PRCTICAS DE

LABORATORIO:
MICROBIOLOG
A
AGROINDUSTR

Microbiologa Agroindustrial
Paulino Ninaquispe

PRACTICA 2: ESTERILIZACIN DE
MEDIOS SECOS Y HUMEDO PARA USO
EN MICROBIOLOGA
A. PREPARACIN DE MATERIAL PARA
ESTERILIZACIN
1. MATERIALES Y MTODOS
MATERIALES
Pipetas
Matraces
Hojas reciclables o papel
Placas Petri

MATRACES

PIPETAS

PLACAS
PETRI

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Paulino Ninaquispe

HOJAS
RECICLABLES
O PAPEL

 MTODOS
1) PIPETAS:
Colocamos en la boquilla de cada de las pipetas un
tapn de algodn.
Flameamos las boquillas de las pipetas, a fin de
eliminar el exceso de algodn.
Envolvimos de manera individual cada una de las
pipetas.

Figura 1. Envoltura de pipetas para

proceso de esterilizacin.

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2) MATRACES:
Colocamos en la boca de cada matraz un tapn
compacto de algodn.
Cortamos el papel en forma de cuadrado.
Cubrimos la boquilla con el papel.
Amarramos y hacemos una cruz con pabilo.

Figura 2. Envoltura de matraces con ayuda de hilo pabilo y papel.

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3) PLACAS PETRI
Envolvimos las placas de tal manera queden
completamente cubiertas.

Figura 3. Envoltura de placa petri para

proceso de esterilizacin.
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B. Esterilizacin de los materiales envueltos

anteriormente
Colocamos las pipetas y placas petri en la estufa a
150 C x 60 min.

n de pipetas en la estufa para la esterilizacin.

Coloc
amos los
matraces
dentro del
autoclave a 120-130C x15 A 20 min.

matraces en la estufa para proceso de esterilizacin.

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V.- RESULTADOS:
EN MEDIO SECO (estufa) se esteriliz a 150C x 60
min.
EN MEDIO HMEDO (autoclave) se esteriliz a 120
130 C x 15 a 20 min.
Se debe utilizar el papel correcto, de lo contrario se
romper y la materia no queda esterilizado.
Si el material no se envuelve correctamente, la
materia no est estril.
No se necesita mucho tiempo para la esterilizacin.
VI.- DISCUSIN:
La esterilizacin es un proceso a travs del que se
logra la destruccin total de los microorganismos
viables presentes en un determinado material. Este
procedimiento es de gran utilidad dentro del campo
qumico, ya que existen muchos procesos que
requieren la utilizacin de materiales estriles. (Black,
J. 1999)
En la experiencia realizada se pudo comprobar este
proceso que es la esterilizacin, ya que as se pudo
eliminar los microorganismos que contenan las
pipetas, placas y matraces; siendo as tiles para el
desarrollo de las prcticas a realizar.
La estufa u horno de aire, es el equipo utilizado en los
laboratorios para esterilizar por calor seco; se requiere
mayor temperatura y tiempo de exposicin que los
mtodos por calor hmedo. La temperatura vara entre
120 y 180C, requirindose distintos tiempos de
exposicin. A 140C se necesitan por lo menos 5 horas
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de exposicin, mientras que entre 160C a 180C se

requieren al menos 2 horas de exposicin; se utiliza
para la esterilizacin de material de vidrio. (Lewis,
2002).

Se recomienda NO abrir la puerta del horno

inmediatamente despus del tiempo de esterilizacin,
pues ello puede ocasionar rotura del material.
Recordar que, el papel y algodn no pueden ser
esterilizados a ms de 160C.
El Autoclave es el equipo utilizado comnmente en los
laboratorios para esterilizar cultivos y soluciones que
no formen emulsiones con el agua y no se
desnaturalicen a temperaturas mayores de 100C. Una
temperatura
de
121C
(Una
atmsfera
de
sobrepresin) con un tiempo de exposicin mayor a 15
minutos
sirve
para
destruir
microorganismos
formadores de esporas.
Es necesaria la accin combinada del calor, tiempo y
presin para conseguir la destruccin celular. (Lewis,
2002).
Las temperaturas y los tiempos de exposicin pueden
variar dependiendo del material a esterilizar.
VII.- CONCLUCIONES:
- Se concluye de que al utilizar el procedimiento de
envolturas correctas, es probable de que
esterilizacin sea efectiva.
- Se concluye que es de suma importancia conocer
pasos de esterilizacin.
- Se concluye que la esterilizacin es el agente
control
ms
empleado
para
combatir
microorganismos.
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las
la
los
de
los

- Se concluye que la temperatura y el tiempo es un

factor

importante en el proceso de esterilizacin.

VIII.- REFERENCIA BIBLIOGRFICA
Black, J. 1999. Microbiology Principles and Exploration.
Fourth edition. John Wiley & Son, Inc.
Lewis, R.E. 2002. Practical guide to autoclave
validation. Pharmaceutical Engineering. ISPE 2002.

IX.- ANEXOS

Esquema 1.- Esterilizacin por autoclave.

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Figura 7. Horno de aire y sus partes.

Figura 6. Autoclave y sus partes.