Los nematodos parasitos del cafeto

Benot Bertrand
Franois Anthony
Herv Etienne
Edgardo Alpizar
Philippe Lashermes
Luc Villain

Breve historia del

Caf y de los nematodos

Diversidad de las especies de caf

Plagas/ enfermedades presentes en Africa

Roya
Colletotrichum kahawae

Nematodos

Broca

Trachomycosis

El cafeto / Los nematodos nativos de

America

Especies polfagos: arboles nativos, malezas, tomate, chile.

Nematoides = Grupo importante : 2 despus de los insectos

- Vida libre (mar, aguas dulces, materia organica)
- Parasitos de animales (Insectos ... Mamferos)
- Parasitos de plantas
Classificacion de los principales nematodos fitoparasitos:
Phylum:
Nematoda
Classe:
Secernentea
Ordem:
Tylenchida, (Aphelenchida, Dorylaimida, Diphterophorina)
Famlias:
Pratylenchidae, Meloidogynidae, Heteroderidae
Prdidas economicas : banano, papas, frutales, sugar
beet, hortalizas.
Los nematodos mas importantes para el caf :
- Nematodos agalladores Meloidogyne spp.
- Nematodos lesionadores Pratylenchus spp.

Nematodos agalladores
Sintomas faciles de reconocer :
Producion de agallas ---corchosis

M. paranaensis

M. exigua

Nematodos lesionadores (Pratylenchus)

Lesionador : sintomas no caractristicos

presencia subestimada

Modo de alimentacion de los nematodos de plantas

Estilete:
- Penetracion en la raiz
- Fora la clulas
- Excrecion de enzimas
- alimentacion (succion)

Aparato sensorial
Modo de orientacion
Exsuda de la planta
Planta

Quimioreceptores
del nematodo

Los dos principales generos de nematodos

del cafeto : biologia diferentes

Nematodos de lesiones
Pratylenchus spp.
migratrios

j2
j3
j4

Nematodos de agallas
Meloidogyne spp.
sedentrios

j2
j3
j4

Consequencias
sobre
las estratgias
de control

Gran diversidad interespecifica

dentro de cada uno de esos generos

Meloidogyne spp.
Nematodos de agallas

M. incognita

Brasil (Paran, So Paulo)

ampliamente distribuido entre los trpicos
sobre otros cultivos. Pb de identificacion

M. paranaensis

Brasil (Paran, So Paulo, Minas

Gerais), Guatemala

M. exigua

Brasil (Minas Gerais, Rio de Janeiro),

espcie americana : presente en muchos
paises de los trpicos americanos.

M. coffeicola

Brasil (Parana, So Paulo, Minas Gerais)

Meloidogyne incognita
Distribucion: ?
- en caf : Brsil (Parana, San
Pablo)
Diversidad intraespecifica:
- Razas fisiologicas (4):
r1 & r4 poco patogenicas
r2 & r3 muy patogenicas

Nematodos polifagos

Meloidogyne exigua
- Especie americana
- La mas encontrada en caf : de Brazil hasta Centro Amrica
- La menos agresiva dentro de las especies de caf
- Diversidad intra-especifica (?)

Conviviencia possible con manejo adecuado

Meloidogyne paranaensis
Descripcion reciente en caf en el Parana, Brazil (Carneiro, 1996)
Sintomas de corchosis (Associacion nematodo + Fusarium ?)

W. Gonalves

Distribucion :
- Brazil [Parana, San Pablo y ahora Minas Gerais
- Guatemala :
- Hawa: M. konaensis (Eisenback et al. 1995) sur caf (responsable
de la corchosis /caf ????)
- Mexico Chiapas : Corchosis a Xalapa ? M.i. ou M.p. ?

Guatemala

Brsil

Meloidogyne arabicida
Especie unicamente presente en Costa Rica
Problematica similar a M. paranaensis:
- Etiologia / fuerte poder pathogenico

Gracias a nuevas herramientas se extiende los

conocimientos sobre la diversidad de los Meloidogyne spp
parasitos de los cafetos
Descripcion reciente
de M. izalcoensis
en el Salvador

Meloidogyne sp.
pseudoarenaria
en Guatemala

Pratylenchus spp.
nematodos de las lesiones

P. brachyurus : Partenogenetico
P. coffeae: Complejo de especies/
en Guatemala: P. coffeae >>> 4 especies

P. jaehni :

Principal parasito de la Citricultura paulista

Misma espcie en caf?

Otras espcies ???

Pratylenchus causa importantes danos en viveros y/o

plantaciones de Coffea arabica en muchos paises (Sur-Este
Asia e CentroAmerica).

100
Control

200

400

Pratylenchus inoculum

Recientes observaciones de Pratylenchus sp. Con alto grado

de patogenicidad en C. arabica en Brazil (Sao Paolo state).
Importante dao en C. canephora cv. Robusta en Indonesia.

2 especies collectadas sobre caf en Guatemala.

Las dos presentan un alto nivel de patogenicidad en C.
arabica.

Epecie 1
P. pseudocoffeae

Especie 2
P. coffeae

N2 Buena Vista
slm

N4 Moca

d
sll
dl

Pratylenchus pseudocoffeae
Pratylenchus gutierrezi
N1 Chamtaca
sll

dl
slm

N3 Chitalon
Pratylenchus coffeae
Pratylenchus loosi

campos laterales
ano

campos laterales

ano

campos laterales
campos laterales

ano

ano

N2 Buena Vista
N4 Moca
P. pseudocoffeae
P. loosi

N1 Chamtaca
N3 Chitalon

P. coffeae

10 m

N2 Buena Vista
N4 Moca
P. pseudocoffeae
P. gutierrezi

N1 Chamtaca
N3 Chitalon
P. coffeae

Test

Chit

Test

Moca

Chit

Moca

Cham

Table 1. Main species of root-knot nematodes observed on C. arabica in Latin America and classed according to the nature of the damage severity: + = existence of galls and decrease in

Nematodos en Amrica Latina

production; ++ = existence of galls, necrosis and generalized weaking of the tree with some tree deaths; +++ = existence of galls and corky roots (corchosis), generalized weakening of the tree
followed by death.

Species

Countries

Importance of distribution

where

Damage

Pathogens associated

severity

with symptoms

none

References

reported

M. exigua

Lordello (1972)

Brazil

Widely distributed

Venezuela

Widely distributed

Esbenshade & Triantaphyllou (1985)

Colombia

Widely distributed

Flores & Lpez (1989)

Costa-Rica

Widely distributed

Hernandez et al (2004a)

Nicaragua
Honduras

Widely distributed
Widely distributed

M. arenaria

El Salvador

Limited

++

none

Bertrand et al (2000b)

M. izalcoensis

El Salvador

Limited

++

Carneiro et al (2005)
Hernandez et al (2004a)

M. arabicida

Costa Rica

Very limited

+++

Fusarium oxysporum

Lpez & Salazar (1989)

Bertrand et al (2000a)

M. incognita

Brazil
El Salvador
Puerto Rico
Hawaii

large

+++

Fusarium oxysporum

Esbenshade & Triantaphyllou (1985)

Carneiro et al (2000)

limited

Negron et al (1989)

limited
limited

M. paranaensis

Brazil
Guatemala*
Hawaii

Large

+++

Suspected

Large

Suspected

Large

Suspected

Carneiro et al (1996)
Carneiro et al (2004)

Brazil Guatemala- Salvador- Hawa:

Problemas importantes y graves
Costa Rica/Mexico:
Problemas importantes
Tiende a ser grave (M. arabicida)
Nicaragua- Honduras- ColombiaVenezuela Peru : Problemas menores

Explicaciones:
a)

Intensificacin del cultivo

b)

Viveros

Perdidas y daos

Produccion (kg de caf cereza / ha)

Relacion entre produccion e

Niveles de populacion de Pratylenchus sp.
7000
6000
5000
4000

Y = - 6232 * X + 13180
r2 = 0,87 ; P = 0,001

Parasitoaltamente
altamentenocivo
nocivo
Parasito

3000
2000
1000
0
1
1,2
1,4
1,6
1,8
2
2,2
Poblaciones promedias de Pratylenchus
durante los 3 aos anteriores a las cosechas

Datos requeridos para una evaluacin

cuantitativa de las prdidas

A nivel nacional: Estimar las superficies

Distribucion geogrfica de los generos

Pratylenchus y Meloidogyne en caf
N

Zonas de producion de caf

Pratylenchus
Meloidogyne
Pratylenchus + Meloidogyne

Nmero de propriedades agrcolas

por departamento (= provncia)
1 - 5 fincas
5 - 10 fincas
10 - 20 fincas
> 20 fincas

Laboratrio de diagnstico de ANACAFE

A nivel de la finca: establecer los sintomas a travs

de un examen visual

Solamente agallas ?
Agallas con corchosis ?
Necrosis ?

Sintomas poco grave a muy grave

Por cada tipo de sintomatologia,

establecer una escala de daos

Escala de 0-5 por ejemplo

Al nivel de la finca:
evaluacin cuantitativa de las prdidas
Estimacin de las areas infestadas dentro de la
finca

Estimacin de la intensidad de la infestacin

Valor V
Ecuacin
% de perdidas=

Condicin

Nmero plantas
(N)

V1

Ningn sintoma

N1

V2

Amarillamiento

N2

V3

Malnutricion y
sintomas
radicales

N3

V4

No produce

N4

V5

Planta muerta

N5

(N2V2+N3V3+N4V4+N5V5) - N1V1 x 100

N5V5
Por lote de 20 arboles y 5 veces por /ha

Estimar los niveles de infestacion

-

Muestra para anlisis en laboratorio :

1, 10, 100 gramos de raices infestadas ?

x 20

Tomar en cuenta los metodos para

conteos

Centrifugation-flottation (laborious)
Nebulization method (2-3 conteos/8-12 dias). Mejor extraccin.

Interpretar un analisis de nematodos

Table 1: Statistical parameters for Pratylenchus spp. and Meloidogyne sp. populations in the two study plots
Guatemala

Costa Rica

Pratylenchus

M. paranaensis

Pratylenchus

M. exigua

Number

100

100

327

327

Mean

188.54

53.03

55.02

1745.12

Variance

41669

18873

5914

1931783

Standard deviation

203.11

136.69

76.91

1389.89

Minimum

74

Maximum

957

868

444

5700

Perdidas

Muy
importantes

Muy
importantes

Poco
importante

15-20%
produccin

Tomar en cuenta las dinamicas anuales de populaciones

N2 Buena Vista 450 m
PS

PL

600
500

PS

PS

400

PS1 PS2
PL

PL

300

400

200

PL

300
200

100

100
A S O N D J

BNL

BNL

BNL

F M A M J

A S O N D J

Anne 1

F M A M J

A S O N D J

Anne 2

1000

BNL
F M A M J

J A S O N D J

F M A M J

1000
800

PL

PS1

PS2 PL

PS1 PS2

PS1

600

Anne 4

Anne 3

PS2

800

600

400

400

200

200

BNL

0
J

F M A M J

S O N D

BNL
J

Anne 1

N4 Moca 1200 m

F M A M J

Anne 2

S O N D

BNL 0
J

F M A M J

Anne 3

S O N D

Nematodos / gramo de raiz

Cumulativo quincenal de lluvias (mm)

700

Meloidogyne exigua. Dinamica Heredia (Costa Rica), agosto 2001 - Agosto

2002.

M. exigua individuals / g root

Interpretar un analisis de nematodos: Variacines anuales,

funccin al desarollo de la planta
3000
Catuai (S)
2000

Xw Hybrid (IR)

1000

0
2002

2003

2004

2005

Year

Evolution of M. exigua population under field conditions (Trial 2). Average

number of individuals / g root on young trees (planted in June 2001) of two
Arabica varieties: susceptible homozygous cv. Catuai and intermediate resistant
Xw F1 hybrid clone at La Hilda State, Poas de Alajuela, Costa Rica (sampling
was assessed in December of years 2002 2004).

Tomar en cuenta la evolucin de los

daos
Nem/10 g de raiz

1000-10000
2000-15000
4000-12000
500-3000

En ciertas fincas, tomar en cuenta las competiciones entre

los dos generos dentro de las parcelas estudiadas
Relaciones entre populaciones de M. exigua e Pratylenchus sp.
(Costa Rica)
1
P1

M3

0,8
0,6
0,4

P3

0,2

M1

0
-1

-0,5

-0,2 0
-0,4
-0,6
-0,8

M2

P2

-1
-1,2

0,5

1,5

Estrategias de lucha
1 - Agronomicas

Estrategias de lucha agronomica

Rotacin de cultivo

2 aos son necesarios. Cultivar con frijol, sorgho,

higuerilla (imn), arachis pintoide

Viveros sanos
Bolsa = riesgo de tierra infestada

Ojo ! viveros comerciales de

bolsa: verificar presencia de
nematodos

Sustrato inerte: libre de

nematodos

Base del Manejo agronomico para cafetales

establecidos infestados
Los nematodos compiten para el Crecimiento

Azucares translocation
N & Ca translocation
Reduccion de la absorpcin de Zinc, Cobre, Fe..
Incrementar la fertilizacin ?
Aliviar los estrs

Intensificacion = fragiliza el sistema de produccion

heterogeneidad
(diversidad)
rotacion
Menos estrs

Productividad debil pero estable

(menos quimicos)

homogeneidad
(uniformidad)
monocultivo
Aumenta los estrs

Productividad elevada pero fragil

(mas quimicos)

Cuando aliviar el estrs ?

Proteger el suelo,
Mantener humedad
y evitar la
destruccin de la
materia organica
durante la poca
seca
Aplicar nutrientes
Development
of the perisperm

30

60

90

Development
of the perisperm

Pericarp maturation

Apenas las
primeras lluvias

Development
of the endosperm

ps
pc

ps
pc

ST3

ST2

ST1

Development
of the endosperm

120

ST4
150

ST6

ST5
180

210

240

ST7

Stage Name:
Time (days) :

30

ST3

ST2

ST1
60

90

120

ST4
150

Pericarp matu

ST6

ST5
180

210

240

ST7

Manejo integrado
Aporte de
Materia
orgnica

Sombra

Aporte de
Materia
orgnica

Regulador de las agresiones climticas

(temperaturas extremas, higrometras bajas)

Cafeto

Microclima regulado
de la plantacin

Programas
de fertilizacin
Fertilizaciones con Nitrgeno
Abonos orgnicos
Control del pH

Fisiologa de la planta

Resistencia
a nematodos
Caractersticas del suelo

Sistema
radicular

fsicas
qumicas
microbiolgicas

Micorizas
Nutricin

= Fertilidad

Comunidad
de
nematodos

Abonos orgnicos

Micro- flora y fauna

antagonistas

Productos quimicos o biologicos

Extractos de planta (?)

Bacterias (en estudio)
Nematicidas
Toxicidad elevada
Costos elevados
Baja eficiencia en cafetales establecidos

Lucha gentica a travs

de cultivares resistentes

Resumn de varios aos de pruebas de resistencia

Tolerantes a Pratylenchus

Susceptibles a Pratylenchus

Arabica

Arabica

Catimor

cultivados

Silvestres

Sarchimor

Robusta

Susceptible a
todos los
nematodos

Susceptible a
Exigua

Existe R a
Exigua

Existe R a
Arabicida e
Paranensis

Hbrido F1 tienen R a Exigua

y Paranaensis

Resitente o
Tolerante a
todos los
nematodos
Meloidogyne
conocidos

Resistencia a Pratylenchus:
Alto grado de patogenecidade , sobre todos los cultivares de C.
arabica o los cafetos de Etiopes o Yemen.

Injertacion sobre C. canephora (40 aos en Guatemala)

Lucha gentica empirica sin seleccion pero buenos

resultados en el campo contra Pratylenchus spp.

Efficiencia de la injertacion sobre C. canephora

para el control de Pratylenchus sp. 1

Pratylenchus root density / g

70

Average of Pratylenchus density in roots

from year 2 to year 6 after planting

60
50
40
30
20
10
0
Ungrafted
without chemical

Ungrafted with
chemical

Grafted without
chemical

Grafted with
chemical

Yield (x1000 kg per ha)

Productividad de injertado vs no-injertado

20

15

10

b
5

b
b

0
3

Harvests (years after planting)

Ungrafted without chemical
Grafted without chemical

Ungrafted with chemical

Grafted with chemical

Mortalidad
60

Plant mortality rate (%)

a
50

40
30

bc

20
10

n.s.
b

0
92

b
93

94

95

96

97

Years
Ungrafted without chemical
Grafted without chemical

Ungrafted with chemical

Grafted with chemical

98

Desarollo de una variedad porta-injerto

(1990-1999)

La variedad Nemaya

Pruebas de resistencia a Pratylenchus sp. 1

a 5 descendencias de C. canephora

Root damage and Pratylenchus reproductive fitness

37
T

Progeny Females
C. Canephora progeny
females

AI
CA

TU

)
(1
51

(2
T

37

59

(1
54
37
T

-2

)
-2

)
-1

-1
(1
37
T

37

55

53

(1

-1

N em atod es/g of roots

2000
1800
1600
1400
1200
1000
800
600
400
200
0
)

100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0

N ecrosed roots (% )

120 dpi (Pi = 100)

Parallel selection scheme for resistance to RKN

T 3751 (1-2) :
Resistente a differentes Meloidogyne agalladores:
Meloidogyne spp. from Brazil
Meloidogyne spp. from Guatemala and Salvador

T 3561 (2-1) :
Origin of rootstock cv. Apoata en Brazil
Resistente a M. incognita
Resistente a differentes agalladores de Centro America
Meloidogyne spp. de Guatemala y Salvador
M. arabicida y M. exigua de Costa Rica

T3751 x T3561 = cultivar Nemaya

Hibrido de Canephora resistente a
nematodos

Variedad porta-injerto Nemaya

Variedad multiresistente

Variedad porta-injerto Nemaya

Grafted coffee trees

Ungrafted coffee trees

Descendencias de Nemaya vs Robusta no seleccionado

6

4 month Plantlets
Inoculum : 600 nematodes
Evaluation at 90 dpi

Pf (thousands)

5
4
3
2

Nemaya progenies
b

c
0

Caturra

"Robusta"

T3561 (2-1) x T3751 (1-2) x

T3751 (1-2)
T3561 (2-1)

Dinamica de penetracion de 2 Pratylenchus spp.

sobre C. arabica vs C. canephora cv. Nemaya
120

Nematodes in roots

100

a
80

60
40
20

0
0

20

40

b b
60

80

100

Hours after inoculation of 300 nematodes

Pratylenchus sp.1 / Catuai
Pratylenchus sp.2 / Nemaya

Pratylenchus sp.2 / Catuai

Pratylenchus sp.2 / Nemaya

120

Presencia de muchos polyfenoles en raices de cv.

Nemaya (nunca observado en raices de C. arabica)

sin nematodos

Factor de resistencia constitutiva a Pratylenchus.

Recomendaciones para el uso de variedades

resistentes en Nicaragua
En Nicaragua las infestaciones solamente con M. exigua
son frecuentes:
En caso de infestacin con M. exigua solamente:
algunas variedades Sarchimor e los F1 siguientes
son resistentes.
Resistentes

Susceptibles

IAPAR59 T5296
H1, H10, H4

CR95, T5175, Geisha,

Caturra, Bourbon, Catuai,

M. exigua individuals / g root

Comparacin Hibrido H1 con Catuai

3000
Catuai (S)
2000

Xw Hybrid (IR)

1000

0
2002

2003

2004

2005

Year

Figure 4 Evolution of M. exigua population under field conditions

(Trial 2). Average number of individuals / g root on young trees
(planted in June 2001) of two Arabica varieties: susceptible
homozygous cv. Catuai and intermediate resistant Xw F1 hybrid
clone at La Hilda State, Poas de Alajuela, Costa Rica (sampling
was assessed in December of years 2002 2004).

Recomendaciones para el uso de variedades resistentes

en Nicaragua
En caso de infestaciones fuertes con Pratylenchus solo o con
Meloidogyne:
Injertar sobre Nemaya (si no hay: Robusta comun).
En baja altura (inferior a 900 metros sobre nivel del mar) con
on sin nematodo: injertar

Uso de variedades Resistentes

- >>>> Probabilidades bajas de erosion de resistencia
- Expression de los factores de resistencia no
dependen de las condiciones ambientales

Optimizar el estado fisiolgico de los cafetos :

Manejo Agronomico adecuado

Para nuevas plantaciones o renovacion : usar
solamente viveros libres de nematodos

Semis en botes Magenta

Perspectivas mediano plazo: nuevas fuentes de resistencia

Inoculacion precoz a 12 dias

valuation
8 semaines

valuation
13 semaines

Inoculacion tardia a 60 dias

valuation
8 semaines

valuation
13 semaines

Perspectivas: mejor conocimiento de los factores de R

Cultivo de raices

Perspectivas : Porta injerto

OGM ?

Transformacion genetica de raices

(Agrobacterium rhizogenes)

Perspectivas
Analisis funccional

0,2

0,15

0,1

0,05

Y6

cr-13

Z6

Z3

cr-32

Y4

Z21

X38

X26

Y3

Z20

X39

X4

X11

X6

X1

X23

X27

Z22

0
NTC

GUS activity (nmol MU/min/mg protein)

0,25

-0,05
Coffee Hairy-root clones

clone X4 (plante composite)

GUS
(++)

GUS
(+++)

GUS
(-)

GUS
(+++)

GUS
(++)

GUS
(+++)

Junio 2005

Octubre 2006
Inoculacion de nmatodos

Agallas de M. exigua
(diciembre 2006)

Perspectivas
Localisacion expresion p35-GFP por
microscopia confocal

Tejido differenciado

Tejido poco diferenciado

GFP (+)

GFP (+++)

Expresion homogenea en tejidos no diferenciados

Expresion heterogenea en tejidos diferenciados