MICROSCOPIA, EQUIPOS Y MATERIALES DE LABORATORIO

PRACTICA N1

MARA CAMILA ASSIA ORTIZ

YUCELYS CONTRERAS SINCELEJO
JAVIER ANDRES RUIZ CONTRERAS
KEVIN JESUS ALMANZA HERNANDEZ

CARLOS GARCIA MOGOLLON

INGENIERO DE ALIMENTOS

UNIVERSIDAD DE SUCRE
FACULTAD DE INGENIERIA
PROGRAMA DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL
SINCELEJO-SUCRE
2015

Laboratorio de Microbiologa industrial, Universidad de Sucre.

RESUMEN
Se realiz a manera de introduccin una orientacin sobre el equipamiento del
laboratorio, las medidas a tomar en caso de emergencia y las normas bsicas
relacionadas con la Bioseguridad. Posteriormente, siguiendo las indicaciones que
ofreci el docente encargado del laboratorio de microbiologa, se realiza un
enfoque terico el cual consisti en conocer los componentes principales del
microscopio, haciendo nfasis en su previa y correcta utilizacin, luego se pone en
prctica lo aprendido realizando varios montajes con distintas muestras, agua
estancada y una hebra de cabello, con el fin de enfocarlos en los diferentes tipos
de objetivos que posee el microscopio, pasando de menor objetivo (4x) hasta el
objetivo de mayor resolucin (40x). Todo esto con el fin de obtener una
operatividad eficiente en relacin a nuestro medio.

Palabras Claves: Equipamiento, bioseguridad, eficiencia, microorganismos,

microscopio.

1. OBJETIVOS

Conocer las normas de bioseguridad que operan para el laboratorio de

microbiologa.

Identificar los equipos, materiales y reactivos qumicos de uso comn en el

laboratorio de microbiologa.

Reconocer las partes integrales y el funcionamiento del microscopio ptico.

2. INTRODUCCIN
La preocupacin por eliminar los riesgos y proteger al personal docente,
administrativo y estudiantil, ha llevado a que las condiciones de trabajo recaigan
sobre todos y cada uno de los usuarios de los laboratorios. La bioseguridad es una
doctrina de comportamiento encaminada a lograr actitudes y conductas que
disminuyen el riesgo del trabajador en cuanto a su salud, de adquirir accidentes o
infecciones en el medio laboral. El conocimiento y la aplicacin adecuada de estas
normas como la utilizacin de bata, guantes, tapabocas, entre otros y el
Laboratorio de Microbiologa industrial, Universidad de Sucre.

conocimiento de las propiedades de los reactivos qumicos; as como la

importancia de estas normas antes, durante y despus de cada prctica es un
deber de cada estudiante en el laboratorio donde se est desenvolviendo.[1]
De igual forma es fundamental reconocer los equipos, materiales y reactivos
qumicos usados en el laboratorio, las funciones, su correcta utilizacin y tener
previo conocimiento de las Fichas de Seguridad Qumica de cada uno.
Entre los equipos de mayor uso encontramos el microscopio. Este es un
instrumento ptico que amplifica la imagen de un objeto pequeo, mediante un
sistema de lentes y fuentes de iluminacin, haciendo visible un objeto
microscpico. As por ejemplo, las clulas bacterianas no se pueden observar a
simple vista, tan solo la consecuencia de su crecimiento y divisin, es decir, un
cultivo de bacterias, pero al llevar una muestra de este cultivo al microscopio es
posible visualizar las bacterias que conforman el cultivo.

3. PROCEDIMIENTO
Diagrama de flujo.

Equipos y su
funcionamiento

MICROSCOPIA,
EQUIPOS Y
MATERIALES DE
LABORATORIO

normas de
bioseguridad

microscopia

microscopio
autoclave
horno
bao maria
mechero
shake
maquina centrifuga
caja de petri
incubadora
asas bacteorologicas...

muestra de agua
estancada y una hebra
de cabello observada
con objetivos de 4x
hasta 40x

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5. ANALISIS DE RESULTADOS
Normas de bioseguridad
La bioseguridad representa una parte muy importante especialmente en los
laboratorios de microbiologa, el adecuado uso de las normas y el conocimiento de
los equipos de laboratorio permiten un ambiente apropiado y apto para la correcta
manipulacin y realizacin de las prcticas de laboratorio. Un buen manejo
personal y profesional conlleva a un ambiente libre de riesgos especialmente
biolgicos puesto que los microorganismos utilizados pueden ser de origen
patgeno y un inadecuado proceso pondra en riesgo al personal presente en el
rea. Se Podra citar como ejemplo de las Normas a seguir en el laboratorio el
siguiente manual [2]
Equipos y funcionamiento

Microscopio:
amplifica las imgenes
microscpicas de
bacterias, hongos y clulas
en general

Incubadora:
Proporciona temperaturas
constantes de incubacin

Autoclave:
realiza la esterilizacin
del material biolgico
del laboratorio

Horno:
se esteriliza todos
aquellos materiales
inertes

Maquina centrifuga.
acelera la decantacin
o la sedimentacin de

Mechero.
Calentar o esterilizar

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para el desarrollo de los

microorganismos

Bao Mara:
Utilizado para la disolucin
de los medios de cultivo,
reactivos. Tambien cuando
se requiere ebullicin
indirecta

Balanza analtica:
se pesan las cantidades
requeridas de reactivos,
medios de cultivo,
muestras y otros, de
manera precisa y
confiable.

sus componentes o
fases segn su
densidad

Shake:
Agitador de laboratorio
agiliza el movimiento de
los microorganismos

Caja de Petri:
se lleva a cabo la
siembra o cultivo de
microorganismos

muestras o reactivos
qumicos. provee una
transmisin muy rpida de
calor intenso

Cabina de seguridad:
filtracin y purificacin del
ambiente circundante al
rea de siembra,
protegiendo a los que ah
laboran

Asas bacteriolgicas:
Facilitan la toma de
inculos de muestras
biolgicas, para la
realizacin de tinciones y
siembras superficiales.

Microscopia
El microscopio est constituido por una serie de partes indispensables que unidas
nos permitieron su adecuada utilizacin. Al realizar los montajes se pudo notar
que en el menor objetivo (4x), llamado objetivo de rastreo se observa la imagen
de la muestra completa, se usa para enfocar y encontrar la imagen. El objetivo de
10x o tambin llamado objetivo de baja potencia, la imagen se observa de mayor
tamao y se utiliza tambin para enfocar y visualizar correctamente la imagen,
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adems es posible observar a mayor profundidad los microorganismos que en el

objetivo anterior. En el objetivo de 40x u objetivo de alta potencia se observa de
forma ms amplia y de forma ms detallada los microorganismos que conforman
las muestras; esto se debe a que a manera que aumentamos de objetivo ah un
mayor aumento un menor campo visual y un mayor poder de resolucin.
Para probar el poder de resolucin del microscopio se muestran las siguientes
figuras correspondientes a los montajes de las muestras de agua estancada (fig.1,
fig.2, fig.3) y de una hebra de cabello (fig.4)

Figura 1: muestra de agua

Estancada visualizada con
objetivo 4x

Figura 3. Muestra de agua

Estancada a una resolucin
de 40x

Figura 2: muestra de agua estancada

observada con objetivo 10x

Figura 4: montaje con una hebra de

cabello visualizada en el objetivo 10x

6. CONCLUSINES
Se conocieron las normas de bioseguridad que se deben tener en cuenta para el
trabajo en el laboratorio de microbiologa.
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 Se identificaron los equipos, materiales y reactivos que se utilizan de manera

frecuente en el laboratorio de microbiologa.
Se manipularon equipos del laboratorio y se reconocieron sus respectivas
funciones.
Se estudiaron las partes del microscopio ptico, as como su funcionamiento y su
manipulacin; se observaron las muestras realizadas con un mejor campo de
visin

7. CONSULTAS
a) En qu consiste el poder de resolucin del microscopio?
El poder de resolucin de un microscopio est determinado por dos pequeos
conceptos y uno de ellos es la capacidad que tiene el microscopio de poder ver
dos puntos en forma separada, Cuando la distancia entre los puntos disminuye se
llega a un lmite a partir del cual ya no se ven los puntos en forma separada, sino
unidos y otra forma en lo que consiste el poder de resolucin es por la longitud de
onda de la radiacin empleada para iluminar el espcimen y es inversamente
proporcional a la misma, es decir, a menor longitud de onda, mayor poder de
resolucin. Cabe resaltar que para obtener mejores resultados de imgenes se
aumenta los objetivos del microscopio. [3]
b) Qu sucede cuando se llevan a cabo las actividades, como las siembras,
alejados del mechero o sin l?
Es posible emplear el calor para esterilizar ingredientes de medios de cultivo o
reactivos lquidos o en disolucin que no resistan ser sometidos al autoclave, por
los cuales se realizan siembras cercas del mechero para obtener mejores
resultados cierto cultivo a realizar. En caso de realizar una siembra alejado del
mechero obtendremos una siembra de microorganismos con intervalos de
incubacin indeterminados de colonias donde se nos es difcil contar el nmero de
colonias. [3]
c) Cules son los usos que tiene el microscopio de fluorescencia, el microscopio
de campo oscuro y el electrnico?
Microscopio de fluorescencia
Este microscopio hace uso de la fluorescencia y se convierte en una herramienta
de inestimable valor para la investigacin cientfica, ya que permite alcanzar altos
niveles de sensibilidad y resolucin microscpica, permitiendo una apreciacin
diferente de la informacin que se puede obtener de los especmenes y que
generalmente pasa desapercibida. [4]
Laboratorio de Microbiologa industrial, Universidad de Sucre.

Aplicaciones
Son numerosas las aplicaciones de la microscopa de fluorescencia, notablemente
en biologa y medicina:
Marcaje de molculas en clulas y tejidos para su caracterizacin e
identificacin.
Estudio de clulas normales y patolgicas.
Estudios inmunolgicos.
Mineraloga. [4]
Microscopio de campo oscuro
La iluminacin de campo oscuro se puede realizar tanto mediante luz transmitida
(trans-iluminacin) como con luz incidente (epi-iluminacin). En el primer caso,
para lograr el efecto se requiere bloquear la parte central del rayo de luz que
normalmente pasa a travs y alrededor del espcimen, de tal manera que slo sea
iluminado por rayos oblicuos. Para la iluminacin con luz incidente o iluminacin
oblicua se emplea un filtro en forma de luna en cuarto decreciente (en forma de
C), obtenindose una interesante imagen con relieve. [5]
Aplicaciones
Estudio de especmenes de tamao pequeo no coloreados, tales como
microorganismos acuticos, ovocitos, clulas en cultivo (cuyos ndices de
refraccin oscilan en un rango de 1.2 a 1.4 y no hay una diferencia notable con el
ndice de refraccin de 1.3 de la solucin acuosa en la cual se encuentran).
Observacin de clulas mviles, como el Treponema pallidum, una espiroqueta
causante de la sfilis, la cual con la microscopa ptica ordinaria es muy difcil de
visualizar.
Estudio de procesos fisiolgicos como mitosis y migracin celular. [5]
Microscopio Electrnico.
La microscopa electrnica es el nico mtodo que hace posible la toma de
imgenes directas de esas estructuras a niveles supramoleculares; detalles que
tambin son denominados con el trmino de ultraestructura celular. El lmite o
poder de resolucin terico del microscopio electrnico es de 0,2nm y esto es en
parte posible gracias a un tratamiento especial al que se somete el tejido que va a
ser examinado. [6]
Aplicaciones
En el estudio de los circuitos integrados se suele utilizar el microscopio electrnico
debido a una curiosa propiedad: Como el campo elctrico modifica la trayectoria
de los electrones, en un circuito integrado en funcionamiento, visto bajo el
microscopio electrnico, se puede apreciar el potencial al que est cada elemento
del circuito. [7]

Laboratorio de Microbiologa industrial, Universidad de Sucre.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

[1]http://html.rincondelvago.com/material-de-laboratorio-y-microscopio
compuesto.html
[2] Organizacin Mundial de la Salud. Manual de bioseguridad en el laboratorio. 3
Ed. Ginebra. 2005
[3] http://www.uib.cat/depart/dba/microbiologia/micro2/practicas.pdf
[4]http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo6
_5.htm
[5]http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo6
_1.htm
[6]http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo5.
htm
[7] https://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio_electr%C3%B3nico

Laboratorio de Microbiologa industrial, Universidad de Sucre.