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Medio de cultivo

Un medio de cultivo consta de un gel o una solucin que cuenta con los nutrientes
necesarios para permitir, en condiciones favorables de pH y temperatura, el crecimiento
de virus, microorganismos, clulas, tejidos vegetales o incluso pequeas plantas. Segn lo
que se quiera hacer crecer, el medio requerir unas u otras condiciones. Generalmente se
presentan desecados en forma de polvo fino o granular antes de ser preparados; ya
preparados pueden encontrarse en estado slido, semislido o lquido. El objetivo ltimo
del cultivo es variado: antibiograma, identificacin, multiplicacin. Uno de los sistemas ms
importantes para la identificacin de microorganismos es observar su crecimiento en
sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el
que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los
microorganismos es el Cultivo. Se han preparado ms de 10.000 medios de cultivo
diferentes.
Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presin de oxgeno
adecuadas, as como un grado correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe
contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo
microorganismo contaminante.
Los virus, por ejemplo, son obligados parsitos intracelulares, por lo que necesitan un
medio que contenga clulas vivas.

Clasificacin
Segn sus cualidades fsicas, se distinguen:

lquidos

semislidos

slidos

Segn su origen:

naturales: son los preparados a partir de sustancias naturales de origen animal o


vegetal como ser extractos de tejidos o infusiones y cuya composicin qumica no se
conoce exactamente.

sintticos: son los medios que contienen una composicin qumica definida
cualitativamente y cuantitativamente. Se utilizan para obtener resultados
reproducibles.

semisintticos: son los sintticos a los que se les aaden factores de crecimiento
bajo una forma de un extracto orgnico complejo, como por ejemplo extracto de
levadura.

Segn su formulacin:

qumicamente definidos: se conoce la cantidad exacta de cada uno de los


compuestos que hay en el medio.

complejos: se realizan a partir de extractos naturales (extracto de levadura, sangre,


etc.); no se conoce exactamente cul es la composicin del medio; sin embargo,
presenta la ventaja de que ya estn presentes todos o casi todos los elementos que
una clula puede requerir.

Segn su uso:

medio general: medio en donde crecen todo tipo de microorganismos, excepto los
que necesitan condiciones especiales (por ejemplo, agar CLED).

medio selectivo: permite seleccionar el crecimiento de una especie o grupo


determinado (hongos, bacterias entricas, protozoos...).

medio diferencial: permite identificar una especie con otra, ambas en el mismo
medio. Puede ser por su crecimiento, su metabolismo,su respiracin, etc. (por ejemplo,
medio de McConkey).

medio de enriquecimiento: contiene los nutrientes necesarios para apoyar el


crecimiento de una amplia variedad de microorganismos, se utiliza para la cosecha de
diferentes tipos de microorganismos en un mismo medio.

medio mnimo: contiene la mnima cantidad de nutrientes posible que permite el


crecimiento de una especie;

medio de transporte: preparado para servir como almacenamiento temporal a


especmenes transportados o en transferencia; mantienen su viabilidad y su
concentracin;

simple

Conteo bacteriano
Generalmente tras analizar un cultivo se realiza un conteo bacteriano con el fin de saber
cul es la densidad de poblacin microbiana que se encuentra en el medio.

Tipos:
Agar sangre
Contiene sangre de mamferos (generalmente oveja, conejo, humanos) a una
concentracin de 5 a 10%. El agar sangre, es un medio enriquecido, diferencial, usado
para aislar microorganismos fastidiosos y detectar actividad hemoltica. La -hemolisis, se
manifiesta como una lisis y digestin completa de los eritrocitos que rodean la colonia, por
ejemplo algunas bacterias del gneroStreptococcus. La -hemolisis , aparece solo como
lisis parcial (los eritrocitos, no son lisados completamente o la digestin no fue completa),
por tanto la hemoglobina aparece como una halo verdoso alrededor de la colonia.
Contiene extracto de carne, triptona, cloruro de sodio y agar.
El agar sangre es un medio de aislamiento especialmente diseado para facilitar el
crecimiento de microorganismos exigentes, bacterias Gram-positivas y todas las especies
encontradas en muestras de origen clnico.
Contiene una mezcla de peptonas particularmente adaptada al cultivo de microorganismos
exigentes (estreptococos, Listeria...).
La presencia de sangre permite la determinacin de la hemlisis, criterio bsico en la
orientacin hacia la identificacin bacteriana.
Ejemplo de hemlisis caractersticas:
Streptococcus pneumoniae: -hemlisis, con una coloracin verdosa alrededor de la
colonia.
Streptococcus pyogenes: -hemlisis, con una zona transparente alrededor o debajo de la
colonia.
El agar sangre puede ser usado para hacer subcultivos y obtener cultivos puros.

Columbia + 5% sangre de cordero, Agar


Aislamiento de bacterias exigentes
Deteccin de hemlisis
El agar Columbia es un medio de aislamiento especialmente diseado para facilitar el
crecimiento de microorganismos exigentes.
Suplementado con sangre de cordero, es altamente nutritivo y, por tanto, est adaptado
para el cultivo de la mayora de las especies bacterianas, con independencia de su
metabolismo.

Columbia CNA + 5% sangre de cordero, Agar


Aislamiento selectivo de bacterias exigentes
Deteccin de hemlisis
Columbia CNA agar + 5 % sangre de cordero es un medio selectivo de aislamiento que
permite el crecimiento de las bacterias Gram-positivas encontradas habitualmente en
muestras clnicas.
La mayora de bacterias Gram-negativas y Bacillus son inhibidos por el cido nalidxico y la
colimicina incluidos en el medio.
Columbia agar + 5% sangre de caballo
Aislamiento de bacterias exigentes
Deteccin de hemlisis
El agar Columbia + 5% sangre de caballo es un medio de aislamiento que ha sido
desarrollado para facilitar el crecimiento de microorganismos exigentes.

Trypcase Soja + 5% sangre de cordero, Agar


Aislamiento de bacterias
Determinacin de hemlisis
El agar Trypcase soja + 5% sangre de cordero es un medio de aislamiento que favorece el
crecimiento de todas las especies normalmente encontradas en muestras clnicas.
Agar chocolate
Es un tipo de agar sangre, donde las clulas sanguneas han sido lisadas por
calentamiento a 56 C. El agar chocolate se usa para cultivo de bacterias respiratorias
fastidiosas como por ejemplo Haemophilus influenzae. No contiene chocolate, solo es
llamado as por la coloracin.
Agar Thayer-Martin
agar chocolate diseado para aislar Neisseria gonorrhoeae.

Chocolate + PolyViteX (PVX), agar

Aislamiento de bacterias exigentes


El agar Chocolate + PolyViteX es un medio de aislamiento particularmente recomendado
para el crecimiento de cepas exigentes pertenecientes a los gneros Neisseria,
Haemophilus y Streptococcus pneumoniaeencontrados en muestras clnicas.
Este medio est compuesto por una base nutritiva enriquecida con los factores X (hemina)
y V (NAD) proporcionados por la hemoglobina y el PolyViteX.
Este medio puede usarse para hacer subcultivos y obtener cultivos puros.
Chocolate + PolyViteX VCAT3, Agar
Aislamiento selectivo de Neisseria gonorrhoeae & Neisseria meningitidis
El agar Chocolate + PolyViteX VCAT3 es un medio selectivo para aislamiento
de Neisseria gonorrhoeae & Neisseria meningitidis a partir de muestras polimicrobianas
(urogenitales, orofarngeas, LCR, hemocultivos...)
El medio est compuesto por una base nutritiva enriquecida con los factores X (hemina) y
V (NAD) proporcionados por la hemoglobina y el PolyViteX. El aumento de la selectividad
del medio se obtiene gracias a la combinacin de agentes antimicrobianos y antifngicos.

Chocolate Haemophilus 2, Agar


Aislamiento selectivo de Haemophilus
El agar Chocolate Haemophilus 2 es medio para aislamiento de diferentes especies
de Haemophilus a partir de muestras polimicrobianas de origen humano..
Esta nueva frmula est compuesta por una base nutritiva enriquecida con los factores X
(hemina) y V (NAD) proporcionados por la hemoglobina y el PolyViteX.
El aislamiento de las especies de Haemophilus recogidas en el tracto respiratorio y genital
es difcil debido a la presencia de numerosa flora asociada.
El aumento de la selectividad del medio se obtiene gracias a la combinacin de agentes
antimicrobianos y antifngicos.

Agar TCBS
TCBS (Tiosulfato-Citrato-Bilis-Sacarosa,)- agar enriquecido, permite el crecimiento de
todos las especies patgenas del gnero Vibrio spp.5

Medios bacteriolgicos de uso general

Agar bilis esculina con azida


Es usado para aislar Enterococcus as como Streptococcus
Agar CLED (Agar cistina-lactosa deficiente en electrolitos)
es un medio de cultivo diferencial para aislar y contar las bacterias presentes en la orina.
Favorece el crecimiento de los patgenos y contaminantes urinarios aunque, debido a la
ausencia de electrolitos, impide la indebida proliferacin de especies de Proteus
Agar entrico de Hektoen
Este es un medio ideal para el aislamiento selectivo de Salmonella y Shigella, a partir de
heces y alimentos.
Agar McConkey
Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gramnegativos de fcil desarrollo,
aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que fermentan lactosa
(L+) de las no fermentadoras (L-) en muestras clnicas, de agua y alimentos. Todas las
especies de la familia Enterobacteriaceae se desarrollan en el mismo. Contiene sales
biliares y cristal violeta, lo que inhibe el crecimiento de bacterias Grampositivas, lo que
convierte en un medio diferencial poco selectivo.
Agar Manitol salado
Medio de cultivo selectivo y diferencial, utilizado para el aislamiento y diferenciacin de
estafilococos. Es recomendado para el aislamiento de estafilococos patognicos a partir de
muestras clnicas, alimentos, productos cosmticos y otros materiales de importancia
sanitaria.
Este medio tambin puede utilizarse para el cultivo de especies halfilas de Vibrio, si no se
dispone de medios apropiados (TCBS Medio, Medio Marino, etc.), aunque algunas
especies pueden no desarrollar.
Agar Mueller-Hinton
Este medio de cultivo ha sido recomendado universalmente para la prueba de sensibilidad
a los antimicrobianos. Adems es til con el agregado de sangre para el cultivo y
aislamiento de microorganismos nutricionalmente exigentes.
Mueller Hinton 2 agar
Susceptibilidad a antibiticos y sulfonamidas
El agar Mueller Hinton 2 es un medio para realizar pruebas de susceptibilidad
antimicrobiana mediante el mtodo de difusin en disco.
La composicin del medio Mueller Hinton 2 permite el crecimiento de las bacterias no

exigentes (enterobacterias, bacilos Gram-negativos no fermentadores, estafilococos y


enterococos) encontrados en patologa humana, mientras que garantiza mnimas
interferencias entre los componentes del medio y el resultado de la prueba de
susceptibilidad antimicrobiana.
la concentracin de iones divalentes en el medio est ajustada para asegurar una
determinacin ms exacta de la sensibilidad de Pseudomonas frente a los aminoglicsidos
y a las tetracilinas.
La baja concentracin de timina - timidina (inhibidores de sulfonamidas) restringe el
crecimiento alrededor de los discos, permitiendo una medida ms exacta de las zonas de
inhibicin.
El uso del medio Mueller Hinton 2 est conforme con estndares NCCLS y CA-SFM.
Mueller Hinton 2 agar + 5% sangre de cordero
Susceptibilidad de neumococos y otros estreptococos a antibiticos y sulfonamidas
El agar Mueller Hinton 2 + 5% sangre de cordero es un medio para realizar pruebas de
susceptibilidad antimicrobiana por el mtodo de difusin en disco en cepas que necesiten
sangre para su crecimiento.
La composicin del agar Mueller Hinton 2, suplementado con sangre de cordero, permite el
crecimiento de bacterias como neumococos y otros estreptococos, garantizando unas
mnimas interferencias entre los componentes del medio y el resultado de la prueba.
La baja concentracin de timina - timidina (inhibidores de sulfonamidas) restringe el
crecimiento alrededor de los discos, permitiendo una medida ms exacta de las zonas de
inhibicin.
El uso del agar Mueller Hinton 2 est conforme con estndares NCCLS y CA-SFM.

Agar nutritivo
Medio de cultivo utilizado para propsitos generales, para el aislamiento de
microorganismos poco exigentes en lo que se refiere a requerimientos nutritivos. Su uso
est descripto en muchos procedimientos para el anlisis de alimentos, aguas y otros
materiales de importancia sanitaria.
Agar nz
El agar nz permite un diagnostico bacteriolgico rpido de Salmonella y Shigella Las
colonias son fcilmente diferenciables de otras enterobacterias.
Agar Feniletil alcohol
Este agar selecciona especies de Staphylococcus mientras inhibe bacilos gamnegativos
como Escherichia coli, Shigella, Proteus, etc.

Agar R2A
Un agar inespecfico que imita el agua. Usado para anlisis del agua.
Agar Tripticasa soya (TSA)
TSA es una medio multiuso, producido por la digestin enzimtica de soya y casena. Es la
base de otros tipos de agar, por ejemplo el agar sangre est hecho de TSA enriquecido
con sangre. TSA permite crecer muchas bacterias semifastidosas incluyendo algunas
especies de Brucella, Corynebacterium, Listeria, Neisseria, y Vibrio.
Agar Xilosa, Lisina, Desoxicolato
es utilizado para el aislamiento y diferenciacin de bacilos entricos Gramnegativos,
especialmente del gnero Shigella y Providencia.
Agar cetrimida
Medio utilizado para el aislamiento selectivo de Pseudomonas aeruginosa y de otras
especies del gnero Pseudomonas.
Agar Tinsdale
Contiene telurito de potasio y puede aislar Corynebacterium diphteriae.5

Medios para hongos


Agar glucosado de Sabouraud
el Agar glucosado de Sabouraud es usado para cultivar hongos y tiene un pH bajo que
inhibe el crecimiento de la mayora de bacterias, adems tiene un antibitico (gentamicina)
que inhibe especficamente el crecimiento de bacterias gramnegativas .
Agar Infusin Cerebro Corazn
Es un medio muy rico en nutrientes, que proporciona un adecuado desarrollo microbiano.
La infusin de cerebro de ternera, la infusin de corazn vacuno y la peptona, son la
fuente de carbono, nitrgeno, y vitaminas. La glucosa es el hidrato de carbono
fermentable, el cloruro de sodio mantiene el balance osmtico y el fosfato disdico otorga
capacidad buffer.
Agar papa dextrosa
es un medio utilizado para el cultivo de hongos y levaduras a partir de muestras de
alimentos, derivados de leche y productos cosmticos.
Agar extracto de malta
Tiene un alto contenido de peptona.

MEDIOS SIMPLES

BCP, Agar
Aislamiento de microorganismos comunes
El agar BCP (agar lactosa con prpura de bromocresol) es un medio de
aislamiento y diferenciacin para el desarrollo de todos los microorganismos
encontrados habitualmente en muestras de diverso origen.
Permite diferenciar los microorganismos fermentadores de lactosa de los
microorganismos no fermentadores.
Los organismos lactosa (+) producen colonias amarillas por acidificacin del
medio.
Los microorganismos no fermentadores producen colonias azules o
incoloras.

Eosina-azul de metileno, Agar


Aislamiento de Enterobacterias
El agar Eosina-azul de metileno es un medio selectivo de aislamiento y
diferenciacin para la deteccin de Enterobacterias..
Permite diferenciar los microorganismos lactosa (-) y/o fermentadores de la
sucrosa de los microorganismos no fermentadores.
El agar eosina-azul de metileno se usa para detectar enterobacterias
en heces, orinas u otras muestras biolgicas.
Los microorganismos lactosa (+) y/o sacarosa (+) producen colonias
prpuras oscuras por acidificacin del medio, que pueden ir acompaadas
de un brillo metlico.
Los organismos no fermentadores producen colonias incoloras o ligeramente
rosceas.
La presencia de dos colorantes inhibe el crecimiento de las bacterias Grampositivas.

Mac Conkey agar


Aislamiento selectivo de Enterobacterias y Escherichia coli
El agar MacConkey con cristal violeta es un medio selectivo y diferencial
para deteccin de Enterobacterias en muestras de origen diverso.
Este medio ha sido especialmente diseado para detectar la fermentacin
de la lactosa mediante un cambio de color al rojo neutro.

colonias lactosa (+): rosa a rojas, a veces rodeadas por un halo de


sales biliares precipitadas.

colonias lactosa (-): incoloras o ligeramente beige.

Las sales biliares y el cristal violeta hacen el medio selectivo para las
bacterias Gram-positivas.
Almacenamiento: la caducidad incluye una conservacin durante 4
semanas a 15-25C

Drigalski, Agar
Aislamiento selectivo de Enterobacterias y otras baxterias Gramngativas
El medio Drigalski es un medio selectivo de aislamiento y diferenciacin
utilizado para identificar Enterobacteriasy otras bacterias Gram-negativas
en heces, orins u otras muestras biolgicas.
Los microorganismos que fermentan la lactosa forman colonias amarillas o
amarillo-verdosas; el resto de microorganismos producen colonias azules,
verdes o azul-verdosas.
La presencia de desoxicolato sdico y cristal violeta inhibe el crecimiento de
bacterias Gram-positivas.

SS agar
Aislamiento selectivo de Salmonella y Shigella
El agar SS es un medi selectivo de aislamiento y diferenciacin
recomendado para la deteccin de las especies Salmonella y Shigella.
Se inocula directamente a partir de heces, de una suspensin de heces o de
caldo de enriquecimiento.
El medio detecta las colonias fermentadores de lactosa y las reductoras de
tiosulfato (produccin de H2S) colonies.
Los microorganismos fermentadores de lactosa producen colonias rosas, el
resto forman colonias incoloras.
Los microorganismos productores de H2S dan lugar a colonias con un centro
negro.

Las colonias de Salmonella son incoloras o de color amarillo plido,


con o sin un centro negro.

Las colonias de Shigella son incoloras o de color rosa plido o naranja


sin centro negro.

La inhibicin de microorganismos Gram-positivos se obtiene por una mezcla


de sales biliares y colorantes.

Hektoen agar
Selective isolation of Salmonella and Shigella
El agar Hektoen es un medio selectivo de aislamiento y diferenciacin
recomendado para la deteccin de las especies Salmonella y Shigella.
Se inocula directamente a partir de heces, de una suspensin de heces o de
caldo de enriquecimiento.
Los microorganismos que fermentan uno de los tres azcares presentes en
el medio forman colonias amarillas o rosa-amarillentas; el resto producen
colonias verdes o azul-verdosas.
Los microorganismos productores de H2S producen colonias con un centro
negro.

Las colonias de Salmonella son verdes o azul-verdosas, con o sin


centro negro.

Las colonias de Shigella son verdes o verde azuladas sin centro negro.

La inhibicin de microorganismos Gram-positivos se obtiene por una mezcla


de sales biliares y colorantes.

CLED agar
Aislamiento de microorganismos del tracto urinario
El medio de CLED (Cistina Lactosa Electrolito Deficiente) es especialmente
til para aislamiento de micrrorganismos del tracto urinario.
Permite la diferenciacin entre bacterias fermentadoras de lactosa y las no
fermentadoras (indicador azul de bromotimol).

Las bacterias lactosa (+) producen colonias de amarillo plido a


aamarillo por acidificacin del medio.

Las bacterias no fermentadoras de lactosa producen colonias verdes,


azules o incoloras.

La composicin del medio (contenido dbil de electrolitos) previene la


formacin del velo de Proteus.
La nueva formulacin del CLED proporciona ventajas reales respecto al
mayor tamao de la colonia, la mejora en la lectura del carcter Lactosa y la
mejor diferenciacin de la colonia.

Mannitol Salt 2, Agar


Aislamiento selectivo de estafilococos
El agar Manitol Sal 2 tiene como objetivo el aislamiento selectivo de

estafilococos en muestras humanas y la orientacin en la identificacin


del S. aureus.
La nueva frmula ha aumentado la capacidad nutritiva, la sensibilidad de
deteccin y la especificidad.
Los microorganismos que fermentan el manitol producen colonias amarillas.
Esta caracterstica es un criterio para orientar la identificacin
deStaphylococcus aureus.
El elevado contenido de cloruro sdico limita el crecimiento de algunas
bacterias disitinatas a estafilococos.

MEDIOS ESPECIFICOS
Sabouraud Gentamicina Cloranfenicol, 2 Agar
Aislamiento selectivo de levaduras y hongos
El agar Sabouraud Gentamicina Cloranfenicol 2 es un medio selectivo
recomendado para aislamiento de levaduras y hongos a partir de muestras
polimicrobianas.
En la nueva formulacin se ha aumentado la capacidad nutritiva, la
intensidad de color, la sensibilidad de deteccin y la especificidad del color
para los hongos.
El aumento del nivel de peptonas y dextrosa favorece el crecimiento de
cepas de hongos.
La presencia de gentamicina inhibe el crecimiento de la mayora de las
bacterias Gram-negativas y Gram-positivas.
La presencia del cloranfenicol mejora la selectividad frente a algunas
especies que pueden ser resistentes a la
gentamicina (estreptococos,Proteus, etc.).
El pH del agar es ligeramente cido, por lo que favorece el crecimiento
fngico ms que el crecimiento bacteriano.

Campylosel, Agar
Aislamiento selectivo de Campylobacter
El medio Campylosel es un medio slectivo para aislamiento
de Campylobacter intestinal (C. jejuni y C. coli principalmente) presente en
heces.
La presencia de sangre de cordero favorece el crecimiento de las especies
buscadas.
El uso de agentes reductores mejora la capacidad nutritiva.
La buena selectividad est asegurada por la presencia de antibiticos y
antifngicos en el medio que inhiben la mayora de los contaminantes
bacterianos y fngicos.
Las colonias caractersticas de Campylobacter son pequeas y grisceas, y

a veces crecen a lo largo de las estras de inoculacin.

A7 Mycoplasma, Agar
Cultivo selectivo y recuento de micoplasmas urogenitales
El agar A7 Mycoplasma es unmedio selectivo para cultivo de micoplasmas,
especies de , U. urealyticum y M. hominis a partir de muestras
urogenitales. La especie Ureaplasma urealyticum se ha separado en dos
especies nuesvas denominadas Ureaplasma parvum yUreaplasma
urealyticum. Para utilizar este medio debern considerarse ambas como
especies de Ureaplasma.
Este medio combina una base nutritiva rica con peptonas, suero de caballo
y factores de crecimiento que favorecen el crecimiento de
micoplasmas (cistena, poliViteX, arginina, urea).
El aspecto de las colonias de micoplasmas se indica a continuacin:

Ureaplasma urealyticum Especies de Ureaplasma


Colonias en forma de erizo de mar: colonias redondas rodeadas por
un precipitado de color marrn -negro (por la oxidacin del sulfato de
manganeso)

Mycoplasma hominis
Colonias en forma de huevo frito: Colonias redondas con un centro
pronunciado rodeado de un halo ms claro. Una mezcla de
antibiticos inhibe el crecimiento de la mayora de las bacterias Gram
positivas y Gram negativas contenidas en la muestra.

SMAC CT, Agar


Aislamiento selectivo de Escherichia coli O157:H7
El agar SMAC CT (Mac Conkey con Sorbitol) permite la deteccin y la
diferenciacin de Escherichia coli enterohemorrgico del serotipo O157:H7,
responsable de infecciones o enfermedades gastrointestinales.
Segn los datos epidemiolgicos, estos tipos de patologas pueden tambin
ser inducidas por el serotipo O157:H (bacteria inmvil a diferencia del
serotipo O157:H7).
La presencia de sorbitol y telurito permite la diferenciacin de E.
coliO157:H7 que se caracteriza por formar colonias incoloras con un centro
marrn. Cepas de E. coli 0157:H7 pueden tambin producir colonias
incoloras con un centro marrn.
El resto de E. coli fermentadores de sorbitol producen colonias de rosas a
rojas.
La selectividad frente a bacterias Gram-positivas y
a algunas Enterobacterias se asegura por la presencia de cefixima, sales
biliares, cristal violeta y telurito.

BCSA, Agar
Aislamiento selectivo de Burkholderia cepacia
El agar BCSA (Agar selectivo Burkholderia cepacia) es un medio
recomendado para aislamiento selectivo y deteccin de la especie
Burkholderia cepacia a partir de muestras clnicas, principalmente de origen
respiratorio (esputo y lavados broncoalveolares) en pacientes que sufren
fibrosis qustica..
La presencia de una base peptonada y azcares permite el crecimiento
ptimo de los microorganismos.
El cristal violeta y los organismos presentes en el medio inhiben la mayora
de las especies microbianas (inhibicin de especies dePseudomonas).
Un elevado volumen de agar por placa permite unas buenas prestaciones
para el cultivo en 72 horas.

Cetrimida, Agar
Aislamiento selectivo de Pseudomonas aeruginosa
El agar Cetrimida es un medio de aislamiento para la deteccin
dePseudomonas aeruginosa a partir de muestras de origen diverso.
El agar Cetrimida estimula la produccin de piocianina y la fluorescencia
de P. aeruginosa.
su formulacin se basa en una optimizacin del medio King A: La adicin de
un amonio cuaternario inhibe el crecimiento de la mayora del resto de los
microorganismos.
Las colonias caracteristicas presentan una pigmentacin verde plido
espontnea y fluorescencia verde bajo luz ultravioleta.

D-Coccosel, Agar (DCO)


Aislamiento selectivo de enterococos y estreptococos del grupo D
El agar D-Coccosel (Agar Bilis Esculina) se utiliza para aislamiento selectivo
y diferenciacin de enterococos y estreptococos del grupo D a partir de
muestras policricrobianas.
Las colonias caractersticas de enterococos y estreptococos del grupo D son
incoloras o grises y se encuentran rodeadas por un halo negro (hidrlisis de
la esculina)
La selectividad del medio frente a las bacterias Gram-negativas est
proporcionada por la azida sdica. la bilis inhibe otras bacterias Gram-

positivas distintas a los enterococos.


Legionella GVPC, Agar
Aislamiento selectivo de Legionella
El agar Legionella GVPC ha sido especialmente desarrollado
para aislamiento a partir de muestras respiratorias de la mayora de
especies de Legionella, sobre todo de aqullas responsables de
infecciones: Legionella pneumophila, especie ms frecuentemente
involucrada (fiebre de Pontiac) y tambin L. bozemanii, L. longbeachae, L.
dumoffii, L. jordanis, L. gormanii, L. anisa and L. micdadei.
Este medio selectivo tambin permite el recuento de Legionella en agua
segn la normativa T90-431 and ISO 11731.
El carbn activado absorbe cualquier sustancia txica en el extracto de
levadura y estimula el crecimiento de Legionella.
El tampn ACES estabiliza el pH del medio a 6.9, para un ptimo
crecimiento.
Las colonias caractersticas de Legionella son azul-grisceas, pero pueden
llegar a carecer de color o ser blancas en cultivos envejecidos.
Tienen un borde regular rosceo y, cuando se observa bajo microscopa,
tienen aspecto cristalino.
El medio GVPC proporciona una excelente inhibicin del crecimiento de las
bacterias Gram-positivas, de la mayora de las bacterias Gram-negativas,
levaduras y hongos, mediante la combinacin optimizada de tres
antibiticos.

Gardnerella, Agar
Aislamiento selectivo de Gardnerella vaginalis
El agar Gardnerella es un medio de aislamietno selectivo para dereccin
de Gardnerella vaginalis en muestras genitales.
Gardnerella vaginalis, sola o asociada a algunas bacterias aerobias
(Mobiluncus, Bacteroides and Prevotella), es responsable de diversas
infecciones urogenitales.
La presencia de sangre humana favorece el crecimiento de las especies
estudiadas, ya que producen -hemolysis alrededor de las colonias. La hemolysis en agar con sangre humana es altamente indicativa de presencia
de G. vaginalis.
Los antibiticos incluidos en el medio inhiben la mayora de los
contaminantes Gram-negativos y de las levaduras.

Yersinia CIN, Agar

Aislamiento selectivo de Yersinia


El agar Yersinia CIN es un medio de aislamiento selectivo para deteccin e
identificacin de diferentes especies de Yersinia a partir de procultivos.
La formulacin del medio es la descrita por Schiemann (medio
CIN: Cefsulodina, Irgasan, Novobiocina).
El manitol y el rojo neutro presentes en el medio permiten
diferenciar Yersinia por el color de las colonias (colonias de rosas oscuras a
rojas).
La presencia de colato, desoxicolato, cristal violeta, Irgasan y antibiticos
inhibe el crecimiento de las bacterias Gram-positivas y de la mayora de
bacterias Gram-negativas.

Clostridium difficile, Agar


Aislamiento selectivo de Clostridium difficile
El agar Clostridium difficile es un medio de aislamiento selectivo,
especialmente desarrollado para crecimiento de Clostridium difficile en
muestras de heces.
Clostridium difficile es el agente causal de colitis pseudomembranosa y,
ms generalmente, de diarreas asociadas a antibiticos.
he presence of sheep blood facilitates the growth of the species being
tested for.
The characteristic colonies are grey and sometimes spread along the
inoculation streaks.
The antimicrobial and antifungal agents in the medium inhibit most bacterial
and fungal contaminants.

Pylori, Agar
Aislamiento selectivo de Helicobacter pylori
El agar Pylori es un medio de aislamiento selectivo para deteccin
deHelicobacter pylori en biopsias gstricas.
Helicobacter pylori es uno de los agentes causales de la gastritis y est
asociado al desarrollo de lceras gstricas y duodenales.
Helicobacter pylori es una bacteria microaerfila cuya viabilidad se ve
reducida en contacto con el aire.
Estas caractersticas deben tenerse en cuenta para el transporte y el cultivo.
La presencia de plasma de caballo y PolyViteX favorece el crecimiento de las
especies buscadas.
La presencia de antibiticos en el medio inhibe el crecimiento de la mayora
de los contamiantes bacterianos.

Schaedler + 5% sangre de cordero, Agar


Aislamiento de bacteris anaerobias
El agar Schaedler + 5 % sangre de cordero es un medio de
aislamiento particularmente adecuado para deteccin de bacterias
anaerobias estrictas y facultativas.
La presencia de factores de crecimiento como el extracto de levadura, la
hemina y la vitamina K3 y la adicin de sangre de cordero hace posible el
crecimiento incluso de las especies ms exigentes.
El agente reductor (L-cistina) y la elevada concentracin de dextrosa en el
medio favorecen el crecimiento de especies anaerobias.

Kligler Hierro Agar.


Medio de cultivo frecuentemente usado en microbiologa de alimentos para la diferenciacin de enterobacterias, en base
a la fermentacin de glucosa y lactosa, y a la produccin de cido sulfhdrico.

Fundamento

En el medio de cultivo, la peptona de carne y la triptena, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo
bacteriano. La lactosa y la glucosa son los hidratos de carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato
necesario para la produccin de cido sulfhdrico, el citrato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe 3+, los cuales se
combinan con el cido sulfhdrico y producen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol es el indicador de pH, y
el cloruro de sodio mantiene el balance osmtico. El agar es el agente solidificante.
Por fermentacin de azcares, se producen cidos, que se detectan por medio del indicador rojo de fenol, el cual vira al
color amarillo en medio cido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrgeno el que reacciona luego con una sal
de hierro proporcionando el tpico sulfuro de hierro de color negro.

Resultados
1-Pico alcalino/fondo cido (pico rojo/fondo amarillo): el microorganismo solamente fermenta la glucosa.
2-Pico cido/fondo cido (pico amarillo/fondo amarillo): el microorganismo fermenta glucosa, y lactosa.
3-Pico alcalino/fondo alcalino (pico rojo/fondo rojo): el microorganismo es no fermentador de azcares.
4-La presencia de burbujas, o ruptura del medio de cultivo, indica que el microorganismo produce gas.
5-El ennegrecimiento del medio indica que el microorganismo produce cido sulfhdrico.

Agar TSI
El Agar-hierro-triple azcar es un medio de cultivo. Gracias a su composicin es uno de
los medios de cultivo ms empleados para la diferenciacin de enterobacterias segn:
1. Fermenten o no glucosa.
2. Fermenten o no lactosa o sacarosa.
3. Produzcan o no cido sulfhdrico.
4. Produzcan o no gas.
Correspondientemente las reacciones sobre agar TSI son:

1. Si la bacteria problema fermenta la glucosa, acidificar el medio haciendo virar a


amarillo el indicador en el fondo del tubo, mientras que si no es fermentadora de
glucosa, el medio permanecer de color rojo.
2. Si la bacteria problema fermenta lactosa o sacarosa, acidifica el medio en su
superficie volvindolo de color amarillo, mientras que si no lo es, la superficie del
medio continuar de color rojo.
3. Si produce cido sulfhdrico (debido a la reduccin de las sales de hierro), se
presentar un ennegrecimiento del tubo. La produccin de sulfhdrico y el
consiguiente ennegrecimiento pueden impedir ver la fermentacin de la glucosa
(fondo amarillo), pero este hecho implica directamente que la bacteria es
fermentadora de glucosa.
4. Si aparece rotura o desplazamiento del medio, significa que la bacteria es
productora de gas.

Agar Levine
Colonias de E.coli sobre agar Levine.

El Agar Levine o Agar EMB Levine es un medio de cultivo usado para el aislamiento y
diferenciacin de E.coli, tiene un aspecto purpreo, aunque naranja tras su esterilizacin,
es semislido, y est destinado al cultivo en placa.
Es un medio selectivo y diferencial, adecuado para el crecimiento de enterobacterias, que
inhibe el crecimiento de bacterias Gram positivas y permite la diferenciacin de bacterias
fermentadoras y no fermentadoras de lactosa, dando lugar a colonias incoloras, las no
fermentadoras, y colonias de color azulado-negro con cierto brillo metlico, las
fermentadoras.
Las colonias de E.coli sobre agar Levine miden 2-3mm de dimetro, con centros oscuros,
casi negros, y pueden presentar o no cierto brillo verde metlico.

M e d i o d e c u l t i vo T B X
Medio de cultivo TBX es un medio cromognico para la deteccin y
recuento de E.coli -glucuronidasa positiva en muestras de alimentos
de acuerdo con la norma.
La presencia de E.coli indica contaminacin fecal y la posible
presencia de patgenos peligrosos tales como bacterias del tipo Vibrio
cholerae, Salmonella, Pseudomonas etc,. o virus y parsitos
intestinales. Las infecciones derivadas de la ingestin de material
contaminado pueden ser peligrosas y potencialmente mortales.
El agar TBX es un medio cromognico altamente selectivo ya que las
sales biliares contenidas en su formulacin inhiben las bacterias gram
+. La actividad B-D-glucoronidasa especfi ca de E.coli queda
detectada por el agente cromognico X-glucoronido de la frmula.

Ureasa Medio para la prueba


Medio utilizado para la identificacin de microorganismos, en base a la actividad uresica.
Es particularmente til para diferenciar Proteus spp. de otros miembros de la familia Enterobacteriaceae.

Fundamento
Este medio de cultivo, formulado por Rustigian y Stuart, presenta bajo contenido de nutrientes y alta capacidad buffer.
El extracto de levadura es la nica fuente de carbono, nitrgeno, vitaminas y cofactores, y aporta los nutrientes
esenciales para el desarrollo bacteriano. Las sales de fosfatos constituyen el sistema buffer, el rojo de fenol es el
indicador de pH y la urea es el sustrato de la enzima ureasa.
Aquellas bacterias que poseen la enzima ureasa, pueden utilizar el nitrogeno proveniente de la urea, la hidrolizan,
liberando amonaco y dixido de carbono. Estos productos metablicos alcalinizan el medio, haciendo virar el indicador
rojo fenol del amarillo al rojo.
Su uso, se recomienda para diferenciar Proteus spp. de otros gneros.
Para organismos que hidrolizan la urea lentamente, es recomendable usar el medio de Christensen (B02-109-05, B02109-06).

Christensen Medio (Urea Agar Base).


Medio utilizado para diferenciar microorganismos en base a la actividad uresica.
Se utiliza para identificar bacterias que hidrolizan urea, tales como Proteus spp., otras enterobacterias y estafilococos.

Fundamento
En el medio de cultivo, la triptena y la glucosa, aportan los nutrientes para el desarrollo de microorganismos. El cloruro
de sodio mantiene el balance osmtico, y el rojo de fenol es el indicador de pH.
Algunas bacterias hidrolizan la urea por medio de la enzima ureasa liberando amonaco y dixido de carbono. Estos
productos alcalinizan el medio haciendo virar el rojo de fenol del amarillo al rojo. En este medio, la fermentacin de la
glucosa activa la enzima ureasa, acelerando la velocidad del metabolismo en aquellos organismos que hidrolizan
lentamente la urea, como especies de Enterobacter o Klebsiella.

O.F. Medio Basal de Hugh & Leifson.


Medio de cultivo, que al ser suplementado con hidratos de carbono, se usa para determinar el metabolismo oxidativofermentativo de las bacterias Gram negativas. Esta prueba es til para diferenciar especies bacterianas. Tambin,
permite determinar movilidad y produccin de gas.

Fundamento

El medio basal O.F., fue desarrollado por Hugh y Leifson, para evidenciar la importancia del significado taxonmico del
metabolismo oxidativo-fermentativo de los hidratos de carbono por las bacterias Gram negativas.
Cuando un microorganismo es inoculado en 2 tubos del medio O.F. conteniendo el mismo hidrato de carbono, y uno de
los 2 tubos es sellado con vaselina o parafina antes de la incubacin, se puede diferenciar bien el metabolismo oxidativo
o fermentativo, as como la no utilizacin de un hidrato de carbono por la bacteria en estudio.
En el medio de cultivo, el agregado de una alta concentracin de un determinado hidrato de carbono, hace que
los microorganismos utilicen para su desarrollo dicha sustancia, evitando que bacterias aerbicas utilicen la triptena
presente con la consecuente produccin de reaccin alcalina, la que se neutraliza por la ligera acidez producida por un
microoganismo oxidativo.
El fosfato dipotsico agrega capacidad reguladora, el cloruro de sodio mantiene el balance osmtico, y el azul de
bromotimol es el indicador de pH que vira al color amarillo en medio cido. El contenido de agar, da la propiedad de ser
un medio semislido, y permite determinar la movilidad y la distribucin de los productos cidos en el medio de cultivo.
La glucosa es el hidrato de carbono mas frecuente que se agrega al medio basal O.F., pero tambin pueden agregarse
otros azcares, como ser, lactosa, sacarosa, maltosa, manitol o xilosa, entre otros.
Por oxidacin o fermentacin de un determinado hidrato de carbono, se acidifica el medio y el indicador de pH vira del
color verde al amarillo.

Resultados
El uso del hidrato de carbono, ya sea por fermentacin u oxidacin, produce acidez en el medio, con el consecuente
viraje del color verde al amarillo.
a-Microorganismos oxidativos del hidrato de carbono en estudio: producen una reaccin cida solo en el tubo
abierto.Presentan poco o nulo desarrollo y ausencia de produccin de cido en el tubo cerrado.
b-Microorganismos fermentadores del hidrato de carbono en estudio: producen una reaccin cida en ambos tipos de
tubos.
c-Microorganismos que no utilizan el hidrato de carbono en estudio: no producen cambios ninguno de los 2 tubos, los
cuales permanecen verdes.
Se debe informar: produccin de cido (A), cido con gas (AG), alcalino (K) o sin cambio (-).
Tambin, puede informarse si el organismo es mvil, cuando crece lejos de la lnea de inoculacin.
Las reacciones tpicas son las siguientes:

Reaccin

Tubos con

Tubo Abierto

Tubo cerrado

reaccin

Oxidacin

Fermentacin

Sin oxidacin o
fermentacin

Abierto

Amarillo (A)

Cerrado Cerrado Amarillo Amarillo


(AG)

Ninguna

Azul o Verde (-)

Verde (-)

Amarillo (A)
Amarillo (AG)

Verde (-)