Metabolismo del colesterol

El colesterol (C27)

El ncleo esteroideo
Ciclopentanoperhidrofenantreno
Un OH- en C-3

Cadena
Lateral
alquilo

Cabeza
polar

Ncleo
esteroideo

Un doble enlace entre

C-5 y C-6
Una cadena
hidrocarbonada de 8
carbonos unida a C-17
Dos metilos unidos a C10 y C-13 (C-19 y C-18)
2

Colesterol
El ncleo esteroideo es casi planar y rgido.

Los anillos se disponen en conformacin de silla.

El colesterol es anfiptico

tiene un grupo hidroxilo como cabeza polar.

El hidroxilo puede estar esterificado con un cido
carboxlico de cadena larga (cido graso) para formar
un ster de colesterilo.

Esteroles
Los esteroles son lpidos estructurales
presentes en membranas eucariotas.

El colesterol es el ms abundante en los tejidos

animales.
Otros organismos tienen esteroles anlogos, como el
ergosterol.

Los esteroles son precursores de varios

productos con actividad biolgica
Hormonas esteroideas
Acidos biliares
Vitamina D

El colesterol en las membranas

no est esterificado
El colesterol modula la fluidez de la

membrana.
El colesterol est presente en todas las
clulas, particularmente en estructuras
mielnicas del sistema nervioso central.

Transporte de colesterol
Es muy poco soluble en agua (0.002 g/L).
La concentracin plasmtica es 1.5 a 2.0 g/L.
Esto se explica porque se transporta unido a las
lipoprotenas plasmticas, principalmente VLDL
y LDL.
30% como colesterol no esterificado (libre)
70% como colesterol esterificado,
Esteres con AG, frecuentemente esenciales
Es an ms insoluble.

Lipoprotena
plasmtica

Monocapa
De fosfolpidos

Triacilglicridos

Apolipoprotena

Colesterol no esterificado
steres de colesterilo

Colesterol
El colesterol tambin es abundante en la

bilis (3.9 g/L), donde la solubilizacin del

colesterol se consigue gracias a las
propiedades detergentes de los
fosfolpidos y las sales biliares presentes.
Las sales biliares son el producto de
desecho del colesterol y la forma de
solubilizar los lpidos de la dieta
9

Panormica del metabolismo del

colesterol
~0,3 gr/da

1 gr/da

10

Absorcion intestinal de
colesterol

11

Absorcin de colesterol de la dieta

Colesterol
esterasa

ABC

Sintesis
De
quilomicrones

ACAT
Luz intestinal

12

Absorcin intestinal
Aproximadamente la mitad del colesterol requerido

por el organismo es sintetizado, el resto es provisto

por la dieta.
Si decrece el colesterol ingerido con la dieta,
aumenta la sntesis, y viceversa.
Los steres de colesterilo son hidrolizados por la
enzima pancretica colesterol esterasa.
En la luz intestinal forma micelas con los cidos
biliares.
El colesterol, los cidos grasos, los 2monoacilgliceroles y otros lpidos de la dieta, entran a
los enterocitos por difusin pasiva.
13

Absrcion intestinal de colesterol

Dentro de los enterocitos

parte del colesterol se reesterifica por accin de

la enzima acil-CoA-colesterol acil
transferasa (ACAT).
El CE se empaqueta con TAG y fosfolpidos, con
la apolipoproteina B48 en quilomicrones.
Los quilomicrones transportan los lpidos de la
dieta desde el intestino a la circulacin general
a travs de la linfa.

14

ATP-binding cassette (ABC)

Aunque la absorcin de colesterol a nivel del

intestino es un proceso controlado por

difusin, existe un mecanismo para remover
excesos de colesterol y otros esteroles.

En la membrana luminal del enterocito existen

protenas transportadoras de la familia ABC (ATPbinding cassette), ABC1, ABCG5 y ABCG8.
Estas protenas acoplan la hidrlisis de ATP al
transporte del colesterol a la luz del intestino para su
eliminacin por las heces.

15

Transporte plasmtico de colesterol

El colesterol absorbido se transporta a los

tejidos en los QM, cuya apolipoprotena principal

es la B48.
El colesterol se sintetiza predominantemente en
hgado (800 mg/da), intestino, corteza adrenal
y gnadas.
El colesterol sintetizado en el hgado se
transporta a los tejidos perifricos unido a
lipoprotenas que contienen apolipoprotena
B100 (VLDL y LDL).

16

Biosntesis de colesterol

17

 Tiene lugar en el citosol de todas las clulas,

sobretodo:

Hgado
intestino
corteza suprarrenal
tejidos reproductores (ovario, testculo y placenta).

Se sintetiza a partir de
acetil-CoA (fuente de carbono)
NADPH (poder reductor)

Impulsada por hidrlisis de enlaces tioster del

acetil-CoA y fosfodister del ATP.

18

Biosntesis de colesterol

Acetato

Colesterol
19

4 etapas claves en la sntesis de colesterol

Acetato

Mevalonato

isopreno

La
sntesis
de
escualeno se realiza
mediante la adicin
de 6 unidades de
isopreno (unidades
de 5 carbonos).

Isopreno Activado
Colesterol
4
Escualeno

20

1. Sntesis de mevalonato a
partir de la condensacin de 3
Acetil Co-A y su posterior
reduccin
Es la etapa limitante de la sntesis
de colesterol

21

1. Sntesis de mevalonato
A

Acetil-CoA

Tiolasa
(citoslica)
(HMG-CoA)
Acetoacetil-CoA

HMG-CoA
Sintasa
(citoslica)

HMG-CoA
Reductasa
(RE)

b-hidroxi-b-metilglutaril-CoA
(HMG-CoA)

Mevalonato
22

Sntesis de mevalonato a partir

de Acetil-CoA
La sntesis de acetoacetil-CoA se lleva a cabo en el

citosol.
La HMG-CoA sintasa citoslica, que participa en la
sntesis del colesterol, es distinta de la enzima
mitocondrial encargada de la sntesis de cuerpos
cetnicos.
La HMG-CoA reductasa, unida a la membrana del
retculo endoplsmico, genera mevalonato
es el principal punto de control de la sntesis de colesterol.
23

Activacin de mevalonato
Mevalonato

Quinasa

5-fosfomevalonato

Quinasa

5-pirofosfo
mevalonato

A continuacin se
transfieren tres
fosfatos del ATP al
mevalonato, con el
fin de activar los
hidroxilos
incorporndoles
buenos grupos
salientes.

Quinasa

3-fosfo-5-pirofosfomevalonato

24

2. Conversin de mevalonato en 2 unidades activadas de

isopreno

3-fosfo-5-pirofosfomevalonato

Pirofosfomevalonato
decarboxilasa

D3-isopentenil-pirofosfato
Isoprenos
activados

3,3-dimetilalil pirofosfato
25

 Los dos isoprenos activados (isopentenil

pirofosfato y dimetilalil pirofosfato) son
precursores de colesterol y de una serie de
molculas isoprenoides con roles diversos

vitaminas A, E y K
pigmentos vegetales (caroteno, fitol, goma, aceites
esenciales)
hormonas de insectos
dolicol
Ubiquinona
plastoquinona

Se conocen ms de 20000 isoprenoides

naturales diferentes.
La prenilacin es un mecanismo de anclaje de
protenas a membranas.
26

3. Isoprenos activados (6 unidades) se

condensan para formar escualeno

3,3-dimetilalil pirofosfato

D3-isopentenil-pirofosfato

Prenil transferasa
(cataliza la condensacion
Cabeza-cola)

Geranil pirofosfato

27

el geranil-PP reacciona con otro isopentenil-PP para formar el

farnesil-PP de 15 carbonos.

Geranil pirofosfato

Prenil transferasa
(condensacion
Cabeza-cola)

D3-isopentenil-pirofosfato

Farnesil pirofosfato

28

Farnesil
pirofosfato
Farnesil
pirofosfato

Farnesil
Farnesilpirofosfato
pirofosfato
Escualeno
sintasa

Escualeno

el escualeno de 30 carbonos
se forma por condensacin
cabeza-cabeza de dos
molculas de farnesil
pirofosfato
29

Conversin de escualeno en el
ncleo esteroideo
Escualeno mono oxigenasa-ciclasa

30

 Se adiciona un tomo de
Escualeno

oxgeno para formar un

epxido.
El otro tomo de oxgeno se

Escualeno
monooxigenasa

Escualeno-2,3-epoxido

reduce a agua a expensas de

NADPH.

Los carbonos insaturados

del epxido quedan bien
alineados para la ciclacin
formando lanosterol.

31

Escualeno-2,3-epoxido

2,3-oxido
escualeno
Lanosterol
ciclasa

Lanosterol

El metilo unido al C14 es

transferido a la posicin 13 y
el del C8 al C14.
La reaccin es catalizada
por un complejo enzimtico
llamado escualeno
monooxigenasa-ciclasa,
formado al menos por dos
enzimas: una epoxidasa o
monoxigenasa de funcin
mixta y una ciclasa (la
lanosterol ciclasa).
32

4. Conversin del escualeno en el

ncleo esteroideo de 4 anillos
Una vez formado el lanosterol, una serie de
reacciones (19) lleva a la formacin de
colesterol.
Fundamentalmente remocin de grupos metilo y
reducciones de enlaces dobles

33

 20 reacciones

Colesterol
34

En plantas y
hongos el
escualeno da
origen a
estigmastrol y
ergosterol en
lugar de
colesterol

35

36

Regulacion de la sntesis
de colesterol

37

HMG-CoA reductasa
Es el punto principal de control de la

sntesis de colesterol, que cataliza la

sntesis de mevalonato.
Est ubicada en el RE
Presenta 8 dominios trans-membrana y
una porcin amino terminal
citoplasmtica, que contiene la actividad
enzimtica
El colesterol acta retroinhibiendo su
propia sntesis.
38

Joseph L. Goldstein

Michael S. Brown

Premio Nobel de
Fisiologa y Medicina
1985

http://nobelprize.org/nobel_p
rizes/medicine/laureates/198
5/goldstein-bio.html

Nature 343 (1990): 425

39

Regulacin de la HMG-CoA
reductasa

Control a corto plazo: regulacin

actividad enzimtica
Inhibicin por fosforilacin:
Fosforilacin por PK dependientes de hormonas:
(+) insulina
(-) glucagn

Fosforilacin regulada por carga energtica: PK AMP

dependientes

40

Regulacin de la de la HMG-CoA
reductasa por modificacin covalente
La sntesis de colesterol se reprime cuando la carga
energtica es baja.
La quinasa que fosforila la enzima es sensible a AMP a travs
de una quinasa quinasa que se activa por AMP.
El glucagn (ayuno) inhibe la desfosforilacin de la enzima,
mantenindola inactiva.

Por el contrario, el aumento en la insulina la activa al

activar fosfatasas que desfosforilan a la enzima.

El aumento en la concentracin de esterol aumenta la
fosforilacin (retroalimentacin negativa).
La hormona tiroidea activa, y los glucocorticoides
inactivan la sntesis de colesterol.

41

Regulacin covalente de la HMG-CoA reductasa

(HMG-CoA-R) asociada a la carga energtica
ATP

HMG-CoA R Quinasa

AMP
Quinasa quinasa-AMP
ADP
ATP

Pi

Fosfatasa de proteina
HMG-CoA R Quinasa-P
activa

HMG-CoA R-P
inactiva
-

ADP

HMG-CoA R
activa

Colesterol
HMG-CoA Fosfatasa

Glucagon
AMPc

ADP

PKA
ATP

Inhibidor de la fosfatasa-P
activo

Insulina

Fosfatasa de proteina
Inhibidor de Fosfatasa

Pi
42

2b. Regulacin de la HMG-CoA reductasa por

carga energtica

43

Regulacin de la HMG-CoA
reductasa a largo plazo

Regulacin de la [E]
Regulacin de la Sntesis:
Regulacin de la transcripcin: inhibicin de la
transcripcin mediada por esteroles y a travs de los
SRE/SRE-BP (protena de unin a los elementos reguladores
de esteroles).

Regulacin post-transcripcional: control de la traduccin

del ARNm mediada por intermediarios de la ruta

Regulacin de la Degradacin: por productos
esteroideos y no esteroideos
44

Regulacin de la Sntesis de la HMG-CoA

reductasa: regulacin transcripcional

Cell 89: 331-340; 1997

45

HMG-CoA reductasa - Control

transcripcional
La velocidad de sntesis del ARNm para la
HMG-CoA reductasa se controla por una
protena de la familia de SREBPs.

Estos son factores de transcripcin con elementos de

unin al ADN que directamente activan la expresin
de ms de 30 genes implicados en el metabolismo
lipdico.

46

HMG-CoA reductasa - Control

transcripcional

El factor de transcripcin SREBP aumenta la

expresin de HMG-CoA reductasa al unirse al

elemento de regulacin SRE ubicado en la
regin promotora de los genes que regula.
La actividad de SREBP-1 se regula por
protelisis.
SREBP-1 se encuentra en el retculo asociado a la protena
reguladora SCAP (Protena de Activacin del Corte de SREBP).
SCAP censa la presencia de colesterol en la membrana del RE
y cuando disminuye escolta a SREBP al Golgi
En el Golgi se encuentran 2 proteasas (S1P y S2P) que cortan a
SREBP activndola
bHLH (la porcin activa de SREBP) difunde al ncleo donde se
une a SRE y activa la transcripcin gnica.
47

SRE: sterol regulatory element

SREBP: SRE binding protein

SCAP: protena de activacin

del corte de SREBP.
S1P y S2P: peptidasas de los
sitios 1 y 2
bHLH: cierre (zip) hlicebucle-hlice de Leu

J Clin Invest. 109: 11251131; 2002.

48

PNAS 90: 11603 07; 1993

49

Regulacin de la sntesis de colesterol a nivel de la

HMG-CoA reductasa
Regulacin de la degradacin proteoltica de la enzima

La HMG-CoA reductasa es una enzima de

RE con ocho dominios transmembrana y una

porcin amino terminal, citoplasmtica, que
contiene la actividad enzimtica.
El aumento en la concentracin de colesterol
ocasiona un cambio en el estado de
oligomerizacin de la enzima a nivel de los
dominios transmembrana que la vuelven
mucho ms susceptible a protelisis,
inactivndola.
50

 En el plasma el colesterol se transporta unido a

lipoprotenas.
El metabolismo de estas lipoprotenas repercute
directamente en la cantidad de colesterol
disponible en las clulas, y por lo tanto afecta la
regulacin de la sntesis.
La presencia a nivel intracelular de
concentraciones altas de colesterol inhiben la
sntesis del receptor de LDL y activan a la
ACAT, que esterifica al colesterol para su
almacenamiento.
La HMG-CoA Reductasa se inhibe por su
producto, el Mevalonato, lo que se emplea en
farmacologa: sistatinas
51

Farmacologa - Teraputica

52

Destinos del colesterol

El colesterol puede provenir de la dieta o de la

biosntesis. Si decrece el colesterol ingerido con la dieta,

aumenta la sntesis, y viceversa.
Se sintetiza predominantemente en hgado, y tambin
en intestino, corteza adrenal, gnadas y placenta.
La mayor parte del colesterol heptico es excretado
como: steres de colesterilo y colesterol libre o cidos
biliares en la bilis.
Los steres de colesterilo se forman en el hgado
gracias a la enzima acil-CoA-colesterol acil transferasa
(ACAT).
El colesterol sintetizado en el hgado viaja a los tejidos
perifricos unido a lipoprotenas que contienen
apolipoprotena B100 (VLDL y LDL).
53

Eliminacin del colesterol

El ncleo esteroideo NO puede metabolizarse

hasta CO2 y agua.

La eliminacin del colesterol se realiza por la
bilis como colesterol y como cidos/sales
biliares.
Los cidos biliares y sus sales se sintetizan a
partir de colesterol y se almacenan en la
vescula biliar, se descargan al intestino al
ingerir alimentos.

54

Sales biliares
Son la forma de eliminacin del colesterol
Tienen poder detergente y emulsifican los lpidos

de la dieta permitiendo su absorcin.

Las sales biliares primarias se sintetizan en el
hgado mediante hidroxilaciones del ncleo
esteroideo del colesterol y corte de la cadena
lateral.
Primeramente se agrega un hidroxilo al carbono 7
7 a-hidroxilasa
luego se reduce el doble enlace y se hidroxila
nuevamente una o dos veces.
Se oxida y acorta la cadena lateral.

55

Formacin de Sales Biliares

Primarias

7-a hidroxilasa
Colesterol

7-hidroxi colesterol
12-a-hidroxilasa

Varios pasos

Propionil Co-A

Propionil Co-A

Colil Co-A
Quenodesoxicolil Co-A

56

- OH

Sales biliares
Los cidos biliares tienen pKa ~ 6.
El carboxilo de la cadena lateral puede

cido clico

conjugarse con glicina o taurina.

Los conjugados tienen pKa 4 (conjugado con
glicina) o pKa 2 (taurina).
Las sales biliares se secretan con la bilis, actan
como detergentes.
cido quenodesoxiclico
- OH

57

Sales Biliares Primarias conjugadas

con aminocidos

Acido Glicocolico

Acido Taurocolico

58

Sales biliares primarias

Ac. Glicocolico

Ac. Taurocolico

Derivan del colesterol

Actuan como detergentes
Se sintetizan en el higado
Se unen para formar miscelas

Asociacin de la Lipasa Pancreatica a miscelas mixtas

Compuestas por Sales biliares TAG - Fosfolipidos

Sales Biliares

Lipasa pancretica
TAG de la dieta

Cara
hidrofbica

Colipasa

Cara
hidroflica

cido Clico

Sal Biliar
Modified from Mathews, van Holde, & Ahern,
Biochemistry, 3rd Edition, Fig. 18.4

Esta miscela es muy grande

Para ser absorbida por la
mucosa intestinal.

La digestin por la lipasa

Pancreatica produce una
Micela que puede ser
Absorbida por la mucosa
intestinal.

Circulacin entero-heptica de
sales biliares
Si bien la eliminacin fecal de sales biliares es

bastante menor, es el modo principal de

eliminacin del ncleo esteroideo, ya que la
especie humana NO puede degradarlo.
Ms del 95% de las sales biliares se reabsorben
va circulacin enteroheptica y se reciclan.
Menos de 5% es excretado por las heces.
Pueden ser metabolizadas por bacterias
intestinales que las desconjugan y deshidroxilan,
formando SALES BILIARES SECUNDARIAS,
menos solubles, que se excretan.
61

Sales Biliares Secundarias

Acido Colico
7-deshidroxilacion

Acido Desoxicolico

Acido Quenodesoxicolico
7-deshidroxilacion

Acido Litocolico

62

Moleculas derivadas del

colesterol y del isopreno

63

Hormonas esteroideas
Se sintetizan a partir de colesterol

64

Sntesis de hormonas esteroideas a partir del colesterol

65

Formacin de hormonas esteroideas a partir del colesterol

66

 El colesterol da origen a los cinco tipos de

hormonas esteroideas:

glucocorticoides
mineralocorticoides
andrgenos
estrgenos
progestagenos

Las hormonas esteroideas son hidrofbicas, se

transportan unidas a protenas por la sangre y

actan a nivel intracelular. All, se unen a
receptores nucleares o citoplsmicos, se unen al
ADN y regulan la transcripcin de genes.
La sntesis de hormonas esteroideas requiere
enzimas con citocromo P450.
67

Vitamina D

No es estrictamente una vitamina ya que, puede

ser sintetizada en la piel a expensas de luz
ultravioleta y de 7-dehidrocolesterol (intermediario
precursor del colesterol).

Participa en la absorcin y homeostasis del calcio.

Su deficiencia lleva a raquitismo en nios y

osteomalacia en adultos.

Acta va receptores nucleares que afectan la

expresin gnica como las hormonas esteroideas.

68

69

El 7-dehidrocolesterol, en la piel, reacciona con la luz

UV para formar previtamina D, la cual forma
espontneamente el colecalciferol o vitamina D3.

En el hgado, el colecalciferol se hidroxila para formar el

25-hidroxi-D3. Se traslada por la sangre unido a
protenas.

A nivel del rin, puede hidroxilarse para formar 1,25dihidroxivitamina D3 (calcitriol), la forma activa de la
vitamina. Alternativamente, el calcidiol puede 24hidroxilarse para dar un metabolito inativo.

El calcitriol controla la homeostasis del calcio.

- regula su propia sntesis activando la 24-hidroxilasa e inhibiendo la
1-hidroxilasa.
- aumenta la absorcin de calcio en el intestino.
- reduce la excrecin de calcio a nivel del rin.
- moviliza el calcio de los huesos.

70

Moleculas derivadas del

isopreno

71

72

Vitamina E
un antioxidante liposoluble

73

Vitamina K

participa en la modificacin postraduccional de los

factores de la coagulacion sanguinea

Cofactor en la g-carboxilacin de glutamato en los
factores II, VII, IX y X de la coagulacin

74

Ubiquinona (coenzima Q)
transportador de electrones
mitocondrial (n = 4-8)

75

Plastoquinona
transportador de electrones de los
cloroplastos (n = 4-8)

76

Dolicol
transportador de azcares
(n = 9-22)

Dolicol-PP
77

78