BIOQUMICA

MANUAL DE PRCTICAS DE LABORATORIO DE

II

FORMATO DE PRESENTACIN DE PREINFORME

PREINFORME DE LABORATORIO DE BIOQUMICA II

NOMBRE DE LA PRCTICA: FECHA: 19/10/2015
TIROSINASA (PARTE 2)
INTEGRANTES DEL GRUPO
NOMBRE:
CDIGO.
CDIGO:
CDIGO:
PROGRAMA:
BIOLOGIA

GRUPO: #2

DOCENTE:
MARIA
JOSE BAQUERO

MARCO TERICO
Las enzimas son protenas que realizan la catlisis de las
reacciones qumicas que se llevan a cabo en los seres vivos.
Aunque las reacciones enzimticas obedecen a los mismos
principios de la cintica qumica, se diferencian de stas por el
hecho de que las enzimas son saturadas por los substratos.
Durante una reaccin enzimtica, el substrato S se une
qumicamente a la enzima E para formar un complejo
"enzima-substrato"
(ES).
Luego
de
sufrir
varias
reacciones
qumicas,
el complejo ES se rompe para dar
origen al producto P, liberando a la enzima E,
que
puede
volver
a
iniciar
otro
ciclo
cataltico.En 1913, Michaelis
y Menten desarrollaron la teora cintica general que explica el
comportamiento de las reacciones enzimticas.
La grfica obtenida con los resultados de velocidad inicial
diferentes concentraciones de sustrato, corresponde a la curva
hiperblica de Michaeles Menten, representada en la figura
cuya ecuacin es la siguiente.
Vmax [S ]
Vi=
Km+[S ]

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Con esta grfica se pueden determinar los valores de Vmax y la

constante de michaeles- menten Km. Cuando una enzima
presenta valores altos de Vmax indica que tiene para esa
concentracin una actividad muy elevada. Referente al valor de
Km , es conveniente que este valor sea pequeo ya que a
valores ms bajos de Km mayor ser la afinidad de la enzima
por el sustrato, por lo tanto se requerir poca cantidad de
sustrato para alcanzar la mitad de la velocidad mxima (
Vmax).
Los valores de Vmax y Km pueden tambin obtenerse
graficando el inverso de la velocidad inicial contra el inverso de
la concentracin del sustrato (1/Vi vs 1/[S]). Correspondiendo
en este caso a una lnea recta. Como se indica en la figura
siguiente.

El tipo de inhibidor se deduce al comparar los resultados de

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Vmax y Km y con inhibidor as:

Inhibidor competitivo, la Vmax no cambia pero el Km sin
inhibidor es menor que con inhibidor.
Inhibidor no competitivo, el Km no vara pero el valor de Vmax
sin inhibidor es mayor que con inhibidor.
MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS

Sln de fosfato 0,1 M en buffer (pH=7,2),

Sln de L-DOPA 0,03 M en Buffer(pH=6),
fuentes de tirosinasa ( banano, aguacate),
arena para trituracin de la fruta,
lienzo o tela para filtrar
mortero,
espectrofotmetro
sln de NaCN 0,1 mM
hielo.

PROCEDIMIENTO

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NOTA DE SEGURIDAD

NaCN 0,1 mM
La sustancia irrita fuertemente los ojos, la piel y el
tracto respiratorio. La sustancia puede causar
efectos en la respiracin celular, dando lugar a
convulsiones y prdida del conocimiento. La
exposicin puede producir la muerte.
La sustancia se descompone rpidamente en
contacto con cidos, y lentamente en contacto con
agua, humedad o dixido de carbono, produciendo
cido cianhdrico .La disolucin en agua es
moderadamente bsica.
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

Tejn, Jos Mara. Fundamentos de Bioqumica Estructural.

2 Edicin. Editorial TBAR. Madrid Espaa. 2006.

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Antonio Pea. Bioqumica. 2 Edicin. Editorial LLIMUSA.

Mxico D.F.

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