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Nancy P. Mauln1,2,a
Bachillerato en Ciencias, Universidad San Sebastin, Puerto Montt. Chile.
Bioqumica; Doctora en Ciencias.
2
Facultad de Ciencias Biolgicas, Universidad Andrs Bello, Via del Mar, Chile.
a
Bioqumica. Doctora en Ciencias.
1
Correspondencia a:
Factores de virulencia
La habilidad de un patgeno bacteriano para sobrevivir dentro de un organismo
hospedero requiere de la expresin de una serie de determinantes genticos
involucrados en la interaccin patgeno-hospedero, situacin que le permite resistir
el estrs fisiolgico y ambiental. La expresin diferencial de los genes de virulencia,
en el caso de Salmonella typhimurium, Salmonella typhi, Helicobacter
pylori y Vibrio cholerae, permite, entre otros, inhibir la apoptosis del macrfago,
modular el nivel de produccin de IL-12, disminuir las especies reactivas del
nitrgeno (RNI) o modular la secrecin de protenas de invasin a travs de los
sistemas de secrecin tipo III codificados dentro de islas de patogenicidad, y en
donde dichos "factores" resultan esenciales para su patognesis, pero no para su
crecimiento en medios de cultivo in vitro14,15,23,24.
Desafortunadamente, no hay una respuesta concreta acerca de los factores de
virulencia relevantes para la progresin de la tuberculosis en el ser humano. Sin
embargo, sta puede ser cuantificada a travs de la estimacin de morbilidad y
mortalidad de aislados clnicos o cepas mutantes en modelos animales (conejo,
ratn, primates, bovino, entre otros). De esta manera, cepas de M.
tuberculosis mutantes respecto de su virulencia han sido clasificadas como
fenotipos SGIV ("severe growth in vivo"), GIV ("growth in vivo") y PER("persistence
genes")11,17. Asimismo, se ha descrito diferencias entre el perfil de expresin gnica
de Mtbdentro de los pulmones y bazo de ratn, as como diferencias entre la
expresin de ciertos genes de stos con respecto al pulmn de pacientes con
tuberculosis crnica activa25,26. Cabe mencionar, que la respuesta inflamatoria del
Vacuna BCG
El bacilo Calmette-Gurin (BCG) es una cepa viva atenuada de Mycobacterium
bovis, que corresponde a la nica vacuna disponible en el mundo contra la
tuberculosis (TB). BCG protege a los nios con ms de 80% de eficacia contra
Conclusiones
La TB continua ofreciendo desafos intelectuales complejos, que atraen a cientficos
de diversas disciplinas en un intento por comprender su biologa y patognesis. Ello
requiere conocer en detalle los determinantes bacterianos involucrados en la
virulencia de Mtb, as como tambin de la caracterizacin de la respuesta inmune
que instaura el ser humano en las distintas etapas de la infeccin. Dentro de los
desafos pendientes se encuentra la identificacin de "blancos" alternativos para el
tratamiento de la TB activa y latente, el desarrollo de una vacuna, posiblemente
recombinante, que sea verdaderamente eficaz y que reemplace o mejore a las
cepas de BCG que se producen hoy en da.
Tincin de Ziehl-Neelsen
1Fundamento
2Tcnica
2.1Variante histolgica
2.1.1Resultados
4Referencias
5Bibliografa
6Enlaces externos
Fundamento[editar]
Las paredes celulares de ciertas bacterias contienen cidos grasos (cidos miclicos) de
cadena larga (50 a 90 tomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la
decoloracn con alcohol-cido, despus de la tincin con colorantes bsicos. Por esto se
denominan cido-alcohol resistentes. Las micobacterias como Mycobacterium tuberculosis
y M. marinum se caracterizan por sus propiedades de cido-alcohol resistencia. La
coloracin clsica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese
la pared bacteriana que contiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua,
provoca una nueva solidificacin de lo cidos grasos de modo que el colorante ya no
puede salir de las bacterias. Por otro lado, el calentamiento aumenta la energa cintica de
las molculas del colorante lo cual tambin facilita su entrada a las bacterias. Las bacterias
que resisten la decoloracin son de color rojo y las que no, se ven de color azul ya que se
utiliza azul de metileno como tincin de contraste.
Tcnica[editar]
Esta tcnica puede realizarse tanto en muestras histolgicas como citolgicas.
Variante histolgica[editar]
Para demostrar la presencia de BAAR en cortes de tejido en parafina.Los reactivos
necesarios para su realizacin son los siguientes:
1. cido perydico 58%
2. carbol fucsina de Ziehl culina(fucsina fenicada). Preparar mezclando en el orden
dado:
1. 0,5 g fucsina bsica
2. 50 ml agua destilada
3. 5 ml etanol absoluto
4. 28,5 g cristales de fenol derretidos
3. hematoxilina
4. alcohol cido 1%:
1. alcohol de 35
2. cido clorhdrico
El procedimiento es el siguiente:
1. desparafinar e hidratar los cortes
2. cido peridico 5%, 10 min
3. lavar con agua destilada
4. fucsina fenicada, 15 min
5. decolorar en alcohol cido al 50%
6. lavar con agua destilada
7. hematoxilina, 10 min
8. azulidificar con, por ejemplo, carbonato de litio
9. deshidratar, aclarar y montar preparaciones
Resultados[editar]
BAAR: rojo.amarillo
Ncleos: azul semiamarillo.
Variante clsica o "en caliente"=
Tincin de Gram
Tincin de Esporas
Tincin negativa