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LaetoxiquinamodificalosefectosbioqumicosehistopatolgicosdelaintoxicacincrnicaporaflatoxinasengallinasdeposturaEngormix

Avicultura/Artculostcnicos/Sanidad
Megusta

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Lasiguientepublicacintcnicaestarelacionadaalevento:
XXXVIIConvencinNacionalANECA2012

Laetoxiquinamodificalosefectosbioqumicose
histopatolgicosdelaintoxicacincrnicapor
aflatoxinasengallinasdepostura
Publicadoel:23/10/2012
Autor/es:MaraCarolinadeLunaLpez,ArturoG.Valdivia,TeoduloQuezadaTristan(Depto.deClnica
Veterinaria),ArmandoMartnezdeAnda,RaulOrtiz(Depto.deDisciplinasPecuarias)delCentrodeCiencias
AgropecuariasdelaUniversidadAutnomadeAguascalientes,FernandoJaramilloJurez(Departamentode
FisiologayToxicologa,CentrodeCienciasBsicas,CentrodeCienciasAgropecuariasdelaUAA)yJos
LuisReyes(DepartamentodeFisiologaCelularyNeurociencias,CINVESTAVIPN)
(1658)

(0)

Resumen
Seevalulacapacidaddeetoxiquinaparaprevenirelefectotxicodelasaflatoxinassobre
parmetrosbioqumicosehistopatolgicosengallinasdepostura.Lasavesconsumieron
aflatoxinas(0.00,0.50,1.00y1.50mg/kg)conysinetoxiquina(500mg/kgdealimento).Se
sacrificaronavesalas0,14,20,46y72semanasdeintoxicacin.Elconsumocrnicode
aflatoxinasprodujocambiosmorfolgicosybioqumicossignificativos(P<0.05)enhgadoy
riones,comodisminucindelaconcentracindeprotenastotalesyglutatinreducido
cambiodelaactividadenzimticadelastransferasasdeglutatiny
gammaglutamiltranspeptidasa.Laetoxiquinafueaceptadaporlasavesynoalterporsisola
lamorfologadelhgadoyriones.Elusodeetoxiquinamitigloscambios
bioqumicosinducidosporlasaflatoxinasenlasvariablesevaluadas,locualsugierela
existenciadeunefectoquimioprotectorccontraelefectotxicodelasaflatoxinas.
Palabrasclave:aflatoxicosis,hepatoxicidad,nefrotoxicidad,quimioprotectores,avicultura.
INTRODUCCIN
Lasmicotoxinasproducenunfuerteimpactoenlasaludhumanayanimalyseestimaquelas
mismas ocasionan importantes prdidas econmicas valuadas en millones de dlares. En la
industriaavcola,lasaflatoxinasrepresentanunserioproblemayaquefrecuentementeseles
ha relacionado con la contaminacin de los alimentos debido a sus propiedades txicas y
carcinognicas. Los efectos txicos ms importantes que stas producen en las aves es la
mortalidad cuando se consumen niveles muy altos, pero cuando los niveles van de

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mortalidad cuando se consumen niveles muy altos, pero cuando los niveles van de
moderadosabajosydemaneracrnica,ocasionanunareduccindelaproductividaddebido
aldaoproducidoprincipalmenteanivelheptico,renaleinmunolgico(11).

En gallinas de postura, se ha demostrado que las aflatoxinas inducen una disminucin de

la cantidad y calidad en el huevo producido (31), y aunque el organismo del animal
logra inactivar una buena parte de la aflatoxina incluida en los granos, cuando las dosis
destassonaltas,losnivelesdecontaminacinenelhuevorebasanloslmitesdedeteccin
y los lmites mximos de tolerancia (43). Durante los ltimos aos, varias investigaciones se
hancentradoencomponentesnonutricionalescontenidosenladieta(7,13,35)queayuden
a prevenir, disminuir o inactivar el efecto de las aflatoxinas. Se ha demostrado que
la quimioproteccin puede prevenir, inhibir o revertir el efecto patolgico ocasionado
por algunos agentes txicos, como es el caso de las aflatoxinas (22). La etoxiquina es
un compuesto sinttico empleado para proteger sustancias lipdicas y preservar carotenos
yvitaminasAyE,ademsprevienelacombustinespontneadeproductosalmacenadosal
inhibirelcalorproducidoporlaoxidacindelpidos(3,40).Enlaaviculturaseusaparainhibir
laoxidacindelpidosycompuestosliposolublesenelalimentoyasmejorarlaestabilidadde
lagrasayprotenasenelpollodeengorda(26)laprevencindelaoxidacindecompuestos
nutricionales se vuelve importante para que exista un crecimiento y desarrollo ptimos, ya
queelincrementodelconsumodeperxidospuedecausarunadisminucindecrecimientoy
un efecto negativo en la eficiencia alimenticia (40). Con base en lo anterior, se ha
planteado que el uso de agentes quimioprotectores, como la etoxiquina, adicionados en la
dieta puede prevenir o atenuar los efectos txicos sobre los parmetros bioqumicos
ypatolgicosocasionadosporlaintoxicacincrnicaalimentariaconaflatoxinas.

MATERIALESYMTODOS
Se adquirieron 240 gallinas de postura Hy Line W36 de un da de edad, con semejanza de
pesocorporal(media5.0%)yausenciadedefectosmorfolgicos.Lasavesfueroncriadas
bajo procedimientos zootcnicos estndar (16) el agua y alimento fueron suministrados ad
libitum desde el primer da hasta la semana 85 de edad. Para la etapa de crianza las aves
fueron alojadas en jaulas en batera con calefaccin manual y para la etapa de desarrollo y
produccinseutilizaronjaulasinvertidasenpirmidededospisos.Elmanejodelasavesyde
las instalaciones fueron mantenidas dentro de las recomendaciones de la Federation of
Animal Science Societies (5). La dieta base fue elaborada de acuerdo a los
requerimientos nutricionales sealados por la National Research Council (27), no se
aadieroncoccidiostatos,antibiticosnipromotoresdelcrecimiento.
Las aflatoxinas se obtuvieron mediante la contaminacin de maz con utilizando dos cepas
toxicognicas de Aspergillus flavus (39). La dieta base y el maz contaminado se analizaron
mediante cromatografa lquida de alta resolucin para cuantificar la concentracin de
micotoxinasdeacuerdoalmtodosealadoporlaAOAC(mtodo990.33)(34).
Las aves fueron anestesiadas (25 mg/kg de pc de pentobarbital sdico va IV) hasta
que alcanzaron un plano quirrgico para luego realizar una perfusin in situ. El hgado y
los riones fueron pesados, adems se obtuvieron muestras de ambos rganos y
Ingresar o registrarme
seconservaronenunasolucinfijadora(formalinaneutraal10%)hastaqueselesrealizla
tcnicahistolgicaconhematoxilinayeosina(28).Tambinseobtuvieronmuestrasdedichos
Inicio Foros Artculostcnicos ContactarProfesionales Noticias Eventos Productos Indicetemtico
rganos
Videos para
Fotos cuantificar la concentracin de glutatin reducido (14), para determinar la
Iniciarsesin

actividadenzimticadelastransferasasdeglutatin(10)ydegammaglutamiltranspeptidasa
(4,17).

Avicultura
Avicultura

Registro

Se utiliz un diseo experimental completamente al azar con un anlisis estadstico con

Ingresesudireccindeemail
arreglofactorialdetratamientos(36),comparandodosnivelesdelquimioprotector(0.00y500
mg/kg de alimento) contra cuatro niveles de aflatoxinas (0.00, 0.50, 1.00 y 1.50 mg/kg de
Nombrecompleto
alimento). Para la evaluacin de los parmetros bioqumicos y patolgicos
se realizaron
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Nombrecompleto
alimento). Para la evaluacin de los parmetros bioqumicos y patolgicos
se realizaron
cinco muestreos que correspondientes a un da de edad (da cero), 27 semanas de edad
(14 semanas de intoxicacin), 31 semanas de edad (20 semanas de intoxicacin),
59 semanas de edad (46 semanas de intoxicacin) y 85 semanas de edad (72
semanas
de
Contrasea
(6omscaracteres)
intoxicacin) de las gallinas. La comparacin de medias de los tratamientos se realiz por
mediodelapruebaprotegidadeFischer,considerandounniveldeprobabilidadP<0.05.Los
datos de todas las variables fueron sometidos a un anlisis de varianza mediante el
Perfil
procedimientoparamodeloslinearesgeneralesdelsoftwareStatisticalAnalysisSystem(33).
Seleccionesuperfil

RESULTADOS
Enelanlisismicroscpicodelhgadoyrindelasgallinasquenoconsumieronaflatoxinas, REGISTRESE
mostrunarregloestructuralcaractersticodeambosrganos.Conlametodologautilizada,
no se detectaron diferencias en el grado de dao a la estructura celular atribuible a las
diferentes dosis de las aflatoxinas ni tampoco al empleo del quimioprotector combinado con
Ingresarusandotucuentade
las mismas. La principal alteracin en el caso del hgado fue la degeneracin
grasa microvesicular y macrovesicular, focos necrticos en hgado y rin de las
gallinas intoxicadas, focos de infiltracin linfocitaria y amiloidosis en la periferia de
vasos sanguneos y en el espacio perisinusoidal. En el caso del rin, tambin se
observaron focos de infiltracin linfocitaria entre los glomrulos y tbulos renales as
como amiloidosis en vasos sanguneos en el rea mesangial de los glomrulos y alrededor
delostbulos.
En las aves intoxicadas con aflatoxinas se observ un descenso en la concentracin
de glutatin reducido heptico, principalmente en las dosis ms elevadas y al final de la
faseexperimental(FiguraNo.1).

FIGURANo.1.Efectodeltratamientoconaflatoxinasyetoxiquinasobrelaconcentracinde
glutatin reducido en hgado y rin. Los asteriscos (**) indican diferencias significativas
(P<0.01)alapruebaderangodeamplitudmltipledeDuncan

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(P<0.01)alapruebaderangodeamplitudmltipledeDuncan
Enloquerespectaalglutatinreducidorenal,todoslosgruposdetratamientomostraronun
descenso en la semana 72 de intoxicacin aunque las aves intoxicadas y tratadas
conetoxiquinatuvieronunaconcentracinde
glutatin reducido similar al del grupo control, hubo diferencias significativas (P<0.01) en la
semana46deintoxicacin.Encuantoalastransferasasdeglutatindurantelasprimeras20
semanas de tratamiento, se produjo una actividad enzimtica irregular en hgado y rin,
pero posteriormente se observ una estabilizacin de los efectos de las aflatoxinas y
de etoxiquina destacando una disminucin significativa (P<0.01) en las semanas 46 y 72 de
intoxicacin(FiguraNo.2).

FIGURA No. 2. Efecto del tratamiento con aflatoxinas y etoxiquina sobre la actividad de
las transferasas de glutatin en hgado y rin. Los asteriscos (**) indican diferencias
significativas(P<0.01)alapruebaderangodeamplitudmltipledeDuncan
La actividad de las transferasas de glutatin hepticas de las aves intoxicadas
disminuy significativamente (P<0.01) al final del estudio en las dosis ms elevadas de
aflatoxinas con referencia al grupo control. Sin embargo, el incremento de la actividad
enzimtico producido en las dosis ms baja, entre las semanas 46 y 72, coincide con la
deplecindeglutatinreducidoenestemismorganoduranteelmismoperiodo.Estemismo
efecto se observ en el caso de la actividad de las transferasas de glutatin a nivel de
rin,aunquehubounaactividadmselevadaqueelgrupocontrol.
Laactividaddelagammaglutamiltranspeptidasaenhgadoseincrementsignificativamente
(P<0.01) en las gallinas intoxicadas con las dosis elevadas (1.0 y 1.5 mg/kg) durante la
semana 20 de intoxicacin y con referencia a las gallinas control (0.0 mg/kg). Con el
transcursodeltiempo,laactividadfuedescendiendosignificativamente(P<0.01)hastaelfinal
delestudioenlasgallinasquerecibieronlastresdosisdeaflatoxinas(FiguraNo.3).
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delestudioenlasgallinasquerecibieronlastresdosisdeaflatoxinas(FiguraNo.3).

FIGURA No. 3. Efecto del tratamiento con aflatoxinas y etoxiquina sobre la actividad de
gamma glutamiltranspeptidasa en hgado y rin. Los asteriscos (**) indican diferencias
significativas(P<0.01)alapruebaderangodeamplitudmltipledeDuncan
La actividad de la enzima mostr una tendencia ms estable durante toda la
fase experimental en el grupo etoxiquina con algunas variaciones significativas (P<0.01).
Adiferenciadeloocurridoenhgado,laactividaddelaenzimaenrinfuemenoryconun
comportamiento regular durante toda la fase experimental con algunas
variaciones significativas (P<0.01), principalmente durante las primeras 20 semanas
deintoxicacin.
DISCUSIN
La degeneracin grasa en hgado que se observ en los grupos intoxicados con aflatoxinas
enesteestudio,sedebeaquesteeselprincipalrganoenelcualsellevaacabolasntesis
decidosgrasos(1,6,38).SehaindicadoqueelconsumodeaflatoxinaB1producedaoen
los genes que sintetizan enzimas que metabolizan cidos grasos, ocasionando una
disminucinenlaactividaddelasmismasyeneltransportedelpidos,originandounaumento
en la concentracin de lpidos y el peso relativo del hgado (30, 37, 42), ocurriendo
principalmenteenexposicionescrnicas(15).Lapresenciadeclulasinflamatoriasenreas
daadas del hgado y rin, especficamente en zonas perivasculares, debido al consumo
de aflatoxinas, es una respuesta inflamatoria que puede estar involucrada en un
procesoregenerativodeclulasparenquimatosasynoparenquimatosas,espectivamente(18,
21) mientras que la amiloidosis tambin se ha indicado que se produce como una
respuesta secundaria a enfermedad crnica o procesos destructivos de tejido (25). La
degeneracin epitelial y la falta del borde en cepillo en los tbulos contorneados proximales
del rin se ha relacionado a necrosis tubular aguda ocasionados por este tipo de
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del rin se ha relacionado a necrosis tubular aguda ocasionados por este tipo de
micotoxinas. Los cambios producidos en la estructura renal, tales como el incremento en el
espacio de la cpsula de Bowman y en la morfometra glomerular (23, 38), ocasionan una
falla en el funcionamiento renal, dependiendo de la dosis y duracin de la exposicin
alxenobitico(8,21,32).
Los niveles de glutatin reducido heptico y renal de las aves intoxicadas tratadas
con etoxiquina, posiblemente no se incrementaron debido a la funcin antioxidante del
compuesto. Sin embargo, las variaciones observadas en hgado, se interpreta como una
menor produccin de epxidos de aflatoxina y que no requiri de manera importante la
utilizacin de la ruta metablica de formacin de cido mercaptrico. En presencia de
aflatoxinas, el nivel de glutatin reducido heptico disminuye debido a que es el
principal rgano blanco (38), adems de que sus niveles son ms elevados comparado con
los riones (24, 29), los cuales reciben un menor porcentaje de la aflatoxina
absorbida, ejerciendo el mismo efecto sobre la concentracin de glutatin reducido
presente en este rgano. En las aves intoxicadas, el glutatin reducido renal descendi tal
vez porque sus niveles no son tan elevados como los que presenta el hgado, por lo que
fue insuficiente para formar conjugados con los epxidos de aflatoxinas sin embargo, se
ha reportado que la deplecin de los niveles de glutatin reducido por este tipo de
agentestxicosproduceconsecuenciascelularesqueculminanconladestruccindelaclula
y falla del rgano afectado (19). Aunque la etoxiquina no confiri proteccin en las gallinas
intoxicadassobreesteparmetroaniveldehgadoyrin,estudiosenratashandemostrado
que este quimioprotector es capaz de inducir la formacin de conjugados que epxidos con
glutatin reducido heptico (12). En aves, los efectos quimioprotectores de etoxiquina
contraaflatoxinassonpococonocidos.
El incremento de la actividad de la gamma glutamiltranspeptidasa en hgado de las gallinas
intoxicadas puede interpretarse como una respuesta del organismo para sintetizar esta
enzimaantelapresenciadeconjugadosdeepxidosdeaflatoxinaconglutatinreducido.El
descensodelaactividadalfinaldelestudiopuederelacionarseaunefectodeconsumodela
enzima al participar en la eliminacin de los conjugados por la va del cido mercaptrico.
Mientrasquelaestabilidaddelaactividadenzimticaenlasavesintoxicadasytratadascon
etoxiquina, probablemente se produjo porque se el quimioprotector evit la formacin
deepxidos,reduciendoaslautilizacindelavadelcidomercaptrico,debidoasuefecto
antioxidante.Laactividaddisminuidayestabledelagammaglutamiltranspeptidasaenrin
de las gallinas intoxicadas durante las primeras semanas de la fase experimental, pudo
deberse a que el hgado es el principal rgano encargado de metabolizar las aflatoxinas,
mientras que los riones tienen un porcentaje menor de participacin. Sin embargo, en las
aves intoxicadas tratadas con etoxiquina, este compuesto ejerci sus propiedades
antioxidantes,pueselincrementodelaactividadquesepresent,posiblementesedebiaun
menorporcentajedeaflatoxinasquelogrllegaralrin,observndoseunefectocrnicoal
final del experimento, donde el grado de actividad enzimtica fue proporcional a la dosis
deaflatoxinas,suponiendoquetalvezlanicadosisdelquimioprotectorquefuesuministrada,
sesaturconformeseincrementladosisdelamicotoxina.Estudiosenratas,hanindicado
queelrinjuegaunpapelmuyimportanteenlaeliminacindeestetipodexenobiticospor
filtracin va glomerular, debido a que presentan una elevada actividad enzimtica de la
gammaglutamiltranspeptidasaynivelesaltosdeglutatinreducido(9,41).Sesabepocodel
efecto de etoxiquina sobre la actividad de lagamma glutamiltranspeptidasa en
pollos intoxicados con aflatoxinas. Pero algunos autores reportaron la eficacia de la
etoxiquina en pollos alimentados con dietas que contenan grasas oxidadas, donde
los resultados obtenidos indicaron concentraciones elevadas de glutatin reducido y gamma
glutamiltranspeptidasa a nivel intestinal, donde la etoxiquina se encarg de transportar
glutatin reducido a las clulas intestinales y por tantoincrementar la actividad enzimtica
contratoxinaspresentesenellos(2,20).

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Autor/es
ArmandoMartnezdeAnda
,Mxico

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