Prctica 5.

Punto Isoelctrico de una Protena

INTRODUCCIN
La leche contiene vitaminas, minerales, protenas, carbohidratos y lpidos .la
propiedad de la casena es su baja solubilidad (pH 4.6). Si se aade a la leche
acido la carga negativa de la superficie de la micela se neutraliza y la protena
neutra precipita . Todas las macromolculas de la naturaleza adquieren una carga
cuando se dispersan en agua y esta depende del pH medio. As todas las
protenas y carbohidratos tienen una carga neta. Debido a la composicin pueden
existir de tres maneras catinicos, neutros y anionicos por lo tanto cuando las
protenas tienen una carga muy cercana a cero o de cero se dice que es su punto
isoelctrico. En el punto isoelctrico las cargas se encuentran en equilibrio por lo
tanto precipitan.
MATERIALES
Vasos de precipitado
Matraz aforado
Parrilla
Agitador magntico
Termmetro
Bureta
Embudo de vidrio
Probeta
Pipetas
Vidrio de reloj
Tubos de ensaye
Gradilla
Piceta
METODOLOGA

AISLAMIENTO DE LA CASENA
Calentar 150ml de
agua (38C)

Aadir 50ml de leche y

gota a gota agregar el
acetico acetico

Filtrar y lavar con 20ml

de etanol

Agregar 5ml de ter y

filtrar
PREPARACIN
DE LA SOLUCIN DE CASENA
Aforar a 50ml la
solucin debe ser
clara.

Prctica 5.Punto Isoelctrico de una Protena

250mg con 20ml de

agua destilada y 5ml
de NaOH

Disolver y agregar 5ml

de cido actico

DETERMINACIN DEL PUNTO ISOELCTRICO DE LA CASENA

Preparar las soluciones correspondientes a la tabla.

DISCUSIN Y RESULTADOS
TUBO

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Acetato
de sodio
0.1N
0.5
1
1.5
2
3
4
5
6
7
8

cido
actico
0.1N
9.5
9
8.5
8
7
6
4
2
-

cido
actico
0.01N
4
2

pH
resultante
aprox.
3.2
3.6
3.8
4.0
4.2
4.5
4.7
5.1
5.5
6.1

pH
resultante
3
2
3
4
4
5
5
5
7
8

En la tabla se pueden observar tanto los valores tericos como los

valores obtenidos

Los puntos isoelctricos proporcionan informacin til para razonar sobre el

comportamiento de los aminocidos y protenas en solucin. En nuestro caso
tericamente el pH final debera de haber sido de 3.5 a 6.5 sin embargo tenemos
resultados mayores esto se debe a las diferentes cantidades que se le puso a
cada uno ya que en base a eso tienden a tener un pH diferente por lo cual la
casena no es capaz de solubilizarse ya que lo que se esperara es que las cargas
sean casi neutras. El pH se dispar debido a que hubo un gran aumento en la
acidez.Los aminocidos y las protenas son menos solubles en su punto
isoelctrico si las dems condiciones permanecen iguales. Esto se debe a que los
iones dipolares no presentan carga neta y cristalizan en forma de sales insolubles
a ese pH.

Soluciones a distintos pH

Aqu se puede observar en cual se

solubilizo (los nmeros son
correspondientes con el numero anotado

Prctica 5.Punto Isoelctrico de una Protena

Aqu no hay una solubilizacion por lo tanto

se ve en dos faces

CUESTIONARIO
1-Por qu las protenas tienen solubilidad mnima en el punto isoelctrico?
Las protenas generalmente tienen muchos grupos ionizables, los que tienen una
variedad de pK. A pH fisiolgico el grupo carboxilo est disociado y el amino tiene
carga positiva. Puede actuar como cido cediendo el grupo amino un protn y
como base aceptndolo el grupo carboxilo. El estado de disociacin depende del
pH al que se encuentre la disolucin y lo fuerte que sea el cido, habiendo muy
fuertes y muy dbiles. Independientemente de la cadena lateral tienen 2 grupos

Prctica 5.Punto Isoelctrico de una Protena

disociables, el -amino y el -carboxilo. Para tener el aminocido totalmente

protonado el pH debe ser muy cido. La tendencia a disociarse viene dada por el
pK (pK ms pequeo, cido ms fuerte). Como el carboxilo tiene pK ms bajo que
el amino se disocia antes. Al aumentar el pH se disocia primero -carboxilo y
luego el amino.
2-indicar los aminocidos por los que est formada la casena?
Acido asprtico, a. glutmico ,alanina, arginina, cistina, fenilalanina, glicina,
histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, prolina, serina, tirosina, treonina,
triptfano, valina.
3-cmo se calcula el punto isoelctrico?
El pH isoelectrico se calcula como media de pKa,1 y pKa,2, es decir, la media de los
pKas de las etapas que forman y descomponen el Zwitterin.
pI = (pKa + pKa)/2
BIBLIOGRAFA
Pg. de internet

http://www.fisicanet.com.ar/quimica/bioquimica/ap02_proteinas.php
Pg. de internet

http://www.ecured.cu/Punto_isoel%C3%A9ctrico
Pg. de internet

https://www.saberespractico.com/estudios/universidad/bioquimicauniversidad/punto-isoelectrico-de-los-aminoacidos-naturales/