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HUMANA
DEPARTAMENTO ACADMICO DE
CIENCIAS BSICAS
PARASITOLOG
A GUA DE
PRCTICA
HELM INTOS
ALUMNO:
..
PROFESOR: DIA-GRUPO:
LIMAPER
2015
-II
FMH-USMP-Parasitologa 2015
2014
-II
FMH-USMP-Parasitologa 2015
CONTENI
DO
Pginas
PRCTICA 1
..................................................................................................
.................4
NORMAS DE BIOSEGURIDAD
......................................................................................4
PRCTICA 2
..................................................................................................
.................8
MTODOS DE DIAGNSTICO PARASITOLGICO
....................................................8
PRCTICA 3
..................................................................................................
................15
CARACTERSTICAS MORFOLGICAS DE PROTOZOARIOS Y
HELMINTOS .......15
PRCTICA 4
..................................................................................................
................19
IDENTIFICACIN DE AMEBAS INTESTINALES.
.....................................................19
PRCTICA 5
..................................................................................................
................25
IDENTIFICACIN DE FLAGELADOS Y CILIADOS
INTESTINALES.......................25
PRCTICA 6
..................................................................................................
................28
IDENTIFICACIN DE ESPOROZOARIOS INTESTINALES Y
TISULARES ..............28
PRCTICA 7
..................................................................................................
................33
IDENTIFICACIN DE FLAGELADOS HEMTICOS, TISULARES Y
DEL APARATO GENITOURINARIO
.................................................................................................
......33
PRCTICA 8
..................................................................................................
................37
IDENTIFICACIN DE ESPOROZOARIOS
HEMTICOS............................................37
PRCTICA 9
..................................................................................................
................40
IDENTIFICACIN DE TREMTODES
........................................................................40
PRCTICA 10-11
..................................................................................................
.........44
IDENTIFICACIN DE CSTODES INTESTINALES Y
TISULARES..........................44
PRCTICA 12- 13
..................................................................................................
........49
IDENTIFICACIN DE NEMTODOS INTESTINALES
..............................................49
PRCTICA 14-15
..................................................................................................
.........55
IDENTIFICACIN MORFOLGICA DE ARTRPODOS
...........................................55
APNDICE .................................................................................
....................................62
GLOSARIO ................................................................................
.....................................81
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
..............................................................................85
PRCTICA
1
NORMAS DE
BIOSEGURIDAD
I.
INTRODUCCI
N
La bioseguridad es un conjunto de medidas probadamente
eficaces para evitar la adquisicin accidental de infecciones con
patgenos contenidos en las muestras, as como
los
riesgos
relacionados con la exposicin a agentes qumicos, fsicos y/o
mecnicos a los que est expuesto el personal en los laboratorios.
Slo si las personas que trabajan en los laboratorios conocen las
normas de bioseguridad y las aplican, pueden determinar su propia
seguridad, la de sus compaeros y de la colectividad. El personal de
laboratorio debe cumplir con las normas de bioseguridad y los
directivos de la institucin deben cumplir con brindar las facilidades
para que stas sean aplicadas.
Conocer las principales normas para proteger la salud de las
personas que puedan estar expuestas a riesgos relacionados con la
exposicin a agentes biolgicos, qumicos, fsicos, y otros en los
laboratorios de ensayos, biomdicos y clnicos.
II.
AGENTES
DE
RIESGO
El personal de laboratorio diariamente realiza muchas actividades
que pueden causar enfermedad o dao en l o en las personas que
trabajen en ambientes cercanos, e incluso en sus familiares y la
comunidad. Estas enfermedades pueden ser causadas por:
- Agentes biolgicos, transmitidos por ingestin, inhalacin,
inoculacin y por contacto
directo a travs de piel o
mucosas.
- Agentes fsicos y mecnicos, como las temperaturas extremas,
radiaciones ionizantes, contactos elctricos o conexiones defectuosas y
vidrios resquebrajados de recipientes daados o tubos rotos.
- Agentes qumicos que pueden ser corrosivos, txicos,
carcinognicos, inflamables, explosivos.
III.
PRINCIPIOS
BSICOS
DE
BIOSEGURIDAD
El trmino contencin se utiliza para describir mtodos seguros
para manejar materiales infecciosos en el ambiente de laboratorio
donde son manipulados o conservados.
El objetivo de la contencin es reducir o eliminar la exposicin de
quienes trabajan
en laboratorios u otras personas y del medio ambiente externo a
agentes potencialmente peligrosos.
IV.NIVELES
CONTENCIN
DE
Contencin Primaria:
Constituyen la primera lnea de defensa cuando se manipulan
materiales biolgicos, qumicos y/o fsicos.
Las barreras de contencin
primaria son:
Equipos de proteccin
personal (EPP).
- Tcnicas de laboratorio estndar y normas de
higiene personal.
Inmunizacin
(vacunacin).
- Esterilizacin y desinfeccin de instrumentales
y superficies.
Es la proteccin del personal y del medio ambiente inmediato contra la
exposicin a agentes infecciosos y/o productos qumicos de riesgo. Es
provista por una buena tcnica microbiolgica y el uso apropiado del
equipo de seguridad. El uso de vacunas aumenta el nivel de proteccin
personal.
Contencin secundaria:
Se refiere al diseo y construccin de un laboratorio, lo que en
seguridad biolgica se conoce como contencin o barrera secundaria,
contribuye a la proteccin del personal de laboratorio, personas que se
localizan fuera del laboratorio y protege a las personas de la
comunidad frente a posibles escapes accidentales de agentes
infecciosos.
Los modos de transmisin en el laboratorio pueden ser insidiosos y
algunas veces
complicados, debido a que los vehculos y rutas de transmisin difieren
de los modos clsicos. El personal de Laboratorio esta frecuentemente
expuesto a niveles muy altos de los agentes infectantes, por lo que los
periodos de incubacin pueden ser mas cortos que los del mismo tipo
de infeccin provocada por una exposicin corriente.
TIPOS DE LABORATORIO CON RELACIN AL NIVEL DE
BIOSEGURIDAD (NBS) NBS 1:
El personal de laboratorio cuenta con una capacitacin especf
ica acerca de los procedimientos realizados en el laboratorio y es
supervisado por una persona con capacitacin general en microbiologa
o una ciencia relacionada. Adecuado para agentes biolgicos del grupo
1.
NBS
2:
Se aplican normas similares al NBS 1 y es adecuado para trabajos
que involucran agentes biolgicos de riesgo 2 con potencial moderado
para el personal y el medio ambiente.
NBS
3:
Es aplicable a las instalaciones clnicas, de diagnstico,
enseanza, investigacin o produccin en las que se llevan a cabo
trabajos con agentes biolgicos del grupo 3 que pueden producir una
enfermedad grave o potencialmente como resultado de la
exposicin por va de inhalacin.
NBS
4:
PRECAUCIONES DE TRABAJO
1.
17.
PRCTICA
2
MTODOS DE DIAGNSTICO
PARASITOLGICO
I. INTRODUCCIN
Puesto que el diagnstico de la parasitosis intestinal depende del
hallazgo de huevos o larvas de helmintos y quistes o trofozotos de
protozoos en heces, la coleccin y el manejo adecuado de
las
muestras son indispensables para la bsqueda e identificacin de
los parsitos en el laboratorio.
Son factores que interfieren en el examen, la ingestin de
medicamentos previa a la coleccin y las muestras viejas o
conservadas en forma inadecuada. La cantidad de heces para un
examen rutinario es del tamao de una nuez o de cinco a seis
cucharadas. Las muestras se depositan en un recipiente de boca
ancha, con tapa hermtica y limpia, no debe contaminarse con agua,
orina o cualquier otro material extrao; no debe obtenerse de la
taza del ba, ni del suelo. En lactantes, la muestra se obtiene
mediante la cucharilla recta.
Las muestras deben ser etiquetadas con el nombre del
paciente, hora de coleccin y fecha. Generalmente se recomienda
examinar tres muestras en serie y en das sucesivos. Las heces blandas,
diarreicas y lquidas, deben examinarse dentro de las primeras horas de
haber sido colectadas, si esto no es posible, las heces deben
depositarse en una solucin conservadora. Ej.: Formol 10%, alcohol
polivinilico (PVA), merthiolate yodo (MIF) o fenol-alcohol-formol (PAF).
Las heces formadas pueden ser
examinadas durante el mismo da de su coleccin. Si no es
posible pueden ser
refrigeradas durante 24 horas o conservadas (una parte de material
fecal por tres de la solucin conservadora).
DIAGNSTICO
1. Examen directo
Principalmente se busca en muestras frescas, la presencia de
formas evolutivas de parsitos de tamao microscpico sean estos
trofozotos, quistes de protozoos: Entamoeba histolytica, Giardia
intestinalis, Balantidium coli, etc.; as como larvas (Strongyloides
stercoralis), o huevos de helmintos: Ascaris lumbricoides, Trichuris
trichiura, Hymenolepis nana, Taenia sp., Fasciola hepatica, etc.).
Elementos normales: En un examen microscpico suelen
encontrarse como elementos normales estructuras
reconocibles y
otras no, fruto de la ingestin de alimentos. Las ms frecuentes son:
Fibras vegetales, Cristales de oxalato de calcio,Granos de almidn,
esporas de hongos, fosfato amnicomagnesio, granos de polen, fibras
musculares lisas, fibras musculares estriadas, cristales de cidos
grasos, grasa neutra, abundantes bacteria.
II. MATERIALES
Procedimie
nto
1. Recolecte la muestra de heces en un envase limpio y tpela.
Asegrese de no mezclar papel higinico u orina con la muestra.
2. Transporte la muestra hasta el laboratorio a
temperatura ambiente.
3. Coloque una gota de salina en una lmina
portaobjeto.
4. Aada una cantidad pequea de muestra de heces utilizando un
aplicador de madera y
mzclela con la solucin salina. Proceda igual
agregando lugol.
5. Site un cubreobjetos sobre la muestra y examine bajo el
microscopio (10X 40X).
6. Evalu la muestra y determine si hay parsitos presentes. El
diagnstico definitivo se
logra demostrando la presencia de parsitos. En algunas ocasiones es
necesario hacer exmenes repetidos en das consecutivos antes de
establecer que la muestra est negativa.
Esquem
a:
SF
Movilidad
(Trofozotos)
Lugol
Tincin
Vacuolas
Ncleos
2. Mtodos de concentracin
Este mtodo permite concentrar quistes de protozoarios,
larvas y huevos de helmintos contenidos en las heces, para obtener
una
mayor
cantidad
de
parsitos
mediante
centrifugacin,
sedimentacin, o flotacin. Las ms usadas son Sedimentacin
espontnea, Ritchie, Willis, Faust, entre otras.
A. Mtodos de Flotacin
Tcnica de Willis
Este mtodo se basa en la propiedad que tiene algunos quistes de
protozoarios y huevos de helmintos de flotar en la superficie de una
solucin saturada de cloruro de sodio debido a su menor densidad.
Material
Procedimiento
Colocar en un tubo de prueba uno o dos gramos de heces.
Aadir 4 ml de solucin saturada de NaCl. Emulsionar con una
bagueta y completar con la misma solucin el tubo hasta que en el
borde se forme un menisco, djelo reposar durante 20 minutos.
Se toma la muestra cubriendo el tubo con un cubreobjeto, en el
se adhieren los
protozoarios. Hacer una observacin microscpica de la muestra en una
lmina con lugol.
B. Mtodo de centrifugacin y flotacin
Tcnica de Faust modificada
Se basa en que los quistes y/o huevos de los parsitos flotan en la
superficie por ser de menor densidad que el sulfato de zinc a 33,3%,
cuya densidad es 1180. Es til para la bsqueda de quistes y/o huevos
de parsitos y excepcionalmente se observan larvas. Se recomienda
controlar la densidad del sulfato de zinc y usar agua filtrada para el
lavado previo de la muestra.
Materiales
Tubo de ensayo 13 x 100 mm
Gradillas
Sulfato de Zinc USP 33,3 g
Agua destilada tibia 100 ml
Muestra de heces frescas
Guantes y mascarillas
Frasco con desinfectante para descartar material (clorox, fenol,
lugol)
Lugol
Microscopio de luz
Procedimiento
1. Preparar una suspensin fecal en un tubo de prueba, completar
el volumen a 10 ml con agua destilada.
2. Centrifugar a 2500 RPM durante un minuto y decantar el
sobrenadante; repetir el procedimiento anterior tres veces (hasta
que el sobrenadante este claro).
3. Agregar la solucin de sulfato de zinc 2 ml, mezclar bien y
completar con la misma
solucin.
4. Centrifugar a 2500 RPM.
5. Luego con un asa de platino tomar una o dos asadas del
material flotante
(superficie) y colocarlo una lmina portaobjeto.
6. Agregar una gota de lugol y cubrir la preparacin con una laminilla
cubreobjeto
7. Observar al microscopio.
Pelcula
superfici
al
Sulfato de Zinc
Sedimento
de
parsitos
Sediment
o
Parsit
o
D. Tcnica
Graham
de
Coloracin
de
colorante Wright
frotis
con
ESQUEMAS (PRCTICA 2)