UNIVERSIDAD NACIONAL DE

CHIMBORAZO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA
SALUD
Carrera de Medicina
PRCTICAS DE LABORATORIO

PRCTICA NMERO

12

TEMA: DETERMINACIN
DE LA SENSIBILIDAD DE
LAS BACTERIAS A LOS
ANTIBIOTICOS
(ANTIBIOGRAMA)
Ctedra:
Docente:

Estudiantes participantes:
Lugar de la prctica:

FARMACOLOGIA I
RODRIGUEZ PONTN GABRIELA DE LOS ANGELES
Grupo 1
Grupo 2
1.
1.
1.
2.
2.
2.
3.
3.
3.
4.
4.
4.
5.
5.
5.
LABORATORIO DE
Puestos de Trabajo:
FISIOLOGIA

Grupo 3

Introduccin
La resistencia de las bacterias es el principal obstculo para la eficacia teraputica de los antibiticos,
pues no slo puede anular la accin curativa si se manifiesta en el curso del tratamiento, sino que tiene a
la larga consecuencias todava ms graves para el conjunto de la poblacin, ya que provoca la
desaparicin de las cepas susceptibles y la propagacin de las resistentes.
Ese es el motivo por el cual la determinacin de la sensibilidad de las bacterias a los antibiticos haya
adquirido tanta importancia y sea indispensable para hacer de los antibiticos un uso racional y para
preservar la eficacia de este grupo tan valioso de agentes teraputicos.
El conocimiento de la sensibilidad a los antibiticos, del microorganismo causante de una enfermedad, no
es slo importante para hacer la seleccin inicial del agente teraputico correspondiente, sino que adems
en aquellos casos en los cuales el paciente presente intolerancia a determinado frmaco, permite
seleccionar el ms adecuado para ese paciente en particular.
Los antibiogramas son mtodos in vitro que determinan las susceptibilidades de los microorganismos a
una variedad de agentes antimicrobianos, bajo condiciones de laboratorio especficas y estandarizadas.
La meta principal del estudio de susceptibilidad es proveer al clnico algunas recomendaciones sobre la
terapia que puede ser ms apropiada en pacientes con una infeccin especfica. No obstante, la
correlacin exacta entre los resultados in vitro y la respuesta clnica es muchas veces difcil de predecir,
ya que existen numerosos factores que influencian la interaccin de los agentes antimicrobianos y los
microorganismos en un determinado paciente. Entre los factores podemos resaltar:
Factores del agente antimicrobiano
Farmacocintica
Unin a protenas del plasma
Vas de administracin
Accin bacteriosttica
Bactericida
Concentracin en el sitio de la infeccin
Factores del husped

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Enfermedad
Estado inmunolgico
Formacin de absceso
Presencia de cuerpo extrao
Funcin renal y heptica
Cumplimiento del tratamiento
Factores del microorganismo
Virulencia
Alta concentracin de microorganismos
Infeccin mixta
Desarrollo de resistencia durante el tratamiento
Logro de Aprendizaje:
El mdico debe reconocer e identificar el crecimiento bacteriano y a la vez determinar la sensibilidad de
los microorganismos a los antibiticos.
Objetivo:
Determinar la sensibilidad a diversos antibiticos de un determinado microorganismo.
Materiales:
Estufa
Placa agar Pinzas metlicas
sangre
finas
Asa recta y asa
Placa con agar
Torunda estril
redonda
para
Discos de
Tablas
para
antibiograma
diferentes tipos de
determinacin
Regla
antibiticos (4-6
de resistencias
tipos distintos)
milimetrada
Guantes
Mechero
Rotulador de
Mascarillas
vidrio
Cinta adhesiva
Fosforera
Equipos:
1.
2.
3.
Herramientas Didcticas: 1.
2.
3.
Mtodo
1. Ilustrativo Experimental
Antes de empezar
No se puede tocar nada que vaya a tomar contacto con la muestra biolgica con las manos (depresor,
asa de siembre, torunda,...) para evitar contaminaciones.
Una vez utilizado este material ha de ser eliminado en un contenedor especial. Estos contenedores
sern llevados posteriormente a una planta de tratamiento de residuos biolgicos, donde sern
incinerados.
Todos los materiales o muestras tomadas deben estar perfectamente identificados: nombre, grupo,
fecha e indicativo del tipo de muestra.
Las placas sembradas deben sellarse con cinta adhesiva al finalizar para evitar su contaminacin o la
nuestra.
Al acabar la prctica, se deben lavar bien las manos.
Siembra en csped del microorganismo problema
Tomamos con una jeringa una pequea cantidad de suero fisiolgico estril (2-5 ml) y lo vertemos en

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un tubo de ensayo.
A partir de la placa problema, que contiene colonias del microorganismo cuya sensibilidad a los
antibiticos queremos determinar, tomamos una muestra SUPERFICIAL de UNA SOLA
COLONIA con un asa de siembra.
Introducimos el asa de siembra con la muestra en el tubo y agitamos el asa para realizar una
suspensin de las bacterias en el suero fisiolgico. Al acabar echamos al contenedor de residuos el asa
de siembra.
Introducimos un hisopo estril en el tubo, mojar el hisopo estril en la suspensin. Escurrir el exceso
de lquido contra las paredes del tubo de ensayo.
Tapar el tubo e inocular la placa pasando muy suavemente por la superficie de la placa agar-sangre
nueva. En esta ocasin realizaremos una siembra en csped, es decir, por toda la superficie de la
placa, para conseguir que crezca bacterias de modo masivo (no interesa aislar bacterias como en la
prctica del frotis farngeo). Es importante que la siembra sea SUPERFICIAL, sin profundizar en el
medio de cultivo. (Se puede Inocular dos veces ms en ngulos de 60) Se tapa la placa y
se rotula indicando en el nombre, grupo y fecha y marcando con una A la tapa (Antibiograma)

Colocacin de los discos de antibitico

Tomando ahora con las pinzas - NUNCA CON LAS MANOS- un disco de cada uno de
los antibiticos que se facilitan (cada disco es un papel de filtro que contiene una suspensin de uno
varios antibiticos a la concentracin teraputica).

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Se deposita el disco suavemente sobre la placa, sin tocar la superficie con las pinzas. es muy
importante que el disco contacte con el medio de cultivo en un nico sitio.
Realizamos la misma operacin con los otros cinco antibiticos, colocando los nuevos discos
separados de los anteriores, formando un hexgono.

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Incubacin y observacin
Se llevan las placas a incubar a 37C (temperatura corporal) durante 24 horas. Tras este periodo se
recogen las placas y SIN ABRIR se observa el crecimiento bacteriano.

Medicin del halo de inhibicin

Por la parte trasera de la placa incubada mediremos el dimetro de los halos de inhibicin que se han
formado alrededor de los discos de antibitico a los que la bacteria problema es sensible.
Anota los datos en la representacin de la figura 2, indicando con un nmero del 1 al 6, el antibitico
colocado en el disco y dibujando la presencia o ausencia de halos y su tamao en mm.
Con ayuda de las tablas que se te proporcionan determina si la bacteria es sensible (S) o resistente (R)
a cada antibitico y antalo en la tabla, en las columnas correspondientes.
Cuestionario
1. Cmo actan los antibiticos sobre los microorganismos?
2. Por qu se realizan los antibiogramas?
3. Qu es resistencia bacteriana?
Evidencia de prctica (fotos)
GRUPO N 2 FARMACOLOGIA I

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EQUIPO 1.
EQUIPO 2.
13. Terminologa