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ARTICLE IN PRESS

PHARMA-431; No. of Pages 7

Annales Pharmaceutiques Franaises (2015) xxx, xxxxxx

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ARTICLE ORIGINAL

Application du test de robustesse pour


lvaluation de lincertitude de mesure au
terme de phase de dveloppement dune
mthode chromatographique de
quantication de cinq vitamines
hydrosolubles
Application of robustness test for assessment of the measurement uncertainty
at the end of development phase of a chromatographic method for
quantication of water-soluble vitamins
B. Ihssane a,, H. Bouchafra a,b, M. El Karbane b,
M. Azougagh c, T. Saffaj a
a

Laboratoire de chimie organique applique, facult des sciences et techniques, universit


Sidi Mohamed Ben Abdellah, BP 2202, route dImouzzer, Fs, Maroc
b
Laboratoire national de contrle des mdicaments, direction de mdicaments et de la
pharmacie, ministre de la Sant Publique, Rabat, Maroc
c
Institut suprieur des professions inrmires et techniques de sant, avenue Hassan II,
route de Casa, Rabat, Maroc
ut 2015 ; accept le 6 octobre 2015
Rec
u le 17 ao

MOTS CLS
Incertitude de
mesure ;
Robustesse ;

Rsum
Objectif. Nous proposons dans ce travail un moyen efcace pour valuer lincertitude de
mesure lissue de ltape de mise au point dune mthode danalyse, vu que cette valuation
permet de donner une indication de la performance du processus doptimisation.
Mthode. Lestimation de lincertitude est effectue via un test de robustesse par
lapplication dun plan de Placquett-Burman en investiguant six paramtres inuant la mthode

Auteur correspondant.
Adresses e-mail : chouaibihssane@yahoo.fr, bouchaib.ihssane@usmba.ac.ma (B. Ihssane).

http://dx.doi.org/10.1016/j.pharma.2015.10.002
0003-4509/ 2015 Publi par Elsevier Masson SAS pour lAcadmie Nationale de Pharmacie.

Pour citer cet article : Ihssane B, et al. Application du test de robustesse pour lvaluation de lincertitude de mesure au
terme de phase de dveloppement dune mthode chromatographique de quantication de cinq vitamines hydrosolubles.
Ann Pharm Fr (2015), http://dx.doi.org/10.1016/j.pharma.2015.10.002

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B. Ihssane et al.
Plan
Plackett-Burman ;
Dosage
chromatographique
des vitamines

de dosage chromatographique simultan de cinq vitamines hydrosolubles. Les effets valus de


variation de chaque paramtre sont traduits en valeur dincertitude-type chaque niveau de
concentration.
Rsultats. Les valeurs de lincertitude relative obtenues ne dpassent pas la limite
dacceptation de 5 %, montrant ainsi que la mise au point du mode opratoire a t bien
accomplie. De plus, une comparaison statistique de type test-F, mene pour comparer les
incertitude-type issues de ltape de dveloppement et celles de ltape de validation, indique
que les estims de lincertitude sont quivalents.
Conclusion. Lensemble des rsultats trouvs montre, nettement, la performance et la capacit de la mthode chromatographique doser simultanment les cinq vitamines ainsi son usage
adquat en application de routine.
2015 Publi par Elsevier Masson SAS pour lAcadmie Nationale de Pharmacie.

KEYWORDS

Summary
Objective. We propose in this work an efcient way to evaluate the measurement of uncertainty at the end of the development step of an analytical method, since this assessment
provides an indication of the performance of the optimization process.
Method. The estimation of the uncertainty is done through a robustness test by applying a
Placquett-Burman design, investigating six parameters inuencing the simultaneous chromatographic assay of ve water-soluble vitamins. The estimated effects of the variation of each
parameter are translated into standard uncertainty value at each concentration level.
Results. The values obtained of the relative uncertainty do not exceed the acceptance limit of
5%, showing that the procedure development was well done. In addition, a statistical comparison
conducted to compare standard uncertainty after the development stage and those of the
validation step indicates that the estimated uncertainty are equivalent.
Conclusion. The results obtained show clearly the performance and capacity of the chromatographic method to simultaneously assay the ve vitamins and suitability for use in routine
application.
2015 Published by Elsevier Masson SAS on behalf of Acadmie Nationale de Pharmacie.

Measurement
uncertainty;
Robustness test;
Plackett-Burman
Design;
Chromatographic
assay of vitamins

Introduction
Une mthode danalyse est un outil de dcision indispensable. En consquence, les mesures analytiques doivent
tre sufsamment crdibles pour que toute dcision sur
cette base puisse tre prise avec conance. Ce qui explique
quune bonne procdure danalyse est celle qui a pour
objectif dtre en mesure de quantier aussi prcisment
que possible chacune des quantits inconnues que le laboratoire devra dterminer [14].
Parmi les tapes de cycle de vie dune mthode analytique, on trouve la phase de la mise au point (ou phase de
dveloppement). Lobjectif de cette tape dtude est de
chercher les conditions opratoires optimales utilisant, souvent, la technique des plans dexpriences, par exemple,
la mthodologie de surface de rponse [58]. Toutefois,
on a observ que rarement quon rclame un calcul primitif de lincertitude de mesure lissue de ltape de
dveloppement visant chercher si loptimisation a t
bien accomplie. Lobjectif principal de ce document est
de proposer une mthode simple et efcace pour estimer
lincertitude de mesure aprs la phase doptimisation. En
effet, un test de robustesse est recommand an dvaluer

leffet de variation dun ensemble de paramtres inuents


sur les rsultats fournis par la mthode analytique. Barwick
et Ellison proposent dutiliser le plan de Plackett-Burman
pour tudier leffet dun ensemble de facteurs inuant la
mthode danalyse et aussi calculer, pour chaque paramtre, son effet traduit en valeur dincertitude-type [9].
Dans ces papiers, nous essayons donc de dmontrer
laptitude lemploi dune mthode chromatographique
liquide (HPLC) pour quantier cinq vitamines dans la forme
pharmaceutique. Cette mthode a t mise au point via
un plan de surface de rponse par Bouchafra et al. [8].
La mise en vidence de la performance de la dite mthode
est conrme par lapplication des outils chimiomtriques
qui nous aident vrier labsence de leffet dventuelles
modications des conditions opratoires sur les mesures
de dosage simultan des vitamines. Le plan exprimental
de type Plackett-Burman permet effectivement de raliser
cette investigation, dans un nombre limit dexpriences,
fournissant une estimation de lincertitude de mesure au
terme de la phase de dveloppement.
Nous visons galement, par ce travail, de comparer les
estims de lincertitude obtenus lissue de ltape de
dveloppement avec ceux trouvs en tape de validation.

Pour citer cet article : Ihssane B, et al. Application du test de robustesse pour lvaluation de lincertitude de mesure au
terme de phase de dveloppement dune mthode chromatographique de quantication de cinq vitamines hydrosolubles.
Ann Pharm Fr (2015), http://dx.doi.org/10.1016/j.pharma.2015.10.002

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valuation de lincertitude au terme de dveloppement dune mthode analytique


Cette comparaison est trs utile, du moment quelle nous
permet de connatre la performance et la capacit de la
mthode chromatographique mesurer simultanment avec
exactitude les quantits inconnues des cinq vitamines dans
lapplication de routine.

Tableau 1 Conditions chromatographiques optimises


de la mthode de dosage des cinq vitamines.
Chromatographic conditions optimized for the ve vitamins assay.
Paramtre
Colonne danalyse

Temprature de la
colonne
Volume dinjection
Phase mobile A
Phase mobile B

Rapport A:B
Dbit
Dtection UV

Conditions et valeurs
Lichrospher RP-selected B C18,
diamtres des particules 5 m,
125 mm 4 mm
30 C
50 L
Actonitrile (ACN)
0,015 M de sel sodique dhexane
acide sulfonique, pH x
3,6 avec lacide phosphorique
10:90 (v/v)
1,2 mL/min
270 nm

Mthodes
Cas dtude : dosage chromatographique de
cinq vitamines hydrosolubles
Une mthode chromatographique rapide pour la dtermination simultane de cinq vitamines hydrosolubles dans
des comprims multivitamins a t dveloppe dans notre
laboratoire. Les vitamines sujettes danalyse sont lacide
ascorbique (VC), le nicotinamide, (VB3), le chlorhydrate de
pyridoxine (VB6), la riboavine (VB2) et le chlorhydrate
de thiamine (VB1) [8]. La mise au point a t effectue
moyennant doutil chimiomtrique tel que les plans expriences. En effet, un plan de criblage a t utilis, dans
un premier temps, pour slectionner les facteurs inuents.
Ensuite, un plan de surface de rponse de type BoxBehnken est appliqu pour trouver les valeurs optimales des
facteurs inuents. Les conditions chromatographiques optimises obtenues du dosage RP-HPLC sont indiques dans le
Tableau 1.

Test de robustesse
Lvaluation de lincertitude de mesure, au terme de la
phase de dveloppement, a t effectue travers le test
de robustesse. Ce test consiste examiner les modications
des paramtres de la mthode ( facteurs ).
Les essais de lvaluation du test de robustesse, de la
mthode chromatographique pour le dosage des vitamines
dans la forme pharmaceutique, ont t raliss en appliquant le plan de Plackett-Burman construit partir dun
plan exprimental de N = 12, comme il est indiqu dans le
Tableau 2.

Six facteurs, soupc


onns davoir de linuence sur la
mesure de la procdure analytique, sont slectionns
savoir le type de modicateur organique (X1 ), le type de
la colonne (X2 ), la concentration du ractif de paire dions
(X3 ), la temprature de la colonne (X4 ), le pH de la solution
tampon (X5 ) et le dbit de la phase mobile (X6 ). Le domaine
de variation de ces facteurs est donn par le Tableau 3.
Leffet de chaque facteur tudi est estim ainsi par la
diffrence entre la moyenne des rsultats obtenus au niveau
(+1) et celle obtenue au niveau (1) comme illustr par
lquation (1) suivante [913] :
DXJ =

1
N





Yi (+)

1
N





Yi ()

(1)

Avec
DXJ est la diffrence calcule pour chaque facteur,
Yi (+) et Yi () reprsentent respectivement, les rsultats
de lessai du plan de Plackett-Burman au niveau suprieur
(+1) et infrieur (1) de chaque facteur.
Xj reprsente le facteur tudi, avec j indice du nombre
de facteur de 1 6.
An de dterminer si la variation dun paramtre a un
effet signicatif sur le rsultat danalyse, un test de Student
a t utilis avec un risque de 5 %. Ainsi, un facteur est
considr comme tant signicatif si la valeur du t-test est
suprieure la valeur critique (pour un degr de libert de
p1 et au niveau de conance de 95 % o p est le nombre
de dterminations utiliss pour lestimation de lcart-type
de prcision Spr ). Le test t est calcul, pour chaque facteur,
par la formule suivante :
 

N
2 DXj 
txj =
(2)
2 Spr
Avec N/2 est le nombre dexpriences ralises chaque
niveau, pour chaque paramtre et Spr est lestimation de la
prcision de la mthode, obtenue dans ltape de dveloppement partir de 3 sries de 4 rptitions de lanalyse du

Tableau 2 Matrice du plan de Plackett-Burman incomplte ralise pour ltude de la robustesse.


Matrix of Plackett-Burman incomplete design conducted
for the robustness study.
Essai, N

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12

Facteurs, Xj
X1

X2

X3

X4

X5

X6

1
+1
+1
1
+1
1
+1
1
+1
1
+1
1

+1
1
+1
1
+1
+1
+1
+1
1
1
1
1

1
+1
1
1
1
+1
+1
+1
+1
+1
1
1

1
+1
+1
+1
+1
+1
1
1
1
+1
1
1

1
1
+1
+1
1
1
+1
+1
1
+1
+1
1

+1
+1
1
+1
1
+1
+1
1
1
1
+1
1

Pour citer cet article : Ihssane B, et al. Application du test de robustesse pour lvaluation de lincertitude de mesure au
terme de phase de dveloppement dune mthode chromatographique de quantication de cinq vitamines hydrosolubles.
Ann Pharm Fr (2015), http://dx.doi.org/10.1016/j.pharma.2015.10.002

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B. Ihssane et al.
Tableau 3 Facteurs et leurs niveaux tudis dans le test de robustesse.
Factors and their levels investigated in the robustness test.
Facteur indpendant

Unit

Niveau ()

Niveau (+)

Type du modicateur organique


Type de la colonne
Concentration de paire-ion
Temprature de la colonne
pH de la solution tampon
Dbit de la phase mobile

mol/L

mL/min

MeOH
A
0,01
20
2
0,8

ACN
B
0,02
30
2,5
1,2

mme chantillon utilis dans ltude pendant trois jours,


raison dune srie par jour.

Calcul de lincertitude de mesure


Sagissant de ltude de la signicativit de leffet de
chaque facteur inuant la mthode par le plan de
Plackett-Burman, deux cas sont considrer pour estimer
lincertitude de mesure. Ainsi la procdure de calcul est la
suivante : si tXj est infrieur tctit (tcrit est la valeur rfrence tire de la table de Student), la diffrence DXj nest
pas signicativement diffrente de zro. En consquence,
lincertitude-type u(y(Xj )) sur la mesurande y (teneur en
vitamine) provenant du facteur Xj est value par lquation
(3) suivante [14] :

  

u y Xj

 
 DX 
j

1, 96

j

(3)

O j = real /test . real est la variation usuelle du facteur


Xj quand la mthode fonctionne sous contrle et test est la
variation introduite dans le test de robustesse.
Pour les facteurs qui conduisent des effets signicatifs,
lincertitude est estime comme suit :

  

u y Xj

 

 
 DX 
j

= u Xj cj = j
3

(4)

Avec cj est le coefcient de sensibilit pour le facteur Xj .

 DX 
changement observ de rsultat
j
cj =
=
changement du paramtre
test

(5)

Et lincertitude due au facteur Xj , note u (Xj ), a t estime partir dune distribution de probabilit rectangulaire
selon lquation (6) [15] :

 
u Xj = test/ 3
(6)

Rsultats et discussion
Le test de robustesse a t achev sur un chantillon reprsentatif reconstitu au niveau du laboratoire pour couvrir
trois niveaux de concentrations : 80 %, 100 % et 120 % de la
valeur cible pour chaque vitamine. Lincertitude de mesure
a t donc calcule chaque niveau de concentration.
Le Tableau 4 donne galement un aperc
u sur les
 = real /test . Les valeurs real sont tires soit partir des
informations de la littrature propose par Barwick et

Ellison [9,15] ou soit des spcications dans les manuels de


lquipement utilis.
Les calculs des valeurs de Student tXj et la diffrence DXJ , pour chaque facteur, sont regroups dans le
Tableau 5. La contribution de chaque facteur pour le calcul de lincertitude de y est estime selon lquation (3),
si leffet nest pas statistiquement signicatif. Pour les facteurs qui conduisent des effets importants, lincertitude
est estime partir de lquation (4).
Les valeurs de lincertitude, pour chaque facteur,
sont calcules facilement fournissant nalement, selon
lquation (7), lincertitude-type de la teneur (y) pour
chaque vitamine et chaque niveau de concentration tudi.
u (y) =

u2 (y (X1 )) + u2 (y (X2 )) + + u2 (y (X6 ))

(7)

O u(y(X1 )) est, par exemple, la contribution du


facteur 1 pour le calcul de lincertitude-type. Par
ailleurs, lincertitude largie est calcule en multipliant
lincertitude-type par un facteur de k selon lquation
suivante :
U (y) = k u (y)

(8)

Avec k est le facteur de couverture, le choix de la valeur


de ce facteur est bas sur le niveau de conance dsir.
Pour un niveau de conance approximatif de 95 %, k est pris
gale 2.
Lensemble de rsultats qui correspondent aux calculs
des valeurs de lincertitude-type, lincertitude largie et
lincertitude relative est regroup dans le Tableau 6.
Ltude des rsultats rsums par le Tableau 6 montre
que les valeurs de lincertitude relative sont acceptables
puisquelles ne dpassent pas la valeur 5 %, considre

Tableau 4 Valeurs des variations usuelles et variation


dans ltude de robustesse.
Values of the usual variations and changes in the robustness study.
Facteur

test

rel

Modicateur organique
Type de colonne
Concentration de paire-ion
Temprature de la colonne
pH de la solution tampon
Dbit de la mobile phase

1
1
0,01
10
0,5
0,4

1
1
0,002
2
0,2
0,006

1
1
0,2
0,2
0,4
0,015

Pour citer cet article : Ihssane B, et al. Application du test de robustesse pour lvaluation de lincertitude de mesure au
terme de phase de dveloppement dune mthode chromatographique de quantication de cinq vitamines hydrosolubles.
Ann Pharm Fr (2015), http://dx.doi.org/10.1016/j.pharma.2015.10.002

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valuation de lincertitude au terme de dveloppement dune mthode analytique

Tableau 5 Valeurs de t-Student et la diffrence D(x) pour chaque facteur de chaque vitamine.
Values of t-Student and difference D (x) for every factor of each vitamin.
Vitamine

VC

D(x)
t(x)
D(x)
t(x)
D(x)
t(x)
D(x)
t(x)
D(x)
t(x)

VB1
VB2
VB3
VB6
a

Paramtrea

Facteur
Modicateur
organique

Nature de
colonne

Concentration
de pair-ion

Temprature
de colonne

pH

Dbit

0,0002
1,1417
0,0003
15,181
0,0002
10,073
0,0006
2,2177
0,0002
6,1212

0,0000
0,2233
0,0003
17,423
0,0002
8,7637
0,0008
3,0695
0,0001
2,2132

0,0005
2,3381
0,0006
30,589
0,0004
18,232
0,0013
4,7711
0,0003
11,1157

0,0001
0,4910
0,0003
10,446
0,0002
6,2888
0,0006
1,6736
0,0001
2,0808

0,0005
1,9577
0,0004
14,461
0,0003
11,083
0,0012
3,2459
0,0001
4,0451

0,0003
1,0158
0,0005
19,009
0,0003
10,705
0,0021
5,3971
0,0003
8,3618

Valeur critique de t-Student gale 2,201.

comme limite dacceptabilit dans le domaine pharmaceutique. Par contre, pour la riboavine, nous remarquons
distinctement un dpassement de la limite dacceptabilit,
ceci pour les trois niveaux de concentrations tudis.
Par ailleurs, nous avons procd une comparaison des
rsultats trouvs de lincertitude en phase de validation
avec ceux obtenus lissue de ltape de dveloppement.
Bas sur lutilisation des intervalles de tolrances de type
, -content tolrance intervalle , lincertitude en tape
de validation est calcule par la formule de lquation 9
[1,3,4].
u(Yk ) =

U k Lk
2Q (v)

(9)

Avec

Q() est le (1 + )/2 quantile de la distribution de tStudent avec  degrs de libert,


Yk est la concentration calcule au k-ime niveau,
Lk et Uk sont respectivement, la limite infrieure et suprieure de --content tolrance intervalle.
Notons que ces deux intervalles de tolrance sont calculs pour = 90 % et = 95 % (risque pris gal 5 %). Cela
signie que 90 % des futures mesures seront incluses dans
les limites dacceptation avec un risque de se tromper de lordre de 5 %. En fait, sagissant des vitamines
considres comme supplments dans le secteur pharmaceutique, il est indispensable de garantir au moins une
proportion de 90 % des mesures comprises entre les limites
dacceptation pour dclarer que la mthode chromatographique est capable de doser simultanment les cinq
vitamines.

Tableau 6 Incertitude value au terme de ltape de dveloppement via le test de robustesse pour chaque vitamine,
chaque niveau de concentration tudi.
Uncertainty evaluated at the end of the development step using the robustness test for each vitamin, at each concentration level studied.
Vitamine

Concentration
(mg/mL)

Incertitudetype
(mg/mL)

Incertitude largie
(mg/mL)

Incertitude
relative (%)

Vitamine C

0,1601
0,2001
0,2401
0,0120
0,0150
0,0180
0,0040
0,0050
0,0060
0,0402
0,0501
0,0602
0,0080
0,0101
0,0120

0,00031
0,00054
0,00062
0,00017
0,00023
0,00024
0,0001
0,00016
0,00017
0,00022
0,00055
0,00061
0,00008
0,0001
0,00013

0,00062
0,00108
0,00124
0,00034
0,00046
0,00048
0,00020
0,00032
0,00034
0,00044
0,00110
0,00122
0,00016
0,00020
0,00026

0,39
0,54
0,52
2,83
3,07
2,67
5,00
6,40
5,67
1,09
2,20
2,03
2,00
1,98
2,17

Thiamine

Riboavine

Nicotinamide

Pyridoxine

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terme de phase de dveloppement dune mthode chromatographique de quantication de cinq vitamines hydrosolubles.
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Tableau 7 Rsultats de comparaison des valeurs dincertitude-type issues de ltape dtude de dveloppement et de
validation.
Results of the comparison of the standard uncertainty values resulting from the development and validation study.
Vitamine

Vitamine C

Thiamine

Riboavine

Nicotinamide

Pyridoxine

Concentration
(mg/mL)

0,160
0,200
0,240
0,012
0,015
0,018
0,004
0,005
0,006
0,040
0,050
0,060
0,008
0,010
0,012

Dveloppement

Validation

Paramtres statistiques

Incertitudetype
(mg/mL)

Incertitude
relative (%)

Incertitudetype
(mg/mL)

Incertitude
relative (%)

Valeur de F

p-value

0,00031
0,00054
0,00062
0,00017
0,00023
0,00024
0,0001
0,00016
0,00017
0,00022
0,00055
0,00061
0,00008
0,0001
0,00013

0,4
0,5
0,5
2,8
3,1
2,7
5,0
6,4
5,7
1,1
2,2
2,0
2,0
2,0
2,2

0,00077
0,00065
0,00072
0,00025
0,00018
0,00020
0,00012
0,00015
0,00018
0,00022
0,00063
0,00079
0,00015
0,00010
0,00025

1,0
0,6
0,6
4,2
2,4
2,2
5,9
5,8
5,8
1,1
2,5
2,6
3,9
2,0
4,1

6,22
1,45
1,33
2,19
1,61
1,44
1,41
1,21
1,06
1,03
1,31
1,69
3,72
1,04
3,62

0,003
0,306
0,350
0,138
0,255
0,310
0,292
0,403
0,477
0,497
0,360
0,233
0,024
0,492
0,039

Concernant la comparaison statistique, puisque dans


cette tude les mmes chantillons sont analyss par
la mme mthode, il est ais de comparer les estims
dincertitude en appliquant le test de Fisher (test-F). Une
diffrence est dclare signicative si la p-valeur (probabilit) ne dpasse pas le seuil x = 0,05. Les rsultats
de comparaison par le test-F, chaque niveau de concentration et pour chaque vitamine, sont rsums dans le
Tableau 7.
En examinant ces rsultats, sauf le premier niveau de
concentration de la vitamine C et la pyridoxine, les pvaleurs (probabilits) sont suprieures 0,05. Ce qui montre
lexistence daucune diffrence signicative. Daprs les
rsultats de la comparaison statistique, nous jugeons que les
deux estims de lincertitude sont quivalents. Ces conclusions montrent effectivement que la mise au point de la
mthode, faite en phase de dveloppement, donne des
rsultats plausibles vu que lincertitude obtenue est acceptable.
On outre, nous remarquons que les valeurs de
lincertitude relative, calcule en tape de validation pour
la vitamine riboavine, sont aussi leves et dpassent la
limite dacceptabilit.
Ce rsultat nous laisse recommander que lanalyste
devrait tre vigilant la modication des paramtres tudis du fait que cette modication entrane une incertitude
leve pour le dosage de la Riboavine.

Conclusion
Le dveloppement, ainsi loptimisation du mode opratoire, est considr comme tant une tape importante et

cruciale dans le cycle de vie dune mthode analytique.


De ce fait, durant cette tape un ensemble doutils chimiomtriques, tels que les plans factoriels et les plans de
surface de rponse, sont exploits en vue dobtenir les
conditions opratoires optimales de la mthode optimise.
Cependant, et avant de passer ltape suivante de validation analytique, rarement quon se demande est-ce que
cette optimisation obtenue conduit des mesures entaches
dune incertitude acceptable. Le prsent travail a permis de
trouver une solution permettant dvaluer lincertitude de
mesure lissue de ltape de la mise au point. Ceci est
accompli par un test de robustesse en appliquant un plan
de Plackett-Burman. Ltude de robustesse est ralise en
tudiant leffet de modication de six paramtres inuant
les mesures dune mthode chromatographique de dosage
simultan de cinq vitamines hydrosolubles dans une forme
pharmaceutique.
Les effets valus des paramtres investigus sont traduits en valeurs dincertitude-type estimes trois niveaux
de concentrations. Les valeurs de lincertitude relatives calcules, pour chaque niveau de concentration et pour chaque
vitamine, permettent de dclarer que le mode opratoire
optimis est able. En consquence, le passage ltape
de validation est possible puisque lincertitude trouve ne
dpasse pas les limites dacceptation.
De plus, une tude statistique est mene pour comparer les estims de lincertitude de mesure issus des deux
tapes, dveloppement et validation. Les conclusions de
cette comparaison dnudent clairement que les estims de
lincertitude sont quivalents et montrent galement que
la mthode chromatographique optimise est apte lusage
pour le dosage de cinq vitamines dans les formes pharmaceutiques.

Pour citer cet article : Ihssane B, et al. Application du test de robustesse pour lvaluation de lincertitude de mesure au
terme de phase de dveloppement dune mthode chromatographique de quantication de cinq vitamines hydrosolubles.
Ann Pharm Fr (2015), http://dx.doi.org/10.1016/j.pharma.2015.10.002

Modele +
PHARMA-431; No. of Pages 7

ARTICLE IN PRESS

valuation de lincertitude au terme de dveloppement dune mthode analytique

Remerciements
Les auteurs tiennent remercier le directeur et le personnel du laboratoire de contrle qualit des mdicaments de
Rabat au Maroc pour leurs aides fructueuses.

[8]

Dclaration de liens dintrts


Les auteurs dclarent ne pas avoir de liens dintrts.

Rfrences
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Pour citer cet article : Ihssane B, et al. Application du test de robustesse pour lvaluation de lincertitude de mesure au
terme de phase de dveloppement dune mthode chromatographique de quantication de cinq vitamines hydrosolubles.
Ann Pharm Fr (2015), http://dx.doi.org/10.1016/j.pharma.2015.10.002