INSTITUTO TECNOLOGICO DE TUXTLA

GUTIERRZ

LICENCIATURA EN
INGENIERA BIOQUMICA

MATERIA
BIOQUIMICA

DOCENTE
QBP. AURA FLORES PREZ

REPORTE DE PRCTICA
DETERMICACIN DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA DE LA CATALAZA

EQUIPO 5 INTEGRANTES

TUXTLA GUTIERREZ, CHIAPAS A __ DE ABRIL DEL 2016

INTRODUCCIN
La vida es inconcebible sin las enzimas. Las enzimas no solo intervienen en la
sntesis de compuestos biolgicos, catalizan tambin reacciones que abastecen a
la clula de la energa, destoxifican compuestos, producen luz, etc. Las enzimas
son responsables de virtualmente todas las reacciones qumicas de las clulas, en
las cuales se forman o rompen enlaces covalentes. Aumentan la velocidad de una
reaccin al proporcionar una ruta de reaccin alternativa que requiere menos
energa que la reaccin sin catalizar.

OBJETIVO
Determinar y cuantificar la actividad enzimtica de la catalasa en productos
naturales de origen animal y vegetal.
MARCO TERICO
La catalasa es una enzima que se encuentra en los tejidos vivos de animales y
vegetales; perteneciente a la categora de las oxidorreductasas que se encuentra
en organismos vivos como los peroxisomas y cataliza la descomposicin del H 2O2
en O2 y H2O. La reaccin catalizada por la enzima, ocurre en dos etapas, en las
cuales interviene el hierro del grupo hemo de la hemoglobina como cofactor. Se
efecta con dos molculas de H 2O2; esto resulta en la formacin de H 2O (sustrato
reducido) y O2 (donador oxidado).
H2O2

H2O +

1
2 O2

Las formas reducidas de las L- y D- aminocido-oxidasa pueden reaccionar

directamente con el oxgeno molecular, formando perxido de hidrogeno y
regenerando las formas oxidadas de las enzimas:
E FMNH 2 + O2

E FMN + H2O2

E FADH 2 + O2

E FAD + H2O2

En las clulas eucariotas, tanto las L- como las D-aminocido oxidasas, as como
la urato-oxidasa, se encuentran en los microcuerpos, considerados como
orgnulos oxidativos especializados. Contienen la catalasa necesaria para la
descomposicin del H2O2 producido por estas oxidasas; por esta razn, los
microcuerpos reciben el nombre de peroxisomas.

MATERIALES

Material

Reactivos

Muestras

2
1
1
5
1
1
1
1

Pipetas de 5 ml
Pipeta de 10 ml
Tubos de ensayo

HCl a 1N
NAOH a 1%
Perxido de hidrgeno

Manzana
Papa
Frijol

Gradilla
Pinza de diseccin
Termmetro
Calormetro

Plata coloidal (microdin)

Agua destilada

Hgado de pollo

1
1
1
1
2

Bao Mara
Piseta
Exacto
Pedazo de Hule
Vasos de pp de 250mL

DESARROLLO DE LA PRCTICA

*Nota: las muestras

deben ser crudas y
cocida.

Muestra

Actividad de la
catalasa

Altura de la
espuma

Hgado crudo

Positiva

6 cm

Hgado cocido

Negativa

0 cm

Hgado con HCl

Negativa

0 cm

Hgado con
NaOH

Positiva

3.5 cm

Hgado con
Microdin

Positiva

7.5 cm

Papa cruda

Positiva

2.5 cm

Papa cocida

Negativa

0 cm

Manzana cruda

Positiva

0.7 cm

RESULTADOS

Calormetro
Muestra
5gr de Hgado
crudo
+
10 ml H2O2

Temperatura
inicial
29C

Temperatura
final
33C

Tiempo
5 minutos

OBSERVACIONES
Durante el desarrollo de la prctica se pudo observar la actividad enzimtica de la
catalasa en los tejidos de animales y vegetales mediante los alimentos que
usamos, manzana, papa, frijol e hgado de pollo. Al agregar H 2O2 a los alimentos,
se observ cmo se desprenda espuma (O2 y H2O) en diferentes medidas, se us
una regla para saber los cm de espuma que desprenda cada alimento. La misma
cantidad de alimentos se cocieron a bao Mara y al momento de agregar el
perxido se observ que no hubo desprendimiento de espuma (no hubo reaccin).
Para el hgado de pollo hubo un tratamiento previo con NaOH al 1%, con HCL al
1N y con Microdin. Al agregar perxido al tubo con hidrxido de sodio se pudo
observar que si hubo reaccin, en el tubo que tena el hgado y cido clorhdrico
no se desprendieron burbujas por lo que no hubo reaccin alguna, en el tubo con
alimento y Microdin se pudo observar el mayor desprendimiento de espuma, en
comparacin que los tubos de alimentos sin coccin y el tubo con hidrxido de
sodio. En el calormetro se observ el calor que desprende la reaccin de
descomposicin del perxido.

DISCUSIN DE LOS RESULTADOS

Al analizar los resultados obtenidos, se puede decir que los alimentos de origen
tanto vegetal como animal tienen catalasa, y presentan diferentes actividades
enzimticas. La catalasa es una enzima formada por protenas, en las muestras
que fueron sometidas al bao mara para su coccin, el calor desnaturalizo las
protenas, por lo cual no hubo reaccin en estas muestras, sin embargo se
observaron algunas burbujas, por la poca cantidad de oxigeno que se liber en la
reaccin, quizs porque pese a la coccin quedaron algunas enzimas que
reaccionaron ante el perxido de hidrgeno y por tal motivo se observaron algunas

burbujas aunque no las suficientes para considerar a la reaccin positiva; por otro
lado en la muestras crudas, las protenas que constituyen a la catalasa se
encontraban intactas y por ello la enzima llevo a cabo la accin de descomponer el
H2O2 en H2O y O2, por ello en las pruebas positivas se observ la presencia de
burbujas.
El tubo que contena el hgado de pollo con HCl no reacciono porque el cido al
interactuar con el tejido lo cosi por lo tanto las protenas de la catalasa se
desnaturalizaron y no se observ ninguna burbuja. En las muestras a las que se
les fue adicionada una base; el (NaOH) a pesar de que es una base fuerte si hubo
reaccin. En el caso del Microdin, la bibliografa dice que este ayuda a la
descomposicin del perxido de hidrogeno por lo que aument la cantidad de O 2 y
H2O desprendida, por lo que, si se present una actividad enzimtica positiva,
pues hubo presencia de burbujas a lo largo del tubo.
BIBLIOGRAFA

Ma. Pilar Gonzales, Manuela Caballero, engracia Olivares, Aurelio

Santiesteban. (2003). Prcticas de laboratorio y de aula. Madrid. Narsea
S.A. Ediciones. Pg. 29

Referencia:https://books.google.com.mx/books?
id=l_o6kIbkLU0C&pg=PA28&dq=catalasa&hl=es&sa=X&ved=0ahUKEwjfyN3UyufL
AhWERiYKHVm_ByAQ6AEIOzAG#v=onepage&q=catalasa&f=false

Evelin Rodriguez, Mara del Mar Gamboa, Francisco Hernandez, Jorge

Danilo Garcia. Bacteriologa general. Pg. 217.

Referencia:https://books.google.com.mx/books?
id=vwB0fgirgN0C&pg=PA217&dq=catalasa&hl=es&sa=X&ved=0ahUKEwjcvcnlpen
LAhXE74MKHXEdD24Q6wEIITAB#v=onepage&q=catalasa&f=false