

c. dorsal

costillas

Esquema del extremo posterior de los machos del Suborden Strongylida.

MANUALES UEX

31

PORTADA

NDICE

F. J. SERRANO, E. M. FRONTERA, L. C. GMEZ, M. . HABELA, J. E. PREZ, D. REINA


REINO ANIMALIA

MANUALES UEX

SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Clase Chromadorea (~ Secernentea)
Orden Rhabditida
Suborden Strongylida
Superfamilia Strongyloidea
Familia Chabertiidae
Gneros Oesophagostomum y Chabertia

Oesophagostomum dentatum (extremo anterior).

Chabertia ovina (extremo anterior).

32

PORTADA

NDICE

MANUAL PRCTICO DE PARASITOLOGA VETERINARIA


REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Clase Chromadorea (~ Secernentea)
Suborden Strongylida
Superfamilia Ancylostomatoidea
Familia Ancylostomatidae
Gneros Ancylostoma, Uncinaria y Bunostomum

Uncinaria stenocephala (extremo anterior).

Bunostomum trigonocephalum (extremo anterior).

MANUALES UEX

Ancylostoma sp. (extremo anterior).

33

PORTADA

NDICE

F. J. SERRANO, E. M. FRONTERA, L. C. GMEZ, M. . HABELA, J. E. PREZ, D. REINA


REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Suborden Strongylida
Infraorden Trichostrongylina
Gneros Trichostrongylus, Teladorsagia, Haemonchus y Nematodirus

L3 (filariforme)

cutcula
de la L2

muda

cutcula de la L1

Hospedador

L2 (rabditiforme)
muda

huevo
L1 (rabditiforme)

mrula

eclosin

Ciclo biolgico general de los nematodos gastrointestinales del Suborden Strongylida.

Ostertagia circumcincta (bolsa copuladora ).

Haemonchus contortus (bolsa copuladora ).

Nematodirus spathiger (bolsa copuladora ).

MANUALES UEX

Trichostrongylus retortaeformis (bolsa copuladora ).

34

PORTADA

NDICE

MANUAL PRCTICO DE PARASITOLOGA VETERINARIA


REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Clase Chromadorea (=Secernentea)
Suborden Strongylida
Superfamilia Trichostrongyloidea
Familia Dictyocaulidae: Gnero Dictyocaulus

L3

L1

L2

Ciclo biolgico de Dictyocaulus viviparus.

Dictyocaulus viviparus (bolsa copuladora ).

Superfamilia Metastrongyloidea
Familia Metastrongylidae
Gnero Metastrongylus
Hospedador
intermediario

Hospedador
definitivo
Huevo
larvado

Ciclo biolgico Metastrongylus apri.

Hospedador
definitivo

Metastrongylus apri (extremo posterior).

Hospedador
intermediario
L1

Familia Protostrongylidae
Gneros Protostrongylus, Muellerius,
Neostrongylus y Cystocaulus

PORTADA

Ciclo biolgico Muellerius capillaris.

NDICE

MANUALES UEX

35

F. J. SERRANO, E. M. FRONTERA, L. C. GMEZ, M. . HABELA, J. E. PREZ, D. REINA


REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Orden Ascaridida (=Ascaridomorpha)
Superfamilia Ascaridoidea
Familia Ascarididae
Gneros Ascaris, Parascaris, Toxocara y Toxascaris

Toxocara mystax (extremo anterior).

Ascaris suum en intestino delgado de cerdo.

MANUALES UEX

Superfamilia Heterakoidea
Familia Heterakidae
Gnero Heterakis
Familia Ascaridiidae
Gnero Ascaridia

36

Heterakis sp. (extremo posterior).

PORTADA

NDICE

MANUAL PRCTICO DE PARASITOLOGA VETERINARIA


REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Orden Oxyurida (=Oxyuridomorpha)
Familia Oxyuridae
Gneros Oxyuris, Enterobius, Passalurus y Skrjabinema
Familia Heteroxynematidae
Gnero Aspiculuris

Aspiculuris tetraptera (extremo posterior ).

Passarulus ambiguus (extremo anterior).

Passarulus ambiguus (zona uterina


y extremo posterior ).

Passarulus ambiguus (huevo).

MANUALES UEX

37

PORTADA

NDICE

F. J. SERRANO, E. M. FRONTERA, L. C. GMEZ, M. . HABELA, J. E. PREZ, D. REINA


REINO ANIMALIA

MANUALES UEX

SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Orden Spirurida (=Spiruromorpha)
Superfamilia Habronematoidea
Gneros Habronema y Draschia
Superfamilia Filarioidea
Gneros Dirofilaria y Onchocerca
Superfamilia Spiruroidea
Gneros Gongylonema, Spirocerca y Ascarops

Dirofilaria immitis (Microfilarias, L1).

Gongylonema pulchrum (extremo anterior).

Ascarops strongylina (extremo anterior).

Ascarops strongylina (extremo posterior ).

38

PORTADA

NDICE

MANUAL PRCTICO DE PARASITOLOGA VETERINARIA


REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Nematoda
Clase Enoplea (~Adenophorea)
Orden Trichinellida
Superfamilia Trichinelloidea
Gneros Trichuris, Capillaria y Trichinella

Capillaria aerophila (detalle tero ).

Trichuris skrjabini (Esfago glandular).

msculo
esqueltico

L1 madura

Larvas
emigrantes

Ciclo biolgico de Trichinella sp.

PORTADA

epitelio
intestinal

MANUALES UEX

quiste

39

NDICE

F. J. SERRANO, E. M. FRONTERA, L. C. GMEZ, M. . HABELA, J. E. PREZ, D. REINA


REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Arthropoda
Clase Arachnida
Subclase Acari
Superorden Parasitiformes
Orden Mesostigmata (=Gamasida). Gnero Dermanyssus
Orden Metastigmata (=Ixodida)
Familia Argasidae (Garrapatas blandas)
Familia Ixodidae (Garrapatas duras)

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Hyalomma lusitanicum y (Ixodidae) (vista dorsal).

Ornithodoros erraticus (Argasidae) (vistas dorsal y ventral).

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REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Arthropoda
Clase Arachnida
Subclase Acari
Superorden Acariformes
Orden Astigmata (~Sarcoptiformes) (caros de la sarna)
Orden Trombidiformes. Gnero Demodex (sarna demodcica)

Sarcoptes scabiei suis.

Psoroptes equi cunicui.

Huevo de Sarcoptes scabiei suis.

Demodex canis.

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REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Arthropoda
Clase Insecta
Orden Phthiraptera
Subrdenes Anoplura, Amblycera, Ischnocera
Orden Hemiptera
Orden Siphonaptera

Bovicola (~Damalinia) caprae (Ischnocera).

Haematopinus suis (Anoplura).

Triatoma infestans (Hemiptera).

Ctenocephalides canis (Siphonaptera).

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REINO ANIMALIA
SUBREINO BILATERIA
Phylum Arthropoda
Clase Insecta
Orden Diptera
Suborden Nematocera
Suborden Brachycera (Tabanomorpha y Muscomorpha)

Gasterophilus sp. (L3 en estmago de quido).

Oestrus ovis (diferentes estadios larvarios).

2.Larvas 1 en esfago.

3.Larvas 3 en dorso de vacuno.

4.Pupas.

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1.Imago.

Fases del ciclo biolgico de Hypoderma lineatum.

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II.TCNICAS DE DIAGNSTICO PARASITOLGICO

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1.TOMA DE MUESTRAS Y ENVO AL LABORATORIO
1.1. Heces
Se debe intentar siempre que la recogida de heces se realice directamente del recto del
animal, para evitar as posibles contaminaciones por nematodos de vida libre que se encuentran en el medio ambiente, dificultando a veces el diagnstico coprolgico.
Las heces se depositan en un frasco limpio con un algodn hmedo, o bien en bolsas hermticamente cerradas y en un ambiente de humedad. Si las heces estn secas, no se pueden
utilizar para diagnstico, ya que los elementos de diseminacin pueden estar deteriorados. Una
vez realizada esta operacin, se recomienda el envo rpido al laboratorio para su procesado.
Es muy importante que los botes o bolsas estn debidamente etiquetados, completamente
limpios, hermticamente cerrados y se les incorpore una anamnesis completa de la explotacin y/o del animal objeto de estudio.
1.2.Sangre
La sangre debe enviarse entera y/o con anticoagulante, conservndose refrigerada a 4C
hasta su remisin al laboratorio. Al igual que las heces, debe mandarse debidamente identificada aadindose la correspondiente anamnesis.
En la extraccin se debe evitar por todos los medios que los eritrocitos se hemolicen, ya que
en estos casos se dificulta en gran medida el diagnstico de algunos parsitos intraeritrocitarios.
Tambin se puede enviar al laboratorio frotis sanguneos fijados previamente con metanol
u otro medio.
Para diagnsticos serolgicos se toma sangre entera y se espera hasta que se forme un cogulo, extrayndose el suero sanguneo y se procede a su congelacin. Tambin en los casos
de sangre con anticoagulante se realiza una centrifugacin, extrayndose el plasma y conge
lndose hasta el momento de su uso.

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1.3. Vsceras y tejido muscular

46

Las vsceras deben remitirse debidamente identificadas al laboratorio, refrigeradas y en el


menor tiempo posible, o bien en frascos con glicerina, creando un ambiente anaerobio que
evite la putrefaccin. En el caso del tejido muscular, la remisin debe hacerse debidamente
identificada y con la muestra refrigerada.
1.4. Piel
Primeramente se procede al raspado con bistur en los bordes de las depilaciones hasta
que brote un poquito de sangre. El material recogido, incluida la cuchilla de raspado, se

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manda al laboratorio en bolsa de plstico, placa de Petri o frasco hermticamente cerrado e
identificado. Sera conveniente el envo de dos raspados por animal para remitir muestra del
mismo tambin al laboratorio de patologa infecciosa.

2. EXAMEN COPROLGICO
2.1.Examen directo de heces frescas
En un portaobjetos, sobre una gota de suero fisiolgico templado (38-40C), se coloca una
pequea cantidad de heces, a ser posible tomada del centro de la masa fecal.
Se mezclan perfectamente hasta conseguir una capa fina. La extensin debe tener un grado
de transparencia suficiente para que un texto, colocado debajo del portaobjetos, se pueda
leer sin dificultad.
Se coloca un cubreobjetos y se observa al microscopio.
Para una mejor visualizacin de protozoos mviles (trofozoitos de Giardia, Chilomastix,etc.)
o sus quistes, alternativamente se puede poner una gota de lugol en el portaobjetos para
hacer la extensin con las heces, as como otras tcnicas de tincin (hematoxilina-cristal
violeta, etctera).
Indicaciones
Esta tcnica permite reconocer cualquier elemento de diseminacin de los parsitos, pero
en caso de no observar ninguna forma parasitaria por este mtodo, no debe descartarse la
posibilidad de una parasitosis, ya que el tamao de la muestra es tan pequeo que el resultado negativo no es excluyente. Sin embargo, no es sustituible por su sencillez, rapidez y
fundamentalmente porque algunos parsitos no son evidenciables por otras tcnicas, que
en general son mucho ms sensibles, siendo de especial utilidad para la deteccin de protozoos mviles.
2.2.Mtodos de enriquecimiento (cualitativos)

Este sistema se basa en lograr la concentracin de los elementos de diseminacin (huevos,


larvas y quistes) por flotacin en un lquido de mayor densidad que ellos.
La densidad de los elementos de diseminacin de los parsitos oscila generalmente entre
1,05 y 1,10. La densidad de las soluciones empleadas, no debe ser excesivamente alta para
que no deformen los elementos parasitarios y para que no floten otras partculas slidas presentes en las heces.

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2.2.1.Flotacin

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a) Flotacin en solucin saturada de NaCl
Probablemente sea la solucin ms empleada y la que ofrece ms ventajas. Tiene una
densidad de 1,18 y se prepara hirviendo una solucin en exceso de sal comn durante unos
minutos. Se deja enfriar, se filtra y se ajusta a la densidad indicada.
Tcnica
Se mezcla una pequea cantidad de heces con solucin saturada de NaCl en un vial de
paredes rectas (Fig. 1, dibujo 1, 2 y 3).
Con unas pinzas se disgregan perfectamente las heces (Fig. 1, dibujo 4).
A continuacin se agrega suficiente solucin para que se forme un menisco convexo en la
superficie del vial (Fig. 1, dibujo 5).
Sobre este menisco convexo, se coloca un cubreobjetos con una superficie mnima
de 1818 mm, teniendo la precaucin de evitar que se formen burbujas de aire en la
superficie del lquido de flotacin, o que floten porciones de heces sin disgregar (Fig. 1,
dibujo6). Si esto ltimo resulta difcil de evitar, la suspensin de heces se puede realizar
en otro recipiente y tras filtrarla mediante una doble gasa, se coloca en el vial mediante
una pipeta Pasteur.

Figura 1. Secuencia para la realizacin de la tcnica coprolgica de flotacin.

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Se esperan 45 minutos y se recoge el cubreobjetos, mantenindolo en posicin horizontal


para que no se desprenda la gota de solucin salina que queda adherida al mismo. Con
un movimiento suave se coloca sobre un portaobjetos (Fig. 2) y se examina a 40x y 100x
con el diafragma cerrado. Debe examinarse sin dilacin, ya que la solucin salina de la
preparacin se cristaliza por completo en pocos minutos.

48

Cuando se dispone de una centrfuga, la suspensin se puede centrifugar a 1.500 rpm


durante 3 minutos. En los tubos de centrfuga se coloca un cubreobjetos de la misma
manera que se ha descrito anteriormente. Se recoge el cubreobjetos, se deposita sobre
un porta y se observa al microscopio. Para la investigacin de Giardia, Chilomastix, etc.,
se colorea la preparacin con lugol. Este procedimiento, si bien es ms rpido, es menos
preciso que el anterior.

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Figura 2. Colocacin del cubre sobre el portaobjetos.

Indicaciones
Es la tcnica ms empleada en cualquier laboratorio de parasitologa. Con ella se pueden
observar la mayora de los huevos y larvas de nematodos, los ooquistes de coccidios y algunos huevos de cestodos.
Sin embargo, no flotan los huevos de trematodos, los cestodos seudofilideos, ni las larvas
de nematodos pulmonares, para los que habra que utilizar soluciones de mayor densidad.
b) Otras soluciones empleadas para mtodos de flotacin
Solucin al 33% de Sulfato de Zinc (densidad de 1,33), solucin al 35% de Sulfato Magnsico (densidad de 1,28), solucin de N2O3Na (densidad de 1,360), solucin de sacarosa
(densidad 1,2). Estas soluciones estn recomendadas para el diagnstico de las formas de
diseminacin de mayor densidad, como Fasciola heptica en rumiantes, Metastrongylus en
cerdos, de Spirocerca lupi en el perro, etctera.
2.2.2.Sedimentacin
Se trata de concentrar los posibles elementos de diseminacin existentes en las heces por
simple gravedad.
Tcnica
Se pasa la suspensin a travs de un tamiz (doble gasa) en una copa de 500 cc y se llena
seguidamente de agua hasta aproximadamente 2,5 cm del borde.
Aadir 2-3 gotas de Azul de Metileno o Verde Malaquita (opcional). Esto teir los restos
vegetales, pero no los elementos de diseminacin parasitarios, facilitando en gran medida
su bsqueda al microscopio ptico.
Se deja reposar 30-40 minutos.

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Se mezclan varios gramos de heces con agua hasta que la disgregacin sea completa.

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Quitar el sobrenadante hasta la marca de 100 cc y volver a llenar con agua hasta el mismo
nivel.
Se repite el procedimiento hasta que el sobrenadante permanezca ms o menos transparente (lo ideal es repetirlo 3 4 veces).
Para terminar este procedimiento, se elimina el sobrenadante y se examina el sedimento al
microscopio. Para ello, se recogen al menos 9 gotas del sedimento con una pipeta Pasteur,
las cuales se depositan en un portaobjetos y se les coloca un cubreobjetos, visualizndose
al microscopio con el diafragma cerrado. Tambin puede examinarse todo el sedimento
restante a pocos aumentos en una placa de Petri, buscando en el esteromicroscopio (o un
trichinelloscopio de pantalla) los huevos de Fasciola u otros elementos de diseminacin de
tamao considerable.
Indicaciones
Se recomienda el mtodo de sedimentacin para el diagnstico de quistes de amebas y
ciliados, huevos de trematodos y de cestodos seudofildeos, ya que por su elevado peso no se
detectan por las tcnicas usuales de flotacin, anteriormente mencionadas.
Esta tcnica tiene la ventaja de recuperar todos los huevos de helmintos, larvas de nematodos, y quistes de protozoos en condiciones de viabilidad y sin distorsin; no obstante tiene
el inconveniente de consumir excesivo tiempo y concentrar muy poco las formas parasitarias;
de tal forma, que es ms difcil visualizarlas.
Los mtodos de flotacin y sedimentacin son tcnicas cualitativas de concentracin que
se complementan y se utilizan sistemticamente ambas para el diagnstico coprolgico.
2.3.Coprocultivos o incubacin de heces
Se trata de mantener las heces en condiciones adecuadas de humedad, temperatura y
oxigenacin para que los elementos parasitarios evolucionen y alcancen estadios en que la
identificacin resulte ms fcil y exacta, simulando las condiciones que se producen en el
medio ambiente.
2.3.1. Esporulacin de ooquistes de coccidios

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Para la identificacin correcta de coccidios son necesarios ooquistes esporulados. Para


que dicho proceso se desarrolle (esporulacin-esporogonia) se procede como sigue:

50

En una placa de Petri, se mezclan las heces que contienen los ooquistes con una solucin
de dicromato potsico al 2%, el cual, adems de dar humedad al medio, posee accin
bactericida y fungicida.
La placa se introduce en una estufa a temperatura adecuada (20-25C).
Se ventilar a diario para proporcionar a los ooquistes el oxgeno necesario.

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Diariamente se podrn examinar por flotacin los ooquistes para controlar el desarrollo de
los esporozoitos.
2.3.2. Incubacin de huevos de Strongylida
En muchas parasitosis producidas por agentes pertenecientes al Orden Strongylida, el
estudio de los huevos encontrados en las heces no es suficiente para determinar la familia y/o
el gnero de los parsitos implicados, por falta de peculiaridades morfolgicas y morfomtricas diferenciadoras. En tales casos, las heces positivas se depositan en un medio que imite
las condiciones medioambientales naturales, en las que los huevos embrionan (embriognesis), eclosionan y experimentan una doble muda hasta alcanzar la fase o estadio de larva 3.
stas tienen unas caractersticas morfolgicas y morfomtricas diferenciadoras entre gneros
y especies.
Tcnica
La muestra de heces de introduce en una placa de Petri y se le adiciona agua templada para
proporcionarle humedad suficiente.
Se lleva a una estufa (20-25C) durante 7-10 das. Si no se dispone de estufa, la embriognesis tambin se producir, pero dependiendo de la temperatura ambiental. A mayor
temperatura, menor tiempo y viceversa.
Cada da se controlar la humedad y se ventilar el coprocultivo durante unos minutos.
Una vez transcurrido este tiempo, las heces se colocan en el aparato de Baermann para el
aislamiento de las larvas y su posterior identificacin (ver a continuacin).
2.4.Mtodo de Baermann para el aislamiento de larvas de nematodos en heces

Las larvas son muy activas y presentan hidrotropismo positivo, migrando de las heces y
sedimentndose en el fondo del tubo de goma conectado al embudo.
A partir de 3-6 horas (tiempo mximo necesario 12-24 horas) se depositan sobre un vidrio
de reloj las primeras gotas del sedimento, examinndose al estereomicroscopio.
Con una pipeta se recogen algunas larvas y se depositan entre porta y cubre, examinndose
a microscopa ptica.
La muestra objeto de anlisis se puede mezclar con una o dos gotas de lugol para fijar y
colorear las larvas y hacer as ms fcil su identificacin.
Si no disponemos de aparato Baermann, el aislamiento de las larvas se puede realizar en
una copa de sedimentacin llena de agua templada sobre la que depositaremos un colador

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Se monta el aparato de Baermann. El embudo se llena de agua templada y sobre sta es


depositada la muestra (sobre gasas y tamiz), de manera que se produzca un contacto suave
entre las heces y agua.

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y una gasa. Sobre sta se deposita la muestra, de tal forma que las larvas migren hasta el
fondo de la copa. Finalmente, con cuidado se retira el sobrenadante y se recogen las larvas
del sedimento.
2.5.Examen cuantitativo (Mtodo de McMaster)
Sirve para realizar una estimacin aproximada de la carga parasitaria, y por tanto se su
posible significacin clnica, a travs del nmero de ooquistes, huevos o larvas por gramo
de heces.
La cmara de McMaster consta de dos compartimentos independientes y abiertos lateralmente que estn cubiertos por un cubreobjetos.
Cada compartimento tiene una altura de 0,15 cm y en el cubreobjetos tiene trazado un
cuadrado de 1 cm de lado, dividido en calles para facilitar el contaje. Por tanto, el volumen
que se examina de cada cmara es de 0,15 cc (volumen total de 0,3 cc).

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Su procedimiento es como sigue:

52

Suspender cuidadosamente 2 gramos de heces en solucin saturada de NaCl hasta un


volumen final de 60 ml (aproximadamente 58 ml).
Filtrar la suspensin por una doble gasa, presionando finalmente sobre la malla. De esta
forma, son eliminadas las partculas ms groseras.
Agitar suavemente la suspensin, para homogeneizarla perfectamente, con el objeto de
distribuir uniformemente los elementos de diseminacin.
Inmediatamente, llenar con una pipeta los compartimentos de la cmara de McMaster,
evitando que se formen burbujas de aire (Fig. 3).
Colocar la cmara de McMaster en el microscopio, y dejarla reposar unos 5 minutos para
que los elementos parasitarios floten y acumulen en la parte superior de la cmara.
Enfocar a 40 aumentos (objetivo 4x) las lneas dibujadas en la parte superior de la cmara
y centrar el campo en el extremo de la primera calle. Sin mover la cmara, cambiar el
objetivo de 4x a 10x (100 aumentos) y ajustar el enfoque. No debe intentar enfocar la
cmara a mayores aumentos, ni intentar enfocar su parte inferior, ya que podra romperla
con el objetivo del microscopio. Slo debe realizar ligeras correcciones de enfoque durante el recuento, tomando nicamente como referencia las lneas de la cmara. No intente enfocar partculas que vea borrosas cuando las lneas estn bien enfocadas, ya que
eso implica que estn en un plano inferior de enfoque (y que por tanto no estn en el parte
superior de la cmara).
Realizar el contaje siguiendo las calles o columnas marcadas en ambas cmaras. Como
la suspensin de heces est en la relacin 1 g en 30 cc (2 g en 60 cc), y se examina un
volumen total de 0,3 cc, este contaje equivale al examen de 0,01 g de heces. Por tanto,
la cantidad de elementos de diseminacin por gramo de heces es la suma del contaje de
ambos compartimentos multiplicado por 100.

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Figura 3. Cmara McMaster.

Si el nmero de huevos u ooquistes en cada calle es muy bajo, es conveniente repetir el


contaje varias veces y obtener la media. Por el contrario si es muy alto y difcil de contar,
se pueden contar una sola cmara, o slo algunas calles, extrapolando el resultado a las
calles restantes, o bien repetir el contaje diluyendo parte de la suspensin sobrante a un
volumen apropiado segn la intensidad de la infestacin, y multiplicar el contaje final por
ese factor de dilucin (por ejemplo si diluimos la suspensin a examinar al 1/10, en contaje
final se deber multiplicar por 10).

Si se requiere una mayor sensibilidad, un simple modificacin consiste en duplicar el


tamao de la muestra de heces sin modificar el volumen final (4 g de heces en 56 ml de solucin salina) por lo que el contaje de ambas cmaras se debe multiplicar por 50. Una ventaja
adicional de esta modificacin es que la suspensin de heces sobrante se puede emplear
para rellenar unos viales con una pipeta Pasteur y realizar la tcnica de flotacin a partir del
punto indicado en el dibujo 5 de la figura 1. Esto permite simplificar la rutina en el laboratorio, al aunar los primeros pasos de ambos mtodos y poder realizar simultneamente ambas

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Con este mtodo, por tanto, el recuento mnimo es de 100 elementos de diseminacin
por gramo de heces. Esta sensibilidad suele ser suficiente en la prctica, dado que los contajes
inferiores se corresponden a cargas parasitarias muy leves que no suelen tener significacin
clnica.

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tcnicas, con el consiguiente ahorro de tiempo. Adems, la flotacin realizada de esta forma
es preferible, ya que se parte siempre de la misma cantidad de heces, y gracias al filtrado se
evita que algunas heces no se disgregan fcilmente en el vial o queden partculas gruesas que
floten y dificulten el examen del cubreobjetos.
Para una mayor sensibilidad se ha descrito (FAO Animal Health Manual) otra modificacin de este mtodo cuantitativo con una sensibilidad de hasta 20 huevos/g heces, con la
ventaja adicional de que tras la recogida y un procesamiento inicial, las muestras se pueden
mantener refrigeradas a 4C hasta 1 semana sin que se altere el nmero de huevos en la
muestra, lo que puede resultar conveniente cuando el nmero de muestras a procesar es muy
alto. El procedimiento es como sigue:
Pesar 4 g de heces y aadirle 56 ml de agua.
Mezclar adecuadamente con una esptula y dejar reposar 30 minutos para su correcta
homogeneizacin.
Filtrar la mezcla a travs de una gasa a un segundo vaso de precipitado e inmediatamente
despus verter 10 ml de esta solucin a un tubo de centrifuga.
Centrifugar 7 minutos a 1.200 rpm.
Retirar el sobrenadante, teniendo cuidado de no remover el sedimento (en este paso se
puede interrumpir el proceso, conservando estos tubos con el sedimento en el refrigerador,
hasta 7 das).
Aadir al sedimento 4 ml de una solucin de flotacin (solucin salina sobresaturada+glucosa) mezclando cuidadosamente usando una pipeta Pasteur.
Finalmente, rellenar la cmara McMaster evitando la formacin de burbujas y dejar
3-5minutos para permitir la flotacin de todos los huevos. Se cuentan el total de huevos
y el resultado se multiplica por 20.
2.6.Identificacin de ooquistes de Cryptosporidium sp.

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Los ooquistes de Cryptosporidium son difciles de identificar por su pequeo tamao


(prximo a 5 m), falta de estructuras claramente visibles y su similitud con otros elementos
normales de las heces, en especial las levaduras.

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Existen varios mtodos de tincin aceptables, pero es conveniente que vayan precedidos
de un mtodo de concentracin, dado que pueden eliminarse en concentraciones muy bajas
en enfermos leves o portadores. No obstante, por su rapidez, la tincin directa de las heces
puede utilizarse como cuando se trata de comprobar si estn implicados en las diarreas neonatales o diarreas de animales inmunodeprimidos.
2.6.1.Tincin por el Mtodo de Heine
Depositar una pequea porcin de heces sobre un porta y extender un poco.
Teir con fuchsina bsica fenicada durante unos segundos.

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Eliminar el colorante sobrante y dejar secar.
Observar a microscopa con objetivo de 40x o de inmersin (100x).
2.6.2.Tincin por el Mtodo de Kinyoun modificado
Realizar una extensin fina de heces en un portaobjetos.
Dejar secar.
Fijar a la llama durante unos 6 segundos.
Fijar con metanol durante 5 minutos. Dejar secar.
Teir con fuchsina bsica fenicada durante 10 minutos.
Lavar con agua.
Decolorar el exceso de fuchsina con alcohol-clorhdrico hasta que la parte ms fina de la
extensin sea transparente (aproximadamente 10 segundos).
Lavar con agua para arrastrar el exceso de colorante.
Teir con una solucin de verde malaquita al 5% durante 20-30 segundos.
Lavar de nuevo con agua.
Dejar secar y observar al microscopio ptico con el objetivo de inmersin.
2.6.3.Tincin por el Mtodo de Ziehl-Neelsen modificado
Extensin muy fina de heces en un portaobjetos. Dejar secar.
Fijacin con metanol o alcohol absoluto durante 5 minutos. Dejar secar.
Teir con fuchsina bsica fenicada durante 60 minutos.
Lavar con agua.
Decolorar con cido sulfrico al 2% durante 10-15 segundos con el porta en agitacin, o
con alcohol clorhdrico hasta alcanzar una coloracin plida (de 5 a 10 segundos).
Lavar con agua.
Tincin de contraste con Verde Malaquita o Azul de Metileno al 5% durante 30 segundos.
Lavar, secar y observar al microscopio.

Extensin muy fina de heces en un portaobjetos.


Dejar secar.
Fijacin con metanol o alcohol absoluto durante 5 minutos.
Dejar secar.
Teir con Giemsa (3 gotas/litro de H2O) durante 25 a 30 minutos.
Lavar con agua.
Dejar secar.

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2.6.4.Tincin con Giemsa

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Preparacin de colorantes
Fuchsina bsica fenicada
Fuchsina bsica..............................................................................
Alcohol etlico al 95%...................................................................

1g
10 ml

Mezclar con 5 ml de fenol (fundir los cristales previamente al bao mara) en 95 ml de


agua destilada.
Verde malaquita
Verde malaquita.............................................................................
Agua destilada................................................................................

5g
100 ml

3. EXAMEN DE SANGRE
3.1.Tcnicas para el diagnstico de microfilarias
3.1.1. Examen en fresco
Se deposita una gota de sangre fresca (con anticoagulante) entre porta y cubre, examinndose a microscopa con luz poco intensa. La existencia de microfilarias (larvas 1) es observada por los activos movimientos de stas entre los elementos formes.
Es una tcnica fcil y que no requiere prcticamente material. Es importante observar
varias preparaciones debido a la poca cantidad de sangre que es observada. La no observacin de microfilarias no es excluyente, habiendo de recurrir a otros mtodos ms fiables
(mtodos de concentracin).
3.1.2. Mtodo del tubo microhematocrito
Este mtodo consiste en realizar un hematocrito con la muestra de sangre. Posteriormente
se observa al microscopio ptico la zona del tubo microhematocrito situada entre los glbulos blancos y plasma, localizacin donde se sitan las microfilarias (Fig. 4).

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3.1.3. Mtodo de Knott

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Se trata de un mtodo de concentracin de microfilarias.


Se mezcla 1 ml de sangre con 9 ml de formalina al 2%.
Centrifugacin durante 8 minutos a 1.500 rpm. Posteriormente, se desecha el sobrenadante
y se examina el sedimento al microscopio (adicionar una gota de colorante).

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x100

Figura 4. Localizacin de las microfilarias en el tubo microhematocrito.

3.1.4. Mtodo de filtracin


Es tambin un mtodo de concentracin de microfilarias, que consiste en:

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Se mezcla, agitando, 1 ml de sangre con 9 ml de formalina al 2% en una jeringa de


10-12ml para lisar los eritrocitos.
Se prepara la cmara de filtracin, colocando sobre la rejilla metlica del portamembranas una membrana de policarbonato de 5 m de dimetro de poro (Fig. 5). Sobre esta
se coloca una arandela y la parte superior de la cmara, que se enrosca sobre el portamembranas.

Figura 5. Cmara de filtracin y membrana de policarbonato.

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Se introduce el cono de la jeringa en la parte superior de la cmara de filtracin y se inyecta
despacio la solucin lisada a travs del filtro (si se atasca no se debe forzar la inyeccin de
lquido, sino aspirar un poco, mezclar el lisado restante en un tubo apropiado con 10ml
de formalina, agitar nuevamente, y filtrarlo nuevamente, o en una segunda membrana).
Enjuagar el filtro lentamente con 10-15 ml de agua para eliminar el exceso de clulas y
detritus.
Posteriormente, se desenrosca la cmara de filtracin y se retira el filtro, colocndolo en un
portaobjetos manteniendo el material filtrado hacia arriba.
Teir con una o dos gotas de colorante en el centro de la membrana y se coloca un cubreobjetos de tamao apropiado sobre el filtro. Es conveniente esperar 30 segundos para
obtener la mxima tincin.
Finalmente, para visualizar las microfilarias teidas, se observa la membrana al microscopio ptico a 100 aumentos.
Si se observan microfilarias, deben diferenciarse por las caractersticas morfolgicas y
morfomtricas que no se aprecian bien por este mtodo, por lo que deben estudiarse
mediante tincin en Giemsa o similar, previa concentracin por el mtodo de Knott si es
necesario. Dado que algunas de estas caractersticas no son fciles determinar, y varios
autores sealan cierto solapamiento de tamaos entre las distintas especies de microfilarias,
es interesante la tincin diferencial mediante el mtodo de la fosfatasa cida, ya que ste
permite obtener una tincin diferencial de esta enzima en cada una de las microfilarias
comunes en los cnidos.
3.1.5. Mtodo de la fosfatasa cida
Reactivos
Reactivo I
Tampn acetato veronal de Michaelis o solucin de Glicina-NaOH 50 mM
pH = 10.
Reactivo II (guardar a 4C, pues se mantiene estable algunas semanas)
Naphtol AS-TR-phosphato..............................................................
N,N-dimetilformamida...................................................................

0,05 g
5 ml

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Reactivo III (Disolver en agua, calentndolo. Aadir HCl y enfriar. Guardar a 4C)

58

Pararosanilina.................................................................................
Agua destilada................................................................................
HCl................................................................................................

1g
20 ml
5 ml

Reactivo IV (A 4C o temperatura ambiente)


NaNO2...........................................................................................
Agua destilada................................................................................

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4g
100 ml

MANUAL PRCTICO DE PARASITOLOGA VETERINARIA


Reactivo V (Verde Metilo 1%; se mantiene a temperatura ambiente)
Sol. a) Na2HPO4............................................................................
Agua destilada................................................................................
Sol. b) cido ctrico. H2O..............................................................
Agua destilada................................................................................
Sol. de trabajo: a)...........................................................................
b)...........................................................................
Verde metilo...................................................................................

28,396 g
1.000 ml
21,011 g
1.000 ml
77,1 ml
122,9 ml
2g

Sustrato
20 ml de sol I
50 ml de agua destilada
4 ml de sol II
Mezclar 3,2 ml de sol III y IV y aadir a lo anterior (estables a 4C ms de 6 meses) y
ajustar a pH 5 con sosa 0,1 N. Hacer justo antes de su uso.
Metodologa
Se incuban las muestras utilizando el sustrato 1 h a 37C o 2 h a 25C.
Lavar con agua destilada.
Contratincin con sol V 2 3 minutos (opcional).
Deshidratar con alcohol etlico de 95.
Lavar en xileno y montar.

Dirofilaria immitis tiene un tamao medio de 3087m (2995-6,5), de movimientos


no progresivos, que una vez fijadas y teidas (hematoxilina) aparecen con el cuerpo
extendido, con un estrecho extremo ceflico de 11,5m y un recto extremo caudal de
28m de media. Adems, posee estriaciones cuticulares, evidenciables una vez teidas
con hematoxilina. Por la tcnica histoqumica antes descrita se detecta la presencia de
actividad de la fosfatasa cida de forma concreta y marcada en poro anal y poro excretor
(Fig. 6, dibujo 1).
Dirofilaria repens aparece en el mtodo de la fosfatasa cida con una zona con coloracin roja en el poro anal, si bien puede aparecer alguna coloracin rojiza en el centro del
cuerpo y otras zonas (Fig. 6, dibujo 2).
Dipetalonema dracunculoides aparece con este mtodo con una tincin intensa el poro
anal y una zona superior del cuerpo, as como coloraciones de menor intensidad en otras
zonas, como el poro excretor, espacio ceflico (Fig. 6, dibujo 3) y es de menor tamao
que las microfilarias de D. immitis.

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Diferenciacin de microfilarias

59

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Figura 6. Tinciones
histoqumica
de distintas especies
de microfilarias por mtodo
fosfatasa cida.

Las microfilarias de Dipetalonema reconditum son tambin ms pequeas y con movimientos de progresin rpida a intervalos, con un prominente gancho ceflico y un extremo anterior obtuso. Varios autores sealan solapamiento de tamao con las de D. immitis,
lo que hace interesante su tincin con esta tcnica para demostrar la actividad de fosfatasa cida prcticamente por todo el cuerpo (Fig. 6, dibujo 4), en tres o cuatro reas
extensas, o slo en los dos tercios distales, con mayor intensidad en los poros anales y
excretores.

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3.2.Tcnicas para el diagnstico de protozoos hemticos: frotis de sangre teidos


con Giemsa

60

Para realizar el frotis sanguneo, se deposita una gota de sta aproximadamente a 2 mm


del extremo del porta.
Se contacta con la gota el extremo de otro porta, dejando que se extienda la sangre a lo
largo de la superficie de contacto.
A continuacin, se desliza rpidamente el porta formando un ngulo de 30-45; con lo
cual, se logra una extensin fina de sangre.
Dejar secar y, a continuacin, proceder a la fijacin con metanol (durante aproximadamente 5 minutos) y tincin con Giemsa mediante tcnicas de tincin hematolgicas rpidas
(Panptico rpido, Diff-Quick, etctera).

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4. EXAMEN DE TEJIDO MUSCULAR
4.1.Triquineloscopia o trichinelloscopia
Esta tcnica diagnstica consiste en una inspeccin microscpica de tejido muscular para
la bsqueda de larvas 1 de Trichinella spp. enquistadas.
El Reglamento 2075/2005 de la Comisin Europea obliga a tomar muestras en cerdos
domsticos de los pilares del diafragma, concretamente de la zona de transicin muscular y
tendinosa del mismo, debiendo tomar 28 muestras del tamao de un grano de avena por cada
pilar del diafragma. Cuando no se disponga de los dos pilares, se pueden tomar 56 muestras
de diferentes zonas de ese nico pilar. Para el caso de jabales, las muestras se tomarn de
cada uno de los pilares del diafragma, en la zona de transicin entre la parte muscular y la
tendinosa y, adems, de los maseteros, de los msculos de la parte inferior de la pierna, de
los msculos intercostales y de los msculos de la lengua, hasta un total de 6 muestras por
individuo. En estos animales, adems del nmero de trozos de carne de diafragma a examinar
comentado anteriormente, se analizarn 7 trozos de cada uno de los 4 msculos restantes,
lo que hacen un total de 84 trozos a examinar. Se debe procurar que los cortes, en todos los
casos, vayan dirigidos en el sentido de las fibras musculares. Posteriormente, se comprimen
los trozos de tejido muscular entre las dos placas compresoras y se observa detenidamente
en el estereomicroscopio, que permita un aumento mnimo de 30 a 40 veces. El examen de
las muestras deber ser cuidadoso y durar un mnimo de 6 minutos por trichinelloscopia.
Adems, un veterinario no deber examinar en el trichinelloscopio ms de 840 trozos por
da. En este Reglamento, se expone que este mtodo debe ser sustituido por otro ms fiable
antes del 31 de diciembre de 2009.
4.2.Digestin artificial (ppsica) para el diagnstico de Trichinella spp.
En la actualidad, el mtodo oficial es la digestin de muestras colectivas con utilizacin
de agitador magntico (digestin artificial ppsica). La digestin artificial es, sin duda, un
mtodo de mayor sensibilidad que la trichinelloscopia.

El fundamento de la digestin ppsica es simular el proceso fisiolgico al que es sometida la carne en el estmago de un animal, y su objetivo es liberar las larvas musculares de
Trichinella spp. enquistadas en el tejido muscular. Como resultado se obtiene un lquido de
digestin en el que se encuentran las larvas en suspensin. Este mtodo, acorde con el Reglamento 2075/2005, se basa fundamentalmente en una digestin en el agitador magntico, en
el cul se coloca un vaso de precipitado con las siguientes proporciones de reactivos (para
100 g de carne):

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La legislacin actual en Espaa, segn el Reglamento 2075/2005 de la Comisin Europea,


establece que se deben emplear de 1 a 5 gramos de tejido muscular por cerdo sacrificado,
segn su sistema de produccin. En jabales, se deben digerir 5 g por animal. Al igual que la
trichinelloscopia, el msculo de eleccin son los pilares del diafragma.

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Agua a 46-48C..........................................................................
Pepsina de 2000 U/g. FIP (1:10.000 NF).....................................
cido clorhdrico al 25%............................................................

2l
10 g
16 ml

Este vaso de precipitado debe permanecer en el agitador magntico unos 30 minutos.


Posteriormente, se filtra el lquido de digestin a travs de un tamiz colocado sobre un
embudo de decantacin. Este tamiz debe tener una malla de 180 micrmetros de dimetro
de poro y un dimetro exterior de 11 cm. Tras otros 30 minutos, se pasan 40 mililitros a un
nuevo embudo de decantacin, de menor tamao, dejando precipitar 10 minutos. Tras este
tiempo se retiran 30 mililitros de sobrenadante y los 10 mililitros restantes de sedimento se
vierten en una placa de Petri junto con 10 mililitros de agua que se utilizan para enjuagar la
pared de este segundo embudo de decantacin. Este filtrado se observa al estereomicroscopio
con un aumento de 15 a 20 veces. En caso de observar algo sospechoso de confundirse con
parsitos, debern aplicarse aumentos superiores, de entre 60 y 100 veces.
El Reglamento CE 2075/2005 establece unos mtodos equivalentes de deteccin de
Trichinella spp. que son:
1. Mtodo de digestin de muestras colectivas con asistencia mecnica/tcnica de sedimentacin.
2. Mtodo de digestin de muestras colectivas con asistencia mecnica tcnica de aislamiento por filtracin.
3. Mtodo de digestin automtica para muestras colectivas de hasta 35 g.
No obstante, no ser necesario investigar la presencia de este nematodo en la carne
de cerdos domsticos que hayan sido sometidas a un tratamiento de congelacin regulado
en el Reglamento 2075/2005, ni que procedan de explotacin o regin declarada libre de
Trichinella spp.
4.3.Digestin artificial (trpsica) para el diagnstico de Sarcocystis spp.

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En el diagnstico de Sarcocystis spp. se sigue el mtodo de Erber (1977) modificado


a posteriori por nosotros a raz de la experiencia adquirida a travs de un gran nmero de
digestiones de musculatura esqueltica, corazn e incluso cerebro; ya que, en todas estas
estructuras pueden albergarse los quistes producidos por este protozoo parsito.

62

La tcnica se basa en una digestin trpsica muy suave, simulando la digestin que se
produce en el duodeno de los hospedadores, ya que la tripsina producida en el pncreas se
vierte al duodeno y no al estmago. De esta forma, los quistes de Sarcocystis spp. quedan
libres de las fibras musculares o tejidos en los que se alojen, para que puedan ser observados
al microscopio.
El material necesario para llevar a cabo la tcnica es el siguiente:
Picadora elctrica.
Bscula digital.

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Recipiente de al menos 500 ml de capacidad con tapadera.


10 gramos de muestra problema.
0,13 gramos de tripsina.
50 ml de PBS. Esta solucin tampn debe tener un pH bsico o neutro, con lo que debe
oscilar entre un pH de 7 a 7,2 (ajustar si el pH resultante es diferente). Los componentes
necesarios son:
NaCl...............................................................................................
8,77 g
Na2HPO4.2H2O..............................................................................
1,37 g
NaH2PO4.H2O................................................................................ 0,318 g
H2O destilada................................................................................. 1.000 ml

Agitador orbital.
Embudo.
Gasa o filtro de 600-700 micrmetros.
Tubo de centrfuga de 50 ml con tapadera.
Centrfuga.
Pipetas Pasteur.
Portas y cubres.
Microscopio ptico.

1. El primer paso consiste en preparar la muestra que vamos a digerir, para lo cual, procedemos a triturar aproximadamente 10 gramos (pesados con anterioridad en la bscula) del
tejido muscular o nervioso que queremos someter a estudio. A estos 10 gramos de muestra, le aadimos 0,13 gramos de tripsina y 50 ml de PBS en el recipiente con tapadera, y
lo homogeneizamos adecuadamente.
2. Una vez hecho todo lo anterior, en los casos de musculatura esqueltica y corazn, se
procede a incubar la mezcla a 22C en agitacin suave (100 rpm) durante 8 minutos en
el agitador orbital (simulando las condiciones de la digestin en el hospedador). En el
caso del cerebro, se procede a simple agitacin manual durante slo 4 minutos. En caso
de no disponer de incubador o centrfuga refrigerada, la incubacin puede realizarse a
temperatura ambiente.
3. Pasados los 8 minutos de digestin, se filtra el contenido de la digestin travs de una gasa
de 600-700 micrmetros (aproximadamente doble gasa) y embudo, pasando el material
filtrado al tubo de centrfuga de 50 ml con tapadera. Es conveniente presionar la gasa
una vez filtrado el lquido, para exprimir el jugo e incrementar el nmero de los posibles
quistes de Sarcocystis spp.
4. El lquido de digestin resultante del filtrado se centrifuga a 1.000 rpm durante 10 minutos
a una temperatura baja (entre 1 y 3C) para detener la digestin de la muestra ya que los
quistes son muy lbiles y se rompen con facilidad. Finalmente, se elimina el sobrenadante

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Los pasos a seguir son los siguientes:

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y se van tomando pequeas gotas del sedimento con una pipeta Pasteur para observarlas
(colocadas entre portaobjetos y cubreobjetos) al microscopio ptico. La observacin al
microscopio debemos realizarla con el diafragma cerrado en busca de quistes septados
completos o zotos libres.

5. EXAMEN DE PIEL
La identificacin de los parsitos existentes en la piel, puede verificarse a simple vista
tras su recogida con pinzas o simple cepillado (piojos, pulgas, garrapatas, etc.), o bien tener
que recurrir a exmenes microscpicos despus de un procesamiento en el laboratorio de la
muestra obtenida por el raspado.
5.1.Investigacin microscpica para el diagnstico de caros: raspado de piel
Toma de muestra
El raspado debe realizarse de las zonas enfermas o sospechosas de la piel, a ser posible
de las regiones ltimamente atacadas o bien de los lmites entre zonas sanas y enfermas.
Despus de cortar con las tijeras el pelo o la lana, conviene eliminar las costras o escaras
ms gruesas y superficiales antes de realizar el raspado. Se raspa con la ayuda de un bistur,
hacindolo profundamente hasta que se produzca una leve hemorragia. Este material se
recoger en una placa de Petri u otro recipiente de boca ancha, para asegurarse que nada
del material raspado se pierda. El material debe tomarse, a ser posible, de distintos lugares y
en cantidad suficiente.
Remisin de la muestra
El raspado debe mandarse al laboratorio en la placa de Petri o el recipiente utilizado para
la recoleccin, cerrado e identificado adecuadamente, junto con la hoja de bistur empleada.

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Tratamiento de la muestra: aclarado en KOH al 5-10%

64

El raspado se coloca en un vidrio de reloj y se aade potasa para ayudar a la disgregacin y aclarado de las costras y restos de la piel, y as poder visualizar ms fcilmente los
posibles caros (huevos, formas larvarias y/o adultas) al estereomicroscopio. Mediante una
pipeta Pasteur, algunos ejemplares deben trasladarse a un portaobjetos para su observacin
microscpica e identificacin morfolgica.
En el caso de posible sarna por Octodectes cynotis (sarna auricular), la muestra se tomar
con un bastoncillo de algodn de los pabellones auditivos afectados.
La mayora de los caros de la sarna se diagnostican con la ayuda del estereomicroscopio. No obstante, ante la dificultad que entraa el diagnstico de la sarna ocasionada por

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Demodex spp., el material del raspado se aclarar directamente sobre el portaobjetos y se
observar tambin al microscopio ptico (con los objetivos de 4x o 10x) para la observacin
de estos caros.
Una vez realizada la mezcla, se calienta a la llama del mechero al mismo tiempo que
se disgregan y rompen las escaras y costras con la hoja del bistur. Posteriormente, se observa
al estereomicroscopio y finalmente se recogen con una pipeta Pasteur una porcin de la
muestra conteniendo caros para identificarlos a mayores aumentos al microscopio.
5.2.Miasis
Para conocer la especie causante de la miasis, se deben recoger las larvas III y enviarlas
a un laboratorio especializado para su identificacin. Para ello debemos extraer las larvas
con unas pinzas de la herida y meterlas en un recipiente que permita la entrada de aire, ya
que son aerobias, y enviarlas en condiciones de refrigeracin si van a estar expuestas a altas
temperaturas.

6. EXAMEN DE VSCERAS
Mediante ella pretendemos hallar formas parasitarias adultas, larvarias o elementos de
diseminacin de los parsitos en su localizacin orgnica.
6.1.Investigacin de parsitos intestinales
Se procede a la apertura de distintos tramos, tanto del intestino grueso como el delgado.
Adems de esto, se realiza un lavado de la mucosa intestinal filtrndose el contenido y
recogindose en recipientes adecuados.
El material anterior se visualiza al estereomicroscopio, y posteriormente se realiza la identificacin del parsito y contaje.

6.2.Investigacin de parsitos en abomaso y estmago de monocavitarios


Se procede a la apertura de la vscera por su curvatura mayor y se observa sobre la mucosa
la presencia de parsitos adultos o formas larvarias.
Posteriormente, se realiza un lavado de dicha mucosa, procedindose del mismo modo
que en el apartado 6.1.

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Hay casos clnicos en los que es necesario realizar un raspado de la capa mucosa intestinal, e investigar la posible presencia de formas parasitarias al microscopio (Por ejemplo,
los coccidios).

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6.3.Investigacin de parsitos en pulmn
Se lleva a cabo la apertura del aparato respiratorio, comenzando por trquea, posteriormente bronquios grandes, medianos y bronquiolos, hasta llegar a la parte apical del pulmn, tratando de evidenciar nematodos broncopulmonares en ese recorrido.
As mismo, se realiza un raspado con un cubreobjetos sobre el parnquima pulmonar y luz
bronquial, se coloca sobre un portaobjetos y se examina al microscopio para hallar larvas
de nematodos, fciles de evidenciar, en caso de positividad, por sus activos movimientos.
Para aislar 3 4 larvas de diferentes parsitos pulmonares puede procederse a la digestin
ppsica del rgano (o parte proporcional del mismo) siguiendo el mtodo descrito en el
apartado 4.2.
6.4.Investigacin de parsitos en hgado
Observacin y palpacin de la vscera.
Recoger con la ayuda de una jeringuilla el lquido biliar, previamente homogeneizado,
para posteriormente examinar varias gotas de ste al microscopio ptico y poder visualizar
elementos de diseminacin de los parsitos hepticos.
Abrir los canalculos biliares y presionar para que salgan los distintos parsitos.
Recogida de los mismos e identificacin al microscopio.
Al igual que en pulmn se pueden aislar larvas parasitarias en el hgado mediante digestin
ppsica del rgano.
6.5.Investigacin de parsitos en corazn
Apertura de la vscera segn necropsia reglada.
Visualizacin directa de las formas parasitarias adultas y jvenes de Dirofilaria immitis en
carnvoros. Adems de lo anterior, se realiza una observacin de la arteria pulmonar, donde
tambin se localiza este nematodo.
6.6.Investigacin de formas larvarias de la familia Taeniidae

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Cisticerco

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Observacin directa en su localizacin habitual (hepatoperitoneo o musculatura). R


ecogida
del material sospechoso y visualizacin al estereomicroscopio.
Coenuro
Apertura de la cavidad craneana y observacin de la superficie enceflica. Posteriormente,
se identifica la forma parsita del mismo modo que en el caso anterior.

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Estos dos parsitos pueden comprimirse e incluirse en un recipiente con formol al 10%
con el fin de obtener preparaciones permanentes.
Posteriormente, se incluiran en una cadena de montaje de cestodos (adultos o este tipo
de formas larvarias), la cual incluye:
1. Inclusin en alcohol de 70.
2. Tincin con Carmn actico durante 24 horas (frmula magistral).
3. Decoloracin con alcohol-clorhdrico (hasta que se visualicen adecuadamente las estructuras del parsito).
4. Pases de 5 minutos por una cadena ascendente de alcoholes (70, 80, 90, 90, alcohol
absoluto y xileno).
5. Montaje en portaobjetos con blsamo de Canad o Eukitt.
Quiste hidatdico
Observacin macroscpica del quiste en los distintos rganos donde es frecuente su presencia (hgado, pulmn, rin, corazn).
Puncin de la membrana qustica con la ayuda de una jeringuilla para la extraccin del
lquido hidatdico.
Rotura de la membrana qustica y raspado de la arenilla hidatdica con un cubreobjetos.
Todo el material anteriormente recogido se lleva al microscopio donde:
Si hay existencia de protoesclex es un quiste frtil.
Si no hay protoesclex es un quiste infrtil.
Finalmente, en el caso de que sea FRTIL, la preparacin se colorea con una gota de
violeta de Genciana, y:
Si los protoesclex se tien, son no viables.
Si los protoesclex no se tien, son viables.
Las formas larvarias de Taeniidae spp. pueden conservarse en formol al 10% o en alcoholformol (10% de formalina al 35%-40% y 90% de alcohol de 70). Por otra parte, los protoesclex procedentes del quiste hidatdico se conservan en formol al 5%.

7.1.Orina
La vejiga urinaria de los carnvoros es asiento del nematodo Capillaria plica, aunque
ms raramente se puede encontrar en los riones y pelvis renal otro nematodo denominado
Dioctophyma renale.

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7. EXAMEN DE ORINA Y SECRECIONES

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Los huevos de ambos nematodos parsitos son evidenciables en orina. Para ello, se deja
sedimentar en una copa de base acuminada (o tubo de ensayo), o bien se realiza una centrifugacin rpida, observando en ambos casos el sedimento al microscopio ptico, tal y como
se hace en las tcnicas de coprologa.
7.2.Secreciones vaginal, uterina y prepucial
La obtencin de este material biolgico est justificado en orden a la bsqueda de distintas especies del gnero Trichomonas y Trypanosoma equiperdum.
Las secreciones son obtenidas mediante el lavado con solucin fisiolgica templada de
cloruro sdico, o bien mediante cucharilla. El producto resultante conviene mantenerlo a
refrigeracin (no inferior a 5C), ya que si se produce la desecacin, los protozoos se conservan vivos poco tiempo (menos de 24 horas).
El estudio de las secreciones se lleva a cabo a travs del microscopio ptico y mediante
cultivos.
7.3.Secrecin nasal
El estudio de la secrecin nasal est indicado en pequeos rumiantes y cnidos que
presentan un abundante flujo nasal, para la bsqueda de larvas de Oestrus spp. en ovejas y
cabras, y huevos de Linguatula serrata en perros (este ltimo caso clnico es de muy escasa
frecuencia).
El examen se realiza directamente al microscopio, teniendo en ocasiones que mezclar el
exudado con cido actico.
7.4.Saliva
Se toman muestras de saliva en el caso de la evidencia en la mucosa de la boca y faringe
de palomas y pavos de Trichomonas gallinae. El diagnstico debe realizarse lo ms rpidamente posible, ya que se deterioran con prontitud, hacindose frotis a partir de buche, boca
y faringe, siendo fcil la investigacin por el movimiento vivaz del parsito.

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8. REALIZACIN Y EXAMEN DE BIOPSIAS

68

En este apartado estudiamos diferentes tcnicas de obtencin de muestras sobre el animal


vivo para el diagnstico de posibles parasitosis. Va sobre todo encaminado al diagnstico de
leishmaniosis canina y de theileriosis (fase linfoctica), ambas de elevada presentacin en
nuestro entorno. Se fundamentan en la obtencin de tejido procedente de ganglio linftico,
mdula sea y piel.

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8.1.Biopsia ganglionar
En concreto, se trata de una biopsia de aspiracin, ya que se obtienen muestras de un
rgano de consistencia elevada, tenindose que dislacerar el tejido para obtener una pequea
muestra celular. Va encaminada al diagnstico de las formas viscerales de leishmaniosis y
fase linfoide de la theileriosis.
Tcnica
Los dos posibles ganglios para la toma de muestras ms importantes son el poplteo (en el
perro situado en la cara flexora de la articulacin de la rodilla, muy superficial y sobre
el msculo gastronemio) y el preescapular sobre la articulacin del encuentro.
Rasurar la zona de intervencin y desinfectar.
Fijar el ganglio perfectamente con una mano, intentando que la piel quede bien tensa.
La aguja o trocar que se emplee podr ser de diferentes calibres en funcin del volumen
del ganglio, la cual se introduce mediante un acto rpido y se coloca aproximadamente en
el centro de la masa ganglionar.
Dislacerar el tejido mediante movimientos rotacionales y laterales.
Conectar la jeringa (estril y de amplio volumen; de 5 a 10 ml) y aspirar con el mbolo al
mximo.
Por ltimo, slo queda extraer mediante un movimiento rpido el conjunto aguja-jeringa en
la que quedar alojada las suficientes clulas para posteriormente realizar el frotis y tincin
por mtodos hematolgicos usuales.
8.2.Biopsia medular
Se trata de otra biopsia de aspiracin, que da mejores resultados para el diagnstico de la
leishmaniosis visceral. Las agujas a emplear (trocar) son de tipo Salah.
Es preciso elegir para la puncin un hueso que contenga mdula hematopoytica activa
(roja). Si por error, la puncin recae sobre mdula grasa (amarilla), la muestra obtenida contar solamente de grasa y algunas gotas de sangre.

Colocar al animal en decbito lateral derecho, con la extremidad izquierda sobre el costillar, para as poder evidenciar el esternn. Tambin puede realizarse sobre la cresta ilaca.
Cortar el pelo, afeitar y desinfectar la zona a intervenir, que suele ser la 2-3 esternebra o la
cresta ilaca, la cual se anestesia localmente por infiltracin en zonas subcutneas prximas
del periostio, el cual es muy sensible.
Desinfectar de nuevo la zona e insertar la aguja hasta alcanzar el hueso.
Retirar el fijador o mandril, conectar la jeringa y retirar el mbolo bruscamente. Brotar en
pequeo chorro fragmentos de mdula sea con algo de sangre.

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Tcnica

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8.3.Biopsia de piel
Va encaminada a la deteccin de leishmaniosis cutnea, onchocercosis, etctera.
Podr realizarse con bistur para obtener una pequea porcin de tejido (Onchocercosis)
o con la punta de una aguja tomando la muestra de la base de la lcera.

9. DIAGNSTICO INMUNOLGICO
En la actualidad muchas de las enfermedades parasitarias son diagnosticadas gracias a
la utilizacin de tcnicas que ponen de manifiesto la existencia de respuesta inmunolgica
(anticuerpos especficos) en sangre frente a los agentes extraos.
Los parsitos generan desde las primeras semanas una fuerte respuesta de anticuerpos que
pueden ser puestas de manifiesto mediante estas tcnicas de inmunodiagnstico.
La deteccin precoz de las infecciones parasitarias a travs de dichos mtodos, se muestra
como una de las medidas de control ms efectivas, ya que posibilita una mayor efectividad
teraputica de los medicamentos empleados, al ser utilizados en fases precoces de la infeccin. Tambin se consigue una mejor monitorizacin del proceso parasitario a travs del
anlisis de las respuestas inmunolgicas, ya que la evidencia de la efectividad teraputica se
ve reflejada en un descenso de la cantidad de anticuerpos en sangre como consecuencia de
la muerte de los parsitos.
Existen diferentes mtodos de inmunodiagnstico, entre los que se encuentra la tcnica
inmunoenzimtica micro-ELISA indirecto de dobles anticuerpos, que ha demostrado ser
una de las ms eficaces y fiables en multitud de estudios seroepidemiolgicos, permitiendo en diferentes pases el conocimiento de la distribucin de las parasitosis y de su prevalencia.
Su realizacin slo requiere de una pequea muestra de sangre del animal sospechoso
para su anlisis en el laboratorio.
9.1.ELISA indirecto

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Mediante la tcnica ELISA indirecto se determinan diferentes tipos y subtipos de inmunoglobulinas (anticuerpos) producidas frente a distintos antgenos del parsito (Fig. 7).

70

As, el antgeno soluble empleado en dicha tcnica puede ser la totalidad de las protenas del parsito (protena total del parsito), determinadas fracciones del mismo o diferentes
protenas recombinantes obtenidas por ingeniera gentica.
Tras tapizar las placas con el antgeno parasitario a la concentracin deseada, a cada
pocillo se le aaden 100 l del fluido problema, diluido a la concentracin adecuada en
buffer carbonato, PBS u otra solucin de pH apropiado, segn el tipo de antgeno. Dichas

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diluciones son seleccionadas durante la estandarizacin de la tcnica, y tras la titulacin
del nivel de anticuerpos de distintos sueros positivos y negativos (controles) que permiten,
en cada caso, la obtencin de la mejor y mayor diferenciacin entre valores de reactividad
positivos y negativos.
Tras la incubacin a 37C durante 30 minutos y posterior lavado, se aaden 100 l del
conjugado anti-especie de eleccin en cada caso (anti-inmunoglobulina marcada con peroxidasa); y a la concentracin idnea previamente determinada. Se somete a una nueva incubacin de 30 minutos a 37C, y despus a un nuevo lavado para eliminar las inmunoglobulinas
que no hayan reaccionado con el complejo antgeno-anticuerpo.
Posteriormente, se aaden 100 l de substrato cromgeno a cada pocillo. Dicho substrato, en presencia de peroxidasa, tomar una coloracin que variar segn el substrato usado
(TMB, OPD, ABTS, etctera) con una intensidad proporcional a la cantidad de anticuerpos
fijados al antgeno. Este substrato se elabora como mximo quince minutos antes de ser utilizado, debido a la poca estabilidad del preparado.
La reaccin enzimtica debe leerse cuando el control positivo alcanza una DO idnea,
generalmente al cabo de unos 10-30 minutos de incubacin a temperatura ambiente. La
reaccin puede pararse aadiendo a cada pocillo 50 l de H2SO4 3N. La lectura se realiza
en un espectrofotmetro a la longitud de onda determinada segn el sustrato utilizado (A490,
A450, etc.) en un lector de placas de ELISA despus de haber observado a simple vista si existen
errores o coloraciones anormales.

Figura 7. Placa de ELISA


con pocillos
de distinta coloracin,
en funcin
de la seroreactividad
frente a Leishmania
infantum.

PORTADA

NDICE

MANUALES UEX

Para comprobar que todos los pasos de la tcnica han sido realizados correctamente,
es necesario reservar unos pocillos en cada placa para realizar los controles de conjugado,
positivos y negativos (Fig. 7).

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F. J. SERRANO, E. M. FRONTERA, L. C. GMEZ, M. . HABELA, J. E. PREZ, D. REINA


Para el control del conjugado, se utilizan pocillos sin suero problema, siendo ste sustituido por PBS 1x con Tween-20 y continuando los dems pasos rutinariamente. Este control
nos puede dar informacin sobre errores de procedimiento tales como procesos de lavado
inadecuado o reactivos en mal estado. Como control positivo (introducido en cuatro pocillos)
se utiliza un suero conocido obtenido de un animal infectado por el parsito. Como control
negativo, se utiliza el suero de un animal sano y libre de la infeccin por el parsito, introducindose ambos en varios pocillos. Las muestras se realizan por duplicado o triplicado por
el mismo motivo.
La correcta realizacin de la tcnica queda garantizada por la repetitividad mostrada por
estos controles tras la lectura de las placas.
Es importante sealar que la seropositividad de un animal sospechoso, implica que tiene
anticuerpos especficos contra un parsito, y que por tanto ha tenido algn contacto con ste,
pero no necesariamente refleja una infeccin actual, y en caso de existir, puede ser independiente de que se manifieste o no la enfermedad, o de gravedad de la misma. La interpretacin correcta de la seropositividad y su intensidad depende en extremo del tipo de parsito,
su prevalencia, su ciclo biolgico y la interaccin con el sistema inmune del hospedador
que se deriva del mismo. As, en enfermedades como la leishmaniosis, ser adems necesario el anlisis en profundidad del paciente, para comprobar a qu estado de enfermedad
se corresponde el diagnstico serolgico positivo, que puede variar desde el asintomtico u
oligosintomtico al claramente patente, con daos orgnicos severos que imposibiliten su
recuperacin total.
9.2.Inmunofluorescencia indirecta
La tcnica de Inmunofluorescencia Indirecta (IFI) es una prueba inmunolgica de carcter diagnstico que se utiliza para la deteccin de anticuerpos especficos frente a parsitos,
bacterias, virus, etc. Estos anticuerpos son producidos por el individuo tras su contacto con
un determinado microorganismo. Entre estos agentes podemos destacar algunos parsitos
como Leishmania infantum y piroplsmidos, tales como Theileria spp. y Babesia spp. en los
que esta tcnica es muy til.

MANUALES UEX

Esta tcnica es bsicamente similar a la del ELISA indirecto, en la que el conjugado no


est marcado con una enzima, sino con una sustancia fluorescente que detecta el inmunocomplejo resultante de la unin Antgeno-Anticuerpo (Ag-Ac). Podremos constatar la existencia de esta reaccin mediante un microscopio de epifluorescencia.

72

Los pasos a seguir para realizar esta prueba son:


En primer lugar, debemos preparar una serie de diluciones, que varan normalmente entre
1/40 y 1/1.280, con la ayuda de una solucin tampn fosfato (PBS) de pH neutro o ligeramente bsico (compuesta por agua bidestilada, NaCl, NaH2PO4.2H2O y Na2HPO4.2H2O) y
aadiendo posteriormente el suero o plasma problema.

PORTADA

NDICE

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Enfrentaremos estas diluciones al antgeno correspondiente que tendremos fijado en un
portaobjetos con acetona y conservado en congelacin.
Incubaremos durante 30 minutos a temperatura ambiente para favorecer as la unin entre
el antgeno y el anticuerpo.
Posteriormente, realizaremos tres lavados de los portaobjetos de cinco minutos cada uno
a 37C con la solucin PBS. De esta manera, se eliminarn restos de suero o plasma y
antgeno sobrante.
Despus aadiremos el conjugado e incubaremos 30 minutos ms a temperatura ambiente
para que, de esta manera, se realice la fijacin con el inmunocomplejo (si lo hubiera).
Seguidamente, haremos otros tres lavados de cinco minutos cada uno con PBS a 37C,
eliminndose as el exceso de conjugado que no se ha unido de forma especfica al inmunocomplejo.
Tras estos pasos, aadiremos sobre el portaobjetos una pequea cantidad de Glicerina
tamponada con PBS (pH=7,2) y pondremos un cubreobjetos encima.
Por ltimo, se observarn los portaobjetos en el microscopio de epifluorescencia para
realizar la lectura de las muestras.

MANUALES UEX

Para comprobar que la prueba ha sido realizada correctamente, se utilizan dos controles
testados previamente. Uno de ellos negativo y el otro positivo. Adems, estos sueros se utilizan como referencia para la determinacin del ttulo del resto de las muestras.

Figura 8. Resultado positivo mediante IFI de un caballo frente a Theileria equi.

PORTADA

NDICE

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MANUALES UEX

En la Unidad de Parasitologa de nuestra Facultad se aplica este tipo de diagnstico


principalmente para la deteccin de anticuerpos frente a Theileria equi y Babesia caballi en
quidos, T. annulata y B. bigemina en bvidos y B. ovis en pequeos rumiantes. Tambin se
utiliza para la deteccin de Leishmania infantum en cnidos.

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PORTADA

NDICE

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III.LMINAS DE IDENTIFICACIN

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PORTADA

NDICE

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Ooquistes de Cryptosporidium sp. (tincin de


Heine).

Ooquistes de Cryptosporidium sp. (tincin de


Ziehl-Neelsen).

Quiste de Balantidium coli (1) y ooquiste de


Eimeriidae sp. (2).

Huevos de Dicrocoelium dendriticum.

Huevos de Fasciola hepatica y D. dendriticum.

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Ooquistes de Eimeria sp.

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PORTADA

NDICE

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Cpsulas ovgeras de Dipylidium caninum.

Huevos de Taeniidae sp.

3
2

Huevos de Moniezia benedeni (1), Strongylida


sp. (2) y Nematodirus sp. (3).

Larva 1 de Dictyocaulus viviparus.

Larva 1 de Muellerius capillaris.

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Huevos de Moniezia benedeni (1), Strongylida


sp. (2) y ooquistes de Eimeriidae sp. (3).

PORTADA

NDICE

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Huevo de Passalurus ambiguus.

Huevo de Trichuris vulpis.

Huevo de Capillaria plica (en orina).

Huevo de Ascaris suum.

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Huevos de Toxascaris leonina (1) y Toxocara


canis (2).

PORTADA

Huevo de Ascaridia galli.

NDICE

Babesia canis (piroplasmas).

Theileria annulata (piroplasmas).

Haemoproteus columbae (gametocitos).

Hepatozoon canis (gametocitos).

Larva 1 de Dirofilaria immitis (microfilaria).

Leishmania infantum (promastigotes


y amastigotes).

PORTADA

NDICE

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Sarcocystis miescheriana.

Trichinella spiralis.

Psoroptes equi cuniculi.

Sarcoptes scabiei suis.

Ctenocephalides canis (Siphonaptera).

MANUALES UEX

Demodex canis.

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PORTADA

NDICE

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IV.LMINAS DE LESIONES

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PORTADA

NDICE

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Perro afectado de Leishmaniosis.

Cultivo celular de Leishmania sp.

Bazo de un perro con Leishmaniosis.

Lesiones drmicas por Leishmaniosis.

Coccidiosis heptica en conejo.

Coccidiosis intestinal en cordero (hiperplasia de


placas de Peyer).

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PORTADA

NDICE

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Pseudoquiste de Toxoplasma gondii.

Quistes de Sarcocystis gigantea en esfago ovino.

Hgado de un cabrito de 3 meses con fasciolosis


aguda (Fasciola hepatica). Hepatitis hemorrgica
traumtica.

Moniezia spp. (Cestoda) en intestino de cordero.

PORTADA

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Diarrea en cordero y lesiones entricas e hipertrofia de la cadena ganglionar causadas


por Cryptosporidium spp.

83

NDICE

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Adultos de Taenia sp. en intestino de perro.

Ndulos en intestino de jabal causados


por Macracanthorhynchus hirudinaceus.

M. hirudinaceus en la mucosa del intestino de


un porcino.

Quistes hidatdicos en pulmn de cerdo


(Echinococcus granulosus).

Quiste hidatdico en hgado de cerdo.

Cisticercosis hepatoperitoneal por Taenia pisiformis


en una liebre.

84

PORTADA

NDICE

Coenuro de Taenia multiceps en cerebro de oveja


(Coenuro cerebralis).

Adultos de Dirofilaria immitis en el corazn de


un perro.

Adultos de Ascaridia galli en el intestino de una gallina.

Adultos de Ascarops strongylina en la mucosa


gstrica de un cerdo.

Lesiones hepticas en un lechn, causadas por la


migracin larvaria de Ascaris suum (Manchas de
leche).

Ndulos en pared gstrica de un perro con adultos


de Spirocerca lupi.

PORTADA

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NDICE

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Adultos de Dictyocaulus filaria en vas respiratorias


altas de ovino.

Lesiones pulmonares en cerdo causadas


por Metastrongylus spp.

Sarna psorptica ovina (Psoroptes ovis).

Sarna sarcptica ovina (Sarcoptes scabiei var. ovis).

Hiperqueratosis generalizada en sarna sarcptica


porcina (Sarcoptes scabiei var. suis).

Sarna demodcica en perro: alopecia, descamacin


y ulceracin de la dermis (Demodex canis).

PORTADA

NDICE

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Sarna demodcica generalizada (fase pustulosa).

Hembras de Ixodes ricinus en una cabra montesa.

Descarga nasal en una oveja por oestrosis


(Oestrus ovis).

PORTADA

Edema submandibular (papo) en un ovino


causada por Haemonchus contortus.

NDICE

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Ictericia en la conjuntiva, edema subcutneo, y hemoglobinuria intensa en un quido con piroplasmosis


por Theileria equi.

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Miasis cutnea prepucial en ovino (Wohlfahrtia


magnfica).

Miasis cutnea vulvar en ovino (Wohlfahrtia magnfica).

Conejo con lesiones por Psoroptes sp.

Miasis cavitaria por Oestrus ovis.

Infestacin por Rhipicephalus bursa en un toro.

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Miasis cutnea furuncular en perro.

88

PORTADA

NDICE

ANEXO 1.TAXONOMA

INTRODUCCIN
La clasificacin taxonmica de los parsitos est cambiando considerablemente en las
ltimos aos gracias al desarrollo de la biologa molecular y los estudios ultraestructurales,
que han permitido conocer mucho mejor la filogenia de los eucariotas.
Los protozoos o protistas no se consideran ya una rama separada ni de organismos
celulares autotrficos como las algas o los cromistas, ni de los clsicos reinos Animalia,
Fungi y Plantae. No hay un consenso sobre
la clasificacin concreta de los grandes gruEukaryota
pos taxonmicos, pero en cualquier caso se
Amoebozoa
aceptan diversos grupos, de los que surgen
Archaeplastida
formas de vida hetertrofa, autotrfica o mixta,
Plantae
y en algunos, ramas evolutivas multicelulares
Chromalveolata
en diversos momentos.

PORTADA

NDICE

MANUALES UEX

Excavata

As por ejemplo, en los seis grupos princiOpisthokonta


pales (equivalentes a reinos) de la clasificacin
Animalia
de Adl et al. (2005) que se muestran en el cua
dro siguiente, hay protozoos en todos ellos,
Fungi
junto a seres multicelulares y protistas no conRhizaria
siderados como protozoos. As por ejemplo,
Clasificacin, segn Adl et al. (2005), de los
el protozoo parsito Toxoplasma gondii tiene
grandes grupos de eucariotas (en azul) mosun ancestro comn ms cercano con un alcortrando la ubicacin en ellos de los clsicos
noque o una diatomea, que con otros proreinos de seres multicelulares (en rojo).
tozoos parsitos como Entamoeba histolytica,
o Leishmania infantum, a su vez ms emparentada con las algas verdes unicelulares (Euglena spp.) que con todos los anteriores. En
otras palabras, el reino Protozoa es parafiltico, ya que se excluye a ciertos descendientes
protozoos. No obstante, siguiendo a Cavalier-Smith seguiremos considerndolo un reino
independiente, aunque sin olvidar que, en puridad, tal reino no existe, al menos desde un
punto de vista filogentico.

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PORTADA

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102

PORTADA

NDICE

ANEXO 2.PRINCIPALES GNEROS PARSITOS


SEGN HOSPEDADORES Y LOCALIZACIONES ORGNICAS

RUMIANTES

PORTADA

Teladorsagia
Strongyloides
Trichostrongylus
Trichuris
HGADO
Trematodos
Dicrocoelium
Fasciola
Cestodos
Echinococcus
Cysticercus
APARATO RESPIRATORIO
Cestodos
Echinococcus
Nematodos
Cystocaulus
Dictyocaulus
Muellerius
Neostongylus

NDICE

MANUALES UEX

APARATO DIGESTIVO
Protozoos
Cryptosporidium
Eimeria
Trematodos
Paramphistomum
Cestodos
Avitellina
Moniezia
Stilesia
Thysaniezia
Nematodos
Bunostomun
Capillaria
Chabertia
Cooperia
Gongylonema
Haemonchus
Nematodirus
Neoascaris
Oesophagostomun

103

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Protostrongylus
Artrpodos
Insectos
Oestrus
APARATO UROGENITAL
Protozoos
Tritrichomonas
SANGRE
Protozoos
Babesia
Theileria
Trypanosoma
MSCULO
Protozoos
Sarcocystis
Toxoplasma
Cestodos
Cysticercus
SISTEMA NERVIOSO
Protozoos
Sarcocystis
Toxoplasma
Neospora
Cestodos
Coenuro

MANUALES UEX

SACO CONJUNTIVAL
Nematodos
Thelazia
PIEL Y TEJIDO SUBCUTNEO
Nematodos
Onchocerca
Parafilaria

Artrpodos
Arcnidos
caros de la sarna
Chorioptes
Demodex
Psoroptes
Sarcoptes
Dermanyssus
Ixdidos
Boophilus
Dermacentor
Haemaphysalis
Hyalomma
Ixodes
Rhipicephalus
Insectos
Anopluros
Haematopinus
Linognathus
Ischnoceros
Damalinia (Bovicola)
Columbicola
Goniodes
Dpteros
Calliphora
Culex
Haematobia
Hyppobosca
Hypoderma
Lucillia
Melophagus
Sarcophaga
Simulium
Stomoxys
Wohlfahrtia

104

PORTADA

NDICE

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QUIDOS
APARATO DIGESTIVO
Protozoos
Cryptosporidium
Eimeria
Cestodos
Anoplocephala
Paranoplocephala
Nematodos
Cyathostomun
Cylicocylus
Draschia
Habronema
Oxyuris
Parascaris
Strongyloides
Strongylus
Trichostrongylus
Triodontophorus
Artrpodos
Gasterophilus

APARATO UROGENITAL
Protozoos
Trypanosoma
SANGRE
Protozoos
Babesia
Theileria
Trypanosoma
MSCULO
Protozoos
Sarcocystis
Nematodos
Trichinella
SACO CONJUNTIVAL
Nematodos
Thelazia

APARATO RESPIRATORIO
Cestodos
Echinococcus
Nematodos
Dictyocaulus
Artrpodos
Insectos
Rhinoestrus

PIEL Y TEJIDO SUBCUTNEO


Nematodos
Habronema
Onchocerca
Artrpodos
Arcnidos
caros de la sarna
Chorioptes
Demodex
Psoroptes
Sarcoptes

MANUALES UEX

CAVIDAD ABDOMINAL
Nematodos
Setaria

HGADO
Trematodos
Dicrocoelium
Fasciola
Cestodos
Echinococcus

105

PORTADA

NDICE

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Dpteros
Culicoides
Hypoderma
Hyppobosca
Musca
Sarcophaga
Stomoxys
Wohlfahrtia

MANUALES UEX

Ixdidos
Dermacentor
Hyalomma
Ixodes
Rhipicephalus
Haemaphysalis
Insectos
Anopluros
Haematopinus
Ischnoceros
Damalinia
Sifonpteros
Ctenocephalides
Pulex

106

PORTADA

NDICE

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PORCINOS

HGADO
Trematodos
Dicrocoelium
Fasciola
Cestodos
Echinococcus
Cysticercus
APARATO RESPIRATORIO
Cestodos
Echinococcus
Nematodos
Metastrongylus

APARATO UROGENITAL
Nematodos
Stephanurus
SANGRE
Protozoos
Babesia
MSCULO
Protozoos
Sarcocystis
Cestodos
Cysticercus
Nematodos
Trichinella
PIEL Y TEJIDO SUBCUTNEO
Artrpodos
Arcnidos
caros de la sarna
Demodex
Sarcoptes
Argsidos
Ornithodoros
Ixdidos
Boophilus
Dermacentor
Hyalomma
Ixodes
Rhipicephalus
Insectos
Anopluros
Haematopinus
Sifonpteros
Pulex
Ctenocephalides

MANUALES UEX

APARATO DIGESTIVO
Protozoos
Balantidium
Eimeria
Cryptosporidium
Isospora
Cestodos
Diphyllobothrium
Nematodos
Ascaris
Ascarops
Globocephalus
Gongylonema
Hyostrongylus
Oesophagostomun
Physocephalus
Simondsia
Strongyloides
Trichuris
Acantocfalos
Macracanthorhynchus

107

PORTADA

NDICE

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CARNVOROS

MANUALES UEX

APARATO DIGESTIVO
Protozoos
Cystoisospora
Giardia
Sarcocystis
Toxoplasma
Neospora
Entamoeba
Trematodos
Alaria
Plagiorchis
Cestodos
Diphyllobothrium
Diplopylidium
Dipylidium
Echinococcus
Joyeuxiella
Mesocestoides
Multiceps
Taenia
Nematodos
Ancylostoma
Capillaria
Physaloptera
Spirocerca
Strongyloides
Toxascaris
Toxocara
Trichuris
Uncinaria
APARATO RESPIRATORIO
Nematodos
Capillaria
Aelustrongylus

APARATO UROGENITAL
Nematodos
Capillaria
Dioctophyma
SANGRE
Protozoos
Babesia
Nematodos
Dirofilaria
Dipetalonema
SISTEMA MONONUCLEAR FAGOCTICO
Protozoos
Hepatozoon
Leishmania
MSCULO
Nematodos
Trichinella
PIEL Y TEJIDO SUBCUTNEO
Nematodos
Dipetalonema
Dirofilaria
Artrpodos
Arcnidos
caros de la sarna
Cheylletiella
Demodex
Notoedres
Otodectes
Sarcoptes
Ixdidos
Rhipicephalus

108

PORTADA

NDICE

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Dpteros
Calliphora
Lucillia
Sarcophaga
Wohlfahrtia

MANUALES UEX

Insectos
Anopluros
Linognathus
Ischnoceros
Trichodectes
Sifonpteros
Ctenocephalides
Pulex

109

PORTADA

NDICE

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AVES
APARATO DIGESTIVO
Protozoos
Cryptosporidium
Eimeria
Hexamita
Histomonas
Isospora
Tetratrichomonas
Trichomonas
Cestodos
Amoebotaenia
Choanotaenia
Davainea
Railletina
Nematodos
Amidostomun
Ascaridia
Capillaria
Epomidiostomun
Heterakis
Tetrameres
Trichostrongylus

APARATO RESPIRATORIO
Protozoos
Cryptosporidium
Nematodos
Cyathostoma
Syngamus
Artrpodos
Arcnidos
caros de la sarna
Cytodites
Gamsidos
Sternostoma
APARATO UROGENITAL
Trematodos
Prosthogonimus
SANGRE
Protozoos
Haemoproteus
Leucocytozoon
Plasmodium

MANUALES UEX

HGADO
Protozoos
Histomonas

110

PORTADA

NDICE

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Insectos
Ischnoceros
Columbicola
Menacanthus
Gonicotes
Gonioides
Lipeurus
Menopon
Hempteros
Cimex
Sifonpteros
Ceratophylus
Echidnophaga

MANUALES UEX

PIEL Y TEJIDO SUBCUTNEO


Artrpodos
Arcnidos
caros de la sarna
Knemidocoptes
Laminosioptes
Gamsidos
Dermanyssus
Ornithonyssus
Argsidos
Argas
Ixdidos
Haemaphysalis
Hyalomma
Ixodes

111

PORTADA

NDICE

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LAGOMORFOS
APARATO DIGESTIVO
Protozoos
Cryptosporidium
Eimeria
Encephalitozoon
Giardia
Cestodos
Andrya
Cyttotaenia
Hymenolepis
Mosgovoyia
Nematodos
Capillaria
Graphidium
Nematodirus
Passarulus
Strongyloides
Trichostrongylus
Trichuris

MANUALES UEX

HGADO
Protozoos
Eimeria
Trematodos
Fasciola
Dicrocoelium
Cestodos
Echinococcus
Cysticercus
Nematodos
Capillaria

APARATO UROGENITAL
Nematodos
Capillaria
MSCULO
Protozoos
Sarcocystis
Toxoplasma
PIEL Y TEJIDO SUBCUTNEO
Artrpodos
Arcnidos
caros de la sarna
Notoedres
Psoroptes
Sarcoptes
Cheyletiella
Gamsidos
Ornithonyssus
Ixdidos
Haemaphysalis
Hyalomma
Ixodes
Rhipicephalus
Insectos
Anopluros
Haemodipsus
Sifonpteros
Spilopsyllus
Echidnophaga
Xenopsylla

APARATO RESPIRATORIO
Nematodos
Protostrongylus

112

PORTADA

NDICE

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PECES
APARATO DIGESTIVO
Protozoos
Ceratomyxa
Eimeria
Entamoeba
Glugea
Hexamita
Trematodos
Diplostomun
Cestodos
Bothriocephalus
Khawia
Eubothrium
Nematodos
Capillaria
Acantocfalos
Echinorhynchus
Acanthocephalus

MSCULO, TEJIDO CONECTIVO


Y CARTLAGO
Protozoos
Ceratomyxa
Glugea
Henneguya
Myxosoma
Pleistophora
Sphaerospora
CAVIDAD CORPORAL
Cestodos
Diphyllobotrium
Ligula
Nematodos
Anisakidae
Philometra

MANUALES UEX

SISTEMA VASCULAR Y AGALLAS


Protozoos
Cryptobia
Nosema
Pleistophora
Henneguya
Haemogregarina
Myxosoma
Chilodonella
Trichodina
Tripanoplasma
Trypanosoma
Trematodos
Sanguinicola
Nematodos
Philometra

113

PORTADA

NDICE

F. J. SERRANO, E. M. FRONTERA, L. C. GMEZ, M. . HABELA, J. E. PREZ, D. REINA


Monogeneos
Benedenia
Dactylogirus
Gyrodactylus
Trematodos
Cryptocotyle
Moluscos
Unionidae
Anlidos
Piscicola
Artrpodos
Crustceos
Argulus
Ergasilus
Lernaea

MANUALES UEX

PIEL Y TEJIDO SUBCUTNEO


Protozoos
Amyloodinium
Ceratomyxa
Chilodonella
Costia (Ichtyobodo)
Cryptocarion
Dermocystidium
Epistylis
Glugea
Henneguya
Ichthyophtrius
Kudoa (Cloromyxum)
Oodinium
Pleistophora
Sphaerospora
Trichodina

114

PORTADA

NDICE

MANUAL PRCTICO DE PARASITOLOGA VETERINARIA


ABEJAS
APARATO DIGESTIVO
Protozoos
Malpighamoeba

MANUALES UEX

APARATO RESPIRATORIO
Artrpodos
Arcnidos
Acarapis

ECTOPARSITOS
Artrpodos
Arcnidos
Varroa
Insectos
Dpteros
Braula
Senotainia

115

PORTADA

NDICE

69

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