Seguridad fronteriza: Control de Calidad en la

envoltura nuclear
La identidad bioqumica nica de la envoltura nuclear confiere su capacidad
para establecer una barrera que protege el compartimento nuclear y
directamente contribuye a la funcin nuclear. Obra recientemente descubierto
los mecanismos de control de calidad que emplean la clasificacin de
complejos endosomal necesarios para la maquinaria de transporte (ESCRT) y
un nuevo brazo del retculo endoplasmtico asociada a la degradacin de
protenas (ERAD) para contrarrestar el despliegue, el dao o mal ensamblaje
de protenas de la envoltura nuclear y garantizar la integridad de las
membranas envoltura nuclear. Por otra parte, las clulas tienen la capacidad de
reconocer y triaje complejos de poro nuclear defectuosos para prevenir su
herencia y preservar la longevidad de la progenie. Estos mecanismos sirven
para poner de relieve las diversas estrategias utilizadas por las clulas para
mantener la compartimentacin nuclear; sugerimos que mitigar la progresin y
la gravedad de enfermedades asociadas con el mal funcionamiento envoltura
nuclear tales como los laminopathies.
tendencias
La protena de control de calidad est compartimentada en eucariotas: un
brazo dedicado de funciones ERAD en la INM para proteger su proteoma nico,
y tal vez su lipidoma tambin.
La maquinaria ESCRT asegura la integridad de las membranas de la NE por
ellos de sellado en el final de la mitosis.ESCRTs ayuda a asegurar el correcto
montaje y funcionamiento de los CPN durante la interfase.NPC en mal
funcionamiento est vinculado al envejecimiento: en analoga a los
mecanismos de control de calidad espaciales, la levadura en ciernes Sequester
NPCs que funcionan mal en un grupo que ayuda a prevenir su herencia a las
clulas hijas.
La prdida de la compartimentacin nuclear y el entremezclado de citoslicas y
nucleares contenidos es una caracterstica de la patologa celular de muchas
enfermedades humanas, lo que podra ser mitigado por los mecanismos de
control de calidad-NE especfico.
Palabras clave:envoltura nuclear , complejo del poro nuclear , membrana
nuclear interna , compartimentacin , ESCRT , ERAD , el control de calidad
La envoltura nuclear como subcompartimento Nuclear
A medida que el orgnulo definicin de los eucariotas, el ncleo sirve como un
excelente modelo para identificar paradigmas mecanicistas que generan y
mantienen la identidad y la funcin de orgnulos durante toda la vida de una

clula. Dos membranas concntricas delimitan el ncleo, la membrana nuclear

"interior" y "exterior" (INM y ONM), que en conjunto comprenden la envoltura
nuclear (NE). La NE es contigua con el retculo endoplsmico (ER) pero se
enriquece en un subconjunto de protenas (y los lpidos probables) que
bioqumicamente y funcionalmente distinguirla de ER. Esta especializacin es
aportado principalmente por protenas integrales de membrana que se
localizan al INM (vase la Figura I en el recuadro 1 ), y por los complejos de
poro nuclear (CPN), que median el intercambio bidireccional de molculas a
travs de la NE (Cuadro 2 ). La lmina nuclear, que es una red entretejida del
intermedio de filamentos como las protenas lamina, que es la base del INM
Tambin se considera generalmente para ser parte de la NE, aunque no es
universal para todos los eucariotas ( Cuadro 1 ). Durante las ltimas dcadas,
los principales esfuerzos realizados por el campo han arrojado luz sobre los
mecanismos que conducen a la formacin y funcin de la NE. Estos incluyen
estudios encaminados a dilucidar cmo el NE se descompone y se reform
durante la mitosis [ 1 , 2 ], cmo CPN se ensamblan [ 3 ] y mediar en el
transporte nuclear [ 4 ] , y como protena integrante de MNI estn dirigidos a
[ 5 ] , y funcin, en el INM [ 6 ] . Se est convirtiendo en claro, sin embargo,
que hay una interrupcin en la organizacin de NE y la funcin como clulas
edad y en las enfermedades humanas causadas por el mal funcionamiento NE
[ 6 , 7 ]. Estas observaciones sugieren que la capacidad de una clula para
mantener la funcin NE en el contexto de perturbacin gentica o fsica ser
crucial para su mxima viabilidad y la vida til. Con esto en mente, el trabajo
reciente est revelando el control de calidad (QC) mecanismos que
salvaguarden la integridad y la funcin de la NE, protegiendo al mismo tiempo
la viabilidad celular en la cara del mal funcionamiento del NE.
Recuadro 1

El interior de la membrana nuclear Proteoma

La INM est enriquecida con un subconjunto de protenas integrales de

membrana que se sintetizan y se insertan en el ER. El mecanismo de la
protena de membrana de orientacin a la INM sigue siendo un tema de
investigacin activa y este trabajo ha sido revisado recientemente
[ 5 ] . Aunque no parece haber diferencias en los requisitos para los receptores
de transporte nucleares para la focalizacin de protenas de MNI individuales
de energa y / o, hay sin embargo un consenso de que las protenas de
membrana se mueven a lo largo de la bicapa continua desde el ER / ONM, a
travs de la membrana de poro nuclear, a INM donde interactan con factores
nucleares, incluidos el genoma y la lmina nuclear [ 6 ] . La continuidad del
sistema NE-ER y la incapacidad de distinguir entre el INM y la ONM por
microscopa de fluorescencia convencional ha hecho que define el INM
proteoma un desafo persistente en el campo. Los estudios protemicos apoyan
que hay docenas de NE integrales (TNE) las protenas en clulas de mamfero
[51 ] , algunos de los cuales se expresan diferencialmente en los tejidos
[ 91 ] pero no todos son conocidos para localizar exclusivamente al INM; la

levadura tiene un nmero mucho menor con slo un puado claramente

identificados ( Figura I ). En metazoos, muchas protenas de MNI integrales se
unen a la lmina nuclear, que es una red de protenas de filamentos
intermedios-como compuestos de A- y laminas de tipo B ( Figura I). Las laminas
proporcionan estabilidad mecnica al ncleo, contribuyen a la inmovilizacin
NE de la cromatina que es en gran parte transcripcionalmente silencioso, y
sealizacin de las vas de influencia [ 92 ] . Si bien no est presente en todos
los eucariotas, la prevalencia de enfermedades humanas asociadas con
mutaciones en los genes de lamina que codifica ( LMNA y LMNB ) han hecho
entender su funcin lamina una prioridad [ 6 , 83 ].
Las protenas de MNI integrales ms conservadas de la levadura a los seres
humanos son miembros de la LAP2-emerin-man1 (LEM) [ 93 ] y de la familias
[SAD1-Unc84 (SUN)94 ] , categorizado por la presencia de los dominios "LEM" y
"sol" ( Figura I ). El dominio LEM es un motivo hlice extensin hlice cido 4050 amino que interacta con (por lo menos en metazoos) el factor de barrera a
autointegration factor de unin de la cromatina (BAF), pero probablemente
tambin con el ADN y otras protenas [ 93 , 95 ]. Las protenas de dominio de
Sun se encuentran dentro del espacio perinuclear lumen / NE y existen como
trmeros que se unen tres protenas de dominio KASH en la ONM ( Figura I ). La
unin de las protenas KASH con elementos del citoesqueleto citoplasmticos
acopla mecnicamente el citoesqueleto con la cromatina, aumentando la
posibilidad de la modulacin mecnica directa de los procesos de genmica
[ 96 ] .
Recuadro 2

Complejos de poro nuclear

Los CPN se construyen a partir de ~ 30 protenas, denominadas nucleoporinas

o nups, en (probablemente) todos los eucariotas. Estos 30 nups se encuentran
en Subcomplejos distintas, que se ensamblan en mltiplos de ocho a generar el
icnico de 8 veces la simetra radial del conjunto completo. En efecto,
mediante el uso de una increble variedad estructural, proyeccin de imagen,
y el modelado de los enfoques, nos estamos acercando a una comprensin a
nivel atmico de la estructura del andamio de la APN [ 97] , que una vez
formado es increblemente estables [ 66 ] . Un reto importante permanece en
la comprensin de la organizacin de un grupo de nups desordenados ricos en
residuos de fenilalanina y de aminocidos glicina se encuentran dentro de
motivos repetitivos (PMB FG). Los nups FG probable que alinean el canal
central de la APN y desempean dos funciones principales: (i) establecen una
barrera de difusin para las protenas solubles ms de ~ 40 kDa y (ii) que
facilitan el transporte activo de macromolculas (y algunas protenas de
membrana) unido a una familia de receptores nucleares de transporte solubles,
a travs de un mecanismo que an se debate en el campo [ 4 , 5 ].

Otro desafo importante es entender cmo se monta la APN. La idea general es

que el montaje de la APN se produce a travs de un mecanismo de postmitotic
e interfase [ 3 ] , aunque el trabajo reciente apoya que es probable ms
similitudes entre estos dos escenarios que se pensaba inicialmente ( ver
[ 2 ] para la discusin). Ambos mecanismos en ltima instancia, se basan en el
conjunto de etapas de nups individuales (probablemente dentro de sus
complejos afines), que se acopla a los eventos en la membrana para formar y
estabilizar un poro nuclear.
Varios nups membrana de flexin [98 , 99 , 100 ] y ER-protenas que dan forma
[ 101 ] probablemente juegan un papel clave en la formacin de un poro, pero
no fusgeno ha identificado que es capaz de fusionar el INM y la ONM. La
comprensin del mecanismo de fusin y la forma en que se acopla a la
insercin final de cientos de protenas individuales representa un obstculo
significativo para elucidar el mecanismo de montaje. Por otra parte, dado que
el misassembly de una sola NPC podra contribuir a la prdida de la integridad
de la barrera de difusin a travs de la NE, ser necesario entender los
procesos que aseguran el montaje se procede correctamente [ 60 ] .

La compartimentacin de control de calidad Los mecanismos de control

de calidad se entiende mejor son aquellas que contribuyen a la homeostasis de
protenas (Proteostasis) mediante la estimulacin del replegamiento o la
degradacin de las protenas daadas o mal plegada [ 8 , 9 ]. La prdida
gradual de estos mecanismos se cree que contribuyen a la disminucin
relacionada con la edad de la funcin celular, y a la acumulacin de la protena
mal plegada txico agregados caractersticos de la patologa de enfermedades
neurodegenerativas tales como la enfermedad de Alzheimer o de Huntington
[ 10 ] . Curiosamente, especies de protenas txicas a menudo se acumulan en
orgnulos celulares tales como el ncleo [ 11 ] , lo que sugiere que los
mecanismos de control de calidad pueden actuar localmente para proteger la
funcionalidad de los compartimentos celulares. De hecho, hay pruebas de que
el citosol [ 12 , 13 ], la membrana plasmtica [ 14 ] , las mitocondrias [ 15 ] ,
ncleo [ 16 ] , y ER [ 17 , 18 ] todos han dedicado mecanismos de control de
calidad de protenas capaces de reconocer y eliminar mal plegada o protenas
daadas.
Estas vas de control de calidad de protenas orgnulo generalmente convergen
ya sea en el sistema de la ubiquitina-proteasoma o maquinarias autofagia a
ltima instancia claras protenas defectuosas de la clula. Vale la pena
teniendo en cuenta que tambin hay una segregacin espacial de estos
mecanismos de degradacin como la maquinaria de la autofagia se cree que

est excluido del compartimento nuclear [ 19 ] , mientras que algunos

sustratos del proteasoma se degradan en el ncleo [ 10 ] - un reflejo de la
constante localizacin nuclear -state del proteasoma (a menudo en la periferia
nuclear [ 20 , 21 ]) de muchas clulas [ 22 ] . Esta segregacin de los
mecanismos de degradacin tiene claras implicaciones para cmo las protenas
mal plegadas NE o daados y los agregados de protena insoluble
(normalmente tratados por autofagia) se borran del ncleo. Por ejemplo, la
acumulacin de proteasomal subunidades en la periferia nuclear hace que la
prediccin de que un mecanismo de degradacin de la protena ubiquitinaproteasoma dependiente podra producirse especficamente en el INM; trabajo
reciente apoya que este es realmente el caso [ 23 , 24 ].
Control de calidad de protena en el INM
Hay varias razones por las que el INM podra requerir un mecanismo de control
de calidad de protena dedicado. Puesto que no hay sntesis de protenas en el
ncleo, las protenas en el INM estn aislados de otras vas de control de
calidad de protenas que actan temprano, durante, o justo despus de la
traduccin para garantizar el plegamiento correcto y la orientacin
[ 25 , 26 , 27]. Adems, de las tensiones "normales" encontradas por todas las
protenas (trmica, oxidativa, etc.), se sugiere que el ncleo, ya que es un gran
orgnulo y tal "rgido '[ 28 ] , tambin se somete nica para tanto internos
(mediada por las conexiones con el citoesqueleto) y tensin mecnica externa
que podran conducir a desarrollo o dao de protenas de MNI, incluyendo
laminas, que desempean un papel clave en la determinacin de las
propiedades mecnicas del ncleo [ 28 ] . A medida que la NE es continua con
la sala de emergencias, parece plausible que los mecanismos de control de
calidad de protena ER como la degradacin de ER-asociado (ERAD; [ 18 ] )
podran tambin extenderse a la proteoma INM. Los componentes clave de
ERAD son conservadas evolutivamente, pero se caracterizan mejor en
levaduras e incluyen dos E3 ubiquitina ligasas, Hrd1 y Doa10, se cree que son
responsables de la ubiquitinacin de todos los sustratos conocidos ERAD,
centrndose as en ellos por la degradacin proteasomal [ 29 ] .
Muchas pistas de trabajo llevado a cabo durante los ltimos 15 aos apoyan
que ERAD podra funcionar para degradar las protenas no plegadas del INM,
incluyendo el trabajo pionero estableciendo que Doa10 (pero no Hrd1) es capaz
de acceder y actuar en el INM [ 30 ] . Por otra parte, se sabe que los
componentes ERAD estar involucrado en el volumen de ventas de varias
protenas NE [ 31 , 32 , 33 ]. La prueba ms directa para ERAD en el INM fue
proporcionado por trabajos recientes pruebas de la estabilidad del producto de
unSEC61 alelo ( sec61-2 ), que codifica un componente translocon ER que se
puede desplegar de forma condicional despus de la integracin y la sntesis
de la membrana a alta temperatura [ 23 ] . Aadiendo una secuencia INMfocalizacin de la protena sec61-2, su despliegue podra ser activado

especficamente en el INM. Sorprendentemente, la degradacin de la sec61-2

localizada-INM era dependiente de la funcin de dos ligasas E3 relativamente
no caracterizados, ASI1 y Asi3 ( Figura 1 A, Figura Key). A diferencia de Doa10 y
Hrd1, ASI1 y Asi3 acumular en el INM en estado estacionario [ 34 , 35 ], que
apoya la existencia de un brazo-INM especfico dedicado de ERAD ( Figura 1 A).
La proteccin de la identidad del INM
Ms all de la eliminacin de las protenas no plegadas en subcompartimentos
especficos, tales como el INM, orgnulos pueden tener la capacidad de
reconocer especficamente y degradar las protenas inapropiada localizadas. Un
ejemplo convincente es la degradacin de protenas ER-cola anclada
mistargeted a las mitocondrias, mediada en parte por una mitocondrial AAA
ATPasa [ 36 ] . Por lo tanto, adems de servir como receptores de protenas
especficas despus de la sntesis, orgnulos pueden tener una capacidad
mayor de lo previsto en el control de su proteoma locales mediante la
distincin 'auto' de 'no-yo'. El INM podra ser particularmente vulnerables a la
mala focalizacin de protenas de la membrana debido a su continuidad con el
ER, el sitio casi exclusiva de la integracin de protenas de membrana. De
acuerdo con esta idea, Sec61, un componente de la translocon ER, puede
acceder a la INM [30 ] , lo que sugiere que muchas protenas ER podran ser
capaces de atravesar la membrana de poro nuclear. Es plausible que la mala
focalizacin o la retencin inadecuada de las protenas de membrana pueden
desplazar o bien las protenas nativas del INM, o conducir efectos deletreos
dominantes negativos sobre las funciones nucleares, que requieren
mecanismos para proteger el proteoma INM.
El concepto de que el INM tiene la capacidad de diferenciar entre las protenas
correctamente orientadas y mistargeted se apoya en una pantalla gentica
utilizada para identificar posibles dianas de ERAD mediada-Asi, varios de los
cuales resultaron ser componentes de la membrana de la vacuola [ 24 ] . Como
la pantalla se llev a cabo mediante la evaluacin de la fluorescencia de un
tndem protena fluorescente temporizador C-terminal anexa a prcticamente
cada marco de lectura abierto de levadura, que era posible que la adicin de
una etiqueta afectada la localizacin vacuolar de estas protenas. Esta
suposicin es correcta, ya que la sobreexpresin o de marcado C-terminal de
un subconjunto de protenas de la membrana vacuolar dio lugar a su
acumulacin en el NE y ER [ 24 ] . Estos resultados apoyan un modelo en el
que el inspector encuestas complejas del proteoma INM y tiene la capacidad de
distinguir 's' y 'no-yo' (Figura 1 A).
Ser emocionante para entender si el mecanismo que subyace a la triaging
molecular del complejo Asi refleja los principios fundamentales que se pueden
extender a otros ejemplos de orgnulo proteoma de vigilancia [ 36 ] . Puesto
que la composicin de la INM est en ltima instancia, gobernada por el NPC,

que impone una barrera de difusin para las protenas de membrana con
dominios extralumenal mayores de ~ 90 kDa y facilita el transporte activo de
otros [ 5 , 37], un modelo de este tipo hace que la prediccin comprobable que
mutaciones que hacen que el NPC ms permisiva a INM acumulacin de
protenas [ 30 , 38, 39 , 40 ] podran proporcionar fondos genticos donde se
requiere nicamente el complejo Asi (o equivalente de mamfero, an no se ha
identificado) para la viabilidad celular.
La proteccin del INM lipidome
Curiosamente, adems de su papel en el control de calidad de protenas, ERAD
tambin controla los niveles de enzimas que sintetizan esteroles tanto en
levaduras y clulas de mamfero [ 18 ] . Esto plantea la posibilidad de que una
funcin importante de la va Asi es la de regular directamente la ruta de
biosntesis de ergosterol, tal vez mediante la segregacin de la sntesis de
ergosterol espacialmente lejos de la INM [ 23 ] . De hecho, ERG11, una enzima
crucial en la va de sntesis de ergosterol, se localiza en la sala de emergencia y
enriquece en el NE, cuando su facturacin se atena en asi1 clulas
[ 23 ] .Desde ergosterol se sabe que altera la fluidez de las membranas, un
modelo sera que la fluidez de membrana es crucial para la funcin de NE. Esta
idea se hace eco de varios estudios que han implicado una segregacin
espacial distinta de los lpidos dentro de la NE crtico para permitir la dinmica
de NE [ 41 ] , incluyendo la insercin del centrosoma en la levadura [ 42 , 43 ],
la biognesis de CPN [ 44 , 45 , 46 ], y cambios en la composicin y la forma de
la membrana durante la mitosis [ 47 , 48 , 49 , 50 ]. Por lo tanto, es interesante
tener en cuenta el complejo Asi como un componente crucial del equipo de
control de calidad de vital importancia para el mantenimiento de la
subcompartimento NE protegiendo no slo su proteoma nico pero quizs
tambin una lipidoma nico.Al igual que los retos inherentes a la identificacin
del proteoma completo INM resultante de su ntima conexin con la sala de
emergencia [ 51 ] , la identificacin de un lipidoma del INM resultar an ms
desalentadora. Sugerimos que esta ser una necesidad crtica, sin embargo, ya
que proporcionar una valiosa fuente de informacin sobre los mecanismos
que subyacen a la dinmica NE.
El mantenimiento de la barrera NE con ESCRTs
Los cambios en las propiedades biofsicas de las membranas NE probable que
permiten la membrana dinmica remodelacin eventos esenciales para la
funcin de la NE. Por ejemplo, a diferencia de la mayora de los otros orgnulos,
que se heredan intacta por las clulas hijas durante la mitosis, la NE
(incluyendo CPN) se descompone completamente y reformado con cada
divisin celular en algunos eucariotas [ 1 , 2 ]. Durante la interfase, la NE se
remodela a travs de la biognesis de nuevos puntos de contacto, y, al menos
en algunas clulas, la gemacin de vesculas que llevan partculas de

ribonucleoprotenas "mega" a travs de la NE [ 52 ] . Sugerimos que, en

circunstancias en las que estos eventos "normales" de remodelacin de
membrana no se realizan correctamente que suponen una amenaza para la
compartimentacin nuclear, y por lo tanto estos eventos podran estar bajo la
vigilancia de los mecanismos de control de calidad que funcionara para
asegurar la funcin de la APN y / o la integridad NE.En consonancia con esta
idea, el agotamiento de los PMB cesta nucleares provoca una inhibicin
mediada por Aurora B de la abscisin cytokinetic, por tanto, que une
ntimamente la biognesis de los NPCs de la progresin del ciclo celular
[ 53 ] . Curiosamente, este puesto de control de abscisin se basa en la funcin
de los complejos de clasificacin endosomal requeridas para el transporte
(ESCRT) maquinaria [ 54 ] ( Box 3 ), que ejemplifica una de las varias formas en
que los ESCRTs estn vinculados a la funcin NE.
Ms all de montaje de la APN, la mayor amenaza para la compartimentacin
nuclear durante las etapas terminales de la reforma NE despus de la mitosis
es el establecimiento de un NE continua. Durante NE reforma, ER tbulos se
adhieren a la superficie de la cromatina, se aplanan en una hoja, y se
extienden lateralmente para encapsular el genoma [ 1 , 2 ]. Estas lminas de
membrana ER convergen en anillos, que en ltima instancia necesita ser
fusionada a sellar el NE [ 1 ] ; dos estudios interesantes implican la maquinaria
ESCRT-III y la AAA ATPasa VPS4 ( Cuadro 3 ) como mediadores de este proceso
crucial [ 55 ,56 ] ( Figura 1 C). Por otra parte, ESCRT-III tambin recluta
espastina a los sitios donde los microtbulos del huso (MT) estn asociadas a la
cromatina [ 56] . Desde escinde espastina MT, su contratacin proporciona un
mecanismo convincente que une aclaramiento MT de sellado NE ( Figura
1 C). El uso de la maquinaria ESCRT-III para cerrar agujeros NE es atractivo
como la topologa de la membrana en estos sitios sera idntica a lo que se
observa en otros eventos de fisin membrana mediado por ESCRT-III
[ 57 ] ( Figura 1 C, Cuadro 3 ). Sin embargo, es poco probable que la topologa
por s sola es suficiente para reclutar ESCRT-III de la NE ya que se necesitan
adaptadores de protenas para su distribucin en otras ubicaciones
subcelulares [ 57 ] .
En consonancia con la idea de que podra haber adaptadores especficos NEESCRT-III, UFD1 promueve ESCRT-III reclutamiento a la naciente NE, quizs a
travs de la unin directa a la subunidad ESCRT-III, CHMP2A [ 55 ] . Un papel
para UFD1 tiene sentido como, junto con sus parejas de unin Npl4 y la AAA
ATPasa Cdc48 / p97, se ha implicado previamente en el sellado de la NE,
probablemente a travs de la eliminacin de la influencia inhibidora de Aurora
B quinasa de la superficie de la cromatina [ 58 , 59 ]. Puede que no actuar por
s solo, sin embargo, como tan bien caracterizados en componentes ESCRT-IIIcomo, CHMP7, tambin parece ser un jugador clave en ESCRT-III NE
contratacin [ 56 ] . Por otra parte, ya que ni UFD1 ni CHMP7 son componentes
de la NE, sigue siendo posible que factores adicionales de contratacin NE

estn an por identificar. Debido a sus funciones conocidas en el reensamblaje

NE, los candidatos principales son protenas integrales del INM [ 2 ] ( Cuadro 1).
Un trabajo reciente en ciernes levadura indica que Heh1 y Heh2 (LEM los
dominios de protenas ortlogos INM integral; ver Figura I en el recuadro 1 )
interactan con ESCRT-III en la NE [ 60 ] . Los datos apoyan un modelo en el
que ESCRT-III / Vps4 contribuyen a la biognesis de la APN, quizs facilitando la
liquidacin de defectuosas montaje intermedios de la APN de la NE ( Figura
1B). La iluminacin ltimo de los mecanismos moleculares que requerir el
examen de la morfologa de NE en los sitios donde ESCRT-III es reclutado por el
dominio LEM contiene protenas. Por ejemplo, es posible que el conjunto de
NPC aberrante conduce a la formacin de un agujero en la NE que requiere un
evento de fusin de membrana mediada por ESCRT-III para sellar el NE ( Figura
1 C). Alternativamente, defectuosos intermedios de montaje de la APN pueden
ser despojados de la membrana por la AAA ATPasa Vps4, lo que podra
remodelar complejos de protenas a travs de un mecanismo anlogo a otras
ATPasas AAA [ 61 ] ( Figura 1 B). Por ltimo, una posibilidad emocionante
invocara un modelo en el que ESCRTs claras nups misassembled a travs de un
intermedio vesicular dentro de la luz NE [ 62 ] ( Figura 1 B) en un mecanismo
anlogo al herpesvirus egreso nuclear [ 63 ] . Si bien los mecanismos exactos
son actualmente difcil de alcanzar, un fenotipo de unin entre la levadura y
clulas de mamfero es la prdida de la compartimentacin nuclear en
ausencia de la funcin ESCRT-III / Vps4 [ 55 , 56 , 60 ]. Por lo tanto, de forma
acumulativa, estos estudios sugieren que ESCRT el aspecto ms conservadas
de la funcin ESCRT-III en la NE es proteger compartimentacin nuclear en todo
el ciclo celular.
La proteccin de la APN herencia por Control de Calidad Espacial
Si bien es posible prever cmo ESCRTs podran sellar el NE o eliminar un
conjunto de NPC defectuoso intermedio, es menos evidente cmo las clulas
son capaces de hacer frente a un NPC que pierde la funcin como resultado de
desplegamiento de la protena o dao, particularmente ya que no son
mecanismos conocidos para eliminar completamente formado CPN que
abarcan tanto el INM y la ONM. De hecho, los componentes del andamio de la
APN (Recuadro 2 ) son extremadamente estables [ 64 , 65 ], siendo sustituido
en escalas de tiempo de mes (s) [ 66 , 67 ]. Por otra parte CPN pueden
acumular dao oxidativo que impide su funcin en las neuronas postmitotic
[ 65 ] , donde algunos nups andamio se pierden en el tiempo [ 67 ] , lo que
sugiere que la APN mal funcionamiento podra ser una entrada al
envejecimiento. En consonancia con esta idea, el trabajo en ciernes levadura
apoya que la robustez del sistema de transporte nuclear podra influir
directamente en la vida til de replicacin, lo que sugiere que la funcin de la
APN es fundamental para garantizar la longevidad [ 68 ] . Dado que la levadura
se someten a una divisin asimtrica en la que el NE no se descompone, se

ofrece un modelo valioso para explorar cmo evaluar las clulas y hacer frente
a las protenas que funcionan mal y complejos (incluyendo CPN) y cmo el
envejecimiento de estas vas de impacto [ 69 ] .
Los estudios realizados en levadura en ciernes han sido instrumentales en la
identificacin de los mecanismos de "control de calidad espacial 'que conducen
al secuestro de protenas mal plegadas en agregados o inclusiones
[ 70 ] . Estas inclusiones sirven como tanques de retencin que mitiguen los
efectos nocivos de las protenas defectuosas en la homeostasis celular, la
viabilidad, y la vida til. A menudo estn asociadas con orgnulos, por ejemplo,
como su nombre sugiere, el juxtanuclear (JunQ; [ 71 ] ) o el control de calidad
intranuclear (INQ; [72 ] ) compartimiento se asocia con el ncleo, mientras que
el depsito de protena insoluble (IPOD) es proximal a la vacuola [ 71 ] . En
algunos casos, orgnulo de unin sirve como una estrategia eficaz para
restringir la herencia de protenas mal plegadas a las clulas hijas
[ 73 , 74 ]; invocan otros mecanismos de transporte con motor a lo largo de los
elementos del citoesqueleto [ 75 ] . La evidencia de que daa NPC tambin
podra ser una entrada al envejecimiento sugiere que puede haber
mecanismos para prevenir su herencia a las hijas; Por lo tanto, en lugar de la
eliminacin, el uso de agregacin o agrupamiento en el NE es una estrategia
potencial.
En consonancia con la idea de que los CPN podra agregarse con mal
funcionamiento y / o edad, un grupo de NPC se ha observado en las madres
viejas replicativamente, que se ha denominado el "tope NPC [ 76 ] . Mientras
que la tapa es ms evidente cuando los plsmidos episomales estn unidos a
puntos de contacto a travs del complejo SAGA, morfolgicamente se asemeja
a la de almacenamiento de compartimento NPC incorrectamente montado
(SINC), que es un repositorio para NPC misassembled en el NE [ 60 ] ( Figura
1D) . Como los defectos de transporte nuclear en clulas madre SINC que
contienen se invierten en las hijas [ 60 ] , estos datos de forma acumulativa
sugerir que la levadura tiene la capacidad para segregar funcional en puntos
de contacto no funcionales. Un mango de potencial sobre el mecanismo que
triages NPC podra estar con el canal central FG-nup, NSP1. De hecho, los
niveles de NSP1 y un nup relacionada, Nup116, se reducen en las clulas
madre de edad [68 ] ; estos resultados sinergia con estudios en los que el
agotamiento controlado de NSP1 impide la herencia de CPN hijas [ 77 , 78 ]. Por
lo tanto, es probable NSP1 un nodo crucial en una va de control de calidad que
detecta la funcionalidad de NPC y regula su transmisin a los descendientes,
tal vez a travs de la modulacin de una difusin barrera yema del cuello
[ 76 , 77 , 78 ,79 , 80 ].
Observaciones finales

Hemos puesto de manifiesto varios estudios contemporneos que apoyan la

existencia de mecanismos de control de calidad que garantizan la
compartimentacin nuclear mediante la preservacin de la funcin de la APN y
la integridad de la NE ( Figura 1 ). Estos estudios plantean cuestiones
importantes para el trabajo futuro (vea las preguntas pendientes), muchos de
los cuales se centran en los mecanismos que permiten el reconocimiento de
protenas defectuosas del INM, NPCs, o agujeros NE. Por otra parte, ya que
muchos de estos mecanismos se han caracterizado en la levadura, ser
importante identificar sus homlogos de mamferos. Cabe sealar, sin
embargo, que los mecanismos celulares que funcionan en estas vas son, en
general, bien conservadas, el apoyo que mientras matices mecanicistas
podran existir en eucariotas multicelulares, el concepto de que el NE est
protegido por los mecanismos de control de calidad anlogas es un escenario
probable . Con esto en mente, ser interesante explorar estos mecanismos en
los sistemas multicelulares, postmitotic que no se benefician de un evento
mittico degradacin, lo que liberara protenas no plegadas o daados de
compuestos macromoleculares tales como NPC o la lmina para facilitar su
separacin. La observacin de que existen diferencias en la cintica de rotacin
de los PMB andamio en las neuronas del cerebro de rata [ 67 ] apoya la
existencia de mecanismos de control de calidad capaces de eliminar nups de la
APN en escalas de tiempo de meses a aos; cmo se produce esto, y cmo
estudiar estos eventos, es un reto para el trabajo futuro.
Curiosamente, la prdida de los PMB andamio como resultado del dao en las
neuronas de edad [ 65 , 67 ] sugiere que la capacidad de reemplazar ellos
podra ser atenuada con la edad, apoyando el concepto de que una capacidad
de control de calidad reducida contribuye a la patologa de las enfermedades
proteotoxic [ 10 ] . Por lo tanto, creemos que es de vital importancia que los
mecanismos de control de calidad se incorporan en nuestra descripcin de la
patologa de muchas enfermedades que muestran defectos en la funcin NE
[ 81] . Muchos de los laminopathies, por ejemplo, el resultado de la expresin
de patgenos LMNA alelos que actan de una manera dominante negativo, tal
vez mediante la formacin de agregados de protena en la NE o en el ncleo
[ 82 , 83]. Para borrar los agregados nucleares de clulas postmitotic podra
requerir mecanismos de control de calidad que invocan un mecanismo en
ciernes a travs de la NE, que fue recientemente la hiptesis [ 81 ] , tal vez con
la ayuda de ESCRT-III actuando en el INM [ 60 ] . Alternativamente, un
mecanismo anlogo al fragmentaria autofagia del ncleo (PMN) en la que los
contactos nucleares-vacuolar / lisosomal engullen porciones del ncleo
[ 84 ] podra ser empleado. Mientras PMN slo se ha observado en la levadura,
los lisosomas con contenidos nucleares hacen tope el ncleo en las clulas que
expresan algunos alelos laminopathy [ 85 ] , haciendo alusin a la conservacin
potencial de esta va. Por otra parte, la regulacin positiva inducida
farmacolgicamente de la autofagia se ha demostrado para mitigar el impacto

nocivo de mutantesLMNA alelos en cardiomiopata [ 86 ] , el apoyo que los

escenarios de tratamiento podra tambin beneficiarse de la va teniendo en
cuenta los objetivos de control de calidad.
Adems de la proteotoxicity potencial de las protenas codificadas
por LMNAmutaciones, una caracterstica comn de las clulas con una lmina
defectuosa es una interrupcin de la integridad de NE y la mezcla subsiguiente
de citoslicas y nucleares contenidos [ 7 , 28 ]. Sorprendentemente, algunas de
las rupturas EN observada en las clulas que expresan alelos laminopathy
[ 87 ] , y tambin los que se observan en varias lneas celulares de cncer
[ 88 ] , son transitorios y por lo tanto se estn reparando constantemente. Es
fcil imaginar cmo el papel de ESCRT-III en el sellado de la NE en el extremo
de la mitosis podra ser portado a uno que es capaz de reparar este tipo de
eventos de ruptura; Esta hiptesis est apoyada por la capacidad de ESCRT-III
para reparar heridas de la membrana plasmtica [ 89 , 90 ], y por lo tanto
proporciona otra va interesante de futuro bsqueda experimental en los
mecanismos que protegen el compartimento nuclear.
Recuadro 3

La maquinaria ESCRT

La maquinaria ESCRT consta de varios mdulos, ESCRT-0, -I, -II, -III y de la AAA
ATPasa, Vps4 (y los factores asociados) [ 57 ] , todos los cuales estn bien
conservadas de la levadura a los seres humanos [ 102 ] . Se ha estudiado
ampliamente como un actor clave en la biognesis de cuerpo multivesicular
donde juega un papel en la clasificacin de receptores transmembrana
ubiquitylated en vesculas intraluminales formados a partir de la invaginacin y
escisin de membranas endosomal. Mientras ESCRT-0, y -II se cree -I para
desempear funciones en el proceso de clasificacin, ESCRT-III y Vps4 se
requieren para el evento de escisin de la membrana que se forma definitiva la
vescula intraluminal [57 ] . Mientras que el mecanismo de escisin exacta
sigue siendo objeto de debate, hay varios modelos que han sido propuestas
que incorporan la notable capacidad de ESCRT-III para oligomerizar en un
filamento que forma una espiral helicoidal o cnica que es capaz de
invaginacin membranas de distancia desde el citosol y que recubre la cuello
de una invaginacin [ 57 , 102 , 103 ]. Vps4 se cree que desempean un papel
en desmontar el filamento ESCRT-III en una etapa terminal que remodela el
complejo
de
una
manera
que
podra
promover
la
escisin
[ 104 ] . Curiosamente, los estudios recientes en la levadura y en clulas de
mamfero apoyan que es slo ESCRT-III y la AAA ATPasa Vps4 que funcionan a
la NE [ 55 , 56 , 60 ]. Desde ESCRT-II se cree que desempean un papel en el
reclutamiento de ESCRT-III de endosomas, factores de reclutamiento anlogos
probablemente contribuyen a la unin del NE ESCRT-III y podran incluir UFD1
[ 55 ] , CHMP7 [ 56 ] , o de dominio LEM protenas integrales de membrana
[ 60 ] .

El uso de adaptadores especficos del sitio se piensa que es un mecanismo

importante para apuntar ESCRT-III a varias ubicaciones subcelulares [ 57 ] . Por
ejemplo, ESCRT-III ha sido implicado en la salida viral de la membrana
plasmtica, la abscisin de la membrana durante la citocinesis, mantenimiento
centrosoma, y reparacin de la membrana de la herida plasma
[ 57 , 89 , 90 ]. En la mayora de estos contextos, que acta sobre las
membranas que comparten una topologa comn ejemplificado por un agujero
de NE ( Figura 1 C). Es probable que hay matices al mecanismo de fisin que
pudiera verse afectada por interacciones con los adaptadores s mismos
[ 105 ] , o el uso de combinaciones nicas de subunidades ESCRT-III
[ 103 , 106 ].
Cuestiones pendientes
Cules son los mecanismos por los cuales las protenas integrales INM
mistargeted y / o daados se detectan antes de un despeje de ERAD? Esta es
una cuestin fundamental que va al corazn de la forma en compartimentos
celulares son capaces de evaluar la funcionalidad de sus proteomas nicas.
Cmo son reclutados para ESCRTs agujeros en el NE? Ms especficamente, la
prestacin de los adaptadores de protenas se han identificado, cmo son
capaces de reconocer la topologa nica de los agujeros NE, y es este supuesto
mecanismo utilizado en otras localizaciones subcelulares en el que ESCRTs
acto, como, por ejemplo, durante el montaje de la APN?
Son clulas capaces de evaluar la funcionalidad de CPN individuales y, en caso
afirmativo, cmo ocurre esto? Cmo estn daados nups quitar y poner en
neuronas viejas postmitotic? Hay un lipidoma INM nico que se requiere para
permitir la dinmica NE? Hay mecanismos anlogos a la autofagia
fragmentaria o salida nuclear viral que permiten la eliminacin de grandes
agregados de protena del ncleo?
Cmo mecanismos de control de calidad impactan en la patologa celular y del
organismo de los laminopathies y otras enfermedades en las que se ha
observado mal funcionamiento NE?