Bioqumica

Tema 7: Enzimas. Enzimologa clnica

Ao: 2013

TEMA 7: Enzimas. Enzimologa clnica

Varas, SM; Ferramola, ML y Lacoste, MG
La vida depende de la existencia de catalizadores poderosos y especficos como son
las enzimas. En condiciones biolgicas, las reacciones no catalizadas tienden a ser lentas, por
ello, gracias a la accin de estas macromolculas, las reacciones qumicas se llevan a cabo con
gran velocidad, eficiencia y especificidad. Prcticamente todas las reacciones metablicas que
ocurren en nuestro organismo se encuentran mediadas por enzimas.
Las enzimas son catalizadores biolgicos, en su mayora de naturaleza proteica,
capaces de acelerar una reaccin qumica, sin formar parte de los productos finales ni
consumirse en el proceso.
Propiedades Generales de las Enzimas:
1. Presentan un sitio activo:
La reaccin enzimtica tiene lugar en una hendidura o cavidad definida sobre la
superficie de la enzima. Esta regin de la molcula se conoce como sitio activo. Este sitio est
formado por las cadenas laterales de determinados aminocidos, las que generan una forma
tridimensional complementaria a la estructura tridimensional del sustrato especfico para esa
enzima. La molcula que se fija sobre el sitio activo y sobre la que acta la enzima se
denomina sustrato.
El sitio activo la enzima (E) une al sustrato (S) formando un complejo enzima-sustrato
transitorio (ES). En el complejo ES, E transforma a S en l o los productos (P). Luego de la
reaccin la enzima queda inalterada, no muestra ningn cambio y puede unirse nuevamente
a otra molcula de sustrato. La misma molcula es reutilizada muchas veces (Figura 1 y 2).

Figura 1: Ecuacin de la reaccin enzimtica.

Figura 2: Representacin esquemtica de una reaccin enzimtica.

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2. Eficiencia cataltica (mayor velocidad de reaccin):

La mayora de las reacciones catalizadas por enzimas son muy eficientes y
transcurren desde 106 hasta 1014 veces ms rpido que la misma reaccin no catalizada.
Tpicamente, cada molcula de enzima es capaz de transformar cada segundo de 100 a 1000
molculas de sustrato en producto. El nmero de estas molculas transformadas a producto
por molcula de enzima en cada segundo, se conoce como el nmero de recambio.
Las enzimas logran aumentar la velocidad de reaccin gracias a que disminuyen la
energa de activacin (Ea) (Figura 3). La energa de activacin es la mnima cantidad de
energa necesaria para convertir un mol de sustrato en un mol de producto. Mientras menor
es la energa, ms rpido puede producirse la reaccin.

Figura 3: Comparacin entre reacciones catalizadas por enzima y sin catalizar.

3. Condiciones de reaccin (t, pH y presin) compatible con la vida:
En las condiciones reinantes en el organismo, como son temperatura moderada, pH
prximo a la neutralidad, presin constante, etc; la mayor parte de las reacciones
transcurriran muy lentamente o no se produciran en absoluto. Sin la participacin de las
enzimas, para que estas reacciones ocurran, se necesitaran temperaturas elevadas, pH
extremos o grandes presiones, todas condiciones incompatibles con la existencia de las
clulas. Por ello, gracias a la actividad de las enzimas, las reacciones qumicas se pueden
llevar a cabo a gran velocidad, en condiciones de temperatura, pH y presin compatibles con
la vida.
4. Especificidad:
Las enzimas son muy especficas para el sustrato de la reaccin que catalizan.
Interactan con una o muy pocas molculas y catalizan nicamente un tipo de reaccin. Esta
especificidad le permite distinguir con gran selectividad entre diferentes sustratos y est
determinada por la conformacin del sitio activo. El sitio activo tiene una forma que se
asemeja al sustrato, por lo que el sustrato correcto se ajusta perfectamente en el sitio activo
(Figura 4).

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Figura 4: Especificidad enzima-sustrato.

Constituyentes no proteicos de las enzimas:
Adems del componente proteico, muchas enzimas requieren de la presencia de
ciertos constituyentes no proteicos para poder funcionar como catalizadores. Estos
componentes no proteicos se denominan cofactores (Tabla 1) y pueden ser pequeos iones
orgnicos como por ejemplo el Fe+2, Mg+2, Mn+2 o Zn+2. Si el cofactor es una molcula
orgnica compleja unida de manera no covalente a la enzima se denomina coenzima (Tabla
2). Las coenzimas derivan generalmente de las vitaminas, como por ejemplo el NAD+, FAD+,
la coenzima A y la vitamina C y se obtienen a partir de la alimentacin. Cuando el cofactor
(coenzima o in metlico) se mantiene unido covalentemente o por fuerzas muy fuertes a la
enzima proteica, como por ejemplo el grupo hemo de la hemoglobina, se le conoce como
grupo prosttico. La apoenzima es la responsable de reconocer con precisin al sustrato, en
esta porcin se encuentra el sitio activo (Figura 5).

Figura 5: Constituyentes de las enzimas.

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Tabla 1: Ejemplos de cofactores enzimticos

Tabla 2: Ejemplos de coenzimas

Regulacin de la actividad enzimtica:
La actividad enzimtica puede ser regulada, esto quiere decir que dependiendo de los
requerimientos metablicos, las enzimas son activadas o inhibidas, para acelerar o disminuir
la velocidad con la que catalizan la reaccin, respondiendo as a las diferentes necesidades de
sus productos en la clula. La regulacin ms comn es modificando la concentracin de su
substrato.
Localizacin celular:
La mayora de las enzimas son intracelulares y pueden encontrarse en el citoplasma o
fijadas a distintas organelas (ej. mitocondrias) a fin de cumplir eficazmente sus funciones.
Hay enzimas que son 100% citoplasmticas, es decir, que solo se encuentran en el citosol,
como por ejemplo la lactato deshidrogenasa (LDH) y la glutmico-pirvico transaminasa
(GPT). Hay otras enzimas que estn en un cierto porcentaje en las organelas y otro
porcentaje en el citoplasma, como por ejemplo la glutmico-oxalactico transaminasa (GOT:
60% en citoplasma y 40% en mitocondria) y la malato deshidrogenasa (MDH: 50% en
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citoplasma y 50% en mitocondria). Otras enzimas son solo mitocondriales, como por
ejemplo, la glutamato deshidrogenasa.
Esta compartamentalizacin ayuda a aislar los sustratos o los productos de la
reaccin, de tal forma que no hay competencia de reacciones. De esta manera, se provee un
medio favorable para la reaccin, de tal forma que es posible localizar diferentes etapas del
metabolismo en diferentes organelas, haciendo de la clula una entidad organizada en donde
simultneamente funcionan miles de enzimas.
Isoenzimas:
Son formas fsicamente distintas (difieren en la secuencia de aminocidos) con la
misma actividad cataltica (catalizan la misma reaccin) en diferentes tejidos del organismo,
en distintos tipos celulares o en diferentes compartimientos subcelulares. Es decir, son
protenas diferentes con la misma actividad enzimtica.
La existencia de las isoenzimas permite el ajuste del metabolismo para satisfacer las
necesidades particulares de un determinado tejido o etapa del desarrollo.
Por ejemplo, la lactato deshidrogenasa presenta cinco isoenzimas, en msculo
predominan las cinco, en corazn la 1 y 2 y en hgado la 5.
El estudio de las isoenzimas ayuda a identificar el origen de la enzima y es muy til
en el diagnstico de una patologa. Por ejemplo, el aumento en plasma de la isoenzima 1 de
la lactato deshidrogenasa es caracterstico de lesiones del miocardio, en cambio el aumento
de la 5, es caracterstica de afecciones hepticas.
Nomenclatura de las enzimas:
Las enzimas suelen designarse por el agregado del sufijo asa al nombre del sustrato
o de la reaccin que catalizan. Ejemplo: la ureasa cataliza la hidrlisis de la urea, la amilasa la
hidrlisis del almidn, las proteasas la hidrlisis de las protenas, etc.
Aunque el sufijo asa sigue en uso, en la actualidad los nombres de las enzimas se
enfocan en el tipo de reaccin catalizada. As, la Unin Internacional de Bioqumica y
Biologa Molecular (IUBMB) cre un sistema de nomenclatura basado en las reacciones que
catalizan. En base a esto, las enzimas se clasifican en 6 clases principales (Tabla 3).

Tabla 3: Nomenclatura de las enzimas

1. Oxidorreductasas: catalizan la transferencia de electrones de un compuesto a otro,
es decir, catalizan reacciones de oxidorreduccin (Ej: lactato deshidrogenasa, glucosa
oxidasa).
2. Transferasas: Catalizan la transferencia de un grupo qumico de una sustancia a
otra (Ej: hexoquinasa, aspartato aminotransferasa).

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3. Hidrolasas: catalizan la ruptura de enlaces por adicin de agua (Ej:

acetilcolinesterasa, tripsina, amilasa).
4. Liasas: catalizan reacciones en las que se eliminan grupos (CO2, H2O y NH3) para
formar un doble enlace o aadir un doble enlace (Ej: descarboxilasa cuando se elimina CO2,
deshidratasa cuando se elimina H2O y aldolasas cuando se eliminan grupo s aldehdos).
5. Isomerasas: estas enzimas transforman un compuesto en alguno de sus ismeros
(los ismeros son compuestos que tienen los mismos tomos pero diferente arreglo en el
espacio). (Ej: epimerasas, racemasas, cicloisomerasas, tautomerasas)
6. Ligasas o sintetasas: estas enzimas forman uniones covalentes entre dos grupos
compuestos, la reaccin es endergnica y requiere la ruptura de molculas de ATP que
proporcionen energa. Estas enzimas catalizan la unin de dos molculas (Ej. glutamina
sintetasa)
ENZIMAS DE IMPORTANCIA CLNICA
Las enzimas son empleadas en los laboratorios clnicos y en las investigaciones
biomdicas como reactivos biolgicos para la determinacin de analitos. Pero tambin la
medicin de sus niveles de actividad en el suero u otras muestras biolgicas constituye una
herramienta eficaz para el diagnstico y pronstico de una enfermedad.
Enzimas presentes en el plasma sanguneo:
Se ha definido al plasma sanguneo como un receptculo pasivo que recibe las
enzimas procedentes de los tejidos y de los componentes celulares de la sangre.
De acuerdo a Bcher, las enzimas plasmticas se clasifican en (Tabla 4):
a- Enzimas del plasma especficas
b- Enzimas del plasma no especficas
a- Las enzimas del plasma especficas: Son las enzimas que actan en el plasma.
Estas enzimas son sintetizadas en determinados tejidos y son vertidas activamente a la
sangre, donde encuentran su sustrato y pueden actuar. A este grupo pertenecen las enzimas
del complejo protrombnico, lipoprotenlipasa, plasmingeno y pseudocolinesterasa. Este
grupo de enzimas son sintetizadas en el hepatocito y son muy activas en el plasma. La
determinacin de la actividad de estas enzimas tiene inters clnico en la evaluacin tanto de
la funcin propia de la enzima como de la funcin del tejido que la sintetiza. Por ejemplo,
una disminucin en su actividad (la cual es normalmente alta en el suero) indica una
alteracin en su sntesis, y como la mayora son producidas en el hgado, esto nos estara
indicando una alteracin de la funcionalidad heptica.
b- Las enzimas del plasma no especficas: no desempean funciones biolgicas en el
plasma; por tanto, no son constituyentes funcionales plasmticos y slo se aprecia una muy
pequea actividad en condiciones normales, debido a la renovacin celular natural o
pequeos traumatismos espontneos. Su presencia en plasma en niveles ms altos de lo
normal sugiere un aumento en la velocidad de destruccin celular y tisular. La
determinacin los niveles de estas enzimas plasmticas puede proveer informacin valiosa
para diagnstico y pronstico. Sin embargo, no siempre niveles elevados de enzimas en
plasma pueden ser interpretados como evidencia de necrosis celular ya que, por ejemplo, la
realizacin de ejercicio vigoroso libera cantidades significativas de enzimas musculares. Las
enzimas del plasma no especficas pueden clasificarse en:
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1. Enzimas de secrecin: son enzimas secretadas por glndulas o tejidos muy

especializados que ejercen su actividad fuera de las clulas que las originaron. Se producen
en las glndulas exocrinas, como el pncreas (enzimas o fermentos digestivos) y prstata, as
como en tejidos como mucosa gstrica y hueso. Clnicamente estas enzimas tienen muy baja
actividad en sangre y sus niveles aumentan en patologas agudas y crnicas. Por ejemplo, en
adenocarcinoma y osteosarcoma se observa un aumento importante de la actividad
plasmtica de las fosfatasas cida y alcalina. La amilasa, lipasa pancreticas y el
pepsingeno, se encuentran en muy bajas concentraciones en el plasma y aumentan en
sangre por alteraciones que permiten el pasaje desde la glndula de origen hacia el espacio
intersticial, por ejemplo, en obstrucciones del conducto pancretico o procesos inflamatorios
serios del pncreas.
2. Enzimas celulares del metabolismo intermedio: Son todas las enzimas que tienen
su lugar de accin dentro de la misma clula que las sintetiza, no tienen lugar de accin en el
plasma. La membrana plasmtica normal no permite el paso de enzimas a travs de ella, por
lo tanto estas se mantienen dentro de la clula y solo se encuentran en cantidades muy
reducidas en el espacio intersticial y plasma sanguneo. Una alteracin muy intensa de la
membrana puede determinar la aparicin de estas enzimas en plasma (procesos
inflamatorios serios, falta de irrigacin sangunea). Si la clula es alterada la membrana se
deteriora y si el proceso es grave, se produce su destruccin. En estos casos, el contenido
celular, incluidas las enzimas, se libera al espacio intersticial y de all llegan a la sangre.
Cuanto mayor es el nmero de clulas daadas, mayor nivel de enzimas se encontrar en el
plasma. Algunas de las enzimas de este grupo son: aspartato aminotransferasa (AST) o
glutmico-oxalactico transaminasa (GOT), alanina amino transferasa (ALT) o glutmico
pirvico transaminasa (GPT), lactato deshidrogenasa (LDH), creatn fosfoquinasa (CK),
amilasa, -glutamiltranspeptidasa (GGT), 5nucleotidasa y aldolasa (ALS). A veces la
alteracin consiste en un simple cambio a nivel de la membrana celular, que posibilita la
salida de aquellas enzimas presentes en el citoplasma de la clula. Otras veces, determinadas
estructuras intracelulares, como las mitocondrias por ejemplo, resultan daadas y permiten
la salida de enzimas que tienen esa localizacin. Cuanto mayor sea el rea lesionada y ms
intensa la agresin, ms debe esperarse el incremento de la actividad enzimtica en el suero.
Aunque desde el punto de vista biolgico son muchas las enzimas importantes, el inters
clnico se centra en el estudio de aquellas cuyas variaciones son indicadoras de enfermedad o
de alteraciones funcionales.
CLASIFICACIN DE LAS ENZIMAS QUE APARECEN EN EL PLASMA SEGN SU
ORIGEN
GRUPO
EJEMPLO
Protrombina, plasmingeno,
Especficas del plasma
ceruloplasmina, lipoprotenlipasa,
pseudocolinesterasa
Amilasa pacretica, amilasa salival,
De secrecin
fosfatasa prosttica, pepsingeno
No especficas del
LDH, MDH, glicerol-3-fosfato
plasma
Celulares
deshidrogenasa, GOT, GPT, glucosa-6fosfatasa
Tabla 4: Clasificacin de las enzimas plasmticas

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ENZIMAS CELULARES DEL METABOLISMO INTERMEDIO: MECANISMOS

DE LIBERACIN AL PLASMA SANGUINEO
La membrana plasmtica constituye un medio de retencin de las enzimas
intracelulares. El mantenimiento de la integridad de la membrana plasmtica depende en
gran medida de la actividad metablica, la cual genera la energa necesaria para los
diferentes procesos vitales que se realizan en la clula. Si por cualquier causa se altera la
produccin de energa, ya sea por una disminucin de los sustratos oxidables o de oxgeno, o
bien por errores metablicos congnitos que impidan un metabolismo normal, se promueve
el recambio celular o el escape de las enzimas de clulas sanas. Entre las principales causas
de dao o muerte celular se encuentran los siguientes:
Hipoxia
Presencia de microorganismos (bacterias, parsitos, virus)
Agentes qumicos, fsicos y farmacolgicos
Mecanismos inmunitarios
Trastornos nutricionales
Hipoxia: La hipoxia (o falta de tensin celular de oxgeno) en las clulas o tejidos
puede atribuirse a diferentes causas, como por ejemplo, la deficiencia en el transporte del
oxgeno como sucede en las anemias; la oxigenacin deficiente debida a un fallo
cardiorespiratorio, o por estrechamiento (ej. aterosclerosis) o bloqueo (trombosis) de las
arterias o venas.
Presencia de microorganismos: presencia de bacterias, virus, hongos, as como
protozoos y helmintos. El ataque directo de ellos sobre las membranas celulares promover
tambin la salida de enzimas intracelulares a la circulacin sangunea.
Agentes qumicos, fsicos y farmacolgicos: la contaminacin ambiental es fuente
de agentes qumicos que resultan inhibidores de diversos procesos metablicos, por ejemplo
el mercurio y plomo. El alcoholismo y el tabaquismo pueden conducir a una alteracin de los
niveles sricos de las enzimas. Por ejemplo en el alcoholismo se observa el fenmeno de la
induccin enzimtica (mayor sntesis de protena enzima), que puede aumentar la
produccin de enzimas como la -glutamil transpeptidasa (GGT) y por tanto la elevacin de
sus niveles sricos. Los frmacos tambin pueden alterar los niveles sricos de las enzimas al
actuar por diferentes mecanismos: liberacin de enzimas de membrana, induccin o
represin de la sntesis enzimtica o por modificaciones del flujo biliar. Un ejemplo del
primer caso es la imipramina que por su accin detergente sobre las membranas de los
hepatocitos provoca un aumento de la GGT srica; en el caso del fenobarbital se induce la
sntesis de la GGT y se perturba el flujo biliar, desorganizando las estructuras lipdicas de las
membranas de los hepatocitos; y por ltimo, los anticonvulsivos al igual que la mayora de
los frmacos liposolubles son inductores enzimticos y producen un aumento de ms de un
70% de la ALT srica y ms de un 200% de la GGT.
Mecanismos inmunitarios: Los procesos autoinmunes, alergias, anafilaxis, generan
citotoxicidad y formacin de complejos inmunitarios con destruccin de tipos celulares
especficos.
Trastornos nutricionales: Por ejemplo en la malnutricin proteico-calrica, y en las
deficiencias de vitaminas y/o minerales.

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FACTORES QUE DETERMINAN LA CONCENTRACION Y ACTIVIDAD

ENZIMATICA EN SUERO
Al producirse el dao o la muerte celular, las molculas pequeas son las primeras en
liberarse y escapar a la circulacin. Posteriormente se liberan las macromolculas, entre las
que se encuentran las enzimas, y finalmente todo el contenido celular. La liberacin y
velocidad de aparicin de las enzimas en la circulacin depende de la localizacin
intracelular y de las caractersticas del rgano o tejido daado. La aparicin o aumento en
suero de las enzimas del citosol refleja solo un dao de la membrana, mientras que el
aumento de las enzimas localizadas en organelas, aporta informacin acerca de procesos
destructivos y necrosis celular.
La aparicin de las enzimas en el suero depende de la forma en que logren el paso
desde el lquido intersticial a la sangre, lo que vara de un tejido a otro. Por ejemplo, el
hgado es un rgano altamente vascularizado, con capilares muy permeables por lo que
permite el paso directo de las enzimas a la sangre, mientras que en el caso del msculo
esqueltico con capilares muy poco permeables, las enzimas pasan a la sangre a travs de la
linfa.
Adems de conocer la localizacin intracelular de las enzimas y su paso a la sangre,
es importante tambin cmo se realiza el proceso de clarificacin de las enzimas que llegan al
torrente circulatorio.
Clarificacin o depuracin de las enzimas volcadas al plasma por daos celulares:
El peso molecular de la mayora de las enzimas impide que puedan ser filtradas por
el glomrulo en los riones sanos, por lo que la excrecin a travs de la orina no es la va
principal de eliminacin de las enzimas presentes en el plasma. Una excepcin la constituye
la amilasa de gran valor en las enfermedades pancreticas, que por su pequeo peso
molecular (40 kDa) atraviesa los glomrulos renales y aumenta su excrecin por la orina.
En definitiva, las vas de eliminacin de enzimas sricas son:
a- Eliminacin renal: se cumple para aquellas de bajo peso molecular. Ej: amilasa y
algunas fosfatasas.
b- Inactivacin srica: existen inactivadores o inhibidores para varias enzimas: Ej:
tripsina, quimiotripsina. Luego son eliminadas rpidamente, con la participacin del sistema
retculo endotelial en un proceso de endocitosis mediada por receptor.
c- Para algunas enzimas existe recaptacin por parte de los tejidos convalecientes, al
restablecerse anatmica y fisiolgicamente. Esta pequesima parte de las enzimas
previamente liberadas sera utilizada, no para su funcin primitiva, sino como integrante de
un pool (reservorio) de aminocidos.
La cantidad y duracin de la actividad enzimtica suministran datos acerca del
alcance del dao del tejido. Una actividad enzimtica aumentada durante un tiempo
prolongado sugiere un dao crnico, por el contrario en el caso de las enfermedades agudas
tiene lugar un rpido aumento y un rpido descenso de la actividad enzimtica. La
utilizacin de las enzimas en el diagnstico clnico depende de su vida media despus de su
salida del interior de la clula. La vida media de las enzimas en el plasma vara de 6 a 48 h
(Tabla 5).

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Enzima
Vida Media Promedio
Glutmico-pirvico transaminasa (GPT o ALT)
47 10 horas
Glutmico-oxalactico transaminasa (GOT o AST) 17 5 horas
Glutamato deshidrogenasa (GLDH)
18 1 horas
Lactato deshidrogenasa (LDH)
113 60 horas
Creatn fosfoquinasa (CK)
15 horas aproximadamente
Fosfatasa alcalina
3-7 das
-glutamiltranspeptidasa (GGT)
3-4 das
Colinesterasa (CHE)
10 das aproximadamente
Amilasa
3-6 horas
Lipasa
3-6 horas
Tabla 5: Depuracin de enzimas plasmticas no especficas.
ENZIMAS FRECUENTEMENTE ANALIZADAS EN CLINICA

Transaminasas hepticas (ALT o GPT y AST o GOT)

amilasa
Creatn fosfoquinasa (CK)
Fosfatasa cida (AcP)
Fosfatasa alcalina (ALP)
-glutamil transpeptidasa (GGT)
Lctico deshidrogenasa (LDH)
5-nucleotidasa (NTP)

Lactato deshidrogenasa (LDH):

La LDH es una enzima tetramrica formada por la combinacin de dos tipos de
cadenas diferentes: H y M. Estas cadenas pueden combinarse de maneras diferentes dando
lugar a 5 isoenzimas (Tabla 6).
Lactato deshidrogenasa
Tipo

Composicin

Localizacin

LDH1 HHHH

Miocardio, eritrocito, rin, pncreas

LDH2 HHHM

Miocardio, eritrocito, rin

LDH3 HHMM

Pncreas, pulmn, leucocitos

LDH4 HMMM

Hgado, msculo esqueltico

LDH5 MMMM

Hgado, msculo esqueltico

Tabla 6: Isoenzimas de la lactato deshidrogenasa.

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Los niveles sricos aumentados de LDH se observan en muchas circunstancias como

son las anemias megaloblsticas, infarto de miocardio y pulmonar, etc. El gran nmero de
situaciones en donde aumenta la actividad de LDH hace relativa su utilidad diagnstica. Sin
embargo, es muy til en el seguimiento de la quimioterapia del cncer puesto que la
respuesta en la teraputica se acompaa por una disminucin del nivel srico de esta enzima.
La determinacin de la actividad de LDH es til en el diagnstico del infarto de miocardio y
pulmonar. Son muy caractersticos los niveles de LDH elevados en los casos de infarto de
miocardio y se observan valores altos ya a las pocas horas del comienzo del aparente infarto.
Por si sola, la determinacin de LDH no es determinante de lesin de ningn rgano en
particular. Hay que tener en cuenta que es necesario evitar la hemlisis de la muestra de
sangre, para una correcta determinacin.
Transaminasas (GOT y GPT):
La GOT est elevada en suero en pacientes con enfermedades hepatobiliares,
cardiovasculares y miopatas. La GPT est elevada en el suero de enfermos hepticos.
Fosfatasas:
Fosfatasa alcalina: se encuentra aumentada en las enfermedades hepticas. Los
nios en crecimiento y las mujeres embarazadas en el tercer trimestre presentan valores
fisiolgicamente elevados de fosfatasa alcalina en suero. La determinacin de la fosfatasa
alcalina en suero es til para reconocer las enfermedades seas, sobre todo la ostetis
deformante, hipoparatiroidismo y neoplasias seas. La elevacin de la fosfatasa alcalina
srica en algunas enfermedades hepticas puede ser distinguida mediante otras pruebas de
laboratorio y por sus rasgos clnicos.
Fosfatasa cida: se observan valores elevados en pacientes con carcinoma prosttico.
En la mayora de los casos, los cambios que se observan en los niveles de actividad o
la concentracin de las enzimas del plasma permiten inferir la localizacin y la naturaleza de
los cambios patolgicos que se producen en determinados tejidos del cuerpo.
Sin embargo, hay que tener en cuenta que muchos procesos fisiolgicos normales
pueden provocar aumentos en el suero de algunas enzimas, que no se relacionan con una
enfermedad. Son ejemplo de ello, el aumento en los niveles y actividad de fosfatasa alcalina
por los osteoblastos productores de hueso en los nios en estado de crecimiento, lo que debe
diferenciarse del aumento por actividad osteoblstica en varias enfermedades seas.
ENZIMOLOGA DE LAS ENFERMEDADES DEL CORAZN, HGADO Y
PNCREAS
Las enfermedades del corazn, hgado y pncreas son las que con mayor frecuencia
aparecen en la poblacin, por ello la importancia de la aplicacin de la enzimologa al
diagnstico y evolucin de estas enfermedades.
Determinacin de enzimas sricas en infarto de miocardio:
El trmino infarto agudo de miocardio (IAM) se refiere a la muerte del tejido cardiaco
resultante de la ausencia del flujo sanguneo a las clulas musculares del corazn (Figura
6). Usualmente implica un sndrome clnico clsico, caracterizado por el comienzo sbito de
los sntomas tpicos (dolor opresivo y constante en el pecho que irradia a los brazos, sudor
fro, dolor que llega al cuello y mandbula, dificultad respiratoria), seguidos de alteraciones
electrocardiogrficas e incrementos transitorios de los niveles sricos de las enzimas
liberadas por el miocardio. En dicho sndrome, la oclusin trombtica sbita y total de una
arteria coronaria, causa un infarto que generalmente compromete todo el espesor del
segmento de la pared ventricular irrigado por la arteria comprometida.
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Figura 6: Infarto agudo de miocardio.

Las clulas miocrdicas irreversiblemente lesionadas liberan ciertas enzimas a la
circulacin y su medicin nos proporciona una herramienta de gran utilidad para el
diagnstico del infarto agudo de miocardio. La figura 7 nos ilustra el comportamiento
general de la isoenzima MB de la creatin fosfoquinasa (CK), la lactato deshidrogenasa
(LDH) y la glutmico-oxalactico transaminasa (GOT o AST) desde el comienzo del dolor
precordial en los pacientes con infarto agudo.

Figura 7: Perfil plasmtico tpico de las enzimas liberadas durante el infarto agudo de
miocardio.
1. Lactato deshidrogenasa (LDH): La actividad total de esta enzima supera el rango
normal a las 24-48 horas luego del comienzo del infarto, tiene un pico entre el tercero y el
sexto da, para regresar a valores normales cerca del da catorce. La elevacin de esta enzima
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es un indicador muy sensible pero poco especifico de infarto del miocardio, pues algunas
entidades pueden producir incrementos plasmticos de LDH, como sucede en los pacientes
con hemlisis, anemia megaloblstica, leucemia, enfermedad o congestin heptica,
enfermedad renal, tumores, embolismo pulmonar, miocarditis, enfermedades del msculo
esqueltico. Existen 5 isoenzimas de LDH (numeradas de 1 a 5 de acuerdo con su capacidad
de migracin electrofortica), cuya medicin puede mejorar la capacidad diagnstica del
estudio, pues la LDH1 se encuentra principalmente en el corazn, mientras que la LDH4 y la
LDH5 estn en el hgado y el msculo esqueltico. La elevacin de LDH1 precede a la
elevacin de LDH total en aproximadamente 8 horas. Como la hemlisis puede tambin
incrementar los niveles de esta isoenzima, se debe tener mucho cuidado en el manejo de la
sangre al obtener la muestra para anlisis en el laboratorio. La medicin de las isoenzimas de
LDH puede ser muy til cuando se espera que los niveles de CK-MB se encuentren bajos
(infartos de 2 a 4 das de evolucin), pero la titulacin rutinaria de estas isoenzimas no se
justifica en todos los pacientes.
2. Glutmico-oxalactico transaminasa o aspartato aminotransferasa (GOT o
AST): los niveles plasmticos de esta enzima se empiezan a elevar a las 8 a 12 horas del
infarto y alcanzan un pico a las 24-48 horas, normalizndose en 3-4 das.
3. Creatn fosfoquinasa (CK): es una enzima dimrica formada por monmeros que
pueden ser de dos tipos: M y B. Por lo tanto la CK tiene 3 isoenzimas: CK-MM o CK3
(localizacin muscular), CK-MB o CK2 (localizacin cardaca) y CK-BB o CK1 (localizacin
cerebral) (Tabla 7). Se utiliza la medicin en suero de la isoenzima CK-MB como marcador
de IAM.
Creatn fosfoquinasa
Tipo

Composicin

Localizacin

CK1

BB

Cerebro

CK2

MB

Corazn

CK3

MM

Msculo esqueltico

Tabla 7: Isoenzimas de la creatn fosfoquinasa.

La actividad de isoenzima CK-MB supera el rango normal entre 4 y 8 horas de
iniciados los sntomas de infarto agudo de miocardio, declinando a valores bsales cerca del
tercero o cuarto da. El pico enzimtico es variable, pues puede ser precoz (8 horas) o muy
tardo (58 horas), siendo la media del pico de actividad de CK-MB de 24 horas. Aunque la
elevacin plasmtica de los niveles totales de CK-MB es muy sensible para el diagnstico de
infarto, existen cerca de un 15% de falsos positivos que se presentan en pacientes con
enfermedades musculares, intoxicacin alcohlica, diabetes, trauma msculo-esqueltico,
ejercicio extenuante, convulsiones, inyecciones intramusculares, embolismo pulmonar, etc.
La medicin de la isoenzima CK-MB contina siendo el mtodo bioqumico ms aceptado
para el diagnstico del infarto agudo de miocardio.
Determinacin de enzimas sricas hepticas:
El hgado es una glndula importante, no solo porque en l se realiza la sntesis
proteica, sino tambin porque se llevan a cabo procesos de detoxificacin de una serie de
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Bioqumica

Tema 7: Enzimas. Enzimologa clnica

Ao: 2013

compuestos que deben ser eliminados de nuestro organismo. Contiene un gran nmero de
enzimas, pero las que tienen mayor inters clnico son las transaminasas, la fosfatasa
alcalina, la -glutamil transpeptidasa y la 5-nucleotidasa.
1. Transaminasas: son enzimas que realizan reacciones de transaminacin dando
lugar a aminocidos y cetocidos distintos de los originales. Las transaminasas con valor
clnico son la GOT y la GPT. Estas enzimas no son especficas del hgado y se hallan tambin
en msculo, corazn, pncreas y cerebro. La GOT est constituida por dos isoenzimas, una
citoplasmtica y otra mitocondrial, mientras que la GPT es exclusivamente citoplasmtica.
La concentracin de estas enzimas en el interior del hepatocito es muy elevada y cada vez
que se altera difusamente la permeabilidad de la membrana citoplasmtica, sea por necrosis
o por inflamacin, las transaminasas experimentan un aumento de actividad en sangre
perifrica. Las concentraciones normales de estas enzimas en plasma se deben a la
destruccin normal de las clulas que la contienen, siendo el cociente normal GOT/GPT de
aproximadamente 1,3. Los requisitos indispensables para una elevacin cuantitativamente
importante de transaminasas son que el dao sea difuso y agudo. Constituyen el examen de
mayor utilidad frente a la sospecha de una inflamacin heptica y habitualmente ponen el
sello del diagnstico de un dao heptico agudo. En todas las enfermedades hepticas que
cursan con necrosis celular existe hipertransaminasemia, ms intensa cuanto ms aguda es la
lesin. Las hepatitis vricas y txicas suelen producir niveles ms de 10 veces superiores a los
normales.
2. -glutamil transpeptidasa: esta enzima cataliza la transferencia de grupos glutamil de un pptido a otro o de un pptido a un aminocido. El tejido ms rico en esta
enzima es el rin, seguido del pncreas, el hgado, el bazo y el pulmn. En las clulas se
localiza en las membranas, fundamentalmente en el retculo endoplsmico liso, en los
microsomas, en la fraccin soluble del citoplasma y en los conductillos biliares. Los valores
normales de GGT difieren en ambos sexos, siendo ms elevados en varones que en mujeres.
La GGT aumenta en la mayora de las enfermedades del hgado, por lo que su especificidad
es escasa. Es una enzima sumamente sensible, aumenta en menor o mayor grado en todas las
hepatobioliopatas y los mayores aumentos se ven en los procesos obstructivos biliares
(colestasis) o neoplsicos. Su sntesis es tambin inducida por alcohol y por los barbitricos.
La GGT es un parmetro muy til para el control de los pacientes alcohlicos.
3. Fosfatasa alcalina: La FAL srica tiene varios orgenes (hgado, rin, placenta,
intestino, huesos, leucocitos), aunque las fuentes ms importantes son el hgado, los huesos y
el intestino. Durante el crecimiento, los niveles sricos son altos debido al aumento dela
fraccin sea, que traduce la actividad osteoblstica en el hueso. Lo mismo ocurre durante el
embarazo, sobre todo en el tercer trimestre, en el que las elevaciones se deben a la FAL de
origen placentario. La FAL tiene tres isoenzimas, una de origen placentario, una intestinal y
una no placentaria/no intestinal. El aumento de la FAL de origen heptico revela
obstruccin biliar, con ictericia (color amarillento de la piel y mucosas, producidas por el
aumento de bilirrubina por encima de 2 mg/dl) o sin ella, o la existencia de un proceso
heptico expansivo, infiltrativo o de naturaleza granulomatosa. Su sntesis est regulada por
la presencia de sales biliares; un aumento de la concentracin intracelular de sales biliares
estimula la sntesis de FAL y por esta razn se elevan en la colestasia intra o extracelular.
Determinacin de enzimas sricas pancreticas:
El pncreas es un rgano muy rico en enzimas almacenadas principalmente en
formas inactivas o zimgenos, que se activan en el intestino para la digestin de los
alimentos.
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Bioqumica

Tema 7: Enzimas. Enzimologa clnica

Ao: 2013

La Pancreatitis Aguda (PA) se define como inflamacin del pncreas y del tejido peripancretico en forma aguda. Las principales causas de pancreatitis son las enfermedades de
las vas biliares (obstruccin del coldoco por clculos biliares) y el alcoholismo crnico. Es
importante distinguir entre su forma leve y grave. La primera se caracteriza por la presencia
de inflamacin local que se traduce en edema de la glndula y con mnima repercusin
sistmica. En la pancreatitis aguda grave, en cambio, la glndula puede tener necrosis,
formaciones de pseudoquistes o abscesos, y muchas veces aparece falla orgnica con
repercusin sistmica importante.

Durante la PA, se observa un aumento significativo de la lipasa, la amilasa y el

tripsingeno. En clnica un alza en la lipasemia mayor a 3 veces o de la amilasemia ms de 4
veces, tienen una alta sensibilidad y especificidad.
1. -Amilasa: en condiciones normales solo el pncreas y las glndulas salivales
contribuyen al mantenimiento de los niveles sricos de esta enzima, por esta razn, procesos
inflamatorios en estos rganos pueden provocar elevaciones de las cifras de la misma. Se
eleva en el plasma entre 2 a 12 veces de su valor normal en la PA. El alza es un evento precoz
y transitorio, de tal forma que se eleva al inicio y dura hasta el tercer a quinto da de
evolucin. Luego puede regresar a valores normales o mantenerse elevada. Es importante
destacar que la amilasa puede estar distorsionada en presencia de altos niveles de
triglicridos, por lo tanto la amilasemia es til en etapas precoces de la PA. El hallazgo de
valores normales no excluye el diagnstico y la magnitud de la amilasemia no guarda
relacin con la gravedad de la PA. No es especfica, existen otras patologas que tambin
provocan su elevacin, ej: cirrosis, insuficiencia renal, obstruccin intestinal. La amilasa, se
filtra por glomrulo por su bajo peso molecular, por tal motivo, es posible determinar la
amilasa en orina.
2. Lipasa: es la segunda determinacin ms frecuentemente empleada para el
diagnstico de pancreatitis aguda. En oposicin al aumento de amilasa, que tambin puede
estar elevada en enfermedades no pancreticas (ej parotiditis), el aumento de lipasa solo
puede deberse a afecciones del pncreas. Su determinacin presenta una mayor especificidad
para pancreatitis (96%), con una sensibilidad de 94%. Se eleva despus que la amilasa y
permanece elevada en el plasma por ms tiempo, incluso hasta dos semanas de iniciado el
cuadro.
3. Un marcador que se ha venido utilizando en los ltimos aos, lo constituye el
tripsingeno. El tripsingeno se encuentra en dos formas isoenzimticas, el tripsingeno-1 o
catinico y el tripsingeno-2 o aninico. Durante la PA se favorece la salida de enzimas
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Tema 7: Enzimas. Enzimologa clnica

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pancreticas a la circulacin entre las que se encuentran el tripsingeno-2 que puede ser
valorado en el suero y la orina.
ENZIMAS SRICAS DE IMPORTANCIA DIAGNSTICA CLNICA
Enzimas
Valor normal
Patologa
Creatn
fosfoquinasa < 160 U/L en Aumento importante: infarto de miocardio
(CK)
varones y < 130 (isoenzima CP-MB)
U/L en mujeres
Aumento moderado: miopatas, distrofia
muscular, accidente cerebro vascular.
Lactato deshidrogenasa < 120-230 U/L
Aumento importante: infarto de miocardio
(LDH)
(LDH1), hepatitis vricas (LDH4 y LDH5)
Aumento moderado: hemlisis, accidente
cerebro-vascular, distrofia muscular.
Glutmico-oxalactico
< 40 U/L
Aumento importante: Infarto de miocardio,
transaminas o aspartato
hepatitis, traumatismos.
aminotransferasa (GOT
Aumento
moderado:
cirrosis,
o AST)
mononucleosis, ictericia, hemlisis.
Glutmico-pirvico
< 50 U/L
Aumento importante: Shock, hepatitis.
transaminasa o alanina
Aumento
moderado:
cirrosis,
aminotransferasa (GPT
mononucleosis, ictericia.
o ALT)
-glutamil
< 35 U/L en Aumento importante: Hepatitis vrica,
transpeptidasa (GGT)
varones y < 25 U/L obstruccin biliar, metstasis hepticas, enf.
en mujeres
alcohlica.
Aumento moderado: infecciones que
afectan
al
hgado
(citomegalovirus,
mononucleosis infecciosa)
Fosfatasa alcalina (FAL) 85-190 U/L en el Aumento importante: ictericia obstructiva,
adulto, hasta 500 colelitiasis, neoplasia de las vas biliares,
U/L en nios en cirrosis, hepatomas.
desarrollo
Aumento moderado: neoplasias seas
osteognicas, osteomalacia, enfermedad de
Paget, hiperparatiroidismo
Fosfatasa cida
< 2 U/L
Aumento importante: hipertrofia o cncer
de
prstata
(isoenzima
prosttica),
hiperparatiroidismo, Hodkin, enf de Paget.
Aumento moderado: enf de Gaucher,
insuficiencia renal aguda, hepatitis, ictericia
obstructiva.
5-Nucleotidasa (NT)
< 9 U/L en el Aumento importante: colestasis intra o
adulto
extraheptica, enfermedades hepatobiliares,
cncer heptico.
-amilasa

< 50 U/L

Lipasa

< 210 U/L

Aumento importante: Pancreatitis aguda y

crnica, cncer e pncreas.
Aumento moderado: parotiditis, algunos
carcinomas, procesos parapancreticos
(gastritis, lcera duodenal, peritonitis,
obstruccin intestinal).
Aumenta durante las pancreatitis agudas.
Puede elevarse tambin en la insuficiencia
renal crnica avanzada y en procesos
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Bioqumica

Tema 7: Enzimas. Enzimologa clnica

Ao: 2013

intestinales agudos.
ENZIMURIA
La utilizacin de las enzimas en la orina es limitada ya que debe asegurarse que su presencia
no procede de eritrocitos, leucocitos, clulas epiteliales y microorganismos.
Las enzimas presentes en la orina pueden tener por tanto diferentes orgenes:
- Procedentes del rin por destruccin celular.
- Reacciones de rechazo al trasplante de rin.
- En un rin sano, su presencia en la orina est limitada por los pesos moleculares. Las
protenas con un peso molecular menor de 60 kDa pueden ser filtradas por el rin y se
excretan en la orina.
La presencia de enzimas en la orina puede servir tambin como criterio de evolucin en las
afecciones renales agudas.

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