541

IV
EXTRACCIN DE QUINONAS

Los productos elaborados por los animales y los vegetales son complejos naturales y, para la extraccin de sus componentes, deben
ser secados y disgregados antes de ser sometidos a procesos de
extraccin general no selectivos.
Las quinonas se pueden extraer empleando solventes orgnicos
voltiles, con soluciones alcalinas diluidas, con agua sola o por destilacin en corriente de vapor de agua. El extracto obtenido contendr los compuestos que sean solubles en el solvente empleado.

4.01

EXTRACCIN CON SOLVENTES

Las benzoquinonas y naftoquinonas no hidroxiladas se extraen por

medio de solventes orgnicos voltiles como el ter de petrleo y el
benceno. El extracto crudo obtenido es concentrado y el residuo
crudo goma cruda puede ser sometido a procedimientos de separacin de sus componentes, por cristalizacin fraccionada en
solventes, por cromatografa en columna o capa, gruesa; o mediante un tratamiento qumico selectivo en condiciones especiales.
Debe tenerse presente cuando el compuesto quinnico tiene grupos aldehido CHO, cetnico >C=O, o hidroximetilen CH2OH en
orto al grupo OH fenlico, y se emplea metanol o acetona como
solventes, estos grupos durante la extraccin pueden reaccionar y
dar acetales, cetales o dimetilcetales.
CHO + 2 CH3OH CH(O CH3 )2
>C=O + 2 CH3OH >C(OCH3 )2

641

La eleccin del solvente ms apropiado para un proceso de extraccin, depende de la naturaleza y composicin de la muestraproblema.
Las benzoquinonas y naftoquinonas tambin pueden ser separadas
por destilacin en corriente de vapor de agua.
Las ortoquinonas y antraquinonas no son voltiles en corriente de
vapor de agua.

4.02

EXTRACCIN CON SOLUCIONES ALCALINAS

Las soluciones alcalinas diluidas, son solventes qumicamente activos que se utilizan generalmente para la extraccin de quinonas
de naturaleza cida.
La fuerza cida de las quinonas hidroxiladas depende de, la posicin y el nmero de los grupos OH fenlicos; y en algunos casos
del grupo carboxilo COOH.
Las quinonas ahidroxiladas son cidos dbiles, solubles en las
soluciones al 5% de hidrxido de sodio, e insolubles en las soluciones al 5% de bicarbonato de sodio y de carbonato de sodio.
El comportamiento de la solubilidad de las quinonas en las soluciones alcalinas diluidas permite obtener una informacin de tipo cualitativo importante.
Si las quinonas ahidroxiladas son tratadas con bases fuertes como
el hidrxido de sodio, se oxidan y degradan en presencia de aire.
Las quinonas bhidroxiladas son cidos ms fuertes que las
quinonas ahidroxiladas. Son solubles en las soluciones acuosas
de bicarbonato de sodio y de carbonato de sodio.
La extraccin de antronas y antranoles, con bicarbonato de sodio
se realiza en atmsfera inerte para evitar su oxidacin y transformacin en antraquinonas, diantronas o poliantronas.

741

4.03

CROMATOGRAFA EN COLUMNA

La cromatografa en columna es una tcnica de separacin basada en el establecimiento de un equilibrio, por adsorcin entre un
slido como fase estacionaria y un lquido, como fase mvil.
La columna cromatogrfica que contiene el adsorbente puede ser
de vidrio o de niln.
La columna de niln permite dividir los cromatogramas por corte en
tantas fracciones como bandas coloreadas o fluorescentes sean
observadas bajo luz ultravioleta. Cada fraccin es separada y sometida a una extraccin con metanol para recuperar el compuesto
extrado.
El xito para la separacin cromatogrfica de los componentes de
una mezcla, depender del solvente o del sistema de solventes
mezclados en la proporcin correcta, del empaquetado de la columna, del adsorbente, de la altura y dimetro de la columna; las
columnas muy cortas no dan una buena resolucin. Para la columna la relacin de dimetroaltura que recomendamos, es de 0.64:10.

Cromatografa en columna

841

4.03.1 ADSORBENTES
Los adsorbentes ms empleados son: gel de slice, cido silcico
malla 100, xido de aluminio (alumina), xido de magnesio calcinado, carbonato de magnesioHiflo Supercel, poliamidas simples y
acetiladas, policaprolactama, celulosa en polvo, resinas
cambiadoras de iones, geles de sephadex, etc.
La cantidad de adsorbente a emplearse es de veinte partes de
adsorbente por una parte de goma cruda a ser cromatografiada.
La preparacin de la columna cromatogrfica se inicia introduciendo en la parte inferior un tapn de lana de vidrio, el cual se cubre
con una capa de arena blanca y a continuacin se aade el solvente hasta la mitad de la columna.
En un erlenmeyer que contenga el solvente inicial, se dispersa el
adsorbente, lo cual se vierte en la columna poco a poco, regulando
la llave de salida para que el volumen de solvente que sale sea
proporcional al que entra con el adsorbente. Se deja en reposo y se
aade arena blanca para formar una capa.
La goma cruda se disuelve en la menor cantidad de un solvente
voltil, luego se agrega cido silcico malla 100 hasta formar una
pasta fluida, la que se deja secar al aire. Esta mezcla se coloca en
la cabeza de la columna y se inicia la elusin.

4.03.2 SOLVENTES
La eleccin de los solventes para la cromatografa es un factor importante. Empleando mezcla de solventes con polaridad diferente
se puede obtener una buena resolucin para la separacin de los
componentes de la mezcla.
A continuacin se da una relacin de solventes ordenados en polaridad creciente:
ter de petrleo, hexanobenceno, tetracloruro de carbono, cloroformo, ter etlico, acetato de etilo, acetona, isopropanol, metanol
agua piridina cidos orgnicos cidos y lcalis inorgnicos.
Sistemas de solventes que pueden emplearse:

941

A) Benceno, bencenocloroformo 1:1, cloroformo, cloroformometanol

99:1, cloroformometanol 97:3, metanol.
B) Benceno, bencenoacetato de etilo 19:1, bencenoacetato de etilo
18:2, metanol.
C) Benceno, bencenoacetato de etilo 95:5, acetato de etilo, metanol.
D) Benceno, bencenoacetato de etilo 95:5, acetato de etilocido
actico 99:1.

4.03.3 ELUSIN
La elusin se inicia con un solvente de baja polaridad, como el
benceno. Si el benceno no separa bien la mancha, se ensaya una
mezcla de solventes que contenga uno que desplace bien la mancha y otro que no la mueva.
Cada fraccin recolectada es destilada a presin reducida. Del residuo se toma una parte alicuota para determinar su comportamiento
cromatogrfico en capa delgada analtica y evaluar el desarrollo de
la elusin. Si la fraccin contiene una mezcla, debe ser recromatografiada. Si slo presenta una mancha, la solucin se destila a
presin reducida y el residuo se recristaliza en metanol y registra
sus espectros.
Ejemplo:
Extracto crudo seco goma cruda
Adsorbente: cido silcico malla 100
Sistema de solventes
Solventes
Benceno
Bencenocloroformo 1:1
Cloroformo
Cloroformometanol 99:1
Cloroformometanol 97:3
Metanol

4.04

100 g
2000 g
A

Fraccin de 2 lt c/u
1 a 25
26 a 50
51 a 75
76 a 100
101 a 102
103

CROMATOGRAFA EN CAPA GRUESA PREPARATIVA

La cromatografa en capa gruesa se emplea para separaciones

ms rpidas de 0,5 g o menos de muestra.
Se utilizan placas de vidrio de 20 x 20, 20 x 40, o de 20 x 50 cm de

051

lado.
Para cubrir dos placas de 20 x 20 cm se requiere de 20 g de gel de
slice Merck PF 254 + 366 y 75 mL de agua que se mezclan en un
matraz durante cuarenta segundos.
La dispersin se vierte en forma uniforme sobre las placas. Se deja
secar a la temperatura del ambiente y despus a 110C. Enfriar.
Aplicacin de la muestra:
La muestra es solubilizada en un solvente voltil, a continuacin
con una pipeta preparativa o un capilar la solucin se aplica con
cuidado a 15 mm del extremo del borde inferior de la placa y de
un extremo a otro como raya. Se deja evaporar el solvente en corriente de aire.
La placa se coloca en la cmara cromatogrfica cuyas paredes
deben estar cubiertas con papel de filtro empapado con el solvente
que contiene la cmara. La superficie del solvente no debe tocar la
lnea de la placa que contiene el problema. Se tapa la cmara y deja
para su desarrollo. Terminada la elusin, se saca la placa de la
cmara y se deja secar. La placa se examina con una lmpara de
luz ultravioleta corta de 254 nm o larga de 366 nm, para ver si
contiene compuestos detectables bajo luz UV.
Las manchas visualizadas se sealan con una esptula, raspan,
recogen y se extraen con un solvente voltil. Se evapora el solvente, recristaliza si es necesario; toma su punto de fusin, y se registran sus espectros UV, IR, RMN y EM.

4.04.1 CROMATOGRAFA EN CAPA DELGADA ANALTICA

La cromatografa en capa delgada analtica se emplea para fines
analticos cualitativos. Se utilizan lminas de vidrio portaobjetos
de 75 x 25 mm o placas cuadradas de 20 x 20 cm.
Para cubrir 120 lminas de vidrio de 75 x 25 mm se requiere de 50
g de gel de slice Merck HF254 y 150 mL de agua los cuales se
mezclan en un matraz durante cuarenta segundos. La dispersion
se vierte en forma uniforme sobre las lminas que estn acondicionadas en una plantilla de plstico. Se deja secar a temperatura

151

ambiente y despus a 110C durante sesenta minutos. Dejar enfriar.

Aplicacin de la muestra:
La muestra se solubiliza en un solvente voltil y con un capilar la
solucin se aplica a 15 mm del extremo del borde inferior de la
lmina. Se deja evaporar el solvente en corriente de aire. A continuacin la lmina se coloca en la cmara que contiene el solvente.
Concluda la elusin se saca la lmina de la cmara y se deja secar.
Para localizar las manchas se emplea luz ultravioleta. Las manchas tambin pueden ser localizadas por carbonizacin por rociado de cido sulfrico concentrado y calor. Las sustancias separadas se hacen visibles como manchas negras.

4.05

TCNICAS DE EXTRACCIN, AISLAMIENTO Y

PURIFICACIN

Los compuestos producidos por los seres vivos se encuentran formando parte de un complejo natural organizado que contiene una
variedad de productos entre ellos los pigmentos quinnicos, con
estructuras y propiedades diversas.
Para la obtencin de las benzoquinonas, naftoquinonas y antraquinonas, se requiere que la muestra materia de estudio sea sometida a un proceso de tcnicas de extraccin, aislamiento y purificacin, para concluir con su caracterizacin.

4.05.1 BENZOQUINONAS
Las benzoquinonas se extraen con hexano en caliente o por medio
de una destilacin en corriente de vapor de agua.
Si la quinona tiene grupos OH fenlicos libres, se puede emplear
solventes orgnicos prticos voltiles, o realizar una percolacin
con una solucin al 5% de carbonato de sodio; y precipitar la quinona,
por acidulacin.

251

Procedimiento:
De 4 a 5 kg de muestra seca y triturada se somete a extraccin con
hexano en un soxhlet hasta su agotamiento. El extracto hexnico
se destila a presin reducida en un evaporador de tipo rotatorio; y el
concentrado se deja en refrigeracin durante 48 horas. Si hay formacin de un precipitado cristalino, ste es separado y recristalizado
en acetato de etilohexano. Se toma su punto de fusin y registra
sus espectros UV, IR, RMN y EM.
El concentrado se vuelve a dejar en el fro, y si no hay formacin de
cristales, se lleva a seco. El residuo se solubiliza con cloroformo,
luego se mezcla con gel de slice desactivado o con cido silcico
malla 100 y se deja secar. La mezcla seca se coloca en la cabeza
de una columna cromatogrfica preparada con 1000 gr. de gel de
slice en benceno. Se eluye con el sistema de solventes (A).

4.05.2 NAFTOQUINONAS
Las naftoquinonas que no tengan un alto grado de hidroxilacin,
son extradas con benceno en caliente.
Procedimiento-1:
2 kg de la raz seca y triturada de una especie del gnero Plumbago,
se extrae con benceno en un soxhlet hasta su agotamiento. El extracto bencnico se somete a destilacin a presin reducida; y el
concentrado se deja en refrigeracin. Si hay formacin de un precipitado cristalino, ste es separado y recristalizado en alcohol. Se
toma el punto de fusin de los cristales y registra sus espectros
UV, IR, RMN y EM.
El concentrado se lleva a seco y se cromatografa en una columna
preparada con gel de slice. Para la elusin se puede emplear el
sistema de solventes (A) o (C).
Procedimiento-2:
Dos kg de pas y caparazones de erizos de mar son tratados con
una solucin acuosa 5N de cido clorhdrico durante 24 horas; a
continuacin se filtra y la solucin cida se extrae con ter etlico.

351

Se separa el extracto etreo al cual se aade una solucin de bicarbonato de sodio en cantidad suficiente; se mezcla bien y se deja en
reposo. Se toma la fase acuosa, acidula con cido clorhdrico y
luego se sacude con ter etlico en atmsfera de nitrgeno. Se
separa la fase etrea que es desecada con sulfato de sodio anhidro.
El extracto etreo seco se pasa por una columna empacada con
gel de slice, para la separacin de los pigmentos naftoquinnicos
(1).

4.05.3 ANTRAQUINONAS
Para la extraccin de las antraquinonas se emplea metanol o
acetona caliente. Si las antraquinonas estn al estado de glicsidos,
la extraccin se realiza, en caliente, con agua o con soluciones
alcalinas.
Procedimiento -1:
La muestra seca y triturada se extrae con metanol en un soxhlet
hasta agotamiento. El extracto metanlico se somete a destilacin
a presin reducida; y el concentrado se deja en refrigeracin durante 48 horas. Si hay formacin de cristales, stos son separados y
recristalizados en metanol. El residuo que no forma materia cristalizada se trata varias veces con agua y la fase insoluble es separada y sometida a extraccin en un soxhlet primero con ter y luego
con metanol.
Al extracto etreo se aade una solucin 2N de carbonato de sodio,
se sacude y deja en reposo. Se toma la fase acuosa y acidula con
una solucin 2N de cido clorhdrico. El precipitado es separado,
lavado y secado; es la fraccin soluble en carbnato de sodio.
La fase etrea se trata con una solucin 2N de hidrxido de sodio,
en atmsfera de nitrgeno y deja en reposo. Se toma la fase acuosa y acidula con una solucin 2N de cido clorhdrico. El precipitado es separado, lavado y secado; es la fraccin soluble en hidrxido de sodio.
La fase etrea que contiene la fraccin insoluble en alcal, se seca
con sulfato de sodio, deja en reposo, filtra y se evapora el solvente;
es la fraccin insoluble en lcali.

451

La fraccin soluble en carbnato de sodio se pasa por una columna empacada con gel de slice, luego se eluye con bencenoacetato
de etilo 95:5.
La fraccin soluble en hidrxido de sodio es cromatografiada sobre gel de slice y se eluye con benceno.
La fraccin insoluble en lcali se cromatografa por una columna
empacada con gel de slice, eluyndose en forma sucesiva con
ter de petrleo, ter de petrleobenceno, benceno y benceno
acetato de etilo.
Procedimiento-2:
La muestra seca y triturada se extrae con etanol en un soxhlet hasta su agotamiento. El extracto etanlico se destila a presin reducida.
Al residuo se aade acetato de etilo y se mezcla con gel de slice en
suficiente cantidad, a continuacin se deja secar. El producto seco
se percola en forma sucesiva con ter de petrleo, benceno y cloroformo, dando tres extractos.
Con los extractos se realiza una evaluacin cromatogrfica en capa
delgada cualitativa para determinar si contienen productos de inters.
Los extractos obtenidos con ter de petrleo y benceno son cromatografados en una columna empacada con gel de slice y se eluyen
con los sistemas de solventes (B) y (D) respectivamente.
Al extracto clorofrmico se aade una solucin 2N de carbonato de
sodio, se sacude y deja en reposo. Se toma la fase acuosa y acidula
con cido clorhdrico; y el precipitado que se forma es separado y
recristalizado en acetato de etilo. Se toma su punto de fusin y se
registra sus espectros UV, IR, RMN y EM.
Procedimiento-3:
300 gr. de talos secos y triturados del liquen Teloschistes flavicans
(Sw) Norm se extraen con acetona(2) en un soxhlet hasta su agotamiento. Si el extracto acetnico al enfriar forma un precipitado
cristalizado, ste es separado y recristalizado en acetato de etilo

551

metanol y acetonametanol. Los cristales son sometidos a un ensayo de comportamiento cromatogrfico en capa fina, se toma su
punto de fusin y registra sus espectros UV, IR, RMN y EM.
El concentrado del cual fueron separados los cristales se lleva a
seco y luego se pasa por una columna empacada con gel de slice
y se eluye en forma sucesiva con los solventes: benceno, benceno
acetona 9:1, bencenoacetona 1:1 y acetona acidulada con cido
actico.
Procedimiento- 4:
100 gr. del insecto Dactylopius coccus Costa cochinilla seco y
triturado es sometido a ebullicin con 1000 mL de agua destilada
durante 15 minutos(3). Se deja en reposo, decanta el lquido y filtra.
Al extracto se aade una solucin de acetato de plomo, deja en
reposo y decanta el lquido. El remanente se filtra y lava.
El complejo obtenido se deja expuesto al ambiente hasta que se
cubra de una pelusa blanquecina.
El complejo se trata con una solucin de metanolcido sulfrico y
se deja en reposo 48 horas. Se filtra y la solucin metanlica se
concentra a un volumen aproximado de 100 mL.
El concentrado se deja en un ambiente seco hasta la formacin de
cristales de color rojo brillante de cido carmnico.

4.06

EXTRACTORES

Para la extraccin de slidos se dispone a nivel de laboratorio de

aparatos simples para la extraccin continua, que utilizan una mnima cantidad de solvente con el mximo de rendimiento en la extraccin y la recuperacin del solvente.
El extractor clsico de este tipo es el aparato de Soxhlet que consta
de tres partes: el matraz, la cmara de extraccin y el refrigerante
de reflujo.
La cmara de extraccin en su parte inferior tiene un tubo estrecho
doblado en U que funciona como sifn. En la cmara de extraccin
se introduce la sustanciaproblema, dentro de un cartucho de papel de filtro o en una bolsita de tela tupida.
El solvente se aade a la cmara de extraccin en cantidad suficiente para que funcione el sifn, y cuando el lquido ha terminado

651

de trasegar, se aade ms solvente hasta cubrir las 2/3 partes de la

cmara de extraccin. Se pasa agua por el refrigerante y se empieza a calentar el matraz hasta que la extraccin est agotada, es
decir, que el lquido pase incoloro por el tubosifn.

751

Extractor de Soxhlet

Extractor de Soxhlet
A) Extractor mediano de vidrio
B) Micro extractor
C) Extractor mediano de acero inoxidable
Extractores

851

Extractor tipo Soxhlet

8. Vidriosobservacin
9. Entrada de solvente
10. Condensador de tubos
11. Entradaagua de enfriamiento
11a. Salidaagua de enfriamiento
12. Enfriadorsolvente recuperado
13. Salida de gases
14. Soportes.

1.
2.
3.
4.
4a.
5.
6.
7.

Evaporador
Cmara de calefaccin
Nivel
Llave de purgaextracto
Llavesolvente recuperado
Cmara de extraccin
Cestos
Sifn

Destilador para extraccin

en corriente de vapor

Evaporador rotatorio

Decantadores y filtracin al vaco

Desecadores

951

REFERENCIAS
1. FARINA, F. y HEILMLICH, W. 1969: Anal de Qumica (julio
agosto), 713-715.
2. GIBAJA OVIEDO, S., y MONTES, R. 1979: Bol. Soc. Quim. Per.
Vol. XLV, Jun. N 2, 102-106
3. GIBAJA OVIEDO, S., y TERRY, D. 1984: Bol. Soc. Quim. Per. Vol.
1, Mar. N.1,83-87.