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RECONOCIMIENTO DE BIOMOLCULAS ORGNICAS

Johan Edilberto Quispe Navarrete


Herbert Alexander Apaza Mamani
Eider Jess Noa Sumoco
I.
Introduccin y resumen
Los carbohidratos, lpidos, protenas y nucletidos son 4 macromolculas orgnicas que
poseen los organismos. Todas estas contienen en su estructura Carbono (C), Hidrgeno (H)
y Oxgeno (O). Las protenas, adems, contienen Azufre (S) y Nitrgeno (N); y los
nucletidos al igual que algunos lpidos contienen Nitrgeno (N) y fsforo (P). [1]
Los carbohidratos son las molculas fundamentales de almacenamiento de energa en la
mayora de los seres vivos y forman parte de diversas estructuras de las clulas vivas. Los
carbohidratos -o glcidos- pueden ser molculas pequeas, (azcares), o molculas ms
grandes y complejas. Hay tres tipos principales de carbohidratos, clasificados de acuerdo
con el nmero de molculas de azcar que contienen. Los monosacridos como la ribosa,
la glucosa y la fructosa, contienen slo una molcula de azcar. Los disacridos consisten
en dos molculas de azcar simples unidas covalentemente. Ejemplos familiares son la
sacarosa (azcar de caa), la maltosa (azcar de malta) y la lactosa (azcar de la leche).
Los polisacridos como la celulosa y el almidn, contienen muchas molculas de azcar
simples unidas entre s. [1]
Reaccin de Fehling:
Los monosacridos y la mayora de disacridos poseen poder reductor (capacidad de donar
electrones ), que se debe al grupo carbonilo que tienen su molcula, este carcter reductor
puede ponerse de manifiesto mediante la utilizacin del reactivo de Fehling que presenta
sulfato de cobre, carbonato de sodio, citrato de sodio, y agua, donde los dos primeros
compuestos son agentes estabilizantes y el sulfato de cobre es el reactante,
especficamente el Cu +2 que va reaccionar con los grupos aldehdos y cetonas (grupo
carbonilo), la reaccin se muestra en la siguiente ecuacin

OH
>Cu2 O + RCOOH (1)

2Cu+2 + RCHO
donde Cu+2 (color azul) se convierte en Cu 2 O dando un color rojo ladrillo que precipita
posteriormente, el smbolo vaco indica que se le entreg energa en forma de calor.

La sacarosa es un disacrido que no posee poder reductor debido a que carece carbonos
anomricos libres, as que no reacciona con el reactivo de Fehling, pero en presencia de
HCl y el calor, la sacarosa se hidroliza (gana una molcula de agua) y se descompone

en glucosa y fructosa, que son reductores, ver imagen de reaccin que seria la ecuacin 2:

Los polisacridos: El Almidn es un polisacrido vegetal formado por dos polisacridos, la


amilosa y la amilopectina, para reconocer la presencia de almidn se usa un reactivo de
lugol
(es una disolucin de yoduro molecular y yoduro potsico en agua destilada), donde el
almidn cuando est presente en la solucin da un color azul en presencia del yodo.

la

hidrlisis

de

la

figura 2: Muestra
sacarosa

Los lpidos son un grupo general de sustancia orgnicas insolubles en solventes polares
como el agua, pero que se disuelven fcilmente en solventes orgnicos no polares, tales
como el cloroformo, el ter y el benceno. Tpicamente, son molculas de almacenamiento
de energa, usualmente en forma de grasa o aceite, y cumplen funciones estructurales,
como en el caso de los fosfolpidos, glucolpidos y ceras. Algunos lpidos, sin embargo,
desempean papeles principales como "mensajeros" qumicos, tanto dentro de las clulas
como entre ellas. Una molcula de grasa est formada por tres cidos grasos unidos a una
molcula de glicerol (de aqu el trmino "triglicrido"). Las largas cadenas hidrocarbonadas
que componen los cidos grasos terminan en grupos carboxilo (-COOH), que se unen
covalentemente a la molcula de glicerol.[1]
El reconocimiento de lpidos se realiza por la prueba de solubilidad, en este caso
identificando el comportamiento de las molculas de aceite con diversas sustancias que son
el agua, acetona y cloroformo, en el caso del agua las molculas de aceite no se
homogenizan por poseer diferente polaridad.
En las protenas fibrosas, las molculas largas entran en interaccin con otras largas
cadenas de polipptidos, similares o idnticas, para formar cables o lminas. El colgeno y
la queratina son protenas fibrosas que desempean diversos papeles estructurales. Las
protenas globulares tambin pueden cumplir propsitos estructurales. Los microtbulos,
que son componentes celulares importantes, estn compuestos por unidades repetidas de
protenas globulares, asociadas helicoidalmente en un tubo hueco. Otras protenas
globulares tienen funciones de regulacin, de transporte y de proteccin. [1]
Las protenas son macromolculas, son grandes cadenas de aminocidos unidos por
enlace peptdico (estructura primaria), su reconocimiento se da mediante la reaccin de
Biuret el cual consiste en el reactivo de Biuret que es una solucin acuosa de sulfato
cprico (CuSO4) en medio alcalino (NaOH). Este reactivo da un ensayo positivo con los
enlaces peptdicos entre aminocidos, cuando la solucin queda de color violeta. Esto se
debe a que el cobre tiene la propiedad de formar iones complejos, especialmente entre los
enlaces peptdicos. Las protenas despus de ser denaturadas por el hidrxido de sodio,
facilita su interaccin con el Cu con los pares de electrones sin compartir del grupo amino
del pptido mediante enlaces de coordinacin con la formacin de un complejo coloreado
prpura-violceo, cuya intensidad depende de la concentracin de protenas

Figura 3: Complejo de cobre formado por una reaccin de Biuret

.
II.

Objetivos especficos

El objetivo general es reconocer 3 de las 4 macromolculas orgnicas que poseen los


organismos: Carbohidratos (monosacridos, polisacridos) , lpidos y protenas.
En la experiencia 1 se pretende reconocer qu soluciones (entre la glucosa, lactosa,
fructosa y sacarosa) son azucares reductores. Es decir cules tienen capacidad de ceder
electrones o aceptar protones. En el caso de los azcares cuales tienen la capacidad de
ceder un Oxgeno (O2-) para la formacin del xido de cobre (Cu 2O) (donde el cobre se
encuentra en el reactivo Fehling).
En la experiencia 2 se pretende hidrolizar la sacarosa, ya que sta al poseer carbonos
anomricos (es decir no posee ismeros) no tiene la capacidad reductora. Por lo cual
debemos incorporar molculas de agua para que se descomponga en glucosa y fructosa los
cuales s son reductores y, al someterlo con el reactivo Fehling, pueda reaccionar con l.
En la experiencia 3 el objetivo es el reconocimiento de polisacridos especficamente el
almidn. El almidn est conformado por la amilosa y la amilopectina. Lo que se pretende
es agregar unas cuantas gotas de lugol ya que ste contiene yodo el cual tiene afinidad por
algunos enlaces presentes en el almidn; por lo cual al encontrarse el almidn en alguna
solucin, el yodo se fijar a unos de los enlaces mencionados (con la amilosa) produciendo
un cambio en la coloracin, con lo cual se verificar la presencia de almidn.
En la experiencia 4 el objetivo es reconocer la presencia de protenas (macromolculas
formadas por muchos aminocidos unidos por enlace peptdico) por lo cul se usar la
reaccin Biuret, la que es producida por los pptidos y las protenas mas no por los
aminocidos.
La experiencia 5 tiene el objetivo de reconocer con qu compuestos los lpidos son
solubles (compuestos polares o apolares?). Esto se realizar por inspeccin agregando
componentes polares y apolares a los tubos de ensayo que contendrn el aceite.

III.
Observaciones
experimento)

experimentales,

datos

resultados

(Para

Experimento N1 Identificacion de azucares reductores


Tabla N1 Resultados de azcares reductores
Glcido

glucosa

lactosa

fructosa

sacarosa

cada

Reductor

Observaciones
Durante el desarrollo del experimento al adicionar el reactivo de Felhing (azul? no
recuerdo ) en los tubos de ensayo que contenan 1ml de (Glucosa / Lactoso / fructuosa /
Sacarosa) Todas las soluciones adquirieron una solucin un color azul claro, luego los tubos
se colocaron en bao maria, se noto que solo en los tubos donde haba Glucosa, Lactosa,
Fructuosa se deba la formacin de un precipitado de color rojizo, la cual no se dio en el tubo
que contena sacarosa en la cual el color azul se conserv incluso luego del bao maria.
Las reacciones posibles que ocurrieron se describe en la ecuacin (1) del fundamento
terico.
Experimento N2 Hidrlisis de la sacarosa
Tabla N2 resultado de reconocimiento de sacarosa
Sacarosa

HCl + Calor

NaOH + (F-A )+ (F-B) +


calor

Resultado

No hay reaccin

si hay reaccin

Mezclamos la sacarosa con el cido clorhdrico, se noto que la solucin mantiene su


caracterstica incolora, luego de incluso de ser enfriada, hasta que se le agreg el Fehling A
y el Fehling B, es ah que la solucin adquiere un color azul. Luego se volvi a someter la
solucin al calor donde luego de unos segundos fue posible apreciar un precipitado de color
rojizo.

Experimento N3 Reconocimiento de polisacaridos : Almidon


Tabla N3 Resultado de reconocimiento del Almidn
Muestra

Solucion de
almidon

Papa rallada

Clara de huevo
(albmina)

Reaccin con lugol

color negro

color negro

no reacciona

perdi color

perdi color

no reacciona

calor

Observaciones
El tubo de ensayo de almidn (incoloro) al adicionar gotas de reactivo de lugol (rojizo) se
observ el cambio de color de la solucin a negro luego de calentar se torno un color azul
oscuro, en el tubo de ensayo con papa rallada al agregar el reactivo de lugol se observ un
comportamiento parecido al anterior experimento, en tercer tubo al adicionar las gotas de
lugol se observa la solucin como mantiene el color del reactivo de lugol.

Experimento N4 Reconocimiento de Protenas


Tabla N4 Ensayos de protenas
Muestra

Albmina

Casena

Almidn

Protenas

+++
(Rojo)

++
(Rojo)

(no cambia)

Observaciones
Luego de agregar hidrxido de sodio al tubo que contena la albmina no se observa ningn
cambio no se observa ningn cambio hasta que agregamos el reactivo de Biuret (Azul ) ah
es donde se pudo observar un color rojo en ciertas partes de la mezcla. Algo parecido
ocurri en el tubo de ensayo donde se almacenaba la casena, sin embargo al, sin embargo
al adicionar el reactivo de Biuret su color no es tan intenso como el anterior. Por otro lado en
el tercer tubo de ensayo donde se tena el almidn, luego de adicionar el hidrxido de sodio
el comportamiento fue similar a las otras dos muestras pues no hubo cambio visible, la
diferencia fue cuando se agreg el reactivo de biuret, la mezcla no adquiri un color rojo
como las otros dos muestras sino que adquiri un color similar al reactivo de Biuret pero un
poco ms claro sin mezclarse por completo.
Experimento N5 Solubilidad de Lipidos
Tabla N5 Resultados de la solubilidad de los lpidos
Muestra

Aceite + agua
destilada

Aceite + acetona

Aceite +
cloroformo

Solucin

No homognea

No homognea

Homognea

Observaciones
En el primer tubo de ensayo que contena aceite, se vierte agua destilada, como resultado
de este procedimiento ambas sustancias no se mezclaron y el aceite se ubica en la parte
superior de la mezcla an luego de agitarlos. En el segundo tubo se agreg acetona, fue
posible tambin ver un sistema de dos fases (al igual que en la primera parte de este
experimento) con la diferencia que esta vez el aceite termin en la base del tubo de ensayo
y la acetona en la parte superior de la mezcla, posteriormente se agit tubo de ensayo y
como resultado no obtuvimos una mezcla homognea clara. Como parte final de este
experimento se verti cloroformo en el tercer tubo de ensayo, las fases no fueron muy
evidentes donde las sustancias se mezclan dando lugar a una solucin homognea
IV.

Discusin de las observaciones experimentales, datos y resultados

V.

Conclusiones

VI.

Cuestionario

a. Qu azcares son reductores?


monosacridos : glucosa, la fructosa, galactosa, la ribosa y la
disacridos: maltosa, la isomaltosa, la gentiobiosa, la celobiosa y la lactosa.

desoxirribosa

b. En el experimento 2: reconocimiento del almidn, al trabajar con el lugol Por qu


se da el cambio de coloracin despus de sometido al calor? Fundamente su
respuesta.
Gracias al calor, se form un complejo llamado ioduro de almidn. El ioduro viene de la
composicin del lugol, lo que nos muestra que es positivo para la determinacin de
polisacridos, en este caso almidn.
c. Cules son los factores que afectan la naturaleza de las protenas?
La exposicin al calor o a pH extremos produce ordinarios cambios no hidrolticos bastante
drsticos en la estructura de la protena, la presin, irradiacin, cidos fuertes u otros
agentes qumicos logran la desnaturalizacin de la protena.
VII.

Referencias

[1]
Curtis, Schnek et al. Biologa (2007). Editorial Mdica Panamericana. 7ma
edicin.

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