UNIVERSIDAD TCNICA DE AMBATO

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE LABORATORIO CLNICO

TEMA: VIH (Virus de la Inmunodenficiencia Humana)

ASIGNATURA: Sangre y Componentes Seguros II

Nombre:
Germania Gallardo L.
Docente:
Dr. Jos Acosta

Ambato
2016

VIH (Virus de la Inmunodenficiencia Humana)

HISTORIA
Tabla 1. Historia del VIH.
FECHA
Mayo de 1981

ACONTECIMIENTO
Se conoci en Estados Unidos el sndrome de
inmunodeficiencia adquirida (SIDA)

1983

En el instituto Pasteur (Francia) e Instituto Nacional de

Salud (EE.UU.) se descubri el virus etiolgico. Fue
denominado virus linfotrpico de clulas T humanas

1986

(HTLV-III)
Comit Internacional de virlogos lo design, como
virus de inmunodeficiencia humana (HIV) (Human

1987

immunity virus)
Se identific el HIV-2

Fuente: (Meja & Meja, 2006)

VIH
El VIH es un virus que pertenece a los retrovirus de 100 nm, los que tienen
perodos prolongados de incubacin, desde el momento en que se infecta el
individuo hasta el desarrollo de los sntomas. El virus se halla en saliva,
lgrimas, leche materna y orina sin comprobarse su agresividad, pero en
sangre, semen y secreciones vaginales, es altamente contagioso. (Meja &
Meja, 2006)
En la estructura de VIH cada virin expresa 72 proyecciones glucoprotenicas
compuestas por gp120 y gp41. La gp41 es una molcula transmembranal que
cruza la bicapa lipdica de la cubierta vrica. La molcula gp120 se relaciona
directamente con la molcula gp41 y funciona como receptor vrico para el CD4
de la clula hospedadora. La cubierta vrica se deriva de la clula hospedadora

y contiene algunas protenas de la membrana de sta, entre ellas molculas

MHC clases I y II. Dentro de la cubierta se encuentra el ncleo vrico, o
nucleocpside, constituido por una capa de una protena denominada p17 y
una capa interior de una protena llamada p24. El genoma del VIH posee dos
copias de RNA monocatenario, las cuales se relacionan con dos molculas de
inversotranscriptasa (p64) y protenas de nucletido p10, una proteasa y p32,
una integrasa. (Kindt, Goldsby, & Osborne, 2007)
Figura 1. Estructura de VIH

Fuente: (Kindt, Goldsby, & Osborne, 2007)

Una persona que se infecta con el VIH va perdiendo, de forma progresiva, la
funcin de ciertas clulas del sistema inmune como son macrfagos y linfocitos
T CD4 o helper, al perder esta funcin los sujetos estn expuestos a padecer
infecciones por grmenes oportunistas como el Pneumocystis carini,
Criptococus neoformans, virus del Herpes simple, monilias, hongos,
toxoplasma, mycobacterium, etc., y tambin pueden desarrollar tumores que
atacan al organismo y causan la muerte debido a que las defensas del
individuo son escasas. (Meja & Meja, 2006; Reyes, 2008)
El perodo medio de incubacin despus de ser infectado por el virus en el
caso de que el contagio se haya dado por transfusin sangunea, es de 8,23
aos en adultos y de 1,97 en nios menores de 5 aos. Este virus en el medio
ambiente se destruye fcilmente. El Hipoclorito de sodio al 10% empleado para
asear los pisos, lo destruye inmediatamente al igual que el calor, jabn, etc., y
tampoco es transmitido por ningn insecto. (Meja & Meja, 2006)

CLASES
En la actualidad se conocen dos clases. El HIV-1 que es el responsable del
Sida en nuestro medio y el que predomina en todas partes del mundo, con
excepcin de frica Occidental donde se identific el HIV-2. El HIV 2 se ha
encontrado fuera del frica en Estados Unidos, en Francia, Pars, Alemania
Occidental, Reino Unido y en Londres. (Meja & Meja, 2006)
Muchas infecciones virales pertenecen al VIH 2, por lo tanto aparecen
negativas cuando se emplean antgenos que slo investigan el HIV-1. La gran
diferencia biolgica, radica en la capa de envoltura del virus, que tiene una
constitucin de aminocidos diferente. (Meja & Meja, 2006)

MECANISMOS DE INFECCIN
1. Por relaciones sexuales (hetera u homosexuales).
2. Por la sangre (trasfusiones - agujas infectadas).
3. Placentaria (madre infecta al lactante). (Meja & Meja, 2006)

MECANISMOS PATGENOS DEL VIH

El VIH infecta principalmente linfocitos T CD4 y clulas de la estirpe de

los macrfagos (p. ej., monocitos, macrfagos, macrfagos alveolares
del pulmn, clulas dendrticas de la piel y clulas de la microglia del

cerebro).
El virus provoca la infeccin ltica de los linfocitos T CD4 y una infeccin
persistente productiva de bajo nivel de clulas de la estirpe de los

macrfagos.
El virus provoca la formacin de sincitios en clulas que expresan
grandes cantidades de antgeno CD4 (linfocitos T) con la subsiguiente

lisis de las clulas.

El virus altera la funcin de los linfocitos T y de los macrfagos.

El virus reduce el recuento de linfocitos T CD4 y el mantenimiento por

parte de los linfocitos T colaboradores de la funcin de los linfocitos T

CD8 y los macrfagos.

El nmero de linfocitos T CD8 y la funcin de los macrfagos se
reducen.

MANIFESTACIONES CLNICAS
Las manifestaciones clnicas que presenta este virus son muy diversas. Se
presenta con las siguientes fases:
La fase inicial, misma que puede ser asintomtica, pero en la mayora de los
casos desde la segunda a la sexta semana de exposicin al virus, los pacientes
desarrollan fiebre, linfadenopatas generalizadas, cefalea, faringitis y eritemas.
(Suardiaz, Cruz, & Colina, 2004)
La fase latente se caracteriza por una progresin de la enfermedad en los
tejidos linfoides y cada vez ms, las clulas TCD4+, los macrfagos y las
clulas dendrticas son infectados. Este perodo puede durar alrededor de 10
aos. (Suardiaz, Cruz, & Colina, 2004)
Tabla 2. Sntomas iniciales de un paciente con VIH.
Leucopenia, linfopenia, trombopenia, anemia normocrmica
Mdula sea normal (Alteracin hematolgica perifrica)
Enzimas hepticas elevadas, con bilirrubina normal
Inmunoglobulina IgG - Superior a 2.000 mg/dL
Inmunoglobulina IgA - Superior a 350 mg/dL
Inmunoglobulina IgM - Inferior a 30 mg/dL
Cociente linfocitario: CD4/CD8 - Muy bajo
CD4 - (Helper inductores) CD8 - (Supresores citotxicos)

Anticuerpos HIV: Positivos (90% son HIV-1)

Fuente: (Meja & Meja, 2006)
SIDA
Sndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA), conjunto de manifestaciones
clnicas que aparecen como consecuencia de la depresin del sistema
inmunolgico debido a la infeccin por el virus de la inmunodeficiencia humana
(VIH). (Reyes, 2008)

DIAGNSTICO
El VIH despus del perodo de incubacin en el organismo hospedador obra
como antgeno y se desarrolla anticuerpos especficos. El primer Ac en
aparecer es el anti p-24, como respuesta a la protena p-24 base de las
glicoprotenas estructurales de la envoltura y posteriormente l contra las
protenas del ncleo viral gp-160-gp-120 y 41-gp. Las concentraciones de
anticuerpos siguen aumentando, hasta llegar al perodo de estabilizacin que
persiste hasta la muerte. (Meja & Meja, 2006)
Hemograma completo
Es un medio rpido que puede brindar mucha informacin, por ejemplo, anemia
y alteraciones morfolgicas de los hemates, que puede acompaar a los
defectos celulares, neutropenias, linfopenias y trombocitopenias. (Suardiaz,
Cruz, & Colina, 2004)
Eritrosedimentacin
Orienta hacia la presencia de infeccin o proceso inflamatorio. (Suardiaz, Cruz,
& Colina, 2004)
Evaluacin de la respuesta humoral
a) Electroforesis de protenas: presencia de hipo-gammaglobulinemia o de
hiper-gammaglobulinemia.

b) Cuantificacin de inmunoglobulinas sricas.

c) Dosificacin de subclases de IgG.
d) Titulacin de anticuerpos tras la vacunacin (antitetnico, antineumococo).
e) Recuento porcentual y absoluto de linfocitos B: CD19, CD20, Ig de
superficie. (Suardiaz, Cruz, & Colina, 2004)
Evaluacin de la respuesta celular.
a) Respuesta proliferativa de linfocitos B a mitgenos y produccin de Ig in
vitro.
b) Recuento porcentual y absoluto de linfocitos T: CD2, CD3, CD4, CD7, CD8.
c) Cultivo mixto de linfocitos. (Suardiaz, Cruz, & Colina, 2004)
Pruebas funcionales de clulas NK.
Evaluacin del sistema mononuclear fagoctico
a) Recuento absoluto de neutrfilos.
b) Adherencia, quimiotaxis, fagocitosis.
c) Presencia de molculas de adhesin CD11/CD18. (Suardiaz, Cruz, & Colina,
2004)
Carga viral
Es la cantidad de virus circulante, que valora el estado de infeccin y es un
gran criterio para evaluar la respuesta al tratamiento. Se basa en las tcnicas
de cuantificacin de los cidos nucleicos (ADN y ARN) como la reaccin en
cadena de la Polimerasa PCR, la misma que consiste en amplificar in vitro una
regin especfica de ADN con el fin de producir en 3 horas ms de un billn de
copias. Un nivel de carga viral alta es cuando tiene ms dc 100.00 copias dc
PCR por mL dc plasma. Intermedia entre 10.000 a 100.000 copias y baja con
menos de 10.000 copias. (Meja & Meja, 2006)

Se debe cuantificar la carga viral con 2 determinaciones e intervalo de 3

semanas, debido a la gran variabilidad individual con el fin de apreciar la
evolucin en el tratamiento. ste debe ir orientado a tener niveles inferiores a
500 copias de ADN. (Meja & Meja, 2006)

TCNICAS DE DIAGNSTICO
Tabla 3. Pruebas de Laboratorio de VIH

Fuente: (Murray, Rosenthal, & Pfaller, 2009)

ELISA
La tcnica de enzimoinmunoanlisis de absorcin utiliza un antgeno
inmovilizado en una superficie, una bolita o un filtro de plstico con el objeto de
capturar y separar un anticuerpo especfico de otros anticuerpos presentes en
el suero de un paciente. El anticuerpo del paciente as fijado se detecta
posteriormente por medio de un anticuerpo antihumano unido por un enlace
covalente a una enzima (p. ej., peroxidasa de rbano picante, fosfatasa

alcalina, -galactosidasa). Se cuantifica por espectrofotometra en funcin de la

intensidad del color producido como respuesta a la conversin de un sustrato
adecuado por la enzima. Se puede determinar la concentracin real del
anticuerpo especfico por comparacin con la reactividad de soluciones
estndar de anticuerpos humanos. (Murray, Rosenthal, & Pfaller, 2009)
Figura 2. Deteccin de Anticuerpos y Antgenos

Fuente: (Murray, Rosenthal, & Pfaller, 2009)

Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)

Amplifica copias simples de ADN vrico varios millones de veces. Se incuba la
muestra con dos oligmeros cortos de ADN, denominados cebadores, los

cuales contienen unas secuencias complementarias a las de los extremos de

una secuencia gentica conocida del ADN completo, una polimerasa de ADN
dotada de estabilidad trmica (Taq u otra polimerasa obtenida a partir de
bacterias termoflicas), nucletidos y tampones. (Murray, Rosenthal, & Pfaller,
2009)
Los oligmeros se hibridan con la secuencia apropiada de ADN y actan como
cebadores para la actuacin de la polimerasa, la cual copia ese segmento de
ADN. Posteriormentese calienta la muestra con el propsito de desnaturalizar
el ADN (separar las cadenas de la doble hlice) y se enfra para permitir la
hibridacin de los cebadores con el nuevo ADN formado en el ciclo anterior.
Cada copia de ADN se convierte en un nuevo patrn para la sntesis de nuevas
molculas. (Murray, Rosenthal, & Pfaller, 2009)
El proceso se repite un gran nmero de veces (de 20 a 40) con el fi n de
amplificar la secuencia del ADN original de manera exponencial. Una secuencia
diana se puede amplificar 1.000.000 de veces en unas pocas horas a travs de
este mtodo. Esta tcnica es especialmente til para detectar retrovirus, los
virus del herpes, los papilomavirus y otros virus de ADN. (Murray, Rosenthal, &
Pfaller, 2009)
Figura 3. Reaccin en cadena de la polimerasa

Fuente: (Murray, Rosenthal, & Pfaller, 2009)

PCR-TI (reaccin en cadena de la polimerasatranscriptasa inversa)
Es una variacin de la PCR convencional, se utiliza la transcriptasa inversa de
los retrovirus para convertir el ARN vrico o el ARN mensajero en ADN con
anterioridad a su amplificacin por PCR. Esta tcnica se concibi con el fin de
cuantificar la cantidad de ADN o ARN presente en una muestra tras su
conversin a ADN por la transcriptasa inversa. De forma sencilla, cuanto mayor
sea la cantidad de ADN presente en una muestra, mayor ser la velocidad de
sntesis de nuevo ADN en la reaccin de PCR, ya que la cintica de la reaccin
es proporcional a la cantidad de ADN. (Murray, Rosenthal, & Pfaller, 2009)
La produccin de ADN bicatenario se determina en funcin del incremento de la
fluorescencia de una molcula unida a la molcula de ADN bicatenario
amplificado o mediante algn otro mtodo. Este procedimiento resulta de
utilidad para cuantificar el nmero de genomas del virus de inmunodeficiencia
humana (VIH) presente en la sangre de un paciente al evaluar el desarrollo de

la enfermedad y la eficacia de los frmacos antivricos. (Murray, Rosenthal, &

Pfaller, 2009)

Anlisis con ADN de cadena ramificada

Es una nueva alternativa a la PCR y la PCR-TI y se emplea en la deteccin de
pequeas cantidades de secuencias especficas de ARN o ADN. Esta tcnica
resulta especialmente til para cuantificar las concentraciones plasmticas de
ARN del VIH (carga vrica plasmtica). (Murray, Rosenthal, & Pfaller, 2009)
En este caso, el plasma se incuba en un tubo especial que est revestido de
una secuencia corta de ADN complementario (ADNc) capaz de capturar el ARN
vrico. Se agrega otra secuencia de ADNc para que se una a la muestra, pero
este ADN est unido a una cadena ADN artificialmente ramificada. Cada rama
es capaz de iniciar una seal detectable durante la prueba, de forma que se
amplifica la seal de la muestra inicial. (Murray, Rosenthal, & Pfaller, 2009)

Western-blot (WB).
Es una variante del anlisis ELISA. Esta tcnica transfiere protenas vricas
separadas por electroforesis segn su peso molecular o su carga a un papel de
filtro (p. ej., nitrocelulosa, nailon). Cuando se exponen al suero del paciente,
las protenas inmovilizadas capturan los anticuerpos antivricos especficos y se
visualizan mediante anticuerpos antihumanos conjugados con enzimas. Esta
tcnica muestra las protenas reconocidas por el suero del paciente. El anlisis
de transferencia de Western se usa para confirmar los resultados del anlisis
ELISA. (Murray, Rosenthal, & Pfaller, 2009)
Un suero de prueba completamente reactivo debe reaccionar con las protenas
gag p17, p24, p26, p55; las protenas pol p31, p56 y p66 y las glicoprotenas
env gp41, gp120 y gp160. Una muestra se define como anti-VIH positiva si se

presentan como mnimo 2 de las siguientes bandas: p24, gp41, gp120/160.

(Meja & Meja, 2006)
Figura 4. Anlisis de transferencia de Western de antgenos y anticuerpos del
VIH.

Fuente: (Murray, Rosenthal, & Pfaller, 2009)

INVESTIGACIN ACERCA DEL VIH

Tabla 4. Investigacin acerca de VIH.
CASO: En San Francisco se investig a cerca de 6.700 varones donde el
94% de los casos de Sida est constituido por hombres homosexuales
o bisexuales y slo el 2% por drogadictos, se encontr un perodo de
incubacin de 7,7 aos.
40%

Desarrollo SIDA

40%

Presentaban sntomas

20%

Asintomticos, con Ac positivos

Fuente: (Meja & Meja, 2006)

Bibliografa
Kindt, T., Goldsby, R., & Osborne, B. (2007). Inmunologa de Kuby (Sexta
ed.). Mxico.
Meja, G. ., & Meja, M. (2006). Interpretacin clnica del laboratorio
(Sptima ed.). Bogot: Medica Panamericana.
Murray, P., Rosenthal, K., & Pfaller, M. (2009). Microbiologa mdica (Sexta
ed.). Espaa: Elsevier.
Reyes, O. (2008). Manual bsico de laboratorio clnico. Bogot: 2008.
Suardiaz, J., Cruz, C., & Colina, A. (2004). Laboratorio clnico. La Habana:
Ciencias Mdicas.