INFORME DEL LABORATORIO HIDRLISIS DE POLISACRIDOS

AUTORES:
ANDREA CAMILA BECERRA VERJEL (710709)
LAURA SANDRID CARRILLO SANJUAN (710680)
LEONEL PEREZ ARMESTO (710655)

Trabajo Presentado Para La Materia De Bioqumica

Director:
DIEGO ARMANDO ROJAS MEZA

UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y DEL AMBIENTE
ZOOTECNIA
Ocaa, Colombia

septiembre 2016

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ndice

Captulo 1: Marco terico.................................................................................................................1

1.1 Introduccin............................................................................................................................1
1.2 Objetivos.................................................................................................................................3
1.2.1 Objetivo general..............................................................................................................3
1.2.2Objetivos especficos........................................................................................................3
1.3 Justificacin............................................................................................................................4
1.4 Fundamento terico................................................................................................................5
Capitulo 2: Metodo...........................................................................................................................7
2.1 Mareriales...............................................................................................................................7
2.2 Metodologa y procedimiento.................................................................................................7
2.2.1 Experimento 2. reaccin de benedict...............................................................................7
2.2.2 Experimento 3. Reaccin de fehling...............................................................................7
2.2.3 Experimento 4. Reaccin de Bial....................................................................................8
2.2.4 Experimento 5. Reaccin de seliwanoff..........................................................................8
2.3 Resultados...............................................................................................................................8
2.3.1 BENEDICT GRUPO N 1..............................................................................................9
2.3.2 BENEDICT GRUPO N2.............................................................................................10
2.3.3 FEHLING......................................................................................................................11
2.3.4 BIAL..............................................................................................................................12

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2.3.5........................................................................................................................................13
2.3.6 SELIWANOFF GRUPO N 2.......................................................................................14
2.4 DISCUSIONES....................................................................................................................15
CAPITULO 3: CUESTIONARIO..................................................................................................18
Captulo 4: Conclusin...................................................................................................................19
Captulo 5: Bibliografa..................................................................................................................20
Anexos............................................................................................................................................21

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CAPTULO 1: MARCO TERICO

1.1 Introduccin

Es glucgeno y el almidn son polmeros lineales de monosacrido simple. La glucosa es el

principal constituyente de los polisacridos, no es el nico si es el de mayor relevancia.
Constituido por numerosas unidades de sta. El almidn presenta memos ramificaciones que el
glucgeno, frecuente, cada 24-30 unidades de monmeros, y masa molecular ms elevada, hasta
de varios millones. Los almidones constituyen la principal fuente de nutricin glcida para la
humanidad.

Un polisacrido es un polmero que est compuesto por una extensa sucesin de

monosacridos, unidos entre s a travs de enlaces glucosdicos. Los polisacridos pueden
incluirse dentro del grupo de los hidratos de carbono, que tambin son conocidos como
carbohidratos o glcidos.

En el laboratorio se realiz el hidrolisis de polisacridos con HCl como acido fuerte,

neutralizando con NaOH y se practicaron diferentes pruebas como Lugol para detectar la
presencia de polisacridos, Benedict para detectar carbohidratos reductores, Barfoed para
monosacridos y disacridos y Bial para pentosas, se obtuvo como resultado un positivo para la
presencia de los mismos.

Polisacridos

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Los polisacridos estn formados por la unin de centenares de monosacridos, unidos por
enlaces O-glucosdicos. Existen algunos formados por unidades de pentosa, llamados
pentosas, pero los que tienen importancia biolgica son los polmeros de unidades de hexosas,
llamados tambin hexosas, y muy especialmente los polisacridos formados de glucosa.

Propiedades y clasificacin.
Los polisacridos son sustancias de gran tamao y peso molecular. Son totalmente insolubles
en agua, en la que pueden formar dispersiones coloidales. No tienen sabor dulce. Pueden ser
cristalizados, mantienen el aspecto de slidos de color blanco y carecen de poder reductor. Se
pueden clasificar en dos grandes grupos:

Homopolisacridos, formados por el mismo tipo de monosacridos. Destacan por su inters

biolgico el almidn, el glucgeno, la celulosa y la quitina.

Heteropolisacridos, formados por diferentes monmeros. Entre ellos se encuentran la

pectina, la hemicelulosa, el agar-agar y diversas gomas y mucopolisacridos.

Los seres vivos se distinguen de la materia inanimada por estar compuestos de molculas
orgnicas, que incluyen carbohidratos, grasas, protenas y cidos nucleicos. Estas molculas son
orgnicas por tener tomos de carbono. Adems de carbono, las molculas orgnicas contienen
varios o todos estos elementos: hidrgeno, oxgeno, nitrgeno, azufre y fsforo.

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1.2 Objetivos

1.2.1 Objetivo general.

Verificar la hidrlisis del polisacrido, almidn.

Comparar mediante diferencia de tiempo requerido en cada uno de los

procedimientos y las condiciones requeridas para que suceda la hidrlisis.

Observar e identificar la accin del hidrlisis de polisacridos en accin de la
enzima alfa-amilasa y cido clorhdrico.

1.2.2Objetivos especficos.

Determinar el comportamiento del almidn con la solucin de yodo.

Con las pruebas del laboratorio anterior identificar los monmeros y tipo de

glcidos reductores o no.

Observar e identificar azucares reductores.

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1.3 Justificacin

Para reconocer e identificar e identificar la argumentacin vista, ahondar en efectuar una

prueba fsico-qumica que permita familiarizarnos con los carbohidratos y a la vez observar las
reacciones particulares de ellas.

Los carbohidratos tambin llamados azcares, osas o sacridos, son polihidrxialdehidos

o polihidroxicetonas o compuestos polimricos que por hidrlisis producen polihidrxialdehidos
y polihidroxicetonas.

A travs de esta prctica se logr la identificacin por mtodos colorimtricos

cuantitativos de carbohidratos: monosacridos, disacridos y polisacridos.

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1.4 Fundamento terico
La identificacin de carbohidratos es un problema analtico frecuente en bioqumica. Se
recurre a una serie de reacciones qumicas y a ciertas propiedades fsicas y fisicoqumicas
caractersticas de los azucares.

Existen reactivos que fcilmente deshidraten a los carbohidratos, glcidos que en

presencia de compuestos fenlicos dan sustancia coloreadas y es como el reactivo de molisch, el
cual permite identificar carbohidratos en general, cuyo derivado suyo respondan positivamente a
esta prueba, monosacridos, olisacaridos, polisacridos ye incluso glucoprotenas.
Otros reactivos, dan prueba positiva cuando en sus estructuras moleculares de cadena abierta con
su grupo carbonilo libre y se puede oxidar fcilmente con llevando una a reduccin de un
reactivo, con inclusin de iones metlicos, ion cprico, para cuproso produciendo un precipitado
rojo para la prueba de Barboed.

Por el contrario otros reactivos interaccionan con todo azcar que posea un grupo
carbonilo libre o un conjugado de un carbono anomrico en la estructura cclica, casi todo se
basa en la reduccin del ion CU+2 en la formacin de xido cuproso, el tiempo que tarda en
realizarse la reduccin a una temperatura controlada, da idea del tipo de carbohidrato reductor,
pero su identificacin precisa requiere la formacin de derivados cuya forma cristalina y punto
de fusin son determnales tales reactivos son benedict, fehling, teniendo con estos azucares
reductores o no reductores.

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Adems de las pruebas de molisch, barboed, fehling, los azucares pueden ofrecer muchas
otras reacciones que permitan detectarlos e identificarlos, sea en conjuntos o por grupos
especficos, como el de seliwanoff, especficas para cetosas libres, forman un precipitado rojo, en
la prueba de Bial es especficos para pentosas dando una coloracin azul verdoso.

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Capitulo 2: Metodo

2.1 Materiales

Tubos de ensayo
Gradilla
Pipeta
Pinzas
Bao serolgico

2.2 Metodologa y procedimiento

2.2.1 Experimento 2. reaccin de benedict.

En los cinco tubos de ensayo colocamos un ml de cada disolucin, y unas gotas del
reactivo de benedict, luego los sumergimos en una misma serie en un bao mara. Los
sumergimos 15 minutos.

2.2.2 Experimento 3. Reaccin de fehling.

En los cinco tubos de ensayo agregamos 1 ml de cada disolucin, y unas gotas de fehling
y agregamos en el bao de mara 15 minutos.

2.2.3 Experimento 4. Reaccin de Bial.

Se hace el mismo procedimiento con los cinco tubos, pero le agregamos unas gotas del
reactivo de Bial, el cual los mismo cinco tubos de ensayo agregamos al bao de mara.

2.2.4 Experimento 5. Reaccin de seliwanoff.

Volvemos a coger los mismos cinco tubos de ensayo con las mismas disoluciones, pero
ahora agregamos unas gotas de seliwanoff, donde vamos a observar quienes reaccionan estando
en el bao de mara.

2.3 Resultados

Determinar cualitativamente las coloraciones de cada uno de las muestras, tiempo de

aparicin, clase de azcar reductor o no.

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2.3.1 BENEDICT GRUPO N 1
La prueba de Benedict identifica azcares reductores (aquellos que tienen su OH libre del
C anomrico), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, y celobiosa. En soluciones alcalinas,
pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solucin alcalina como
Cu2O de color rojo-naranja.

Reaccin Positiva (+)

Reaccin Negativa (-)

Tabla 1. Reconocimiento de carbohidratos

reactivo de Benedict
CARBOHIDRATOS
Glucosa C6H12O6
Galactosa C6H12O6
Ribosa C5H10O5
Sacarosa C12H22O11
Fructosa C6H12O6

PRUEBA BENEDICT
Positivo +
Positivo +
Positivo +
NegativaPositivo+

La glucosa y fructosa presentan un precipitado de color naranjado denominado xido

cuproso (Cu20) es decir que se trata de azcares reductores.

La sacarosa no presenta evidencia de precipitado color rojo ladrillo con la reaccin de
oxidacin de Benedict, por lo que se confirma, que no es un azcar no reductor.

2.3.2 BENEDICT GRUPO N2

Tabla 2. Reconocimiento de carbohidratos reactivo benedict.

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CARBOHIDRATOS
Glucosa C6H12O6
Galactosa C6H12O6
Ribosa C5H10O5
Sacarosa C12H22O11
Fructosa C6H12O6

PRUEBA BENEDICT
Positivo +
Positivo +
Positivo +
NegativaPositivo+

Analizando el grupo nmero 2 se puede observar en la tabla que dieron los mismos
resultados y reaccionaron los mismos carbohidratos del primer grupo.

Fig. 1 Ilustracin 1 Reaccin de la glucosa con el reactivo benedict

2.3.3 FEHLING
El reactivo de Fehling, tambin conocido como Licor de Fehling, se utiliza como reactivo
para la determinacin de azcares reductores. Sirve para demostrar la presencia de glucosa, as
como para detectar derivados de sta tales como la sacarosa o la fructosa.

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Tabla 3 Reconocimiento de Carbohidratos Prueba de Fehling

CARBOHIDRATOS
Glucosa C6H12O6
Galactosa C6H12O6
Ribosa C5H10O5
Sacarosa C12H22O11
Fructosa C6H12O6

PRUEBA FEHLING
Positivo +
Positivo +
Positivo +
NegativaPositivo+

la sacarosa el resultado nos indica una coloracin azul determinando que esta
solucin es un azcar no reductor debido a que la prueba sali negativa y que no

se produjo la reduccin.
las soluciones de azcares reductores que son: (Fructosa, Lactosa, Glucosa,
galactosa y ribosa), que nos indica una coloracin rojo ladrillo a diferente nivel de
coloracin ya que esto se debe a la concentracin de azcar en cada solucin,
estableciendo que se produjo la reduccin y que la prueba fue positivo.

2.3.4 BIAL
La prueba de Bial es una reaccin caracterstica de pentosas y est basada en la formacin
de furfural). El reactivo de Bial contiene orcinol en cido clorhdrico, el cual forma complejos
de coloracin slo con las pentosas.

Tabla 4 Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Bial

CARBOHIDRATOS
Glucosa C6H12O6
Galactosa C6H12O6

PRUEBA BIAL
Positivo +
Positivo +

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Ribosa C5H10O5
Sacarosa C12H22O11
Fructosa C6H12O6

Positivo +
NegativaNegativo-

En la prueba de Bial procedimos a realizar la prueba con fructosa, sacarosa, ribosa,

glucosa, galactosa. Tanto la fructosa como la sacarosa al no ser pentosas no dan una
coloracin positiva, sin embargo, las hexosas al reaccionar con el reactivo de Bial
originan una coloracin verde, caf o caf-rojiza.

2.3.5 SELIWANOFF GRUPO N 1

La prueba de Seliwanoff es una prueba qumica que se usa para distinguir aldosas y
cetosas. Los azcares son distinguidos a travs de su funcin como cetona o aldehdo. Si el
azcar contiene un grupo cetona, es una cetosa, y si contienen un grupo aldehdo, es una aldosa.
Esta prueba est basada en el hecho de que, al calentarlas, las cetosas son deshidratadas ms
rpido que las aldosas.

Tabla 5. Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Seliwanoff

CARBOHIDRATOS
Glucosa C6H12O6
Galactosa C6H12O6
Ribosa C5H10O5

PRUEBA SELIWANOFF
Negativo NegativoNegativo-

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Sacarosa C12H22O11
Fructosa C6H12O6

Positivo+
Positivo+

La fructosa es una cetosa razn por la cual obtenemos un resultado positivo dando una

coloracin medio naranja

La sacarosa no es cetosa, pero est formada por una aldosa y una cetosa razn por la cual
el resultado tambin es positivo dando una coloracin naranja muy leve.

2.3.6 SELIWANOFF GRUPO N 2

Tabla 6. Reconocimiento de carbohidratos- prueba de Seliwanoff.

CARBOHIDRATOS
Glucosa C6H12O6
Galactosa C6H12O6
Ribosa C5H10O5
Sacarosa C12H22O11
Fructosa C6H12O6

PRUEBA SELIWANOFF
Negativo NegativoNegativoPositivo+
Positivo+

La fructosa es una cetosa razn por la cual se obtiene del segundo grupo un resultado

positivo dando una coloracin medio naranja fuerte

La sacarosa no es cetosa, pero est formada por una aldosa y una cetosa razn por la cual
el resultado tambin es positivo dando una coloracin naranja fuerte.

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Figura 2: Reaccin de las cetohexosas con el reactivo de Seliwanoff

2.4 DISCUSIONES

REACTIVO BENEDICT
La reaccin de Benedict identifica azcares reductores (aquellos que tienen su OH libre

del C anomrico), por lo cual nos dio un resultado en monosacridos glucosa y fructosa positiva,
en disacridos la sacarosa negativa porque no es un azcar reductor y la maltosa positiva.

Se habla de azcares reductores cuando tienen su OH libre del carbono anomrico como
la lactosa, maltosa, glucosa y stos son los que dan positivo en la prueba de Benedict.

En los dos grupos se not que dio un resultado igual ya que la sacarosa dio negativa y la
glucosa, lactosa, galactosa. Fructosa y la ribosa dieron positivos al ser reductores.

REACTIVO DE FEHLING

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Como resultado de monosacridos tenemos glucosa, fructosa y en disacridos lactosa, maltosa
da prueba positiva de precipitado anaranjado porque son azcares reductores frente a la reaccin
de fehling

La sacarosa result ser un compuesto no reductor por lo que no tiene el grupo carbonilo libre
y la prueba es negativa.

Al reaccionar con monosacridos, se torna verdoso; si lo hace con disacrido, toma el color
rojo-ladrillo.

Debido a que el Cu(OH)2 (azul) se calienta en presencia de un compuesto reductor

formando xido cuproso (color rojo ladrillo).

Un azcar se oxida con el reactivo de Fehling, formando un precipitado de color rojo

ladrillo que es Oxido Cuproso, esto es evidencia que es un azcar reductor.

REACTIVO BIAL

En la prueba de Bial no se cont con la ribosa, procedimos a realizar la prueba con fructosa y
sacarosa. Tanto la fructosa como la sacarosa al no ser pentosas no dan una coloracin positiva,
sin embargo, las hexosas al reaccionar con el reactivo de Bial originan una coloracin verde, caf
o caf-rojiza, razn por lo cual en la fructosa se observ una coloracin caf rojiza oscura y en la
sacarosa una coloracin similar pero clara.

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REACIVO SELIWANOFF

Como resultado para la muestra de fructosa y sacarosa dan pruebas positivas dando una
reaccin de coloracin color anaranjado por la cetosa lo que es una reaccin positiva de
seliwanoff.
La Galactosa, ribosa, lactosa y la glucosa resultaron no formar parte del grupo de las cetosas
por lo que la prueba es negativa.
El color depende de la concentracin de cetosas presentes en la muestra.
Esta prueba est basada en el hecho de que, al calentarlas, las cetosas son deshidratadas ms
rpido que las aldosas.
Lo que pudimos notar en los dos grupos fue el resultado que dio igual solo que la fructosa
del grupo 2 tuvo un color ms fuerte que del grupo numero 1

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CAPITULO 3: CUESTIONARIO

1. Azucares reductores y no reductores

Azucares Reductores son aquellos azcares que poseen su grupo carbonilo (grupo funcional)
intacto, y que a travs del mismo pueden reaccionar como reductores con otras molculas ya que
al menos tienen un -OH hemiacetlico libre.

AZCARES REDUCTORES:
Los monosacridos y muchos disacridos, (excepto Sacarosa y Trehalosa).
Monosacridos: Glucosa, Fructosa
Disacridos reductores: Lactosa, Maltosa.

Los azcares No Reductores son aquellos que cuando 2 monosacridos iguales o

diferentes se unen forman un Disacrido, los disacridos por condensacin liberan una molcula

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de agua y son azcares no reductores se unen por enlaces glicosdicos de tipo Alfa Beta, ya que
el grupo Oxidrilo (OH) de una hexosa se combina con el grupo Aldehdo (CHO) de otra hexosa
liberando 1 molcula de H20.

-AZCARES NO REDUCTORES:
Oligosacridos y Polisacridos.
Oligosacridos: molculas formadas por 2 a 10 monosacridos.
Polisacridos molculas formadas por ms de 10 monosacridos.

Captulo 4: Conclusin

Con este informe se aprendi como manipular los reactivos para saber qu clase de
carbohidratos se estn utilizando, as como saber cul es su grupo funcional y a que tipo
pertenecen.
Se diferenci gracias a los reactivos cuales son los monosacridos y oligosacridos segn
el color y el precipitado que se form en las pruebas.
Las reacciones que se observaron con el reactivo de benedict nos dio positivo para los
azcares de: glucosa, fructosa y sacarosa.
Dentro de los disacridos se observ que la sacarosa nos dio una reaccin negativa.
En la reaccin de benedict se reduce de Cu2+ que tiene color azul a Cu+, lo cual precipita
de la solucin como Cu2Ode color rojo-naranja lo cual nos dio los diferentes resultados.

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Concluimos que existe la presencia de cetonas en las soluciones de fructosa y sacarosa ya
que la reaccin da un resultado positivo presentando una coloracin rojiza para la sacarosa y
amarillo rojiza para la fructosa.
Se demostr que la reacciones dan un resultado positivo slo en presencia de cetosas.
Los carbohidratos al poseer en su estructura aldehdos o cetonas, presentan un
comportamiento qumico ligado a los grupos funcionales.

Captulo 5: Bibliografa

http://es.slideshare.net/agc1992/reconocimiento-de-carbohidratos.
https://es.wikipedia.org/wiki/Reacci%C3%B3n_de_Molisch.
http://es.slideshare.net/sunanowafer/informe-prctica-1-indentificacin-de-carbohidratos.

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Anexos

Figura 1:

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En la prueba de benedict se adiciono agua destilada al 1% y unas gotas de benedict se
llev al bao mara por 15 minutos y reacciono la glucosa, galactosa, ribosa y fructosa siendo
positivo al ser un azcar reductor al tomar una coloracin naranja- amarillo.
la cual la sacarosa dio negativo al no ser un azcar no reductor siguiendo su igual
coloracin azul.

Figura 2

22
En la prueba del fehling se adiciono agua destilada al 1% y unas gotas de fehling a y b se
llev al bao mara por 15 minutos y reacciono la glucosa, galactosa, ribosa y fructosa siendo
positivo al no ser azcar reductor. Tomando una coloracin roja, ladrillo
Viendo la sacarosa la cual dio negativo por no ser un azcar reductor siguiendo su color
azul.

Figura 3:

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En la prueba Bial se adiciono agua destilada al 1% y unas gotas de bial se llev al bao
mara por 15 minutos y reacciono la glucosa, galactosa, ribosa al ser positivos siendo un azcar
tomando un color verdoso
En cuanto la sacarosa y la fructosa no reaccionaron y sigui su misma coloracin naranja
al no ser un azcar.

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Figura 4:

En la prueba de seliwanoff se adiciono agua destilada al 1% y unas gotas de seliwanoff se

llev al bao mara por 15 minutos y reacciono la sacarosa y la fructosa dando positivo siendo
estos carbohidratos cetosas tomando un color medio naranja.
En el caso de la glucosa, galactosa y ribosa siguieron su misma coloracin transparente
fueron negativos.