ROTEIRO DE AULA PRTICA

TEMA: Anlise macro e microscpica dos microfungos isolados e

discusso dos resultados obtidos
PROTOCOLOS DAS TCNICAS

I) Para as placas de petri com meio de cultura (solo, ar, impresso

foliar):
Anlise macroscpica I (a olho desarmado):
1. Observar as UFCs (unidades formadoras de colnias de fungos) com a placa de
petri ainda fechada (parte superior com a tampa para baixo)
2. Quantificar (por contagem) as UFCs, caso seja possvel (quando no existe
sobrecrescimento de UFCs)
3. Observar cada UFC quanto a: (i) aspecto (filamentoso, no-filamentoso), (ii)
colorao (branca, verde, negra, castanha, etc.)
4. Com a placa de petri ainda fechada, inverter a placa e observar fundo da
mesma, tentando correlacionar as UFCs que foram vistas por cima com as
observadas por baixo

Anlise macroscpica II (com o auxlio de estereomicroscpio):

1. Levar a placa de petri ao microscpio estereoscpico
2. Ligar a lmpada (luz refletida)
3. Abrir a placa de petri
4. Selecionar uma colnia para ser visualizada por vez
5. Observar a UFC selecionada, inicialmente com a lente de menor aumento
6. Tentar identificar as estruturas somticas (miclio) e estruturas reprodutivas
(esporangiforos, esporngios, conidiforos), se houver
7. Visualizar as estruturas somticas e/ou reprodutivas em lentes de maior
aumento

Preparo da lmina para observao ao microscpio

1. Retirar, com auxlio de uma pina e um estilete, pequena quantidade do miclio

e/ou estruturas reprodutivas de uma UFC
2. Colocar o material retirado sobre uma lmina previamente limpa e seca
3. Colocar, com o auxlio de um conta-gotas, 1 gota de gua destilada
4. Desfiar suavemente o material sobre a lamnula, utilizando duas pinas (uma
delas para manter parte do material firme e a outra para puxar outra parte do
material).
5. Cobrir com uma lamnula (a descida da lamnula deve ser feita delicadamente
para que no haja formao de bolhas)

Anlise microscpica (com o auxlio de microscpio):

1. Levar o material ao microscpio
2. Ligar a lmpada (luz transmitida)
3. Focalizar a montagem com a objetiva de menor aumento (4x)
4. Tentar identificar as estruturas somticas (miclio composto por hifas
cenocticas ou septadas) e estruturas reprodutivas (esporangiforos, esporngios)
j visualizadas na anlise macroscpica
4. Observar o material com as outras objetivas secas de maior aumento (10x e
40x), visualizando os detalhes das estruturas, bem como os esporos

II) Para as placas de petri com papel de filtro (substratos orgnicos

fezes e folhas cortadas):
Anlise macroscpica (com o auxlio de estereomicroscpio):
1. Levar a placa de petri ao microscpio estereoscpico
2. Ligar a lmpada (luz refletida)
3. Abrir a placa de petri
4. Observar os substratos orgnicos (fezes e folhas cortadas)
5. Tentar identificar as estruturas somticas (miclio) e estruturas reprodutivas
(esporangiforos, esporngios), se houver
6. Visualizar as estruturas somticas e/ou reprodutivas em lentes de maior
aumento
OBS: O preparo da lmina para observao ao microscpio e a anlise
microscpica so realizadas conforme explicitado anteriormente

II) Para as placas de petri com iscas em meio lquido (gua ou gua +
solo)
Anlise macroscpica (com o auxlio de estereomicroscpio):
1. Levar a placa de petri ao microscpio estereoscpico
2. Ligar a lmpada (luz transmitida)
3. Abrir a placa de petri
4. Observar as iscas de substratos orgnicos (sementes etc.)
5. Tentar identificar as estruturas somticas (miclio) e estruturas reprodutivas
(esporangiforos, esporngios), se houver
6. Visualizar as estruturas somticas e/ou reprodutivas em lentes de maior
aumento
7. Desligar a lmpada (luz transmitida)
8. Ligar a lmpada (luz refletida)
9. Repetir os passos 4-6 com esta lmpada ligada
OBS: O preparo da lmina para observao ao microscpio e a anlise
microscpica so realizadas conforme explicitado anteriormente

Discusso dos resultados obtidos por tcnica e por placa

1. Nmero de diferentes morfo-espcies por placa
2. Quantidade de UFCs por placa
3. Grupos Taxonmicos identificados