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Silvia Mrquez - Lionel Valenzuela Prez - Gladys Glvez - Luis A. Fernndez - Cecilia Bocchino
NIVELES DE ORGANIZACIN
Fig. 1.1. Niveles de organizacion de la materia
A los seres vivos se los define por sus caractersticas, una de stas es su organizacin. Esta organizacin biolgica
representa el patrn complejo que nos muestra el camino que ha seguido la evolucin, desde formas sencillas a otras
ms complejas.
a las distintas poblaciones de animales y plantas de la zona y se halla parasitada por las mismas poblaciones de
parsitos intestinales.
Esta comunidad comparte el mismo lugar fsico que presenta caractersticas particulares. La unin de estos
factores fsicos con los factores biolgicos constituyen los ECOSISTEMAS.
Todos los ecosistemas de la Tierra estn relacionados, directa o indirectamente. Es por ello que un cambio drstico
o continuo de alguno de ellos indefectiblemente acarrear cambios en los restantes. Del mantenimiento de un
equilibrio entre los distintos ecosistemas, depende la vida en el planeta.
1. Nivel Subatmico
2. Nivel Atmico
12. Poblacin
13. Comunidad.
14. Ecosistema
15. Universo
Durante el desarrollo de nuestra materia, nos ocuparemos de los niveles de organizacin ms sencilla y
haremos hincapi en el Nivel Celular de Organizacin.
ORGANIZACIN CELULAR
TEORA CELULAR
La clula es la unidad de vida ms pequea. Es la unidad anatmica y fisiolgica de todos los seres vivos. Dos
cientficos alemanes el botnico Mattias Schleiden (1804-1881) y el zologo Theodor Schwann (1810-1882) fueron
los primeros en sealar que " Los cuerpos de las plantas y de los animales estn compuestos por clulas y por
productos celulares" enunciando el postulado inicial de la Teora Celular
Posteriormente, Rudolph Virchow (1821-1902) amplio la Teora Celular y afirm: " Todas las clulas proceden de otra
preexistente". Por lo tanto, las clulas no surgen por generacin espontnea a partir de materia inanimada.
Otra importante conclusin de la Teora Celular afirma que todas las clulas actuales, tienen un origen comn. La
evidencia ms importante, sobre el origen comn de todas las formas celulares, radica en las similitudes bsicas de
sus estructuras y principalmente de su composicin molecular.
1- Todos los seres vivos estn formados por clulas y productos celulares (unidad anatmica)
2- Las funciones de un ser vivo son el resultado de la interaccin de las clulas que lo componen
(unidad fisiolgica)
4- Toda clula tiene la informacin hereditaria del organismo del cual forma parte, y esta informacin
pasa de una clula progenitora a una clula hija.
Los eucariontes son organismos cuyas clulas poseen un sistema de endomembranas (membranas internas) muy
desarrollado. Estas membranas internas forman y delimitan organelos donde se llevan a cabo numerosos procesos
celulares. De hecho l ms sobresaliente de estos organelos es el ncleo, donde se localiza el ADN. Justamente, el
trmino eucarionte, significa ncleo verdadero (eu: verdadero, carion: ncleo). Por lo tanto, las clulas eucariontes,
poseen diversos compartimentos internos, rodeados por membranas. De esta forma es ms eficiente reunir a los
sustratos y sus enzimas, en una pequea parte del volumen celular total. Adems de conseguirse una mayor
velocidad, las membranas favorecen la aparicin de estructuras reguladoras que orientan el flujo de molculas y su
posterior conversin en otros productos. Ciertos procesos como la fotosntesis y la cadena respiratoria estn
altamente organizados gracias a la localizacin de las enzimas en diferentes estructuras de membrana. Por otra
parte, las membranas tambin impiden la aparicin de sustratos en forma inespecfica en distintas regiones de la
clula, ya que actan como barrera selectiva. En cuanto al tamao, podemos decir que en promedio una clula
eucarionte es diez veces mayor que una clula procarionte. En cuanto al material gentico, podemos decir que el
ADN eucariota posee una organizacin mucho ms compleja que el ADN procarionte.
Las clulas procariontes carecen de ncleo y generalmente son mucho menores que las clulas eucariontes. El ADN
de las clulas procariontes no est rodeado por una membrana, pero puede estar limitado a determinadas regiones
denominadas nucleoides. Las clulas procariontes, al igual que las clulas eucariontes, poseen una membrana
plasmtica, pero carecen de membranas internas, que formen organelos. Sin embargo, debemos precisar que en
algunas clulas procariontes, la membrana plasmtica forma laminillas fotosintticas.
Las clulas procariontes poseen una caracterstica nica, una pared de peptidoglicanos, un gran polmero de glcidos
y aminocidos.
Caracterstica
Clula Procaritica
Clula Eucaritica
Ncleo
Cromosomas
ADN extracromosmico
Presente en organelas
Organelas citoplasmticas
No posee
Membrana plasmtica
Sistema de endomembranas
No posee
Pared celular
No poseen pared de
peptidoglucano. Pueden poseer una
pared de celulosa o quitina
Esteroles
Generalmente presentes
Citoesqueleto
Ausente
Exocitosis y Endocitosis
Ausente
Presente
Ribosomas
70 S en el citoplasma
80 S en el retculo endoplsmico y
en el citosol
Divisin
Mitosis - Meiosis
Tamao
0,2 a 10 mm
Siempre superior a 6 mm
En la Tabla 1.4 se aprecian las diferencias ms importantes entre las clulas procariotas (bacterias) y eucariotas
PLSMIDOS
Un plsmido es una molcula de ADN extracromosmico que se replica en forma autnoma, por lo que al igual que el
cromosoma es un replicn. Puede haber hasta 50 copias de un plsmido en una bacteria. Funcionalmente los
plsmidos son elementos genticos accesorios, es decir que la bacteria puede vivir sin ellos. Sin embargo, la
informacin que contienen puede contribuir a la adaptacin de la bacteria al medio y a la evolucin de la misma. Los
plsmidos pueden contener genes que codifican factores de resistencia a antibiticos (los plsmidos R) y factores
de patogenicidad como exotoxinas. La evolucin bacteriana a travs de los plsmidos es factible, ya que pueden ser
intercambiados entre distintas bacterias (por ejemplo, el plsmido F). Es decir que ciertos genes pueden
transferirse de una bacteria otra mediante el pasaje de plsmidos, a este mecanismo se lo denomina conjugacin.
Para que la conjugacin pueda llevarse a cabo las dos bacterias deben ponerse en contacto fsico. Esto es posible
debido a que una de las bacterias, posee pili sexuales (pelos) en su envoltura. Estos pili se encuentran codificados en
el mismo plsmido F (plsmido conjugativo). La bacteria que transfiere el plsmido es la que posee pili y se la
denomina F+, la clula receptora es F-.
TRANSPOSONES
Los transposones son elementos genticos movibles, que se encuentran presentes en los procariontes (aunque
tambin en las clulas eucariontes). El descubrimiento de los transposones se lo debemos a Barbara McClintock. Los
transposones son fragmentos de ADN que se mueven de una localizacin a otra del cromosoma. Esta transposicin
es catalizada por una enzima llamada transposasa. El gen de la transposasa esta incluido dentro del mismo
transposn. Los transposones al ser elementos mviles, dentro del genoma, pueden provocar mutaciones al
insertarse en nuevas regiones del ADN.
PARED CELULAR. BACTERIAS GRAMPOSITIVAS Y GRAMNEGATIVAS
Por fuera de la membrana celular, se encuentra una pared celular rgida de peptidoglicano, que esta presente en
todas las bacterias excepto los micoplasmas. La presencia de la pared protege a la bacteria de la diferencia de
presin osmtica entre el medio interno de la bacteria y el medio exterior. De no existir la pared la bacteria
estallara. Adems la pared cumple funciones de proteccin como por ejemplo contra sustancias txicas .
Existen dos tipos de pared bacteriana que pueden diferenciarse por la Tincin de Gram (siglo XIX). El primer grupo
de bacterias son aquellas capaces de retener el colorante cristal violeta luego de la decoloracin con alcohol-cetona.
Estas bacterias son llamadas Grampositivas. El segundo grupo esta conformado por aquellas bacterias incapaces de
retener el colorante luego del tratamiento decolorante, por lo tanto son llamadas Gramnegativas.
LA PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS GRAMPOSITIVAS
Fig.1.5- Esquema de la ultraestructura tridimencional de una clula animal y sus principales componenetes
Presentan este modelo celular, los organismos de los reinos Protista, Hongos, Plantas y Animales.
Si bien existe una gran diversidad entre estas clulas, el modelo bsico es similar, presentando como
estructura sobresaliente el ncleo celular.
NCLEO CELULAR
Las diversas partes de una clula eucaritica interactan de forma integrada. Esto es posible
porque existe un centro primordial de control: el ncleo celular. Una membrana doble, la envoltura nuclear
(constituida por dos unidades de membrana), controla el transporte, muy selectivo, de sustancias entre el ncleo y
el citoplasma. El pasaje se realiza a travs de los poros nucleares. La envoltura nuclear posee ribosomas adheridos a
la cara citoplasmtica y una estructura proteica en su parte interna llamada lamina nuclear, que sirve como
esqueleto al ncleo.
En el interior del ncleo, se encuentra el material gentico (ADN) asociado a protenas bsicas llamadas histonas,
formando una estructura fibrilar muy enrollada denominada cromatina y el nucleolo, sitio de ensamblaje de los
ribosomas (estructuras esenciales para la sntesis de protenas, formados por ARN ribosomal y protena). El ARN
ribosmico se sintetiza en el nucleolo, y las protenas ribosmicas en el citoplasma, para pasar despus al ncleo y de
all al nucleolo, donde se unen al ARN ribosomal para formar los ribosomas.
Descripcin
Funcin
Ncleo
Envoltura Nuclear
Nucleolo
Cromatina
Empaquetamiento
(plegamiento) de ADN. El ADN
compone los genes. Funciones
regulatorias de la
transcripcin gentica.
Cromosomas
Rodeando al ncleo encontramos el CITOPLASMA, coloide donde predominan como constituyentes agua, iones,
enzimas y donde se encuentran incluidos los organelos celulares. El citoplasma se encuentra separado del ambiente
exterior por la membrana plasmtica.
MEMBRANA PLASMTICA
Estructuralmente esta compuesta por una bicapa fosfolipdica. El colesterol esta presente en las clulas
animales, pero esta ausente, en general, en plantas, hongos y procariontes (salvo micoplasmas). La membrana
plasmtica tambin contiene mltiples protenas con diversas funciones. Podemos dividirlas en dos grandes grupos:
a) protenas integrales de membrana y b) protenas perifricas de membrana. Las primeras atraviesan la membrana
de lado a lado, mientras que las segundas estn en contacto con la membrana, pero no la atraviesan. Algunas son
enzimas reguladoras, otras receptores hormonales. Existen tambin protenas transportadoras y canales
reguladoras del movimiento de iones y molculas a travs de la membrana plasmtica, de all su enorme
especificidad. Otra funcin importante de la membrana es la comunicacin intercelular y el reconocimiento de
diversos tipos de molcula (hormonas, virus, anticuerpos, toxinas, etc.) que interactan con ella. En general esta
funcin es llevada acabo por glucoprotenas y glucolpidos, que se encuentran solo en el lado externo de la membrana
plasmtica. Se cree que los glcidos juegan un importante papel en la adhesin entre clulas. A esta capa, de
glucolpidos y glucoprotenas se la denomina glucoclix.
SISTEMA DE ENDOMEMBRANAS
Este sistema se compone de sistemas membranosos interconectados entre s, como el retculo endoplalmtico
liso o agranular (REL), el retculo endoplasmtico rugoso o granular (REG) y el aparato de Golgi. Estas estructuras
permiten la circulacin de sustancias siempre dentro de formaciones limitadas por membrana interactuando por
medio de vesculas.
Estructura
Descripcin
Funcin
Aparato de Golgi
Lisosomas
Vacuolas
Sacos membranosos
Transporte de materiales,
principalmente, en plantas, hongos deshechos y agua.
y algas.
ORGANELAS
Estructura
Descripcin
Funcin
Mitocondria
Cloroplasto
Microcuerpos (Peroxisomas)
RIBOSOMAS Y POLIRRIBOSOMAS
Son estructuras redondeadas que a diferencia de las anteriores, carecen de unidad de membrana.
Estn constituidos por dos subunidades, mayor y menor separadas entre s. Ambas subunidades se unen cuando leen
una molcula de ARNm. Las subunidades estn formadas por ARNr y protenas, siendo ensambladas en el nucleolo.
Cuando hay varios ribosomas unidos a una molcula de ARNm, lo denominamos polirribosoma.
La funcin de los ribosomas es sintetizar protenas.
CITOESQUELETO
El citoesqueleto es una red de fibras protenicas. Esta red es dinmica encontrndose en constante cambio.
Sus funciones, son esenciales para las clulas eucariontes y abarcan motilidad celular, forma, diferenciacin,
reproduccin, regulacin, etc.
Estructura
Descripcin
Microtbulos
Filamentos de actina
(microfilamentos)
Filamentos intermedios
Centrolos
Funcin
Sostn estructural,
participan en el movimiento
Tubos huecos compuestos por la
de organelas y la divisin
forma monomrica de la protena
celular (aparato mittico),
tubulina. (monmero globular)
componentes de cilios,
flagelos y centrolos.
Sostn estructural,
participan en el movimiento
de la clula y sus organelos y
en la divisin celular.
Cilios
Flagelos
Movimiento de algunos
Proyecciones relativamente cortas
organismos unicelulares. Se
que se extienden desde la
utiliza para mover materiales
superficie celular. Compuestas por
en la superficie de algunos
microtbulos.
tejidos.
Locomocin celular de
espermatozoides y algunos
organismos unicelulares.
Fig. 1.7- Esquemas de una clula vegetal (izquierda) y tridimencional de un cloroplasto con sus componentes
(derecha)
Estructura
Clula animal
Clula vegetal
Pared celular
Ausente
Astral
Anastral
Centrolos
Presente
Ausente
Vacuolas
Vacuolas pequeas
Metabolismo
Hetertrofo
Auttrofo
Mitocondrias
Presentes
Presentes
Cloroplastos
Ausentes
Presentes
VIRUS
Hacia fines del siglo pasado se formulo la teora de que cada enfermedad era producida por un germen
especfico. Hasta ese momento los patlogos estaban convencidos de que para cada enfermedad seria posible
encontrar el microorganismo responsable, utilizando las siguientes tcnicas: a) observacin del germen con la ayuda
del microscopio, b) cultivo sobre un medio nutritivo y c) retencin por filtros. Sin embargo, en 1892, Iwanowski (o
Ivanovsky?) pudo demostrar que el agente productor de la enfermedad del mosaico de tabaco pasaba a travs de
los filtros para bacterias y no poda ni verse ni cultivarse. Luego en 1898 Beijerinck, determin que la enfermedad
del mosaico del tabaco era provocada por un nuevo agente infeccioso a los que denomino virus filtrables (virus:
palabra de origen latino que significa veneno). Los virus estn ampliamente distribuidos en la naturaleza y afectan a
todo tipo de organismos, tanto del reino animal, vegetal o protista.
CARACTERSTICAS ESTRUCTURALES DE LOS VIRUS
La estructura de los virus esta integrada por dos tipos de macromolculas: cidos nucleicos y protenas, los
que forman las partculas virales o viriones. Bsicamente existen dos tipos de partculas virales: partculas virales
simples (virus desnudo) o partculas virales envueltas (virus envuelto). El virus desnudo consta de un cido nucleico
(genoma) asociado a protenas y una cubierta proteica o cpside. Por otra parte los virus envueltos aaden a esta
estructura bsica una envoltura lipoproteica de origen celular. La funcin de la cpside es de servir al cido nucleico
como proteccin y vehculo.
Postulado de Lwoff
"nicamente sern considerados virus aquellos agentes infecciosos cuya partcula elemental contenga un solo tipo
de cido nucleico". Es decir poseen ARN o ADN, pero no ambos tipos de cidos nucleicos funcionales a la vez. Por lo
tanto los virus pueden ser ADN o ARN virus. Debido a la estructura simple de virus, para su multiplicacin dependen
en forma absoluta de la clula husped que infectan. Por lo tanto consideraremos a los virus como parsitos
intracelulares obligados.
REPLICACIN VIRAL
La clula husped, una vez infectada, sintetizar nuevas molculas de cido nucleico viral, ya que el genoma
viral tomara el control de las actividades metablicas de la clula. Bajo este control, tambin se producirn gran
cantidad de protenas virales. De esta manera el ensamblado de nuevas partculas virales provendr de la asociacin
de las nuevas molculas de cido nucleico viral con las protenas. Este proceso es muy diferente de la reproduccin
celular, tanto de los procariontes como de los eucariontes. Por lo tanto es mas apropiado hablar de REPLICACION
VIRAL.
LOS VIRUS COMO PARSITOS INTRACELULARES
Hasta el momento no se ha podido demostrar que ningn virus aislado pueda utilizar o almacenar energa mediante
procesos similares a la respiracin, tampoco pueden sintetizar protenas. Es decir no tienen metabolismo propio,
dependiendo en forma absoluta del medio ambiente celular.
El parasitismo de los virus se ejerce a nivel gentico, ya que el genoma viral dentro de la clula desplaza al genoma
de la clula hospedadora del control celular.
PROVIRUS
Anteriormente hemos explicado que los virus, infectan las clulas y hacen replicas de si mismos. Luego abandonan la
clula husped y pasan a otra, recomenzando su ciclo. Pero tambin puede ocurrir que el genoma viral se integre al
ADN del husped. Cuando el genoma viral se integra al genoma celular y se replica junto con este se lo denomina
PROVIRUS. Un provirus puede activarse espontneamente o bien expuesto a diversos estmulos, una vez activado
puede inducir la produccin de virus completos. Los provirus pueden modificar la morfologa celular y su
metabolismo, esto puede deberse a la produccin de alguna protena viral. Estos cambios en la estructura celular,
generalmente asociados a cambios en la membrana celular, inducidos por un provirus reciben el nombre de
transformacin. En algunos casos estas clulas transformadas por los provirus pueden ser cancerosas.
LOS VIRUS COMO AGENTES INFECCIOSOS
El parasitismo celular obligado es la causa bsica por la cual un virus puede causar dao. La relacin que establece un
virus y su clula husped es variable. El resultado de la interaccin depende tanto del virus en cuestin como de la
clula husped. Por ejemplo, se denominan virus citocdicos , a los que como resultado de su multiplicacin, producen
una rpida induccin hacia la muerte celular. Por otra parte se encuentran los virus no citocdicos, que son aquellos
que no provocan la muerte celular. Ejemplos de virus no citocdicos serian los virus moderados y los virus
oncognicos. Los virus moderados son aquellos que producen partculas virales y no producen la muerte celular. Han
llegado con la clula husped a un estado de equilibrio ms o menos estable. Luego estn los virus
oncognicos,capaces de estimular la divisin celular, estos cambios pueden ser irreversibles si la clula pierde la
capacidad de regular su ciclo celular. Este estado se denomina transformacin celular.
Los virus no citocdicos pueden causar dos tipos de infecciones:
1- Las infecciones latentes, donde el virus permanece sin manifestarse, alojado en clulas no productoras. Ante
determinados estmulos, estrs, enfermedades, exposicin a la luz solar, el virus se reactiva, recomenzando la
sntesis de cidos nucleicos y protenas virales. Ejemplos: L Herpes simplex, Varicela zoster.
2- Las infecciones crnicas, donde de una persona enferma siempre es posible obtener virus infeccioso, aun por
periodos muy prolongados de tiempo. Por ejemplo, virus de la hepatitis B, Epstein-Barr, virus de la rubola.
Fig. 1.10- Virus del Mosaico del Tabaco (ARN virus) y Bacterifago T4 (ADN virus)
MORFOLOGA VIRAL
Los virus poseen gran variedad de formas y tamaos. Por ejemplo los virus que al microscopio electrnico aparecen
aproximadamente esfricos se denominan isomtricos. En estos virus el cido nucleico esta rodeado por una cpside
(caja) proteica. Las subunidades estructurales que forman la cpside, visibles al microscopio electrnico, se
denominan capsmeros. A su vez los capsmeros estn formados por subunidades proteicas. La cpside por su
naturaleza antignica es la que determina la identidad viral.
El cido nucleico viral no se encuentra desnudo, sino que esta asociado a protenas distintas de las de la cpside,
cuya funcin puede ser estructural (plegado del ADN) o enzimtica (polimerasa). Al conjunto de cido nucleico y
protenas asociadas se lo denomina "core". Por ultimo diremos que los virus donde la cpside rodea directamente al
cido nucleico (es decir que no hay un "core" evidente), el conjunto de cpside y cido nucleico recibe la
denominacin de nucleocpside.
GENOMA VIRAL
El genoma, que puede encontrase en los distintos tipos de virus, puede sistematizarse de acuerdo a diversos
criterios:
1- Tipo de cido nucleico: ADN o ARN
2- Polaridad o sentido: + o - (aplicado principalmente a los ARN virus)
3- Nmero de cadenas: monocatenario o bicatenario
4- Genoma circular o desnudo
5- Genoma entero o fragmentado
Debemos recordar que las cadenas de un cido nucleico de doble cadena, son de polaridad (sentido) opuesto. Por
convencin se considera que si una tiene sentido + la otra ser -.
De acuerdo a este criterio se considera que un virus es + (o cadena +), cuando su genoma monocatenario tiene la
misma polaridad que un ARNm. Es decir el mismo genoma viral, puede actuar dentro de la clula como ARNm y llevar
a cabo directamente la sntesis de protenas virales. Los "virus +", pueden infectar con el cido nucleico solo, salvo
los retrovirus que siendo +, necesitan una transcriptasa reversa asociada al genoma para poder infectar. Por el
contrario, se denomina "virus -" cuando el genoma no puede actuar directamente como mensajeros. El ARN - puede
actuar como molde, para la sntesis de ARN +, el ARNm viral.
Los Bacterifagos son virus especficos de las bacterias. Bacterifagos, significa que se "alimenta" o multiplica a
expensas de bacterias.
Los Bacterifagos que infectan clulas husped, pueden establecer dos tipos de procesos:
1- Ciclo Ltico: en este tipo de ciclo el virus produce inmediatamente gran cantidad de cidos nucleicos virales y
protenas de la cpside. Estos se ensamblan produciendo nuevas partculas virales que son liberadas al medio al
producirse la lisis celular.
2- Ciclo Lisognico: en este ciclo la relacin entre clula husped y virus, puede prolongase por periodos variables
de tiempo. El virus integra su genoma al cromosoma bacteriano, replicndose conjuntamente el cido nucleico del
parsito y el del husped. Un virus bacteriano integrado al cromosoma se denomina profago. Por lo tanto el profago
se replica junto con el ADN bacteriano. En determinadas circunstancias (por ejemplo ruptura del ADN bacteriano
por luz ultravioleta o agentes qumicos), el profago se activa, y comienza la produccin de cido nucleico viral y
protenas virales, produciendo luego la lisis celular. Las bacterias que portan profagos se denominan lisognicas. Los
Bacterifagos que pueden integrarse como profagos y que no lisan inmediatamente a las clulas se denominan fagos
atenuados.
Fig. 1.12- Esquema del Ciclo Ltico Viral (de multiplicacn) y del Ciclo Lisogenico Viral
LOS VIRUS COMO VECTORES
Los virus pueden servir como vehculos (vectores), para transferir material gentico de una clula a otra. Este
fenmeno se denomina transduccin. Durante el ciclo ltico, el ADN del husped queda fragmentado y alguno de esos
fragmentos puede ser tomado al azar y quedar dentro de la cpside. De esta forma, cuando el virus infecta una
nueva clula, transporta genes de una antigua clula husped a otra nueva.
VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA (HIV)
El SIDA (sndrome de inmunodeficiencia humana), es una enfermedad infecciosa crnica producida por el virus HIV.
Esta enfermedad esta caracterizada por una deficiencia inmunolgica progresiva, con la expresin clnica de
infecciones oportunistas y/o tumores.
El HIV es un retrovirus. Los retrovirus son virus cuyo material gentico es ARN. Una vez que el virus ha penetrado
en una clula, una enzima llamada retrotranscriptasa, produce ADN a partir del ARN viral. El ADN recin
sintetizado viaja al ncleo y se integra al ADN cromosmico . En este punto la infeccin se ha hecho permanente , y
la forma integrada del virus se denomina provirus. El HIV es un LENTIVIRUS. Por lo tanto su ciclo vital intracelular
(ciclo de infeccin) puede prolongarse por aos. Sus genomas son complejos y sus mecanismos regulatorios son solo
parcialmente conocidos. Los Lentivirus causan infecciones crnicas.
El sistema inmune del hombre reconoce las protenas del HIV como antgenos y produce anticuerpos contra ellas.
Por lo tanto una persona infectada tendr circulando en sangre anticuerpos contra las protenas del HIV. En este
aspecto se basa el test de diagnstico ms utilizado en la actualidad: el test de ELISA (inmunoensayo ligado a
enzima).
cadena en el cromosoma del husped es necesaria para la sntesis de nuevas molculas de ARN, por la ARN
polimerasa celular, ya que el virus carece completamente de la maquinaria metablica necesaria para realizar la
transcripcin y la sntesis de protenas necesarias para la cpside y la misma transcriptasa reversa.
PRIONES
Las partculas infecciosas llamadas priones, estn constituidas nicamente por una protena de aproximadamente
250 aminocidos. Es decir carecen completamente de cidos nucleicos. Es esta la razn por la cual fue resistida
durante mucho tiempo, la hiptesis de que las protenas por si solas podan ser la causa de enfermedades
infecciosas. De acuerdo al dogma imperante hasta 1980, las enfermedades transmisibles (infecciosas) necesitaban
material gentico, para que la infeccin se asentara en el husped. Hasta ese momento eran los virus los agentes
infecciosos ms pequeos conocidos, y todos ellos poseen ADN o ARN como material gentico necesario para
codificar sus protenas y dirigir la replicacin viral en el husped.
Pero ahora sabemos que las partculas protenicas infecciosas (priones), pueden ser el sustrato de diversas
enfermedades, hereditarias o contagiosas. Este comportamiento dual tanto infeccioso como hereditario era
desconocido. Posteriormente se descubri que los priones se multiplican por una va increble y desconocida hasta
ese momento: convierten protenas normales en MOLECULAS INFECCIOSAS, con solo alterar la estructura
proteica.
Las encefalopatas espongiformes transmisibles (EET), son las enfermedades degenerativas del sistema nervioso
central que afectan a animales y seres humanos causadas por los priones. Se denominan espongiformes ya que el
cerebro adquiere un aspecto parecido al de una esponja. Las EET que sufren los seres humanos son el Kuru (o
muerte de la risa), la enfermedad de Creutzfeldt -Jakob (ECJ), el sndrome de Gerstman-Straussler-Scheinker
(GSS) y el insomnio Familiar Fatal (IFF); las EET de animales, incluyen el scrapie (del ingles to scrape, raspar, por la
tendencia de los animales infectados a rasparse contra postes , troncos o cercas para combatir la picazn) de
ovejas y cabras, la enfermedad de agotamiento crnico de mulas y ciervos en cautiverio y la encefalitis
espongiforme bovina (EEB), o enfermedad de la vaca loca.
Las EET se caracterizan por su prolongado periodo de incubacin (en el hombre puede tener un periodo de
incubacin de 30 o mas aos), generalmente asociadas a declives progresivos de las funciones motoras y cognitivas
(enfermedad activa), y por su evolucin inevitablemente fatal. Las EET en el ser humano generalmente aparecen en
personas de edad avanzada.
Aparentemente todas las EET son causadas por el cambio en la estructura de una protena normalmente presente en
las membranas celulares, denominada protena prinica (PrP). La forma anormal de la PrP se designa PrP sc (scrapie),
para diferenciarla de la forma normal llamada PrP c (celular). La secuencia de aminocidos (estructura primaria) de la
PrPc y la PrPsc es idntica lo que varia es su conformacin (plegamiento en el espacio). De acuerdo a esta teora la
protena alterada (PrPsc), puede unirse a la protena normal (PrPc) y cambiar su conformacin, transformndola a su
vez en una protena alterada. De esta forma se propagara la enfermedad y se generaran nuevas protenas
infecciosas. De esta forma el pasaje de la forma normal a la patolgica es catalizada por el mismo prin (PrP sc), por
lo tanto solo hace falta una pequea cantidad de este para provocar la transformacin de toda la protena normal, ya
que se trata de un fenmeno de crecimiento exponencial.
Recientemente , se ha aceptado que los priones pueden ser transmitidos, posiblemente por comida, inoculacin
directa en el cerebro, piel, msculo o estmago. Por esto la epidemia de EEB, ocurrida en Gran Bretaa provoco un
enorme inters en todo el mundo. Desafortunadamente han aparecido en ese pas una nueva variedad de la ECJ
(casos en personas mucho mas jvenes que lo usual), lo que probara una relacin causal entre la EEB y los casos
seres humanos. El gobierno britnico tuvo que admitir la posibilidad de que la aparicin de estos extraos casos de
la ECJ hubieran sido provocados al ingerirse carne vacuna infectada (tejido nervioso).
Al principio habamos hablado de la dualidad de los priones, por un lado partculas infecciosas y por el otro
responsables de enfermedades hereditarias. Esto es naturalmente confuso. Por ejemplo, ciertas enfermedades
prinicas como la GSS, son hereditarias. Esta enfermedad tiene una herencia autosomal y dominante, lo cual
significa que si un padre desarrolla la enfermedad , los hijos tienen un 50 por ciento de probabilidades de
desarrollarla. La explicacin a estos hechos vino dado por el descubrimiento de mutaciones gnicas puntuales en la
secuencia de nucletidos del gen que codifica la PrP . Estos genes mutados provocan cambios en la secuencia de
aminocidos de la protena PrP. Estos cambios podran incrementar la probabilidad de la transformacin de la
protena PrP mutante de una forma normal a una anormal patgena. Diferentes mutaciones en el gen provocaran
diferentes protenas mutantes, con mayor o menor tendencia a transformarse en la forma aberrante patgena. Esto
explica tambin las distintas enfermedades prinicas hereditarias, la ECJ espordica , un 15 por ciento de los casos
hereditaria y la GSS autosomal dominante.
Enfermedad
Sntomas tpicos
Va de Propagacin
Distribucin
Kuru
ECJ
Demencia, prdida de
coordinacin
EGSS
IFF
Como se aprecia, las principales unidades de medida que se emplean corrientemente en microscopia no son las de uso
cotidiano. En la siguiente tabla se expresan aquellas unidades y sus equivalencias:
Unidad
Smbolo
Centmetro
cm
0,01 metro
Objetos macroscpicos
Huevos grandes.
simple
vista.
Milmetro
mm
0,001m
Objetos macroscpicos
Clulas muy grandes.
simple
vista.
Micrmetro
mm
10-6 m
Nanmetro
nm
10-9 m
Microscopia electrnica.
Organelas
grandes.
Angstrom
10-10 m
pequeas,
macromolculas
Microscopia
electrnica.
Mtodos
de
difraccin de rayos X. Molculas y tomos.
Fig. 1.16 Cuadro comparativo de distintos ejemplos de niveles de organizacin a nivel microscpico.
En el nivel macromolecular, la difraccin de rayos X resulta ser la tcnica ms adecuada para estudiar la
configuracin molecular de protenas, de cidos nucleicos y de algunos entes prebiticos tales como los virus.
Los compuestos qumicos que constituyen la clula pueden ser detectados, descriptos y localizados dentro y fuera
de la clula mediante mtodos adaptados de la Qumica Analtica.
Las tcnicas aislamiento y separacin especfica de clulas, organelas y macromolculas y el preparado de
cultivos celulares para el estudio detallado son herramientas invalorables para el avance de la biologa celular y
molecular.
LOS MICROSCOPIOS PROVEEN VENTANAS PARA EL MUNDO DE LA CLULA
resolucin est inversamente relacionado con la longitud de onda (l) de la radiacin que un microscopio usa y un haz
de electrones tiene longitudes de onda mucho ms cortas que la luz visible. Para mayores precisiones al respecto,
consulte el cuadro 1.4
Hay dos tipos de microscopio electrnico: el microscopio electrnico de transmisin (MET) y el microscopio
electrnico de barrido (MEB):
El MET permite develar la ultraestructura de las clulas y de la matriz extracelular. El haz de electrones es
desviado por un campo electromagntico (que actuara como lente). En este tipo de microscopia se requiere que las
muestras tengan un grosor de 100 nm.
El MEB es especialmente til para estudios de superficie del espcimen. El haz de electrones explora la
superficie de la muestra la que usualmente se recubre con una pelcula de oro. El haz excita a los electrones sobre
la superficie de la misma muestra y estos electrones secundarios se recolectan y enfocan sobre una pantalla. Esto
forma una imagen de la topografa del espcimen. Un importante atributo del MEB es su gran profundidad de campo,
la cual resulta en una imagen tridimensional.
El ME revela muchas organelas que son imposibles de resolver con MO. Pero el MO ofrece muchas ventajas
especialmente para el estudio de la clula viva. Una desventaja de ME es que los mtodos qumicos y fsicos usados
para preparar la muestra, no slo matan a las clulas sino que puedan introducir artefactos, estructuras peculiares
vistas en micrografas que no existe en una clula viva.
La preparacin de la muestra para el MO y el ME resulta similar si se trabaja con las clulas muertas.
En la tabla 1.9 se comparan los pasos a seguir en ambos tipos de microscopia para la preparacin de la muestra:
Tabla 1.12 -Tcnicas para Preparar una Muestra en Microscopia ptica y Electrnica
Paso
Microscopia ptica
Microscopia Electrnica
OBTENCIN: Se hace
cuidadosamente con instrumental
adecuado.
DESHIDRATACIN: retira
el Pasajes sucesivos por alcoholes
agua de las piezas fijadas, para de concentracin creciente.
que luego puedan ser incluidas en
un elemento que es insolubles en
solventes acuosos.
ACLARACIN
INCLUSIN
CORTE
Es lo suficientemente delgado
como para ser atravesado por la
luz. Esto se logra utilizando
elmicrtomo con el que se realiza
cortes uniformes del tejido a un
dado espesor.
REHIDRATACIN
COLORACIN
MONTAJE
CONTRASTADO
Las diferencias ms notables de los principales componentes del MO y del ME y sus caractersticas singulares
se especifican en la siguiente tabla.
MICROSCOPIO PTICO
CARACTERSTICA
MICROSCOPIO ELECTRNICO
De interferencia de rayos
luminosos
De dispersin de electrones
2) TUBO
Luz (fotones)
3) FUENTE
Filamento de tungsteno
(electrones)
4) ELEMENTOS
Bobinas electromagnticas
5) ESTUDIAN
Clulas muertas
Coloreadas o no
0,25m
7) LIMITE DE RESOLUCIN
3 a 5 (terico)
10 (en la prctica)
8) LONGITUD DE ONDA
0,056
500 X a 1500 X
30.000 X a 1.000.000 X
10) FIJACIN
Parafina o coloidina
11) INCLUSIN
12) CORTES
De vidrio
13) PORTAOBJETO
Nivel microscpico:
Nivel submicroscpico:
ESTRUCTURA
ULTRAESTRUCTURA
El microscopio de luz polarizada puede proveer datos sobre la estructura a nivel molecular de las clulas y los
tejidos no slo en las clulas vivas sino en preparados post-mortem. Ciertos componentes celulares y tisulares se
comportan peculiarmente cuando la luz polarizada (luz que gira nicamente en un plano) los atraviesa.
el sobrenadante constituido de partes ms pequeas suspendidas en el lquido por encima del pellet. El sobrenadante
es transvasado a otro tubo y centrifugado otra vez. El proceso es repetido incrementando la velocidad en cada paso.
De esta manera se consigue recolectar componentes ms pequeos de los sucesivos pellets.
Los detalles de esta marcha se aprecian en la Fig.1.19.
El fraccionamiento celular permite preparar los componentes especficos de la clula tanto cualitativa como
cuantitativamente.
LAS POBLACIONES CELULARES PUEDEN SER SEPARADAS POR EL CITMETRO DE FLUJO
Este instrumento posee un tubo muy delgado por donde se hacen pasar a las clulas una tras otra. Un determinado
tipo celular emitir fluorescencia, previo tratamiento con fluorocromo (pigmento fluorescente). Esto permite la
discriminacin y, por lo tanto, la separacin de las clulas as tratadas de acuerdo a la fluorescencia que emitan.
LAS CLULAS VIVAS PUEDEN SER ESTUDIADAS MEDIANTE EL CULTIVO CELULAR
Con el objetivo de preservar toda la informacin que sea posible sobre todos los tipos celulares, se han desarrollado
tcnicas de disociacin de las clulas.
En los primeros tiempos, la tcnica consista en colocar un explante de un pequeo trozo de tejido en un medio
compuesto por suero sanguneo, extracto de embriones y solucin salina. Hoy se conocen los requerimientos
nutricios de las clulas eucariontes. Se las mantienen y hacen crecer en un medio sinttico enriquecido de suero. Se
distinguen tres tipos de cultivos:
Cultivos Primarios se obtienen de los animales o vegetales. El tejido se separa en condiciones aspticas y se
corta en pequeos trozos y se los trata con tripsina (enzima proteoltica) que disocia los agregados celulares y
genera una suspensin de clulas libres que se cultivan en un medio apropiado.
Cultivos Secundarios se obtienen mediante el tratamiento con tripsina de un cultivo primario, seguido de un
nuevo cultivo en una caja de Petri.
Cultivos de lneas establecidas cuyo crecimiento se prolonga debido a las condiciones cancerosas de las clulas.
Entre las ms usadas se encuentran las clulas HeLa. A pesar de tales anomalas son muy tiles para el estudio del
cncer.
LAS MOLCULAS ORGNICAS SON ESTUDIADAS DENTRO Y FUERA DE LA CLULA
A nivel molecular, los organismos estn formados por relativamente pocos tipos de compuestos. El agua constituye
alrededor del 70% de la mayora de los seres vivos. De los dems compuestos, los principales son los glcidos,
los lpidos, las protenas y los nucletidos, muchos de ellos combinados para formar los cidos nucleicos, cido
ribonucleicos (ARN) y cido desoxirribonucleico(ADN). Aunque hay muchos otros compuestos presentes, estas
cuatro categoras constituyen la mayora de las molculas orgnicas de los seres vivos y son los actores de los
procesos metablicos. Por lo tanto, su localizacin y funcin dentro de la clula como un estudio ms detallado fuera
de ella se hace necesario.
Algunos ejemplos de tcnicas para el estudio, la ubicacin y la cuantificacin de molculas orgnicas se mencionan a
continuacin:
RECONSTRUCCIN DE IMGENES A PARTIR DE ELECTROMICROGRAFAS
a.
envoltura nuclear
b.
cloroplasto
c.
aparato de Golgi
d.
retculo endoplasmtico
2. Un determinado veneno destruye el citoesqueleto. Cul de las siguientes funciones sera afectada
directamente?:
a.
la divisin celular
b.
la respiracin celular
c.
la fotosntesis
d.
la sntesis de protenas
3.
a.
cloroplasto
b.
pared celular
c.
mitocondria
d.
centrolos.
4.
a.
mitocondria
b.
ribosoma
c.
cloroplasto
d.
retculo endoplasmtico
5.
6.
7.
8. Si Ud. tuviera que argumentar acerca de que los virus son organismos vivos, qu caractersticas estructurales
y funcionales del virus podra utilizar para apoyar su argumentacin?
9. Qu tipo de clulas pensara Ud. que alcanzaran el mayor tamao: una clula muy aplanada o una esfrica? Por
qu?
10. Por qu casi todas las clulas casi siempre son microscpicas?
11. Cules son las propiedades fundamentales que comparten todas las clulas? Describa la importancia de cada
una de ellas.
12. Compare en un cuadro las diferencias estructurales, funcionales y metablicas entre las clulas procariontes y
eucariontes.
13. Qu propiedades distinguen a un virus de una bacteria?
14. Enumere los pasos de la infeccin viral, y describa brevemente cada paso.
15. Utilizando el Sistema Mtrico Decimal resuelva las equivalencias en metros de: a) 1 nm; b) 1 mm.
16. Indique el poder de resolucin del: a) M.O.; b)M.E.T.; c)M.E.B.
17. Cuntas veces son mayores los aumentos del M.E. en relacin a los del M.O.?
18. A qu es igual el poder de resolucin?:
a.
AN / 0.61 x l
b.
0.61 x l / AN
c.
0.61 / AN x l
d.
0.61 x AN /l.
decrece
b.
aumenta
c.
se mantiene constante
d.
se vuelve ms delgada
b.
c.
d.
citometra de flujo
b.
b) microscopia electrnica
c.
fraccionamiento celular
d.
difraccin de rayos
30. Las muestras de clulas vivas o preparados fijados se pueden estudiar indistintamente con:
a.
microscopia electrnica
b.
microscopia de interferencia
c.
d.
difraccin de rayos X.
BIBLIOGRAFA
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