NDICE

PGINA

Captulo 1 Historia De La Biologa Molecular

1

Historia De La Biologa Molecular.....1-2

Captulo 2 Historia De La Biotecnologa Y Sus Aplicaciones

2

Historia De La Biotecnologa....2-4

2.1

Aplicaciones De La Biotecnologa

2.1.1 Sector Alimenticio..5

2.1.2 Sector Agropecuario..5
2.1.3 Sector Pecuario...6
2.1.4 Sector Salud....6
2.1.5 Vacunas...6-7
2.1.6 Farmacogenmica...7
2.1.7 Aplicaciones Teraputicas....7
2.1.8 Proyecto Genoma Humano...7
2.1.9 Terapia Gnica....8
2.1.10 Campo De La Biorremediacin...8-9

Captulo 3 Aplicaciones De La Biologa Molecular En Medicina

3

Aplicaciones De La Biologa Molecular En Medicina.9-11

3.1

reas De Aplicacin

3.1.1 Medicina Genmica......11-12

3.1.2 Farmacogenmica......12
3.1.3 Medicina Molecular Y Patogenia12-13
3.1.4 Diagnostico Molecular......13-14
3.1.5 Terapia Gnica........14-17

3.1.6 Medicina De ARN...17-20

3.1.7 Ingeniera De Protenas..20-22

Captulo 4 Conclusiones
4
4.1

Conclusiones Cientficas....22-24
Conclusiones Del Autor...24

Captulo 5 Referencias
5

Referencias Consultadas25

Marco A. Hernndez
Ing. en Biotecnologa, UPZ ,Fresnillo, zacatecas

INTRODUCCION
Historia de la biologa molecular
La biologa molecular nace formalmente en
1953, con la publicacin del modelo estructural del
cido

desoxirribonucleico

ADN o, de manera

universal, DNA por sus siglas en ingls propuesto

por James Watson, Maurice Wilkins, Rosalind
Franklin y Francis Crick. En ese entonces tambin se
fraguaba, de manera por dems importante, el
concepto de que la biologa obedeca a fenmenos
fsicos y qumicos cuantificables; esto es, que la

Fig. 1 Watson y Crick con su

modelo del ADN.

biologa no era meramente una disciplina descriptiva sino tambin cuantitativa.

Es as que el inicio de la biologa molecular fue influido en gran medida por los
fsicos, destacando Max Delbruck, quien se dedic a la gentica despus de una
trayectoria en la fsica terica y quien estimul a otro fsico, Erwin Schrodinger, a
escribir su importante libro Qu es la vida?
La biologa molecular nace, asimismo, de la
bioqumica. El desarrollo de la gentica moderna, que se
inici a principios del siglo xx con el reconocimiento de
los trabajos de Gregor Mendel sobre la herencia,
realizados varias dcadas atrs, y continuado en los
bacterifagos o virus que infectan a las bacterias y en la
Fig. 2 Gregor Mendel experiment
con chicharos, teniendo las primeras
nociones sobre herencia gentica.

mosca de la fruta, dio paso a nuevas preguntas sobre los

mecanismos que controlan las caractersticas observables
de los seres vivos, o sea, el fenotipo.

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Marco A. Hernndez
Ing. en Biotecnologa, UPZ ,Fresnillo, zacatecas

Despus de una serie de experimentos iniciales, se determin que el DNA es el

portador de la informacin que controla el fenotipo: es la sustancia qumica que conforma a
los genes o unidades indivisibles de la herencia; esto es, el DNA constituye el genotipo. Fue
entonces de importancia caracterizar qumica y fsicamente al DNA.
En esencia, la biologa molecular busca entender la vida a travs de los complejos
mecanismos por los cuales el DNA codifica y expresa las protenas apropiadas, en las
cantidades apropiadas, en los tipos celulares apropiados que determinan un fenotipo.
Esta visin ha incluido posteriormente el mejor entendimiento de la estructura de las
protenas, del DNA, y de los cidos ribonucleicos (ARN o RNA) y de su interaccin con
otras molculas, ya sean protenas, RNA, o DNA, todo lo cual tambin determina los
diferentes fenotipos.
En ocasiones, se confunde el hecho de utilizar herramientas experimentales de la
biologa molecular con realizar biologa molecular en toda la extensin de la palabra. La
biologa molecular provee una visin sobre cmo conceptualizar un fenmeno
biolgico, y esta visin ahora se ha extendido al estudio no slo de genes individuales,
sino a la mejor comprensin de la organizacin de todo el conjunto de genes de un
organismo o genoma, al estudio de sus variaciones, y a las interacciones entre todos los
componentes del genoma. En la actualidad, la biologa molecular es de importancia
central para el mejor entendimiento de las interacciones que ocurren en poblaciones de
organismos, ya sea entre ellos o con el ambiente que les rodea, o ambos.

Historia de la Biotecnologa y sus Aplicaciones

La Biotecnologa es sin duda, una de las reas tecnolgicas clave en el desarrollo
industrial contemporneo. El trmino biotecnologa es considerado como el conjunto de
tcnicas que utilizan organismos vivientes o sustancias provenientes de stos para
elaborar o modificar un producto, mejorar plantas o animales, o para desarrollar
microorganismos para usos especficos1. De acuerdo con el especialista Pierre Douzou
1

Morris, M.S.1989.Historia de la biotecnologa. Ciencia y desarrollo.

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Ing. en Biotecnologa, UPZ ,Fresnillo, zacatecas

separa a la biotecnologa en tres etapas: la primera la considera emprica y es cuando la

biotecnologa nace con el establecimiento de las sociedades humanas y su necesidad de
desarrollar organismos que le permitieran mantener asegurada la alimentacin, la
industria y lograr su expansin territorial.
Una segunda etapa importante referida como la de transicin se presenta con la
intervencin de la Ciencia y la Tcnica en el desarrollo de industrias biotecnolgicas que
contribuyen al desarrollo de los grandes imperios. Y la tercer etapa se da con el
nacimiento de la biotecnologa moderna se da con la conjuncin de dos situaciones
relevantes: la primera, es la aparicin de la biologa molecular, disciplina que permiti
descifrar en los aos cincuenta la estructura del DNA, material gentico de los seres
vivos y los genes que lo conforman, as como de los mecanismos para traducir la
informacin gentica que se localiza en el DNA, en protenas. Este conjunto de
conocimientos permite hoy en da, tener una precisa imagen a nivel subcelular del
funcionamiento de la clula viva. La segunda situacin de la biologa molecular es la
concientizacin de que la ciencia se transforma a un tipo de actividad mucho ms
multidisciplinaria dndose la convergencia de varias estrategias, conocimientos y
herramientas, vislumbrando el xito para solucionar problemas cientficos y sociales.
Todo el conocimiento de frontera que genera la biotecnologa moderna se basa en
los esfuerzos de la biologa molecular, bioqumica, ingeniera bioqumica, biologa
celular, microbiologa, inmunologa, gentica, etctera, permitiendo el estudio integral y
la manipulacin gentica de los sistemas biolgicos (microorganismos, plantas,
animales, hombre, entre otros), y a travs de ello la utilizacin inteligente y respetuosa
de la biodiversidad para permitir el desarrollo de tecnologa eficiente, limpia y
competitiva que, a su vez, facilite la solucin de problemas importantes, en campos tales
como el de la salud, agropecuario, industrial, y tratamiento de la contaminacin
ambiental, a travs de disear, ejecutar y evaluar programas para guiar la accin
humana hacia la conservacin y el uso sustentable de la biodiversidad.

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Diversas organizaciones mundiales como la ONU, y la OCDE, expresan desde la

dcada de los 80 los riesgos implcitos y las condiciones al acceso, manejo y transferencia
de los recursos genticos. Por lo que a travs de diversas reuniones han planteado las
polticas, estrategias y programas para orientar el manejo de los recursos genticos.
La industrializacin, en mayor o menor medida, contribuye a la contaminacin y
destruccin de los ecosistemas y as todos los das varias especies de seres vivos
desaparecen de nuestro planeta produciendo mayores ganancias econmicas para unos
cuantos lo que repercute en una discriminacin econmica entre los pases. En el mbito
mundial existe la preocupacin por el acceso racional a estos recursos.

Por otro lado,

el crecimiento de la poblacin humana requiere aumentar da con da la produccin de

alimentos, as como la demanda de salud, vivienda y energticos.
La contradiccin es que, para satisfacer estas necesidades y requerimientos se
necesita consolidar y modernizar la industria y la produccin agropecuaria. De lo
anterior se desprende la importancia que tiene el reforzar el desarrollo de la
biotecnologa moderna como componente de una estrategia y alternativa respetuosa e
inteligente hacia la naturaleza y as propiciar simultneamente el uso, la preservacin y
la recuperacin de los ecosistemas de nuestro planeta2.
Por tanto, queda claro que tanto en nuestro pas como en el mundo entero hay
una gran demanda de tecnologa adecuada para resolver problemas relevantes en los
sectores mencionados, por lo tanto, para el desarrollo de la biotecnologa moderna es
importante consolidar grupos de investigacin cientfica de frontera para la generacin
de tecnologa, tanto en la industria como en las universidades y otras instituciones de
investigacin superior.
En el desarrollo de la biotecnologa moderna es importante consolidar grupos de
investigacin cientfica de frontera para la generacin de tecnologa, tanto en la
industria como en las universidades y otras instituciones de investigacin superior.

Sobern, X. et al .1998.Biotecnologa moderna en Mxico: reas estratgicas. Obra Cientfica. Trabajos

seleccionados de divulgacin cientfica. Tomo III.
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Existen diferentes campos de aplicacin de la biotecnologa, estos campos se

aplican en casi todos los sectores productivos de uso y consumo humano.
Sector alimenticio
En el sector moderno destaca la produccin de colorantes, gomas (gelificantes),
potenciadores del sabor, saborizantes y aromatizantes, acidulantes (cido ctrico),
enzimas como aditivos, etctera. En el sector de edulcorantes, la protena dulce
taumatina, extrada de una fruta africana, ha sido expresada ya en varios
microorganismos, y estn en desarrollo otros edulcorantes de naturaleza proteica.
Pero los microorganismos no slo contribuyen a la conservacin de los alimentos
o darles sabor, los propios microorganismos son comestibles, se trata de la protena
unicelular consumida como alimento por humanos y es producida por el hongo
Fusarium, que contiene el 45% de protenas y 13% de grasas y es elaborada por la
empresa inglesa Rank Horis McDougall.
Sector Agropecuario
La domesticacin de plantas para uso agrcola fue un proceso de largo plazo que
tuvo profundas consecuencias evolutivas en muchas especies. Actualmente la
biotecnologa moderna ofrece sistemas radicalmente novedosos para alterar o modificar
las propiedades genticas de los organismos en una forma totalmente dirigida. La
tecnologa de modificacin gentica naci en la dcada de los70 y uno de sus avances
ms notorios, fue la creacin de nuevas variedades de plantas agrcolas transgnicas.
Tambin este enfoque hace posible el mejoramiento gentico de plantas
resistentes a enfermedades, insectos y a condiciones ambientales adversas (sequa,
heladas, etctera) y, adems se puede reducir el uso de agroqumicos, fertilizantes y
pesticidas. Gracias a los avances de la biotecnologa moderna y junto con las
investigaciones agropecuarias tradicionales se han identificado genes que son
importantes para la agricultura, el desarrollo de tcnicas para el cultivo de clulas,
regeneracin de plantas y manejo de embriones.
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Ing. en Biotecnologa, UPZ ,Fresnillo, zacatecas

Sector pecuario
La biotecnologa moderna ha contribuido a la generacin de animales con un
crecimiento ms acelerado (incremento del tamao en peces) o produccin de leche
(vacas) y en la calidad de la carne (cerdos). Esto se ha logrado a travs de la utilizacin
de hormonas para crecimiento en el ganado.
Animales transgnicos: el primer animal transgnico que se patent fue el
Harvard Mouse, el cual es muy susceptible al cncer y es utilizado para estudios de
sustancias potencialmente carcingenas y para estudios fundamentales del cncer,
tambin se han obtenido animales transgnicos que sean tolerantes a enfermedades
virales por expresar protenas virales que les permitan una proteccin cruzada.
Sector Salud
Cualquiera que haya sido el curso de la historia, la biotecnologa naci como
industria ante la presin de la demanda de antibiticos durante la segunda guerra
mundial (Merck, Pfizer y Squibb). A partir de entonces se disearon estrategias para
mejorar genticamente las cepas microbianas industriales para que hoy en da se
puedan obtener una gran variedad de compuestos teraputicos como: aminocidos,
vitaminas, vacunas, etctera. se considera que en el sector salud es donde se ubican los
impactos ms importantes de la aplicacin de la ingeniera gentica.
Vacunas
Las nuevas vacunas de ADN o ARN emergen como una va importante de
terapia por las posibilidades de inmunizacin que ofrecen contra ciertas enfermedades.
Las vacunas genticas o de ADN son totalmente diferentes de las tradicionales en su
estructura. Las ms estudiadas son los plsmidos, es decir, pequeos anillos de ADN
proveniente de una bacteria. Los plsmidos usados para vacunar han sido alterados
para portar genes especficos de uno o ms antgenos, protenas fabricadas por los
agentes patgenos y que tienen la capacidad de despertar al sistema inmunitario de
nuestro organismo, con una gran ventaja: gracias a su manipulacin, han perdido los
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genes donde se halla la informacin que produce la enfermedad, es decir, preparan al

organismo para dar la batalla contra la posible invasin.
Farmacogenmica
La identificacin y estudio de nuevos genes, que podran ser blancos teraputicos,
y su asociacin con diferencias en la respuesta a distintos frmacos, harn ms eficientes
las estrategias teraputicas actuales y permitirn el desarrollo de frmacos ms efectivos
y con menos efectos adversos.
Aplicaciones Teraputicas
Las tcnicas de ingeniera gentica han permitido en los ltimos 20 aos el
aislamiento y caracterizacin de genes de diferentes organismos, en 1980 se consideraba
que la estructura de los genes era completamente colineal con la estructura proteica para
la cual codificaba. Sin embargo, se ha demostrado claramente, que muchos de los genes
de organismos superiores, incluyendo el hombre, estn interrumpidos. Con toda la
informacin que se ha generado y gracias a la sofisticacin permanente de las tcnicas
de DNA recombinante, en particular con la aparicin de tcnicas poderosas

en

la

amplificacin de DNA tales como la tcnica de PCR o reaccin en cadena de polimerasa

de DNA, y los vehculos moleculares que permiten la movilizacin de pedazos de ADN
de una clula a otra, hoy es posible analizar, inclusive sin clonar, los genes de cualquier
organismo, incluyendo al hombre y a travs de ello, estamos ya en la era del genoma3.
Proyecto Genoma Humano
El proyecto del genoma humano es sin duda uno de los ms importantes en la
historia de la humanidad, que por sus implicaciones biomdicas y sociales en el mbito
mundial, representa una gran promesa cientfica. El objetivo principal del proyecto es
descifrar la secuencia completa del genoma humano, dnde se encuentra la informacin
de todas las funciones que se realizan, as como la de los genes que determinan la
susceptibilidad de desarrollar alguna enfermedad como la diabetes mellitus, cncer,
Alzheimer, Huntington y las problemticas maniaco depresivas entre algunas.
3

Bolvar, F.Z. 1995. La gentica moderna: horizontes. El Colegio Nacional. Mxico.

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Terapia gnica
Los avances del proyecto del genoma humano darn lugar a una nueva era en la
medicina tanto en el diagnstico, tratamiento y la prevencin de distintas enfermedades
comunes como el cncer, la diabetes o la hipertensin por medio del surgimiento de una
nueva rea de estudio, la medicina genmica. La secuenciacin completa del genoma
permitir la identificacin de la totalidad de los genes que le componen (genmica
estructural) y su estudio para la determinacin de su funcin en los organismos
(genmica funcional) en distintos procesos como el desarrollo embrionario, en el
envejecimiento, la regeneracin de rganos o tejidos y durante el proceso de distintas
enfermedades. La identificacin de los genes que determinan la susceptibilidad o la
resistencia al desarrollo de distintos padecimientos comunes como la hipertensin
arterial, el asma o la osteoporosis, posibilitar el desarrollo de mtodos de diagnstico
molecular basados en tecnologas como las microhileras de ADN (microarrays).
Una vez identificados los genes de susceptibilidad especficos de cada poblacin,
ser posible la investigacin y el desarrollo de estrategias para la transferencia de genes
a clulas o tejidos especficos con fines teraputicos (terapia gnica), permitiendo la
restitucin o inhibicin de la funcin de distintos genes implicados en distintas
enfermedades comunes4.
Campo de la Biorremediacin
Desarrollos ms recientes en biologa molecular, ecologa e ingeniera ambiental,
ofrecen actualmente la oportunidad de modificar genticamente organismos de tal
manera que los procesos biolgicos bsicos sean ms eficientes y capaces de degradar
compuestos qumicos ms complejos as como mayores volmenes de materiales de
desecho. Actualmente, la principal aplicacin de la biotecnologa ambiental es limpiar o
remediar la polucin.
La Biorremediacin se est enfocando hacia el suelo y los residuos slidos. Los
logros destacados de la nueva biotecnologa ambiental incluyen la limpieza de aguas y
4

Tusi, T.L. y A.G. Lpez. 2000. Proyecto Genoma Humano: perspectivas y retos. Muy interesante.

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de suelos contaminados con productos del petrleo, utilizando bacterias del grupo
pseudomonas que son capaces de alimentarse de petrleo.
La lixiviacin bacteriana est siendo exitosamente utilizada en muchos pases del
mundo para recuperar metales de una gran variedad de menas. Los principales metales
recuperados son cobre y uranio, pero tambin se obtienen cobalto, nquel, zinc, plomo y
oro. Tambin las plantas modificadas genticamente han demostrado ser tiles en
fitoremediacin para la descontaminacin de suelos que contienen metales pesados y
otras sustancias txicas.

DESARROLLO
Aplicaciones de la biologa molecular en medicina
La medicina molecular, la medicina genmica, la Farmacogenmica el
diagnstico molecular y la terapia gnica han sido el resultado del impacto de la
biologa molecular en las ciencias mdicas. Estas reas de la investigacin biomdica
han permitido el avance en el conocimiento de la patogenia de los padecimientos
humanos, el desarrollo de novedosas estrategias teraputicas (como es el caso de la
medicina

del

RNA),

el

mejoramiento

de

tratamientos

farmacolgicos

la

implementacin de mtodos diagnsticos precisos.

La medicina molecular es la ciencia biomdica que utiliza las tcnicas de la
biologa molecular en el estudio de las enfermedades humanas.
Las clulas son las unidades funcionales de cualquier organismo vivo. Las
instrucciones necesarias para dirigir sus actividades estn contenidas en los cromosomas
del ncleo celular y son conocidas en su conjunto como informacin gentica. La
informacin gentica se encuentra almacenada en el acido desoxirribonucleico (DNA)
en forma de un cdigo, denominado cdigo gentico. Un segmento de DNA de
localizacin cromosmica precisa que contiene el cdigo para un producto (protena o
RNA) de funcin definida se denomina gen. La informacin del gen es transferida a los

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diferentes compartimentos celulares a travs del cido ribonucleico (RNA) y es

transmitida de una clula madre a las hijas por duplicacin del material gentico (DNA)
Los

procesos

celulares

involucrados en la transferencia y
transmisin de la informacin
gentica en la clula constituyen la
materia de estudio de la biologa
molecular. La biologa molecular
puede ser definida como una
disciplina

que

se

ocupa

del

estudio de la vida a nivel molecular.

Fig. 3 Dogma central de la biologa Molecular 5

Se fundamenta en un dogma central, que establece el flujo de la informacin gentica

en la clula (DNA RNA Protena).
Para el estudio de la transferencia y la transmisin de la informacin gentica, los
bilogos moleculares han desarrollado tcnicas que permiten la manipulacin de los
cidos nucleicos (DNA y RNA), denominadas tcnicas del DNA recombinante; con este
mismo fin han propuesto y perfeccionado procedimientos para el estudio de los
productos de la expresin de los genes (RNA y
protenas).
El impacto de la biologa molecular en
las ciencias mdicas se vio potenciado por el
Proyecto Genoma Humano, investigacin
multinacional que estableci la secuencia de
bases del DNA contenido en los cromosomas
humanos. El Proyecto del Genoma Humano ha
logrado determinar el orden preciso de los
cerca de 3,200 millones de nucletidos del

Fig. 4 La incorporacin de la biologa molecular a la

medicina ha sido impulsada por el avance tecnolgico y la
Comprensin de la informacin gentica producidos por el
Proyecto Genoma Humano.

Concepto que ilustra los mecanismos de transmisin y expresin de la herencia gentica tras el
descubrimiento de la codificacin de sta en la doble hlice del ADN
5

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genoma y elaborar un mapa que ubica a sus 30 a 40 mil genes. Para la medicina, el
conocimiento de la secuencia completa del DNA humano constituye una poderosa
herramienta para la investigacin en biomedicina que ha permitido el avance en el
conocimiento de la patogenia, el desarrollo de nuevas terapias y la implementacin de
mtodos diagnsticos precisos.
Medicina genmica
Las diferencias morfolgicas, fisiolgicas, bioqumicas y moleculares entre
individuos de la misma especie (diferencias fenotpicas), son producto de las variaciones
en la secuencia del DNA (variaciones genotpicas). Los cambios en la secuencia del DNA
que se presentan con una incidencia superior al 1% reciben el nombre de polimorfismos,
si la incidencia es menor son llamadas mutaciones. En el genoma se identifican
diferentes tipos de polimorfismos; VNTRs (de Variable Number Tandem Repeats) y SNPs
(de single nucleotide polymorphism). Los SNPs (variaciones heredadas en una sola base)
explican alrededor del 90% de la diversidad fenotpica en el humano.
El estudio de los polimorfismos y su asociacin con las enfermedades humanas es
el rea de investigacin de la llamada medicina genmica, la cual se define como el uso
de anlisis genotpicos rutinarios para mejorar los cuidados de la salud del individuo.
De la relacin entre los polimorfismos y las enfermedades humanas que se derivan de
las investigaciones en medicina genmica surge el trmino de susceptibilidad
gentica, es decir, un polimorfismo o conjunto de estos que confieren propensin
gentica al desarrollo de ciertas enfermedades o bien a complicaciones de estas. La
capacidad de predecir con cierta exactitud los riegos de padecer enfermedades donde
los genes jueguen un papel fundamental hace posible la aplicacin de medidas
preventivas que limiten o incluso eviten los padecimientos y sus complicaciones.
La variabilidad gentica no slo es capaz de identificar la susceptibilidad a los
padecimientos, puede predecir adems la evolucin de estos y su respuesta a las

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terapias farmacolgicas; claro ejemplo de ello son los polimorfismos encontrados en

pacientes con DM que se asocian a nefropata diabtica severa.
Farmacogenmica
La evaluacin de las reacciones txicas y adversas de los frmacos es un requisito
indispensable para su uso teraputico. Idiosincrasia es el trmino acuado por la
farmacologa para definir las reacciones individuales (tanto teraputicas como toxicas)
que puede experimentar un individuo tras la administracin de una terapia
farmacolgica; en definitiva, la respuesta individual a las drogas es determinada por el
genotipo.
De los estudios de variabilidad gentica se deriv la farmacogenmica, disciplina
que evala la influencia de los polimorfismos genticos en la respuesta a los frmacos.
Las evaluaciones farmacogenmicas de los nuevos activos e incluso de los ya existentes
permitirn incrementar la eficiencia y bioseguridad de los tratamientos farmacolgicos
para generar un tratamiento justo a la medida del genotipo, en otras palabras, frmacos
hechos a la medida.
Medicina molecular y patogenia
Es clara la implicacin de la biologa molecular en el estudio, diagnstico y
tratamiento de padecimientos genticos hereditarios ocasionados por mutaciones; sin
embargo, todas las enfermedades humanas poseen un componente gentico bien
hereditario o como resultado de la respuesta del organismo a los estmulos del medio,
como las toxinas o los virus. La exploracin de las funciones de cada gen humano y de
sus implicaciones en la enfermedad revela cmo el genotipo se relaciona con la gnesis y
evolucin de los padecimientos. Con el conocimiento de las bases moleculares de las
enfermedades es posible identificar marcadores para el diagnstico temprano y nuevos
blancos teraputicos, as como desarrollar estrategias teraputicas novedosas y efectivas
que en su conjunto permitan mejorar la atencin a la salud.

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Por ejemplo, actualmente est bien documentada la estrecha asociacin entre la

gnesis del cncer de mama y las mutaciones de los genes BRCA. Los genes BRCA 1 y 2
funcionan como supresores tumorales; mutaciones en estos genes producen la prdida
de su funcin y por lo tanto conducen a proliferacin celular descontrolada. La
deteccin de portadores de mutaciones en BRCA1 y BRCA2 tiene un gran impacto sobre
la prctica mdica, permite implementar estrategias de prevencin y diagnstico
temprano en miembros de familias con individuos afectados, adems de permitir
predecir la evolucin (agresividad) del cncer de mama para en ltima instancia
determinar el manejo ms adecuado.
Diagnstico molecular
La biologa molecular ha venido
a

revolucionar

diagnsticos

los

de

estudios

enfermedades

hereditarias y adquiridas. Las tcnicas

moleculares aplicadas al diagnstico
ofrecen

mayor

especificidad

sensibilidad,
rapidez

con

requerimientos mnimos de muestra en

comparacin

con

las

pruebas

convencionales. Esto permite el inicio

temprano

del

mejor

esquema

teraputico, disminuyendo de esta

manera

la

complicaciones.

probabilidad

de

Fig. 5 Las tcnicas generadas por la Biologa Molecular ofrecen

ventajas sobre las tcnicas convencionales en el diagnstico de
enfermedades hereditarias y adquiridas.

Las tcnicas moleculares aplicadas al diagnstico de enfermedades infecciosas en

ocasiones superan las limitaciones que imponen los organismos para su aislamiento. Los
cidos nucleicos microbianos extrados de una muestra clnica pueden ser analizados

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para buscar la presencia de secuencias de DNA especficas de los organismos sin

importar los requerimientos fisiolgicos para la viabilidad de los organismos.
El anlisis y la clonacin del genoma del virus de la hepatitis C (HCV) ha
permitido conseguir antgenos virales necesarios para el desarrollo de pruebas
serolgicas. Actualmente, las tcnicas de biologa molecular permiten la identificacin,
cuantificacin y el anlisis de la secuencia del genoma de HCV en individuos infectados.
Terapia gnica
La terapia gnica se define como la transferencia o introduccin de material
gentico para modificar el repertorio gentico de clulas, destinada a curar
enfermedades de origen tanto hereditario como adquirido. Las enfermedades posibles
de tratar con esta estrategia teraputica incluyen desde las monognicas hereditarias
hasta las polignicas e infecciosas; dada esta diversidad, cada enfermedad requiere un
abordaje particular. Las opciones en la manipulacin gentica son variadas e incluyen la
adicin o supresin de genes. La adicin de genes (insertar un gen funcional que
exprese la protena teraputica en el tejido indicado), incluye la correccin de genes
defectuosos, insertar genes para inducir funciones nuevas o incrementar la expresin de
un gen de inters. Por otro lado, la supresin gnica se realiza a travs de RNA de
interferencia, oligonucletidos anti-sentido o bien ribozimas para disminuir o anular la
expresin de genes.
Segn el procedimiento que se
aplique a las clulas para introducir el
gen, la terapia gnica se divide en terapia
gnica ex vivo e in vivo. En la terapia ex
vivo

las

cultivadas

clulas
para

transfectar

son

posteriormente

introducirles el material gentico; una

vez que estas clulas expresan el gen
Fig. 6 Modalidades en que consiste la Terapia Gnica

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teraputico son introducidas nuevamente al paciente. Por otro lado; la terapia in vivo
consiste en la introduccin directa del gen teraputico al torrente sanguneo o en la
administracin directa en el rgano o tejido diana. Cuando la terapia gnica se aplica en
clulas germinales se origina un cambio permanente de todo el organismo y en
generaciones posteriores. Por el contrario, la aplicacin en clulas somticas implica que
solo tejidos u rganos sean transfectados mediante administracin sistmica, inyeccin
directa o previa extirpacin del tejido. Este tipo de terapia gnica se aplica a
prcticamente cualquiera de las clulas del organismo y es la ms aplicada en la clnica.
Para

transferir

los

genes

teraputicos, la terapia gnica utiliza

vehculos de origen viral o no viral
llamados vectores. La transferencia de
genes

cambios

fenotpicos

provocados por un vector viral se

denomina transduccin; en cambio,
la transferencia de genes por un
sistema

no

transfeccin

viral

se

denomina

Fig. 7 Vectores tiles en la Terapia Gnica

Los vectores no virales muestran una baja toxicidad y en general son de bajo
costo; sin embargo, la transferencia de genes es generalmente ineficiente y transitoria. La
transfeccin por vectores no virales se divide a su vez en mtodos fsicos
(electroporacin, bombardeo de partculas, inyeccin directa de DNA, etc.) y qumicos
(precipitacin con fosfato de calcio, liposomas, etc.).
Electroporacin: consiste en el uso de una corriente elctrica para generar orificios
en la membrana celular a travs de los cuales el material gentico se introduce,
generalmente por precipitacin de complejos DNA-sales. Usada para cultivos celulares.

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Bombardeo de partculas: consiste en el uso de un aparato de balstica que dispara

micropartculas de oro rodeadas de DNA plasmidico; estas partculas atraviesan la
pared celular depositando el material gentico en el citoplasma. Es el mtodo de
eleccin para la transfeccin de clulas vegetales.
Inyeccin directa del DNA: consiste en la introduccin directa de DNA en el ncleo
celular mediante una especie de jeringa y un microscopio. Se utiliza principalmente para
la produccin de animales transgnicos.
Precipitacin con fosfato de calcio: consiste en formar un precipitado insoluble entre
el cloruro de calcio y el DNA que forma microagregados que se depositan sobre la
membrana celular y posteriormente son endocitados. Es la tcnica de eleccin para
experimentos in vitro.
Liposomas: se basa en polmeros de poliamidoaminas y lipopoliaminas con cargas
positivas que se unen a las cargas negativas del DNA formando vesculas
multilaminales que interactan con los lpidos de la membrana celular, facilitando la
transferencia de los cidos nucleicos al interior de las clulas.
Por otro lado, los vectores virales presentan una mayor eficiencia de transduccin
comparados con los sistemas no virales, por lo que son los vectores de eleccin en los
modelos in vivo y en protocolos clnicos de terapia gnica. Hasta el momento se usan
retrovirus, adenovirus, adenoasociados, herpesvirus y baculovirus. Para su uso como
vectores, los virus son modificados genticamente para que sean deficientes en
replicacin; en algunas ocasiones adems, su cpside es modificada con la finalidad de
dirigir o re-direccionar su clula blanco. Cada uno de estos vectores posee ventajas y
limitaciones respecto a los otros dependiendo del transgen, el tipo celular y la va de
administracin. En general, un vector ideal debe producirse de manera fcil y eficiente,
no ser txico o inducir reacciones inmunolgicas, ser capaz de infectar a clulas tanto en
reposo como en replicacin y transducir tipos celulares de manera especfica.

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Ing. en Biotecnologa, UPZ ,Fresnillo, zacatecas

Con base en la naturaleza de su genoma los vectores virales pueden ser divididos
en vectores de RNA y DNA; dada su capacidad de integrar o no su genoma viral dentro
del DNA cromosmico de la clula husped pueden ser clasificados como vectores
integrativos o no integrativos. Los vectores integrativos se basan en retrovirus; los no
integrativos incluyen a los vectores adenovirales (Ad), virus adeno-asociados (AAV) y
los virus de herpes simple tipo 1 (HSV-1).
Medicina de RNA
La medicina de RNA utiliza diversas estrategias basadas en el uso de molculas
de RNA con fines teraputicos. De estas estrategias, la primera en ser desarrollada fue la
terapia antisentido; es decir, aquella basada en el empleo de oligonucletidos
antisentido expresamente diseados para bloquear la accin de determinados genes.
Esta idea inicio promisoriamente hacia 1992 en la Universidad de Harvard, donde se
propuso inicialmente que la terapia antisentido podra resultar eficaz para tratar
enfermedades vinculadas con una actividad gentica anormal y donde se inici la
elaboracin comercial de oligonucletidos antisentido.
Esta terapia se basa en la sntesis de un oligonucleotido antisentido a un mRNA
para el que se desea bloquear su traduccin, evitando as la produccin de una protena
nociva. En un abordaje alterno, el oligonucletido puede ir dirigido a unirse a un DNA
de doble cadena que contiene una mutacin causante de una patologa; de esta manera,
la triple cadena formada no ser transcrita, impidiendo la expresin del gen defectuoso.
Las desventajas presentadas por esta estrategia estriban en la gran cantidad de
oligonucletidos que se requieren administrar para sistemas in vivo y en la facilidad de
degradacin de estos RNA de cadena sencilla (a veces aun antes de alcanzar su
objetivo); adems, dada la conformacin espacial tanto del DNA como del RNA, aun
con un diseo terico correcto no es posible asegurar la hibridacin del oligonucletido.
Esta estrategia ha probado ser til para bloquear la expresin del oncogn kRAS, los
efectos fibrticos del TGF- y para inhibir la expresin vrica del VHC.
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El sistema de inhibicin conocido como RNA de interferencia (RNAi) se

descubri al observarse que algunas molculas de RNA de longitud pequea podan
anular la expresin de genes en clulas de plantas y animales al hibridar con las cadenas
de RNA mensajero, con lo que la sntesis proteica se vea inhibida. Este proceso de
inhibicin con RNA de doble cadena se da en las clulas naturalmente, por ejemplo, las
plantas lo utilizan como defensa contra infecciones virales; otros procesos dentro de la
clula utilizan mecanismos similares.
El siguiente aporte en esta historia, despus del descubrimiento de los RNA
pequeos, ocurri a mediados del 2002 cuando se identific una enzima con actividad
de ribonucleasa llamada Dicer. Esta enzima es la encargada de producir en la clula las
molculas de RNA pequeo a partir de molculas de RNA grandes. Los segmentos
cortados pueden ser, segn el gen que los produjo, microRNAs y RNAs interferentes
cortos (siRNAs).
Los siRNAs se originan por el procesamiento de un RNA largo de doble cadena
(dsRNA) por la enzima Dicer que genera fragmentos de 20-25 nucleotidos de longitud.
Este siRNA se incorpora a un complejo denominado Complejo Silenciador Inducido por
RNA (RISC) que contiene proteasas. Al constituirse el RISC, las hebras complementarias
(sentido y antisentido) del siRNA son desapareadas. El siRNA desapareado antisentido
se asocia, mediante hibridacin, con el RNA blanco y gua al complejo RISC hacia su
secuencia blanco (mRNA sentido) al cual es complementario. La actividad de
endorribonucleasa corta el RNA blanco en la porcin media de la regin pareada y
algunas exonucleasas completan la degradacin. Esta estrategia se ha utilizado como
herramienta para silenciamiento de genes especficos en clulas de mamfero. Otras
estrategias que se han implementado para inducir la expresin de estas molculas son la
inyeccin de dsRNA (sintetizado qumicamente o transcrito in vitro), el bombardeo de
partculas recubiertas del RNAi o la transfeccin con vectores que portan secuencias
para la expresin endgena del RNAi (transitoria o estable).

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Las posibilidades y aplicaciones del RNA pequeo han cambiado la manera de

entender la produccin de protenas, la cual ya no se puede explicar sin la participacin
de estos RNA que pueden inactivar genes completos. Como estrategia teraputica, su
poderosa accin de inhibicin y la posibilidad de propagarse de una clula a otra podr
generar nuevas terapias genticas altamente eficaces. Por su tamao pequeo, su
participacin en la expresin o inexpresin de protenas y sus funciones todava
desconocidas, los RNA pequeos se han convertido en molculas clave que repercutirn
en la forma en que nos acercamos a los mecanismos de la vida.
Los microRNAs (miRNA) son RNA de
cadena sencilla de 21-23 nucletidos de
longitud que regulan la expresin gnica.
Fueron descritos por primera vez por el
grupo de Victor Ambros en 1993 como small
RNAs, aunque el termino micro RNA se
acuo hasta el 2001 por Ruvkun. Los miRNA
son codificados por genes que son transcritos
mas no traducidos; estos transcritos son
procesados a un forma llamada pri-miRNA
que originan las estructuras premiRNA que
contienen una pequea horquilla; finalmente
se originan los miRNA maduros. Los genes
que

los

originan

son

transcritos

primariamente a pri-miRNA con una CAP y

Fig. 8 Va que sigue el miRNA

una cola de poli A que es procesado en el ncleo de la clula a un segmento corto de 70

nucletidos con estructura de pasador llamado pri-miRNA. Este procesamiento lo
realiza un complejo llamado Microprocessor complex, que incluye una nucleasa llamada
Drosha y una protena de unin a RNA de doble cadena denominada Pasha.
Posteriormente, en el citoplasma, el pre-miRNA es procesado a su forma madura por la
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nucleasa Dicer que inicia la formacin del complejo RISC (complejo inductor del
silenciamiento de RNA). El corte por Dicer origina dos molculas pequeas
complementarias de RNA, de las cuales solo una, conocida como hebra gua, es
seleccionada por la protena Argonauta (RNAasa del complejo RISC) para integrar el
complejo RISC mientras que la cadena sobrante es degradada. El miRNA generado
complementara a su secuencia blanco la cual ser degrada por el complejo RISC.
En plantas, la funcin de estas molculas parece ser similar a la del RNAi
(facilitar el corte del mRNA); en el caso de los animales, se cree funciona previniendo la
traduccin proteica sin degradar el mRNA. Los miRNA parecen tambin regular la
metilacin de secuencias.
La actividad de un miRNA puede ser bloqueada por un locked nucleic acid
(LNA), que es un oligonucletido modificado (2'-O-methyl RNA oligo), o por un
oligonucletido bloqueador estrico.
Los miRNA han sido vinculados a patologas como cirrosis, cncer, dao
muscular, etc.; y su bloqueo est siendo explorado como una estrategia teraputica para
el tratamiento de varios padecimientos.
Ingeniera de protenas
Los avances en biologa molecular permitieron disear y producir en masa
nuevas protenas diferentes de las sintetizadas por los organismos vivos. Con las
tcnicas actuales para sintetizar DNA es posible crear un gen artificial que se puede
emplear para producir protenas que tengan una secuencia deseada de aminocidos. El
problema reside en saber cul de todas las posibles protenas, entre una variedad
prcticamente infinita, se podra manufacturar que tuviera alguna funcin til. Por
ejemplo, consideremos una compaa de biotecnologa que quiere manufacturar una
protena que se enlace a la superficie del virus del SIDA para eliminarlo de una solucin
acuosa o del torrente sanguneo. Asumiendo que un programa de simulacin en
computadora puede predecir la forma que debe tener tal protena para enlazarse a la
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superficie del virus, qu secuencia de aminocidos se debe reunir para producir dicha
protena? La respuesta requiere un conocimiento detallado de las reglas que gobiernan
la relacin entre estructura primaria y estructura terciaria de una protena.
En aos recientes se lograron grandes avances en la sntesis de genes artificiales
cuyos productos pptidos pueden plegarse en estructuras secundarias relativamente
simples, como haces de hlices o lminas . Sin embargo, los intentos para crear una
estructura ms compleja de polipptidos a partir de la inicial son mucho ms difciles.
Otra manera de conocer el estado actual de conocimiento de las protenas por
parte de los bioqumicos es suministrarles la secuencia primaria de una protena cuya
estructura terciaria est a punto de conocerse y permitirles que hagan predicciones
respecto del aspecto tridimensional que tendr dicha protena; luego se pueden
comparar las predicciones con la verdadera estructura. Hasta ahora, estas predicciones
no han sido muy precisas, lo cual sirve para recordarnos el alto nivel de complejidad de
las protenas y nuestra limitada comprensin de la manera como la naturaleza
transforma un mensaje gentico lineal en una protena funcional tridimensional.
Un mtodo alternativo para la produccin de nuevas protenas es modificar las
producidas por las clulas. Avances recientes en la tecnologa del DNA han permitido a
los investigadores aislar un gen individual de los cromosomas humanos, alterar su
contenido de informacin en forma precisa y luego sintetizar la protena modificada con
la secuencia de aminocidos alterada. Esta tcnica, a la cual se denomina mutagnesis
dirigida al sitio, tiene gran variedad de usos, tanto en investigacin bsica como en
biologa aplicada. Por ejemplo, si un investigador desea saber el papel de un residuo
particular en el plegamiento de un polipptido, se puede mutar al gene de manera que
sustituya a un residuo con diferencias de carga, caractersticas hidrofbicas o
propiedades para formar enlaces de hidrgeno, y a continuacin se puede determinar la
capacidad del polipptido modificado para lograr su estructura terciaria normal. La

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mutagnesis dirigida al sitio es una invaluable herramienta en el anlisis de las

funciones especficas de partes mnimas de casi todas las protenas de inters biolgico6.

CONCLUSIONES
Al hablar de la Biotecnologa es preciso subrayar que una de sus principales
facetas, la ingeniera gentica, se ha desarrollado bsicamente gracias a estudios
realizados con microorganismos.
La mayora de los cientficos interesados en la biologa molecular del crecimiento
y de la divisin celular concentran sus esfuerzos en las bacterias, debido en parte a que
sus clulas son unas 500 veces ms pequeas que la clula media de cualquier planta o
animal superior, con un nmero de molculas que, en el caso de las clulas de E. Coli,
oscila entre 3.000 y 6.000, de las cuales aproximadamente la mitad son macromolculas.
Pero existe otro grupo de microorganismos, los virus, que ofrecen tambin un
inters biolgico grande dentro de la biologa molecular y la moderna biotecnologa,
sobre todo al actuar como vectores de clonacin en numerosos experimentos de
ingeniera gentica.
La biotecnologa ha demostrado que las aplicaciones cientficas van ntimamente
unidas al trabajo de investigacin bsica, y tambin es preciso tener en cuenta la
naturaleza

extraordinariamente

multidisciplinaria

interdisciplinaria

de

la

biotecnologa.
La Biotecnologa se ha constituido en una Ciencia altamente interdisciplinaria en
donde la aplicacin de los organismos vivos o de sus componentes a los procesos
industriales se basa en el hecho de que los seres vivos producen innumerables
substancias, con frecuencia de elevado inters comercial. El gran avance de la moderna
biotecnologa ha sido una consecuencia del progreso de la biologa molecular que ha

Tomado del libro Karp, Gerald; Biologa Celular y Molecular, 4 edicin, McGraw-Hill, (2006)

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facilitado el conocimiento de los fundamentos bsicos en los que se asienta la vida, en

especial las bases del crecimiento y reproduccin de los organismos vivos. La
introduccin de las tcnicas del cido desoxirribonucleico recombinante (DNAr), de la
fusin celular inducida y de otras nuevas tecnologas en los procesos industriales
biolgicos, han conducido a aplicaciones ms efectivas de algunos procesos antiguos
bien desarrollados.
La tecnologa

del DNA

recombinante, introducida principalmente

por

investigadores de las Universidades de Stanford y California, han revolucionado la

biologa y de forma muy especial la biotecnologa. La tecnologa, a primera vista
sumamente simple, consiste en la unin del DNA procedente de diferentes organismos
vivos, para un fin especfico. En su conjunto, estas tcnicas han permitido una gran
proifundizacin en el conocimiento de las bases moleculares de la vida, mientras que en
otro terreno han conducido al establecimiento de numerosas empresas dinmicas y
agresivas; estas bioindustrias con firmes races en la investigacin bsica universitaria,
se orientan fundamentalmente a fines concretos de produccin de numerosos
compuestos que van desde los productos farmacuticos a las aplicaciones ms distantes
en el rea de la minera o incluso de la microelectrnica.
La medicina se ha beneficiado extraordinariamente de este progreso al poner la
industria biotecnolgica productos de gran inters en manos de los clnicos para su
ensayo sobre los enfermos. A modo exclusivamente informativo se pueden citar algunos
de los productos as obtenidos, comenzando por las protenas reguladoras, entre las que
destaca la insulina humana, los interferones, las linfoquinas, la hormona del crecimiento
humano, los pptidos neuroactivos y todo un amplio conjunto de otras protenas
reguladoras.
La tecnologa del DNA recombinante ha comenzado ya a dar pasos importantes
en la produccin de vacunas antivricas, ofreciendo una clara ventaja frente a las
tradicionales, al ofrecer la posibilidad de fabricar subunidades de las mismas. Se
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produce ya la vacuna de la hepatitis B y se trabaja intensamente en las de la gripe,

poliovirus y herpes sin olvidar la del virus VIH o del SIDA de extraordinario inters,
proyecto en el que trabajan un buen nmero de centros de investigacin biomdica y
alguna bioindustria.
Es por eso que aprender de la amplia gama de aplicaciones de la biologa
molecular es de gran importancia, ya que nos permite saber y conocer como un
organismo se comporta en determinados ambientes, y situaciones.
Adems, a partir de all se origina la curiosidad por seguir aprendiendo de esta
ciencia para el mejoramiento de productos, creacin de nuevos frmacos, nuevos
procesos que nos lleven a terapias gnicas, saber como se comporta la herencia, etc.

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BIBLIOGRAFAS CONSULTADAS
Karp, Gerald; Biologa Celular y Molecular, 4 edicin, McGraw-Hill, (2006)
Quintero, R. et al., 1999. Prospectiva de la biotecnologa en Mxico. Fundacin J.
Barros Sierra-CONACYT, Mxico. pp. 461-466.
Guarneros, R.M. y Crdenas, G.G.1999. La Nueva Biotecnologa. Muy interesante.
10:6-18.
Cox TM, Sinclair J. Biologa Molecular en Medicina, Buenos Aries: Editorial Mdica
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Garca, Fernndez Horacio. Biotecnologa: La Lampara de Aladino: Cmo se lleg a la
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1994. Captulo 4: 31-36.
M. F. De Robertis, Eduardo, Fundamentos de biologa celular y molecular de, De
Robertis; 4 edicin, Ed. El Ateneo.
Lizcano Losada, Fernando; Fundamentos Moleculares en Medicina, universidad de
la Sabana, 2005.
Timothy M. Cox, John Sinclair, John Sinclair (Ph.D.), Jorge H. Negrete; Biologa
molecular en Medicina, Ed. Mdica Panamericana, 1998
Jimnez, Maldonado; Biologa Molecular En Medicina; Ed. Limusa, series
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Cabrera Luque, Jos ; texto ilustrado de biologa molecular e ingeniera gentica, Ed. El
Sevier, Espaa, 2001.

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Sobern, X. et al .1998.Biotecnologa moderna en Mxico: reas estratgicas. Obra

Cientfica. Trabajos seleccionados de divulgacin cientfica. Tomo III. El Colegio
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