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SEROLOGÍA Y CONFIRMACIÓN EN EL BANCO DE SANGRE NOM-253

SEROLOGÍA Y CONFIRMACIÓN EN EL BANCO DE SANGRE NOM-253 Q. JUAN MORENO E. 15-AGOSTO-2016

Q. JUAN MORENO E.

15-AGOSTO-2016

AGENDA

TAMIZAJE Y CONFIRMACIÓN.

1.-

VIH, VIRUS DE LA HEPATITIS B, C.

2.-

SÍFILIS, CHAGAS.

3.-

OTRAS EMERGENTES Y REEMERGENTES.

4.-

5.- CONCLUSIONES.

ANTÍGENOS / ANTICUERPOS

ANTÍGENOS / ANTICUERPOS

INMUNOENSAYOS (EIA).

RIA:

RADIOINMUNOENSAYO UTILIZA ISOTOPOS RADIACTIVOS.

ELISA:

INMUNO ENSAYO ENZIMÁTICO.

FPIA:

INMUNOENSAYO POR POLARIZACIÓN DE FLUORESCENCIA.

MEIA:

INMUNOENSAYO POR MICROPARTÍCULA (micropartículas De látex, reactivo fluorescente con matriz de fibra de vidrio).

CMIA:

INMUNOENSAYO MAGNÉTICO QUIMIOLUMINICENTE (produce Luz, usa micro partículas magnéticas)

OTROS:

ELECTROQUIMIO, LUMINEX, LASER, MULTIPLEX, ETC

Las pruebas de Tamizaje se utilizan para eliminar riesgos a

los receptores de Productos del Banco de Sangre

Las Pruebas de Tamizaje diferencian muestras negativas

de muestras reactivas

Las Pruebas de Tamizaje no definen si una muestra es

Positiva

Se requiere de Pruebas Confirmatorias y/o suplementarias

para definir si una muestra ó prueba Reactiva es Positiva

-TAMIZAJE

 

INTERPRETACIÓN

-ESCRUTINIO

-CRIBADO

REACTIVO

-SCREENING

NO-REACTIVO

-DESPISTAJE

Z. G. Ó DUDOSO

-PRESUNTIVA

CONFIRMATORIAS Y/O SUPLEMENTARIAS

WESTERN BLOT:

IFI:

CULTIVO VIRAL:

ELECTROINMUNOTRANSFERENCIA A PARTIR

DE LISADO VIRAL. (GOLD STANDAR)

INMUNOFLUORESCENCIA.

CULTIVO DEL HIV.

RIBA:

A)

ANTÍGENOS RECOMBINANTES POR

 

INMUNOBLOT.

 

B)

ENSAYOS EN LÍNEA.

C)

INMUNO-DOT

-CONFIRMATORIA Y/O -SUPLEMENTARIA INTERPRETACIÓN POSITIVO NEGATIVO INDETERMINADO

-CONFIRMATORIA

Y/O

-SUPLEMENTARIA

INTERPRETACIÓN

POSITIVO

NEGATIVO

INDETERMINADO

-CONFIRMATORIA Y/O -SUPLEMENTARIA INTERPRETACIÓN POSITIVO NEGATIVO INDETERMINADO

NOM-253-SSA1-2012, Para la disposición de sangre humana y sus componentes con fines terapéuticos.

de sangre humana y sus componentes con fines terapéuticos. NOTIFICACION AL DONANTE: RESULTADOS DE LOS ANÁLISIS

NOTIFICACION AL DONANTE:

RESULTADOS DE LOS ANÁLISIS DE LABORATORIO QUE INDICAN

DONACIÓN NO APTA.

NOM-253-SSA1-2012, Para la disposición de sangre humana y sus componentes con fines terapéuticos.

3.1.124 Prueba suplementaria: análisis de laboratorio adicional que apoya los resultados de las pruebas de

tamizaje, mas no los confirma.

COMPLEMENTARIAS

NAT:

TECNOLOGÍA DE ACIDOS NUCLEICOS

PCR: REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA

DIFERENCIALES Y / O DISCRIMINATORIAS

MULTISPOT:

DIFERENCIA ANTICUERPOS HIV-1 DE HIV-2

GEENIUS HIV1 / HIV2: DIFERENCIA ANTICUERPOS HIV-1 DE HIV-2

Y CONFIRMA AMBOS VIRUS.

APROBADAS POR LA FDA

MONITOREO CLÍNICO

CARGA VIRAL:

CONTEO CD4, CD8:

NÚMERO DE COPIAS POR mm3 DE MUESTRA.

NÚMERO DE LINFOCITOS T.

NOM-253-SSA1-2012, Para la disposición de sangre humana y sus componentes con fines terapéuticos.

3.1.80 Periodo de ventana: el lapso entre el momento del contagio con un

agente infeccioso y el desarrollo de marcadores de infección detectables en

el suero de una persona.

INFECCIÓN DETECCIÓN PERIODO DE VENTANA 0 ¿Por qué es conveniente reducirlo? * Para tener un
INFECCIÓN
DETECCIÓN
PERIODO DE
VENTANA
0
¿Por qué es conveniente reducirlo?
* Para tener un diagnóstico más temprano
* para tener un tratamiento más eficaz
* Para evitar el diagnóstico malo
* Para evitar la contaminación de sangre

TIEMPO

FASE ECLIPSE

FASE ECLIPSE

ALGORITMO: Combinación de pruebas

seleccionadas por una serie de reglas de

decisión, que permiten mejorar la

sensibilidad y especificidad diagnóstica,

para resolver resultados discordantes.

de decisión, que permiten mejorar la sensibilidad y especificidad diagnóstica, para resolver resultados discordantes.

NOM-010-SSA2-2010, Para la prevención y el control de la infección por Virus de la Inmunodeficiencia Humana.

4.4.6 Cuando dos pruebas (en secuencia o

en paralelo) exhiben resultados diferentes (una es reactiva y la otra no es reactiva) el resultado se describe como discordante.

ALGORITMO DE CONFIRMACIÓN PARA HIV-2

ALGORITMO DE CONFIRMACIÓN PARA HIV-2

Frecuencia

NOM-253-SSA1-2012, Para la disposición de sangre humana y sus componentes con fines terapéuticos.

3.1.131 Sensibilidad: capacidad de una prueba de laboratorio para detectar verdaderos reactivos o verdaderos positivos.

20

40

80

160

320

640

1.280

2.560

ENFERMOS

20 40 80 160 320 640 1.280 2.560 ENFERMOS Valor de corte en γ : Menor

Valor de corte en γ:

Menor sensibilidad = sangre insegura Mayor especificidad = menor descarte de unidades

100%

= máxima sensibilidad  = máximas especificidad y sensibilidad Indeterminaci  = máxima especificidad ón
= máxima sensibilidad
= máximas especificidad
y sensibilidad
Indeterminaci
= máxima especificidad
ón
Zona gris
Valor de corte en β:
Mayor (Y) Índice de Youden
10
10

SANOS

Valor de corte en α:

Mayor sensibilidad = sangre segura Menor especificidad = descarte de unidades

NOM-253-SSA1-2012, Para la disposición de sangre humana y sus componentes con fines terapéuticos.

3.1.47 Especificidad: capacidad de una prueba de laboratorio para

identificar todos los negativos o no reactivos correctamente.

100% = máxima sensibilidad SANOS ENFERMOS  = máximas especificidad y sensibilidad Indeterminaci  =
100%
= máxima sensibilidad
SANOS
ENFERMOS
= máximas especificidad
y sensibilidad
Indeterminaci
= máxima especificidad
ón
Zona gris
Valor de corte en β:
Mayor (Y) Índice de Youden
10
20
40
80
160
320
640
1.280
2.560
Valor de corte en α:
Valor de corte en γ:
Mayor sensibilidad = sangre segura
Menor especificidad = descarte de
unidades
Menor sensibilidad = sangre insegura
Mayor especificidad = menor descarte de
unidades
Frecuencia

GENERACIONES PRUEBAS DE TAMIZAJE PARA HIV

1ª GENERACIÓN:

- LISADO VIRAL VIH-1

2ª GENERACIÓN:

- PÉPTIDOS SINTÉTICOS VIH-1 y VIH-2

3ª GENERACIÓN :

- PÉPTIDOS SINTÉTICOS VIH-1 y VIH-2

- PROTEÍNAS RECOMBINANTES

- DETECCIÓN GRUPO “O” y “M” GENERACIÓN :

- DETECCIÓN Ab/Ag (ANTÍGENO p24)

GENERACIÓN :

- DETECCIÓN Ab/Ag TECNOLOGÍA LASER MULTIPLEX

4ª GENERACIÓN : - DETECCIÓN Ab/Ag ( ANTÍGENO p24) 5ª GENERACIÓN : - DETECCIÓN Ab/Ag TECNOLOGÍA
4ª GENERACIÓN : - DETECCIÓN Ab/Ag ( ANTÍGENO p24) 5ª GENERACIÓN : - DETECCIÓN Ab/Ag TECNOLOGÍA
4ª GENERACIÓN : - DETECCIÓN Ab/Ag ( ANTÍGENO p24) 5ª GENERACIÓN : - DETECCIÓN Ab/Ag TECNOLOGÍA

¿Y si existe una prueba reactiva?

¿Y si existe una prueba reactiva?

VIH

9.4.12 Detección del virus de la inmunodeficiencia humana, tipos 1 y 2

9.4.12.1 Tamizaje. Se deberá realizar mediante pruebas de marcadores de infección del virus que tengan una sensibilidad 99.5% y una especificidad 99%, entre las siguientes:

a)

Ensayo inmunoenzimático combinado para la determinación de

antígenos y anticuerpos virales;

Ensayo inmunoenzimático;

b)

Inmunoensayo por quimioluminiscencia, y

Otras que tengan sensibilidad y especificidad igual o mayor.

9.4.12.2 Confirmatoria. La confirmación se deberá realizar mediante una

c)

d)

prueba de detección de anticuerpos contra el VIH tipos 1 y 2, entre cualquiera de las siguientes:

Inmunoelectrotransferencia (Western blot);

Inmunofluorescencia;

Inmunoensayo recombinante, u

Otras metodologías más avanzadas.

-

-

-

-

LA CONFIRMACÍÓN DEL VIH Electroinmunotransferencia ( Western blot ); INMUNOBLOT
LA CONFIRMACÍÓN DEL VIH Electroinmunotransferencia ( Western blot ); INMUNOBLOT

LA CONFIRMACÍÓN DEL VIH

Electroinmunotransferencia (Western blot); INMUNOBLOT

Evolución de la Infección VIH (Típica)

Evolución de la Infección VIH (Típica) RNA [ ] IgG IgM Ag IgA Limite de Detección
RNA [ ] IgG IgM Ag IgA Limite de Detección t
RNA
[ ]
IgG
IgM
Ag
IgA
Limite de Detección
t

Evolución de la Infección VIH (Atípica)

Evolución de la Infección VIH (Atípica) RNA [ ] IgG IgA IgM Ag Limite de Detección
RNA [ ] IgG IgA IgM Ag Limite de Detección t
RNA
[ ]
IgG
IgA
IgM
Ag
Limite de Detección
t

Prueba Confirmatoria: Western Blot

TIRAS DE NITROCELULOSA CON PROTEÍNAS VIRALES SEPARADAS POR ELECTROFORESIS

ESTÁNDAR DE ORO

MUY ESPECIFICA, POCO SENSIBLE

DEFINE SUBTIPOS O VARIANTES

PROTEÍNAS Y GLICOPROTEÍNAS ESTRUCTURARES

PROTEÍNAS Y GLICOPROTEÍNAS ESTRUCTURARES

INTERPRETACIÓN

INTERPRETACIÓN
INTERPRETACIÓN
INTERPRETACIÓN

REACCIONES CRUZADAS / INDETERMINADOS

REACCIONES CRUZADAS / INDETERMINADOS
TAMIZAJE Y CONFIRMACÍÓN DE HCV

TAMIZAJE Y CONFIRMACÍÓN DE HCV

GENERACIONES PRUEBAS DE TAMIZAJE HCV

1a GENERACIÓN:

- c100-3 (APROBADA POR LA FDA EN 1990)

2a GENERACIÓN:

- PROTEÍNAS RECOMBINANTES DE NUCLEOCAPSIDE, NS3 Y NS4

3a GENERACIÓN :

- PÉPTIDOS SINTÉTICOS DE NUCLEOCAPSIDE

- PROTEÍNAS RECOMBINANTES DE NS3 Y NS4

4a GENERACIÓN :

- DETECCIÓN Ab/Ag

- PEPTIDO MUTANTE DE CAPCIDE

NUCLEOCAPSIDE - PROTEÍNAS RECOMBINANTES DE NS3 Y NS4 4a GENERACIÓN : - DETECCIÓN Ab/Ag - PEPTIDO
NUCLEOCAPSIDE - PROTEÍNAS RECOMBINANTES DE NS3 Y NS4 4a GENERACIÓN : - DETECCIÓN Ab/Ag - PEPTIDO
NUCLEOCAPSIDE - PROTEÍNAS RECOMBINANTES DE NS3 Y NS4 4a GENERACIÓN : - DETECCIÓN Ab/Ag - PEPTIDO

Serología de HCV

Serología de HCV

HEPATITIS C

9.4.11 Detección del virus C de la hepatitis

9.4.11.1 Tamizaje. Se deberá realizar mediante pruebas de detección de anticuerpos contra el virus o detección

simultanea de antígenos virales y anticuerpos contra el

virus que tengan una sensibilidad 99.5% y especificidad 99%, entre las siguientes:

Ensayo inmunoenzimático;

a)

Inmunoensayo por quimioluminiscencia, y

Otras con sensibilidad y especificidad igual o mayor.

b)

c)

9.4.11.2 Confirmatoria. Se deberá realizar mediante la

prueba de “inmunoblot” recombinante u otras con

sensibilidad y especificidad igual o mayor.

Organización genómica del HCV y

Biologicos Usados para la identificación Anti-HCV

Core peptides NS3 Rec. Protein NS4 Rec. Protein NS4 peptides
Core peptides
NS3 Rec. Protein
NS4 Rec. Protein
NS4 peptides

Cuatro antígenos HCV sensibilizan la membrana del inmunoblot del Deciscan.

Dos antígenos de cápside C1 y C2

Dos antígenos no estructurales NS3 y NS4

Los péptidos son seleccionados por su alta inmunogenicidad

La membrana del inmunoblot se fija a una tira de plástico.

Deciscan RIBA (Recombinant Inmuno Blot Assay)

Tiras de control

Un control negativo y otro positivo

El control positivo.

La banda control anti-IgG y las cuatro bandas de HCV

son claramente visibles.

No hay señal de la banda GST.

El control negativo

Solamente la banda control anti IgG es visible.

No se observa ninguna otra señal.

Tira de muestra

La banda control anti-IgG es claramente visible (sin esta banda, el ensayo no se valida).

NS4

NS3

C2

C1

Anti IgG Control

(sin esta banda, el ensayo no se valida). NS4 NS3 C2 C1 Anti IgG Control Banda

Banda Control Positiva

Banda Control Negativa

ESPECIFICIDAD

Muestras

Total de muestras

probadas

Especificidad

(%)

Muestras de donadores de sangre

474 muestras

100%

Negativo: 95.36% Indeterminados: 4.64%

Especificidad clínica

240 muestras

100%

Negativo 91,25% Indeterminado (21 /240) 8,75% Probable positivo (2/240) 0.8%

Reactividad cruzada Incluyendo mujeres embarazadas

91 muestras

100%

Negativo 98%

+ 1 prob positivo mieloma (1%)

+ 1 VZV indeterminado (1%)

Límites del inmunoblot

En caso de un resultado de inmunoblot positivo, debe

investigarse

mas

antes

de

iniciar

tratamiento o

procedimiento invasivo.

 

En

el

caso

de

población

de

alto

riesgo

(pacientes

inmunosuprimidos,

hemodializados,

etc)

los

anti

HCV

pueden

no

ser

detectados

debido

a

bajo

nivel

de

concentración.

 

Un inmunoblot negativo puede ser seguido por ensayos de

RNA.

TAMIZAJE Y CONFIRMACÍÓN DE LA HEPATITIS B

TAMIZAJE Y CONFIRMACÍÓN DE LA HEPATITIS B

GENERACIONES PRUEBAS DE TAMIZAJE HBs Ag

ULTIMA GENERACIÓN :

SENSIBILIDAD ANALÍTICA

ULTIMA GENERACIÓN : SENSIBILIDAD ANALÍTICA Menos de 50 Picogramos/ml (Mezclas oficiales de los subtipos del HBs

Menos de 50 Picogramos/ml

(Mezclas oficiales de los subtipos del HBs Ag ad y ay)

(Mezclas oficiales de los subtipos del HBs Ag ad y ay ) (fase sólida sensibilizada con
(Mezclas oficiales de los subtipos del HBs Ag ad y ay ) (fase sólida sensibilizada con

(fase sólida sensibilizada con Tres anticuerpos monoclonales)

(Detección de mutantes y variantes)

ESTRUCTURA DEL VIRUS DE LA HEP- B

HBc Ag HBs Ag DNA DNA polymerase Virion (Partícula de Dane)
HBc Ag
HBs Ag
DNA
DNA polymerase
Virion (Partícula de Dane)

HEPATITIS B

9.4.10 Detección del Virus B de la hepatitis

9.4.10.1 Tamizaje. Se deberá realizar mediante pruebas de

detección del antígeno de superficie del virus B de la hepatitis, con pruebas que tengan una sensibilidad 99.5 % y especificidad 99.0 %,

tales como:

Ensayo inmunoenzimático;

a)

Inmunoensayo por quimioluminiscencia, y

Otras con sensibilidad y especificidad igual o mayor.

El control de calidad de la prueba de tamizaje efectuado en cada

b)

c)

corrida, se demuestra cuando la prueba tiene una sensibilidad suficiente para detectar un control positivo débil.

9.4.10.2 Confirmatoria. Se deberán realizar mediante la detección

de antígenos con una prueba de neutralización con anticuerpos con

especificidad 99.5%.

GENOTIPOS

GENOTIPOS

SEROLOGÍA DE HEPATITIS B

HBsAg Anti HBc IgM Anti HBc Anti HBs Anti HBe HBeAg
HBsAg
Anti HBc IgM
Anti HBc
Anti HBs
Anti HBe
HBeAg

HBsAg

Anti HBc-HBsAg

Anti HBc IgM

Anti HBc

Anti HBs

Marcadores serológicos

MARCADORES SEROLÓGICOS DE HB

HBs Ag

HBe Ag

HBe Ac

HBc Ac

HBs Ac

INTERPRETACION

Positivo

Positivo

Negativo

Negativo

Negativo

Periodo de incubación de una hepatitis aguda

Positivo

Positivo

Negativo

Positivo

Negativo

Hepatitis aguda o Hepatitis crónica

Positivo

Negativo

Positivo

Positivo

Negativo

Hepatitis aguda en fase de resolución o portador crónico

Negativo

Negativo

Positivo

Positivo

Positivo

Fase de convalecencia de una hepatitis aguda. Hepatitis B pasada (inmunización).

Negativo

Negativo

Negativo

Negativo

Positivo

Hepatitis B pasada (Reacc. Inespecífica a Acs. no proteicos)

Negativo

Negativo

Negativo

Positivo

Negativo

Distintas eventualidades posibles

CONFIRMACIÓN HB (EIA POR NEUTRALIZACION)

* La neutralización del Ag HBs en las muestras, se

realiza mediante anticuerpos específicos de Ag

HBs.

* Para garantizar la neutralización se necesita diluir

las muestras positivas altas para estar seguros de la neutralización.

* Por que la neutralización de muestras con exceso

de Ag es imposible en las condiciones normales.

EIA POR NEUTRALIZACIÓN

SIN NEUTRALIZANTE

EIA POR NEUTRALIZACIÓN SIN NEUTRALIZANTE CON NEUTRALIZANTE
EIA POR NEUTRALIZACIÓN SIN NEUTRALIZANTE CON NEUTRALIZANTE
EIA POR NEUTRALIZACIÓN SIN NEUTRALIZANTE CON NEUTRALIZANTE
EIA POR NEUTRALIZACIÓN SIN NEUTRALIZANTE CON NEUTRALIZANTE
EIA POR NEUTRALIZACIÓN SIN NEUTRALIZANTE CON NEUTRALIZANTE

CON NEUTRALIZANTE

TAMIZAJE Y CONFIRMACÍÓN DE SÍFILIS

TAMIZAJE Y CONFIRMACÍÓN DE SÍFILIS

SERODIAGNOSIS

Prueba de Nelson

FTA-ABS

TPHA

SPHA

ELISA

Aglutinación

Inmunoblot

PCR

VDRL/RPR

EVOLUCIÓN CLÍNICA DE UNA SÍFILIS NO TRATADA

EVOLUCIÓN CLÍNICA DE UNA SÍFILIS NO TRATADA

Treponema pallidum

9.4.9 Detección de Treponema pallidum

9.4.9.1 Tamizaje. Se deberá realizar mediante cualquiera de las pruebas siguientes:

a)

VDRL, o

-

RPR, o

pruebas treponémicas con especificidad =98.50%, tales como:

b)

Inmunocromatografía;

Ensayo inmunoenzimático, u

Otras con sensibilidad y especificidad igual o mayor.

9.4.9.2 Confirmatoria. Se deberán emplear pruebas treponémicas que

-

-

-

tengan especificidad 99 %, entre otras, cualquiera de las siguientes:

Hemaglutinación contra Treponema;

a)

b)

c)

Anticuerpos fluorescentes contra el Treponema;

Inmunofluorescencia indirecta;

Inmovilización del treponema, u

d)

Otras con especificidad igual o mayor.

e)

CLASIFICACIÓN

No Treponemal

CLASIFICACIÓN No Treponemal Detección de anticuerpos anti-cardiolipinas RPR (R apid P lasma R eagin ) VDRL

Detección de anticuerpos anti-cardiolipinas

RPR (Rapid Plasma Reagin) VDRL (Veneral Disease Research Laboratory)

T. pallidum

(V eneral D isease R esearch L aboratory ) T. pallidum Detección de Ab específicos de

Detección de Ab específicos de T.pallidum

TPHA (Treponema Pallidum Hemagglutination Assay)

FTA-ABS (Fluorescent Treponemal Antibody Absorbtion)

EIA (Enzyme Immuno Assay)

Syphilis Total Antibodies Syphilis IgG & IgM

APLICACION GENERAL DE VDRL / RPR

* DISGNOSTICO CLINICO

* INFECCIÓN RECIENTE

* MONITOREO AL TRATAMIENTO

FTA - ABS

Detección de anticuerpos anti Treponema pallidum.

Se considera referencia internacional CONFIRMATORIA.

Control positivo humano

Conjugado (IgG, IgM ó GAM)

Absorbat reiterii

TPHA (Treponema Pallidum Hemagglutination Assay)

Cinética Sífilis primaria, titulos bajos y en Sífilis secundaria los titulos aumentan. El restos es Positivo en Sifilis Latente, durante la

infección y después del tratamiento.

De facil uso, puede automatizarse, prueba barata, muy

específica, Sensible para excluir la historia de Sífilis.

TPHA (Treponema Pallidum Hemagglutination Assay)

La hemaglutination pasiva se basa en una prueba usando eritrocitos cubierto con antígenos de T. pallidum .

Avian erythrocytes

Anti-T Pallidum Ab

T. pallidum antigen

usando eritrocitos cubierto con antígenos de T. pallidum . Avian erythrocytes Anti-T Pallidum Ab T. pallidum

EIA - DONADORES

SÍFILIS ANTIECUERPOS TOTALES

SÍFILIS ANTICUERPOS IgG & IgM

ESPECIFICIDAD

100%

…PARA RESPONDER A MÚLTIPLES ESTRATEGIAS DE ENSAYO.

EIA de detección (o TPHA)

 

Reactiva

 

No Reactiva

 

Confirme con pruebas treponémicas

Informe de no detección de anticuerpos

Diferentes Por ejemplo, TPHA EIA).

Treponémicos, pero aconsejamos

 

Realizar prueba cuantitativa NO TREP (VDRL o RPR)

 

repetir si tiene un riesgo de infección reciente

 
repetir si tiene un riesgo de infección reciente   TREP. reactiva NO TREP. reactiva TREP. reactiva
repetir si tiene un riesgo de infección reciente   TREP. reactiva NO TREP. reactiva TREP. reactiva
repetir si tiene un riesgo de infección reciente   TREP. reactiva NO TREP. reactiva TREP. reactiva

TREP. reactiva NO TREP. reactiva

TREP. reactiva NO TREP. negativo

TREP. negativo NO TREP. reactiva

infección (recientes / activos) Asesorar a repetir para confirmar.
infección (recientes / activos)
Asesorar a repetir para confirmar.
La infección en algún momento. Asesorar a repetir para confirmar.
La infección en algún momento.
Asesorar a repetir para confirmar.
Ab no treponémicos detectados (falso positivo)
Ab no treponémicos
detectados (falso positivo)

CAUSAS DE FALSOS POSITIVOS SÍFILIS

FISIOLOGICO:

ESPIROQUETAS:

INFECCIONES :

VACUNAS:

OTROS:

EMBARAZO

LEPTOSPIROSIS ENFERMEDAD DE LYME

HERPES, VARICELA ZOSTER, MONONUCLEOSIS, TOXO, CMV, H-B

TIFOIDEA, FIEBRE AMARILLA

DROGAS, CIRROSIS, MALNUTRICION, TB, ETC.

TAMIZAJE Y CONFIRMACÍÓN DE CHAGAS

TAMIZAJE Y CONFIRMACÍÓN DE CHAGAS

DISTRIBUCIÓN MUNDIAL

DISTRIBUCIÓN MUNDIAL

Trypanosoma cruzi

9.4.14 Detección del Trypanosoma cruzi

9.4.14.1 Tamizaje. Se deberá realizar mediante pruebas de detección de anticuerpos contra el Trypanosoma cruzi que tengan una sensibilidad y especificidad 95%, entre las siguientes:

Ensayo inmunoenzimático;

a)

Aglutinación directa;

b)

Tira reactiva, y

Otras con especificidad y sensibilidad igual o mayor.

9.4.14.2 Prueba suplementaria. Se deberá emplear una prueba de

c)

d)

detección de anticuerpos contra el Trypanosoma cruzi, que tenga un formato distinto a la prueba empleada para el tamizaje y que tenga una especificidad superior.

ANTÍGENO CRUDO (LISADO DEL PARÁSITO)

Formato de la Técnica

ANTÍGENO CRUDO (LISADO DEL PARÁSITO) Formato de la Técnica • Microplaca sensibilizada con antígenos

Microplaca sensibilizada con antígenos

citoplasmáticos y de membrana del T. cruzi

200 ml de Diluyente de Muestra + 10 ml de control o muestra

Incubar 30 minutos a 37ºC

Lavar 5 veces la Microplaca

• Incubar 30 minutos a 37ºC Lavar 5 veces la Microplaca • 60 m l de
• Incubar 30 minutos a 37ºC Lavar 5 veces la Microplaca • 60 m l de

60 ml de Conjugado

Incubar 30 minutos a 37ºC

ANTÍGENOS RECOMBINANTE

Microplaca sensibilizada con proteínas

recombinantes del T. cruzi

SE AISLARON ANTIGENOS INMUNODOMINANTES ESPECIFICOS

QUE EL PARÁSITO CONSERVA EN TODAS SUS CEPAS.

(TECNOLOGÍA ADN RECOMBINANTE).

REACCIÓN EN ETAPA AGUDA Y CRONICA (EPIMASTIGOTE Y TRIPOMASTIGOTE).

EN TODAS SUS CEPAS. (TECNOLOGÍA ADN RECOMBINANTE). REACCIÓN EN ETAPA AGUDA Y CRONICA (EPIMASTIGOTE Y TRIPOMASTIGOTE).

HISTORIA NATURAL

HISTORIA NATURAL

BUSQUEDA DEL PARÁSITO

En Centros de Referencia:

Gota Gruesa

Xenodiagnóstico

Hemocultivo

PCR

BUSQUEDA DEL PARÁSITO En Centros de Referencia: • Gota Gruesa • Xenodiagnóstico • Hemocultivo • PCR
Recomendaciones de la OPS para tamizaje de donadores de sangre
Recomendaciones de la OPS para tamizaje
de donadores de sangre

Utilizar 2 métodos serológicos diferentes:

Aglutinación - IFI HAI - EIE (ELISA)

Se considera que se logra una sensibilidad del 98 - 99.5% utilizando dos reacciones serológicas diferentes y simultáneas

EL CRITERIO RECOMENDADO POR LA OMS INDICA QUE ES NECESARIA LA CONCORDANCIA DE DOS PRUEBAS

EL CRITERIO

RECOMENDADO POR LA

OMS INDICA QUE ES NECESARIA LA

CONCORDANCIA DE DOS PRUEBAS REALIZADAS

SIMULTÁNEAMENTE PARA

TENER UN

INMUNODIAGNÓSTICO

PRECISO

INFECCIOSAS EMERGENTES - REEMERGENTES

ELISA

MALARIA

NEW

ELISA

CMV

NEW

ELISA

BRUCELLA

NEW

ELISA

HTLV 1

en desarrollo

ELISA

HTLV 2

en desarrollo

ELISA

VIRUS DEL NILO

en desarrollo

HTLV 1 en desarrollo • ELISA HTLV 2 en desarrollo • ELISA VIRUS DEL NILO en
HTLV 1 en desarrollo • ELISA HTLV 2 en desarrollo • ELISA VIRUS DEL NILO en
HTLV 1 en desarrollo • ELISA HTLV 2 en desarrollo • ELISA VIRUS DEL NILO en
HTLV 1 en desarrollo • ELISA HTLV 2 en desarrollo • ELISA VIRUS DEL NILO en

HTLV I y II

9.4.15.5 Retrovirus HTLV I y II:

a)

Tamizaje. Detección de anticuerpos

mediante pruebas que tengan una sensibilidad y especificidad 95%, entre otras:

Ensayo inmunoenzimático;

Amplificación de ácidos nucleicos, y

Otras con especificidad y sensibilidad igual o

-

-

-

mayor, y

b) Confirmatoria. Detección de anticuerpos por

inmunoblot o bien por detección de genoma viral

mediante amplificación de ácidos nucleicos.

Pasmodium / CMV / Toxo

9.4.15.2 Detección de Plasmodium. Las pruebas que se indican a continuación se practicarán para definir la aceptabilidad de un donante que se encuentre en cualquiera de las condiciones que señala la tabla 3 de esta Norma:

Ensayo inmunoenzimático;

a)

b)

Inmunofluorescencia, y

Investigación del parásito con microtubo con naranja de

c)

acridina.

9.4.15.3 Detección de citomegalovirus. Se emplearán pruebas de

detección de anticuerpos tipo inmunoglobulina M contra el

citomegalovirus, entre otras, con cualquiera de las técnicas siguientes:

a)

b) Inmunofluorescencia;

9.4.15.4 Detección de Toxoplasma gondii. Se emplearán pruebas de detección de anticuerpos mediante ensayo inmunoenzimático.

Ensayo inmunoenzimático, y

MALARIA

DIAGNÓSTICO EN DONADORES

MALARIA DIAGNÓSTICO EN DONADORES

BRUCELOSIS

BRUCELOSIS
BRUCELOSIS

Brucella

9.4.15.1 Detección de Brucella. Las pruebas para la detección de Brucella que se indican a continuación, se practicarán a las

personas consideradas de riesgo, tales como: las que ingieren productos lácteos no pasteurizados, las que trabajan con animales domesticados, especialmente ganado vacuno, caprino, porcino,

ovejas, ciervos, alces o que tienen contacto con sus carnes,

excreciones, secreciones, placentas o sus cadáveres, así como las que trabajan en granjas, mataderos, curtidurías y los veterinarios:a) Pruebas de tamizaje. Se efectuará mediante pruebas de aglutinación en placa con antígeno teñido con rosa de bengala o

ensayo inmunoenzimático para la detección de anticuerpos totales

o de tipo IgM, y

b)

Prueba confirmatoria. Se realizará a través de metodologías

como titulación de anticuerpos mediante aglutinación en presencia

de 2 mercaptoetanol y otras disponibles para el efecto.

VISIÓN MUNDIAL OMS.

VISIÓN MUNDIAL OMS. SIDA ANTRAX BOTULISMO LENGUA AZUL CHAGAS CHINKUNGUNYA CÓLERA DENGUE ENFERMEDAD DE LYME MALARIA

SIDA ANTRAX BOTULISMO LENGUA AZUL CHAGAS CHINKUNGUNYA CÓLERA DENGUE

ENFERMEDAD DE LYME

MALARIA

http://www.aabb.org/Content/About_Blood/Emerging_Infectious_Disease_Agents/appendix2.htm

DENGUE

DENGUE

ZIKA VIRUS

ZIKA VIRUS Países y territorios con transmisión autóctona del virus Zika, febrero 2016. Rev Enf Emerg

Países y territorios con transmisión autóctona del virus Zika, febrero 2016.

Rev Enf Emerg 2016;15(1):13-21

VIRUS MAYARO

Patógeno:

Virus Mayaro (MAYV), familia Togaviridiae, genero Alphavirus.

Distribución: América Central, norte de América del Sur y la zona amazónica.

Mecanismo de transmisión: Picadura de mosquitos género Aedes.

Clínica: Fiebre, rash, dolor de cabeza y dolores articulares.

Diagnóstico: PCR y serología.

Tratamiento: No hay tratamiento específico.

Prevención: Protección frente a la picadura del mosquito

y serología. Tratamiento : No hay tratamiento específico. Prevención : Protección frente a la picadura del
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NORMA Oficial Mexicana NOM-253-SSA1-2012

21. Concordancia con normas internacionales y mexicanas

Esta Norma Oficial Mexicana es parcialmente equivalente con los lineamientos y recomendaciones emitidos por

Organización Mundial de la Salud,

Organización Panamericana de la Salud,

European Council,

The American Association of Blood Banks y

• la “International for Standaritation Organization” y

no tiene equivalencia con Normas Mexicanas por no existir referencia al momento de su elaboración.

CONCLUSIONES

APLICANDO ADECUADAMENTE LAS NORMAS

NACIONALES E INTERNACIONALES

SE LOGRA UN CORRECTO DIAGNÓSTICO Y SIGUIENDO ESTAS RECOMENDACIONES SE LOGRA UNA CONFIRMACIÓN ADECUADA Y SEGURA.