Facultad de ciencias

Departamento de Qumica
2014
Jose Mateus
Alexis Santos
Sergio Dvila Gonzlez

cod.
cod.
cod

25191159

Grupo 7.

Tcnicas cromatogrficas
1 OBJETIVOS.

Identificar los componentes de una mezcla binaria de solutos coloreados,

utilizando el proceso de cromatografa en capa delgada (CCD).
Identificar los componentes de una mezcla no coloreada, empleando la
tcnica de cromatografa en capa delgada.
Utilizar agentes reveladores (Yodo y cmara UV) para realizar las
observaciones de solutos no coloreados en CCD.
Separar los componentes de una mezcla binaria coloreada mediante la
tcnica de cromatografa en columna (CC).

2 MARCO TEORICO.
Los compuestos que se encontrar en la naturaleza y que utilizamos generalmente
como estudio son compuestos que se encontrar en mezclas es decir, no estn 100%
puro un compuestos en especifico, La mayora de veces necesitamos que estos
compuestos se encuentren puros para poder analizarlos y darles otros usos
aprovechando sus caractersticas.
La cromatografa es un mtodo mundialmente utilizado para la obtencin y el
anlisis de compuestos a partir de mezclas, esta se basa es la distribucin de un
compuesto es una fase mvil y otra estacionaria. Esta practica profundizara
particularmente en dos tipos de cromatografa: la cromatografa en capa delgada o
CCD para analizar el comportamiento de una mezcla coloreada y otra no-coloreada
y la cromatografa de Columna como mtodo de separacin de compuestos en una
mezcla.

1. Qu se entiende por
a. Cromatografa
La cromatografa es uno de los principales mtodos para la separacin de
especiesqumicas estrechamente relacionadas en mezclas complejas. La
cromatografa es un mtodo fsico de separacin basado en la distribucin
de los componentes de una mezcla entre dos fases inmiscibles, una fija o
estacionaria y otra mvil.
b. Sistema cromatogrfico
Sistema que se emplea para efectuar una cromatografa, comprende la fase
mvil, estacionaria y la muestra a analizar
c. material de soporte
Es un slido que retiene y ubica la fase estacionaria de tal forma que haya
la mayor superficie de contacto posible con la fase mvil.
d. fase estacionaria
La fase estacionaria consiste en partculas, generalmente slidas, pequeas
y con una superficie microporosa, de forma que presenta un amplio
desarrollo superficial. Puede estar empaquetada en forma de columna o
extendida en forma de capa. En ocasiones es necesario un tratamiento
qumico de la fase estacionaria para conseguir unas partculas de tamao y
poro adecuados.
e. fase mvil
La fase mvil puede ser un lquido o un gas, y su funcin es transportar a los
componentes de la mezcla a travs del sistema cromatogrfico.
f. cmara de desarrollo
Es un recipiente cerrado que sirve para contener el medio empleado y la
fase mvil, al tiempo que mantiene un ambiente constante del vapor de la
fase.
g. saturacin de la cmara de desarrollo
Esta expresin se refiere a la existencia de una distribucin uniforme del
vapor de la fase mvil dentro de la cubeta de elucin, antes de iniciarse la
cromatografa.
h. columnarellena
Es un tubo que contiene un slido activo ms la fase estacionaria lquida.

i. columna de pared recubierta

Es un tubo donde fase estacionaria lquida recubre la pared interna del
cubo, la cual es lisa y por lo general poco modificada
j. desarrollo cromatogrfico
Es el pasaje de la fase mvil a travs de la fase estacionaria
k. efecto de borde en CCD?
l. cromatograma
Es un grfico u otra representacin de la respuesta del detector, de la
concentracin del analito en el efluente o de otra magnitud utilizada para
medir una propiedad del efluente frente al volumen de efluente o tiempo.
En cromatografa en plano, "cromatograma" puede ser el papel o capa con
las zonas separadas.
m. agente revelador
Es una sustancia o mtodo que permite visualizar las zonas en que se
encuentran los compuestos ya separados, cuando estos no poseen color
intrnseco
n. puntodeaplicacin
Lugar donde se deposita la muestra en la columna o fase estacionaria.
o. volumen muerto
Es el volumen del eluyente que se consume sin que se detecte ningn
componente.
p. frentededisolvente
Es el borde delantero de la fase mvil cuando atraviesa el medio plano. En
todas las formas de desarrollo, excepto en el radial, el frente de la fase
mvil es esencialmente, una lnea recta paralela a la superficie de la fase
mvil
q. frentebeta
Es el borde delantero del componente ms desplazado a lo largo de la
placa cromatogrfica.
r. ndice de retencin, Rf

Se lo define como el cociente entre la distancia recorrida por el compuesto

y la distancia recorrida por el solvente por el solvente de desarrollo. De la
definicin se desprende que el valor de Rf es siempre menor o igual a la
unidad.
s. poder de resolucin de un sistema cromatogrfico
Es el parmetro que expresa el grado de separacin que se puede obtener
en un sistema cromatogrfico para dos componentes dados. Relaciona la
capacidad separadora de un sistema cromatogrfico para dos
componentes.
t. tiempo de retencin
Es el tiempo transcurrido entre el instante en que se introduce la mezcla y
el instante en que se detecta la seal propia del componente en su
mxima intensidad. Los tiempos de retencin no son reproducibles.
u. volumendeelusin
Se define como el volumen de lquido necesario para extraer una
determinada sustancia. Presenta el inconveniente de depender
fuertemente del volumen total de la columna
v. poder de elusin de una fase mvil
Capacidad impulsora de la fase mvil sobre los solutos de la muestra
retenidos sobre la fase estacionaria.
w. serie eluotrpica
Es una lista de disolventes ordenados conforme a su capacidad relativa
para desplazar solutos de un adsorbente dado.

x. cromatografa en fase normal

Procedimiento de elucin en el que la fase estacionaria es ms polar que
la fase mvil. Este trmino se usa en cromatografa lquida para resaltar el
contraste con la cromatografa con fase invertida.
y. cromatografa en fase reversa
Procedimiento de elucin empleado en cromatografa lquida en el cual la
fase mvil es significativamente ms polar que la estacionaria; por
ejemplo, un material microporoso de base silcea con cadenas alquilo
unidas qumicamente.

z. CCD analtica o comparativa

Tcnica analtica cualitativa que permite la separacin de los
componentes de una mezcla debido a la influencia de dos efectos
contrapuestos, retencin y desplazamiento.
aa. elusin
Es el fenmeno de migracin de los componentes de una mezcla a lo
largo de la fase estacionaria, impulsados por la fase mvil
bb. elusin isocrtica
Es un procedimiento en el que la composicin de la fase mvil permanece
constante durante el proceso de elucin.
cc. elusin por gradiente
Procedimiento en el que la composicin de la fase mvil se cambia, de
forma continua o en etapas, a lo largo del proceso de elucin.
dd. Retencin
Efecto producido sobre los componentes de una mezcla por una fase
estacionaria, que puede ser un slido o un lquido anclado.
ee. absorcin
Es la retencin de una especie qumica por parte de una masa, y debido a
la tendencia que esta tiene a formar mezcla con la primera, absorcin
pura, o a reaccionar qumicamente con la misma, absorcin con reaccin
qumica, considerando ambas como un fenmeno msico y no superficial.
ff. adsorcin
Es la retencin de una especie qumica por parte de los puntos activos de
la superficie de un slido quedando delimitado el fenmeno a la superficie
que separa las fases o superficie interfacial.
gg. Particin
Es el proceso de separacin en el cual se produce una competicin entre
la fase mvil y la fase estacionaria por el componente.
hh. difusin
Proceso fsico irreversible en el que partculas materiales se introducen en
un medio que inicialmente estaba ausente, aumentando la entropa del

sistema conjunto formado por las partculas difundidas o soluto y el medio

donde se difunden o disuelven.
ii. revelado
Proceso que implica la localizacin de las zonas en que se encuentran los
compuestos ya separados, cuando estos no poseen color intrnseco
jj. CCD
CCD son las siglas de Cromatografa en Capa Delgada. Es un
procedimiento que se utiliza para separar molculas relativamente
pequeas. Al igual que otras cromatografas, consiste de una fase
estacionaria y una fase mvil y el principio es el mismo: la sustancia de
inters se adherir a la fase estacionaria o se mover con la fase mvil,
viajando una distancia que es inversamente proporcional a la afinidad por
la fase estacionaria.
kk. CC
Cromatografa de columna, Es una tcnica de separacin en la que el
lecho estacionario est dentro de un tubo. Las partculas de la fase
estacionaria slida, o del soporte recubierto con la fase estacionaria
lquida, pueden llenar el volumen interno del tubo (columna rellena), o
concentrarse sobre o a lo largo de la pared interna del tubo, dejando un
camino abierto sin restriccin, en la parte media, por el que circula la fase
mvil (columna abierta).
ll. GC
Cromatografa de gases, Es una tcnica de separacin en la que la fase
mvil es un gas. La cromatografa de gases se lleva a cabo siempre en
columna.
mm. HPLC
Cromatografa lquida de alta presin (o alta eficacia), por sus siglas en
ingles HPLC. Es una tcnica de cromatografa de lquidos en la que
normalmente se utilizan partculas muy pequeas y presiones de entrada
relativamente altas.
nn. GPC
Cromatografa por permeacin sobre gel, es una tcnica de separacin en
la cual la fase estacionaria es un gel hinchado y se basa
fundamentalmente en efectos de exclusin, tales como diferencias en el
tamao de las molculas y /o en su forma o en su carga.
oo. CCP

La cromatografa en capa preparativa, es una variacin de la

cromatografa en capa delgada, esta emplea placas grandes de manera
que los componentes separados se puedas obtener individualmente.
2. Cules son los materiales de soporte comunes usados en los sistemas
cromatogrficos?
Los materiales de soporte ms empleados son las placas de vidrio, el
polister y el aluminio.
3. Cules son las fases estacionarias ms comunes usadas en los
sistemas cromatogrficos?
L
L
L
L

Las fases fijas ms comunes son

Carbn activado
Silicato de magnesio
Oxido de aluminio (Almina)
Slica Gel
Hidrxido de aluminio
Hidrxido de calcio
Carbonato de calcio
Talco y Almidn
4. Cules son los principales mecanismos que operan en una separacin
cromatogrfica?
El proceso para llevar a cabo una cromatografa consta de cinco pasos
principales
1. Armado de la placa o columna: implica la disposicin espacial que
adoptar la fase estacionaria
2. Siembra: se refiere al contacto inicial de la mezcla a separar con
la fase estacionaria, para su posterior desarrollo.
3.

Desarrollo: Es el pasaje de la fase mvil a travs de la fase

estacionaria.

4. Revelado: Implica la localizacin de las zonas en las que se

encuentran los compuestos cuando estos no poseen color
intrnseco.
5.

Elucin: Se utiliza cuando se intenta remover los solutos de la fase

estacionaria.

5. Explique cmo se determina y cmo se calcula el ndice de retencin, Rf, a

partir del registro de las manchas en el cromatograma de una CCD?

Rf se puede definir como el

cociente
entre
la
distancia
recorrida por la sustancia X, y la
distancia
recorrida
por
el
solvente. Se puede medir en el
cromatograma la distancia desde
el origen hasta la mancha
respectiva y efectuar la operacin
como se ilustra a continuacin.

6. Cmo se determina la identidad de dos compuestos mediante CCD?

A partir del cromatograma de CCD para dos compuestos se puede calcular
el ndice de retencin. El ndice de retencin se utiliza como criterio de
identificacin por su valor negativo, es decir Si la sustancia incgnita y el
patrn con la que se compara en la misma corrida cromatogrfica dan
valores de Rf distintos, se descarta que sean el mismo compuesto. En
cambio si dan el mismo valor de Rf no se puede asegurar que sean el mismo
compuesto.
Solo puede garantizarse la identidad de un compuesto cuando adems de
datos de propiedades fisicoqumicas y cromatogrficas pueden analizarse y
asignarse datos espectroscpicos del mismo.
7. Qu factores determinan o afectan el valor del Rf que se mide en el
cromatograma CCD?
a.
b.
c.
d.
e.

Las variables que afectar el ndice de retencin son

Adsorbente
Estructura del soluto
Solvente de desarrollo
Temperatura
Saturacin de la cuba

8. Qu es una serie eluotrpica? Muestre un ejemplo con los disolventes

comunes en un laboratorio.
Una serie eluotrpica hace referencia a una lista de solventes en orden
creciente de polaridad.
A continuacin se presenta una serie eluotrpica con solventes comunes en
un laboratorio:
ter de Pet.< Ciclohexano<Tolueno <Cloroformo< Acetona< Etanol
<Metanol

9. Cules son las caractersticas deseables de una fase mvil para CCD o CC?
El solvente (Fase mvil) ptimo para llevar a cabo una CCD ser aquel que
produzca un Rf de 0.5 para el componente nico, o que separe el mayor
nmero de componentes de la muestra.
Se toma un ndice re tencin de 0.5 ya que si es mayor pudo haberse
superpuesto la mancha principal con alguna de otra impureza poco polar, si
es menor pudo haberse superpuesto la mancha principal con alguna de otra
impureza ms polar, en cambio s es de 0.5 puede inferirse que la muestra
tiene un solo componente.
10.Qu es un agente revelador? Cmo se clasifican los agentes reveladores
que se usan en CCD? Enumere algunos agentes reveladores comnmente
empleados en CCD.
Un agente revelador es una sustancia o mtodo que permite visualizar las
zonas en que se encuentran los compuestos ya separados, cuando estos no
poseen color intrnseco.
Existen dos tipos de mtodos para lograr el revelado de un cromatograma:
Mtodos qumicos y mtodos fsicos.
Mtodos Qumicos:
Consisten en realizar una reaccin qumica entre un reactivo revelador y los
componentes separados, para ello se pulveriza la placa con los reactivos
reveladores con la ayuda de un pulverizador de vidrio y una pera de goma, o
mediante un dispositivo que proporcione aire comprimido.
Es preferible pulverizar con las placas en posicin horizontal. Si el reactivo
revelador es peligroso o muy corrosivo, la pulverizacin deber realizarse en
una vitrina de gases bien ventilada.
La pulverizacin se realizar poco a poco. En cromatografa en capa fina no
puede realizarse el baado del cromatograma (en cromatografa en papel s).
Generalmente se utiliza como reactivo revelador yodo, el cual forma
complejos coloreados con los componentes orgnicos (con tonos amarillomarrn), pero las manchas desaparecen con el tiempo con lo que es
conveniente sealar las manchas aparecidas.
Otro reactivo revelador bastante utilizado es el cido sulfrico, que reacciona
con los componentes orgnicos produciendo manchas negras.
El tamao de las manchas no est relacionado con la cantidad de
componente separado.
Adems de estos reveladores generales, existen otros especficos:

L
L
L
L
L

2,4 - dinitrofenilhidracina (para aldehdos y cetonas).

Verde de bromocresol (para cidos carboxlicos).
Paradimetil aminobenzaldehido (para aminas).
Ninhidrina (para aminocidos).

L
Mtodos Fsicos: El ms comn consiste en aadir al adsorbente un
indicador fluorescente. De tal forma que al colocar la placa bajo una lmpara
ultravioleta, y dependiendo del indicador y de la longitud de onda, aparecen
manchas fluorescentes en las zonas en las que hay componentes, o en otros
casos aparece toda la placa fluorescente excepto donde hay componentes.

Algunos compuestos poseen cierta fluorescencia (aunque no es normal) con

lo que pueden ser detectados directamente en una lmpara de ultravioleta.
11.Discuta la afirmacin: La CCD constituye un criterio parcial de identificacin
para un compuesto; es decir, no puede dar la identificacin total de ste.
A travs del cromatograma de CCD es posible calcular el ndice de
retencin que permite la identificacin parcial de un compuesto. Al elegir
el adsorbente y el solvente de elucin pueden lograrse valores de Rf
reproducibles para cada soluto. Aun as esta reproducibilidad no es lo
suficientemente confiable, puede ocurrir que dos compuestos tengan el
mismo valor de Rf aun probando distintos solventes de desarrollo por eso
el Rf de la CCD se usa como criterio de identificacin por su valor
negativo, en otras palabras este ndice se emplea para descartar
compuestos si el valor es diferente pero si son iguales no asegura que se
trate del mismo.
12.Cmo influye cada uno de los siguientes aspectos en la separacin que se
obtiene en la cromatografa?
a. La aplicacin de muestra en exceso o de una disolucin muy
concentrada de sta en la placa o en la columna de cromatografa.
Si se sobresatura el adsorbente en la zona de siembra, habr soluto que
estn desorbidos desde el primer momento, si esto ocurre en una placa se
observaran manchas deformadas que dificultaran su interpretacin. Si
esto ocurre en una columna se obtendr una zona de siembra demasiado
ancha o si se siembra en pastilla se tapar la columna al pretender eluir
con un solvente poco polar en el cual la muestra es insoluble.
b. El uso de una fase mvil de alta polaridad en un sistema cromatogrfico
en fase normal.
Al tratarse de una fase estacionaria de alta polaridad, la separacin de los
compuestos no ser efectiva ya que ambas fases son de carcter
altamente polar.

c. El uso de una fase mvil de alta polaridad en un sistema cromatogrfico

en fase inversa.
El sistema cromatogrfico de fase inversa implica que la fase mvil es
ms polar que la estacionaria, eso ocasionara que se desplacen los
componentes polares y los ligeramente polares o apolares queden
retenidos, todo lo contrario a el resultado de una cromatografa en fase
normal.

d.La disposicin de una cantida de excesiva de fase mvil en la cmara de

desarrollo cromatogrfico ascendente en una CCD.
Esto puede ocasionar que el solvente supere la lnea de siembra por tanto
la fase mvil disolver los solutos en vez de arrastrarlos a travs de la
fase estacionaria
f.

La aplicacin de la muestra muy cerca del extremo de la placa para CCD

que se sumerge en la fase mvil.
Al aplicar la muestra muy cerca al borde que se sumerge en la fase mvil
puede ocurrir que la siembra quede sumergida en el solvente y este
disuelva la muestra en vez de desarrollar la cromatografa.
f. La aplicacin de la muestra muy cerca de alguno de los bordes
verticales de la placa para CCD.
Esto ocasionara que debido al fenmeno de difusin el dimetro de la
siembra se incremente y sobrepase los lmites de la placa, haciendo
ininteligible el cromatograma
g. La existencia de ms de una fase lquida, con polaridad diferente, en la
composicin de la fase mvil
Si a fase mvil consta de lquidos inmiscibles, se registrar ms de un
frente de solvente haciendo ininteligible el cromatograma y malogrando la
separacin.
h.El agrietamiento, la presencia de grumoso burbujas de gasen la fase
estacionaria.
Una capa irregular ocasionar recorridos ms rpidos o ms lentos
dependientes de la forma de la fase estacionaria, implicando un valor de
ndice de retencin aleatorio e irreproducible.

i. El tamao, la forma y la porosidad de las partculas que constituyen la

fase estacionaria.
Al disminuir el tamao de partcula,
unidad es mayor y la capacidad de
mejora la resolucin. Cuando se utiliza
espacio entre los grnulos es ms
desorcin se establece rpido.

el nmero de centros activos por

adsorcin se incrementa, adems
el adsorbente de grano ms fino, el
pequeo, el equilibrio adsorcin-

j. La viscosidad de la fase mvil.

La viscosidad de la fase mvil determinar la rapidez con la que
atraviesan la fase estacionaria, y por lo tanto el tiempo que dura el
desarrollo cromatogrfico.
k. El flujo de la fase mvil.
Si la velocidad de flujo es muy rpida no se alcanza a establecer el
equilibrio adsorcin- desorcin y el frente de las bandas aparece
deformado.
l. La falta de saturacin, con la fase mvil, de la cmara de desarrollo
cromatogrfico en CCD.
Si la cmara no est debidamente saturada, el solvente, en vez de
ascender por capilaridad continuamente, tender a evaporarse de la capa
de adsorbente, para equilibrar al lquido con su presin de vapor. Esto
implicar un ascenso inhomogneo del frente de solvente
m. La distribucin irregular de la fase estacionaria o las variaciones no
uniformes del flujo y del avance de la fase mvil en la elusin.
Esto ocasiona que el frente de solvente corra inclinado haciendo
irreproducibles los valores de ndice de retencin.
n. Un cambio en la polaridad de la fase mvil por efecto de un gradiente
muy alto o un paso de gradiente excesivamente grande.
El cambio en la polaridad ocasionara que el solvente aumente o
disminuya su fuerza eluyente, determinando el grado de separacin de los
componentes de la muestra.
13. Cmo se adaptan la placa, la aplicacin y la cmara de desarrollo para
hacer CCD de tipo preparativo?
14. Cmo se aplica la muestra en la placa para CCP?.
Una vez preparadas las placas para CC Preparativa, se siembra la solucin
a la que se le practicar la cromatografa, por medio de un capilar o una

pipeta capilar controlando gota a gota su drenaje. La siembra se realiza

colocando puntos de solucin contiguos en varias pasadas, de tal forma
que quede una lnea de siembra a 1.5cm del borde interior de la placa.
Entre cada secuencia de siembra se debe dejar evaporar el solvente que
est saturando el adsorbente en esa zona.
15. Para qu se recomienda disponer un papel filtro con un extremo
sumergido en la fase mvil, dentro de la cmara de desarrollo cromatogrfico
de la CCP?
Se recomienda recubrir las paredes de la cmara con papel filtro cuyo
borde este sumergido en el solvente de desarrollo con el fin de lograr una
perfecta saturacin de la cmara de desarrollo. Se deja que el solvente
ascienda por el papel y despus de un tiempo puede considerarse que la
cmara est saturada.
16. Explique mediante un esquema cmo se controla la elusin en una CC
mediante CCD en fase normal (Slica gel). haga un paralelo o comparacin
con el resultado esperado en el control hecho por CCD en fase reversa (RP18).
Bsicamente el proceso consiste en evaluar cada una de las fracciones
obtenidas mediante la cromatografa de columna para identificar si se
trata del mismo compuesto o similares y de esta forma poder reunir las
fracciones con las mismas caractersticas para simplificar el proceso.
En el control de una elusin en cromatografa en columna en fase reversa
el proceso es similar, sin embargo se tendr que las primeras fracciones
corresponden a los compuestos ms polares y las ltimas sern los
compuestos menos polares.

3 PARTE EXPERIMENTAL.
a) Cromatografa en columna.
Materiales y reactivos.
Columna cromatogrfica
Soporte universal
Pinza
4 vasos de precipitados de 50 mL
Camaras de desarrollo cromatograficas.
Placas de cromatografa
Silica gel
Mezcla de sustancias de purificar (Sudan III / 3-Nitroanilina)
Eter de Petroleo
Acetato de isopropilo.
Rotavapor

 Trozo de Caucho
Espatula
Emsable del Montaje:
La columna Cromatografica debe asegurarse con la pinza al soporte universal
(se debe tomar nota de la longitud y el diametro interno de la columna
cromatografica) se mide la cantidad de silica gel utilizada y el volumen
necesario de solvente.
En un vaso de precipitados se mezcla el solvente que se utilizara que en esta
practica seran: Eter de petroleo y Acetato de isopropilo con la silica gel
usandola como fase estacionaria hasta. Esta solucion debe resolverse hasta
obtener una suspension regular para luego ser trasferida rapidamente de
nuevo a la columna cromatografica. (En necesario colocar un pezado de
algodn al fondo de la columna para hacer de el papel de filtrante), Luego de
esto se golpea con columna de la manera suave y uniforme con el trozo de
caucho para lograr una distribucion uniforme en toda la columna.
Desarrollo de la practica:
Al dejar reposar la la mezcla de debe drenar el exceso de fase movil en al
columna hasta que solo quede 1cm por encima del inicio de la fase
estacionaria, seguido de esto se aplican la mezcla problema haciendo una
distribucion uniforme en la parte superior de la columna con ayuda de la
espatula.
Antes empezar a aadir el solvente se debe disponer algodor en la parte
superior para que el solvente que va ingresando primero choque con este y as
lograr que ingrese de una manera menor violenta, hecho esto se da paso a
aadir el solvente.
En caso de que los solventes tengan problemas al atravesar la fase
estacionaria se debe aumentar la polaridad del solvente debido a que se trata
de una elusion en gradiente.
Las fracciones recolectadas deben recogerse en recipientes debidamente
rotulados y ser llevados al rotavapor a concentracion. Esta solucion resultante
es la que sera utilizada para realizar CCD para hacer control del proceso de
cromatografia en columna desarrolado, cada fraccion sera comparada contra
un patron para verificar la pureza de las mismas; si al realizar la CCD se
verifica la pureza el resto de la sustancia que se ha separado puede ser
llevada al recipiente del patron seleccionado.

4 ANLISIS DE RESULTADOS.
1 Cromatografa en capa delgada de solutos coloreados:
En esta prctica se analiz la mezcla problema con los criterios de la cantidad de
componentes que la mezcla posea y la identidad de cada uno de ellos. Para llevar
esto acabo se busc un disolvente que
pudiera separar cada uno de los
componentes llegando a la conclusin de que el mejor disolvente para el proceso
de cromatografa es ter de petrleo con acetato de isopropilo en proporcin 9:1.
Este disolvente tiene la caracterstica de ser poco polar, por lo que fue ideal para
realizar la cromatografa en fase normal, adems que arrastro los solutos poco
polares. Estas pruebas demostraron que la sustancia ms retenida fue
3nitroanilina ya que puede actuar como aceptor de puentes de hidrogeno mientras
que sudan III tiene la posibilidad de formar puentes de hidrogeno por el grupo
hidroxilo que posee en su estructura. En otro tpico la masa molar del sudan III es
considerablemente mayor que la 3-nitroanilina por lo que se creera que el sudan
III se retuviera primero, sin embargo se puede inferir por medio de la placa
cromatogrfica realizada en el laboratorio que este factor no influye en la
cromatografa y es ms significativo la polaridad de cada uno de los compuestos
siendo la 3-nitroanilina el ms polar siendo ms afn a la fase estacionaria haciendo
que esta se retenga primero.
Este mismo proceso se llev a cabo en placas activadas a diferentes proporciones
de los componentes de los disolventes sin embargo los resultados de ndice de
retencin de sudan III son iguales mientras que los ndices de retencin de 3nitroanilina son mayores en las placas activadas que en las placas sin activar lo que
nos indica que no se tuvo el suficiente cuidado en la manipulacin de la placa o en
la activacin de la misma en el desecador.

2 Cromatografa en capa delgada de solutos no coloreados:

Con esta tcnica se buscaba analizar una mezcla incolora e identificar sus
componentes, bsicamente es el mismo proceso que en la tcnica anterior, pero se
us mtodos fsicos como el sometimiento de la placa a longitudes de onda que
representan la luz UV y mtodos qumicos como el uso de yodo como sustancia
reveladora. En esta cromatografa la fase mvil adecuada es ter de petrleo y
acetato de isopropilo en proporcin 9:1, como resultado se present una mezcla
ternaria y para la identificacin de cada de los componentes se realiz una
cromatografa con un patrn.
Podemos concluir que el componente ms retenido fue la p-aminoacetofenona ya
que en su estructura posee dos lugares de aceptor de hidrogeno y un lugar como

donor de hidrogeno, mientras que B-naftol solo posee un lugar

para donar o
aceptar hidrgenos mientras que el acetato de etilo solo posee un lugar para
aceptar puentes de hidrogeno.

5 CONCLUSIONES

Los agentes reveladores son tiles para identificar las zonas en donde se dio
la separacin de cada componente incoloro por medio de luz ultravioleta el
cual no cambia su composicin y una cmara de yodo la cual cambia la
composicin de los componentes.
Para la identificacin de sustancias
incoloras
se
realizaron varias
cromatografas con diversos patrones lo cual facilita la interpretacin del
proceso.
En la cromatografa en capa delgada
es importante el disolvente de
extraccin ya que de este depende que tan buena sea la separacin de los
componentes de una mezcla

6 BIBLIOGRAFIA.