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Casa abierta al tiempo

UNIVERSIDAD AUTNOMA METROPOLITANA


Unidad Iztapalapa

Licenciatura en Qumica

Proyecto Terminal:

Captura de betalainas por HDL y


alminas
Presenta:

Loera Serna Sandra

Director: Dr. Enrique Jaime Lima Muoz

Abril 2005
Dedicatoria

Al Dr. Pedro Bosch Giral, por mostrarme el camino de la verdad y la honradez,


por ser una persona ejemplar, que no importando la situacin, realza siempre sus valores y
convicciones. Por conservar congruencia en sus actos, motivando la constancia y la
perseverancia, valores que ahora radican en nosotros.

Gracias por ser mentor y, adems, un amigo.

A mis padres Manuel Loera y Juana Serna, por apoyarme y estar siempre
pendientes de m. A mis hermanos, Ricardo, Manuel y Alejandra, por ser parte integral de
mi vida.
A la persona ms importante, Argel Ibarra, por mantenerse en pie en todos los
momentos difciles, y por ser, entre otras cosas, un excelente compaero de trabajo.

Sandra

Agradecimientos
Quiero agradecer muy particularmente al Dr. Enrique Lima, ya que sin l este trabajo no
hubiese sido posible.

A:
- Dra. Margarita Viniegra

- M. en C. Juan C. Rosas

- M. en Q. Victor H. Lara

- M. en I. Q. Sara Nez

- Dr. Ulises Morales

- M. en C. Alejandro Montesinos

- M. en C. Marco A. Vera

- Dra. Nancy C. Martn

- Dr. Claudio M. Zicovich

- M. en Q. David Gonzlez

- Dra. Silvia Bulbulian

- Maria de Jess Miguel

- M. en Q. Alejandro Lpez

- Dr. Juan Mndez

- Febe Arzola

- Estela Cervantes

- Jos Gonzlez

- Silvia Corts

- Roberto Gonzlez

- Concepcin Garay

Por toda la ayuda y apoyo brindado a lo largo del proyecto.

A los Doctores Robin Sagar, Eduardo Gonzlez, Arturo Rojo y Alfredo Rodrguez, por las
palabras de aliento que nunca faltaron, por motivarme y no dejarme vencer.

ndice
Pg.

1. Introduccin

2. Objetivo

3. Secuestrando el color de la bugambilia en matrices inorgnicas

4. Procedimiento experimental

4.1. Sntesis de los HDL

4.2. Sntesis de la almina

4.3. Extraccin del cromforo betanidin

4.4. Secuestro del betanidin en materiales inorgnicos

5. Caracterizacin

5.1. Difraccin de rayos-X (DRX)

5.2. Espectroscopia de resonancia magntica nuclear (RMN)

5.3. Espectroscopia infrarroja (IR)

5.4. Espectroscopia ultravioleta-visible (UV-Vis)

6. Resultados

6.1. Matrices inorgnicas que no lograron secuestrar el betanidin

6.2. Matrices inorgnicas que secuestran el betanidin

6.2.1. HDLMgAl-CO3

10

6.2.2. HDLMgZnAl-CO3

12

6.2.3. ASG

14

6.3. Variacin del color del betanidin con el pH

18

7. Discusin

18

8. Conclusiones

22

9. Referencias bibliogrficas

23

Pg.

Apndice A: Tcnicas de caracterizacin

26

A.1. Difraccin de rayos-X (DRX)

27

A.2. Espectroscopia de resonancia magntica nuclear (RMN)

28

A.3. Espectroscopia infrarroja (IR)

29

A.4. Espectroscopia ultravioleta-visible (UV-Vis)

30

A.6. Referencias bibliogrficas

32

1. Introduccin
Del avance continuo en campos como la ptica, procesamiento de alimentos,
construccin, catlisis, entre otros, surge la necesidad de desarrollar nuevos materiales con
propiedades fotoqumicas y fotofsicas [1, 2].
Una estrategia para la obtencin de estos slidos es la incorporacin de
cromforos orgnicos en matrices inorgnicas, dando lugar a la formacin de materiales
hbridos con propiedades particulares, determinadas tanto por la naturaleza de sus
componentes como por las condiciones de preparacin.
En el campo de los pigmentos, los slidos clsicamente empleados contienen
metales pesados como: Pb, Co, Cr, Hg, etc [3, 4], que son altamente txicos, y esto aunado
a las exigencias internacionales, que prohben la utilizacin de dichos metales en industrias
como la farmacutica, alimenticia, cosmtica y textil, ha provocado la bsqueda de
sustitutos [5], en algunos casos es deseable que stos sustitutos sean colorantes naturales.
Sin embargo, muchas veces estas nuevas propuestas estn limitadas por la inestabilidad de
las molculas orgnicas extradas de frutos y plantas [6, 7].
Un pigmento natural se caracteriza por tener una molcula especfica que da
color, llamada cromforo. Estas molculas son las responsables del color en flores y frutos.
Algunos de los cromforos ms comunes son, por una parte las antocianinas que le dan el
color rojo a los vinos [8, 9]. Por otro lado, algunas flores y la raz de la remolacha, aunque
tambin son rojas, su color se lo deben a otro cromforo, el betanidin [10].
Una tercer molcula, aunque menos comn, pero muy famosa es la que se obtiene
de la planta ndigo, cuyo cromforo lleva el mismo nombre. El ndigo se ha encontrado en
algunas pinturas datadas de la poca de los Mayas (250 al 900 d.C.) [11]. Se ha propuesto
que la remarcable estabilizacin del cromforo, se debe a su incorporacin de las
molculas de ndigo en los canales de la arcilla palygorskita [12]. El pigmento ndigopalygorskita se conoce como Azul Maya [13].
Las propiedades de los cromforos antes citados y, por supuesto, algunos otros,
pueden ser empleadas en una amplia gama de industrias (cosmtica, alimenticia, textil,
farmacutica, vincola, etc.). Por ejemplo, las betalainas pueden usarse como colorantes
naturales en alimentos, en prevencin de algunas enfermedades y aprovechar sus

propiedades como antioxidantes. Sin embargo, estas molculas son inestables cuando se
extraen, y muchas veces es necesario estabilizarlas en condiciones muy especficas [14].
El betanidin puede obtenerse fcilmente de flores como la bugambilia
(bougainvillea glabra), mediante extracciones en medio acuoso.
Retomando el tema del azul maya, las pinturas encontradas constatan que el
ndigo se estabiliz durante muchos aos (desde el periodo Clsico Tardo 300 d.C. hasta
hoy) [15], en los canales de una arcilla. Existen otras investigaciones donde se ha logrado
estabilizar pigmentos cloroflicos extrados de la espinaca en matrices inorgnicas
mesoporosas [16]. Inspirados en estos pigmentos, se propone en este trabajo estabilizar el
betanidin presente en las bugambilias, sobre slidos como hidrotalcitas [17], zeolitas [18] y
-almina.
La almina, es un material que funciona muy bien como absorbente [19], mientras
que las zeolitas y las hidrotalcitas son unos excelentes intercambiadores catinicos y
aninicos [17, 18], respectivamente.

2. Objetivo
Secuestrar un cromforo natural, betanidin, en slidos inorgnicos del tipo
hidrxido doble laminar (HDL) y -almina.

3. Secuestrando el color de la bugambilia en matrices inorgnicas


Algunas molculas orgnicas sintticas, coloridas, pueden ser estabilizadas en
diferentes slidos. El presente trabajo est consagrado a mostrar que los cromforos
naturales extrados de flores, por ejemplo de la bugambilia, figura 1, pueden fijarse en
algunas matrices inorgnicas.
La bugambilia debe su color a las betalainas y estas se dividen en dos grupos:
-

Betacianinas que otorgan el 90 % de la coloracin y cuyo pigmento


mayoritario es el betanidin, de color variable (rosa a rojo).

Betaxantinas que son amarillas.

Figura 1. Flores bugambilia (bougainvillea glabra)

El pigmento extrado de la flor bugambilia, cuenta con ms de una estructura de


betalainas, se han detectado hasta 30 compuestos diferentes, y hasta hoy no es posible
obtener fracciones de un solo componente [14]. En la figura 2 se muestra la estructura
bsica del betanidin.

HO

COO-

RO

N+

N
H

HOOC

COOH

Fig. 2. Estructura general del cromforo betanidin. Donde R puede ser cualquiera
de sus nueve variantes [14].

Tomando en cuenta esta estructura, las matrices que se proponen para estabilizar
el betanidin son: zeolitas y compuestos tipo hidrotalcita (hidrxidos dobles laminares), los
cuales se han revelado como eficaces para retener algunos cromforos sintticos.
Los HDL

son

compuestos inorgnicos formados

por hojas

cargadas

positivamente, separadas por especies aninicas (figura 3). Cuando un HDL es calcinado
conduce a la obtencin de un xido mixto. Si la temperatura de calcinacin no excede los
600 C, el xido mixto puede rehidratarse para obtener nuevamente un HDL, esta
propiedad es el llamado efecto memoria.

Hoja de tipo brucita M(OH)2


(metales divalentes y trivalentes)

Espacio interlaminar
(cationes y agua)

Figura 3. Estructura de un hidrxido doble laminar.

Las zeolitas son aluminosilicatos conteniendo en su estructura cavidades, las


cuales alojan iones y molculas de agua. Tanto los cationes como el agua tienen libertad de
movimiento, de tal modo que posibilitan el intercambio inico y la deshidratacin.
Particularmente, la zeolita X tiene una relacin Si/Al comprendida entre 1.0 y 1.5,
pertenece al sistema cbico, en la forma sdica, el parmetro de red vara entre 25.0 y 24.18

, dependiendo de la relacin Si/Al. La gran cavidad (supercaja ) tiene un dimetro


interno igual a 12.4 (figura 4).
Dado que las betalainas tienden a ser estabilizadas en medio cido, se proponen
como matrices receptoras a materiales de carcter cido, a saber, la forma protonada, HX,
de la zeolita NaX y la -almina.

Figura 4. Estructura de la zeolita X. (Obtenida de iza-structure, data base)

En efecto, la -almina (-Al2O3) es una espinela considerada con defectos dada


la relacin de tomos de aluminio respecto a los tomos de oxgeno (32 tomos de oxgeno
y 21 tomos de aluminio). Posee alta rea superficial (200 a 220 m2/g), y adems cuenta
con una superficie qumica con sitios cidos de tipo Lewis y Brnsted, lo que hace de sta
un material muy reactivo, comparada con otro tipo de alminas [20].
La -Al2O3 absorbe fcilmente agua y se disuelve en los cidos, por ello son
ampliamente usadas en cromatografa [21].

4. Procedimiento experimental
Materiales
Los reactivos usados fueron: tri-sec-butxido de aluminio (ATB) y etanol
absoluto anhidro (EtOH).
Zeolita NaX con una relacin Si/Al de 1, suministrada por Sigma Chemical
Company. Esta zeolita se us en su forma sdica y protonada. La zeolita protonada se
prepar intercambiando la zeolita NaX en una solucin de NH4OH. Despus, el NH3 se
evacu a 300 C en vaco. Nos referimos a la zeolita sdica como NaX y a su forma
protonada como HX.
5

4.1. Sntesis de los HDL


Los hidrxidos dobles laminares fueron preparados por coprecipitacin a pH
constante. Se probaron 2 HDL en la retencin de betanidin.
El primero fue el HDLMgAl-CO3, el cual se prepar a partir de una solucin, A,
disolviendo Mg(NO3)26H2O y Al(NO3)39H2O, en agua bidestilada. Las relaciones molares
de esta solucin fueron Mg:Al:H2O, 3:1:84.
Se prepar una segunda solucin, B, disolviendose KOH y K2CO3 en agua
bidestilada. Las relaciones molares fueron OH-: CO32-:H2O, 2.0:1.0:41.5.
Se mezclaron las soluciones A y B, a temperatura constante (80 C), manteniendo
el pH entre 9 y 10. El slido se lav, se filtr, y, se sec a 100 C por 12 horas. El slido
obtenido tuvo una relacin molar de Mg/Al=3, y frmula: [Mg0.75Al0.25(OH)2](CO3)0.125

0.783 H2O.
El segundo HDL se prepar con tres metales, Mg, Al y Zn. El Zn2+ fue
incorporado durante la sntesis, la relacin del metal divalente/ metal trivalente fue 3. La
composicin de este slido fue: [Mg0.614Zn0.093Al0.293(OH)2](CO3)0.146 0.731H2O, este
slido es nombrado HDLMgZnAl-CO3.

4.2. Sntesis de la Almina


La almina se prepar por el mtodo sol-gel, usando ATB como fuente de
aluminio. El ATB fue disuelto en EtOH y se refluj a 80 C durante 1 hora. Enseguida se
adicion cido fosfrico 3 N para hidrolizar la solucin, se agit y refluj por 1 hora. Para
completar la hidrlisis, el sistema se enfri a temperatura ambiente formndose un gel. Las
relaciones molares de los reactivos fueron; EtOH:ATB = 60:1, H3PO4:ATB = 0.03:1.00,
H2O:ATB = 1:1. El gel se envejeci durante 30 das y se sec a 80 C. Finalmente se
calcin a 550 C por 4 horas. Este slido se llam ASG.

4.3. Extraccin del cromforo betanidin


1 g de flores Bougainvillea glabra se molieron con 40 mL de agua. La mezcla se
agit por 20 min. Posteriormente se filtr a temperatura ambiente.

4.4. Secuestro del betanidin en materiales inorgnicos


Los slidos anteriormente descritos se probaron como adsorbentes del cromforo
betanidin, para ello se colocaron 100 mg de la muestra slida en 10 mL de la solucin
conteniendo el extracto de las flores.

5. Caracterizacin
5.1. Difraccin de rayos-X (DRX)
Los materiales se caracterizaron por difraccin de rayos-X, los difractogramas se
obtuvieron con un difractmetro Siemens D500, con un nodo de tubo de cobre. Se
seleccion la radiacin K con un monocromador interno. En el apndice A se mencionan
algunos de los aspectos bsicos de las tcnicas de caracterizacin usadas en este trabajo.

5.2. Espectroscopia de resonancia magntica nuclear (RMN)


Los espectros RMN en el estado slido se obtuvieron en un espectrmetro Bruker
ASX-300 a una frecuencia de resonancia de 78.2 MHz para

27

Al. Con una secuencia de

pulsos de excitacin sencillos de 2 s con tiempo de repeticin de 0.5 seg. La velocidad de


giro del rotor fue 10 kHz. Para los desplazamientos qumicos se tomo como referencia una
solucin acuosa 1 N de AlCl3.
Los espectros 13C CP/MAS RMN se obtuvieron operando el espectrmetro a 75.4
MHz. El pulso fue de 4 s. La velocidad de rotacin de 5 kHz. La referencia externa
utilizada fue el pico de adamantano slido a 38.2 ppm relativo al tetrametilsilano (TMS)

5.3. Espectroscopia infrarroja (IR)


Las muestras se caracterizaron por espectroscopia infrarroja a temperatura
ambiente, en forma de pastillas diluidas con KBr, en un espectrmetro Perkin Elmer 1600
Series-FTIR, equipado con un detector DTGS. La resolucin fue de 4 cm-1.

5.4. Espectroscopia ultravioleta-visible (UV-Vis)


Los espectros UV-Vis se obtuvieron en un espectrmetro Perkin Elmer Lambda
40 UV-Vis, en la ventana espectral entre 800 y 300 nm.

6. Resultados
Composicin de los soportes
Las tablas 1 y 2 resumen la composicin de las matrices inorgnicas usadas para
secuestrar el betanidin, especificando las razones metal divalente (M2+) a metal trivalente
(M3+).
Matriz inorgnica

Frmula desarrollada

Carcter cido-bsico

NaX

Na80[(AlO2)80(SiO2)112] x H2O 32 Na+

cida (dbil)

HX

Na80[(AlO2)80(SiO2)112] x H2O 32 H+

cida (moderada)

HDLMgAl-CO3

[Mg0.744Al0.256(OH)2](CO3)0.128 0.850H2O

bsica

HDLMgZnAl-CO3

[Mg0.614Zn0.093Al0.293(OH)2](CO3)0.146 0.731H2O

bsica

ASG

Al2O3

cida

Tabla 1. Composicin y caractersticas de las matrices inorgnicas.

HDLMgAl-CO3

HDLMgZnAl-CO3

ASG

% Mg

74.4

61.4

% Al
% Zn

25.6
0

29.3
9.3

0
100

0
M2+/M3+
2.9
2.41
Tabla 2. Porcentajes de los metales en las matrices inorgnicas.
6.1. Matrices inorgnicas que no lograron secuestrar el betanidin
Las zeolitas NaX y HX resultaron no eficientes para fijar el betanidin. En efecto,
aun cuando se esperaba que el betanidin, por su tamao y forma, pudiera estabilizarse en la
superficie externa de las zeolitas, nuestros experimentos no fueron exitosos. Estos
materiales, no sufren ningn cambio en su estructura cristalina despus de ser probados
como adsorbentes del betanidin, como lo muestran sus patrones DRX (figura 5).

Intensidad (u.a.) .

(d)

(c
)
(b)

(a
)
5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

ngulo de Bragg (2)

Figura 5. Difractograms de rayos-X de: (a) NaX, (b) NaX-B, (c) HX y (d) HX-B.

6.2. Matrices inorgnicas que secuestran el betanidin


A diferencia de las zeolitas, que no logran retener el betanidin en su estructura o
superficie, las otras matrices inorgnicas probadas s retienen el cromforo, generando,
sorpresivamente, slidos de diferentes colores.
Por una parte, los HDL con betanidin conducen a slidos morados y rojos, en
HDLMgAl-CO3, y HDLMgZnAl-CO3 respectivamente ((figura 6 (a) y (b)). Por otra parte, el
color del batanidin guarda el tono caracterstico de la bugambilia cuando el adsorbente es
almina (figura 6 (c)).

Para identificar las muestras que retienen betanidin, se agreg una letra B al
nombre del slido adoptado en la etapa de sntesis. Por ejemplo, el slido HDLMgAl-CO3
despus de haber retenido betanidin, es llamado HDLMgAl-CO3-B.

(a)

(b)

(c)

Figura 6. Matrices inorgnicas en contacto con la solucin de bugambilia, (a)


HDLMgAl-CO3, (b) MgZn(Al)O, (c) ASG.

6.2.1. HDLMgAl-CO3
En la figura 7 se comparan los patrones de difraccin de rayos-X de los HDLMgAlCO3, no calcinado y calcinado a 600 C. Tambin se incluyen los difractogramas de estas
mismas muestras conteniendo betanidin.
No se observan cambios significativos entre los difractogramas comparables, (a) y
(b), (c) y (d).
El efecto de la calcinacin es claro y tpico: la estructura laminar del HDL se
destruye promoviendo la formacin de un xido mixto, Mg(Al)O, con estructura tipo
periclasa. Adems, la incorporacin del betanidin a los HDL no provoca cambios en su
estructura cristalina que puedan ser detectados por DRX. Cabe hacer notar que el contacto
de Mg(Al)O con la solucin de betanidin no regenera la estructura laminar del HDL.

10

Intensidad (u. a.)

(d)
(c)

(b)

(a)

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

70

ngulo de Bragg (2)

Figura 7. Patrones de difraccin de rayos-X de: (a) HDLMgAl-CO3, (b) HDLMgAlCO3-B, (c) HDLMgAl-CO3 calcinada a 600 C (Mg(Al)O), (d) Mg(Al)O con betanidin
(Mg(Al)O-B).

Como se acaba de mostrar, los slidos HDL retienen betanidin sin provocar
cambios estructurales detectables por DRX. Sin embargo, el color de los slidos no es
persistente en el tiempo y las HDLMgAl-CO3-B experimentan un cambio de color, de
morado a caf, cuando son expuestas al medio ambiente incluso por tiempos cortos de 24
horas. Se analizaron los espectros infrarrojos de estas muestras, figura 8.
En los espectros (b) y (c), correspondientes a los slidos conteniendo el
cromforo, se aprecian dos bandas: una en 1088 cm-1 y otra en 2942 cm-1 debidos a las
absorciones de los enlaces C-N y C-H aromticos, respectivamente. Evidentemente, estas
absorciones no se observan en el espectro de la muestra antes de la sorcin del betanidin
(espectro (a)). Ambos grupos funcionales se encuentran en la estructura del betanidin,
figura 2. Si se comparan los espectros de la muestra morada (b) y de la muestra caf (c) no
se observan cambios significativos.

11

100
90

Transmisin (%)

80

(c)

70
60

(b)

50
40
30

(a)

20
10
0

3500 3000 2500 2000 1500 1000

500

-1

Nmero de onda (cm )


Figura 8. Espectros infrarrojos de: (a) HDLMgAl-CO3; (b) HDLMgAl-CO3-B y (c)
muestra (b) despus de 24 horas.

6.2.2. HDLMgZnAl-CO3
La figura 9 muestra la serie de patrones DRX para los slidos que contienen zinc.
En el slido MgZn(Al)O-B, al igual que en los slidos Mg(Al)O-B, no se observa la
reconstruccin de la estructura laminar .
El color del slido, suspendido en la solucin, es rojo (figura 6 (b)). Cuando el
slido se separa del lquido y se seca adquiere un color amarillo, que se mantiene
invariante, incluso despus de varios meses.
La figura 10 contiene los espectros IR del MgZn(Al)O, con y sin betanidin. En
ste caso, las frecuencias de absorcin caractersticas del betanidin no se observan
claramente.

12

Intensidad (u. a.)

(c)

(b)

(a)
5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

70

ngulo de Bragg (2)

Figura 9. Patrones DRX de: (a) HDLMgZnAl-CO3, (b) HDLMgZnAl-CO3 calcinada a


600 C (MgZn(Al)O), (c) MgZn(Al)O con betanidin (MgZn(Al)O-B).

100
90

Transmisin (%)

80

(b)

70
60
50
40
30
20

(a)

10
0
3500

3000

2500

2000

1500

1000

500

-1

Nmero de onda (cm )

Figura 10. Espectro infrarrojo de HDLMgZnAl-CO3-B calcinada a 600 C: (a)


MgZn(Al)O, (b) MgZn(Al)O-B. La fotografa asociada a (b) corresponde al slido
MgZn(Al)O-B.

13

Resonancia magntica nuclear (RMN) de los xidos mixtos


La figura 11 exhibe los espectros 27Al RMN MAS de los soportes utilizados para
adsorber el cromforo betanidin. Los espectros correspondientes a los slidos Mg(Al)O y
MgZn(Al)O muestran dos picos de resonancia, a 11 y 64 ppm, debidos a especies de
aluminio con coordinacin octadrica y tetradrica, respectivamente [22, 23]. De la
deconvolucin de los espectros se obtiene que la relacin AlVI/AlIV es mayor en el slido
Mg(Al)O que en el slido MgZn(Al)O, es decir, que en el slido que contiene Zn, existe
una mayor cantidad de aluminio tetradrico.

VI

Al

IV

Al

(b)

(a)

300

200

100

-100

-200

-300

Desplazamiento qumico (ppm)


Figura 11. Espectros 27Al RMN MAS de: (a) Mg(Al)O y (b) MgZn(Al)O.

6.2.3. ASG
Las alminas ASG y ASG-B, presentan la estructura tpica de la -almina (figura
12). El slido ASG-B presenta el color caracterstico de la bugambilia (rosa intenso) y lo
mantiene por largos periodos (mayores a 6 meses).

14

Figura 12. Difractogramas de rayos-X de: (a) ASG y (b) ASG con bugambilia (ASG-B).

En la figura 13 se presentan los espectros IR de ASG, con y sin betanidin. La


banda de absorcin a 2930 cm-1 en el espectro (b) se debe a la absorcin del enlace C-H de
los anillos aromticos, siendo el nico grupo observable de la molcula del betanidin, ya
que la absorcin caracterstica del enlace C-N se enmascara por un pico muy ancho que
presenta el slido ASG y que se atribuye a la absorcin de los enlaces Al-O.
La figura 14 despliega los espectros

27

Al RMN MAS correspondientes a las

muestras ASG y ASG-B. Antes de la adsorcin del betanidin, el material presenta las
resonancias de AlVI y AlIV, a 3.4 y 62.0 ppm, respectivamente. Adems, se puede observar
el pico a 33.0 ppm correspondiente al aluminio pentagonal, AlV [24]. Despus de la
adsorcin del betanidin, se observa una clara disminucin en la intensidad del pico
asignado a AlV.

15

100
90

Transmisin (%)

80
70
60

(b)

50
40
30
20

(a)

10
0
3500 3000 2500 2000 1500 1000

500

-1

Nmero de onda (cm )


Figura 13. Espectro infrarrojo de ASG: (a) sin betanidin, (b) con betanidin.

(b)

(a)

300

200

100

-100

-200

-300

Desplazamiento qumico (ppm)


Figura 14. Espectros 27Al RMN MAS de: (a) ASG y (b) ASG-B.
En la figura 15 se presenta el espectro 13C CP/MAS RMN del betanidin adsorbido
en el slido ASG-B. Se observan los picos principales debidos a las resonancias de los
16

15
8

OOC

13

14

COOH

carbonos del betanidin confirmando que no hay cambios estructurales significativos cuando
este se adsorbe en ASG. Adoptando la numeracin de los carbonos en la misma figura, se
asignaron los picos 13C RMN, tabla 3 [4.17].
15
8

OOC

13

11

N
3

10

14

12

COOH

NH
18

17

COOH
16

5
1

HO

300

OR

250

200

150

100

50

-50

Desplazamiento qumico (ppm)

Figura 15. Espectros 13C CP/MAS RMN de ASG-B y cromforo betanidin, con
sus respectivos carbonos.
Carbono

Desplazamiento qumico (ppm)

7, 18

29

8, 16, 15

175

2, 3, 4, 5

135

1, 6

73

55

Tabla 3. Asignacin de los picos 13C RMN, para los carbonos del cromforo betanidin.

17

6.3. Variacin del color del betanidin con el pH


La solucin con extracto de bugambilia, de color rosa intenso, present un pH
muy cercano al neutro (7.2). Por adicin de HNO3 1M y NH4OH 1M, este pH fue alterado
para obtener soluciones con pH de 1.7 y 11.0, respectivamente. Las soluciones con pH
neutro y cido mantuvieron el color rosa intenso. Aquella con pH bsico, cambio a morado.
Los espectros UV-Vis de estas tres muestras incluidas en la figura 16, confirman que la
adsorcin del betanidin es vulnerable a cambios de pH, ya que hay un corrimiento en la
longitud de absorcin.

Absorbancia

560 nm

550 nm

(c)
(b)

550 nm
(a)
440

470

500

530

560

590

620

650

680

(nm)

Figura 16. Espectros UV-Vis de la solucin que contiene el betanidin a 1.7, 7.2 y
11.0; (a), (b) y (c), respectivamente.

7. Discusin
Se acaban de presentar los resultados clasificando

los materiales como

adsorbentes y no adsorbentes de betanidin.


La zeolita NaX no adsorbe el betanidin. Por un lado, el tamao de la molcula
orgnica la imposibilita para ocluirse dentro de los poros. Por otro lado, la adsorcin en la
superficie reclamara la existencia de sitios activos en el slido, es decir, afines para
interaccionar con los grupos funcionales del cromforo. Aparentemente, tales sitios, cuya
naturaleza podra ser variada, no existen, y adems, no basta acidificar la zeolita para que
ellos se creen. En efecto, la transformacin de la zeolita NaX a HX, slo intercambia,
18

dentro de las cavidades de la zeolita, los cationes Na+ por H+. Como ya se mencion, los
cationes dentro de los poros de la zeolita no son accesibles al betanidin.
Entre los slidos que retienen el betanidin se encuentran Mg(Al)O y MgZn(Al)O.
En el caso de estos xidos mixtos, cuando se ponen en contacto con la solucin, y se
incorpora el betanidin, no se reconstruye la estructura laminar. Es decir, el betanidin no se
desprotona para producir aniones que pudieran aprovecharse y entonces llevarse a cabo el
efecto memoria caracterstico en los HDL.
La solucin acuosa de betanidin, en contacto con Mg(Al)O genera una suspensin
morada y con MgZn(Al)O una suspensin roja. Como se mostr, el color de las betalainas
es muy sensible al pH. Entonces, el color que adquiere el betanidin debe relacionarse con
las propiedades cido-bsicas del slido. Efectivamente, los slidos usados como soportes,
exhiben diferentes propiedades cido-bsicas [25]. Son estas propiedades las que provocan
cambios en el color del betanidin adsorbido en los slidos. As pues, la almina de carcter
predominantemente cido, secuestra el color de la bugambilia, mientras que los HDL de
carcter dominantemente bsico, cambian el color del cromforo.
Cuando los slidos se separan de la solucin, el color originalmente adquirido no
se mantiene. El slido MgZn(Al)O-B adquiere un color amarillo, estable en el tiempo. Por
su parte, el slido Mg(Al)O-B mantiene el color morado observado en solucin pero solo
durante un corto tiempo, virando a las pocas horas a caf. En este ultimo caso, el cambio de
color del slido se puede atribuir a la oxidacin de los dobles enlaces y el consecuente
fraccionamiento de la molcula. La oxidacin se lleva a cabo por accin del O2 presente en
el aire. En efecto, la oxidacin solo se presenta cuando la muestra es expuesta al aire. Esto
se confirm encapsulando al vaco un muestra Mg(Al)O-B inmediatamente despus de
preparada, y se observ la persistencia del color bugambilia durante el tiempo que se
guardo libre de aire (tiempo > 1 mes). La reaccin de oxidacin del betanidin adsorbida
sobre Mg(Al)O-B puede escribirse como:

19

O
O

O
Mg

O
O

O2

NH

O
C

H
C

NH

Mg

HO

Al

Mg
O

C
O

O
OR

Mg

NH+

Al

O
Mg

Al

Al

HO

Al

O
Mg

Al

Al

Al

OR
Mg

Al

Mg
O

Al

Mg
O

Mg
O

Figura 17. Reaccin de oxidacin del betanidin adsorbido sobre Mg(Al)O.

Esta reaccin corresponde a la autooxidacin lenta de muchos compuestos


orgnicos en presencia de oxgeno. Generalmente, la autooxidacn se lleva a cabo va
mecanismos de radicales libres, en los cuales, es necesario O2 y un iniciador [26]. Este
ltimo puede ser aire, ya que puede contener trazas de intercambiadores radicalarios.
El oxgeno por s solo no inicia la autooxidacin, dada su baja reactividad como
abstractor de hidrgeno. Sin embargo, en nuestro caso la oxidacin puede ser acelerada por
la superficie del slido, que es capaz de abstraer los protones cidos del betanidin.
Ntese que la adsorcin ms probable del betanidin en el Mg(Al)O es la
presentada en la figura 17. Los tomos cargados positivo y negativo, N y O,
respectivamente, interaccionan con los pares metal-oxgeno del xido mixto, ms
probablemente, los pares Al3+-O2-. En efecto, la resonancia magntica nuclear del aluminio
revel que en los xidos mixtos existen especies de aluminio octadricas (AlVI) y
tetradricas (AlIV). Los aluminios octadricos deben formar parte del xido mixto con
estructura de tipo periclasa. Sin embargo, la mayora de los aluminios tetradricos deben
estar en la superficie de los xidos mixtos, enriquecindola as en sitios de aluminio
disponibles para adsorber al betanidin.
En el caso del slido MgZn(Al)O, los sitios de adsorcin ms probables tambin
son pares Al3+-O2- ya que, incluso, ste xido mixto presenta una cantidad mayor de AlIV,
relativa al AlVI.
20

No obstante, como se mencion anteriormente, el slido MgZn(Al)O-B exhibi


un color amarillo persistente en el tiempo, sugiriendo que el cromforo estabilizado no fue
el betanidin, sino el betaxantin. Tambin cabe la posibilidad que el color amarillo se deba a
que la cido-basicidad del slido MgZn(Al)O sea muy diferente comparada con aquella del
slido Mg(Al)O. Sin embargo, esta ltima hiptesis debe descartarse ya que en el estudio
de la variacin del color del betanidin, en funcin del pH, no se observ el color amarillo.
Entonces, se debe concluir que el betanidin, adsorbido en MgZn(Al)O, se transforma en
betaxantin. Un mecanismo viable para esta transformacin es el siguiente:

HO
RO

N+

COO-

HO

HO

COON+

H
HO

COO-

H
HO

HOOC

N
H

COOH

N
H

HOOC

COOH

HOOC

N
H

5
HO

COO-

HO

H 2N

HO
NH2

HO

HO
HO

HO
H

HOOC

HO

N+

N
H

COOH

COOH

HOOC

N+

N
H

COOH

Figura 18. Mecanismo propuesto para el cambio de betanidin a betaxantin.


21

COOH

Ntese que dos diferentes especies tipo betaxantin pueden obtenerse, 7 y 8.


Las reacciones incluidas en el mecanismo propuesto, son generalmente
catalizadas por enzimas [27]. Su ocurrencia en el slido MgZn(Al)O puede deberse a la
presencia de Zn en superficie, el cual tambin cataliza muchas reacciones biolgicas debido
a que fcilmente forma complejos con molculas orgnicas [28].
Hasta este punto de la discusin, una conclusin emerge: la adsorcin del
betanidin sobre la superficie de los xidos mixtos es una adsorcin reactiva, promovida por
la cido-basicidad de los slidos y el oxgeno del aire. Para el caso del MgZn(Al)O la
presencia del Zn y Al en superficie provoca que el cromforo betanidin, se convierta a
betaxantin (figura 18), y por ello el slido mantiene un color amarillo, estable en el tiempo.
La adsorcin del betanidin sobre un slido de carcter predominantemente cido,
como la -almina, inmoviliza el cromforo manteniendo sus grupos funcionales
caractersticos.
La disminucin de aluminios insaturados en la almina, despus de la adsorcin
del cromforo, sugiere que este ltimo interacciona con los AlIV y AlV, que son sitios
cidos y por tanto estabilizan el betanidin con color caracterstico en la bugambilia.

8. Conclusiones
El cromforo betanidin puede ser fcilmente secuestrado en xidos mixtos y

-almina. Sobre los xidos mixtos, de carcter predominantemente bsico, el betanidin es


altamente reactivo y con facilidad se oxida o se transforma en betaxantin. En contraste, el
betanidin es inmovilizado y permanece sin reaccionar qumicamente cuando se absorbe en
la -almina, un slido de carcter cido.

22

9. Referencias bibliogrficas
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24

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25

Apndice A

Tcnicas de caracterizacin

26

A. Tcnicas de caracterizacin
A.1. Difraccin de rayos-X (DRX)
La difraccin de rayos-X es una tcnica ampliamente utilizada en la ciencia de
materiales y, en general, en la industria, debido a la informacin que aporta sobre
ordenamiento y espaciado de los tomos en los materiales cristalinos, es decir, de sus
propiedades estructurales [1].
Este mtodo proporciona informacin cualitativa y cuantitativa de los compuestos
presentes en una muestra, asentndose en el hecho de que cada sustancia cristalina tiene un
nico patrn de difraccin. La identificacin de las fases se basa en la posicin de las lneas
(en trminos de 2) y de sus intensidades relativas.
El fenmeno de difraccin se presenta cuando los rayos-X son reflejados por el
entorno ordenado de un cristal, en donde se asume que los tomos estn dispuestos
formando planos. Para que los rayos-X sean reflejados es necesario que se cumpla la Ley de

Bragg (figura A.1.) [2]:


n = 2d sen

Figura A. 1. Difraccin de rayos-X.


Donde:
n es un entero
d es la distancia interplanar del cristal

es la longitud de onda de la radiacin


es el ngulo de incidencia

27

Existen siete sistemas cristalinos (cbico, tetragonal, ortorrmbico, rombodrica


(o trigonal), hexagonal, monoclnico y triclnico) que se distinguen entre s por la longitud
de sus aristas (llamadas constantes o parmetros de red) y sus ngulos caractersticos [3].
Las frmulas para determinar esas constantes dependen del tipo de sistema cristalino, por
ello es importante conocer a cual pertenece la muestra bajo estudio.
La tcnica de DRX permite calcular el parmetro de red; para ello es necesario
incluir un patrn interno, que presente un pico a un ngulo caracterstico, el cual es
seleccionado en base a la muestra problema. El sistema ms simple es el cbico y basta
tomar en cuenta un pico y utilizar la siguiente frmula para determinar el parmetro de red:

d=

h + k2 + l2
2

Donde h, k y l son los ndices de Miller del plano cristalogrfico determinado por
el ngulo del pico seleccionado.
En este trabajo se calcula el parmetro de red de la zeolita A y de la estructura
sodalita en el captulo 4, utilizando como estndar grafito, para determinar el cambio en las
dimensiones de red zeoltica.

A.2. Espectroscopia de resonancia magntica nuclear (RMN)


La espectroscopia RMN consiste en la observacin de las transiciones entre dos
niveles de energa. La RMN permite seguir las transiciones entre dos niveles magnticos,
m =+1/2 y m =-1/2, para el caso de un ncleo con espn 1/2 [4, 5].
Estas transiciones en los ncleos atmicos pueden provocarse por las siguientes acciones
sucesivas:
1) Sometimiento de los ncleos a una induccin, B0, con ello los momentos
magnticos de espn se alinean en el mismo sentido, o en sentido opuesto, de B0.
2) Excitacin de los espines por una onda de radio a la frecuencia de resonancia,
lo que promociona alguno de los espines (figura A. 2.).

28

m= -1/2

Bo

m= +1/2
(b)

(a)

Figura A.2. Estados energticos de los espines nucleares, antes de la aplicacin de


B0 (a), y (b) al aplicar B0 se produce un desdoblamiento de los niveles energticos, el estado
ms poblado es el de menor energa. La onda de radiofrecuencia promueve la excitacin de
los espines en el estado m = + 1/2 hacia el estado m = -1/2.

Los tomos susceptibles de experimentar el fenmeno RMN tienen un momento


de espn diferente de cero, los ms comnmente analizados por esta tcnica son 1H, 13C, 19F
y 31P, que tienen espn nuclear I= 1/2.
La tcnica es muy sensible a la estructura electrnica de la muestra, es decir, al
ambiente que rodea al tomo por analizarse. Esto se debe a que el movimiento de los
electrones, partculas cargadas, produce un campo magntico local que se suma o se resta al
campo externo aplicado, B0, generando un campo efectivo. Este campo provoca una
absorcin que se distingue de una referencia, entonces la medida que se hace es relativa, y
se denomina desplazamiento qumico [2].

A.3. Espectroscopia infrarroja (IR)


El principio de esta espectroscopia radica en el examen de las radiaciones
absorbidas por un compuesto.
La energa asociada a la regin IR es la adecuada para provocar cambios en los
niveles rotacionales y vibracionales de una molcula, generando transiciones, que son las
que se representan en un espectro caracterstico [6].

29

Las longitudes de onda absorbidas van de 2.5 m hasta 25 m, aunque a menudo


se prefiere utilizar el nmero de onda, definido como el inverso de la longitud de onda. Los
espectros IR se trazan en la mayora de los casos en el intervalo 400-4000 cm-1.
Para generar un espectro IR, es necesario que la molcula absorba la radiacin, y
esto ocurre cuando la frecuencia de la vibracin/rotacin molecular es igual a la frecuencia
de la fuente de radiacin [2]. Cuando una molcula absorbe radiacin IR, experimenta un
cambio en el momento dipolar, como consecuencia de su vibracin o rotacin. Si la
molcula es homonuclear (O2, N2, etc.) no se altera el momento dipolar durante la vibracin
o rotacin, por lo tanto, no absorbe en el infrarrojo.
La identificacin de compuestos, utilizando la espectroscopia infrarroja, no es
sencilla, algunas veces los compuestos orgnicos exhiben espectros muy complejos, otras
veces, las bandas pueden enmascararse por el solapamiento de otras. No obstante, cabe
hacer notar que la espectroscopia IR es una herramienta muy poderosa en la caracterizacin
estructural de compuestos, ya que sirvindose de ella se pueden elucidar interacciones
debidas a un conjugamiento, a una atraccin de electrones por un sustituyente vecino, a una
tensin angular o de Van der Waals, o por puentes de hidrogeno [7].
En la prctica, no se hace un anlisis exhaustivo de los espectros, sino que solo, se
reconocen las principales bandas de vibracin apoyndose en los datos de bandas de
absorcin caractersticas ya reportadas en la literatura.

A.4. Espectroscopia ultravioleta-visible (UV-Vis)


La radiacin con longitudes de onda entre 400 nm y 750 nm corresponde al
espectro visible. Cuando esta luz es absorbida por una molcula, produce transiciones entre
sus estados electrnicos.
Un espectro UV-Vis puede describirse convencionalmente en funcin de la
posicin del mximo de la banda de absorcin (mx) y de su intensidad (mx, el coeficiente
de extincin).
La principal aplicacin de la espectroscopia UV-Vis es el anlisis cuantitativo de
un cromforo presente en una solucin.
La primera etapa del anlisis consiste en la construccin de una curva de
calibracin que relacione la concentracin con la absorbancia. Enseguida se selecciona el
30

mximo de la longitud de onda, debido a que es en esta zona que la Ley de Beer tiende a
ser lineal [2].

A = abc

Ley de Beer

Donde:
a es una constante de proporcionalidad denominada absortividad.
b es la longitud de la trayectoria a travs de la solucin.

c es la concentracin de la especie absorbente.


Finalmente, se interpola en la curva de calibracin, el valor de absorcin de la
muestra problema.

31

A.5. Referencias bibliogrficas


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32