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MANUAL DE PRCTICAS DE
BIOQUMICA
ABRIL 2011
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NDICE
Pg
ndice
Presentacin
Prctica 1
Prctica 2
Prctica 3
Prctica 4
Prctica 5
Prctica 6
Prctica 7
Prctica 8
Prctica 9
Prctica 10
Prctica 11
Bibliografa
Anexo.- Preparacin de Reactivos
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PRACTICA No. 1
OBJETIVOS
El discente conocer el material de laboratorio ms comnmente utilizado en el laboratorio de
Bioqumica.
MATERIAL
MTODO
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Los alumnos llevarn a cabo la medicin de agua utilizando los diferentes materiales de laboratorio
as como una discusin dirigida en el laboratorio.
CUESTIONARIO
1. Cmo se clasifica el material empleado en las prcticas de laboratorio?
2. Cules son los cuidados que se deben tener en cuanto a bioseguridad?
3. Qu precauciones debes tener en el laboratorio?
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PRACTICA No. 2
OBJETIVOS
El discente identificar y manejar el equipo comnmente utilizado en el laboratorio de
Bioqumica.
EQUIPOS
Balanza analtica
Balanza granatara
Espectrofotmetro
Potencimetro
Centrfuga
Bao mara
Estufa de laboratorio
Microscopio ptico
MTODO
Se llevar a cabo una demostracin prctica de cada uno de los equipos y una discusin dirigida
en el laboratorio.
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CUESTIONARIO
1. Que medidas de seguridad para el uso correcto del equipo crees que se deban llevar a
cabo?
2. Menciona y describe brevemente que otros equipos consideras que sean de importancia en
el laboratorio mdico.
3. Solamente en el laboratorio de medicina se pueden utilizar los equipos mencionados
anteriormente? Si escribes como respuesta si o no, menciona porque y en que otras
disciplinas se podran utilizar.
PRCTICA # 3.- PREPARACIN DE SOLUCIONES
INTRODUCCIN
Una solucin es una dispersin homognea (en forma inica o molecular) de un slido, lquido o
gas, en el seno de un lquido, y pueden ser Molares, Normales, Saturadas, Amortiguadoras o
Buffer, Porcentuales, Hipertnicas, Isotnicas, etc.
OBJETIVO:
MATERIAL:
Balanza
matraz aforado de 100 mL
matraz aforado de 50 mL
esptula
REACTIVOS:
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HCl concentrado
NaOH granular
NaCl
Agua destilada
MTODO:
A: Preparacin de soluciones normales, molares, porcentuales
INTRODUCCIN
OBJETIVO
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El discente realizar reacciones para demostrar las propiedades fsicas y qumicas de los
carbohidratos.
MATERIAL
Pipeta volumtrica de 10 ml
Pipetas volumtrica de 5 ml
Vaso de precipitado de 100 ml
Agitador
Bureta de 25 ml
Pinzas de 3 dedos
soporte universal
Embudo
Matraces erlenmeyer de 50 ml
REACTIVOS
Fenolftalena
NaOH1 N
HCl 1 N
MTODO
CUESTIONARIO
1. Qu es un indicador?
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PRCTICA NO. 5
INTRODUCCIN
OBJETIVO
El discente comprobar por diferentes mtodos el pH (papel pH, potencimetro) y determinar el
pH de algunas sustancias y lquidos corporales.
MATERIAL
vasos de precipitado de 50 mL
pipetas graduadas de 5 mL
Potencimetro
Gasas
Tiras reactivas para pH
Papel secante
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REACTIVOS
Agua destilada
Muestras de diferentes lquidos
MTODO
CUESTIONARIO
1. Defina pH
2. Qu significa solucin cida, bsica y neutra?
3. Cul es el pH que presentan la mayora de los lquidos corporales?
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INTRODUCCIN
En general, las membranas celulares son permeables al agua y a algunos solutos e impermeables
a otros, pero las concentraciones molares en equilibrio y por lo tanto las presiones osmticas, de
un lado a otro de la membrana, son iguales. Una situacin fisiolgica dada se define en relacin a
la concentracin de las soluciones en ambos lados de una membrana, las soluciones son
isoosmticas o isotnicas, cuando una solucin tiene concentracin mayor que la del otro lado es
hipertnica y, en cambio, la solucin con menor concentracin, es hipotnica.
OBJETIVO
El discente describir los efectos de la concentracin de cloruro de sodio en una solucin sobre los
eritrocitos.
MATERIAL
REACTIVOS
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MTODO
1. Rotular cada uno de los tubos con el nombre de la solucin que contendr y
colocarlos en la gradilla.
2. Adicionar 1 ml de la solucin correspondiente en cada tubo.
3. Aadir utilizando la pipeta pasteur 4 gotas de sangre completa a cada tubo, agitar y
dejar en reposo.
4. Colocar 1 gota de la solucin en un portaobjetos, cubrir con un cubreobjetos y
observar bajo el microscopio con el objetivo seco dbil y seco fuerte.
5. Repetir el procedimiento anterior para cada solucin.
6. Dibujar y anotar los resultados de las observaciones.
Sol. Isotnica
Sol. Hipotnica
Sol. Hipertnica
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CUESTIONARIO
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INTRODUCCIN
Los carbohidratos son compuestos polihidroxilados aldehdicos o cetnicos y de acuerdo a su
cadena pueden ser monosacridos, disacridos, oligosacridos y polisacridos. Los azcares son
compuestos caracterizados por desviar la luz polarizada, por lo que aquellos compuestos que
desvan la luz a la derecha son considerados como dextrorrotatorios o que su rotacin es positiva y
las sustancias que desvan la luz polarizada a la izquierda son levorrotatorios o bien su rotacin es
negativa. Esto es posible determinarlo con un polarmetro.
Los carbohidratos representan el mayor suministro en la alimentacin y la principal fuente de
energa para la poblacin mundial. A pesar de su mayor utilizacin como fuente energtica, slo
una pequea cantidad se almacena en el cuerpo. Cuando la ingestin calrica sobrepasa el
consumo diario, los carbohidratos en exceso se convierten fcilmente en grasas las cuales se
almacenan en el tejido adiposo.
Desde el punto de vista clnico y nutricional es importante identificar y cuantificar algunos
carbohidratos importantes, tanto en raciones alimenticias como en productos elaborados y
materiales biolgicos.
OBJETIVO
El discente realizar reacciones para demostrar las propiedades fsicas y qumicas de los
carbohidratos.
MATERIAL
gradilla
pipetas graduadas de 5 ml
tubos de ensaye de 13X100 mm
mechero bunsen
soporte universal
tripi
tela de alambre
bao mara a 20C
bao mara a ebullicin
bao mara de hielo
pinza para tubo de ensaye
bureta de 100 ml
REACTIVOS
Reactivo de Mollish
Reactivo de Benedict
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Lugol
cido sulfrico concentrado
Acetona
Hidrxido de sodio 0.1 N
Agua destilada
Solucin de diferentes azcares
MTODO
El in Cu+2 se estabiliza en medio alcalino para formar un quelato con el citrato de sodio
dando un precipitado rojo-naranja en presencia de azcares reductores.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
REACCIN DE YODO
sta prueba se utiliza para caracterizar a los almidones segn sea el tipo (amilosa o
amilopectina) dando una coloracin caracterstica para cada uno.
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Los glcidos se deshidratan con cido sulfrico concentrado dando origen a furfurales.
stos se condensan con componentes fenlicos como el -naftol, para dar sustancias qumicas
coloreadas.
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INTRODUCCIN:
stas biomolculas se encuentran en todos los tejidos de los animales, vegetales y en la flora y
fauna microscpicas. Todos los lpidos contienen carbono, hidrgeno y oxgeno, y algunos
nitrgeno, fsforo y azufre. El metabolismo intermedio de los lpidos en animales superiores est
ntimamente relacionado con el de los glcidos y con algunas degradaciones de las protenas,
pues sus vas metablicas tienen diversos puntos en comn; forman la parte principal de los
combustibles productores de energa del cuerpo.
Lpido
a.- Sustancias insolubles en agua pero solubles en los disolventes (de las grasas) como ter,
cloroformo, ter de petrleo, etc.
b.- Son steres reales o potenciales de los cidpos grasos
OBJETIVO:
MATERIAL:
mechero Fisher
pipetas gradadas de 5 ml
pinzas portatubos
tripi
Sales biliares
Aceite de cocina
ter
REACTIVOS:
NaOH en solucin
Al(OH)2 en solucin
NaCl
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Aceite oliva
Agua destilada
Manteca de cerdo
Cloroformo
Alcohol
EMULSIFICACIN:
Cuando un aceite es agitado vigoroamente con el agua, el primero se separa en porciones ms
pequeas dando como resultado la formacin de una emulsin. Por lo tanto podramos decir que
una emulsin es una dispersin de un lquido en otro, en el que no es miscible. sta emulsin no
es estable, ya que despus de transcurrido poco tiempo, los 2 lquidos se separan nuevamente. Si
al agua se le agregan sales biliares, se estabiliza por ms tiempo.
MTODO
MTODO
1.
2.
3.
4.
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5. Agregar a cada uno de los tubos con el precipitado 3 ml de agua destilada. Agitar y
observar.
6. Agregar a cada uno de los tubos NaCl a saturacin
7. Observar la formacin de precipitado que se aglomera en la parte inferior del tubo (despus
de un breve reposo).
8. Decantar el lquidon y observar el precipitado en el mismo tubo
9. Agregar 3 ml de agua destilada, agitar y observar si se disuelve y forma espuma jabonosa.
INDICE DE YODO:
Mide el nmero de gramos de yodo fijados en cada 100 g de grasa.
MTODO
1. Tomar 3 tubos de ensaye y colocar a cada uno de ellos 2 ml de alcohol en cada uno y 1 g
de una muestra de lpido diferente en cada tubo (manteca, aceite de cocina y aceite de
oliva).
2. Colocar en bao Mara a ebullicin por un minuto cada tubo y dejar enfriar.
3. Agregar 10 gotas de lugol a cada tubo y mezclar.
4. Agitar perfectamente y observar el resultado anotando cuales son los cambios para cada
una de las muestras.
SOLUBILIDAD:
Todas las grasas son insolubles en agua pero solubles en solventes orgnicos
MTODO
1. Tomar 4 tubos de ensaye y colocar a cada uno de ellos 2 ml de los diferentes solventes
(ter, cloroformo, alcohol y agua).
2. Agregar 10 gotas de aceite vegetal a cada uno, repetir la prueba para el aceite de cocina.
3. Agitar perfectamente y observar el resultado anotando cuales son los mejores solventes,
para cada una de las muestras.
CUESTIONARIO:
1.
2.
3.
4.
5.
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INTRODUCCIN
La catalasa pertenece junto con las peroxidasas al grupo de las hidroperoxidasas. El papel
fisiolgico de la catalasa consiste en la destruccin del perxido de hidrgeno funcionando como
resguardo fisiolgico para impedir su acumulacin, localizndose en la mayor parte de los tejidos
animales. sta enzima aumenta bruscamente en los enfermos con anemia perniciosa y su
disminucin se observa en adolescentes enfermos con hepatitis viral o con neoplasias malignas.
OBJETIVO
El discente observar el ndice de la actividad de la catalasa en el desprendimiento de oxgeno
molecular que se forma con la descomposicin del perxido de hidrgeno.
MATERIAL Y REACTIVOS
Gradilla
Pipetas graduadas
Bao mara
Perilla de plstico
Mechero
Tubos de ensaye
Sangre nitratada
Perxido de hidrgeno
Agua destilada
MTODO
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INTRODUCCIN
Las protenas de la leche estn constituidas por las casenas y por las protenas del suero o
protenas solubles. La proporcin vara de una raza lechera a otra pero es el componente ms
constante dentro de un mismo hato lechero. Los valores normales se sitan entre 28 y 35 g/L.
OBJETIVO
MATERIAL
Pipetas volumtricas de 10 y 5 ml
Vasos de precipitado de 250 ml
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Agitador
REACTIVOS
Oxalato de potasio
Sulfato de cobalto
Fenolftalena
Solucin de NaOH
Formaldehdo
Leche
MTODO
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INTRODUCCIN
OBJETIVO
MATERIAL
Micropipetas
Tubos de ensaye
Kits comerciales de diagnstico
Espectrofotmetro
Bao mara
REACTIVOS
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MTODO
Se seguirn las indicaciones de los insertos para cada uno de los metabolitos, tanto
para la realizacin de las determinaciones como para los clculos de las
concentraciones.
CUESTIONARIO:
1.
2. Cmo se relacionan los resultados de urea y creatinina con las rutas metablcas?
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BIBLIOGRAFA
Daz Zagoya JC; Leons Oropeza MA. Bioqumica: un enfoque bsico aplicado a las ciencias de la
vida. Mc Graw-Hill. Mxico. 2007.
Hicks, J.J. Bioqumica. Mc Graw-Hill. 2 edicin. Mxico. 2007.
Mathews, D.K; Van Holde, KE; Ahern KG. Bioqumica. Pearson Prentice Hall. 4 edicin. Espaa.m
2002.
McKee, T y McKee JR. Bioqumica. Mc Graw-Hill. 3 edicin. Mxico. 2009.
Murray RK, Bender DA,Bothanik M, Kennely, PJ. Bioqumica Ilustrada de Harper. Mc Graw-Hill
Lenga. Mxico. 2010.
ACTUALIZACIN
Manual de Prcticas de Fisiologa. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad
Autnoma del Estado de Mxico. Toluca, Mxico; 4 de junio de 2013.
Director:
Dr. en C. Mauro Victoria Mora
Elabor:
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