RESPIRATION ET FERMENTATION,

SOURCES D'ATP
Toutes les cellules consomment de l'ATP. Nous avons vu qu'existait un mcanisme de production
d'ATP dans la cellule chlorophyllienne: celui qui a lieu dans le chloroplaste. Est-il le seul utilis par
ces cellules? Comment les cellules htrotrophes assurent-elles cette production?

1 Mise en vidence de la respiration d'une suspension cellulaire:

Les levures sont des champignons unicellulaires dpourvus de chlorophylle. Comme les cellules
animales, elles sont htrotrophes et consomment des substances organiques qui peuvent tre soit
stockes, soient puises dans le milieu.
Nous savons que la respiration est un
phnomne qui consomme du
dioxygne et rejette du dioxyde de
carbone. Nous savons aussi que ces
changes de gaz s'accompagnent de
l'oxydation de nutriments organiques,
comme le glucose.
Nous allons essayer de montrer que des
cellules en suspension respirent en
ralisant le montage exprimental cicontre:
On prpare une suspension de levures 10 g.L-1 que l'on are pendant une douzaine d'heures avec
un bulleur d'aquarium: ceci a pour but "d'affamer" les levures qui auront consomm tous les
substrats mtaboliques. Les levures, raison de 25 mL de suspension sont places dans l'enceinte
ractive, la sonde oxymtrique plonge dans le liquide et on procde un rglage de l'agitation de
manire ce que la sonde ne se trouve pas dans le cne de turbulence. Avant de lancer la mesure,
on attend la stabilisation de la sonde.
Au bout d'une minute (temps ncessaire pour constater l'volution du taux de dioxygne en
l'absence de substrat, on introduit 2 mL de solution glucose 50 g.L-1, assez rapidement pour
pouvoir visualiser l'artefact correspondant cette modification du milieu.
Un enregistrement a t obtenu:

Comparez les rsultats obtenus avant et aprs l'addition du glucose. Quelle

conclusion pouvez mettre? Mettez en relation ce rsultat et les connaissances que vous avez du
bilan chimique de la respiration.

2 Mise en vidence de la respiration de mitochondries:

2.1 LEVURES EN
AEROBIOSE ET EN
ANAEROBIOSE
L'observation au
microscope lectronique de
levures ayant sjourn dans
des conditions arobies
rvlent de nombreuses
mitochondries au sein de
leur hyaloplasme. Par
contre, celle de levures
ayant sjourn dans des
conditions anarobies (sans
dioxygne) montre des
mtochondries peu abondantes et de petite taille.
En gnralisant, des observations de tissus varis, dans des conditions physiologiques diffrentes,
montrent que plus une cellule est active, plus elle possde de mitochondries et plus les crtes de
leurs membranes internes sont dveloppes.
A partir de ces informations, proposez une hypothse sur le rle des mitochondries
dans la cellule.

2.2 ULTRASTRUCTURE D'UNE MITOCHONDRIE

Faites un dessin d'observation du document ci-dessus en y plaant les

annotations suivantes: membrane externe, membrane interne, replis de la membrane
interne ou crtes, matrice (intrieur de la mitochondrie), hyaloplasme.

2.3 INFLUENCE DE DIVERS SUBSTRATS SUR LA RESPIRATION

MITOCHONDRIALE
L'exprience prcdente du 1 (ExAO) est refaite en utilisant une suspension de
mitochondries la place des cellules de Levures. Mais la sparation des mitochondries
demande une centrifugeuse trs rapide (vitesse 100 000 G); c'est un matriel qui n'existe
que dans les laboratoires de recherche, l'absence de ce matriel fait que l'isolement des
mitochondries est alatoire, on obtient en fait un mlange de mitochondries et de
cytoplasme qui toutes les chances de se comporter comme des cellules entires.
On proposera donc des rsultats obtenus ainsi:

Une suspension de mitochondries obtenue par centrifugation d'un broyat cellulaire

est place dans une enceinte de raction, dans un milieu appropri et bien oxygn,

au temps t1 on ajoute une petite quantit de glucose (molcule en C6),

au temps t2 on ajoute du pyruvate (molcule en C3) ou du succinate (molcule en

C4), choisies parce que c'est notamment sous ces formes molculaires que le glucose
est transform dans le cytoplasme.

3 Les tapes de la respiration cellulaire

C6H12O6 + 6 O2 ----> 6 CO2 + 6 H2O

3.1 PREMIERE ETAPE: LA GLYCOLYSE DANS LE CYTOPLASME

La dgradation des nutriments dbute toujours dans le hyaloplasme de la cellule par une
glycolyse (=dgradation du glucose).
C'est une suite complexe de ractions qui dgradent une molcule de glucose ( 6 atomes
de carbone) en deux molcules d'acide pyruvique ( 3 atomes de carbone):

Retenons-en quelques caractristiques:

C'est toujours un phnomne anarobie, c'est--dire qui ne consomme pas de

dioxygne.

Elle comprend plusieurs ractions catalyses chacune par une enzyme spcifique
et produisant une srie de mtabolites intermdiaires entre le produit initial, le glucose
et le produit final, l'acide pyruvique (succinate par exemple).

La signification biochimique fondamentale est une dshydrognation,

correspondant une oxydo-rduction qui ncessite un accepteur ou transporteur de
protons et d'lectrons symbolis R' (tat oxyd).

Le bilan de la glycolyse se traduit par la synthse de 2 molcules d'ATP par mole

de glucose oxyd.

Pour que les phnomnes puissent se poursuivre, il est ncessaire que les
molcules de transporteurs, maintenant rduits (R'H2) soient rgnres, c'est--dire
repassent l'tat oxyd (R').
N.B. Ce recyclage des transporteurs est ralis de manire diffrente dans le cas des
fermentations et dans celui de la respiration selon l'quipement enzymatique de la cellule, donc le
patrimoine gntique.

3.2 DEUXIEME ETAPE DANS LA MATRICE DES MITOCHONDRIES

La dgradation des mtabolites amorce dans le cytoplasme, se poursuit dans les
mitochondries: dans la matrice, l'acide pyruvique est totalement dgrad sous l'action d'enzymes
(dcarboxylases et dshydrognases): du dioxyde de carbone est libr, les transporteurs de
protons et d'lectrons sont rduits (R'H2) et de l'ATP est produit.

3.3 TROISIEME ETAPE DANS LES CRETES MITOCHONDRIALES

Au niveau de la membrane interne (crtes) les molcules de transporteurs rduits (R'H2) sont
rgnres (R') grce des molcules spcialises qui constituent la chane respiratoire et
assurent une srie de ractions d'oxydo-rduction.
Le dioxygne constitue l'accepteur final de protons et
d'lectrons: lui-mme rduit, il permet la formation de
molcules d'eau.
Ainsi, les changes gazeux respiratoires, d'une part en
assurant une srie de dshydrognations et de
dcarboxylations et d'autre part en ne librant pas
d'emble, d'un seul coup leur nergie, mais par fractions,
permettent-ils une suite d'oxydo-rductions cellulaires
productrices d'ATP.
En effet le recyclage des transporteurs est coupl la
synthse de 16 18 molcules d'acide adnosine triphosphate par mole d'acide pyruvique, grce des ATPsynthtases fixes sur la membrane interne des
mitochondries.

Si l'on prend en compte la glycolyse, la respiration cellulaire produit ainsi 36 moles d'ATP par
mole de glucose oxyd.

4 Etude exprimentale de la fermentation alcoolique

4.1 MONTAGE EXPERIMENTAL CLASSIQUE
Lorsqu'on place une suspension de levures dans une solution glucose peu oxygne,
cette dernire fermente.
Que met en vidence le test
ralis avec l'allumette (1, 2)?
Que rvle un dosage de la solution
ralis avec un glucomtre au dbut de
l'exprience et au bout de deux heures au
moins?
Que rvle deux alcootests raliss sur la
solution dans le mme laps de temps?

On peut crire l'quation-bilan de la fermentation alcoolique de la sorte:

C6H12O6 ------> 2 CH3 - CH2OH + 2 CO2

4.2 EVALUATION DU TYPE DE METABOLISME UTILISE PAR DES
LEVURES
On cherche dterminer le type de mtabolisme utilis par les levures selon la disponibilit en
dioxygne du
milieu. On dispose,
pour ce faire, du
matriel suivant:

une
suspension
de levures
maintenues
28C en
milieu
oxygn et
glucos,

un bain
marie
30C,

une
seringue de
10mL
prolonge
par un fin cathter,

une solution glucose,

une chane de mesure ExAO avec bioracteur, sonde CO2, sonde

oxymtrique, sonde thanol et logiciel d'acquisition de mesures.
On utilise le mme montage que dans le 1 ci-dessus. Avant de dmarrer les mesures, on
ajoute dans le milieu contenant la suspension de levures une quantit importante de
glucose.
Le document ci-contre prsente les rsultats d'une telle exprience.
Exploitez ces rsultats en relation avec le problme pos. Donnez leur une
explication.

4.3 ETAPES DE LA FERMENTATION

La fermentation dbute dans le cytoplasme par la glycolyse:

Dans le cas de la fermentation alcoolique, l'acide pyruvique est d'abord dcarboxyl (perte
de CO2), le mtabolite qui en rsulte (l'thanal) est ensuite rduit en thanol avec
rgnration du transporteur:

Ces ractions d'oxydo-rduction ne librent pas une quantit suffisante d'nergie pour
permettre la synthse d'ATP. Donc seule la glycolyse produit de l'ATP lors des
fermentations.
Animation schma de la fermentation
Le bilan en ATP de la fermentation alcoolique est donc de 2 moles d'ATP par mole de
glucose oxyd.

4.4 COMPARAISON RESPIRATION - FERMENTATION ALCOOLIQUE

RESPIRATION

METABOLISME

FERMENTATION
ALCOOLIQUE

Glucose C6H12O6

Substrat

Glucose C6H12O6

2840 kJ par mole de glucose

Energie potentielle initiale

2 840 kJ par mole de glucose

arobies (O2)

Conditions

anarobies

6 CO2 + 6 H2O

Produits

2 CO2 + 2 CH3 - CH2OH

0 kJ

Energie potentielle finale

1 360 kJ par mole d'thanol

36 moles par mole de glucose

ATP produit

2 moles par mole de glucose

Sachant qu'une mole d'ATP libre par hydrolyse 25C une quantit d'nergie
gale 30,5 kJ, valuez le rendement nergtique de la respiration, de la fermentation
alcoolique.
En terme d'oxydation, comment peut-on qualifier chacun des deux processus
mtaboliques?

5 Bilan structural et fonctionnel d'une cellule vivante

Toute cellule vivante est constamment soumise un bilan d'entre et de rejet de matire,
qu'accompagnent des conversions nergtiques.
La cellule eucaryote est forme de compartiments dans lesquels se droulent des ractions
mtaboliques particulires, catalyses par des enzymes spcifiques, par exemple dans la
mitochondrie et le chloroplaste, qui proviennent probablement de bactries qu'une cellule hte
ancestrale aurait adoptes comme endosymbiotes.
Le noyau, par l'information gntique qu'il contient, dirige la synthse des protines, et donc des
enzymes ncessaires au mtabolisme de la cellule.
Au sein d'une cellule eucaryote, la production d'ATP est assure:

dans les chloroplastes des cellules autotrophes lors de la phase photochimique de

la photosynthse. L'ATP produit est utilis dans la seconde phase, pour la rduction du CO2.

dans les mitochondries de toute cellule autotrophe ou htrotrophe, lors de

la respiration cellulaire.

dans le hyaloplasme de quelques types de cellules par fermentation lorsque le

dioxygne fait dfaut.
Choisissons comme exemple la cellule vgtale chlorophyllienne pour y dresser un bilan des
deux modalits de transfert nergtique: le cycle de l'nergie dans la biosphre tant un cycle
de transfert d'lectrons, dans la photosynthse, les lectrons transitent d'un bas potentiel, celui de
l'eau, un potentiel lev, fortement rducteur, celui de RH2; dans la respiration, le transit se fait
dans le sens inverse. De l'nergie est ainsi rcupre pour synthtiser de l'ATP.