AISLAMIENTO BACTERIANO

STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS/ EPIDERMIS

PRESENTADO POR:
MARIA PAZ ANDRADE CARABALLO
MARIA ANGELA ARROYO SARMIENTO
BRIAN JAVIER ATILANO CASTILLO
JULIAN ISAAC MONTES DIAZ
JULIETH TATIANA SUAREZ

PRESENTARLO A:
ING. MSc. YENIS PASTRANA PUCHE

MICROBILOGIA GENERAL

UNIVERSIDAD DE CRDOBA
FACULTAD DE INGENIERIAS
DEPARTAMENTO DE INGENIERIA DE ALIMENTOS
PROGRAMA DE INGENIERIA DE ALIMENTOS
BERASTEGUI CRDOBA
26-03-2015

CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES

FECHA
26/03/2015

PROCEDIMIENTO
Proyecto

03/05/2015

Entrega de
materiales

11/05/2015

Toma de la muestra
pre-enriquecimiento

12/05/2015

Siembra

Sembrar por mtodo

francs en los medios,
Agar sangre Agar salado
de manitol.

13/05/2014

Tincin de Gram y
pruebas bioqumicas

Se toman colonias se
realiza tincin de Gram y
pruebas
bioqumicas

lista

DESCRIPCIN
Se realiza un marco
terico
con
procedimientos en flujo
grama y se define el
cronograma a seguir.
de Se entrega la lista de
todos los materiales a
utilizar en el aislamiento.
y Se toma una muestra de
cerdo; se toman 10g de la
muestra, se vierten 90 ml
de agua peptona y se
deja incubar por 24h

(Ureasa,
Catalasa).

14/05/2014

Revisin de resultados

Coagulasa,

Se observan las muestras

y
se
anotan
los
resultados.

NOTA:
Todo esto se realizara en los horarios en los que el laboratorio este desocupado
para trabajar.

FLUJOGRAMAS DEL PROCESO

1- TOMA DE MUESTRA Y PRE-ENRIQUECIMIENTO
Tomar

Balanza
analtica

Pesar
Verter

37

Incubar

Una muestra carne de cerdo

10 g de la muestra tomada (en
caso de trabajar con carne de
cerdo)
En 100 ml de agua peptona
24 horas

2- SIEMBRAS
2.1- SIEMBRA POR METODO FRANCS EN EL MEDIO AGAR SANGRE
Con el nombre MAJ, la
fecha y la cepa que
contenga la muestra de
Staphylococcus
epidermidis.

Marcar

Caja de Petri que contiene el

medio AGAR SANGRE

Encender

El mechero

Flamear

Un asa redonda

Extraer

Inoculo del caldo con la cepa

bacteriana

Colocar

Inoculo en uno de los extremos

de la caja de Petri que contiene el
medio Agar Sangre

Extender

La muestra continuamente hasta

una cuarta parte

Flamear

Asa redonda y enfriar

Hacer

Flamear

4 o 5 estras formando un ngulo

recto desde donde se hizo la
primera siembra
Asa redonda y enfriar
4 o 5 estras formando un ngulo recto
desde donde se hizo la ltima siembra y
realizar un zigzag al final

Hacer

2.2- SIEMBRA POR METODO FRANCS EN EL MEDIO AGAR SALADO DE

MANITOL
Incubar
Con el nombre MAJ, la
fecha y la cepa que
contenga la muestra de
Staphylococcus
epidermidis.

24 horas a 37C

Marcar

Caja de Petri que contiene el

medio Agar Salado de manitol

Encender

El mechero

Flamear

Un asa redonda

Extraer

Inoculo del caldo con la cepa

bacteriana

Colocar

Inoculo en uno de los extremos de la

caja de petri que contiene el medio
Agar Salado de manitol

Extender

La muestra continuamente hasta

una cuarta parte

Flamear

Asa redonda y enfriar

Hacer

Flamear

Hacer

Incubar

4 o 5 estras formando un ngulo

recto desde donde se hizo la
primera siembra
Asa redonda y enfriar
4 o 5 estras formando un ngulo recto
desde donde se hizo la ltima siembra y
realizar un zigzag al final
24 horas a 37C

3- TINCIN DE GRAM

Con el nombre
MAJ, la fecha y la
cepa que contenga
la muestra de
Staphylococcus
epidermidis.
Asa redonda

Marcar

Portaobjetos

Esterilizar

Asa redonda

Tomar

Inoculo y colocar en el portaobjeto

Fijar

Uniformemente la gota sobre la

lmina y dejar secar al aire
Por calor, pasando la lmina unas 3
veces por la llama y Dejar enfriar

Cubrir

Con cristal violeta

Lavar

Con agua destilada

Extender

Por 1 minuto

Por 1 minuto

Por 14 segundos

Por 30 segundos

Adicionar

Lugol

Lavar

Con agua destilada

Decolorar

Con alcohol acetona

Lavar

Con agua destilada

Cubrir

Con safranina de Gram

Lavar

Con agua destilada

Dejar

Secar

Observar

En el microscopio en el objetivo de
inmersin y reportar lo observado

4. PPRUEBAS BIOQUMICAS:
4.1- PRUEBA BIOQUIMICA UREASA: La hidrlisis de la urea por la enzima ureasa
libera dos molculas de amoniaco que alcaliniza el medio, entonces se vira el indicador
de pH, en el caso del rojo de fenol una prueba positiva es color bugambilia.
Sembrar

Con asa en punta

medio gelatina

Y Otro tubo
como control

5 das

Incubar

Observar

37 por 24 horas
Los resultados

4.2- PRUEBA BIOQUMICA NITRATO: Est a pr ueba perm it e det er m inar si el

m icr oor ganism o es capaz de r educir el nit r at o en nit r it os o en nit r geno
libr e.

Asa
en
esterilizada

punta

Tomar

Inculo de la siembra realiza da en los

medios para propiciar el crecimiento

Sembrar

En caldo nitrato

Incubar

Durante 24 horas a 37C

Agregar

Unas gotas del reactivo de

Griess-Ilosvay

Observar

Los resultados

4.4- PRUEBA BIOQUMICA MOTILIDAD Y H 2S: O bser var la m ot i lid ad del

m icr oor ganism o, gr acias a la baja conce ntr aci n de agar, lo cual nos
indic a la pr esencia de f lage los. Por otr o lado se puede det er m inar si se
ha liber ad o H 2 S por la accin enz im t ico de los am inoc idos que
cont ienen azuf r e, pr oduc iendo una r eacci n visib le de color negr o, se
usan com o indica dor es t ioslf at o de sodio y sulf at o f err oso.
Adem s
t am bi n se obser va en el m edio l a for m acin de in dol.

Con asa en punta

En el medio SIM
Sembrar

En Incubadora

Refrigerador

Incubar

A 37C por 24 horas

Sacar y enfriar

Observar

Los resultados

STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIDIS/ EPIDERMIS

CLASIFICACIN CIENTFICA
Reino: Monera
Filo: Firmicutes
Clase: Cocci
Orden: bacillales
Familia: Staphylococcaceae
Gnero: Staphylococcus
Especie: S. Epidermidis
GENERALIDADES
Staphylococcus epidermidis es una especie bacteriana perfectamente redonda del
gnero Staphylococcus y familia Staphylococcaceae. Crece en grupos y vive
generalmente en la piel humana. Fue descrita por Rosenbach en 1884 y fue
originalmente llamada Staphylococcus albus.

La bacteria Staphylococcus epidermidis no mantiene el tinte violceo cuando se tie con

el mtodo de Gram (bacterias gram-negativo) y casi todas las cepas de Staphylococcus
epidermidis no producen la enzima coagulasa que induce la coagulacin (por ejemplo,
produce un engrosamiento). La bacteria Staphylococcus epidermidis crece por
respiracin aerbica (convierte el oxgeno en dixido de carbono) o por fermentacin
(divide compuestos orgnicos complejos en sustancias simples) [1].

CARACTERISTICAS

Es la causa menos comn en infecciones oportunistas.

Es un mediador de infecciones nosocomiales.
Su crecimiento no produce hemolisis.
No fermenta manitol.
No es pigmentado.
Coagulasa negativo.
Es saprofita.

Se observa como colonias pequeas en agar digerido mucho menor que coliformes
fecales [2].

CARACTERISTICAS DEL CULTIVO

Las infecciones por S. epidermidis son oportunistas, nosocomiales y generalmente est
asociado a los implantes de prtesis, catteres e intervenciones quirrgicas.

Enfermedades
La mayora de las cepas de Staphylococcus epidermidis no son causa de enfermedad y
es teora de que algunas cepas pueden incluso tener un papel benfico para los seres
humanos. Cuando la bacteria Staphylococcus epidermidis causa enfermedad, con
frecuencia, sta se adquiere en un hospital. Puede provocar una infeccin en
biomateriales, como catteres, prtesis de vlvulas, derivaciones de lquido
cefalorraqudeo, prtesis de miembros, vasculares, heridas postoperatorias y catteres
venosos.
Los sntomas
Debido a que la bacteria Staphylococcus epidermidis puede causar una infeccin en una
gran variedad de lugares del cuerpo, los sntomas de la infeccin son parcialmente
dependientes a la infeccin. Algunos sntomas que pueden ser comunes a todas las
infecciones por Staphylococcus epidermidis incluyen fiebre, fatiga, dolor o sensibilidad en
el lugar del implante, respiracin rpida, latidos rpidos del corazn y sudoracin.
Biopelcula
Muchas cepas de bacteria Staphylococcus epidermidis que causan enfermedades
producen un lodo que puede formar una biopelcula. Esta permite que las bacterias
permanezcan en los biomateriales y las ayuda a resistir el sistema inmune, muchos
antibiticos y antimicrobianos.
Resistencia
La bacteria Staphylococcus epidermidis es resistente a muchos antibiticos incluyendo la
meticilina, a todas las penicilinas, penems, carbapanems y a las cefalosporinas. Esta
resistencia a menudo resulta en biomateriales mencionados bajo la "enfermedad" que
necesites eliminar.
Estudios
La bacteria Staphylococcus epidermidis se estudia de manera diferente dependiendo de
qu tipo de laboratorio la est analizando. Los laboratorios clnicos suelen comprobar la
sensibilidad a diferentes antibiticos y mirar biotipos, perfiles plasmdicos y la produccin
del lodo. Los laboratorios de investigacin suelen buscar el tipo bacteriofago y antgenos

que la bacteria produce, as como el uso restringido del anlisis de enzimas y la

hibridacin ADN-ADN [3].

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. http://www.ehowenespanol.com/bacteria-staphylococcus-epidermidissobre_51851/
2. https://books.google.com.co/books?
id=jyVQueKro88C&pg=PA618&lpg=PA618&dq=pruebas+bioquimicas+para+la+ide
ntificacion+de+staphylococcus+epidermidis&source=bl&ots=5OHjZ7aQlw&sig=lu9
VsBZNmPAvDb7ePL5VC_Y3zgw&hl=es419&sa=X&ei=AvwQVezvNY2TsQSCpYL4BA&ved=0CEsQ6AEwCA#v=onepage&
q&f=false

3. https://microbitos.wordpress.com/2011/08/03/staphylococcus-aureusepidermidis-saprophyticus/