ALCANCE

Con este protocolo se quiere Determinar el contenido de alcoholes superiores

mediante la espectrofotometra.
OBJETIVO
Establecer el mtodo para determinar el contenido de alcoholes superiores en
bebidas alcohlicas.
MATERIALES Y EQUIPOS
Espectrofotmetro
Pipeta graduada, de 10 cm3
Tubos de ensayo, de 20 cm3
Matraz volumtrico de 100 cm3, de 250 cm3 y de 1000 cm3
Aparato para destilacin (ver Fig. 1), compuesto por:
matraz de destilacin, de 1 000 cm3 de capacidad y con fondo redondo b)
malla de asbesto
fuente elctrica de calentamiento,
tubo de vidrio delgado, de 6 mm de dimetro interno aproximadamente y
300 mm x 300 mm x 150 mm de dimensiones,
refrigerante de Liebig, de longitud igual o mayor a 400 mm,
tubo de vidrio adecuado para dirigir el destilado al recipiente colector.
matraz volumtrico, de 250 cm3
bao de agua, con hielo, en el que debe sumergirse el matraz volumtrico.
Bao Mara, con regulador de temperatura
Termmetro, graduado en dcimas de grados Celsius (C)
REACTIVOS
Solucin

de

p-dimetilaminobenzaldehido.

Disolver

g de p3
dimetilaminobenzaldehido en una mezcla constituida por 5 cm de cido
3
sulfrico 90 cm de agua destilada; llevar a 100 cm con agua destilada.
cido sulfrico, al 98%, reactivo para anlisis.
Alcohol etlico absoluto, reactivo para anlisis.
Alcohol isobutlico, reactivo para anlisis.
Alcohol isoamlico, de punto de ebullicin comprendido entre 130C y 1 32
C e ndice de refraccin de 1,4077 0,003.
Solucin patrn de alcoholes superiores. Colocar 2 g de alcohol
isobutlico y 8 g de alcohol isoamlico en un matraz volumtrico de 1 000
cm3 y llevar a volumen con agua destilada. Transferir dos porciones de

10 cm3 cada una a matraces volumtricos de 100 cm3 y llevar a volumen,

en el un caso con agua destilada (A) y en el otro con alcohol etlico (B).
Si la graduacin alcohlica de la muestra que debe analizarse es menor o
igual a 85 GL, debe utilizar- se la solucin A, si es mayor, la solucin B.
CURVA DE CALIBRACION
Tomar, utilizando una pipeta, 1, 2, 3, 3,5 y 6 cm3 de la solucin patrn de
alcoholes superiores (ver 4.6 y 4.6.1) y colocar en matraces volumtricos
de 100 cm3; llevar a volumen con solucin hidroalcohlica,
cuyo grado alcohlico sea similar al de la muestra analizada. (La
concentracin de las soluciones debe ser de 10 a 60 mg / 1 000 cm3.
Transferir 2 cm3 de las soluciones contenidas en cada matraz a tubos
de ensayo de 20 cm3; en otro tubo de ensayo, colocar 2 cm3 de agua
destilada, para realizar el ensayo en blanco.
Tapar los tubos de ensayo y colocarlos en un bao de agua con hielo.
Agregar en cada tubo
1 cm3 de
la
solucin de pdimetilaminobenzaldehido;

agitarlos inmediatamente y dejarlos en

reposo dentro del bao de agua con hielo durante 3 min.

Agregar en cada tubo 10 cm3 de cido sulfrico concentrado,
previamente enfriado, agitarlos leve- mente y colocarlos en el bao de
agua y hielo durante 3 min.
Transferir los tubos a un bao Mara hirviente durante 20 min y
regresarlos luego al bao de agua con hielo por 5 min; retirar los tubos
del bao y dejarlos en reposo a la temperatura ambiente durante 10 min.
Calibrar el espectrofotmetro utilizando el blanco.
Determinar la absorbancia de las soluciones a la longitud de onda de
mxima absorcin y construir la curva de absorbancia respecto a
concentracin.
PREPARACION DE LA MUESTRA
Lavar cuidadosamente el aparato de destilacin con agua destilada y
proceder a armarlo.
Enjuagar el matraz con una porcin de la muestra de bebida alcohlica y
llenarlo con la muestra hasta sobrepasar la marca de 250 cm3; tapar el
matraz.

 Colocar el matraz en el bao de agua a temperatura constante de 15 0,5

C durante 20 min y retirar el exceso de muestra que sobrepasa la marca,
utilizando una pipeta, hasta obtener el volumen exacto de 250cm3
Transferir el contenido al matraz del aparato de destilacin y lavar con
tres porciones de 10 cm3 de agua destilada, recogiendo el agua de
lavado en el mismo matraz del aparato de destilacin. Aadir ncleos de
ebullicin.
Destilar lentamente la muestra recogiendo el condensado en un matraz
volumtrico de 250 cm3, al que se ha aadido previamente 10 cm3 de
agua destilada, hasta recoger aproximadamente 220 cm3.
Colocar el matraz en un bao de agua a temperatura constante de 15
0,5 durante 20 min y luego aadir cuidadosamente agua destilada, a
15 C, para

completar el volumen de 250 cm3; homogeneizar

agitando el recipiente.
Para muestras con ms de 60 mg/1 000 cm3 de alcoholes superiores,
debe diluirse la muestra destilada utilizando agua, hasta obtener
concentraciones comprendidas entre 20 y 50 mg/1 000 cm3
PROCEDIMIENTO
La determinacin debe efectuarse por duplicado sobre la misma muestra
preparada. actividad
Tomar 2 cm3 del destilado y colocar en un tubo de ensayo de 20 cm3;
tapar el tubo y colocarlo en el bao de agua y hielo.
Agregar 1 cm3 de la solucin de p-dimetilaminobenzaldehdo; agitar y
dejar en reposo por 3 min, dentro del bao.
Agregar 10 cm3 de cido sulfrico concentrado, previamente enfriado;
agitar levemente y colocar en el bao de agua y hielo durante 3 min.
Transferir el tubo a un bao Mara durante 20 min y regresar al bao de
agua con hielo durante 5 min; esperar
luego retirarlo del bao y dejarlo en reposo a temperatura ambiente durante
10 min.
Determinar la absorbancia de la solucin a la longitud de onda establecida
en 5.8; luego, usndola curva de calibracin, establecer la concentracin
de alcoholes superiores.

ANEXOS
DIAGRAMA
Inicio

Lavar y secar el
material

Agitar

2
20 min y regresar al
bao de agua con
hielo durante 5 min

3 min dentro del

bao

Tomar 2 cm3 del

destilado en un tubo de
ensayo de 20 cm3

Retirar el tubo
del
bao
mara
Agregar 10 cm3
de
cido
sulfrico
concentrado

Por 10 min reposar

a T ambiente
Tapar el
colocarlo
bao de
hielo

tubo y
en el
agua
y
Determinar

la
absorbancia
de
la
solucin a la longitud de
onda establecida en 5.8

Tapar el tubo y
colocarlo en el
bao de agua y
hielo

Agregar un cm3 de
la solucin de pdimetilaminobenzald

Agitar levemente y
colocar en el bao
de agua y hielo

Dejar en reposo
3 min dentro del
bao

Transferir
el
tubo
a
un
bao Mara

ehido

Con
la
curva
de
calibracin, estableces la
concentracin
de
alcoholes superiores

AS=0,01

CF
G

CALCULOS

Siendo:
AS=contenido de alcoholes superiores, en g/100 cm3 de alcohol anhidro.
El contenido de alcoholes superiores en bebidas alcohlicas se determina
mediante la ecuacin siguiente:
C=contenido de alcoholes superiores, determinada mediante la curva de
calibracin.
F=factor de dilucin.
G=grado alcohlico de la muestra (ver INEN 340).
ERRORES DE METODO
La diferencia entre los resultados de una determinacin efectuada por
duplicado no debe exceder del 4%; en caso contrario, debe repetirse la
determinacin.
INFORME DE RESULTADO
Como resultado final, debe reportarse la media aritmtica de los resultados
de la determinacin.
En el informe de resultados, deben indicarse el mtodo usado y el
resultado obtenido. Debe mencionarse, adems, cualquier condicin no
especificada en esta norma, o considerada como opcional, as como
cualquier circunstancia que pueda haber influido sobre el resultado.
Deben incluirse todos los detalles para la completa identificacin de la
muestra, precisndose el grado alcohlico de la misma.
BIBLIOGRAFIA
Norma Argentina IRAM 14 516.
Bebidas alcohlicas destiladas.
Mtodo de determinacin de esteres, metanol, aldehdos, fulfural y
alcoholes superiores. Instituto Argentino de Racionalizacin de Materiales.
Buenos Aires, 1970.
Norma Chilena NCh 674. E 70. Bebidas alcohlicas. Determinacin de
esteres. Instituto Nacional de
Investigaciones Tecnolgicas y Normalizacin. Santiago, 1970.
A.O.A.C Methods of Analysis. Beverages. Distilled Liquors. Association of
Official Analytical Chemists. Washington, 1970.

 Norma Sanitaria Panamericana OFSANPAN-IALUTZ A 011. Norma

Tcnica de mtodos fsicos y qumicos para anlisis de aguardientes.
Oficina Sanitaria Panamericana. Washington, 1968