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Q. JUAN MORENO E.
15-AGOSTO-2016
AGENDA
5.- CONCLUSIONES.
ANTGENOS / ANTICUERPOS
INMUNOENSAYOS (EIA).
RIA:
RADIOINMUNOENSAYO
UTILIZA ISOTOPOS RADIACTIVOS.
ELISA:
FPIA:
MEIA:
CMIA:
OTROS:
-TAMIZAJE
INTERPRETACIN
-ESCRUTINIO
-CRIBADO
-SCREENING
REACTIVO
NO-REACTIVO
-DESPISTAJE
Z. G. DUDOSO
-PRESUNTIVA
IFI:
INMUNOFLUORESCENCIA.
CULTIVO VIRAL:
RIBA:
A)
B)
ENSAYOS EN LNEA.
C)
INMUNO-DOT
INTERPRETACIN
-CONFIRMATORIA
POSITIVO
Y/O
-SUPLEMENTARIA
NEGATIVO
INDETERMINADO
NOM-253-SSA1-2012, Para la disposicin de sangre humana y sus componentes con fines teraputicos.
NOTIFICACION AL DONANTE:
RESULTADOS DE LOS ANLISIS
DE LABORATORIO QUE INDICAN
DONACIN NO APTA.
NOM-253-SSA1-2012, Para la disposicin de sangre humana y sus componentes con fines teraputicos.
COMPLEMENTARIAS
DIFERENCIALES Y / O DISCRIMINATORIAS
MULTISPOT:
MONITOREO CLNICO
CARGA VIRAL:
NMERO DE LINFOCITOS T.
NOM-253-SSA1-2012, Para la disposicin de sangre humana y sus componentes con fines teraputicos.
INFECCIN
DETECCIN
PERIODO DE
VENTANA
TIEMPO
0
Por qu es conveniente reducirlo?
* Para tener un diagnstico ms temprano
* para tener un tratamiento ms eficaz
* Para evitar el diagnstico malo
* Para evitar la contaminacin de sangre
FASE ECLIPSE
ALGORITMO:
Combinacin de pruebas
seleccionadas por una serie de reglas de
decisin,
que
permiten
mejorar
la
sensibilidad y especificidad diagnstica,
para resolver resultados discordantes.
NOM-253-SSA1-2012, Para la disposicin de sangre humana y sus componentes con fines teraputicos.
= mxima sensibilidad
SANOS
Frecuencia
Indeterminaci
n
Zonagris
= mximas especificidad
y sensibilidad
ENFERMOS
= mxima especificidad
Valor de corte en :
Mayor ndice de Youden
(Y)
10
20
40
Valor de corte en :
Mayor sensibilidad = sangre segura
Menor especificidad = descarte de
unidades
80
160
320
640
1.280 2.560
Valor de corte en :
Menor sensibilidad = sangre insegura
Mayor especificidad = menor descarte de
unidades
NOM-253-SSA1-2012, Para la disposicin de sangre humana y sus componentes con fines teraputicos.
= mxima sensibilidad
SANOS
Frecuencia
Indeterminaci
n
Zonagris
= mximas especificidad
y sensibilidad
ENFERMOS
= mxima especificidad
Valor de corte en :
Mayor ndice de Youden
(Y)
10
20
40
Valor de corte en :
Mayor sensibilidad = sangre segura
Menor especificidad = descarte de
unidades
80
160
320
640
1.280 2.560
Valor de corte en :
Menor sensibilidad = sangre insegura
Mayor especificidad = menor descarte de
unidades
1 GENERACIN:
- LISADO VIRAL VIH-1
2 GENERACIN:
- PPTIDOS SINTTICOS VIH-1 y VIH-2
3 GENERACIN :
- PPTIDOS SINTTICOS VIH-1 y VIH-2
- PROTENAS RECOMBINANTES
- DETECCIN GRUPO O y M
4 GENERACIN :
- DETECCIN Ab/Ag (ANTGENO p24)
5 GENERACIN :
- DETECCIN Ab/Ag TECNOLOGA LASER MULTIPLEX
VIH
[]
RNA
IgM
IgG
Ag
IgA
Limite de Deteccin
[]
RNA
IgA
IgG
IgM
Ag
Limite de Deteccin
INTERPRETACIN
Serologa de HCV
HEPATITIS C
9.4.11 Deteccin del virus C de la hepatitis
9.4.11.1 Tamizaje. Se deber realizar mediante pruebas
de deteccin de anticuerpos contra el virus o deteccin
simultanea de antgenos virales y anticuerpos contra el
virus que tengan una sensibilidad 99.5% y especificidad
99%, entre las siguientes:
a) Ensayo inmunoenzimtico;
b) Inmunoensayo por quimioluminiscencia, y
c) Otras con sensibilidad y especificidad igual o mayor.
9.4.11.2 Confirmatoria. Se deber realizar mediante la
prueba de inmunoblot recombinante u otras con
sensibilidad y especificidad igual o mayor.
Core peptides
Deciscan
RIBA (Recombinant Inmuno Blot Assay)
Tiras de control
Un control negativo y otro positivo
El control positivo.
La banda control anti-IgG y las cuatro bandas de HCV
son claramente visibles.
No hay seal de la banda GST.
El control negativo
Solamente la banda control anti IgG es visible.
No se observa ninguna otra seal.
Tira de muestra
La banda control anti-IgG es claramente visible
(sin esta banda, el ensayo no se valida).
NS4
NS3
C2
C1
ESPECIFICIDAD
Muestras
Total de muestras
probadas
Especificidad
(%)
100%
Muestras de donadores
de sangre
474 muestras
Negativo: 95.36%
Indeterminados: 4.64%
100%
Especificidad clnica
Reactividad cruzada
Incluyendo mujeres
embarazadas
240 muestras
Negativo 91,25%
Indeterminado (21 /240) 8,75%
Probable positivo (2/240) 0.8%
100%
91 muestras
Negativo 98%
+ 1 prob positivo mieloma (1%)
+ 1 VZV indeterminado (1%)
ULTIMA GENERACIN :
SENSIBILIDAD ANALTICA
Menos de 50 Picogramos/ml
(Mezclas oficiales de los subtipos del HBs Ag ad y ay)
(fase slida sensibilizada con Tres anticuerpos monoclonales)
HBc Ag
HBs Ag
DNA
DNA polymerase
HEPATITIS B
9.4.10 Deteccin del Virus B de la hepatitis
9.4.10.1 Tamizaje. Se deber realizar mediante pruebas de
deteccin del antgeno de superficie del virus B de la hepatitis, con
pruebas que tengan una sensibilidad 99.5 % y especificidad 99.0 %,
tales como:
a) Ensayo inmunoenzimtico;
b) Inmunoensayo por quimioluminiscencia, y
c) Otras con sensibilidad y especificidad igual o mayor.
El control de calidad de la prueba de tamizaje efectuado en cada
corrida, se demuestra cuando la prueba tiene una sensibilidad
suficiente para detectar un control positivo dbil.
9.4.10.2 Confirmatoria. Se debern realizar mediante la deteccin
de antgenos con una prueba de neutralizacin con anticuerpos con
especificidad 99.5%.
GENOTIPOS
SEROLOGA DE HEPATITIS B
HBsAg
Anti HBc
Anti HBs
Anti HBe
HBeAg
HBsAg
Anti HBc-HBsAg
Marcadores serolgicos
Anti HBc
Anti HBs
MARCADORES SEROLGICOS DE HB
HBs Ag
HBe Ag
HBe Ac
HBc Ac
HBs Ac
INTERPRETACION
Positivo
Positivo
Negativo
Negativo
Negativo
Periodo de incubacin de
una hepatitis aguda
Positivo
Positivo
Negativo
Positivo
Negativo
Negativo
Positivo
Fase de convalecencia de
una hepatitis aguda. Hepatitis
B pasada (inmunizacin).
Positivo
Negativo
Negativo
Negativo
Positivo
Positivo
Positivo
Positivo
Negativo
Negativo
Negativo
Negativo
Positivo
Negativo
Negativo
Negativo
Positivo
Negativo
Distintas eventualidades
posibles
CON NEUTRALIZANTE
SERODIAGNOSIS
Prueba de Nelson
ELISA
FTA-ABS
Aglutinacin
TPHA
Inmunoblot
PCR
VDRL/RPR
SPHA
Treponema pallidum
CLASIFICACIN
No Treponemal
T. pallidum
DISGNOSTICO CLINICO
INFECCIN RECIENTE
MONITOREO AL TRATAMIENTO
FTA - ABS
Cintica
Sfilis primaria, titulos bajos y en Sfilis secundaria los titulos
aumentan. El restos es Positivo en Sifilis Latente, durante la
infeccin y despus del tratamiento.
De facil uso, puede automatizarse, prueba barata, muy
especfica, Sensible para excluir la historia de Sfilis.
Avian erythrocytes
Anti-T Pallidum Ab
T. pallidum antigen
EIA - DONADORES
ESPECIFICIDAD
100%
No Reactiva
TREP.
reactiva
NO TREP. reactiva
TREP.
reactiva
NO TREP. negativo
TREP.
negativo
NO TREP. reactiva
Ab no treponmicos
detectados (falso positivo)
EMBARAZO
ESPIROQUETAS:
LEPTOSPIROSIS
ENFERMEDAD DE LYME
INFECCIONES :
VACUNAS:
OTROS:
DISTRIBUCIN MUNDIAL
Trypanosoma cruzi
9.4.14 Deteccin del Trypanosoma cruzi
9.4.14.1 Tamizaje. Se deber realizar mediante pruebas de
deteccin de anticuerpos contra el Trypanosoma cruzi que tengan
una sensibilidad y especificidad 95%, entre las siguientes:
a) Ensayo inmunoenzimtico;
b) Aglutinacin directa;
c) Tira reactiva, y
d) Otras con especificidad y sensibilidad igual o mayor.
9.4.14.2 Prueba suplementaria. Se deber emplear una prueba de
deteccin de anticuerpos contra el Trypanosoma cruzi, que tenga
un formato distinto a la prueba empleada para el tamizaje y que
tenga una especificidad superior.
60 ml de Conjugado
ANTGENOS RECOMBINANTE
HISTORIA NATURAL
Gota Gruesa
Xenodiagnstico
Hemocultivo
PCR
EL CRITERIO
RECOMENDADO POR LA
OMS INDICA QUE ES
NECESARIA LA
CONCORDANCIA DE DOS
PRUEBAS REALIZADAS
SIMULTNEAMENTE PARA
TENER UN
INMUNODIAGNSTICO
PRECISO
ELISA
MALARIA
NEW
ELISA
CMV
NEW
ELISA
BRUCELLA
NEW
ELISA
HTLV 1
en desarrollo
ELISA
HTLV 2
en desarrollo
ELISA
en desarrollo
HTLV I y II
9.4.15.5 Retrovirus HTLV I y II:
a) Tamizaje. Deteccin de anticuerpos
mediante pruebas que tengan una sensibilidad y
especificidad 95%, entre otras:
- Ensayo inmunoenzimtico;
- Amplificacin de cidos nucleicos, y
- Otras con especificidad y sensibilidad igual o
mayor, y
b) Confirmatoria. Deteccin de anticuerpos por
inmunoblot o bien por deteccin de genoma viral
mediante amplificacin de cidos nucleicos.
MALARIA
DIAGNSTICO EN DONADORES
BRUCELOSIS
Brucella
9.4.15.1 Deteccin de Brucella. Las pruebas para la deteccin de
Brucella que se indican a continuacin, se practicarn a las
personas consideradas de riesgo, tales como: las que ingieren
productos lcteos no pasteurizados, las que trabajan con animales
domesticados, especialmente ganado vacuno, caprino, porcino,
ovejas, ciervos, alces o que tienen contacto con sus carnes,
excreciones, secreciones, placentas o sus cadveres, as como las
que trabajan en granjas, mataderos, curtiduras y los veterinarios:a)
Pruebas de tamizaje. Se efectuar mediante pruebas de
aglutinacin en placa con antgeno teido con rosa de bengala o
ensayo inmunoenzimtico para la deteccin de anticuerpos totales
o de tipo IgM, y
b) Prueba confirmatoria. Se realizar a travs de metodologas
como titulacin de anticuerpos mediante aglutinacin en presencia
de 2 mercaptoetanol y otras disponibles para el efecto.
SIDA
ANTRAX
BOTULISMO
LENGUA AZUL
CHAGAS
CHINKUNGUNYA
CLERA
DENGUE
ENFERMEDAD DE LYME
MALARIA
http://www.aabb.org/Content/About_Blood/Emerging_Infectious_Disease_Agents/appendix2.htm
DENGUE
ZIKA VIRUS
Pases y territorios con transmisin autctona del virus Zika, febrero 2016.
Rev Enf Emerg 2016;15(1):13-21
VIRUS MAYARO
Patgeno:
Virus Mayaro (MAYV), familia Togaviridiae, genero Alphavirus.
Distribucin: Amrica Central, norte de Amrica del Sur y la zona
amaznica.
Nuevas Tecnologas
MATERIAL BIOLGICO
Ag RECOMBINANTES
SENSIBILIDAD ESPECIFICIDAD
HIV-2
HIV-1
Ctl Band
GP36
GP140
P31
GP160
P24
GP41
peptide
peptides
peptide
recombinant
recombinant
peptides
ENV
ENV
POL
ENV
GAG
ENV
Protein A
APROBADO FDA
OCTUBRE 24, 2014
Geenius
TM
CONCLUSIONES
juan_moreno@bio-rad.com