PRACTICA # 3

PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO

David Muoz 5105401, Cesar Gaviria 1105762, Juan Ferrin 4105242,
1
Facultad de Ingeniera y Administracin, 2 Facultad de Ciencias Agropecuarias
Universidad Nacional de Colombia-Sede Palmira

Resumen
Uno de los mtodos ms importantes para poder identificar microorganismos es con la observacin de su crecimiento en
sustancias alimenticias artificiales preparadas en los laboratorios y para ello se uso el agar como agente solidificante en la
preparacin de medios de cultivo. El objetivo de la prctica fue la elaboracin de diferentes medios de cultivo as como su
clasificacin y uso en el estudio de los microorganismos. Se tuvo como resultado la adquisin de conocimiento en la
destreza de preparar diferentes medios que facilitan la investigacin microbiolgica.
Palabras claves: Medio de cultivo, agar, cultivo.

INTRODUCCIN
Los microorganismos al ser organismos vivos tambin
requieren de ciertas condiciones para el mantenimiento
de su vida, la alimentacin y los factores fsicos son
componentes claves para el desarrollo de cultivos en el
laboratorio (Rojas, 2011). Para que los microorganismos
crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial
este debe reunir una serie de condiciones fsicas como
son: temperatura, grado de humedad y presin de
oxgeno adecuado, as como un grado correcto de acidez
o alcalinidad, de igual manera los requerimientos
nutricionales bsicos como Carbono, Nitrgeno, agua,
vitaminas y sales inorgnicas que facilitan el
crecimiento. Adems los medios de cultivo pueden
clasificarse de acuerdo a su consistencia, su funcin, y
composicin, con el fin de dar las mejores condiciones
de vida para el microorganismo (Walter et al., 1965).
El objetivo de la prctica fue el preparar diferentes
medios de cultivo, as como conocer su clasificacin y
uso, utilizando como agente solidificante el agar, debido
a que este es el ms comn y el ms utilizado para la
investigacin.
MATERIALES
Cajas de Petri estriles, tubos de ensayo estriles,
probeta de 250 ml, 245 ml de agua destilada, balanza de
precisin, esptula ,recipiente para pesaje,
estufa
elctrica, un magneto, agitador, agar Sabouraud, pipeta
de 10 ml estril, erlenmeyer 250 ml, autoclave.
MTODO
Para el desarrollo de la practica se sigui las
instrucciones presentes en practica; preparacin de
medios de cultivo, medios selectivos y diferenciales
(Rojas, 2011).

En la preparacin de cada tipo de agar, se tuvo presente

las instrucciones de la casa comercial donde indicaba
cuanta cantidad X en gramos deba prepararse en Y
de solvente. Luego de esto, la solucin era sometida a
un calentamiento usando una placa calentadora, y con
agitacin constante del magneto.
RESULTADOS
En la preparacin de los medios de cultivo se obtuvieron
los siguientes resultados de acuerdo a la cantidad en
mililitros a preparar y al tipo de agar a trabajar teniendo
en cuenta las instrucciones de la casa comercial.

Agar Sabouraud para diez cajas Petri.

1 caja
10 cajas
65g
X

15 ml
150+5 ml para preparar.
1000 ml
155 ml

Agar agua al 1.5% en 8 cajas Petri.

1 caja
8 cajas

15ml
120+5 ml a preparar.

X
100ml H2O

Despejando X
X= 10,07g

1.5g
125ml

Despejando X
X= 1,875g

A. Sabouraud en 30 tubos de ensayo.

1 tubo de ensayo
8ml
30 tubos
240ml +5ml a preparar
65g
X

1000 ml
245ml

Despejando X
X= 15,9g

Agar Nutritivo en 30 tubos de ensayo.

1 tubo de ensayo
8ml
30 tubos
240ml+5ml a preparar.
28g
X

1000 ml
245ml

Despejando X
X= 6,86g

DISCUSIN
La preparacin de la disolucin y calentamiento del
medio deben ser exactos porque un mal manejo puede
provocar perjuicios en la estabilidad del agar, tambin
se debe tener cuidado con la manipulacin de la muestra
para que no haya contaminacin.
En la preparacin del A. Sabouraud para 30 tubos de
ensayo se presento un faltante de solucin, debido a que
hubo error en la cantidad de agua utilizad, por lo tanto se
trabajo para 29 tubos de ensayo. El faltante de Agar
solucin fue de 8ml.

CUESTIONARIO.
El cuestionario se encuentra adjunto a este documento

CONCLUSIN
Al termino de la practica y a manera de conclusin un
tem importante de resaltar, seria que siempre es
preferible trabajar con medios de cultivos que desde
su fuente se encuentren en ptimas condiciones, para
que en el momento de la preparacin esta se haga
eficaz.
y en consecuencia no encontremos
disminucin del volumen y/o propiedades fsicoqumicas no deseadas, lo que pueden afectar el
desarrollo de los microorganismos a inocular.
Se debe tener en cuenta que las cantidades a utilizar
en la preparacin de medios de cultivo son
especficas para cada casa comercial.
Es necesario realizar todo los procesos con la mayor
asepsia posible, debido a que pueden afectar el
resultado esperados de la preparacin del cultivo.

REFERENCIAS
Rojas Trivio. Conceptos y Prcticas de Microbiologa
General. Universidad Nacional de Colombia, 2011.
Walter, W., Macbee, R., 1965. Microbiologa general.
Compaa editorial continental, S.A. Mxico.459.

Condiciones
generales
para
el
cultivo
de
microorganismos. Consultado: Sep 8 2012., disponible
en:[http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/Seminario
Medios.htm]
Rojas, A; Preparacin de medios de cultivo, selectivos y
diferenciales. Curso de microbiologa general, (2011)
universidad nacional de Colombia sede Palmira.