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UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE

BASADRE GROHMANN

FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE BIOLOGIA
MICROBIOLOGIA

MANUAL PRACTICO DE
FISIOLOGIA ANIMAL

Blgo. Vctor Carbajal Zegarra

Tacna Per
2015

Prcticas de Fisiologa

PREFACIO
La presente publicacin ha sido corregida con respecto a las primeras ediciones.
Esto ha sido necesario debido al desarrollo alcanzado por la Fisiologa en los
ltimos aos. Nuevos acontecimientos en el mundo biolgico han ilustrado de
mejor forma nuestros conocimientos, modificaciones de conceptos y tecnicas
mantenidos durante ms de 30 aos, descripcin de nuevos contenidos, etc. Han
sido el producto de la incorporacin de nuevas tcnicas experimentales que han
permitido llegar a los lmites insospechados dentro del conocimiento de los
mecanismos moleculares a nivel intracelular. La biologa celular y molecular, la
ingeniera gentica y la genmica, la inmunologa y el radioinmunoensayo, entre
otras disciplinas, han contribuido en gran parte a este desarrollo.
La experiencia docente muestra que el xito en la transmisin del saber depende en
gran medida del estilo con que se intenta, estilo que es propio de cada docente. Las
Universidades notables del mundo lograron prestigio por sus aportes al
conocimiento y complementariamente, no por ensear una fisiologa, o biologa
diferentes, sino por transmitir los mismos contenidos de una manera diferente. La
pretensin del autor consiste en plasmar en el manual su preocupacin por
aproximarse a la mejor docencia. Sin duda un manual prolonga y hace permanente
la ctedra universitaria. Por aadidura, constituye un instrumento que permite y
exige su superacin. En este sentido la tarea para nosotros apenas se ha iniciado.

Blgo. Vctor Carbajal Z.

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

INDICE
Preparaciones Fisiolgicas

..........................................................04

Fisiologa de Membrana

..........................................................10

Potencial nervioso de accin

..........................................................13

Contraccin muscular

..........................................................16

Gusto y Olfato

..........................................................21

Psicofsica de sensaciones

..........................................................30

Funciones reflejas

..........................................................35

Actividad refleja

..........................................................41

Sistema Digestivo

..........................................................53

Fisiologa Digestiva

..........................................................61

Ventilacin Pulmonar

..........................................................65

Miocardio

..........................................................73

Presin Arterial

..........................................................80

Electrocardiograma

..........................................................83

Elementos Formes de la Sangre

..........................................................87

Valor Hematocrito

..........................................................91

Velocidad de Sedimentacin Globular

..........................................................96

Coagulacin Sangunea

........................................................102

Rin y Medio Interno

........................................................107

Regulacin pH y Lquidos corporales

........................................................118

Fisiologa de rganos Excretores

........................................................120

Sistema Endocrino en Insectos


Electroencefalograma

.122
........................................................124

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

PREPARACIONES FISIOLGICAS
1. INTRODUCCIN.
Anestsicos: Son drogas (frmacos) que provocan la neuro-depresin, que se
caracterizada por prdida de la sensibilidad y de la conciencia, as como la
actividad refleja y la motilidad. En su mayora son gases o lquidos voltiles, pero
algunos no son voltiles y se administran por va intra venosa.
Los anestsicos generales, conforme aumentan su concentracin en el organismo
produce depresin irregular descendente del sistema nervioso central, las funciones
deprimidas primero son aquella que fueron formadas ltimamente durante el
desarrollo embriolgico y filogentico. El orden de depresin es, corteza cerebral,
ganglios basales, cerebelo, medula espinal y finalmente con dosis txicas, los
centros respiratorios y el bulbo vasomotor.
Las descripciones desarrolladas para cada una de las etapas, varan para los
diferentes anestsicos y tambin son modificadas cuando se utilizan medicamentos
auxiliares, sin embargo, es un plan de organizacin til.
Las etapas de la anestesia son:
Etapa 1: Analgesia.- En esta etapa se produce un estado de analgesia o
movimiento voluntario, debido a que se inicia de desinhibicin de los centros
nerviosos, su duracin es desde la administracin inicial del anestsico hasta la
prdida de la conciencia aunque la sensacin dolorosa persiste.
Se experimenta analgesia, debido a que se comienza la desinhibicin. No se
altera la respiracin. Los msculos se encuentran bajo el control voluntario
usual.
Etapa 2: Excitacin.- Se produce una desinhibicin marcada de los centros
nerviosos, con lo cual se pierde la conciencia. La respiracin es frecuentemente
irregular y cambia rpidamente. Se produce un aumento de la descarga
simptico adrenal.
Etapa 3: Anestesia Quirrgica.- La entrada a la etapa 3 est marcada por el
comienzo de un patrn respiratorio regular. Esta etapa se divide adems en 4
planos:
Plano I: Reconocido por el retorno de respiraciones regulares, amplias y
rtmicas, asociadas con movimientos vagos del globo ocular y prdida del
reflejo palpebral.
Plano II: Reconocido cuando las respiraciones regulares se hacen menos
amplias y los globos oculares permanecen fijos.
Plano III: Reconocido por el aumento de las respiraciones abdominales,
estando disminuidas las respiraciones torcicas (comienzo de la parlisis de
los msculos intercostales).
Plano IV: Reconocido por una completa parlisis intercostal. La respiracin
es abdominal, es rpida y superficial.

Etapa 4: Parlisis Bulbar.- Debido a la depresin del bulbo y de la mdula


cervical, no hay movimientos respiratorios y termina con el paro cardiaco.

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

2. MATERIAL
2.1.
Reactivos:
- Ketalar y / o Alatal
- Diazepan
2.2.
Equipo:
- Agujas hipodrmicas
- Jeringas hipodrmicas
- Balanza
2.3.
Material Biolgico:
- Rattus rattus
- Thelmatobius arequipensis
- Columba livia

Xilocaina 2 %
Cloroformo

Campana de vidrio
Algodn

3. METODOLOGA
3.1.
Anestsicos Generales. ( va intraperitoneal )
Pesar una rata y determinar el volumen de anestsico:
Dosis a inocular:
* Slido (polvo)
* Lquido

35 mg / Kg de peso corporal

1 ml / 2.5 Kg de peso corporal

Se sujeta la rata rodeando su cabeza con el pulgar y el ndice de la mano


izquierda, acostando el cuerpo en la palma de la mano y apretando
ligeramente el cuerpo con los otros dedos, impedir el movimiento de las
patas traseras del animal y poner tensa la piel del abdomen.

Con un movimiento rpido, se introduce en la cavidad peritoneal la


aguja hipodrmica unida a la jeringa introduciendo el anestsico.

Determine el tiempo que se requiere para evidenciar el efecto de la


anestesia hasta que aparezca una respiracin lenta y superficial; registre
el tiempo necesario para que pase a una respiracin rpida y profunda.

Establecer las caractersticas de cada uno de los planos de anestesia.

Resultados:
Registre sus observaciones en las siguientes tablas:

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Depresin
SNC

Color de
Mucosa

Tamao
Pupilar

Actividad
globo
Ocular

Tono
Muscular

Datos basales
I Induccin
P. analgesia
P. delirio
II Anestesia
Quirrgica
Plano 1
Plano 2
Plano 3
Plano 4
III Parlisis
Bulbar

Respiracin
Torcica Abdominal

Reflejos
Prpado
Pie
Pulso

Datos basales
I Induccin
P. analgesia
P. delirio
II Anestesia
Quirrgica
Plano 1
Plano 2
Plano 3
Plano 4
III Parlisis
Bulbar
3.2.

Anestsicos locales: (va sub cutnea)

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Para la aplicacin del anestsico local, elija a uno de sus compaeros y


proceda de la siguiente manera:
-

Coloque en una jeringa con aguja de tuberculina calibre 26, 0,2 ml de


xilocaina 2 %. Proceda a limpiar con un algodn humedecido con
alcohol yodado la zona a inyectar aproximadamente el tercio medio del
antebrazo.

Con el pulgar y el ndice de la mano derecha levante un pliegue de la


piel, introduzca la aguja rpidamente a travs de la piel levantada, hasta
el espacio sub cutneo, coincidiendo el bisel de la aguja con el punto a
aplicar.

Inyecte lentamente el lquido contenido en la jeringa.

Retire la aguja y frote de inmediato el lugar de inyeccin, para cerrar el


orificio hecho por la aguja.
Proceda como en los experimentos anteriores, a registrar los signos
vitales del paciente.

Determine el radio de accin del anestsico.

Resultados: Registre sus observaciones:

3.3.

Anestsicos Inhalados

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Los anestsicos por inhalacin son divididos en lquidos voltiles


(cloroformo, ter etlico, halotano, etc ) y gases (etileno, oxido nitroso, ciclo
propano, etc ) esto es de acuerdo con su estado fsico, son administrados por
sistemas semi cerrados o insuflacin.
Coloque en la cmara narctica al espcimen de estudio e introduzca
algodn con ter etlico o cloroformo.
Resultados:
Registre sus observaciones en las siguientes tablas:

Depresin
SNC

Color de
Mucosa

Tamao
Pupilar

Actividad
globo
Ocular

Tono
Muscular

Datos basales
I Induccin
P. analgesia
P. delirio
II Anestesia
Quirrgica
Plano 1
Plano 2
Plano 3
Plano 4
III Parlisis
Bulbar

Respiracin
Torcica

Abdominal

Reflejos
Prpado

Pie

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Pulso
Datos basales
I Induccin
P. analgesia
P. delirio
II Anestesia
Quirrgica
Plano 1
Plano 2
Plano 3
Plano 4
III Parlisis
Bulbar

3.4.

Preparacin Espinal

El sapo es inmovilizado por destruccin del sistema nervioso central; el


espcimen no muere por que su respiracin cutnea es suficiente para
mantener la oxigenacin de la sangre y consecuentemente de los tejidos a un
nivel satisfactorio: el corazn mantiene su automatismo por tiempo ms
prolongado. Se realiza de la siguiente manera:
-

Asegure el sapo con la mano izquierda, deprimiendo la cabeza con el


pulgar.
En seguida localice la lnea media de articulacin atlo occipital
insinuando la ua del dedo ndice.
Luego introduzca un estilete en ese punto, haciendo movimientos para
seccionar la mdula; dirija el estilete hacia el extremo ceflico y con
movimientos laterales destruya la mdula.
Resultados:
Registre sus observaciones:
FISIOLOGIA DE LA MEMBRANA

1.0

INTRODUCCION:

La vida celular depende de un continuo intercambio con el medio externo, ya que la clula
debe tomar de este, los nutrientes y expulsar hacia l, los productos de su metabolismo.

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

El intercambio se establece a travs de la membrana celular, la cual se comporta como una


estructura semipermeable que permite el paso de determinadas sustancias e impide el de
otras.
La membrana est constituida por una bicapa de molculas lipdicas anfipticas, orientadas
de forma tal que sus grupos polares quedan expuestos hacia las interfaces interna y externa,
mientras los grupos apolares se disponen hacia el interior, alejados del agua. La bicapa
lipdica se ve interrumpida en determinados puntos por la presencia de molculas
proteicas.
De acuerdo con la estructura molecular de las sustancias que atraviesan la membrana, el
paso se efecta a travs de la parte lipdica o de la proteica.
Las sustancias apolares se solubilizan en los lpidos de membrana y la atraviesan
fcilmente; las sustancias polares pequeas atraviesan los polos proteicos. En ambos casos
la sustancia se mueve siguiendo su potencial qumico y el mecanismo se conoce como
permeabilidad simple. Las sustancias polares, cuyo dimetro molecular sobrepasa el
dimetro mximo de los poros, requieren de un mecanismo especial de paso a travs de la
membrana, en el cual estn involucradas las protenas de membrana; este mecanismo se
conoce como transporte mediado o facilitado.
El transporte de sustancias a travs de los compartimentos del organismo generalmente va
seguido de transporte de agua mediante el proceso conocido como smosis.
Cuando entre dos compartimentos separados por una membrana semipermeable existe una
diferencia de concentracin de solutos, lo cual constituye un desequilibrio, el sistema
restablece el equilibrio moviendo el soluto y / o el solvente.
En la prctica se utilizan eritrocitos humanos y organismos unicelulares, que al lizarse
liberan al exterior la hemoglobina y algunas sustancias, en el primer caso, la solucin se
colorea de rojo. Al medir el porcentaje de hemlisis provocado por una serie de soluciones
cada vez ms diluidas, puede constituirse la curva de fragilidad de los eritrocitos, lo mismo
ocurre con los organismos unicelulares.
2.0

MATERIAL:

2.1.Reactivos:
ClNa 0,17 M
Sacarosa 0,3 M
Urea 0,3 M

2.2 Equipo:
* Centrfuga
* Espectofotmetro
* Bao termosttico

Glicerol 0,3 M
* Equipo de diseccin
Solucin Locke
Solucin Locke glucosa
Pentobarbital sdico, Ketalar o Alatal
2.3.Material Biolgico:
* Sangre humana fresca
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

* Rattus rattus, Cavia stchudii, Cavia porcelus, Canis familiaris, Felis domesticus
3.0

METODOLOGIA:
3.1.Determinacin de la curva de fragilidad en eritrocitos:
Preparar una batera de tubos, de acuerdo a la siguiente tabla:
T1
NaCl 0.0
Agua 5.0
Sangre 3 g
-

T2
0.5
4.5
3g

T3
1.0
4.0
3g

T4
1.5
3.5
3g

T5
2.0
3.0
3g

T6
2.5
2.5
3g

T7
3.0
2.0
3g

T8
3.5
1.5
3g

T9
4.0
1.0
3g

T10
4.5
0.5
3g

T11
5.0
0.0
3g

Mezclar u homogenizar.
Medir el porcentaje de hemolisis o crenacion.
Graficar la curva de fragilidad, considerando los valores de hemolisis o
crenacion obtenidos frente a la os molaridad o concentracin.

Grafique e Interprete sus Resultados:


3.2.Determinacin de solutos penetrantes y no penetrantes:
Preparar una batera de tubos, de acuerdo a la siguiente tabla:

NaCl 0,17M
Urea 0,3M
Glicerol 0,3M
Sacarosa0,3M
Sangre
-

T1
10 ml

T2

T3

T4

10 ml
10 ml
3g

3g

3g

10 ml
3g

Agitar y dejar en reposo por 1 min, (en todas las soluciones el proceso
debe durar el mismo tiempo).
Tomar 5 ml de cada tubo.
Medir el porcentaje de crenacion o hemolisis.
Determinar la velocidad de penetracin de las diferentes sustancias.

Grafique e Interprete sus Resultados:


3.3. Transporte Activo:
-

Pesar una rata, cuy, conejo, perro o gato, en ayunas (24 h) y anestesiarlo,
con un anestsico general.

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Situar al animal en posicin dorsal en una tabla de diseccin y fijarla


con esparadrapo.
Hacer una incisin media abdominal y localizar la regin pilrica
duodenal.
Perforar el mesenterio en esa zona y pasar por debajo del intestino un
pedazo de seda de aproximadamente 10 cm. Hacer sobre el intestino una
pequea incisin en forma de V.
Medir a partir de esta zona 10 - 15 cm, de asa duodenal y repetir lo
anterior.
Introducir una jeringa con solucin Locke a 38C por la incisin en V
superior y lavar la porcin del intestino.
Ligar el intestino con la seda por encima de la incisin en V inferior.
Introducir por la incisin superior una jeringa con solucin Locke
glucosa a 38C y tratar de que el segmento se llene de forma homognea
y que sus paredes no queden demasiado distendidas por un exceso de
volumen de solucin patrn.
Cerrar la ligadura superior por debajo de la incisin.
Colocar las vsceras de nuevo en el interior del animal y baarle
frecuentemente con solucin Locke a 38C durante 30 min.
Repetir las operaciones con la segunda rata agregando a la solucin
Locke que va a introducir en el intestino 1 ml de solucin de cianuro de
potasio.
Extraer el segmento intestinal, secarlo en un papel filtro y vaciar su
contenido en un tubo de centrfuga.
Determinar la concentracin de glucosa en el sobrenadante y en la
solucin Locke original mediante una tcnica bioquimica:

Grafique e Interprete sus Resultados:

POTENCIAL NERVIOSO DE ACCION: EXCITABILIDAD


1.
INTRODUCCION:
La materia viva se caracteriza por ser capaz de responder ante los cambios en el
medio interno o externo con una variacin de su actividad. Esta propiedad se
conoce como irritabilidad. Cuando la variacin de la actividad celular frente al
estmulo es de naturaleza elctrica, el fenmeno se denomina excitabilidad y est
muy desarrollado en las clulas nerviosas y musculares. Estas clulas
especializadas tienen una gran sensibilidad a los estmulos, su respuesta a ellos es
una variacin del valor del potencial de membrana (PMR).
Las fibras nerviosas son electro excitables, por lo cual el estudio de la excitabilidad
se ha hecho bsicamente aplicando a un axn un estmulo adecuado. La
estimulacin elctrica resulta ventajosa, ya que es fcil de producir, no causa dao a
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

los tejidos y todos sus parmetros son fciles de controlar. Cuando sobre un axn se
aplica un estmulo elctrico de intensidad, duracin y velocidad de crecimiento
adecuados, el potencial de membrana va disminuyendo su magnitud y se hace
menos negativo el interior celular (despolarizacin), primero lentamente y una vez
alcanzado un cierto valor crtico, de forma brusca. Este valor del potencial de
membrana se conoce como umbral. El resultado de la despolarizacin brusca es
invertir la polaridad de la membrana, haciendo el interior positivo. Esta fase es
seguida por una rpida repolarizacin que tiende a llevar de nuevo el potencial de
membrana al valor de reposo.
Este tipo de cambio elctrico es lo que se conoce como potencial de accin (PA) y
es capaz de propagarse a lo largo del axn. En el desarrollo de PA se suceden
eventos elctricos e inicos.
2.
MATERIALES:
2.1. Reactivos:
- Solucin Looke
- Suero fisiolgico
- Solucin Ringer rana
2.2. Equipo:
- Estimulador elctrico
- Quimgrafo
2.3. Material Biolgico:
Bufo spinulosus
Columba livia
3.
METODOLOGIA:
3.1. Comprobacin de la ley "del todo o nada":
- Preparar un nervio y el msculo inervado por ste, usando una de las tcnicas
de preparacin neuromuscular.
- Poner el control de intensidad del estimulador en posicin cero.
- Oprima el interruptor que cierra el circuito. Observar si hay respuesta.
- Aumentar ligeramente la intensidad, oprimir el interruptor. Observar.
-

Repetir sucesivamente la operacin aumentando en forma ligera la intensidad


del estmulo en cada paso, hasta observar la contraccin de algunas fibras
musculares.
Continuar aumentando la intensidad hasta obtener la respuesta mxima.
Esquematizar y explicar ste fenmeno.

3.2. Sumacin latente:


-

Estimular repetitivamente el nervio con estmulos subumbrales y frecuencias


mayores de 5 / s. Observar si alcanza la respuesta. Si la frecuencia de
repeticin utilizada no es efectiva, aumentar este parmetro. Observar.
Esquematizar y explicar ste fenmeno.
3.3. Curva de Excitabilidad:

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Fijar una velocidad de crecimiento de la respuesta. Variar la duracin de los


estmulos y determinar la intensidad necesaria para provocar excitacin en
cada caso.

Construir un grfico de intensidad duracin. Comprobar la exactitud de sus


determinaciones utilizando diferentes valores de intensidad y determinando el
tiempo mnimo necesario para que el estmulo sea afectivo.
Determinar la cronaxia y la reobase.

CONTRACCION MUSCULAR
1.
INTRODUCCION
Las respuestas conductuales de los animales involucran casi sin excepcin una u otra
forma de contraccin muscular. La habilidad de moverse rpidamente es una de las
caractersticas fundamentales de la vida animal y es posible, gracias a la accin combinada
de los msculos. Bajo el trmino de contraccin muscular se definen los eventos
mecanoqumicos que tienen lugar en el msculo y que producen en l acortamiento,
tensin o ambas cosas, y le permiten hacer un trabajo. En el proceso de contraccin
muscular se vinculan las propiedades contrctiles de la clula muscular con las propiedades
excitables de sus membranas.
Aunque las membranas de las clulas musculares son electroexitables, en condiciones
fisiolgicas normales la informacin de contraccin les llega por va qumica, a travs de la
sinapsis neuromuscular. Como resultado de la excitacin de la membrana muscular aparece
un cambio elctrico semejante al impulso nervioso, que se conoce como potencial de
accin muscular. El potencial de accin (PA) se propaga por la membrana sarcoplasmtica
incluyendo los elementos del retculo sarcoplsmico y provoca la liberacin de iones Ca+
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

almacenados en las vesculas terminales. La liberacin de estos iones desencadena una


serie de interacciones qumicas dependientes de ATP, cuyo resultado es la contraccin
muscular.
Los msculos estriados estn formados por miofibrillas y estas por miofilamentos gruesos
y finos dispuestos en un patrn estructural caracterstico, donde aparece como unidad que
se repite a lo largo de la clula muscular, el sarcmero.
Durante la contraccin muscular ocurre un desplazamiento de los filamentos finos respecto
a los gruesos, gracias a la sucesiva formacin y ruptura de puentes transversales entre las
molculas proteicas que componen estos filamentos.
Los filamentos gruesos estn formados por miosina y los finos por actina, troponina y
tropiomisina. En estado de reposo la concentracin de iones Ca + en el sarcoplasma es baja
y las protenas contrctiles de los filamentos finos estn en posicin poco favorable a la
unin con la miosina. Con la excitacin, los iones Ca + concentrados en las cisternas
terminales del retculo sarcoplsmico son liberados. Las molculas de troponina fijan iones
Ca+ y esto provoca un cambio conformacional que favorece la formacin de un puente
transversal entre la actina y la cabeza globular de la miosina. Los iones Ca +, adems,
activan la ATP-asa miosnica, de manera que el ATP es hidrolizado. La energa liberada en
la hidrlisis es utilizada en un giro de la cabeza globular de la miosina unida a la actina,
desde una posicin en que el ngulo entre ellas es de 90 a otra en que este cambia a 45.
Con este giro se tira del filamento fino hacia en centro del sarcmero y as se van
deslizando estos filamentos uno con respecto a otros.
2. MATERIAL
Reactivos:
- Solucin Ringer Rana
- Solucin con glicerina
- Solucin de ATP
- Solucin saturada de ClK
- Solucin de cafena
Equipo:
- Estimulador elctrico
- Quimgrafo
- Microscopio
- Portaobjetos
- Tabla de diseccin
- oteros
Material Biolgico

Equipo de diseccin
Varillas de vidrio
Seda quirrgica
Soporte Universal con pinzas
Agujas

- Bffo spinulosus
3. METODOLOGIA
Se utilizar una preparacin citico - gastrocnemio de anfibio. Se proceder a desmedular y
descerebrar, posteriormente corte la piel detrs de la cadera y retire la de los miembros
inferiores como quien invierte un guante. Se separan las dos patas cortando la pelvis
exactamente en la lnea media. Con una varilla de vidrio separe el gastrocnemio de los
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

tejidos vecinos, busque el tendn de Aquiles, sujtelo con un hilo y jale el taln. El
extremo inferior del msculo se levanta, y se separa el gastrocnemio del hueso y del tejido
muscular de la parte baja de la pierna, cortando la articulacin de la rodilla con tijeras. Se
disecan los msculos de la cara dorsal del muslo hasta exponer el nervio citico, cerca del
fmur. Con mucho cuidado, se diseca el nervio. Se separan el nervio y el gastrocnemio, de
los dems tejidos cortando el fmur y el tejido muscular por encima de la rodilla, y por
debajo de su unin con la pelvis. Las preparaciones neuromusculares de ambas patas se
colocaran en placas Petri de solucin ringer anfibio.
Sumacin Multifibrilar.
Aplicar estmulos aislados de intensidad creciente con el tambor estacionario del
estimulador de Harvard.
Entre contraccin y contraccin se mueve el tambor a mano aproximadamente a un cm de
distancia. Dejar pasar 10 seg. entre cada estmulo. Se va aumentando la intensidad del
estmulo.
Determinar el estmulo umbral, la intensidad de las respuestas y la intensidad capaz de
producir una contraccin mxima.
Resultados:

Sumacin del Estmulo Subumbral.


Poner el estimulador en una intensidad subumbral, escasamente por debajo de la intensidad
umbral.
Estimular varias veces hasta lograr respuesta. Observar
Resultados
Contraccin Tetnica.
Aplique estmulos sucesivos cuya intensidad (subtetanizante) se suficiente para provocar
sacudidas simples de mxima amplitud. Dejar descanzar 20 seg entre estimulacin.
Producir tetanizaciones frecuentes y observar los efectos de la fatiga.
Resultados:
Contractura.
Mantenga el quimgrafo encendido y la palanca inscribiendo. Bae externamente el
msculo con una solucin saturada de ClK. Observar.
Lave la preparacin con solucin fisiolgica.
Aplquele un estmulo elctrico para comprobar que se ha recuperado.
Repita el procedimiento anterior con solucin de cafena. Observe los resultados.
Resultados:
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Efecto de la Carga Sobre la Contraccin Muscular.


Fije el plato para las pesas sobre la palanca del msculo. Aplique estmulos mximos al
msculo. Coloque pesas de 10, 20, 30, 40, 50 y 60 g en el plato y estimule el msculo.
Determine la fuerza de la contraccin en relacin con cada peso, Elabore una grfica de
relacin entre trabajo (peso x intensidad) y peso.
Resultados:
Comprobacin de la Intervencin del ATP en la Contraccin.
Con la ayuda de una aguja hipodrmica y unas pinzas finas, separes fibras del msculo
glicerinado, colquelas sobre un portaobjetos con una gota de solucin fra de glicerina al
15 %.
Examine la preparacin al microscopio y mida la longitud de la fibra muscular.
Aada una gota de solucin de ATP y observe atentamente. Mida de nuevo la longitud de
la fibra. Explique los resultados.

GUSTO Y OLFATO
1.
INTRODUCCION:
El gusto y el olfato constituyen un grupo de sentidos caracterizados por su capacidad para
responder, de manera especfica, al efecto directo de diversos tipos de compuestos
qumicos. Tanto desde el punto de vista de su disposicin estructural como de su
especializacin funcional y su significado biolgico, el gusto y el olfato presentan
numerosos puntos en comn. Ambos son sensibles a estmulos de tipo qumico (pertenecen
al grupo de los quimiorreceptores) y poseen, por tanto, la capacidad de detectar la
presencia de sustancias disueltas (iones o molculas) en el medio ambiente.
La deteccin de compuestos qumicos en fase gaseosa se lleva a cabo por medio de la
olfacin (olfato), mientras que la presencia de las sustancias qumicas en un medio lquido
se pone de manifiesto a travs de la degustacin (gusto). La olfacin o el olfato posee una
gran importancia funcional, dado que permite la deteccin de molculas que, procedentes
de puntos situados a distancias relativamente grandes, son vehiculadas hasta el perceptor a
travs de corrientes areas o lquidas.
La quimiopercepcin constituye la base de numerosas actividades del comportamiento,
incluida de manera particular en los animales, la comunicacin interindividual. La funcin
ms importante de la quimiopercepcin est en relacin con la bsqueda y captura de los
alimentos, as como los procesos que regulan su adecuada digestin. Al propio tiempo, los
sentidos qumicos desempean un papel muy importante en la evitacin de sustancias o
ambientes nocivos. En muchos animales, la deteccin de las sustancias qumicas
segregadas por un individuo determinado forma parte del mecanismo de atraccin sexual;
para otra parte, la secrecin de sustancias qumicas puede ser realizada tanto para atraer a
una potencial vctima como para alejar o rechazar a los posibles depredadores.
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

SENTIDO DEL GUSTO


En los mamferos, la sensibilidad gustativa depende de la adecuada estimulacin de
receptores ubicados en formaciones especializadas, los botones gustativos, particularmente
adaptados para la deteccin de sustancias en disolucin. Los receptores gustativos estn,
habitualmente localizados en determinadas reas de la superficie dorsal de la lengua y no
en el paladar, como podra deducirse de la expresin popular "tener un buen paladar" (en
los peces se hallan distribuidos por toda la superficie corporal).
Un botn gustativo est constituido por un conjunto de clulas de tipo epitelial ordenadas o
estructuradas en forma de cliz o de copa (unas 30 a 40 por botn o paila caliciforme).
Dichas clulas muestran, a nivel de polo apical, numerosas microvellosidades que se
proyectan sobre los pequeos poros o aberturas de los botones gustativos y sirven de
elementos de conexin con el lquido presente en la superficie de la lengua. De esta
manera, en el botn gustativo, las sustancias spidas, en disolucin, se ponen en contacto
con las clulas sensoriales.
Las seales emitidas por los receptores gustativos son transmitidas al sistema nervioso
central a travs de las numerosas fibras nerviosas que los enervan. En el hombre existen
alrededor de unos 12.000 botones gustativos sobre la superficie de la lengua, distribuidos
no de manera uniforme, sino concentrados en determinadas reas, que se extienden desde
la punta de la lengua hasta los borde laterales y sobre una pequea zona que cruza
transversalmente el rgano, a nivel de la base de la lengua. De esta forma, la superficie de
la lengua presenta unas reas con una gran densidad de terminaciones sensoriales para los
receptores gustativos, dotados de una elevada sensibilidad para la quimiopercepcin y
otras, relativamente mucho ms extensas, desprovistas totalmente de quimiorreceptores y
que muestran una insensibilidad absoluta a la mayor parte de las sustancias qumicas.
La capacidad que posee una especie molecular definida para estimular un determinado tipo
de receptor gustativo est acondicionada por diversos tipos de factores fsicos y qumicos.
Para que una sustancia tenga sabor, es necesario que se disuelva en la saliva, ya que los
botones gustativos solamente son excitados por sustancias en disolucin. Las sustancias
insolubles, como el oro, el platino, la vaselina, etc., carecen de todo sabor. Por otra parte,
paradjicamente, sustancias relativamente solubles en el agua, como el nitrgeno o el
oxgeno, no originan tampoco ninguna sensacin gustativa. Las hexosas (monosacridos)
poseen todas ellas sabor dulce, siendo la sensibilidad mxima para la fructosa, intermedia
para la glucosa y mnima para la manosa.
Las moscas son atradas por las hexosas y disacridos, pero no sienten ningn atractivo por
las triosas y tetrosas. En otros casos, a pesar de la completa identidad qumica, existen
diferencias en la calidad del gusto en funcin de la disposicin espacial de determinados
grupos funcionales; as la d-fenilalanina tiene sabor amargo. Curiosamente, sustancias cuya
composicin qumica es totalmente distinta puede poseer un sabor casi idntico; ste es el
caso de la sacarosa, la sacarina y los ciclamatos, las cuales a pesar de corresponder a
estructuras qumicas completamente distintas, poseen sabor dulce todas ellas.
La cualidad de un sabor viene determinada por un conjunto de sensaciones originadas en
distintos tipos de receptores. Dejando aparte el olfato, que contribuye en gran manera a
configurar el "sabor" de los alimentos (en casos de resfriado o al bloquear las aberturas de
las fosas nasales no podemos "saborear" la comida), las sensaciones gustativas dependen
de la estimulacin de receptores trmicos, mecnicos, etc., adems de los propiamente
qumicos. El sabor acre (spero y picante) de algunas sustancias es debido a la
estimulacin simultnea de las fibras de la sensibilidad dolorosa. La sensacin de
astringencia es debida, probablemente, a una ligera lesin de los mecanorreceptores por los
iones hidrgeno libres. Entre las sustancias spidas que estimulan, a la vez, la sensibilidad
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

trmica, tenemos como ejemplos caractersticos el del mentol, que da lugar a una
sensacin de fro o frescor, y el alcohol, que favorece la sensacin de calor. La gran
variedad de sabores que apreciamos en las comidas o manjares es, por tanto, el resultado
de sensaciones complejas, en las que participan no slo los estmulos de tipo gustativo,
sino los tctiles, trmicos, olfatorios, etc.
Las cualidades propiamente tpicas del sentido del gusto corresponden a los cuatro sabores
fundamentales: dulce, salado, cido y amargo. Estas distintas cualidades o modalidades no
son percibidas de igual manera en todas las reas o regiones gustativas, sino que ofrecen
diferencias de localizacin caractersticas. As, la mxima sensibilidad para el dulce se
localiza en la punta de la lengua; para el cido en la parte posterior del reborde lingual;
para el salado en la parte anterior del reborde lingual y, en menor proporcin en la punta de
la lengua, y para el amargo en la base de la lengua. La intensidad de la excitacin depende
de la extensin de la zona afectada o estimulada por el excitante, razn por la cual
"paladeamos" cuando deseamos percibir mejor un gusto dbil.
Distribucin de los receptores gustativos
Los receptores gustativos son el punto de partida de una serie de reflejos importantes. La
secrecin de los jugos digestivos depende, en gran medida, del sabor de la sustancia
ingerida. La secrecin de saliva y de jugo gstrico es mucho ms intensa cuando el
alimento despierta una sensacin agradable que cuando ste es recibido con desagrado. La
mxima capacidad para estimular la produccin de saliva posee las sustancias de carcter
cido, las cuales dan lugar a una profusa secrecin cuyo objetivo principal es el de reducir
la concentracin de hidrogeniones y con ello evitar la lesin de la mucosa bucal, farngea y
esofgica. Las sustancias de sabor dulce dan lugar a una secrecin salival moderada,
mientras que las de sabor amargo inducen una secrecin mnima. Curiosamente, esta
ltimas poseen la capacidad de estimular de manera notable la secrecin de jugo gstrico,
lo que explica su efecto favorable sobre la digestin.
SENTIDO DEL OLFATO
El sentido del olfato comprende un conjunto de fenmenos mucho ms complicados que
en el caso del gusto. Los receptores olfatorios estn constituidos por terminaciones
nerviosas localizadas en la parte superior y posterior de las fosas nasales. En el hombre
existen unos 20 millones de receptores olfatorios, cada uno de los cuales presenta alrededor
de 20 prolongaciones o filamentos de tipo ciliar. Estos receptores son, de hecho, clulas
sensoriales primarias que envan o proyectan sus axones directamente al cerebro.
El epitelio nasal contiene tambin terminaciones nerviosas libres, pertenecientes a la rama
nasal del trigmino, las cuales responden a la presencia de sustancias qumicas a menudo
distintas a las que excitan habitualmente los receptores olfatorios.
El mecanismo por medio del cual se consigue la estimulacin de los receptores olfatorios
dista de estar completamente aclarado y presenta numerosos problemas e interrogantes.
Molculas de tamao o estructura muy diferente pueden oler de manera parecida, mientras
que, por el contrario, molculas muy similares pueden dar lugar a sensaciones olorosas
totalmente distintas.
El nmero de cualidades o modalidades de sensaciones olfatorias es inmenso, estimndose
que el olfato humano puede llegar a detectar unos 10.000 tipos distintos de olores. A pesar
de la gran variedad de olores que podemos percibir, no existe un criterio aceptable y
aceptado por todos los autores para clasificar las distintas sensaciones olfatorias de manera
satisfactoria.

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Prcticas de Fisiologa

A ttulo de orientacin y con un criterio totalmente arbitrario, podemos distinguir las


siguientes variedades:
1. Aromtico (pimienta, jengibre)
2. Fragante (jazmn)
3. Etreo ("ter" de manzanas)
4. Resinoso (sahumerio)
5. Ptrido (cido sulfhdrico)
6. Empirreumtico (alquitrn)
De hecho, existe un nmero relativamente pequeo de sustancias, unas 50, que dan lugar a
sensaciones olfatorias puras; la mayora de las sustancias o compuestos odorferos originan
estimulaciones mixtas, en las que participa tambin el sentido del gusto, as como la
estimulacin de las terminaciones libres del nervio trigmino de la mucosa nasal.
Cuando el individuo realiza movimientos respiratorios tranquilos, poco profundos, el aire
que est en contacto ms inmediato con la regin olfatoria est casi en reposo, por lo que
tan slo una pequea fraccin de la sustancia odorfera inhalada llega a ponerse en
contacto con los receptores olfatorios. Para "oler" mejor llevamos a cabo inspiraciones
intensas, profundas, con objeto de movilizar una mayor cantidad de aire y, con ello,
incrementar el nmero de molculas que entran en contacto con las clulas
neurosensoriales.
La sensacin odorfera no es igual para cualquier concentracin de la sustancia que haya
que detectar. Cuando aumenta la concentracin de una sustancia odorfera, se percibe, al
comienzo, una sensacin olorosa indefinida ("se huele algo") para, a medida que se
alcanzan valores o concentraciones superiores, detectar la sensacin olfatoria especfica.
En el primer caso se alcanza el "umbral de sensibilidad" y en el segundo el "umbral de
especificidad". A continuacin se indican los umbrales especficos para una serie de
sustancias.
Sustancia
Naftalina
Acido actico
Vainilla
Acido butrico
Escatol
Mercaptano

Concentracin (g/l de aire)


4 x 10-9
1 x 10-10
5 x 10-12
1 x 10-12
3.5 x 10-13
4.5 x 10-14

El perro posee una sensibilidad olfatoria muy superior a la del hombre, presentando unos
umbrales olfatorios que son de 6 a 8 rdenes de magnitud inferiores a los de la especie
humana. El perro puede detectar concentraciones de compuestos odorfero del orden de
10.000 molculas por centmetro cbico de aire; teniendo en cuenta que esta masa se
distribuye entre unas 108 clulas o receptores olfatorios, se deduce fcilmente que debe
bastar, probablemente, una sola molcula para estimular un receptor olfatorio.
Los receptores olfatorios se adaptan con suma rapidez, lo que explica que, al entrar en una
habitacin, se perciba claramente un olor determinado, mientras que al cabo de un cierto
tiempo no se note ya dicha sensacin.
2. MATERIAL
Terrones de azcar o azcar cristalizado
Disolucin de sacarosa al 5%
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Disolucin de cido actico al 1%


Disolucin de cloruro sdico al 5%
Disolucin de quinina al 0.05%
Disoluciones de cido actico al 0.14, 0.16, 0.18, 0.20, 0.25 y 0.35 %
Disolucin de feniltiocarbamida al 1.3 % a partir de la cual se preparan, por
disoluciones sucesivas, disoluciones de concentracin inferior.
Botellas o botellines de cristal, color mbar, para guardar las disoluciones de
feniltiocarbamida.
Trozos de cebolla, patata, manzana.
Miel
Frasco con agua de colonia
Frascos de boca ancha
Vasos de vidrio para enjuagues con agua
Vasitos de vidrio o de cermica (desechar el material de plstico para evitar la
contaminacin de las disoluciones que haya que degustar con productos
aromticos).
Gasas estriles
Cronmetro
Electrodos no polarizables
Batera de 6 V
Pinzas finas
Botella de agua

3. PROCEDIMIENTO
Aspectos generales de la estimulacin gustativa
Con una gasa estril, secar la superficie dorsal de la lengua de uno de los compaeros de
prcticas. A continuacin, colocar un pequeo cristal o terrn de azcar sobre la punta de la
lengua y comprobar el tiempo que transcurre desde este momento hasta aquel en que es
percibido el sabor del azucar.
Enjuagar abundantemente la boca con agua y secar de nuevo la lengua por medio de una
gasa estril. Depositar una gota de una disolucin de azcar al 5% en la punta de la lengua
y, de nuevo, verificar el tiempo que transcurre hasta el momento de percibir la sensacin.
Anotar los resultados correspondientes a cada prueba.
Resultados:
Terrn de azcar:
Disolucin de sacarosa:
Localizacin de los receptores gustativos
Con una gasa estril, secar la superficie de la lengua y, a continuacin, depositar una gota
de una disolucin de azcar al 5% sobre la parte posterior o base de la lengua, sobre los
lados o rebordes linguales y, finalmente, sobre la punta de la lengua. En la tabla y por
medio de sendas cruces, anotar la intensidad con que es percibido el sabor en cada una de
las distintas reas.
Enjuagar bien la boca con agua y repetir la experiencia depositando, por medio del
cuentagotas, pequeas cantidades de una disolucin de cido actico al 1%; a continuacin,
de una disolucin de cloruro sdico al 5% y, finalmente de una disolucin de quinina al
0.05%.
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A lo largo de estas experiencias hay que evitar que el compaero "receptor" vea o conozca
el tipo de disolucin que se le est aplicando cada vez. Por otra parte, es necesario insistir
en la necesidad de enjuagar profusamente la boca con agua al pasar de una disolucin a
otra.
Cules son las partes de la lengua ms sensibles a cada una de las distintas disoluciones
ensayadas?
Area

Sacarosa Acido actico Cloruro sdico

Quinina

Punta de la lengua
Parte anterior del
borde lingual
Parte posterior del
borde lingual
Base de la lengua
Umbral de sensibilidad
Sobre la mesa de prcticas ordenar una bacteria de frascos que contenga disoluciones de
sacarosa, de concentracin progresivamente creciente, que comprendan las siguientes
disoluciones: 1, 1.25, 1.5, 2, 2.25 y 3 %.
Depositar una gota de cada una de las disoluciones sobre la punta de la lengua, empezando
por la concentracin inferior y seguir, en sentido ascendente, con las de concentracin
progresivamente superior. Despus de cada momento o dilucin se percibe el sabor dulce
del azcar.
Repetir la experiencia con sendas disoluciones de cido actico, ordenadas en orden
creciente, de concentracin de acuerdo con el siguiente esquema: 0, 14, 0, 16, 0, 18, 0.2,
0.25 y 0,3%.
En este caso, depositar la gota de disolucin sobre la mitad posterior del reborde lingual.
Registrar el momento en que se detecta el sabor cido del actico.
En la tabla, anotar los resultados obtenidos en estas dos experiencias y compararlas con los
umbrales de sensibilidad para estas mismas sustancias que presentan los compaeros
fumadores (o no fumadores, segn sea el caso) del grupo de prcticas.
Sacarosa
Concentracin
(%)

No
fumadores

Acido actico
Fumadores

Concentracin
(%)

No
fumadores

Fumadores

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1
1.25
1.5
2
2.5
3

0.14
0.16
0.18
0.2
0.25
0.3

Prueba de la feniltiocarbamida
El objetivo de esta prueba es el de identificar la disolucin de feniltiocarbamida ms dbil
que es capaz de detectar cada individuo o participante. Con esta finalidad se ofrece a cada
alumno un pequeo volumen de una serie de disoluciones de feniltiocarbamida, de
concentracin progresivamente creciente, hasta el punto en que es capaz de percibir el
sabor amargo de la disolucin, perfectamente diferenciable del propio agua corriente.
Las disoluciones de feniltiocarbamida se preparan a partir de una disolucin madre que
contiene 1.3 g de sustancia por litro de agua potable y de la cual por diluciones sucesivas,
se preparan los siguientes tipos de disoluciones:
1
1,300 mg/l
2
325 mg/l
3
162,5 mg/l
4
81,25 mg/l
5
40,63 mg/l
6
20,31 mg/l
7
5,08 mg/l
8
1,27 mg/l
Si bien en el momento de su preparacin la disolucin madre y las correspondientes
diluciones se realizan empleando agua caliente, en el momento del ensayo todas las
disoluciones que hay que experimentar deben estar a temperatura ambiente, puesto que el
organismo puede detectar diferencias de temperatura inferiores a 1 C.
Por otra parte, el agua empleada para preparar las distintas diluciones, agua pura o potable,
debe ser la misma para preparar toda la batera o serie de disoluciones utilizadas en una
prueba determinada.
La prueba se inicia degustando un pequeo volumen, 5 ml aproximadamente de la
disolucin n7 e indicando el sabor correspondiente, el cual puede oscilar entre el
francamente amarga hasta el totalmente inspido, como el del agua.
En el caso en que se detecte como "amarga" la disolucin ensayada, se admite que la
persona es sensible a la accin estimulante de la feniltiocarbamida y se la califica como de
"degustador". Para determinar el grado de sensibilidad de dicha sensacin se repite la
prueba, despus de enjuagar profusamente la boca con agua, utilizando un pequeo
volumen de la disolucin n8; si nota todava el sabor amargo, hay que repetir la prueba
con una disolucin cuya concentracin es la mitad de la anterior, y as sucesivamente.
En el caso de que la primera disolucin (n7) no sea percibida como de carcter amargo, se
dan a probar al sujeto disoluciones de concentracin progresivamente creciente. La
mayora de las personas percibe el sabor amargo a partir de alguna disolucin cuya

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concentracin supere unos valores mnimos; sin embargo, algunos individuos no notan el
sabor amargo en ninguna de las disoluciones.
Los resultados del grupo de prcticas en conjunto, y en su da, los de la totalidad de la clase
se acumulan y tabulan conjuntamente en forma de histograma de distribucin de
frecuencias; si el nmero de participantes es lo suficientemente amplio, es probable que se
observe una distribucin bimodal. Al analizar las grficas de las figuras es posible
determinar el umbral de sensibilidad (antimodo) a partir del cual la muestra de poblacin
estudiada puede ser dividida en "degustadores" y "no degustadores". Conviene tener en
cuenta que el umbral de sensibilidad para la feniltiocarbamida es mayor en las mujeres que
en los hombres, por lo que los resultados deben ser calculados por separado para cada
sexo. (Tericamente el 70% del grupo debera percibir el sabor, mientras que el 30%
restante sera insensible a l)
El carcter, o capacidad, gustativo parece ser dominante sobre el no gustativo, siendo los
individuos no sensibles o poco sensibles a la feniltiocarbamida homocigotos de tipo
recesivo.
Los compuestos del tipo de la feniltiocarbamida, derivados de la tiourea, son sustancias
con accin antitiroidea, habindose sugerido que el polimorfismo que se observa en la
capacidad para degustar este compuesto podra estar, de alguna forma, en relacin con la
actividad de la glndula tiroides, as como con variaciones en la tasa de crecimiento y
maduracin del sistema seo. De hecho, se ha demostrado cierta correlacin entre los
niveles del yodo proteico en el plasma y la capacidad gustativa para la feniltiocarbamida.
Interprete sus Resultados:
Estimulacin elctrica de los botones gustativos
Por medio de electrodos no polarizables (Ag. AgCl) y una pila o batera de 6 V, estimular
las distintas reas de la lengua y describir las diferentes sensaciones percibidas en cada
zona.
Resultados:
Confusin olor-sabor
Antes de empezar la prctica, colocar en un frasco de boca ancha, bien tapado, unos
trocitos de cebolla. Solicitar a uno de los compaeros de mesa que cierre los ojos y se tape
la entrada de las fosas nasales; en estas condiciones, introducir por medio de unas pinzas,
un trozo de cebolla en la boca del compaero y preguntarle qu tipo de sabor experimenta.
Habitualmente, juzgando slo por la consistencia del alimento, se interpreta que el
fragmento corresponde a un trozo de patata o de manzana. Al destapar las aberturas nasales
y respirar por la nariz se permite la llegada de los vapores de la cebolla a la regin
olfatoria y, en este momento, se percibe claramente la sensacin mixta olor-sabor de la
cebolla.
(La experiencia puede realizarse utilizando trozos de patata o de manzana como elementos
de prueba)
Introducir un poco de miel o un fragmento de pltano en la boca de un compaero,
mientras ste mantiene cerrada la entrada de las fosas nasales. Preguntarle acerca de la
sensacin que percibe; nos indicar que tan slo nota un ligero sabor dulce.
Pedirle ahora que destape la nariz y realice un movimiento espiratorio a travs de sta;
como por encanto percibir en estas condiciones el agradable "sabor" de estos alimentos.
Resultados:
Ubicacin de los receptores olfatorios
Cerrar la boca y, con los dedos pulgar e ndice de una mano, comprimir la entrada de las
fosas nasales. Colocar delante de la nariz un frasco abierto de agua de colonia. Destapar la
nariz, pero mantener la boca cerrada y sin hacer movimiento respiratorio alguno. Notar la
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sensacin que se percibe; no se detectar la sensacin olfatoria que cabra esperar. Retirar
el frasco y realizar una inspiracin profunda; se percibe claramente el olor del perfume.
Los vapores desprendidos del frasco de colonia penetran en las fosas nasales y quedan en
la regin anteroinferior en contacto con la mucosa nasal o pituitaria roja, insensible a los
olores. Al realizar la inspiracin, las molculas odorferas son desplazadas hacia la partes
superior de las fosas, excitando los receptores sensoriales localizados en la regin olfatoria
o pituitaria amarilla.
Resultados:
PSICOFISICA DE LAS SENSACIONES
1.
INTRODUCCIN:
Las sensaciones son la reproduccin subjetiva del mundo objetivo. El primer paso en este
proceso es la deteccin por medio de los receptores de una parte o aspecto de esa realidad
objetiva, ya sea luz, temperatura, tacto, sustancias qumicas, etc. La deteccin de los
diferentes tipos de energa del medio externo la realizan receptores especializados. La
informacin captada por estos receptores y traducida en impulsos nerviosos se propaga a
travs de los nervios perifricos y llega al sistema nervioso central, donde es elaborada
mediante una serie sucesiva de estaciones de relevo hasta llegar a los niveles superiores
donde se producen las sensaciones. Para cada modalidad de sensaciones existe una va
especfica de transmisin. De acuerdo con la va que haya sido activada la sensacin que se
produce ser tctil, trmica, auditiva, visual, qumica, etc.
2.
2.2.
2.3.
3.
3.1.

MATERIAL:
Equipo:
Bao Mara
Termmetros
Material Biolgico:
Homo sapiens. (ambos sexos)
METODOLOGIA:
Sensaciones mecnicas:

Para la sensibilidad tctil superficial:


- Tomar como sujeto de experimentacin a un compaero y pedirle que mantenga
los ojos cerrados mientras se le explora su sensibilidad tctil, pasando
suavemente un fino pincel por las zonas vellosas y no vellosas del dorso de la
mano, cuello y espalda
- Determinar las diferencias y explicar sus causas.
Resultados:
Para la discriminacin de dos puntos:
- Aplicar sobre la superficie de la punta de los dedos de un sujeto de experimentacin
que mantenga los ojos cerrados, las dos puntas de un comps y pedirle con cuntos
puntos diga que se le est estimulando. Cuidar de que ambas puntas sean aplicadas
simultneamente y con la misma fuerza. Estimular indistintamente con una o dos
puntas para asegurarse de que el sujeto no mienta.
- Variar la distancia entre las dos puntas del comps y determinar la mnima distancia
entre ellas, que permite discriminarlas como dos puntos de estimulacin separados,

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Repetir la experiencia aplicando los estmulos sobre el antebrazo el cuello y la


espalda.
- Determinar la zona de mayor poder de discriminacin y explicar las causas de esta
diferencia.
Resultados:
3.2.

Sensaciones Trmicas:

Para la sensibilidad trmica superficial:


- Utilizar varillas de cristal enfriadas hasta 15 C unas y calentadas hasta 45 C otras,
y localizar las reas de sensibilidad de fro y calor sobre la superficie del antebrazo
de un sujeto de experimentacin que debe desconocer la temperatura de la varilla.
- Determinar si todas las reas de la piel son iguales en cuanto a termosensibilidad.
Resultados:
Para el contraste de temperatura:
Introducir los dedos ndice de cada mano en un recipiente con agua a 30 C. Como
siente el agua, fra o caliente.
- Introducir inmediatamente el dedo ndice de la mano izquierda en un recipiente con
agua a 15 C y el de la mano derecha en uno a 40 C. Mantenerlos durante 30 seg.
Describir sus sensaciones.
- Transferir nuevamente ambos dedos al recipiente con agua a 30 C. Describir sus
sensaciones y explicar.
Resultados:
-

3.3.

Sensaciones Visuales:

Determinacin del punto ciego:

Esquema para determinar el punto ciego


- Colocar a 15 pulgadas del ojo la imagen del esquema.
- Cerrar el ojo izquierdo y enfocar con el derecho la cruz. Acercar lentamente la
ilustracin al ojo sin dejar de mirar la cruz.
- Indicar el momento en que deje de ver el crculo. Explicar a qu se debe.
Resultados:

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Para determinar el campo visual:


- Dibujar en la pizarra una circunferencia de 75cm de radio cuyo centro se encuentre
a la altura de los ojos del sujeto de exploracin. Trazar en la circunferencia radios
que formen entre s ngulos de 30 grados, desde 0 hasta 360 grados.
- Colocar al sujeto de experimentacin a 20 cm de distancia de la pizarra e indicarle
que cierre un ojo y que mire con el otro el centro de la circunferencia.
- Hacer avanzar a lo largo de cada radio de la periferie hasta el centro un objeto,
puede ser una pequea linterna, un puntero, etc. Marcar el punto en que el sujeto
reporta que ha visto el objeto mientras permanece mirando el centro de la
circunferencia.
- Unir los puntos marcados en cada radio y obtendr el campo visual del ojo
explorado.
- Repetir con el otro ojo. Observar la zona de superposicin de ambos ojos.
Resultados:

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

FUNCIONES REFLEJAS
INTRODUCCION:
Se conocen como reflejos a aquellas respuestas del organismo a cambios energticos del
medio externo o interno que ocurren en forma rpida e involuntaria; por ejemplo, la flexin
de una articulacin ante un estmulo nocivo. Muchas funciones de la vida vegetativa se
regulan tambin por va refleja como la presin sangunea, el llenado y vaciado de los
pulmones, la secrecin y motilidad gastrointestinal, etc.
La base anatomofuncional de los reflejos es el arco reflejo, el que consta de: receptores que
captan la informacin, va aferente por donde se enva la informacin al sistema nervioso
central, centro integrador constituido por conjunto de neuronas centrales que elaboran esta
informacin y va aferente que lleva la orden de respuesta al efector, rgano encargado de
ejecutar.
Las respuestas reflejas se clasifican atendiendo a diversos criterios:
1.
Por su papel biolgico, en reflejos de nutricin, defensivos, sexuales, de
orientacin, locomotores, etc.
2.
Por la localizacin de los receptores en reflejos exteroceptivos, propioceptivos y
viscerales.
3.
Por el nivel del sistema nervioso donde se elaboran, en reflejos medulares,
bulbares, mesenceflicos, dienceflicos, corticales en los vertebrados, y en los
invertebrados puede integrarse en diferentes ganglios.
4.
Por los rganos efectores involucrados, en reflejas motores, secretores y
vasomotores.
Adems, las respuestas reflejas pueden ser:
1.
Incondicionadas, cuando son respuestas innatas del animal.
2.
Condicionadas, cuando son el resultado de la experiencia del animal al
aprender a asociar dos o ms estmulos.
MATERIAL:
Reactivos:
Sacarosa
15% y 30%
ClH 0,3%, 1%, 0,5%, 0,25%
Novocaina

Alcohol
Cl Na 0,9%

Equipo:
Estimulador elctrico
Martillo de reflejos
Material Biolgico:
Lepidpteros
Cucarachas adultas (Periplaneta americana)
Bufo spinulosus
METODOLOGIA:
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Respuesta refleja de la proboscis en lepidpteros:


Colocar una gota de agua o de solucin azucarada en una placa
Petri.
Sujetar al insecto por las alas entre los dedos ndice y el pulgar.
Introducir un tarso en la gota de agua. Observar si se produce
extensin de la proboscis.
Introducir ambos tarsos. Observar.
Repetir la operacin con cada una de las soluciones. Comparar los
resultados.
Resultados:
Reflejo tarsal en lepidpteros:
Colocar en el fondo del frasco de cristal un algodn empapado en
ter y taparlo, de sta forma queda preparada una cmara de ter.
Introducir los insectos en los viales o tubos de ensayo pequeos
colocarlos en la cmara de ter y taparla. Esperar hasta que se
anestesien (entre 1 y 3 min).
Tomar los insectos anestesiados e insertar un alfiler en la parte
dorsal del trax, paralelamente al eje longitudinal del cuerpo. Cuidar
de hacerlo en forma superficial, de manera que solo afecte la
cutcula y no los msculos por debajo de ella.
Esperar a que se recuperen de la anestesia y suspenderlos por el
alfiler. Observar.
Colocar los insectos sobre el sustrato. Observar. Explicar los
resultados.
Resultados:
Reaccin de escape de la cucaracha:
Colocar las cucarachas en un vaso de precipitado de donde no les
sea fcil escapar.
Producir una leve corriente de aire dirigida hacia los cercos anales
con una pera de goma. Observar.
Producir otra leve corriente de aire dirigido a la cabeza. Observar y
explicar.
Reasultados:
Reflejo flexor en la rana:
Descerebrar la rana y colgarla por el maxilar inferior en un soporte
universal.
Pinche las patas alternativamente con la aguja enmangada. Observar
la contraccin que sigue a la estimulacin.
Colocar sobre la parte ventral del tronco un pequeo pedazo de
papel de filtro mojado con solucin cida. Observar.
Introducir los dedos de una pata en la solucin cida ms dbil.
Observar. Medir el perodo de latencia de la respuesta.
Quitar la piel de una de las patas y vuelva a estimular. Observar.
Estimular elctricamente el msculo. Observar. Explicar.
Disectar el nervio citico de la otra pata y colocar sobre l un
algodn impregnado de la solucin de novocana.
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Despus de unos segundos tratar de producir de nuevo el reflejo,


introduciendo los dedos de la pata de la rana en cido.
Estimular el nervio elctricamente por debajo de la zona de bloqueo.
Observar. Explicar.
Desmedular la rana y trate de lograr los reflejos que se observaron al
estimular patas y tronco.
Estimular otra vez el nervio citico. Observar. Explicar.
Analizar qu partes del arco reflejo fueron afectadas al quitar la piel,
anestesiar el nervio y desmedular.

Resultados:
Reflejo patelar en el hombre:
Pedir al sujeto de experimentacin que se siente en una silla y que
cruce una pierna sobre la otra.
Golpear suavemente la parte inferior de la rodilla de la pierna
cruzada con el martillo de reflejos, o en su defecto con el borde de la
mano. Observar.
Resultados:
Reflejo corneal u culo parpebral:
Tocar suavemente la crnea de un sujeto de experimentacin con una torunda de
algodn. Observar la reaccin.
Resultados:
-

Reflejo pupilar:
Acercar al sujeto de experimentacin a una fuente de luz natural o
artificial.
Tapar uno de sus ojos con la palma de la mano y orientarlo que mire
hacia la luz. Observar lo que sucede con el dimetro pupilar del ojo
descubierto.
Destapar el otro ojo. Comparar.
Pedir al sujeto de experimentacin que cierre un ojo.
Colocar sobre el otro ojo sus manos unidas por las puntas de los
dedos ligeramente flexionadas, de forma que no impida en su
totalidad el paso de la luz. Observar la pupila.
Resultados:
Reflejos de enderezamiento:
- Colocar al animal en posicin de cbito lateral sobre la mesa.
- Observar cmo se produce el enderezamiento.
- Vendarle los ojos con un pao o gasa. Repetir la experiencia. Observar.
- Colocado en la misma posicin tratar de inmovilizarlo manteniendo la cabeza sobre
la mesa. Observar.
Resultados:
ACTIVIDAD REFLEJA
1.

INTRODUCCION

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Las funciones esenciales del sistema nervioso es la de captar, transmitir y elaborar


informacin procedente del interior de nuestro cuerpo, as como del medio que nos
envuelve, haciendo posible, en cada momento, la correcta adecuacin entre las necesidades
de nuestras clulas y del organismo en su conjunto y los parmetros bioqumicos, fsicos y
fisicoqumicos del medio ambiente. El sistema nervioso hace posible, adems, la
integracin y coordinacin de los diversos rganos y sistemas corporales, permitiendo la
interrelacin personal y con los dems seres y objetos que nos rodean, as como el
desarrollo y ejercicio de las facultades y funciones superiores del individuo.
Para regular e integrar toda la compleja serie de funciones corporales, el sistema
nervioso depende de su capacidad para detectar los cambios o variaciones que se producen
en el medio ambiente y responder a stos, transmitiendo informacin sobre ellos a los
centros de coordinacin desde donde se dan las rdenes oportunas para conseguir los
efectos adecuados.
La mayor parte de la informacin captada, transmitida y elaborada por el sistema
nervioso nos pasa totalmente desapercibida; este tipo de actividad, totalmente inconsciente
o involuntaria, recibe el nombre de actividad refleja. Entendemos por reflejo o acto reflejo
cualquier acto involuntario producido como respuesta a la accin de un estmulo (variacin
en las condiciones del medio intra o extracorporal).
Los reflejos intervienen en multitud de funciones corporales y constituyen la base
sobre la que descansa nuestra actividad cotidiana; la regulacin de la presin sangunea, el
tamao de la pupila, la secrecin de enzimas digestivas, el mantenimiento de la postura, la
coordinacin de los movimientos, etc, son actividades de carcter reflejo.
Cualquier reflejo implica la existencia de tres tipos de componentes:
1. Una neurona sensorial que conduce la informacin desde un sistema receptor hasta la
mdula o el encfalo.
2. Una serie ms o menos extensa de interneuronas que conecta los elementos sensoriales
con otras clulas nerviosas.
3. Una neurona motora a travs de la cual se conducen los impulsos, originados en el
cerebro o en la mdula espinal, hasta el msculo o la glndula cuya actividad controla.
La actividad refleja comprende niveles de complejidad variable dentro del sistema
nervioso central, desde los simples reflejos de localizacin espinal hasta los complejos
reflejos del equilibrio que exigen la participacin de centros superiores. La complejidad y
precisin de una respuesta refleja guardan relacin con el nmero y variedad de estructuras
que integran un arco reflejo.
La existencia de un reflejo normal indica la integridad de todos los elementos y vas
que lo constituyen receptor, neurona sensorial, conexiones a nivel del sistema nervioso
central, fibras eferentes, msculos o efector, etc. Por este motivo, la exploracin de los
reflejos reviste gran importancia diagnstica para la correcta evaluacin de las distintas
funciones del sistema nervioso. La ausencia, disminucin, exageracin o alteracin
cualitativa de un reflejo pueden orientar acerca de posibles perturbaciones del sistema
nervioso.
La exploracin de la actividad refleja en el hombre presenta varios problemas y
limitaciones. Muchos tipos de actividad refleja, controlados por centros situados a nivel de
la mdula espinal, pueden ser modificados considerablemente por la actividad de centros
superiores. Por ello, cuando se exploran los reflejos de integracin espinal, el sujeto debe
estar relajado, mental y fsicamente, con la atencin alejada de la exploracin que se le
practica.
Por otra parte, es difcil explorar o evaluar el estado funcional de un solo acto reflejo;
nuestro organismo recibe simultneamente informacin procedente de diversos sistemas
sensoriales. Por este motivo, es necesario examinar cada funcin con el mximo grado de
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

segregacin de las dems para evitar que el sujeto, voluntaria o involuntariamente, muestre
un tipo de respuesta que no corresponde exactamente a la funcin explorada.
Finalmente, el paciente o persona objeto de examen debe recibir rdenes concretas y
claras, fciles de comprender, con objeto de conseguir su mxima cooperacin y obtener
respuesta coherente y precisas.
2.
MATERIAL
Rana
Disolucin de cido actico al 0,5 %
Disolucin de cido actico al 0,3 %
Disolucin de cido actico al 30 %
Disolucin de cido clorhdrico al 1 %
Tabla de corcho
Tijeras
Pinzas o frceps
Placa petri
Vasos de precipitados
Linterna
Martillo de reflejos
3.
OBSERVACION
Comportamiento de una rana normal.Colocar una rana normal sobre la mesa del laboratorio o en el interior de aun frasco
de boca ancha. Observar su postura normal; Anotar la posicin de la cabeza y de los ojos,
as como la de las patas anteriores y posteriores.
Situar un obstculo insalvable delante del animal, al mismo tiempo que se le
empuja desde atrs. Que tipo de trayectoria sigue en sus saltos?.
Colocar la rana sobre su dorso y comprobar el tipo de movimientos que realiza y la
rapidez con que se vuelve a su posicin normal. El enderezamiento del animal se produce
en respuesta a estmulos de presin sobre el dorso y a la anmala posicin de los ojos y del
odo interno (sistema de la postura y el equilibrio). Introducir a la rana en el interior de una
pileta llena de agua: observar su actividad natatoria.
Examinar, el tipo de movimientos respiratorios que realiza la rana. En este animal,
el aire necesario para la respiracin interna penetra, en pequea proporcin, a travs de la
piel y el suelo de la boca por medio de simple difusin, pero la mayor parte penetra en el
interior del organismo a travs de los pulmones. La rana, desprovista de costillas y de
diafragma, inhala a travs de la nariz manteniendo la boca cerrada y realizando un
movimiento de descenso de la base de la boca; en un segundo movimiento, el aire inhalado
es engullido por los pulmones. Observar la frecuencia con que se mueven los pulmones y
el suelo de la boca. Es la misma?
Resultados:
Comportamiento de la rana descerebrada.Descerebracin de la rana.- Para descerebrar una rana puede emplearse una tijera de ramas
largas. Pasar una de sus ramas de la tijera a travs de la boca del animal y colocar la otra
inmediatamente por detrs de los ojos (tan cerca de stos como sea posible); Seccionar la
cabeza por medio de un corte rpido. Con esta operacin se elimina el cerebro, pero se
conservan los lbulos pticos, el cerebelo y el bulbo raqudeo. De esta manera se anula
toda actividad consciente, pero el animal conserva su actividad refleja.
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Despus de la descerebracin es necesario esperar unos 5 minutos a que el animal se


recupere del shock producido por la seccin a nivel del encfalo.
Colocar la rana sobre la mesa y observar su actividad postural. Empujando al
animal desde atrs, comprobar si el animal es capaz de saltar cuando se le provoca
adecuadamente.
El movimiento presenta el mismo grado de coordinacin y espontaneidad que en el
animal normal? Cuando se le obliga a saltar en direccin a un obstculo situado en el frente
del animal. Trata de evitarlo?
Colocar al animal sobre una tabla de corcho y levantar uno de sus extremos de
dicho soporte. La rana de desplazar lentamente hacia la parte superior del plano
inclinado.
Notar la tensin (firmeza) o flaccidez de los msculos de los muslos y de las piernas al
movilizar las distintas articulaciones. Manteniendo el animal en posicin agachada, tirar de
una de las patas posteriores: notar la tensin o resistencia que ejerce la extremidad.
Situar al animal en una pileta llena de agua y observar su comportamiento. Se
mueve voluntaria o espontneamente? Si se le empuja, nada? Respira todava? Si se le
coloca sobre su dorso, se endereza?
Los movimientos natatorios, los respiratorios y los de enderezamiento son
actividades reflejas o voluntarias?
Anote sus resultados:
Accin de diversos estmulos sobre la rana descerebrada.Para esta serie de experimentos, colocar el animal por la mandbula inferior y
sostenerlo en posicin por medio de un soporte o estativo.
1. Estimulacin Mecnica.- Por medio de unas pinzas pellizcar uno de los dedos de las
patas posteriores del animal y observar la reaccin. La pata se retrae o permanece
encogida durante un periodo de tiempo variable. De acuerdo con la intensidad del
estmulo. La extremidad se relaja, despus, y recobra su posicin primitiva.
Dejar la preparacin en reposo durante 2 minutos.
Resultados:
2. Estimulacin trmica.- Aplicar una aguja calentada por medio de un mechero de
alcohol sobre una de las patas; La pata se encoge tambin. Dejar la preparacin en
reposo durante 2 minutos.
Resultados:

3. Estimulacin qumica.- Sumergir, un instante, las puntas de los dedos de una pata en
una disolucin de cido actico al 1 %. En respuesta al estmulo, la pata se retrae y
permanece encogida durante un tiempo.
Baar repetidamente la parte de la piel que ha estado en contacto con la disolucin con
agua del grifo o agua destilada con objeto de eliminar el cido de la superficie cutnea.
Anote sus resultados:
Efecto de la Intensidad del estmulo.-

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Sumergir la pata derecha del animal hasta el tobillo en una disolucin de cido actico al 1
%. Determinar el tiempo, en segundos, que tarda la rana en retirar la pata estimulada.
Cmo se comporta la pata contralateral? Enjuague la parte estimulada con agua.
Repetir el experimento con una disolucin de cido actico al 3 %Cmo reacciona
la preparacin? Qu efecto posee la variacin de la intensidad del estmulo Se descarga
mayor nmero de impulsos en respuesta a un estmulo ms intenso Las disoluciones de
cido actico empleadas en este experimento son muy dbiles, parecidas a vinagre diluido?
(Comprobar la dbil acidez de la disolucin colocando una gota sobre la lengua. Qu
respuesta refleja se produce a nivel de las glndulas salivales?)
Anote sus Resultados:
Irradiacin o dispersin de los reflejos.Sumergir una de las patas posteriores de la rana en una disolucin de cido
clorhdrico al 1 %. El animal no slo encoge la parte estimulada, sino tambin la
contralateral. Lo mismo ocurrir si se le pincha o pellizca con mucha intensidad. Si la
superficie estimulada es muy extensa o el estmulo muy intenso, las patas se encogern y
estirarn repetidas veces, con movimientos vivos e intensos.
Resultados:
Inhibicin contralateral de los reflejos.Pellizcar intensamente la pata posterior de la rana descerebrada, de tal manera que
permanezca encogida durante largo tiempo. Inmediatamente despus pellizcar la pata
izquierda; Esta parte se encoger en respuesta al estmulo, al mismo tiempo que se relajar
la derecha.
En este caso, la contraccin refleja de un lado del cuerpo inhibe la actividad refleja
contralateral.
Anote sus resultados:
Coordinacin de los reflejos medulares.Depositar un pequeo fragmento de papel de filtro impregnado con una disolucin
de cido actico al 30 % (eliminar el exceso de cido de la superficie del papel), sobre la
regin lumbar derecha de la rana descerebrada. Notar los movimientos que realiza el
animal para desprenderse del papel impregnado con el cido. El animal retrae la pata
derecha y realiza movimientos de rascado con objeto de eliminar el agente irritante.
Si por medio de una discreta presin, sujetamos la pata derecha de modo que no
pueda mover la extremidad, el animal, despus de intentar durante un rato contraer la
extremidad inmovilizada, encoger la pata izquierda, con la que intentar eliminar el papel
de filtro.
Completada la observacin, lavar al animal con agua durante un minuto y dejarlo
en reposo durante un par de minutos. Repetir el experimento colocando el papel de filtro en
distintos puntos del cuerpo y de las piernas.
Anote sus Resultados:
Comportamiento de una Rana Descerebrada y Desmedulada
Como ltimo experimento, destruir la mdula espinal pasando un alambre a travs
del conducto vertebral. Notar las contracciones de los msculos a medida que avanza el
alambre.
Una vez desmedulada la rana, dejar la preparacin en reposo durante 2 minutos

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Reexaminar ahora el comportamiento de la rana. Examinar, de manera especial, el tono


muscular y la respuesta a diversos tipos de estmulos. La actividad refleja ha desaparecido
totalmente.
Resultados:
Exploracin de los Reflejos en el Hombre.
Reflejo Miottico.- Para explorar el reflejo miottico, o de estiramiento, se estira
brevemente el msculo percutiendo sobre su tendn.
Los receptores de estiramiento del msculo anuloespirales del uso muscular envan
impulsos a travs de las vas aferentes y entran en la mdula por las races posteriores
sensitivas hasta llegar a las astas anteriores ipsolaterales de la mdula espinal. Las
motoneuronas alfa de las astas anteriores son excitadas y envan impulsos a travs de los
nervios motores que inrvan el msculo estriado, dando lugar a una breve sacudida o
contraccin muscular.
Esto constituye un tipo de reflejo simple, monosinptico, que puede estar alterado
tanto por lesin o destruccin de las fibras aferentes sensitivas como de la eferentes o
motoras.
Todos los msculos presentan el reflejo de estiramiento, pero solamente algunos
grupos musculares pueden ser examinados en la prctica clnica.
En esta prctica se examinar un tipo de reflejos tendinoso o miottico.
Reflejo Rotuliano (reflejo patelar).
Uno de los compaeros se sienta sobre la mesa del laboratorio de modo que sus
piernas cuelguen libres de su borde. Por medio de un martillo de goma (martillo de
reflejos) se estimula mecnicamente, con un golpe seco, el ligamento rotuliano justamente
por debajo de la rtula. Observar con atencin el movimiento de la pierna en respuesta al
estmulo. Repetir la prueba varias veces y determinar hasta qu grado la pierna se extiende
por la contraccin del cuadrceps femoral. Practicar la misma prueba con la otra pierna.
Repetir la prueba:
1. Con el sujeto tratando de bloquear mentalmente el reflejo
2. Mientras el sujeto est realizando un simple clculo aritmtico
3. Mientras el sujeto aprieta fuertemente el puo
Anote los Resultados:

Reflejos Superficiales.Este tipo de reflejos de carcter polisinptico, bastante ms complejos que los de
estiramiento, y pueden ser provocados por estimulacin de receptores situados a nivel de la
piel o de estructuras superficiales.
Reflejo Plantar.Por medio de un objeto de punta roma rascar la planta del pie a nivel del borde
externo. En respuesta a la estimulacin se produce la flexin de los dedos del pie. Cuando,
por el contrario, el dedo gordo se dirige hacia arriba y los dems dedos se extienden o
separan entre s (signo de Babinski), hay que pensar en una lesin de la va piramidal si se

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

trata de un adulto. Sin embargo, este signo es normal durante el primer ao de vida, cuando
todava no se ha completado la mielinizacin de las fibras del sistema piramidal.
Resultados:
Reflejo Abdominal.Rascar las partes laterales de la pared abdominal. La contraccin refleja de los
msculos abdominales determina la desviacin del ombligo hacia el lado etimulado.
Resultados:
Reflejo Corneal.Con una pequea torunda de algodn o con un trocito de papel, tocar suavemente
la superficie corneal o de la esclertica. Los prpados se cerrarn inmediatamente. Si el
estmulo es muy intenso, se producir lagrimeo.
Para realizar esta prueba pedir al compaero que mire a un objeto distante, mientras se
estimula mecnicamente la cornea.
Resultados:
Reflejos Orgnicos.Son tambin reflejos de carcter polisintico, ms complejos que los superficiales y que
comportan la participacin de un mayor nmero de estructuras, implicando un mayor
grado de coordinacin.
Situar al sujeto a la luz de la ventana o de una lmpara de incandescencia (bombilla).
Observar el iris y el dimetro de la pupila.
Solicitar al compaero que se cubra o tape ambos ojos con las manos durante 2 minutos.
Transcurrido este tiempo, pedir al sujeto, que an sigue con los ojos cerrados, que mire a
un objeto distante, mientras se le ordena destapar uno de los ojos. Observar la reaccin de
la pupila. Acto seguido retirar la mano que cubre el ojo contrario y observar la reaccin
pupilar. Esto constituye el reflejo pupilar directo.
A continuacin, llevar al sujeto hacia una zona con menor intensidad de luz y pedirle de
nuevo que se tape los ojos (2 minutos). Transcurrido este tiempo, debe destapar y abrir
simultneamente ambos prpados para de inmediato enfocar con una lmpara uno de los
ojos, mientras observamos la reaccin de la pupila contraria. Es el llamado reflejo pupilar
consensual. Constituye un proceso coordinado que precisa la existencia de fibras que pasan
de un ojo al contralateral, a travs del quiasma ptico.
Resultados:

SISTEMA DIGESTIVO
1.

INTRODUCCION
La funcin del sistema gastrointestinal es la de transformar las grandes partculas y
macromolculas de los alimentos en molculas lo suficientemente pequeas para que
puedan ser absorbidas e incorporadas a la sangre y, finalmente, utilizadas por las clulas de
nuestro organismo; los polisacridos deben ser desdoblados en monosacridos, las
protenas, en aminocidos y los triglicridos, en cidos grasos y monoglicridos.
Los diversos procesos de adaptacin y preparacin de los alimentos para su absorcin por
el intestino se llevan a cabo gracias a la accin combinada de las secreciones y de los
movimientos del tubo digestivo.

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Las secreciones digestivas estn constituidas por una serie de compuestos


elaborados por clulas especializadas que forman parte de glndulas ubicadas a lo largo de
toda la pared del tubo digestivo o bien integradas en rganos especiales, como el pncreas
y el hgado. De estos compuestos, los fundamentales para la accin digestiva son protenas
de carcter enzimtico, cuyo grado de actividad guarda relacin con la proporcin de
sustrato (alimento) disponible, con la temperatura y con la concentracin de los iones
hidrgeno del medio en que actan.
Los polisacridos de la dieta, como el almidn o el glucgeno, son hidrolizados por
la accin de las amilasas y transformados en di y trisacridos. La celulosa, polisacrido
presente tambin en la dieta habitual, no puede ser hidrolizado por las secreciones
digestivas, al carecer nuestro sistema de enzimas capaces de atacar los enlaces
glucosdicos. Los di y trisacridos, procedentes da la hidrlisis del almidn o del
glucgeno, as como los ingeridos como tales en la dieta (sacarosa, lactasa, etc.), deben ser
hidrolizados hasta monosacridos para su correspondiente absorcin. Los azcares
ingeridos como monosacridos no requieren transformacin alguna y son absorbidos
directamente como tales.
La digestin de los polisacridos empieza en la cavidad bucal. La amilasa
segregada por las glndulas salivales (la partida, fundamentalmente) se mezcla con el
alimento y comienza la transformacin del almidn y del glucgeno en maltosa e
isomaltosa. La accin hidroltica de la amilasa salival contina en el interior de la cavidad
gstrica hasta que, al mezclarse con el cido clorhdrico, segregado por las clulas
parietales del estmago, se anula la actividad de la enzima.
Las protenas de la alimentacin son ingeridas principalmente formando parte de
los elementos celulares que integran los tejidos animales y vegetales, ms o menos
desnaturalizados, siendo mnima la proporcin de protena ingerida en forma libre
(constituyen una excepcin la clara de huevo, la casena de la leche y una pocas protenas
ms). Las macromolculas de protenas son digeridas por enzimas segregadas por el
estmago (pepsina) y el pncreas (tripsina, quimiotripsina, etc.). Gracias a la accin de las
mencionadas <<proteinasas>>, las macromolculas son transformadas en pequeos
pptidos, que, bajo la accin de diferentes <<peptidasas>> presentes en el borde en cepillo
de las clulas intestinales, son finalmente convertidos en aminocidos libres.
Los lpidos constituyen un grupo heterogneo de compuestos que poseen en comn
su insolubilidad en el agua y su solubilidad en los solventes de carcter orgnico. La mayor
parte de los lpidos de la dieta son suministrado en forma de triglicridos. La digestin de
los triglicridos tiene lugar en el intestino delgado. No existen enzimas para la hidrlisis de
los lpidos ni en la saliva ni en el jugo gstrico; sin embargo, tanto la masticacin e
insalivacin como la digestin gstrica favorecen la digestin de los lpidos al desdoblar
los polisacridos y protenas que los engloban o limitan en el interior de las clulas. La
grasa, as liberada, no es soluble en el agua y constituye una emulsin tosca y poco estable.
Para que los triglicridos presentes en dicha emulsin puedan ser hidrolizados
adecuadamente, es necesario el concurso de las sales biliares. La lipasa pancretica
convierte los triglicridos en cidos grasos y monoglicridos que son, ms tarde,
absorbidos por el intestino delgado.
Algunos de los constituyentes de las secreciones digestivas, como el cido
clorhdrico, el bicarbonato, la bilis o el mucus, no poseen carcter enzimtico, pero son
absolutamente necesarios para una correcta digestin. El cido clorhdrico y el bicarbonato
contribuyen a crear el medio adecuado para la accin de las enzimas digestivas, las sales
biliares son necesarias para la formacin de micelas con los cidos grasos, el mucus es
esencial como elemento protector y lubricante de la mucosa, etc.

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

2.

3.

MATERIAL
Tubos de ensayo
Rotulador, lpiz graso o etiquetas autoadhesivas
Gradilla para tubos de ensayo
Pipetas de 2, 5 y 10 ml de capacidad
Pipetas Pasteur
Botella pequea para recoger la saliva filtrada
Embudo pequeo
Gasa o algodn hidrfilo para filtrar
Tres probetas graduadas de 25 ml de capacidad
Bao de agua y hielo
Bao de agua a 37C
Mechero de alcohol
Placa de porcelana
Cristales de cloruro de sodio
Pequeo fragmento de tubo de goma
Agua destilada
Disolucin de almidn hervido al 1 %
Disolucin de glucosa al 1%
Disolucin de ClH al 0,8 %
Disolucin de CO3HNa al 0,5 %
Disolucin de cido actico al 5 %
Disolucin de bilis al 10 %
Disolucin de lipasa al 0,5 %
Acido butrico
Tributirina
Butirato de etilo
Disolucin de Lugol
Disolucin de Benedict
Papel indicador de pH
Disolucin indicadora de azul de bromotimol al 0,5 %
PROCEDIMIENTO

SECRECION SALIVAL.
I.

Secrecin salival en condiciones basales y en respuesta a diferentes tipos de


estmulos.
A. Secrecin salival en condiciones basales.
Se estima midiendo el volumen de secrecin producido por las glndulas salivales
durante un periodo de 10 minutos.
Deglutir la pequea cantidad de saliva presente en la boca, anotar la hora y, a partir de
este momento, dejar de deglutir hasta que finalice la prueba.
Por medio de un pequeo embudo de cristal, recoger la saliva producida a intervalos
regulares de 2 minutos, hasta un total de 10, en la probeta marcada con la letra B. Un
minuto despus de cada expulsin leer el nivel alcanzado por el lquido en la probeta;
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

anotar solamente el nivel de la masa lquida, ignorando la espuma presente en la parte


superior, y registrar los valores obtenidos en un grfico. De esta forma se obtiene una
curva, de tipo acumulativo, del volumen de secrecin salival en funcin del tiempo.
Anote sus Resultados:
B. Secrecin Salival en Respuesta a Estmulos de tipo Qumico y de tipo Mecnico.
Se sigue un procedimiento idntico al del apartado anterior en respuesta a:
- Estimulacin Mecnica.- por medio de la masticacin de un pequeo tubo de goma
y recogiendo la saliva en la probeta M.
- Estimulacin Qumica.- por medio de un pequeo fragmento o cristal de cloruro
sdico colocado sobre la lengua, recogiendo la saliva en la probeta Q.
Recoger la saliva producida, en cada caso, durante un periodo de 6 minutos.
Comparar las curvas obtenidas en cada una de las experiencias y razonar las
diferencias observadas.
Guardar la saliva obtenida para las pruebas posteriores.
Anote sus Resultados:
II.

Viscosidad de la Saliva.
Preparar dos tubos de ensayo medianos, numerados, y depositar unos 2 ml de saliva
en cada uno de ellos.
Aadir 10 gotas de cido actico al 5 % al tubo nmero 1 y 10 gotas de agua
destilada al tubo nmero 2. Agitar bien los tubos y dejarlos en una gradilla hasta
que finalice la experiencia siguiente.
Observar el efecto producido por el cido al precipitar la mucina, glicoprotena
presente en la saliva. Comparar la viscosidad de la saliva desprovista de mucina con
la de la saliva normal. Sobre la base de estas observaciones, razonar el posible
papel de la mucina a lo largo del tubo digestivo.
Anote sus Resultados:
III.

Digestin salival.
La ptialina es una alfa amilasa, presente en la secrecin de las glndulas salivales,
que hidroliza el almidn y el glucgeno, polisacrido de procedencia vegetal y
animal, respectivamente. La alfa amilasa transforma dichos polmeros en
compuestos intermedios conocidos como dextrinas y, si se permite un tiempo
suficiente para completar la reaccin, desdobla las dextrinas en maltosa y
maltotriosa.
Con la ayuda de un embudo y gasa, o algodn hidrfilo, filtrar las muestras de
saliva obtenidas anteriormente, recogiendo el filtrado en la botella sealada al
efecto.
Mientras tiene lugar la filtracin, preparar una gradilla con 7 tubos de ensayo,
medianos, numerados. Depositar:
2 ml de la disolucin de almidn hervido al 1 % en cada uno de los tubos (lavar
bien la pipeta al acabar).
2 ml de agua destilada en los tubos numerados 1, 2, 3, 4 y 5.
2 ml de la disolucin de cido clorhdrico al 0,8 % en el tubo nmero 6.
2 ml de la disolucin de bicarbonato sdico al 0,5 % en el tubo nmero 7 de la
serie.
En un tubo aparte (tubo de ensayo grande), hervir una pequea cantidad de saliva,
dejndola enfriar despus hasta temperatura ambiente. Mientras se enfra la saliva

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

hervida, comprobar por medio de papel indicador el pH del contenido de los tubos
5, 6 y 7, previamente agitados, anotando los valores observados en una tabla.
Introducir el tubo 1 en el bao de agua y hielo, dejar el tubo 2 sobre la mesa del
laboratorio y colocar luego el resto de los tubos en un bao de agua a 37C.
Por medio de una pipeta Pasteur, aadir a los respectivos tubos 3 gotas de la
preparacin ( <<enzima>> )correspondiente, de acuerdo con el siguiente orden:
agua (tubo nmero 5), saliva hervida (tubo nmero 4) y saliva normal (tubos
nmeros 1, 2, 3, 6, y 7).
Anotar el momento en que se aade la disolucin de enzima a los distintos tubos.
Inmediatamente y a intervalos de 3 minutos, tomar una gota de cada una de las
muestras, empleando una pipeta Pasteur distinta para cada tubo, y colocarla sobre
una placa de porcelana; agregar una gota de la disolucin de lugol. En tanto que
exista almidn sin hidrolizar, las muestras se teirn de color azul negruzco; pero
cuando todo el almidn ha sido hidrolizado por completo, desaparece el color azul
(acromia) y se dice que la prueba es negativa. La prueba se continuar con cada
tubo hasta que resulte negativa en dos lecturas consecutivas o hasta que haya
transcurrido un tiempo total de 30 minutos.
Determinar el momento en que la prueba de lugol se hace negativa para cada tubo
y notar el tiempo transcurrido en cada caso. De esta forma se estima el tiempo
Invertido en la digestin del almidn, en las distintas condiciones.
Finalizada la prueba anterior, depositar unos 15 ml de la disolucin de Benedict en
cada uno de los tubos de ensayo grandes. Aadir a uno de los tubos 25 gotas de la
muestra 3 y al otro otras tantas de la muestra 5, Hervir la mezcla durante 2 minutos
y dejar enfriar lentamente.
La reaccin de Benedict detecta la presencia de azcares reductores, los cuales, en
medio alcalino, reducen los iones Cu++ del reactivo a iones Cu+, constituyndose
un precipitado de xido de cobre, que confiere a la mezcla un color verde,
anaranjado o rojizo de acuerdo con la cantidad de elemento reductor presente en la
muestra. Comprobar enseguida el resultado de la reaccin en cada caso, anotarlo en
una tabla y razonar las diferencias observadas.
Aadir al tubo en que la reaccin de Benedict ha resultado negativa 10 gotas de
disolucin de glucosa al 0,5 % y calentar de nuevo el tubo.
Anote sus Resultados:
Digestin Intestinal
A nivel del intestino delgado son digeridos los tres tipos de principios inmediatos,
dado que el medio intestinal contiene enzimas capaces de hidrolizar los oligo y
polisacridos, los lpidos y las protenas.
La lipasa es una enzima que desdobla los triglicridos en glicerol y cidos grasos.
La bilis no poseen propiedades enzimticas, pero contiene, en cambio las sales
biliares que son esenciales para la correcta digestin de las grasas. Las sales
biliares, debido a su elevado poder tensioactivo, permiten la emulsin de los
lpidos, con lo que se facilita la accin de la enzima. Por otra parte, las sales biliares
solubilizan los productos resultantes de la hidrlisis de los triglicridos, los cidos
grasos, evitando, de esta manera, que se acumulen en el lugar de la reaccin.
En un tubo de ensayo grande, marcado, depositar unos 8 ml de la disolucin de
pancreatina al 0,5 % (llenar hasta la seal); hervir la disolucin durante unos 3
minutos.

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

En una gradilla, preparar 6 tubos de ensayo medianos, de acuerdo con las


especificaciones. Colocar, en primer lugar, 5 ml de agua destilada en cada uno de
los tubos. A continuacin aadir el sustrato correspondiente:
Butirato de etilo a los tubos 1 y 2
Dispersin de tributirina al 0,5 % (agitar bien la mezcla antes de su uso) a los tubos
3, 4, 5 y 6.
Transferir 0,5 ml de la disolucin de bilis a los correspondientes tubos (tubos 5 y 6).
Los frascos deben ser cerrados inmediatamente, dado que tanto el butirato de etilo
como el cido butrico que se genera son sustancias muy boltiles. Adicionar dos
gotas del indicador y agitar bien los tubos; a continuacin colocar la disolucin de
enzima a cada uno de ellos empezando por la disolucin de pancreatina hervida
(tubos 2, 4 y 6) y siguiendo con la de pancreatina normal (tubos 1, 3 y 5).
Colocar todos los tubos en el bao de agua a 37C y cerrar los correspondientes a
los nmeros 1 y 2 con tapones de corcho.
Notar el agradable olor del butirato de etilo y comprarlo con el del cido butrico
puro, contenido en el tubo provisto de tapn de rosca. A medida que va progresando
la reaccin, notar los cambios producidos en el color de las muestras y en el olor
que desprenden los tubos. Anotar los cambios producidos en funcin del tiempo y
razonar las diferencias observadas entre los distintos tubos.
Anote sus Resultados:

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Prcticas de Fisiologa

FISIOLOGIA DEL SISTEMA DIGESTIVO


1.INTRODUCCION:
Todos los animales a excepcin de los endoparsitos, utilizan como fuente principal la
energa que obtienen de la descomposicin de molculas orgnicas complejas que
incorporan del exterior.
En los animales ms evolucionados el sistema digestivo realiza tres funciones bsicas:
motilidad, secrecin y absorcin.
Estas tres funciones bsicas no se manifiestan en todos los grupos zoolgicos de igual
forma. En los animales menos evolucionados la motilidad se limita al movimiento de cilios
que ayudan a la progresin del alimento como ocurre en los pelecpodos. En moluscos ms
evolucionados (gasterpodos y cefalpodos), al igual que en artrpodos y vertebrados, la
motilidad se debe a contracciones del msculo ms o menos diferenciados. A medida que
se avanza en la evolucin, la motilidad se hace un fenmeno cada vez ms generalizado del
tubo digestivo.
En cuanto al proceso de degradacin de los alimentos, muchos invertebrados lo realizan en
el interior de las clulas (digestin intracelular). En este caso las sustancias alimenticias
son incorporadas por fagocitosis o pinocitosis, y la degradacin ocurre en el interior de las
vacuolas digestivas, desde las cuales se incorporan al citoplasma, sin que se secreten hacia
el exterior enzimas digestivas; esto ocurre en protozoos, porferos, celenterados e incluso
en algunos invertebrados que poseen tubo digestivo diferenciado como pelecpodos y
gasterpodos.
Muchos animales desde los moluscos hasta los vertebrados realizan digestin extracelular.
En este caso, la degradacin qumica ocurre en la luz del tubo digestivo por la accin de
enzimas que las clulas de las paredes de este tubo son capaces de secretar. La aparicin de
la digestin extracelular est asociada a procesos de absorcin, por los cuales las sustancias
digeridas atraviesan las membranas de las paredes del tubo digestivo y mediante la sangre
son distribuidas a los tejidos corporales. El proceso de absorcin ocurre, en los animales
menos diferenciados, en las partes superiores del tracto, mientras que en los ms
evolucionados va quedando relegado a las partes ms posteriores.
2.0.

MATERIAL:
Reactivos:

Ringer
Solucin de acetilcolina a la 10-6 gr/L
Solucin de adrenalina 2 x 10-4 mol/L
Solucin de noradrenalina 2 x 10-4 mol/L

Equipo:
* Microscopio estereoscpico
Material Biolgico:
* Rattus rattus
3.0. METODOLOGIA:
Secreciones salivales:
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Prcticas de Fisiologa

Anestesiar la rata con un anestsico general.


Fijar el espcimen en la tabla de diseccin.
Realizar un corte en la regin media ventral de la mandbula, retirando la
piel y los msculos milo hioideos y genio hioideos
Canular los conductos de Stenon y Warton.
Evaluar la secrecin estimulando alternativamente con adrenalina,
acetilcolina y noradrenalina, en todos los casos por un tiempo de 5 minutos
Anote sus resultados:
Secrecin biliar
Anestesiar la rata con un anestsico general.
Fijar el espcimen en la tabla de diseccin.
Realizar un corte en la regin media abdominal, retirando la piel y los
msculos, hasta visualizar el hgado.
Canular el conducto cstico.
Evaluar la secrecin estimulando alternativamente con adrenalina,
acetilcolina y noradrenalina, en todos los casos por un tiempo de 5 minutos
Anote sus resultados:
Secrecin pancretica
Anestesiar la rata con un anestsico general.
Fijar el espcimen en la tabla de diseccin.
Realizar un corte en la regin media abdominal, retirando la piel y los
msculos, exponiendo el pncreas.
Canular los conductos de Wirson
Evaluar la secrecin estimulando alternativamente con adrenalina,
acetilcolina y noradrenalina, en todos los casos por un tiempo de 5 minutos
Anote sus resultados:
Secrecin gstrica
Anestesiar la rata con un anestsico general.
Fijar el espcimen en la tabla de diseccin.
Realizar un corte en la regin media abdominal, retirando la piel y los
msculos hasta exponer el estmago.
Canular a nivel del esfnter pilrico.
Evaluar la secrecin estimulando alternativamente con adrenalina,
acetilcolina y noradrenalina, en todos los casos por un tiempo de 5 minutos
Anote sus resultados:
Secrecin intestinal
Anestesiar la rata con un anestsico general.
Fijar el espcimen en la tabla de diseccin.
Realizar un corte en la regin media abdominal retirando la piel y los
msculos hasta exponer los intestinos.
Canular el segmento intestinal.
Evaluar la secrecin estimulando alternativamente con adrenalina,
acetilcolina y noradrenalina, en todos los casos por un tiempo de 5 minutos
Anote sus resultados:

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Prcticas de Fisiologa

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Prcticas de Fisiologa

VENTILACION PULMONAR
1.

INTRODUCCION
La energa necesaria para la actividad celular se obtiene en ltima instancia a travs
de la oxidacin de los alimentos, desempeando el oxgeno un papel esencial en este
proceso. Como resultado de la degradacin oxidativa de las sustancias nutritivas se libera
una serie de productos residuales, entre los que destacan, fundamentalmente, el bixido de
carbono y el agua. Cuando el consumo de O2 por parte de los tejidos aumenta, y se
incrementa paralelamente la produccin de CO 2 debe aumentar tambin la intensidad del
intercambio gaseoso pulmonar.
El aumento de actividad respiratoria en relacin con la intensidad del metabolismo
corporal exige un sistema de regulacin sensible y preciso para poder ajustar, en cada
instante, el contenido de la sangre a la demanda tisular. Nuestro organismo cuenta con
sistemas de deteccin y medida de los niveles de O 2 y H en sangre que, manteniendo
constantemente informados a los centros respiratorios, determinan una adaptacin de la
ventilacin pulmonar a las necesidades energticas de cada momento. Otros factores de
tipo qumico, como las catecolaminas, as como influencia de tipo nervioso contribuye
tambin a modular la frecuencia e intensidad de la ventilacin pulmonar.
Entre los factores reguladores de tipo qumico, el CO2 es el dotado de mayor poder
estimulante de la respiracin: un incremento de tan solo un 0,2 % en la concentracin de
CO2 del aire alveolar produce un aumento del 100 % en la ventilacin pulmonar. La
estimulacin por el bixido de carbono de los quimiorreceptores situados a nivel de la
aorta y de las cartidas y a nivel del bulbo raqudeo determina la realizacin de
movimientos respiratorios profundos encaminados a eliminar el exceso de CO2, con ello se
reduce la tasa de bixido de carbono en sangre y la respiracin vuelve a su ritmo basal.
Por otro lado, cualquier variacin en la concentracin de CO2 determina un cambio
en la concentracin de hidrogeniones y, por tanto, en el valor del pH de la sangre a travs
de la siguiente reaccin:
CO2 + H2O CO3H2 C3OH + H (H3O)
Los iones hidrgeno, procedentes de la disociacin del cido carbnico o de otros
productos metablicos, actan como un poderoso estimulante de la respiracin. Algunos
autores sugieren que el CO2 en realidad, estimulara los quimiorreceptores no directamente,
sino por medio de los hidrogeniones liberados a partir del cido carbnico formado al
reaccionar el bixido de carbono con el agua.
La reduccin en la concentracin de oxgeno, estimulando fundamentalmente los
quimiorreceptores articos y carotdeos, constituye otro activador de la respiracin, si bien
de potencia considerablemente inferior a la del bixido de carbono. Para conseguir un
aumento apreciable en la profundidad de los movimientos respiratorios, el porcentaje de
oxgeno en el aire inspirado debe reducirse desde su concentracin normal, alrededor del
20 % hasta un valor del 8 %
Los estmulos de tipo qumico no explican por si solos el aumento de ventilacin
pulmonar que se observa durante el ejercicio muscular por lo que debe admitirse que otros
factores, entre ellos los de tipo nervioso, contribuyen tambin a modular la actividad
respiratoria habitual. La estimulacin elctrica, rtmica, de los msculos de las
extremidades va seguida de un notable aumento de la frecuencia y de la profundidad de los
movimientos respiratorios, aun en ausencia de variaciones o cambios de tipo qumico. En

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Prcticas de Fisiologa

el hombre, la ventilacin pulmonar aumenta en un 40 %, principalmente a expensas de un


incremento en la frecuencia, cuando se movilizan pasivamente las piernas.
El efecto de los distintos factores que intervienen en la regulacin de la respiracin
se suma o se potencia mutuamente cooperando armnicamente para ajustar en cada
momento, la ventilacin pulmonar a los requerimientos funcionales del organismo.
2.

3.

MATERIAL
Sistema para respiracin en circuito cerrado.
Disolucin saturada de hidrxido clcico.
Acido clorhdrico concentrado.
Centrfuga.
Tubos para centrfuga
Pipetas Pasteur
Perillas de goma
Espirmetro
Espirogramas
PROCEDIMIENTO
Efecto del CO2 y del O2 sobre la Respiracin.
Uno de los componentes de la mesa acta como sujeto de experimentacin
respirando a travs de la boquilla correspondiente al extremo proximal del
dispositivo, al mismo tiempo que se mantiene abierto, el extremo distal del circuito
areo experimental desconectado el tapn del frasco de vidrio la boquilla se sujeta
con los dientes manteniendo la boca cerrada al mismo tiempo se impide el paso de
aire a travs de las coanas nasales por medio del pinzamiento de la abertura nasal
con los dedos pulgar e ndice o con unas pinzas de goma, durante la inspiracin el
aire penetra a travs de una de las vlvulas mientras que el efecto de succin
mantiene cerrado la otra vlvula, al espirar, el aire sale a travs de la vlvula que a
permanecido cerrada, durante la fase inspiratoria puesto que es la nica capaz de
abrirse hacia fuera en respuesta al aumento de presin, esta prueba se realiza entre
fases o condiciones distintas

1. Respiracin en circuito abierto.


En estas condiciones y con el sujeto sentado y desnudo de cintura para arriba
determinar la frecuencia respiratoria por espacio de dos minutos, cuente el nmero
de respiraciones por minuto y estimar la profundidad de los movimientos
respiratorios realizados fijarse en los desplazamientos que experimenta la bolsa de
plstico anotar los valores observados en una tabla.
Resultados:

2. Respiracin en Circuito cerrado.

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Prcticas de Fisiologa

Con acumulo de CO2. Repetir la observacin conectando el extremo distal del


circuito al frasco de vidrio en estas condiciones el sujeto respira en un sistema
cerrado donde el paso que se reduce la concentracin de O 2 aumenta
progresivamente la proporcin de CO2 resultante de la actividad metablica del
organismo en general. Determinar la frecuencia respiratoria y determinar la
profundidad de la respiracin. Observar el color de la piel y la secrecin sudorpara
y determinar el tiempo mximo que el compaero puede respirar en el sistema
cerrado. Anotar los valores observados en una tabla.
Resultados:
3. Respiracin en circuito cerrado, sin acumulo de CO2.Descansar durante unos minutos hasta que la frecuencia respiratoria vuelva a su
nivel normal. Depositar unos 100 ml de agua de cal en el fondo del frasco de
vidrio y proceder a una tercera observacin con el sujeto respirando en un sistema
cerrado desprovisto ahora de CO2, (absorbido por combinacin con el Ca (OH)2 del
agua de cal ). Determinar la frecuencia respiratoria por espacio de dos minutos,
estimando al propio tiempo la profundidad de la respiracin, y anotar los valores
obtenidos en una tabla.
Resultados:
ESPIROMETRIA
El espirmetro es un aparato que permite medir volmenes respiratorios as como
determinar el consumo de oxgeno. El sujeto respira a travs de la cavidad bucal en un
sistema cerrado constituido esencialmente por un cilindro o campana, llena de aire o de
oxgeno, que se desliza de manera telescpica en el interior de otro cilindro lleno de agua.
Dentro del dispositivo as constituido se coloca un recipiente con hidrxido brico u otro
tipo de sustancia capaz de absorber el CO2. Un sistema de vlvulas obliga al aire espirado a
pasar a travs del absorbente, al paso que permite la captacin de oxgeno por parte del
sujeto cuando ste realiza una inspiracin. Con cada movimiento respiratorio, la campana o
cilindro que contiene la mezcla gaseosa oscila en sentido vertical. A medida que el sujeto
va respirando, se reduce el volumen de oxgeno y el nivel del cilindro mvil desciende
rpidamente, debido a que el bixido de carbono del aire espirado es eliminado
inmediatamente por combinacin con el absorbente.
Un sistema de inscripcin permite el registro, sobre un quimgrafo o una cinta
mvil, de los movimientos respiratorios realizados. En general, la resistencia del aparato es
mnima y, en condiciones ideales, no afecta el flujo areo ni los volmenes medidos.
En la determinacin de volmenes respiratorios o cuando se realizan pruebas de corta
duracin es preferible emplear aire en lugar de oxgeno, puesto que el oxgeno puro
deprime la ventilacin pulmonar. En los pasos en que se determina el consumo de oxgeno
se realizan pruebas de cierta duracin, el espirmetro se llena de oxgeno.
El sujeto que se somete a la exploracin espiromtrica debe sujetar bien, la boquilla
del espirmetro con los dientes, por medio de una pinza colocada en la nariz se impide la
respiracin por va nasal; de esta manera, el flujo areo tiene lugar solo por la boca y a
travs del circuito cerrado del espirmetro.
Realizar un registro en condiciones basales y, seguidamente registre el volumen de
reserva inspiratorio y el volumen de reserva expiratorio. Sobre los registros realizados o
sobre otros pre elaborados, determinar los siguientes parmetros:

Frecuencia respiratoria

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Prcticas de Fisiologa

Volumen corriente

Capacidad vital

Volumen minuto

Volumen de reserva inspiratorio

Influencia de tipo Reflejo Sobre la Respiracin.


La movilizacin pasiva de las extremidades determina un aumento reflejo de la
ventilacin pulmonar fundamentalmente a expensas de la frecuencia respiratoria. Los
impulsos que inician la respuesta refleja parecen originarse en mecanorreceptores situados
a nivel de la cpsula y de los ligamentos articulares. La estimulacin de dichos receptores
en respuesta al movimiento de la extremidad determina un incremento inmediato de la
frecuencia respiratoria, mucho antes de que los factores de tipo qumico se acumulen en
cantidad suficiente y lleguen a estimular a los quimiorreceptores correspondientes.
Los mecanorreceptores perciben la extensin y frecuencia de los movimientos realizados,
pero no pueden detectar la fuerza con que estos se llevan a cabo.
Para comprobar el efecto de la estimulacin pasiva de los mecanorreceptores sobre
la respiracin, uno de los compaeros se sienta sobre la mesa con las piernas colgando en
su reborde. A continuacin se le hace respirar tranquilamente a travs del espirmetro,
registrando la frecuencia e intensidad de los movimientos respiratorios; esperar a que, en
estas condiciones con la frecuencia respiratoria alcance valores estables. A continuacin,
movilizar pasivamente la extremidad inferior practicando una extensin de la pierna sobre
el muslo y determinar la frecuencia e intensidad de los movimientos respiratorios, en estas
condiciones, es aconsejable que a la movilizacin pasiva se realice con una periodicidad no
superior a la mitad de la frecuencia respiratoria habitual.
Anote sus resultados:
RESPIRACION ARTIFICIAL.
Cuando, en determinadas circunstancias, se produce un paro respiratorio es
absolutamente necesario instaurar una serie de medidas encaminadas a garantizar el
adecuado intercambio gaseoso pulmonar: La asfixia completa de duracin superior a 5
minutos determina la produccin de lesiones cerebrales irreversibles (excepto en el caso
del recin nacido), por lo que en casos de apneas debe restaurarse de forma inmediata la
ventilacin pulmonar. Simultneamente y con idntica rapidez, debe corregirse cualquier
fallo que aparezca, de manera paralela, en el sistema cardiovascular ya sea debido a un
paro cardiaco o a grave hipotensin; es evidente que, si la sangre no llega a los tejidos, de
nada sirve intentar su buena oxigenacin a nivel del lecho capilar pulmonar.
Entre las circunstancias en las que se requiere la prctica de la respiracin artificial
destacan el caso de los ahogados, el, de los individuos que han sufrido una descarga
elctrica (paro cardiaco y respiratorio), el de los pacientes que han ingerido una sobre dosis
de narcticos (bloqueo o anestesia de los centros respiratorios) y el de aquellas que han
inhalado gases txicos o no respirables.
Si bien hoy en da se dispone de aparatos, denominados respiradores, que permiten
asistir, e incluso sustituir, la mecnica respiratoria del paciente, el bilogo o mdico debe
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Prcticas de Fisiologa

estar capacitado para, en situaciones de emergencia, poder practicar la respiracin artificial


por medios manuales.
Entre las diversas variantes de respiracin artificial el mtodo de eleccin es el
denominado de boca a boca, que se describe a continuacin. En la respiracin boca a boca,
como en cualquiera de las otras variantes de respiracin artificial, debe asegurarse el libre
paso del aire a travs de las vas areas, eliminando cualquier tipo de obstruccin que
pueda presentarse. La obstruccin de las vas areas es habitual en el paciente apneico,
inconsciente, debido a la relajacin de las partes blandas de la faringe y la cada de la base
de la lengua hacia atrs. Este tipo de bloqueo se corrige colocando el cuello del paciente en
hiperextensin y deprimiendo al propio tiempo la mandbula inferior, con lo que la base de
la lengua se mantiene separada de la pared farngea posterior. Por otra parte, por medio de
los dedos conviene limpiar la cavidad bucal de las secreciones mucosas, o de las masas
arrastradas por los movimientos del vmito, que pudieran encontrarse en ella.
Para practicar la respiracin artificial, es necesario, en primer lugar, cerrar o
bloquear las aberturas nasales por medio de pinzamiento con los dedos pulgar e ndice de
una mano. A continuacin, abrir los ms ampliamente posible la boca y colocarla sobre la
del paciente de manera que los labios ajusten hermticamente sobre la piel para evitar que
el aire escape a travs de la zona de contacto. Como alternativa, puede reducirse a cerrar la
boca del paciente con la mano practicando la respiracin a travs de la nariz. Si no se desea
entrar en contacto fsico con el paciente puede practicarse la respiracin a travs de un
pao, o gasa, colocando sobre la boca o, en su caso, la nariz.
Insuflar el aire en el aparato respiratorio del paciente y observar si la caja torcica
se expande de manera satisfactoria. En el caso de que la pared torcica no se distienda en
respuesta a la inyeccin de aire, hay que pensar en la presencia de algn obstculo al paso
del aire que debe ser corregido inmediatamente. Comprobar si la cabeza y mandbula
inferior est en posicin correcta y repetir la maniobra; si aun as contina sin observarse el
paso del aire, colocar rpidamente al paciente de lado y golpear repetidamente su espalda
entre ambos omplatos con objeto de conseguir la liberacin de alguna sustancia extraa
atrapada a nivel de las vas respiratorias altas. Asimismo comprobar que no existe
secreciones o masas alimenticias a nivel de la cavidad bucal. Si la distensin torcica es
adecuada, se retira la boca y se gira la cabeza a un lado para inspirar al mismo tiempo que
se intenta percibir si sale aire a travs de la boca del paciente, indicativo de una espiracin
pasiva por parte de ste.
Este tipo de insuflacin intermitente se contina a un ritmo de 12 15 respiraciones
por minuto en el adulto hasta que el paciente empiece a respirar por s mismo. La cantidad
de aire inyectado en el aparato respiratorio de la vctima en cada ciclo debe ser
aproximadamente el doble de la correspondiente al volumen corriente, Si se trata de un
nio, se realizan movimientos respiratorios menos profundos (apropiados al tamao del
individuo) y de frecuencia ligeramente superior (alrededor de 20 por minuto).
En el caso de que, despus de unos minutos de practicar la respiracin artificial, el
color de la piel del paciente no mejore es necesario revisar el estado del sistema
cardiovascular. Un pulso casi imperceptible y unas pupilas dilatadas indican una
circulacin inadecuada y exigen la inmediata aplicacin de masaje cardiaco externo. Para
ello se comprime la parte baja del esternn a nivel del V espacio intercostal ejerciendo
presin con la palma de la mano de manera que la pared torcica se deprime unos 3 5 cm.
Esta maniobra, repetida aproximadamente cada segundo, permite conseguir una
circulacin sangunea adecuada para la fase crtica.

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

MIOCARDIO
1.
INTRODUCCION:
La circulacin de la sangre cumple diversas funciones, entre las que destaca el transporte
de oxgeno, de sustancias nutritivas y de los elementos hacia los tejidos; a su vez, sirve de
medio para eliminar los residuos metablicos celulares a travs de los rganos de
excrecin. La sangre, por medio de su capacidad fagoctica e inmunitaria, protege el
organismo frente a las infecciones. Finalmente, en los animales de sangre caliente, la
circulacin sangunea contribuye a regular la temperatura corporal.
El aparato circulatorio est constituido, en los vertebrados, por un sistema tubular cerrado a
lo largo del cual se desplaza continuamente la sangre. La fuerza que propulsa la sangre a
travs de dicho sistema es la enrgica contraccin de los ventrculos, que funcionan como
una doble bomba impelente. La elasticidad de las arterias, junto con las variaciones en su
calibre y la accin de los msculos que rodean los vasos sanguneos constituyen tambin
dispositivos hidrostticos importantes.
El corazn est constituido por dos bombas, de carcter muscular, conectadas en serie.
Dichas bombas, que se contraen rtmica y con un volumen de expulsin ajustable a las
distintas situaciones fisiolgicas, corresponden a: 1) el ventrculo derecho, que propulsa la
sangre hacia los pulmones donde se produce el intercambio de gases entre aqulla y el
medio externo (circulacin pulmonar o menor y 2) el ventrculo izquierdo, encargado de
impulsar la sangre que irriga todos los tejidos del organismo (circulacin sistemtica o
mayor). Un ajustado sistema de vlvulas determina el flujo unidireccional de la sangre a
travs del corazn.
La accin de bombeo por parte del corazn es intermitente, pero incesante.
El corazn se contrae -y relaja- unas 100.000 veces cada da, desplazando ms de 10.000
litros de sangre a travs de un circuito de casi 100.000 kilmetros, constituido por las
arterias, arteriolas, capilares, vnulas y venas de nuestro organismo.
La eficiencia del corazn como bomba depende de la correcta sucesin de fenmenos de
excitacin, contraccin y relajacin que se producen, de manera ordenada y coordenada,
primero en las aurculas y luego en los ventrculos.
El msculo cardaco est dotado de las propiedades del automatismo, ritmicidad,
conductibilidad (dromotropismo) y contractilidad (inotropismo).
Estas propiedades estn desarrolladas en grado diverso en las distintas estructuras del
miocardio. El ndulo sinusal es, entre las estructuras de tipo marcapaso, la que ha
desarrollado al mximo la capacidad de la autorritmicidad. Las fibras, o red, de HisPurkinje son especialmente aptas para la conduccin rpida de los impulsos. Las fibras
musculares -fibras miocrdias ordinarias- poseen la mxima capacidad contrctil, con una
capacidad de conduccin considerablemente inferior a las del sistema de His-Purkinje y
carentes de la propiedad del automatismo.
El estmulo que pone en marcha el corazn -marcapaso- se origina en la zona donde
confluye la vena cava superior con la aurcula derecha. En las aves y mamferos, esta zona
corresponde a una parte del sistema de excitacin, que recibe el nombre de ndulo sinusal
o de Keith y Flack. En los anfibios y reptiles, dicho marcapaso constituye una cavidad
venosa pulstil, el seno venoso, situada inmediatamente antes de la aurcula.
La actividad rtmica, intermitente, del marcapaso, es debida al parecer, a una reduccin
progresiva en la conductancia para los iones potasio, que presenta la membrana de sus
clulas constituyentes. Las clulas ordinarias -contando entre ellas los nervios y las fibras
musculares- son capaces de originar y de conducir impulsos en respuesta a un estmulo
externo; si ste es adecuado, tiene lugar una entrada masiva de Na+ en el interior de la
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

clula, con lo que se invierte la polaridad de la membrana, quedando su parte exterior


cargada negativamente con respecto a la parte interna. Una vez recuperada, la membrana
celular alcanza su valor de potencial de reposo, estable. Las clulas marcapaso, en cambio,
muestra un vapor de potencial de reposo que disminuye lenta, pero progresivamente, con el
tiempo (potencial diastlico inestable) experimentado, aun en ausencia de estmulos, una
despolarizacin espontnea y generando, de manera rtmica y automtica, impulsos que,
conducidos a todo el miocardio, determina la frecuencia con que se contrae el corazn.
Pero el normal funcionamiento del corazn es necesario, entre otros factores, mantener una
concentracin adecuada de iones en el medio que rodea las clulas. Este hecho, reconocido
ya por Ringer a finales del siglo pasado, obliga a que el lquido empleado para nutrir las
clulas del miocardio deba contener en la debida proporcin iones Na +, Ca++, Cl-, CO3H-,
para mantener en forma correcta su normal actividad.
2.
MATERIAL:
Corazn de cerdo
Bandeja de plstico
Equipo de diseccin
Regla de plstico, milimetrada
Rana
Tabla de corcho
Bao de agua
Placa Petri
Disolucin de Ringer
Disolucin de cloruro potsico al 1%
Disolucin de cloruro clcico al 1%
Disolucin de cloruro sdico al 1%
I.
Estructura macroscpica del corazn
En la primera parte de esta prctica se procede a examinar un corazn de cerdo para
estudiar su estructura macroscpica, la localizacin y distribucin de los marcapasos y del
sistema especfico de conduccin del miocardio y, por ltimo, la disposicin de las
vlvulas que delimitan las diferentes cmaras y determinan el sentido de la corriente.
PROCEDIMIENTO:
Colocar el corazn en la bandeja con la punta del rgano, el pex, dirigida hacia el
observador; el extremo opuesto constituye la base del corazn. Sobre el eje formado por el
pex y la base, girar el corazn hasta localizar un acumulo de grasa dispuesto en diagonal
sobre la superficie ventricular. Por debajo de dicha masa corren los vasos coronarios
encargados de la irrigacin del miocardio; constituye, adems, la demarcacin superficial
que delimita el ventrculo derecho del izquierdo. Comprobar la consistencia de la pared a
ambos lados. Se aprecia alguna diferencia?
En la base del corazn, y sobresaliendo un poco por delante de los ventrculos se observan
unas estructuras que remedan un tanto unas aletas; son las orejuelas que forman parte de
las cmaras denominadas aurculas. A nivel de la base se encuentran tambin los vasos
sanguneos que entran o salen del corazn. Introducir las pinzas de diseccin a travs de la
vena cava superior(anterior) y de la vena cava inferior (posterior) y observar en qu
cavidad desembocan. Comprobar el calibre y la consistencia de la pared de las grandes
venas que confluyen a nivel de la aurcula derecha. Dar la vuelta a la pieza y examinar la
parte posterior del corazn. Localizar las venas pulmonares; introducir una pinza a travs
de ellas y determinar en qu cmara desembocan.
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Colocar de nuevo el corazn en la posicin inicial. Localizar la arteria pulmonar y


determinar de qu cavidad sale; precisar el dimetro del vaso y anotar la consistencia de
sus paredes. Localizar la arteria aorta, determinar su lugar de origen y precisar el calibre
del vaso, anotar la consistencia de sus paredes, comparndola con la de las paredes de la
arteria pulmonar.
Comenzando a nivel de la vena cava superior, practicar una incisin a lo largo del borde
derecho de la aurcula y del ventrculo derechos. Eliminar los cogulos que puedan
encontrarse en el interior de las cavidades. Observar los siguientes detalles:
1.
Ausencia de vlvulas a nivel de la desembocadura de las venas.
2.
Grosor de la pared auricular.
3.
El tabique interauricular.
4.
Disposicin y orientacin de las valvas que constituyen la vlvula tricspide.
5.
Las estructuras tendinosas unidas a las valvas y conectasdas, por otra parte, a los
msculos papilares. Cuntos msculos papilares hay?
A continuacin, practicar una incisin a nivel del borde izquierdo de una vena pulmonar
que se prolonga lo largo de la aurcula y del borde externo del ventrculo izquierdo hasta
llegar a la punta del corazn; alcanzando dicho punto, proseguir la incisin en sentido
ascendente y en direccin a la aorta.
De esta manera se obtiene un corte en forma de U que permite examinar con comodidad la
disposicin interna del corazn izquierdo. Examinar las siguientes estructuas:
1.
Ausencia de vlvulas a nivel de las venas pulmonares.
2.
Grosor de la pared auricular.
3.
Disposicin y orientacin de las valvas que constituyen la vlvula mitral.
4.
Grosor de la pared ventricular; compararla con la del lado derecho.
5.
Disposicin y orientacin de las vlvulas semilunares a nivel de la salida de la
aorta.
6.
Apreciar la relacin entre las vlvulas semilunares articas y el velo septal de la
vlvula mitral.
Comprobar tambin la consistencia que presenta la pared de la aorta y compararla con la
de la arteria pulmonar.
Esquematice sus observaciones:
II.
Corazn de rana
El corazn de rana, a diferencia del de los mamferos, posee solamente tres cmaras; dos
aurculas y un ventrculo. La sangre venosa procedente de la circulacin perifrica es
vertida, por medio de las venas cavas, al denominado seno venoso que comunica
directamente con la aurcula derecha. La sangre oxigenada, procedente de los pulmones, es
vertida a la aurcula izquierda a travs de las venas pulmonares. El seno venoso y la
aurcula derecha o donde llega solamente sangre venosa, muestran un color ms oscuro que
la aurcula izquierda, a donde fluye la sangre bien oxigenada.
En la rana, los impulsos se originan a nivel del seno venoso, donde se encuentra el
marcapaso habitual, propagndose luego al resto del corazn. En primer lugar, se contraen
las dos aurculas y despus el ventrculo que propulsa la sangre hacia el denominado cono
arterial que se divide enseguida en dos grandes troncos arteriales, la aorta derecha y la
aorta izquierda. Debido a que en el ventrculo se mezcla sangre arterial y sangre venosa, el
corazn impulsa a la periferia sangre slo parcialmente oxigenada.
En la figura 22 a 24 se muestran las estructuras ms importantes del corazn de rana y la
disposicin general del aparato circulatorio en los anfibios.

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

En esta segunda parte, se pretende poner de manifiesto algunos de los aspectos funcionales
ms destacados del corazn y las variaciones experimentadas en respuestas a diversos
agentes.
PROCEDIMIENTO:
Sujetando al animal por sus extremidades posteriores, se procede a decapitar la rana. A
continuacin se introduce una aguja o un alambre en el conducto raqudeo con objeto de
destruir la mdula espinal. Se coloca la rana sobre la tabla de corcho de manera que la
superficie ventral del animal quede en la parte superior; sujetar las patas a la tabla por
medio de sendos alfileres.
Por medio de pinzas finas, levantar la piel del abdomen y practicar un corte en la lnea
media, prolongndolo hasta la caja torcica. Levantar la parte correspondiente al apndice
xifoides y seccionar la pared a ambos lados del esternn dirigiendo la incisin hacia arriba
y ligeramente hacia afuera. Seccionar ambas clavculas y doblar sobre ellas el patrn o
bloque esternal obtenido.
Completada la operacin descrita, se percibe enseguida el corazn que late envuelto en el
pericardio. Con cuidado practicar una pequea abertura a nivel de dicha envoltura y
completarla luego de manera que se extienda, desde la punta hasta la base del corazn.
Descubierto el corazn, reclinar el ventrculo con las pinzas de manera que la punta quede
hacia arriba. Humedecer el rgano con una pequea cantidad de lquido de Ringer. Por
medio de un pequeo ancho o anzuelo, clavado sobre la punta del corazn, y conectado a
travs de un hilo a un sistema de palanca, observar el ritmo y la fuerza con que se contrae
el corazn.
Identificar las aurculas y el ventrculo y observar la sucesin rtmica de fenmenos que
constituyen el ciclo cardaco; anotar los cambios alternantes de color que presentan las
distintas estructuras.
Determinar la frecuencia cardaca contando el nmero de contracciones que realiza el
corazn durante 1 minuto. Comparar la frecuencia observada en la rana con la del hombre.
Efecto de la temperatura
Como ocurre con cualquier tipo celular, la actividad metablica del corazn depende de la
temperatura. Los cambios en el automatismo son, entre todas las propiedades funcionales,
los que reflejan de una manera ms evidente los efectos de variaciones en la temperatura
sobre la actividad del corazn.
Empleando un cuentagotas aadir lquido de Ringer mantenido a 0 C a la preparacin:
comprobar la frecuencia cardaca y anotar el valor obtenido en la tabla adjunta. Dejar que
la temperatura del corazn se equilibre con la del ambiente y determinar de nuevo la
frecuencia cardaca. A continuacin, depositar sobre el preparado disolucin de Ringer
mantenida a 27 C; observar la frecuencia cardaca y anotar los resultados:
Efecto de variaciones en la composicin inica
El funcionamiento del miocardio depende de la concentracin de iones presentes en el
medio que baa las clulas. La proporcin para iones de calcio, potasio y sodio en el medio
extracelular contribuye, de manera especial, a modular la actividad del corazn.
Reemplazar el lquido de Ringer que baa el corazn por una disolucin de cloruro
potsico al 1%, observar y anotar la frecuencia con que se contrae.
A continuacin sustituir la disolucin de cloruro potsico por otra de cloruro clcico al 1%.
Tan pronto como se aprecie un cambio evidente en el ritmo de contraccin, reemplazar la
disolucin de cloruro clcico por lquido de Ringer.
Si el lquido de Ringer se reemplaza por una disolucin de cloruro sdico al 0.7% se
observa que el rgano acaba por no contraerse. Al aadir a dicha disolucin cloruro clcico
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

al 1% aparecen de nuevo las contracciones que van siendo cada vez ms intensas y
prolongadas hasta que el corazn se detiene en sstole. Por ltimo, si se reemplaza la
disolucin de cloruro clcico por otra de cloruro potsico vuelve a latir, de manera
espontnea o en respuesta a estmulos externos, hasta que finalmente se para tambin,
ahora en distole.
El corazn presenta la propiedad de iniciar por s mismo los impulsos que determina la
contraccin de los diversos elementos que constituyen el rgano en conjunto; est dotado
de la propiedad del automatismo. El corazn totalmente separado del animal y colocado en
un medio salino adecuado contina contrayndose durante cierto perodo de tiempo.
Para aislar el corazn de rana, basta con seccionar los vasos sanguneos que entran y salen
del corazn. La seccin debe practicarse aproximadamente a 1 cm de distancia del rgano
procurando no lesionar ninguna de las estructuras, especialmente el seno venoso.
Una vez aislado, colocar el corazn sobre una cpsula de Petri que contiene lquido de
Ringer. Esperar unos minutos a que se recupere el rgano y determinar la frecuencia
cardaca en estas condiciones.
Colocar el corazn de tal manera que el seno venoso quede situado en la parte superior de
la preparacin. Por medio de unas tijeras finas, seccionar a nivel del lmite de separacin
entre el seno venoso y aurcula; esperar unos minutos, y observar la frecuencia de
contraccin que presentan ambas partes por separado. Anote sus observaciones:

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Prcticas de Fisiologa

PRESION ARTERIAL
INTRODUCCION.
La presin arterial puede ser definida como la fuerza ejercida por la sangre sobre la pared
de las arterias. La presin arterial vara continuamente a lo largo del ciclo cardiaco, el
mximo valor de presin arterial se alcanza durante el periodo de expulsin sisttica y el
mnimo, al final del periodo de distole; al primero se le da el nombre de presin sistlica o
mxima y al segundo el de presin diastlica o mnima. Una lectura tpica de presin
arterial se expresa, por ejemplo, de la siguiente manera: 120/80 mmHg. La diferencia
numrica de los valores de la presin sistlica y de la presin diastlica constituye la
presin del pulso o presin diferencial. La presin arterial media aritmtica de los valores
de las presiones sistlica y diastlica. La presin arterial media funcional es mucho ms
difcil de determinar correctamente debido a la distinta duracin de los perodos de sstole
y de distole. La presin arterial media funcional , que determina el grado de irrigacin o
perfusin perifrica, puede estimarse con una aproximacin aceptable por medio de la
frmula:
P media funcional=Ps+2Pd/3
Donde Ps corresponde al valor de la presin sistlica y Pd, al de la presin diastlica. Un
individuo con unas cifras de presin arterial de 120/80 posee una presin arterial media de
100 y una presin arterial media funcional de 93.
La presin arterial depende de interaccin de una serie de factores integrados y
coordinados a travs del sistema nervioso central. Entre ellos debemos citar los siguientes:
volumen minuto, resistencia vascular perifrica, volumen de sangre circulante, viscosidad
de la sangre y elasticidad de las paredes arteriales. De todos ellos, los ms importantes para
la regularizacin de la presin arterial son las variaciones en los dos primeros.
MEDICION DE LA PRESION ERTERIAL.
En el hombre, la presin arterial se determina de manera indirecta por medio de un aparato
denominado esfingomanmetro. Cualquier tipo de esfingomanmetro est constituido por
los siguientes elementos:
- Un manguito de compresin constituido por una bolsa hinchable situado en el interior
de una cubierta no distensible.
- Una fuente de presin constituida habitualmente por una perilla de goma y una vlvula
de control que permite regular la presin ejercida por el manguito sobre la arteria.
- Un manmetro que seala la presin ejercida por el manguito de compresin.
Esfingomanmetro de Mercurio.- En este tipo, el manmetro est constituido por un
tubo de cristal en forma de U en el interior del cual se encuentra una cierta cantidad de
mercurio. En general, una de las ramas de la U es mucho ms corta y ancha que la otra,
de manera que, en realidad el conjunto se asemeja ms a una L que a una U.
La rama ancha y corta constituye la cmara de presin y comunica directamente con el
manguito de compresin a travs de un tubo de goma.
En reposo el nivel del mercurio, sometido al mismo efecto gravitatorio, es idntico en
ambas ramas. Por el contrario, cuando el nivel de compresin del manguito aumenta, se
incrementa tambin la presin ejercida sobre el mercurio contenido en el reservorio o
rama ancha, donde el nivel del liquido desciende a la ves que aumenta el de la
columna liquida contenida en la rama estrecha corresponde al valor de la presin
ejercida por el manguito sobre la arteria.
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Prcticas de Fisiologa

Los elementos esenciales son, en este caso, una serie de cpsulas metlicas cuyo
interior est conectado al manguito de compresin. Las variaciones de presin del
sistema determina una mayor o menor expansin de las paredes de las cpsulas, lo que
a su vez, provoca el desplazamiento de una aguja indicadora sobre un dial calibrado.
OBJETIVOS:
1. Esta practica tiene por objetivo primordial iniciarse en los procedimientos de medida
de la presin arterial, comprobando las limitaciones y ventajas de cada uno de los
mtodos empleados y verificando los distintos factores que deben ser tenidos en cuenta
para realizar una correcta medicin.
2. En segundo lugar, pretende poner de relieve algunos de los factores que modifican los
valores obtenidos en condiciones basales y que influyen sobre los complejos sistemas
responsables de la regulacin de la presin arterial.
PROCEDIMIENTO:
La presin arterial se mide habitualmente a nivel de la arteria humeral, estando el sujeto de
cubito espino. La mesa de exploracin debe disponerse de tal manera que el registro pueda
realizar sobre uno de los brazos. El brazo debe estar en abduccin, ligeramente flexionado
y descansado sobre una superficie regular. El punto donde se aplica el manguito del
esfingomanmetro debe estar situado al mismo nivel que el corazn; en cambio, no es
necesario que el aparato de registro est situado al mismo nivel que la bomba cardiaca.
El manguito, completamente desinflado, se coloca alrededor del brazo de manera que la
parte que contiene la bolsa hinchable de caucho ocupe la cara anterointerna del brazo. El
mangito debe ajustarse al brazo de manera uniforme, aunque sin apretar, y con su borde
inferior a unos 3-5 cm de espacio antecubital.
METODO PALPATORIO (Riva Rocci)
Palpar la arteria radial y determinar la frecuencia y ritmo del pulso. A continuacin insuflar
aire en el manguito hasta que la presin en su interior alcance los 170-180 mmHg o, en
general un valor de 30 mm de mercurio superior a aquel en el que se observa la
desaparaicin del pulso. Abrir ligeramente la vlvula y dejar escapar gradualmente el aire
contenido en el manguito de manera que la presin en su interior a un ritmo de 2 a 3
mmHg por cada latido cardiaco. En el momento en que se percibe la primera pulsacin a
nivel de la arteria radial, se observa el valor de la presin sistlica o mxima.(reducir la
presin hasta cero con objeto de evitar la congestin del antebrazo y de la mano). El
mtodo palpatorio no es adecuado para determinar la presin diastlica o mnima. Anote
sus Observaciones:
METODO AUSCULTATORIO (Korotkow)
Por palpacin localizar la arteria humeral por encima del pliegue del codo; sobre el punto
as identificarlo y aplicar la membrana del estetoscopio que deber mantenerse en posicin
de la manera ms ajustada posible. La membrana del estetoscopio no debe estar en
contacto con el manguito de compresin ni con el vestido del sujeto. Insuflar aire en el
manguito de compresin hasta que la presin en su interior. Anote sus Observaciones:

ELECTROCARDIOGRAMA
INTRODUCCION:
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Prcticas de Fisiologa

El corazn est dotado de la propiedad del automatismo, es decir, es capaz de originar por
s mismo el estmulo necesario para su propia contraccin. La propagacin de la onda de
excitacin a travs de las distintas estructuras cardacas va acompaada de variaciones en
el potencial elctrico de sus clulas constituyentes. Los cambios de potencial elctrico
producidos en la membrana celular pueden ser detectados a nivel de la superficie corporal
por medio de un galvanmetro adecuado. De esta manera, se observa una serie de
deflexiones o variaciones elctricas que reflejan la resultante de los cambios de potencial
experimentados, en el transcurso del tiempo, por las distintas clulas a lo largo de los
sucesivos puntos de excitacin. El registro de dichas variaciones de potencial constituye el
electrocardiograma (ECG).
OBJETIVOS
El registro de la actividad elctrica del corazn constituye un proceso relativamente
sencillo; sin embargo, la interpretacin correcta de los registros obtenidos requiere un
grado de conocimientos considerable acerca de la fisiologa y fisiopatologa del sistema
cardiovascular. Esta prctica pretende servir de introduccin a las tcnicas empleadas para
conseguir el registro electrocardiogrfico y de inicio en la interpretacin de los patrones
obtenidos a nivel de las derivaciones empleadas habitualmente en la clnica humana.
MATERIAL
Polgrafo equipado con osciloscopio
Electrodos de extremidades
Electrodo para derivaciones precordiales
Gel conductor
Trazado electrocardiogrficos obtenidos sobre papel.
PROCEDIMIENTO:
Examinar el aparato de registro y observar los diferentes controles de que est provisto. Si
bien la apariencia cambia de un tipo de aparato a otro, todos los electrocardigrafos poseen
los siguientes elementos comunes:
1.
Un selector de derivaciones que permite, a voluntad, observar o registrar las
derivaciones habituales. En el aparato que hay que utilizar, el selector puede pasar por las
posiciones 1(DI), 2(DII), 3(DIII), aVF, aVL, aVR y V (aparte de otras de las cuales
prescindimos en esta prctica).
2.
Un sistema de compensacin (balance) por medio del cual se pueden atenuar
potenciales no deseados.
3.
Un sistema de referencia (standardize) que permite introducir pulsos de 1 mV en el
sistema electrnico del aparato.
4.
Un sistema de amplificacin (gain) por medio del cual la deflexin originada por
un potencial de 1 mV se ajusta de tal manera que alcance 1 cm de altura.
En los electrocardigrafos clnicos, las deflexiones producidas se registran directamente
sobre papel milimetrado que se desplaza a una velocidad prefijada, constante. El aparato
empleado en sta prctica permite, adems, observar las deflexiones sobre una pantalla
fluorescente por medio de un sistema muy parecido al empleado en los sistemas de
televisin.
Uno de los compaeros acta como sujeto de experimentacin. La persona sujeta a
exploracin electrocardiogrfica debe permanecer en posicin de decbito supino y en
completo reposo.
Colocar un electrodo en cada una de las cuatro extremidades, a nivel de la mueca en los
brazos y un poco por encima del tobillo en las extremidades inferiores. Cada electrodo
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Prcticas de Fisiologa

consiste en una placa metlica (de 4,5 cm x 6 cm aproximadamente) que se mantiene en


posicin sobre la piel por medio de una banda de goma enrollada sobre la extremidad.
Para asegurar un buen contacto elctrico, se coloca una pequea cantidad de un gel
conductor entre la placa metlica y la piel. Dicho gel est constitudo por polvo de slice y
agua a los que se adiciona una pequea cantidad de cloruro sdico.
Conectar los terminales correspondientes a cada electrodo (el marcado RA al electrodo
situado en el brazo derecho. LA al situado en el brazo izquierdo, LL al colocado a nivel de
la pierna izquierda y RL al de la pierna derecha).
El electrodo situado en la pierna derecha (RL) acta como electrodo indifente o neutro.
Con los tres electrodos restantes se pueden conseguir los siguientes tipos de derivaciones
tiles para explorar la actividad elctrica del corazn.
I. Derivaciones bipolares clsicas
En este tipo de derivaciones, introducidas por Einthoben en 1908, se detectan las
diferencias de potencial existentes entre pares de electrodos. Existen tres tipos:
DI Registra la diferencia entre potenciales detectados a nivel de brazo derecho y brazo
izquierdo; se produce una deflexin hacia arriba si el brazo izquierdo es positivo con
respecto al derecho.
DII Registra la diferencia entre potenciales detectados a nivel de brazo derecho y pierna
izquierda. Se observa una deflexin hacia arriba si la pierna es positiva con respecto al
brazo.
DIII Registra la diferencia entre los potenciales observados a nivel de brazo izquierdo y
pierna del mismo lado. Aparece una deflexin hacia arriba si la pierna izquierda es positiva
con relacin al brazo izquierdo.
Representando la actividad elctrica del corazn como un vector elctrico situado en el
centro de un tringulo equiltero cuyo vrtices corresponden al brazo derecho, brazo
izquierdo y pierna izquierda, resulta relativamente fcil comprender el tipo de registros
obtenidos en las derivaciones bipolares. Sobre cada uno de los lados del mencionado
tringulo equiltero(conocido tambin como tringulo de Einthoven) se proyecta el vector
de activacin; la magnitud y sentido del vector proyectado se corresponden con la
magnitud y el sentido de la deflexin obtenida (fig.25).
II. Derivaciones monopolares
Registran las diferencias de potencial entre un electrodo explorador y otro de referencia
cuyo potencial se considera igual a cero. Para conseguir que el electrodo de referencia
presente un potencial nulo se conecta cada uno de los tres electrodos de los miembros a
una terminal central a travs de una resistencia de 5.000 ohmios. De acuerdo con la ley de
Kirchoff, la suma de los voltajes de las tres derivaciones es igual a cero (VR + VL + VF =
0), por lo que el electrodo de referencia es insensible a las variaciones de potencial del
msculo cardaco; en estas condiciones, el electrodo explorador funciona como electrodo
monopolar.
Las derivaciones obtenidas en estas condiciones corresponden a:
VR Registra la diferencia de potencial entre brazo derecho y electrodo terminal (R; right,
recht= derecho)
VL Registra la diferencia de potencial entre pierna izquierda y electrodo terminal (L; left,
links= izquierdo)
VF Registra la diferencia de potencial entre pierna izquierda y electrodo terminal (F; foot,
fuss= pie)

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Prcticas de Fisiologa

La mayora de los electrocardigrafos estn constitudos de tal manera que los voltajes
obtenidos por medio de derivaciones monopolares experimentan una amplificacin
adicional de 3/2; en este caso, los registros electrocardiogrficos correspondientes van
precedidos del prefijo a (de ampliado), es decir, aVR, aVL y al'F.
En las derivaciones monopolares, las conexiones en el interior del aparato estn hechas de
tal manera que, cuando el electrodo explorador detecta una positividad relativa, se produce
una deflexin positiva (desviacin hacia arriba) en el electrocardiograma.
III. Derivaciones precordiales
Se registran las diferencias de potencial existentes entre diversos puntos de la pared
torcica y el electrodo de referencia. El nmero de derivaciones precordiales posibles es
ilimitado; por ello se ha seleccionado una serie de posiciones a cada una de las cuales
corresponde una derivacin tpica. De ordinario se explora la actividad elctrica del
corazn por medio de las siguientes derivaciones (fig. 26).
V1 Electrodo colocado inmediatamente por fuera del reborde esternal derecho, a nivel del
IV espacio intercostal.
V2 Electrodo situado inmediatamente por fuera del reborde esternal izquierdo, a nivel del
IV espacio intercostal.
V3 Electrodo situado sobre un punto equidistante entre la posicin de V2 y V4.
V4 Electrodo situado en el punto de interseccin de la lnea media clavicular del lado
izquierdo con el V espacio intercostal. Coincide con la zona habitual del latido de la punta.
V5 Electrodo situado en el punto de interseccin de la lnea axilar anterior del lado
izquierdo con la horizontal que pasa por el punto V4.
V6 Electrodo situado en el punto de interseccin de la lnea media axilar izquierda con la
horizontal que pasa por el punto V4.
OBSERVACION:
Ajustar el aparato hasta conseguir que en la pantalla aparezca un trazado
electrocardiogrfico aceptable. Con el selector colocado en la posicin 2 (DII) observar el
tipo de deflexiones asociadas a cada ciclo cardaco.
Cerciorarse de que el trazado es correcto, sin artefactos; las oscilaciones debidas a la
contraccin de los msculos esquelticos y a la presencia de interferencias elctricas suelen
ser los elementos perturbadores ms habituales.
Observar el tipo de ondas o deflexiones que aparecen en cada una de las derivaciones de
extremidades; nombrar cada uno de los componentes y sealarlos en la figura 27. Analizar
las derivaciones precordiales y notar las variaciones en el patrn electrocardiogrfico a lo
largo del rea precordial.
Estimulacin del seno carotdeo
Palpar el pulso de la cartida primitiva a la altura del borde anterior del msculo
esternocleidomastoideo del lado derecho. Seguir la arteria hasta llegar al borde superior del
cartlago tiroides a cuyo nivel se localiza el seno carotdeo. Practicar un suave masaje o
presin sobre el seno carotdeo durante 2 segundos. Notando a la vez el trazado
electrocardiogrfico y el pulso a nivel de la arteria radial, observar los cambios producidos
en la frecuencia cardaca.
Efecto de la postura
Observar el trazado electrocardiogrfico cuando el sujeto permanece en reposo y en
decbito supino, y determinar la frecuencia cardaca. Repetir la determinacin cuando el

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sujeto se pone de pie y permanece en dicha posicin por espacio de unos minutos. En qu
sentido se modifica la frecuencia cardaca al pasar de la horizontal a la posicin erecta?
Efecto de los movimientos respiratorios y de la maniobra de Valsalva
Observar las variaciones producidas en el trazado electrocardiogrfico al aumentar la
frecuencia respiratoria. Asimismo, determinar los cambios que aparecen durante un
perodo de apnea voluntaria.
Con la glotis cerrada, practicar una aspiracin forzada (maniobra de Valsalva): observar el
llenado y distensin de las venas superficiales del cuello. Determinar el efecto producido
por dicha maniobra sobre la frecuencia cardaca y sobre el trazado electrocardiogrfico.
Registro electrocardiogrfico
Adherir los trazados electrocardiogrficos sobre los recuadros correpondientes a cada una
de las derivaciones sealadas en sta pgina.

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Prcticas de Fisiologa

ELEMENTOS FORMES DE LA SANGRE


INTRODUCCION
La sangre puede ser considerada como un tejido lquido en el cual los componentes
celulares se hallan suspendidos en un medio lquido. La concentracin y distribucin de las
clulas presentes en la sangre perifrica cambia en relacin con una gran variedad de
situaciones fisiolgicas y de procesos patolgicos. Por este motivo, el conocimiento de la
naturaleza e intensidad de la respuesta hematolgica a un determinado proceso es de gran
importancia para el diagnstico de la enfermedad as como para el control de su evolucin.
Debido a su fluidez, la sangre puede ser extendida sobre un portaobjetos en forma de una
pelcula muy delgada, de tal manera que constituya una capa monocelular. El examen de la
extensin de sangre constituye un aspecto importante del estudio del paciente en cualquier
tipo de enfermedad.
OBJETIVOS
Esta practica tiene por objeto la preparacin y estudio de extensiones de sangre humana y
de algunos animales
MATERIALES
- Etanol 96 % - Algodn estril
- Pao limpio o kleenex
- Lminas portaobjetos
- Frascos cuentagotas
- Vasos de precipitados
- Microscopio

- Gasas estriles
- Lancetas desechables, estriles
- Mecheros de alcohol
- Disolucin de Wright
- Aceite de inmersin
- Agua tamponada(pH 6.7)

PROCEDIMIENTO
Preparacin de los portaobjetos.Enjuagar y limpiar los portaobjetos con un pao limpio, eliminar los restos de humedad y
de grasa flameando los portaobjetos por ambos lados con la llama de un mechero. Sujetar
siempre los portaobjetos por los bordes laterales para evitar la contaminacin de la
superficie.
Extensin de la sangre.La extensin de las clulas hemticas puede hacerse a partir de una gota de sangre obtenida
al puncionar con una lanceta estril el pulpejo del dedo medio. Con objeto de aumentar el
flujo sanguneo, conviene practicar un suave masaje sobre las partes blandas. Es necesario
que la piel del dedo est seca y caliente, de lo contrario no se obtiene sangre suficiente y en
condiciones adecuadas. Si la piel est mojada, la sangre no forma gotas regulares y se
desliza a lo largo del dedo en pequeos regueros.
Limpiar el pulpejo de dedo con un algodn mojado en alcohol y secarlo con un trozo de
algodn estril. Sujetar el pulpejo de dedo con firmeza y con la lanceta estril practicar una
incisin en sentido perpendicular al de las lneas drmicas. Con una gasa estril eliminar la
primera gota de sangre, dado que puede contener lquido tisular, o bien otros
contaminantes, y no proporciona una imagen correcta del cuadro hemtico. Practicar un
suave masaje sobre el pulpejo del dedo y apretar ligeramente las partes blandas hasta que
empiece a fluir la primera gota de lquido.
Con cuidado, dejar caer una gota de sangre (de unos 3 5 mm de dimetro) sobre uno de
los extremos de un portaobjetos limpio, el cual se mantiene apoyado sobre una superficie
resistente. Sujetar el otro portaobjetos, provisto de un borde liso, entre el pulgar y el dedo
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

medio y apoyarlo sobre el primero a nivel del extremo opuesto al que contiene la gota de
sangre, de tal manera que constituyan entre ambos un ngulo de unos 30. Desplazar ahora
el portaobjetos en direccin a la gota de sangre, tan pronto como el borde inferior contacte
con la gota de sangre y sta, por accin capilar, se extienda a todo lo ancho del ngulo de
contacto, mover rpidamente el portaobjetos en direccin contraria. Notar que la sangre se
desplaza por detrs del borde del portaobjetos extensor.
Para conseguir una extensin regular es necesario desplazar el portaobjetos extensor de
manera uniforme y rpida. Si la extensin es demasiado gruesa, hay que reducir el ngulo
de contacto entre el portaobjetos extensor y el de soporte y/o desplazar el primero con
mayor rapidez. Si, por el contrario, la extensin resulta demasiado delgada, desplazar el
portaobjetos extensor con menor rapidez y/o aumentar el ngulo de contacto. Es
recomendable realizar como mnimo dos extensiones y trabajar con la obtenida en mejores
condiciones.
Tincin de las Clulas.La extensin, una vez secada al aire, se tie por medio de la disolucin de Wright
compuesta por una mezcla de un colorante bsico, azul de metileno, y un colorante cido,
eosina.
Colocar el portaobjetos que contiene la extensin de sangre sobre la boca de un vaso de
precipitados pequeo y cubrir la totalidad de su superficie con la disolucin del colorante.
Transcurridos 4 minutos, aadir igual volumen de agua tamponada y mezclar ambos
lquidos soplando sobre la superficie. Al cabo de unos 3 minutos, inclinar el portaobjetos y
lavar la extensin con agua destilada hasta que aqulla adquiera color rosado. Retirar el
portaobjetos del vaso y secar la parte inferior con papel filtro. Dejar la extensin, as
teida, y seque al aire; a continuacin proceder al examen microscpico.
OBSERVACION
Se realizar con el objetivo de inmersin (X100), el cual se introducir en el interior de una
gota de aceite de cedro previamente depositada sobre el portaobjetos. Los objetivos de
inmersin se distinguen por la presencia de un anillo de color situado sobre su mitad
inferior.
Eritrocitos.Los eritrocitos o clulas rojas son los elementos ms abundantes en la sangre y aparecen
como discos bicncavos, ligeramente rosados;
no poseen ncleo ni grnulos
citoplasmticos. Poseen un dimetro medio de 7 micrmetros.
Leucocitos.Las clulas blancas, leucocitos, teidas con el colorante de Wright presentan diferentes
aspectos caractersticos.
Los granulocitos neutrfilos presentan grnulos finos, pequeos, de color rosado
distribuidos sobre un fondo citoplasmtico de color lila. El ncleo, de color azul prpura
oscuro, puede presentar de dos a cinco lbulos, as mismo conectados por delgados hilos.
Son los leucocitos ms abundantes.
Los granulocitos eosinfilos se caracterizan
por presentar gruesos grnulos
citoplasmticos de color rojo naranja. El ncleo, de color azul prpura plido, puede
presentar dos o tres lbulos conectados entre s por delgados filamentos.
Los granulocitos basfilos contienen grnulos de color prpura oscuro que cubren
parcialmente el ncleo. El ncleo, color azul prpura plido, posee dos o tres lbulos,
tambin conectados entres s por delgados hilos.
Son los leucocitos menos abundantes.

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Prcticas de Fisiologa

Los linfocitos poseen un citoplasma azul celeste, sin grnulos. El ncleo redondo o
ligeramente indentado, es de color prpura azul y ocupa casi por completo todo el espacio
celular.
Los monocitos poseen un citoplasma gris azulado, sin grnulos. El ncleo, de color violeta
azulado plido, puede ser redondo, doblado o en forma de herradura. Los monocitos son
las clulas de mayor tamao presentes en la sangre.
Plaquetas.Aparecen como agrupaciones de forma irregular y con el aspecto de grnulos de color
prpura rojizo, intenso.
Frmula Leucocitaria.Con los objetivos de bajo y mediano aumento y con el de inmersin, examinar la extensin
e identificar los distintos tipos celulares. Desplazando lentamente el portaobjetos, contar
hasta 100 glbulos blancos o leucocitos, clasificando y anotando en un cuadro los distintos
tipos observados.
La preparacin se desplaza progresivamente por delante del objetivo, de manera que cada
clula sea tabulada solamente una vez. Para el recuento celular se comienza en el ngulo
superior izquierdo de la extensin y se mueve la preparacin dos campos del microscopio
hacia la derecha. A continuacin, se desplaza un campo microscpico hacia abajo y se
cuenta las clulas en este y en los dos campos consecutivos situados a la izquierda y as
sucesivamente, siguiendo una trayectoria en zigzag.
Las zonas ideales para realizar el recuento son aquellas en que los hemates aparecen
relativamente individualizados sin formar acumulo o pilas.
La frmula leucocitaria indica el porcentaje de distribucin de cada tipo leucocitario en la
sangre perifrica. Las variaciones observadas en la distribucin de los leucocitos as como
en el nmero total de clulas por milmetro cbico reflejan desviaciones del estado
fisiolgico y puede ayudar a establecer el diagnstico adecuado.
Ejercicio de Diagnstico.En cada mesa de trabajo realizar una extensin de sangre procedente de un presunto
paciente; determinar la frmula leucocitaria correspondiente.
Anotar las respectivas cifras en una tabla y comparar los datos obtenidos con los resultados
de sus compaeros y con las cifras consideradas habitualmente como normales.
En una seccin correspondiente a comentarios indicar si el cuadro hematolgico que
presenta el paciente est dentro de los lmites de normalidad o no.
Sangre de otros Vertebrados.De manera anloga a la descrita para los elementos formes de la sangre humana examinar
algunas extensiones de sangre perteneciente a otros vertebrados, en los peces, anfibios,
reptiles y aves, los hemates de forma elptica, poseen ncleo, en los mamferos incluidos
los primates el ncleo se pierde antes de que los eritrocitos pasen a la circulacin; en
general las clulas blancas de todos los vertebrados presentan caractersticas semejantes
con estos datos determinar si la sangre determinada pertenece a un mamfero

HEMATOCRITO
1.
INTRODUCCION
La sangre es un lquido complejo, constituido por diversos elementos, con un peso
especfico medio de 1,055 g/ml.
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Una muestra de sangre, que se mantiene incoagulable por medio de la adicin de heparina
o de un secuestrante de los iones calcio, se separa por efecto de la gravedad en diversas
capas de acuerdo con el peso especfico de sus distintos constituyentes. Los eritrocitos, con
un peso especfico de 1,090, ocupan la parte inferior del tubo; por encima de ellos se sitan
los leucocitos, con un peso especfico de 1,050 y por encima de stos, las plaquetas o
trombocitos; por ltimo, la parte superior del tubo est ocupada por el plasma cuya
densidad o peso especfico oscila entre 1,026 y 1,030.
La sangre sometida a la simple accin de la gravedad se separa, en cierto grado, en sus
distintos constituyentes por sedimentacin. Sin embargo las fuerzas que se oponen a la
sedimentacin de los elementos formes, principalmente la viscosidad del plasma y las
corrientes de conveccin, son relativamente importantes, por lo que, en estas condiciones,
la separacin no acaba de ser completa. Cuando, por el contrario, la sangre se somete a la
accin de un campo gravitatorio intenso, por medio de centrifugacin, las fuerzas que se
oponen a la sedimentacin quedan, proporcionalmente, reducidas a valores nfimos y los
distintos constituyentes se separan rpidamente de acuerdo con su peso especfico.
La nitidez con que se segregan los distintos constituyentes de la sangre depende de tres
factores principales: el tiempo de centrifugacin, la intensidad del campo gravitatorio o
fuerza centrfuga aplicados y el volumen ocupado por los hemates. Si bien la interaccin
entre estos factores es compleja, se pueden definir unas condiciones mnimas necesarias
para conseguir la correcta separacin de los hemates. El tiempo de centrifugacin
necesario para conseguir la sedimentacin completa de los eritrocitos cuando el volumen
ocupado por stos es inferior a 75% del total, vara en relacin inversa con la magnitud del
campo gravitatorio aplicado en la forma que se describe a continuacin:
Campo gravitatorio
(g)
10.000
5.000
2.500

Tiempo de centrifugacin
(minutos)
4
10
30

(El campo gravitatorio que acta sobre la parte distal de un tubo sometido a centrifugacin
se calcula multiplicando el nmero de revoluciones al cual gira la centrfuga por el radio de
rotacin medido a nivel de la punta del tubo, de acuerdo con la siguiente expresin:
Cg = (1,118 x 10-5) n2r
En la cual Cg representa la magnitud del campo gravitatorio, n, las revoluciones por
minuto y r, el radio de rotacin del tubo medido en centmetros).
An despus de una prolongada e intensa centrifugacin permanece, todava una cierta
proporcin de plasma atrapado en los espacios que quedan entre los eritrocitos. Ello es
debido a que la curvatura o esfericidad de los hemates impide su total empaquetamiento y,
por tanto, da lugar a la existencia de un cierto volumen intercelular cuya magnitud depende
de la proporcin de clulas as como de su tamao, geometra y grado de deformabilidad.
Se estima que la proporcin de plasma atrapado en los intersticios celulares puede
representar hasta un 2% del volumen de una determinada muestra de sangre. A pesar de
ello, debido a las dificultades que entraa su valoracin exacta, este hecho se ignora en las
determinaciones habituales en clnica.
El valor del hematocrito puede ser definido como el porcentaje en volumen ocupado por
los eritrocitos en una determinada muestra de sangre. El valor del hematocrito vara con
relacin al nmero y tamao de los hemates as como con el volumen de plasma,
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

oscilando, en condiciones normales, entre el 47 + 7 % en los varones adultos sanos y el 42


+ 5 % en las mujeres adultas sanas.
Un valor hematocrito elevado refleja un aumento en el nmero total de hemates
circulantes o bien una reduccin en el volumen plasmtico. Los elevados valores de
hematocrito que se observan en casos de clera, por ejemplo (con un valor hematocrito del
65% o ms), son debidos a las considerables prdidas de lquido por las heces, con la
consiguiente reduccin del volumen plasmtico. Por otra parte, un valor hematocrito bajo
refleja habitualmente una reduccin en el nmero de eritrocitos circulantes o bien un
incremento en la proporcin de volumen plasmtico.
El valor hematocrito constituye un ndice indirecto de la capacidad de transporte de
oxgeno por parte de la sangre y es uno de los parmetros ms importantes y precisos que
pueden utilizarse para detectar una anemia o una policitemia. El valor hematocrito es ms
exacto y menos laborioso de determinar que el recuento de hemates y, debido a lo sencillo
de la tcnica, puede ser realizado en cualquier consultorio mdico.
2.
MATERIAL
Material Biolgico:
Sangre entera de: Homo sapiens, vacuno, ovino, porcino, equino, camlidos sudamericano,
pez, anfibio, reptil, ave
Otros:
Algodn hidrfilo estril
Etanol 96
Lancetas desechables, estriles
Pasta de modelar (plastilina)
Tiritas
Tubo capilar para hematocrito, heparinizado
Centrfuga para hematocrito
Tubo de hemlisis
Disoluciones de ClNa de la siguiente osmolaridad:
200 mosM.
300 mosM.
900 mosM.
2.
PROCEDIMIENTO
En la actualidad pueden utilizarse dos procedimientos para la determinacin del valor
hematocrito: el procedimiento de Wintrobe o macromtodo, en el cual se emplea un tubo
graduado de unos 2 ml de capacidad, o bien el procedimiento del microhematocrito, ms
usado en la actualidad, para el cual se requieren tan slo 50 ul de sangre y un pequeo tubo
capilar de vidrio. En el primer caso se recurre al uso de una centrfuga convencional para
sedimentar los eritrocitos, mientras que en el segundo se requiere una centrfuga especial,
en la cual los tubos capilares se disponen sobre una platina horizontal y orientados en
sentido radial a partir de su eje.
Microhematcrito
En este procedimiento se recurre al uso de tubos capilares, de unos 7.5 cm de longitud por
1 mm de dimetro interior, recubiertos interiormente de una capa de heparina para evitar la
coagulacin de la sangre.
(Si no se dispone de tubos heparinizados, puede procederse a su preparacin en la forma
que se describe a continuacin: A partir de un tubo capilar [empleado para determinar el
punto de fusin] de un dimetro interior de 1 mm se rompen pequeos fragmentos de unos
7 cm de longitud. Por accin capilar se llenan dichos fragmentos con una disolucin de
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

heparina en agua destilada, a una concentracin de 0,1 mg/ml. Los tubos que contienen la
disolucin de heparina se colocan en una estufa a 56 C o bien en una incubadora a 37 C,
hasta que desaparezcan los ltimos restos de agua, y se guardan en frascos tapados
hermticamente hasta el momento de su utilizacin.)
Por medio de algodn impregnado con alcohol o con un detergente limpiar la piel del
lbulo de la oreja o pulpejo del dedo medio y eliminar el exceso de lquido; dejar que la
piel se seque adecuadamente con objeto de evitar que el lquido desinfectante diluya o
hemolice la muestra de sangre. Por medio de una lanceta estril practicar una pequea
incisin sobre la zona; la incisin debe ser lo suficientemente profunda para asegurar un
flujo suave, pero copioso de sangre; cuando la sangre empiece a fluir de nuevo, colocar
uno de los extremos del tubo capilar sobre la gota de sangre, con ngulo de unos 45,
dejando que sta ascienda, por capilaridad, hasta llenar los dos tercios, aproximadamente,
del tubo (al fin debe quedar 1 cm libre en cada uno de los extremos del tubo). Retirar ste y
cerrar uno de sus extremos por medio de pasta de modelar o bien fundiendo el vidrio por
medio de una fina llama. Limpiar de sangre la zona en que se ha practicado la incisin y
desinfectar la pequea herida con alcohol o con alguno de los antispticos habituales.
Situar el tubo capilar sobre la platina de la centrfuga para microhematocrito con el borde
cerrado orientado hacia su parte perifrica. Anotar el nmero de la hendidura donde se
coloca el tubo con el objeto de poder identificar la correspondiente muestra de sangre.
Como los tubos pesan muy poco en relacin con el peso de la platina, no es necesario
proceder a su equilibrado o balanceo, pudiendo centrifugar hasta 24 tubos
simultneamente. Despus de cerrar la platina y colocar la tapa protectora sobre sta,
poner la centrfuga en marcha; debido a la gran velocidad de rotacin, la fuerza centrfuga
generada es unas 12.000 veces superior a la de la gravedad, con lo cual la separacin de la
sangre en elementos formes y plasma se consigue en unos 5 minutos.
Los tubos para microhematocrito pueden ser centrifugados tambin en una centrfuga
convencional para tubos de ensayo. En este caso sin embargo, es necesario colocar los
tubos capilares en el interior de un tubo de ensayo para evitar que la pared del capilar se
rompa; por otra parte es preciso prolongar el tiempo de centrifugacin hasta 30 minutos,
como mnimo, para conseguir una separacin aceptable.
Dado que los tubos para microhematocrito no estn graduados, es preciso determinar la
longitud ocupada por la columna de hemates y la longitud ocupada por el volumen total de
sangre con objeto de calcular los porcentajes correspondientes. Para mayor comodidad
puede utilizarse un sencillo dispositivo (basado en el principio de los tringulos
semejantes) que puede obtenerse comercialmente o bien construirlo uno mismo sobre
papel milimetrado.
El lado o borde derecho del tringulo est graduado en cien divisiones. Un cierto nmero
de estas subdivisiones estn unidas por medio de sendas rectas superior de la columna de
plasma enrase exactamente con el lado superior del tringulo. El valor hematocrito se lee
directamente determinando el punto de interseccin sobre el borde calibrado de la lnea
que pasa por la zona que separa los hemates del resto de la sangre.
En esta prctica se utiliza un lector especial que permite leer directamente en un dial
graduado el valor hematocrito de la muestra de sangre.
Colocar el tubo capilar en la hendidura central del aparato, de manera que la parte
correspondiente a los eritocitos quede a la derecha del lector y la lnea de divisin entre
eritrocitos y el resto de la muestra de sangre coincida con la raya vertical negra situada en
el centro del brazo metlico. Limitado as el tubo, girar el disco del lector de tal manera
que los lados del ngulo del disco pasen por las lneas que limitan los extremos distales de
la columna de eritrocitos y de la columna de plasma del tubo capilar.
En estas condiciones, el valor hematocrito se lee directamente en el dial situado en la parte
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

delantera del aparato.


Resultados:
El eritrocito como osmmetro
Debido a la marcada susceptibilidad del hemate frente a pequeas variaciones en la
concentracin de partculas osmticamente activas en el medio que le rodea, el eritrocito
pierde o gana lquido con relativa facilidad. Colocados en un medio ligeramente
hipotnico, los hemates ganan agua y aumentan de volumen: situados en un medio
ligeramente hipertnico, los hemates pierden agua y se encogen de tamao. En ambos
casos, el porcentaje del volumen total de sangre ocupado por los eritrocitos variar con
relacin a las condiciones normales a pesar de no haber variado el nmero total de
hemates de la muestra de sangre.
Los cambios provocados en el volumen celular por efecto de disoluciones de distintas
concentracin osmtica pueden comprobarse fcilmente por medio de la determinacin del
valor hematocrito.
En sendos tubos de hemlisis colocar 1 ml de cada una de las siguientes disoluciones de
cloruro sdico:
1.
200 mosM.
2.
300 mosM.
3.
900 mosM.
A continuacin aadir 1 ml de sangre mantenida incoagulada, a cada uno de los tubos as
preparados; dejar los tubos en reposo durante unos 10 minutos. Agitar los tubos
invirtindolos suavemente. Por capilaridad, transferir una muestra de sangre de cada uno
de los tubos a sendos capilares para microhematocrito. Cerrar uno de los extremos de los
tubos capilares y centrifugar durante 5 minutos. Determinar el valor hematocrito observado
en cada caso y relacionarlo con la concentracin osmtica del medio con el cual se ha
puesto en contacto la muestra inicial de sangre.
ClNa
(osmM)
200 mosM.
300 mosM.
900 mosM.

Valor hematocrito
(%)

Esta prueba pone de manifiesto la necesidad de controlar cuidadosamente los factores o


elementos que puedan modificar el medio con el cual se ponen en contacto los eritrocitos,
con objeto de evitar errores o variaciones importantes a la hora de valorar o determinar el
valor hematocrito de una determinada muestra de sangre. Entre los elementos que,
comnmente deben controlarse se encuentran el medio antisptico (alcohol, detergentes,
etc.) empleado para limpiar y desinfectar la piel y los anticoagulantes utilizados para
mantener fluida la muestra de sangre a excepcin de la heparina.

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR


1.

INTRODUCCION:
En una muestra de sangre, mantenida incoagulable, los elementos formes sometidos
a la simple accin de la gravedad sedimentan poco a poco hacia el fondo en relacin
con la densidad o peso especfico de cada tipo celular. La velocidad con la densidad
o peso especfico de cada tipo celular. La velocidad con que sedimentan los
eritrocitos est determinada por las caractersticas peculiares de cada muestra de
sangre y constituye un parmetro de gran utilidad clnica, conocido con el nombre de
velocidad de sedimentacin globular.
La velocidad con que sedimentan los elementos formes de la sangre, como la de
cualquier partcula que cae en el seno de un fluido determinado, depende de varios
factores que pueden ser correlacionados por medio de la frmula de Stockes. Una
partcula determinada cae o desciende en el seno de un lquido con una velocidad
creciente, debido a la aceleracin de la gravedad, hasta alcanzar un valor lmite, en el
cual el efecto de su peso es equilibrado exactamente por la resistencia que opone el
medio a su desplazamiento. En estas condiciones, la velocidad de cada es igual a
V=MGnr
donde M es la masa de la partcula: G, la fuerza gravitatoria normal: n, la viscosidad
del medio y r, el radio de la partcula.
dado que la masa de la partcula es proporcionalmente a su volumen, podemos
escribir:
V=
siendo d la densidad y d, la densidad del medio de dispersin:
Podemos comprobar fcilmente que, para un sistema determinado, la velocidad de cada es
proporcional al cuadrado del radio de la partcula, aceptando que sta sea esfrica.
De acuerdo con los parmetros sealados en la ltima ecuacin, la velocidad de
sedimentacin de los elementos formes de la sangre guarda relacin con:
1.El radio de la esfera o partcula
2.La densidad de la partcula o elemento forme.
3.La densidad del medio en el cual aquellas se desplaza, es decir, el plasma.
4.La viscosidad del medio (el plasma).
En la mayora de los casos, los tres ltimos parmetros pueden ser considerados como
constantes o muy similares entre las distintas muestras de sangre, por lo que las diferencias
en la velocidad de sedimentacin estarn en relacin, fundamentalmente, con variaciones
en el valor del primero de ellos.
Los eritrocitos constituyen conglomerados de tamao variable, cuyas dimensiones
determinan la velocidad con que sedimentan los glbulos rojos en su conjunto (conviene
diferenciar estos conglomerados de las agrupaciones que tienen lugar durante el proceso de
la aglutinacin en el cual las clulas se hallan unidas entre s de manera irreversible y no
puede ya separarse una de otra). En una muestra de sangre normal, los hemates se
disponen formando conglomerados, a modo de pilas de monedas, que contienen de 10 a 20
glbulos cada uno de ellos; en cambio, en caso de existir alteraciones orgnicas, ms o
menos importantes, los hemates constituyen aglomerados mucho ms voluminosos
integrados por varios centenares de glbulos rojos. Estos conglomerados configuran una
partcula, que es la sedimenta como tal en la prctica; es a esta partcula, que es la que
sedimenta como tal en la prctica; es a sta partcula y no a los hemates considerados
individualmente, a la que debe aplicarse la frmula de Stockes.

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

Al constituirse los conglomerados o pilas de monedas, la relacin masa / superficie


aumenta considerablemente, con lo que el rea de la interfase, cuya magnitud
determina la intensidad de rozamiento o friccin con el medio y constituye, por tanto,
uno de los factores que se oponen a la cada, se reduce considerablemente; de esta
forma al incrementarse la relacin masa / superficie, los glbulos rojos en su conjunto
sedimentan con mayor velocidad. Un eritrocito con un dimetro de 8 um y un grosor
mximo de 2 um y mnimo de 1 um posee una superficie de alrededor de 160 um 2; 10
glbulos rojos, individualmente considerados, presentaran una superficie de interfase
total de 1.600 um2. Sin embargo, cuando dichos corpsculos se hallan apilados unos
encima de otro, la superficie del conjunto en contacto directo con plasma es tan slo de
700-800 um2, por lo que la resistencia a la cada disminuye y la velocidad de
sedimentacin se incrementa.
As pues, la velocidad de sedimentacin depende, fundamentalmente, de la intensidad
con que se constituyan los conglomerados de eritrocitos o pilas de monedas. A su vez,
el tamao de los agregados eritrocitarios no depende de los propios hemates, sino de
las caractersticas fisicoqumicas de las protenas del plasma. Uno de los factores que
se opone a la segregacin eritrocitaria y que, por tanto, contribuye a mantener
separados a los eritrocitos entre s es la carga electronegativa de la membrana, cuya
magnitud condiciona la mutua repulsin entre ellos. En funcin del tipo y proporcin
de protenas presentes en el plasma y, de manera particular, del valor del punto
isoelctrico que presentan cada una de ellas, la carga electronegativa de la membrana
eritrocitaria ser de mayor o menor magnitud. Cuando mayor sea la proporcin de
protenas plasmticas presentes en el plasma con punto isoelctrico ms prximo al pH
del plasma, menor ser la proporcin de grupos aninicos a nivel de las
correspondientes macromolculas y, en consecuencia, menor la electronegatividad
conferida a la superficie de los hemates.
El fibringeno, las globulinas de manera especial las imunoglobulinas y ciertos
productos de la destruccin tisular reducen la carga electronegativa de los hemates,
aumentan la tendencia a la formacin de agregados e incrementan, por tanto, la
velocidad de sedimentacin globular; la albmina (y la transferrina), por el contrario,
con un punto isoelctrico muy alejado del pH de la sangre, lo reducen.
La velocidad de sedimentacin de la sangre desfibrinada o con un bajo contenido en
fibringeno es extremadamente lenta; por el contrario, en casos de
hiperfibrinogenemia, la velocidad de sedimentacin se halla considerablemente
aumentada.
Factores que Afectan la Velocidad de Sedimentacin Globular
Todas aquellas circunstancias capaces de modificar la tendencia a la agregacin de los
eritrocitos as como la dinmica de la sedimentacin afectarn la velocidad de
sedimentacin globular. Entre las ms importantes podemos sealar las siguientes:
1. La concentracin de hemates por mm 3 (dentro de ciertos lmites, cuanto menor es
la concentracin de glbulos rojos, mayor es la velocidad de sedimentacin).
2. El tipo y proporcin de protenas del plasma, de manera particular el fibringeno y
las inmunoglobulinas. La modificacin de la carga eritrocitaria en funcin del tipo
de macromolculas que rodean el glbulo rojo se aprovecha experimentalmente
para acelerar la velocidad de sedimentacin y conseguir la separacin de los
hemates del resto de los elementos formes de la sangre. As, la adicin de
polivinilpirrolidona o de dextrano a una muestra de sangre permite obtener

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

3.
4.
5.

6.

7.

rpidamente suspensiones ricas en leucocitos y plaquetas con una mnima


contaminacin de eritrocitos.
El contenido en lipoprotenas del plasma, de manera especial las que tienen mayor
contenido en triglicridos (VLDL o pre-B) y en colesterol (LDL o B).
La temperatura de la sangre (el aumento de temperatura favorece la velocidad de
sedimentacin).
El dimetro y la altura del tubo empleado para la determinacin (cuanto ms larga
es la columna o tubo de sedimentacin de manera que, cuando el tubo forma un
ngulo de 45con la vertical, la velocidad de sedimentacin aumenta unas 4 veces.
Cuando el tubo est en posicin estrictamente vertical, la cada de los paquetes de
hemates est contrarrestada por una corriente de plasma que, desplazado por
aqullos, se mueve en sentido ascendente. En un tubo inclinado unos 45 en
relacin con la vertical, los hemates, que siempre desciende en sentido vertical
(bajo la atraccin de la gravedad), se desliza por la pared inferior del tubo, al
mismo tiempo que el plasma asciende por la zona correspondiente a la pared
superior.
El tipo de anticoagulante empleado. El citrato sdico constituye un complejo
soluble con los iones calcio del plasma, mientras que otros anticoagulantes (como
los oxalatos) dan lugar a la formacin de un complejo insoluble y aceleran la
velocidad de sedimentacin.
El perodo de tiempo transcurrido desde la obtencin de la muestra hasta el de la
realizacin de la prueba (la muestra de sangre no debe dejarse en reposo antes de la
prueba, puesto que aquello acelera la velocidad de sedimentacin).
2.
MATERIAL:
Etanol 96
Algodn hidrfilo estril
Sistema para puncin venosa Vacutainer, con agujas estriles y desechables
Tubos Vacutainer con citrato sdico, para determinar la velocidad de sedimentacin
globular.
Tubos de Westergren
Soporte para tubos de Westergren
Disolucin isotnica de cloruro sdico (suero salino fisiolgico)
Disolucin de fibringeno en suero salino
Cronmetro
3.
PROCEDIMIENTO:
Existen diversos procedimientos para determinar la velocidad de sedimentacin. De
todos ellos, el ms habitual es el de Westergren, que es el empleado en esta prctica.
En el procedimiento de Westergren se utiliza citrato sdico como anticoagulante y
tubos largos y delgados como cmaras de sedimentacin. Los tubos de Westergren
pueden ser considerados como pipetas de 300 mm de longitud y 2.5 mm de
dimetro interior, graduadas en milmetros desde cero a 200 mm; en conjunto,
tienen una capacidad de alrededor de 1 ml.
Para determinar la velocidad de sedimentacin debe procederse de la manera
siguiente:
Con las debidas precauciones de asepsia y siguiendo el procedimiento descrito en la
prctica de coagulacin, extraer unos 5 ml de sangre de una de las venas

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

antecubitales. La sangre se recoge en tubos sometidos al vaco, que contienen una


pequea cantidad de una disolucin de citrato sdico al 3.8%, que acta como
anticoagulante. Una vez extrada la muestra, mezclar por medio de suaves
movimientos de rotacin e inclinacin, la sangre con la disolucin de
anticoagulante; la concentracin final de citrato sdico ser de 7.6 mg/ml, con una
dilucin de un 20% de la muestra de sangre.
Por medio de los tubos de Westergren, aspirar el contenido del tubo de ensayo hasta
la marca superior, dejando luego que el contenido se vace de nuevo en el interior
del tubo de ensayo; repetir la operacin tres o cuatro veces con objeto de asegurar
que la sangre se mezcle bien con la disolucin de anticoagulante.
Una vez realizada esta operacin, aspirar un volumen de lquido suficiente para que
la parte superior de la columna de sangre alcance exactamente la marca cero o
punto inicial del tubo o cmara de sedimentacin. Colocar el tubo en un soporte
especial con la parte inferior (donde se halla la marca correspondiente a los 200
mm) firmemente apoyada sobre un tapn de goma fijado a la base del soporte,
mientras que el extremo superior se sujeta por medio de una pinza, de forma que el
tubo quede en posicin exactamente vertical. Al cabo de 1 hora, examinar el nivel
alcanzado por el frente que separa el plasma (de color amarillento) del resto de la
sangre (de color rojo) y anotar los valores obtenidos (la divisin milimtrica del
tubo que coincide con el frente de sedimentacin).
En un individuo adulto, sano, la velocidad de sedimentacin durante la primera
hora es del orden de 4 mm en el hombre (con un margen de variacin comprendido
entre 0 y 6.5 mm) y del orden de 8 mm en la mujer (con un margen de variacin
comprendido entre 0 y 12 mm).
En la infancia, la concentracin de inmunoglobulinas o y-globulinas, con un punto
isoelctrico muy cercano al pH del plasma, es baja, por lo que la velocidad de
sedimentacin es muy pequea, oscilando entre 0,2 y 0,5 mm/hora. Con los aos, la
velocidad de sedimentacin se incrementa alcanzando paulatinamente, los valores
habituales de la edad adulta.
Resultados:
Efectos producidos por alteraciones en la composicin de la sangre
Variaciones en la proporcin de protenas plasmticas
Transferir 1,5 ml de la muestra de sangre mezclada con el anticoagulante a un tubo
de ensayo limpio y seco. A continuacin, adicionar a dicho tubo 0,5 ml de una
disolucin de fibringeno al 20% en suero salino fisiolgico; por medio de un tubo
de Westergren, empleado a guisa de pipeta, mezclar bien ambas dispersiones.
De acuerdo con el procedimiento descrito en el apartado precedente, aspirar un
volumen de lquido suficiente para que la parte superior de la columna de sangre
coincida exactamente con la divisin cero de la escala milimtrica del tubo de
Westergren. Colocar el tubo en el soporte adecuado y anotar el desplazamiento
experimentado por la parte superior o frente de la columna de hemates al cabo de 1
hora.
Resultados:
Efecto de la dilucin de la sangre
Transferir 1 ml de la muestra de sangre extrada al comienzo de la prctica a un
tubo de ensayo, en el que, previamente, se ha colocado 1 ml de una disolucin de
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

cloruro sdico isotnica con la sangre (suero salino fisiolgico). Mezclar bien la
sangre con el suero y a continuacin pipetear hasta la divisin cero del tubo de
Westergren la cantidad adecuada de muestra. Colocar el tubo en el soporte y
verificar el desplazamiento experimentado por la columna de sangre al cabo de 1
hora.
Resultados:
Variaciones inducidas en la velocidad de sedimentacin globular por cambios en la
posicin del tubo
De acuerdo con el procedimiento descrito anteriormente, llenar con sangre
mezclada tan slo con el anticoagulante un tubo de Westergren hasta la divisin
cero. Una vez colocado el tubo sobre el soporte adecuado, inclinar todo el sistema
de manera que la columna de sangre forme un ngulo de unos 45 con la horizontal.
Observar el desplazamiento experimentado, en estas circunstancias, por la columna
de eritrocitos y compararlo con el registrado con la misma muestra en el tubo
mantenido en posicin vertical.
El hallazgo de una velocidad de sedimentacin globular acelerada sugiere la
presencia de enfermedad orgnica, incluso en ausencia de signos clnicos.
La prueba, sin embargo, no es especfica y no proporciona, por tanto, ningn tipo
de informacin acerca de la naturaleza de la enfermedad.
La velocidad de sedimentacin globular est aumentada o acelerada en aquellos
procesos que cursan con destruccin celular (p.ej., tras un infarto de miocardio), en
las enfermedades de tipo neoplstico, en las reacciones inflamatorias y, en general,
siempre que existan alteraciones orgnicas importantes, a nivel local general, de
carcter agudo o crnico. La velocidad de sedimentacin globular est
particularmente aumentada en las enfermedades generalizadas del denominado
tejido conjuntivo, como la fiebre reumtica, la artritis reumatoide, el eritema
nodoso, etc. Entre las situaciones fisiolgicas, solamente durante el embarazo se
observa un aumento en la velocidad de sedimentacin. Las enfermedades de tipo
"funcional" pueden cursar con velocidad de sedimentacin prcticamente normal.
El principal valor clnico de la velocidad de sedimentacin globular estriba en su
utilidad para establecer un pronstico y como indicador de la evolucin del proceso
y de la eficacia de las medidas teraputicas instituidas en cada caso. Un incremento
en la velocidad de sedimentacin sugiere un empeoramiento del cuadro clnico o la
aparicin de complicaciones. Conviene tener presente que la velocidad de
sedimentacin globular puede estar alterada por efecto de drogas o frmacos
presentes en el plasma.
Un gran nmero de medicamentos tiende a aumentar la velocidad de
sedimentacin; podemos citar, entre ellos, la teofilina, la penicilina, los
contraceptivos orales, la vitamina A, etc. Otros dan lugar a una pequea reduccin o
enlentecimiento, debiendo mencionar, entre estos, los salicilatos, la quinina, las
drogas que, como el ACTH o la cortisona, dan lugar a un aumento de la glucemia,
etc.
Resultados:

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COAGULACION SANGUINEA
1.
INTRODUCCION
La coagulacin de la sangre es el resultado de la compleja interaccin, una serie de
reacciones enzimticas que se suceden de manera coordinada siguiendo una determinada
secuencia. En ltima instancia, la coagulacin sangunea representa la constitucin, a partir
del fibringeno, de una trama o red de fibrina que, englobando los distintos constituyentes
de la sangre, ampla, estabiliza y consolida sobre la pared vascular el tapn plaquetario
formado durante la segunda etapa de la hemostasia, El proceso de la coagulacin
constituye un sistema de amplificacin biolgica, en el cual un pequeo nmero de
molculas del compuesto iniciador del proceso induce la activacin en cascada de toda
una serie de factores o pro-enzimas, culminando con la produccin explosiva de trombina,
responsable directo de la transformacin del fibringeno en fibrina.
De manera esquemtica, en el proceso de la coagulacin sangunea podemos distinguir las
siguientes etapas:
1.
Liberacin de tromboplastina tisular o formacin de su equivalente a partir de los
propios componentes de la sangre. En ambos casos se constituye un factor que, con el
concurso de otros elementos, provoca la transformacin de una sustancia inactiva, presente
en el plasma, en "protrombinasa" activa, enzima proteoltica que hidroliza selectivamente
determinados enlaces especficos de la molcula de protrombina.
En esta primera fase se hallan involucrados gran nmero de factores presentes en el
plasma. La formacin del producto final de esta etapa, la protrombinasa, o activador de la
protrombina, puede conseguirse a travs de la activacin de dos vas o sistemas: el sistema
intrnseco o el sistema extrnseco. El sistema intrnseco o endgeno recibe este nombre
debido a que todos los factores necesarios para su activacin se encuentran en la sangre
circulante, mientras que el sistema extrnseco o exgeno, que representa un cortocircuito o
va rpida, requiere para su activacin el concurso de un complejo lipoproteico liberado a
partir de los tejidos lesionados (tromboplastina tisular). Ambos sistemas son
complementarios y necesarios para la hemostasia fisiolgica.
2.
Formacin de la trombina a partir de la protrombina. La intensidad con que la
protrombina, presente siempre en la sangre, es transformada la trombina depende
fundamentalmente de la cantidad del correspondiente activador ("protrombinasa") formado
en la etapa precedente. Para esta reaccin, as como para algunas de la etapa precedente, es
imprescindible la presencia de iones calcio.
3.
Conversin de fibringeno en fibrina. En esta etapa, la trombina hidroliza de
manera selectiva cuatro enlaces peptdicos correspondientes a sendos polipptidos del
fibringeno y determina la conversin de esta molcula en un monmero soluble de
fibrina. Esta relacin es inhibida por la heparina.
4.
Condensacin o polimerizacin de la fibrina. Las molculas o monmeros de
fibrina se unen unas con otras a travs de sendos enlaces peptdicos y constituyen un
retculo o malla de fibrina insoluble que aprisiona en su interior el plasma y los elementos
formes de la sangre. Esta etapa es asimismo inhibida por la heparina.
5.
Retraccin del coagulo. Los haces o filamentos de fibrinas se doblan o retraen
adhiriendose unos a otros, reduciendo el volumen del cogulo y exprimiendo un lquido
claro que constituye el suero. Esta reaccin empieza pocos minutos despus de la
formacin del cogulo y se completa al cabo de unas horas.
En la figura 12 se representa un esquema general del proceso de la coagulacin
diferenciando los dos sistemas de activacin, intrnseco y extrnseco. En esta figura se
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indican los distintos factores de la coagulacin con la respectiva designacin, a base de


nmeros romanos, recomendada por el Comit Internacional sobre Factores de la
Coagulacin, establecido en 1954. La numeracin de los distintos factores no guarda
relacin alguna con su posicin en la secuencia de reacciones del proceso de la
coagulacin y obedece simplemente al orden con que fueron descubiertos.
2.
MATERIAL
Etanol 96
Algodn hidrfilo estril
Tiritas
Sistema para puncin venosa (Vacutainer) con agujas estriles y desechables
Centrfuga
Disolucin de heparina al 1%
Disolucin de cloruro clcico 0.025 M
Disolucin de tromboplastina-calcio
Mezclar a partes iguales, tromboplastina tisular y cloruro clcico 0,025 M
Mezcla de fosfolpidos, equivalente a los fosfolpidos liberados por los trombocitos
(cefaloplastina activada)
Sistema amortiguador de Michaelis, a pH 7,35.
Disolucin recalcificante, constituida por:
Cloruro clcico 0,40 g
Cloruro sdico 8,00 g
Agua destilada c.s.p. 1,000 ml
Disolucin de trombina:
10 unidades NIH/ml en tampn de Michaelis (pH 7,35)
Vaso con hielo y agua
Bao de agua a 37C
Tubos de hemlisis
Gradilla para tubos
Pipetas
Cronmetro
EXTRACCION DE LA SANGRE VENOSA:
Para todas las pruebas que hay que realizar en esta prctica se requiere un mnimo de
sangre que se extrae por medio de puncin venosa, a nivel de la vena antecubital del brazo.
La sangre se extrae por medio de dos tubos que se conectan sucesivamente a la aguja de
puncin. Ambos tubos contienen citrato sdico, o EDTA, como anticoagulante. Finalizada
la extraccin, se mezcla cuidadosamente la sangre con el anticoagulante evitando la
formacin de espuma.
Procedimientos para la puncin venosa
1.
Disponer sobre la mesa todos los elementos necesarios para la puncin: aguja,
soporte de plstico para la aguja, tubos de extraccin, algodn hidrfilo, alcohol,
torniquete, tiritas, etc.
2.
Localizar la vena ms adecuada para la puncin.
3.
Colocar el torniquete alrededor del brazo, por encima del repliegue del codo.
4.
Por medio de un trozo de algodn impregnado en alcohol, limpiar la piel
correspondiente a la zona de la puncin.
5.
Una vez evaporado el alcohol, puncionar la vena introduciendo la aguja con el bisel
dirigido hacia arriba.
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6.
Aflojar el torniquete.
7.
Sosteniendo con firmeza el soporte de plstico, presionar el tubo contra el extremo
posterior de la aguja hasta conseguir que sta perfore el tapn de goma; el tubo se va
llenando de sangre debido a la succin producida por el vaco que existe en la cmara o
tubo de extraccin.
8.
Retirar el tubo cuando ste se haya llenado casi por completo de sangre e invertirlo
inmediatamente con objeto de conseguir la mezcla del anticoagulante con la sangre.
Siguiendo el procedimiento indicado, llenar un segundo tubo de sangre.
9.
Retirar el torniquete
10.
Retirar la aguja juntamente con el soporte de plstico
11.
Colocar un trozo de algodn sobre el punto de la puncin, secar la sangre que pueda
fluir y aplicar, por ltimo, una tirita sobre la zona.
El primer tubo contiene tromboplastina tisular, arrastrada por la sangre al salir de la vena.
Se utilizar para estudiar el efecto de la temperatura sobre el tiempo de coagulacin.
El segundo tubo se centrifuga inmediatamente a 3.500 revoluciones por minuto durante 20
minutos. De esta manera se constituye en la parte superior del tubo un medio lquido libre
de plaquetas, el cual es transferido por medio de una pipeta de Pasteur, a un tubo de
hemlisis (aspirar slo las tres cuartas partes superiores del volumen plasmtico).
A travs de los procedimientos indicados han sido eliminados del plasma una serie de
elementos necesarios para la coagulacin de la sangre:
1.
La tromboplastina tisular por arrastre con los primeros milmetros de sangre
extrada en el primer tubo.
2.
Los factores plaquetarios y los fosfolpidos (aportados normalmente in vivo por los
trombocitos) por centrifugacin.
3.
Los iones calcio por combinacin con el citrato sdico, o el EDTA, (quelacin).
La mayora d pruebas empleadas en el estudio de la coagulacin sangunea intentan
reproducir in vitro lo que con toda probabilidad sucede in vivo, controlando de manera
precisa las condiciones del proceso y reduciendo a un mnimo el nmero de variables.
Entre las pruebas de laboratorio destacan; el tiempo de coagulacin, que estudia el proceso
general de la formacin del cogulo sanguneo; la prueba o tiempo de Quick, que nos
permite detectar alteraciones o deficiencias en el sistema extrnseco, y la prueba de la
cefalina, que nos permite descubrir alteraciones o deficiencias en la serie de reacciones que
integran el sistema intrnseco.
Factores que afectan el proceso general de la coagulacin
Para ello se utiliza la sangre obtenida en el primer tubo de extraccin, desprovisto de iones
calcio (eliminados por combinacin con el citrato sdico o EDTA). Se transfiere 1 ml de
esta muestra de sangre a cada uno de los cuatro tubos de hemlisis preparados al efecto.
Dos de estos tubos se colocan en un bao de agua a 37C, se deja un tercero a temperatura
ambiente y el cuarto se coloca en un bao con agua y hielo.
Cuando la temperatura de la sangre se ha equilibrado ya con la del medio respectivo,
adicionar 0,1 ml de Cl2Ca 0.025 M a todos los tubos, excepto a uno de los mantenidos en el
bao de agua caliente. A partir de este momento determinar el tiempo de coagulacin en
cada uno de ellos inclinando los tubos a intervalos regulares. El proceso de la coagulacin
se considera completo cuando los tubos pueden invertirse por completo y no se observa
prdida o deslizamiento de lquido por las paredes.
Adicionar heparina al tubo mantenido en el bao de agua caliente y cuyo contenido
permanece todava lquido. A continuacin, hay que aadir 0,1 ml de Cl 2Ca 0,025 M,
incubar a 37C y determinar el tiempo de coagulacin.
Tiempo de Quick:

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El tiempo de Quick mide en realidad la velocidad con que se forma trombina a partir de
protrombina en presencia de los factores V, VII y X. Conocida tambin con la
denominacin de "tasa de protrombina", esta prueba constituye un ndice de la intensidad
de formacin de la trombina a travs del sistema extrnseco de activacin.
En un tubo de cristal (tubo de hemlisis), introducido previamente en un bao de agua a
37C, depositar 0,1 ml de plasma. Incubar durante unos 2 minutos, tiempo necesario para
alcanzar el equilibrio trmico, y a continuacin adicionar 0,2 ml de la disolucin de
tromboplastina-calcio. Simultneamente, poner en marcha el cronmetro y agitar
suavemente el tubo para conseguir la mezcla de los distintos componentes. Detener el
cronmetro en el momento exacto en que se observe la aparicin del cogulo de fibrina y
determinar el tiempo transcurrido desde el momento en que se adicion la tromboplastina.
Repetir la prueba empleando un plasma control. (De hecho, la prueba debe realizarse por
duplicado tanto para el plasma control como el plasma objeto de estudio.)
El tiempo de protrombina para el plasma normal se establece habitualmente en 14
segundos, siempre que para realizar la prueba se utilice un extracto tisular de suficiente
actividad. Un tiempo de protrombina comprendido entre 12 y 15 segundos se considera
normal e indica que el plasma estudiado posee un sistema extrnseco adecuado. Un
alargamiento del tiempo de protrombina obedece a un dficit en alguno de los factores del
sistema extrnseco o exgeno (factores VII, V, X y II) o bien a una concentracin de
fibringeno en plasma inferior a 100 mg%. El tiempo de protrombina es tambin superior a
lo normal en presencia de inhibidores de la coagulacin, como ocurre en el caso del
tratamiento con heparina o en el lupus eritematoso.
Prueba de la cefalina
El tiempo necesario para conseguir que un plasma recalcificado llegue a formar un cogulo
de fibrina en presencia de una cantidad adecuada de fosfolpidos constituye el denominado
tiempo o prueba de cefalina. (Esta prueba se conoce tambin con el nombre de tiempo de
tromboplastina parcial.) Esta prueba mide la actividad de los factores plasmticos
implicados en el sistema intrnseco de formacin de protrombinasa, reemplazando a los
factores plaquetarios por la mezcla de fosfolpidos y actuando como factor de activacin
inicial el contacto con la superficie de cristal de los tubos empleados.
En un tubo de hemlisis, colocado previamente en un bao de agua a 37C, depositar:
0,1 ml de plasma desprovisto de plaquetas
0,1 ml de tampn de Michaelis a pH 7,35
0,1 ml de la dispersin de fosfolpidos
Mezclar bien los distintos constituyentes e incubar la mezcla a 37C durante 5 minutos. A
continuacin aadir 0,1 ml de cloruro clcico 0,025 M y al propio tiempo, poner el
cronmetro en marcha. Agitar ligeramente el tubo para asegurar la mezcla del contenido y
dejarlo en reposo durante 30 segundos. A partir de este momento observar con atencin el
tubo y parar el cronmetro en el momento en que aparezca el cogulo formado.
Proceder de manera anloga con una muestra de plasma control.
El tiempo de cefalina de un plasma normal vara entre 40 y 60 segundos segn el reactivo
empleado. Los plasmas cuyo tiempo de cefalina supere en menos de 8-10 segundos al del
plasma control se consideran como normales, indicando la existencia de un sistema
intrnseco de activacin adecuado. Un tiempo de cefalina alargado indica un defecto en el
sistema intrnseco de activacin (factores XII, XI, IX, VIII, X y II), una concentracin
disminuda de fibringeno o la presencia de inhibidores de la coagulacin, como la
heparina, anticuerpos frente a los factores VIII o IX, etc. (El factor VII no puede ser
evaluado por medio de esta prueba.)
Transformacin del fibringeno en fibrina

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En esta relacin se trata de observar la intensidad con que fibringeno se trasnforma en


fibrina por efecto de un exceso de trombina.
En un tubo de ensayo, se depositan:
10 ml de la disolucin recalcificante
0,5 ml de la disolucin de trombina
1 ml de plasma
Agitar ligeramente el tubo para asegurar la mezcla de los distintos componentes y colocar
una pipeta Pasteur en el centro del tubo. Incubar la mezcla en el bao de agua a 37C
durante unos minutos y observar la masa de fibrina formada.

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RION Y MEDIO INTERNO


1.
INTRODUCCION:
La funcin primordial de los riones es la de mantener una adecuada y estable
composicin del medio interno. El rin lleva a cabo esta funcin controlando el volumen
y la composicin del plasma; como resultado de esta actividad reguladora, el rin excreta
un lquido, orina, constitudo fundamentalmente por agua en la cual van disueltas una serie
de sustancias de pequeo peso molecular (productos metablicos, sustancias extraas,
elementos inorgnicos, compuestos en exceso, etc.). El rin es el rgano a travs del cual
son excretados la mayor parte de los compuestos no voltiles y el guardin ltimo que
garantiza la estabilidad y conservacin del medio interno.
Del punto de vista estructural y funcional, el rin est constitudo por un gran nmero de
pequeas unidades que reciben el nombre de nefronas. Cada nefrona puede ser dividida en
dos partes perfectamente diferenciadas: una de carcter vascular, el glomrulo, y otra de
carcter epitelial, el tbulo renal. El tbulo renal presenta tres segmentos: un tbulo
contorneado proximal, un segmento delgado o asa de Henle y un tbulo contorneado distal,
que desemboca en un tubo colector. Cada rin posee ms de 1 milln de nefronas,
alcanzando cada una de ellas una longitud total de 4 a 5 cm, por lo que los tbulos de cada
rin alcanzan en conjunto una extensin superior a los 50 km.
La orina resulta de la actuacin de tres procesos fisiolgicos: filtracin, reabsorcin y
secrecin. A medida que atraviesa los glomrulos, se produce la filtracin de la sangre a
travs de la membrana glomerular debido, en parte, a la existencia de un gradiente de
presin entre las arteriolas renales y la cpsula de Bowman. El anlisis del filtrado
glomerular indica que su composicin es similar a la del plasma, excepto por la prctica
inexistencia de protenas, presentes solamente en pequesima concentracin. El filtrado,
constitudo por agua, sales, glucosa, aminocidos, sustancias de desecho, etc., recorre el
tbulo renal, donde la mayora de las sustancias son parcial y selectivamente reabsorbidas
y restituidas a la sangre. Por otra parte, a nivel de ciertos segmentos del tbulo, las clulas
epiteliales segregan productos residuales o en exceso desde los capilares sanguneos a la
luz tubular. La accin combinada de estos tres procesos da lugar a la formacin de un
lquido, distinto del filtrado glomerular, constituido fundamentalmente por agua, en la cual
estn disueltos unos 50 g de soluto, principalmente sales y derivados nitrogenados no
proteicos. El volumen de orina excretado oscila, en condiciones normales entre 1,100 y
1,500 ml por da.
La funcin renal est bajo el control de varios compuestos de carcter hormonal, entre los
cuales destacan la hormona antidiurtica o vasopresina y la aldosterona.
La hormona antidiurtica mantiene el volumen de lquido corporal, as como su
osmolaridad, dentro de estrechos lmites compatibles con el adecuado funcionamiento del
organismo en conjunto. Cuando la osmolaridad de la sangre aumenta en un 1% se
incrementa la secrecin de hormona antidiurtica y el rin reabsorbe mayor cantidad de
agua, como consecuencia la concentracin osmtica del plasma tiende a normalizarse y el
volumen de orina excretada se reduce. Por otra parte, la ingesta de una gran cantidad de
agua, que es absorbida rpidamente por el intestino, da lugar a la dilucin de la sangre, lo
cual frena o inhibe la secrecin de hormona antidiurtica; a consecuencia de ello, el rin
reabsorbe menor cantidad de lquido, corrigindose la dilucin del plasma, el individuo
excreta un mayor volumen de orina, de menor densidad o peso especfico. Dentro de
ciertos lmites, cuanto mayor sea la dilucin del plasma, ms profusa ser la diuresis.

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La reduccin de la osmolaridad del plasma es detectada por diversos osmorreceptores,


situados en el encfalo, a nivel de los cuales se originan impulsos que dan lugar a una
disminucin en la cantidad de hormona antidiurtica segregada por la hipfisis. Por
medio de la inyeccin selectiva de disoluciones hipertnicas en distintos territorios
vasculares. Verney descubri la presencia de osmorreceptores a nivel del hipotlamo,
muy cerca del lugar de produccin de la hormona antidiurtica. Otros investigadores, por
medio del anlisis de los registros electroencefalogrficos obtenidos en condiciones de
activacin osmtica, confirmaron los hallazgos de Verney.
En estrecho contacto, pero distintos de los osmorreceptores para la hormona
antidiurtica, se encuentran los denominados osmorreceptores para la sed, los cuales
responden tanto a la estimulacin elctrica directa como a la de disoluciones
hipertnicas. La estimulacin elctrica de ciertas reas del hipotlamo en la cabra da
lugar a la ingestin de una asombrosa cantidad de agua, con lo cual el animal alcanza un
considerable grado de sobrehidratacin (puede llegar a retener hasta un 40% ms de
agua). La estimulacin simultnea o concurrente de los osmorreceptores para la sed y de
los osmorreceptores para la hormona antidiurtica da lugar a que el individuo ingiera
agua y, a la vez, orine menos.
En otras circunstancias, sin embargo, se observa una accin antidiurtica en ausencia de
variaciones importantes en la osmolaridad del plasma. As, la reduccin de la volemia,
por una hemorragia, por ejemplo, da lugar a un aumento en la secrecin de hormona
antidiurtica y la retencin de agua; lo mismo ocurre despus del ortostatismo
prolongado o la respiracin bajo presin positiva. En todas estas situaciones disminuye la
presin venosa central, lo cual provoca la estimulacin de los denominados receptores de
volumen (sensibles a la distensin) situados en las paredes de las aurculas. La
estimulacin de dichos receptores da lugar a un aumento en la secrecin de hormona
antidiurtica. La distensin de la pared auricular por medio de balones de plstico o
cuando aumenta en el flujo de orina por reduccin en la secrecin de hormona
antidiurtica.
La hormona antidiurtica, liberada en respuesta a un aumento en la osmolaridad del
plasma o a una reduccin de la volemia, aumenta la permeabilidad al agua de los tbulos
contorneados distales y de los tbulos colectores. La hormona antidiurtica determina un
aumento en el tamao o en el nmero de poros a travs de los cuales el agua pasa, por
smosis, desde la luz tubular al espacio peritubular y de aqu a los vasos sanguneos. La
reabsorcin facultativa de agua, ligada a la reabsorcin metablicamente activa de iones
sodio, es lo que determina en ltima instancia, el volumen de orina excretado y su
concentracin.
Los enfermos afectos de diabetes inspida pueden llegar a excretar 5, 10 hasta 20 l de
orina al da. Estos pacientes presentan lesiones a nivel del hipotlamo o de la hipfisis
posterior con un dficit en la secrecin de hormona antidiurtica o vasopresina. Sin el
efecto regulador de dicha hormona, el agua fluye literalmente a travs del sistema
urinario y el paciente se pasa la vida entre el lavabo y la cocina o el bar; a pesar de estos
inconvenientes, el individuo permanece adecuadamente hidratado.
Las alteraciones en la funcin de la parte distal de la nefrona y de los tubos colectores
provocan la prdida de la capacidad para concentrar la orina por parte del rin. En una
persona normal, cuando se reduce la ingesta de lquido, los riones elaboran orina de
peso especfico del orden de 1.030 o superior. El rin deficiente, por el contrario, es
incapaz de concentrar la orina y excreta un lquido cuyo peso especfico es, como
mximo igual al del ultrafiltrado del plasma.
2.

MATERIAL:
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Prcticas de Fisiologa

3.

Para cada grupo de participantes activos:


Agua corriente potable (una botella de 1 l)
Agua destilada
Cpsulas con 1,5 g de cloruro sdico
Disolucin de bicarbonato sdico al 0,4 %
Paquete de cigarrillos
Whisky, Vodka, Ron u otra bebida con un elevado contenido de etanol.
Vasos para bebida
Recipientes para la recogida de orina (vasos de precipitado o de plstico)
(numerados y agrupados en series de 7 cada una)
Probetas graduadas de 100 ml de capacidad
Densmetros para orina (urinmetros)
Tiras de papel indicador de pH
Gradilla para tubos de ensayo
Tubos de ensayo
Termmetro para lquidos
PROCEDIMIENTO:

Es conveniente dejar de ingerir alimentos o bebidas 2 horas antes de iniciar la prueba.


Una vez llegados al laboratorio, los participantes en el experimento se dividen en 7 grupos:
Los miembros del grupo A ingieren 10 ml de agua potable por kilogramo de peso.
Los miembros del grupo B ingieren 5 ml de agua por kilogramo de peso y adems, 5
cpsulas de cloruro sdico.
Los miembros del grupo C ingieren 5 ml de la disolucin de bicarbonato sdico al 0.4%
por kilogramo de peso.
Los miembros del grupo D ingieren 10 ml de agua por kilogramo de peso y adems, 50 ml
de Whisky.
Los individuos del grupo E fuman un cigarrillo cada media hora durante el perodo de
tiempo que dure la prueba, despus de haber ingerido 10 ml de agua por kilogramo de
peso.
Los individuos del grupo F realizan un ejercicio intenso durante 5 minutos (p.ej, subiendo
y bajando las escaleras a la mxima velocidad posible).
Los miembros del grupo G no ingieren lquido alguno y sirven de control.
De esta prctica deben excluirse, como sujetos activos, los estudiantes que presenten
problemas circulatorios o renales y los que estn sometidos a una dieta de restriccin
salina. Los componentes del grupo B que experimenten alguna molestia (nuseas,
calambres, etc. ) deben interrumpir el experimento.
Recogida de las muestras de orina
Antes de comenzar el experimento, todos los participantes deben vaciar vejiga guardando
esta muestra de orina como control.
En el momento de iniciar la prueba se pone en marcha el cronmetro y cada grupo sigue la
pauta indicada en el apartado anterior. A partir de este momento se recogen muestras de
orina cada 30 minutos (sino se producen suficiente cantidad de lquido, se espera al
prximo perodo para recoger la correspondiente muestra).
ANALISIS DE LAS MUESTRAS DE ORINA
En cada muestra de orina se determinan los siguientes parmetros:

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Prcticas de Fisiologa

Volumen
Peso especfico
pH

Volumen de orina
Transferir la orina recogida en cada perodo a una probeta graduada y medir el volumen de
lquido excretado. Expresar los resultados en un grfico en forma de ml de orina formada
por minuto y en relacin con el volumen total de orina producida (valor acumulativo).
Peso especfico
Introducir el urinmetro o densmetro en la probeta de manera que, cuando est en reposo,
flote sobre el lquido sin tocar las paredes del recipiente. Leer directamente el valor
indicado en la escala del dispositivo (tomar como cifra correcta la correspondiente a la
interseccin de la parte inferior del menisco lquido con la varilla del densmetro): La cifra
obtenida debe incluir tres decimales.
Comprobar la calibracin del hidrmetro o urimmetro introduciendo el instrumento en
agua destilada, cuya densidad a 4 C es igual a 1.000; corregir por medio de adicin o
sustraccin, el error de calibracin.
Si el volumen de orina es insuficiente para conseguir la flotacin del densmetro, aadir un
volumen igual de agua destilada a la muestra de orina. Para determinar el peso especfico
de la muestra original, hay que duplicar las cifras correspondientes a los decimales del
peso especfico de la muestra diluida. As, un valor de 1.020 para la muestra diluida
corresponde a un peso especfico de 1.040 para la muestra original.
Comprobar la temperatura de la muestra de orina contenida en la probeta. Si la temperatura
de la muestra es distinta a la temperatura de calibracin del instrumento, hay que proceder
a una pequea correccin; por cada grado de diferencia entre la temperatura de calibracin
y la de la muestra es necesario aadir o sustraer, en su caso, 0,001 unidades a la cifra de
densidad leda en el aparato. Expresar los resultados en el grfico adjunto.
Se entiende por peso especfico la relacin entre el peso de una sustancia o disolucin y el
de un volumen idntico al agua a la misma temperatura. El peso especfico guarda una
relacin directa, pero no proporcional, con el nmero de partculas en disolucin. Dado que
cada tipo de sustancia eliminada por la orina contribuye de forma distinta al peso
especfico de la muestra, esta medida no refleja, con la misma exactitud con que lo hacen
las determinaciones de la osmolaridad, el nmero total de partculas por unidad de
volumen.
No obstante, habida cuenta que constituye un procedimiento sencillo y prctico, la
determinacin del peso especfico de la orina resulta de gran utilidad clnica.
El peso especfico de la orina est en relacin con la cantidad y calidad de los alimentos
consumidos, cantidad de lquido ingerido y excretado, estado metablico, ambientales, etc.
El peso especfico oscila habitualmente entre 1,015 y 1,025 (300-900 mOsm/1), pudiendo
alcanzar en determinadas situaciones valores extremos comprendidos entre 1 001 y 1,040
(50 mOsm/1 y 1.400 mOsm/1).
La excrecin de 1 l de agua debe realizarse en condiciones normales, en un perodo de
tiempo inferior a 3 horas. El peso especfico de la muestra ms voluminosa debe ser
alrededor de 1.002. En caso de insuficiencia renal, la excrecin de este volumen de lquido
requiere mucho ms tiempo, al paso que el peso especfico de la orina muestra valores
relativamente altos (alrededor de 1.010) equivalentes al del plasma desprovisto de
protenas.

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Prcticas de Fisiologa

Clculo de la concentracin de solutos


La cantidad de soluto presente en la muestra de orina puede ser estimada a partir del peso
especfico de la muestra, empleando el denominado coeficiente de Long. Los gramos de
soluto excretado por litro de orina se calculan multiplicando las dos ltimas cifras
decimales del peso especfico por el factor 2.66.
Una muestra de orina de 24 horas, cuyo peso especfico es de 1,020 y cuyo volumen total
es de 1.000 ml contiene una cantidad de soluto igual a 20 x 2.66 =53.2 g/l/24 horas.
Concentracin de iones hidrgeno (pH) de la orina
La concentracin de iones hidrgeno de la orina puede oscilar entre amplios lmites. El pH
de la orina est habitualmente alrededor de 6, pero puede alcanzar valores comprendidos
entre 4.8 y 8.0 en funcin sobre todo, del tipo de dieta seguida por el individuo.
Para determinar, de manera aproximada, el pH de las distintas fracciones de orina
obtenidas a lo largo de la prueba, hay que introducir el extremo coloreado de la tira de
papel indicador en la muestra correspondiente, comparar las bandas de color formadas con
las del patrn reproducido en el dorso de la caja y estimar el valor correspondiente.
Hay que comparar la relacin de la orina de una persona sometida a un rgimen
alimenticio mixto o, fundamentalmente, crnico con la de otra persona sometida a un
rgimen vegetariano durante 1 da (o con la de un animal herbvoro como el conejo, el
caballo, etc.) La primera presenta una reaccin cida y la segunda, reaccin alcalina. La
acidez de la orina producida bajo la accin de un rgimen crnico es debida a la presencia
de fosfatos cidos y de sales de compuestos orgnicos de carcter cido (uratos, hipouratos,
etc.). La alcalinidad de la orina de los herbvoros es debida a su riqueza en sales del cido
carbnico, de carcter bsico.
Apuntar los valores obtenidos de cada muestra en grficos y tablas.
Aspectos organolepticos
La orina presenta habitualmente un color pajizo claro o ambarino (amarillo mbar) debido,
fundamentalmente, a la presencia de urobilingeno, uno de los productos resultantes de la
degradacin metablica del grupo hemo, constituyente prosttico de la hemoglobina.
El color de la orina puede variar en diversas circunstancias. La orina casi incolora es
debida, normalmente, a la dilucin de los pigmentos provocada por la excrecin de una
gran cantidad de agua. En caso de diabetes inspida, en los cuales falla la reabsorcin de
agua por la parte distal de los tbulos renales, el paciente puede eliminar 5, 10 hasta 15 l
de orina, extremadamente diluda y clara por da.
La orina de aspecto turbio o lechoso puede obedecer a la presencia de gotitas de grasa, pus,
bacterias, etc.
La orina de color rojizo sugiere la presencia de derivados del grupo hemo, como la
uroporfirina, la uroeritrina, la propia hemoglobina, etc. Dichos compuestos pueden
aparecer en la orina como consecuencia de hemorragias internas, o un shock traumtico, o
en casos de porfirina congnita (estado patolgico caracterizado por una orina de color
vinoso).
La orina adquiere un color amarillo caf o amarillo verdoso cuando contiene pigmentos
biliares, como ocurre en casos de ictericia.
La orina puede presentar otros colores, correspondiendo a situaciones patolgicas,
alteraciones metablicas o la ingesta de productos extraos.
Observar el color y la transparencia (transparente, turbia, opaca) de las muestras de orina y
anotarlos.

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VALORACION DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN CADA PRUEBA


Despus de la ingestin de una bebida o refresco, el agua es absorbida rpidamente por las
clulas del intestino delgado. Esto da lugar a una dilucin de la sangre, que, detectada por
los osmorreceptores ubicados, fundamentalmente, en el hipotlamo, provoca una reduccin
en la cantidad de hormona antidiurtica segregada por la hipfisis posterior o
neurohipfisis. En respuesta a esta disminucin de hormona antidiurtica; los riones
reabsorben menor cantidad de agua y, en consecuencia, aumenta el volumen de orina
excretado por unidad de tiempo; al propio tiempo, la orina formada presenta una densidad
o peso especfico inferior. Dentro de ciertos lmites, cuanto mayor es la dilucin en la
sangre, ms profusa es la diuresis.
Cuando se ingieren disoluciones hipertnicas o, como en este caso, sal comn, los
osmorreceptores son estimulados intensamente y, a travs de un incremento en la seccin
de hormona antidiurtica, se reabsorbe mayor cantidad de agua a nivel del tbulo distal y
del tubo colector y se elimina menor volumen de orina, de peso especfico superior. La
vida media de la hormona antidiurtica es de alrededor de unos 10 minutos, siendo
metabolizada principalmente en el hgado y los riones.
El etanol inhibe la secrecin de hormona antidiurtica, por lo que la ingestin de cerveza,
vino o bebidas alcohlicas de graduacin superior, como brandy, ginebra, ron, whisky, etc.,
da lugar a un notable incremento de la diuresis. Por otra parte, diversas sustancias, entre las
que se encuentra la nicotina, favorecen la liberacin de hormona antidiurtica; por esta
razn, despus de fumar dos o tres cigarrillos se observa una importante reduccin en el
volumen de orina excretado.
A partir de los resultados obtenidos, hay que estimar el tiempo requerido para conseguir
eliminar completamente las disoluciones ingeridas por los distintos grupos de participantes
en la prueba. Al realizar esta valoracin, debe tenerse en cuenta que, en condiciones
ordinarias, la velocidad de formacin de la orina es de, aproximadamente, 1 ml/kg/hora.

REGULACION DE pH DE LOS LIQUIDOS CORPORALES


1.

INTRODUCCION:

La regulacin de iones H es uno de los mecanismos ms importantes de los que


intervienen en el mantenimiento de un medio interno constante, ya que pequeas
variaciones en la concentracin de iones H, afectan notablemente la velocidad de
las reacciones enzimticas. En la regulacin de pH de los lquidos corporales y la
sangre intervienen diferentes sistemas. La sangre posee sistemas buffer que pueden
regular las variaciones en la concentracin de iones H en fracciones de segundo. El
sistema respiratorio puede regular las variaciones de pH en un perodo que oscila
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

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entre 1 y 15 min. Por ltimo, el rin necesita desde varias horas a varios das para
regular el pH, sin embargo, es el mecanismo de mayor poder compensatorio.
El sistema respiratorio interviene en la regulacin de pH de la sangre mediante el
aumento o la disminucin de la ventilacin pulmonar.
La ecuacin de Henderson-Hassel balch para el sistema tampn de bicarbonato
plantea:
pH

pK+log
CO2

HCO3-

De esta ecuacin puede deducirse que si aumenta la concentracin de CO 2 el pH


disminuye.
Los centros respiratorios bulbares son muy sensibles a las contracciones de CO 2 e
iones H en la sangre. Cuando el pH baja se estimulan los centros respiratorios,
aumenta la frecuencia y la profundidad de la respiracin y se elimina el exceso de
CO2. Por otra parte, cuando la concentracin de iones H o el CO 2 disminuye, la
frecuencia y profundidad de la ventilacin disminuye, con lo que aumenta la
concentracin de CO2 y la de iones H.
2.
2.1.

MATERIAL:
Reactivos:
Solucin 1 mol/L de ClH
Solucin 1 mol/L de KOH
Solucin de pentobarbital sdico

2.2.

Equipo:
Quimgrafo

2.3.

Material Biolgico:
Rattus rattus

3.
-

METODOLOGIA:
Anestesiar el animal con solucin de pentobarbital sdico a razn de 35
mg/kg de peso corporal.
Fijarlo a la tabla de diseccin con la parte ventral hacia arriba.
Hacer una incisin media torcica y exponer los msculos del trax.
Enganchar un alfiler doblado en V a los msculos de la regin esternal.
Amarrar con un hilo y atarlo por el otro extremo a la palanca de registro.
Registrar los movimientos respiratorios que ocurren durante la respiracin
tranquila, con la ayuda del quimgrafo.
Inyectar por va intraperitoneal 1,5 mL de solucin de ClH 1 mol/L.
Registrar.
Esperar que se restablesca la respiracin normal e inyectar 1 ml de
solucin de KOH 1 mol/L. Registrar.
Repetir la operacin varias veces.

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tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

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FISIOLOGIA DE LOS ORGANOS EXCRETORES


INTRODUCCION:
Los rganos excretores ms evolucionados intervienen de manera activa en el
mantenimiento de un medio interno constante mediante la regulacin de la
concentracin de determinados electrolitos, la osmoloridad y el volumen de los
lquidos corporales. Adems, constituyen una de las vas fundamentales a travs de
las cuales se eliminan los desechos del metabolismo celular. En los rganos
excretores se producen la orina, constituda por diferentes electrolitos y desechos
nitrogenados que en muchos casos se elimina en forma de solucin acuosa.
En el transcurso de la evolucin han surgido diferentes rganos excretores como
son los tbulos de Malpighi, los nefridios y las nefronas, estas ltimas agrupadas en
rganos denominados riones.
La formacin de la orina se realiza por medio de tres procesos fundamentales:
filtracin, secrecin y reabsorcin.
Filtracin: Aparece en aquellos grupos de animales en los que el sistema
cardiovascular es capaz de desarrollar presiones elevadas hidrosttica
proporcionada por la actividad de bombeo del corazn, hace que el contenido de la
sangre, a excepcin de las protenas de alto peso molecular y los elementos formes,
pase hacia los rganos excretores donde sufre modificaciones hasta formar la orina.
Secrecin: se produce mediante el transporte de sustancias de la sangre hacia los
rganos excretores. En aquellos animales que carecen de sistema cardiovascular
desarrollado es el proceso fundamental de formacin de orina. En los tbulos de
Malpighi el fludo tubular se forma por la seccin activa de iones K, el cual arratra
agua. Hacia el interior de los tbulos pueden secretarse de forma pasiva o activa
otros iones inorgnicos, glucosa y rea. Este proceso de formacin de orina se
mantiene an en aquellos rganos excretores que filtran plasma y constituye una
segunda va de eliminar sustancias extraas como son los colorantes vitales,
adems, desechos del metabolismo hormonal e iones inorgnicos. La capacidad de
secretar colorantes vitales permiti a numerosos investigadores estudiar las
caractersticas de los rganos excretores en diferentes especies.
Reabsorcin: Este proceso es, en escencia, similar al de secrecin, pero ocurre en
sentido contrario; se produce mediante el transporte de sustancias, ya sea activo o
pasivo, desde los tbulos hacia la sangre. La reabsorcin costituye una va de
retorno hacia la sangre de sustancias importantes en el organismo como son la
glucosa, los aminocidos, los iones inorgnicos y el agua.
MATERIAL:
2.1. Reactivos:
Ringer insecto
Solucin de indigo carmn 2%
Solucin salina 9 g de ClNa/100 mL de agua

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2.2. Equipo:
Microscopios estereoscpicos
2.3. Material Biolgico:
Periplaneta americana "cucaracha"
METODOLOGIA:
3.1.
Demostracin de la secrecin de indigo carmn en tbulos del Malpighi de
cucarachas:
Inyectar en la cavidad abdominal de tres cucarachas intactas 1,5 ml
de solucin de indigo carmn y esperar 5 min.
Colocar una cucaracha inyectada, con el lado ventral hacia arriba, en
una placa Petri con parafina en el fondo (cortar alas y patas) y fijarla
por medio de alfileres entomolgicos
Retirar con las tijeras toda la cutcula del abdmen, localizar el tubo
digestivo y observar los tbulos de Malpighi que desembocan en el
intestino.
Extraer con las pinzas unos cuantos tbulos y colocarlos sobre el
vidrio reloj con solucin Ringer insecto.
Observar al microscopio si hay acumulacin de colorante en el
interior de los tbulos.
Repetir la operacin con la segunda cucaracha a los 10 min. de
inyectada y luego con la tercera a los 20 min. Anotar.
3.2.
-

Osmorregulacin:
Utilizar tres grupos de alumnos:
a.
Grupo control de que toma 100 mL de agua fra.
b.
Grupo que toma solucin hipertnica: 9 g de ClNa/100 mL
de agua.
c.
Grupo que toma solucin hipotnica: 1000 mL de agua fra.
Todos los alumnos deben vaciar la vejiga antes de comenzar
la experiencia.
Colectar la orina de los tres grupos a los 20, 40, 60 y 80 min. de
comenzada la experiencia. Si se puede extender a 120 min. De cada
muestra anotar el volumen y la densidad.
Construir curvas relacionando los valores de densidad y volumen de
la orina contra tiempo en individuos normales, que tomaron solucin
hipotnica e hipertnica. Discutir los resultados.

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SISTEMA ENDOCRINO EN INSECTOS


1.
INTRODUCCION:
El sistema endocrino de los insectos alcanza un alto grado de desarrollo. Posee
todos los elementos que se encuentran en los vertebrados: clulas neurasecretoras,
rganos neurohemales y glndulas endocrinas de origen no nervioso. Las clulas
neurosecretoras se encuentran fundamentalmente en el protocerebro y en el ganglio
subesofgico, aunque tambin aparecen dispersas en la cadena nerviosa ventral. El
rgano neurohemal ms desarrollado lo constituye corpora cardiaca, a las cuales en
algunas rdenes de insectos se les contribuye, adems, funcin glandular. Los elementos
endocrinos de origen no nervioso estn representados por corpora allata y las glndulas
ecdisiales.

En los insectos se secretan hormonas de naturaleza peptdica,


principalmente por las clulas neurosecretoras y de naturaleza esteroide por corpora
allata y las glndulas ecdiciales. Todas estas hormonas intervienen en el control del
crecimiento, el desarrollo y la reproduccin.
Componentes del sistema endocrino de los insectos:
Las agrupaciones ms importantes de clulas neurosecretoras se encuentran
en el gnglio ceflico, en la regin del protocerebro, en una zona denominada para
intercerebralis.
Los axones de las clulas que se encuentran en esta zona se decusan, forman
un quiasma y salen del ganglio ceflico formando dos nervios denominados corpori
cardiaci I. Los axones de las clulas neurosecretoras que se encuentran situadas
lateralmente a la zona de para intercerebralis, viajan sin decusarse en forma de dos
nervios denominados corpori cardiaci II. Mediante estos dos pares de nervios las
neurohormonas llegan a corpora cardiaca. El conjunto formado por corpora
cardiaca y allata se conoce como el complejo retrocerebral y presenta diferentes
caractersticas morfolgicas segn la especie.
Las clulas neurosecretoras y corpora cardiaca pueden distinguirse por su
color azul plido. La localizacin de las glndulas ecdisiales es distinta en los
diferentes rdenes de insectos. Estas glndulas excepto en los apterigotas
desaparecen en la etapa adulta.
2.

MATERIAL:
2.1. Reactivos:
Eter etlico
Ringer insecto
Fijador de Bouin acuoso
2.2.
2.3.

Equipo:
Microscopio estereoscopio
Material Biolgico:
Periplaneta americana
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

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Spodoptera frugiperda (larva)


3.

METODOLOGIA:
3.1. Componentes del sistema endocrino de insectos:
Fijar el insecto (cucaracha o larva) a la placa Petri previamente
anestesiado con ter; No daar la regin ceflica. Sumergirlo en
solucin Ringer insecto.
Desgarrar la membrana del cuello y localizar el ganglio ceflico.
Observar que para intercerebralis presenta un color azuloso ms
claro tpico de la neurosecrecin.
Localizar los nervios corpori cardiaci I y moverlos con la pinza. Se
ver que corpora cardiaca (rgano neurohemal) presenta la misma
coloracin que las clulas neurosecretoras. En lepidpteros corpora
cardiaca son dos rganos independientes y en cucarachas estn
fusionadas.
Practicar en la larva de lepidptero una incisin media dorsal a todo
lo largo de la regin torcica. Aadir unas gotas de fijador de Bouin
acuoso y se observar sobre los primeros troncos traqueales
transversos (detrs de la cpsula ceflica), unas estructuras en forma
de racimos de uvas que son las glndulas ecdiasiales.
3.2.
-

Control endocrino de la metamorfosis:


Dividir las larvas en dos grupos: un grupo se opera y el otro queda
como control.
Anestesiar las larvas de S. frugiperda tratando de que no tenga
contacto directo con el ter. No dejarlo en la atmsfera de ter por
un perodo mayor de 5 min.
Colocar el insecto anestesiado en la placa Petri con parafina.
Sumergir la larva fijada en Ringer insecto.
Localizar la membrana del cuello y levantarla con una pinza para
desgarrarla y localizar el ganglio ceflico y los nervios corpori
cardiaci I.
Retirar el complejo retrocerebral por los nervios.
Retirar el insecto de la placa Petri, secarlo y mantenerlo en una placa
Petri limpia.
Suministrarle el alimento(hojas de maz)a las 24 h
Cambiar el alimento diariamente.
Revisar la placa a diario para ver si el animal a mudado.
Comparar el tamao de los animales operados y los controles.
Analizar las alteraciones sobre la metamorfosis.

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ELECTROENCEFALOGRAMA
INTRODUCCION:
Las clulas del sistema nervioso, al igual que el resto de las clulas de nuestro
organismo, muestran una serie de fenmenos elctricos caractersticos. La corteza cerebral,
constituida por una extensa coleccin de neuronas y clulas de gla, muestra una actividad
elctrica continua, no uniforme, constituida por oscilaciones ms o menos rtmicas de los
potenciales elctricos observables sobre toda la superficie cortical; sobre esta actividad
constante se superponen una serie de respuestas, ms localizadas, constituidas por
potenciales de mayor intensidad que estn asociados al aumento de actividad de los
sistemas receptores. El primer tipo de manifestacin elctrica obedece a potenciales
elctricos originados de manera espontnea, en el sentido de que se desconoce su origen
exacto (potenciales espontneos), mientras que el segundo tipo de actividad corresponde a
potenciales inducidos por una estimulacin de tipo sensorial (potenciales evocados).
Aunque la existencia de potenciales a nivel de cerebro era conocida hace ms de un
siglo, fue el psiquiatra alemn Hans Berger quien, en 1929, demostr haber
conseguido registrar por primera vez la actividad elctrica del cerebro humano
mediante el empleo de electrodos conectados al cuero cabelludo. (Berger estuvo
realizando sus registros en el ms absoluto secreto, durante 5 aos, empleando en
muchos de sus ensayos a su propio hijo, antes de publicar sus observaciones en
1929). El trazado obtenido, constituido por ondas de amplitud y frecuencia
caractersticas, se denomina electroencefalograma (EEG), habiendo sido
demostrada ya por Berger su utilidad como medio para evaluar el estado funcional,
normal o patolgico, del cerebro humano (fig.55).
La actividad elctrica espontnea del cerebro que se observa en un registro
electroencefalogrfico no es debida a la simple adicin de los potenciales de accin
de los millones de neuronas que integran el cerebro; por el contrario, como se
sugieren ciertos datos experimentales, parece que los cambios rtmicos del
electroencefalograma se correlacionan ms bien con oscilaciones de los potenciales
dendrticos de grandes poblaciones neurales, las cuales estaran sometidas a la
regulacin de la formacin reticular, que actuara como marcapaso.
Los potenciales elctricos del cerebro humano son muy dbiles, del orden de los 50
uV (los del corazn son de intensidad aproximadamente diez veces mayor); por
este motivo, dichos potenciales deben ser ampliados considerablemente para poder
ser registrados y analizados. Esto se consigue con el empleo de un aparato especial,
denominado electroencefalgrafo, que permite amplificar las seales elctricas
captadas a nivel de la superficie craneal, a la vez que elimina o filtra los potenciales
elctricos cuya frecuencia no est comprendida dentro de los lmites mostrados
normalmente por la actividad elctrica cerebral.
El registro electroencefalogrfico constituye hoy una tcnica perfectamente
establecida, totalmente inocua para el sujeto explorado, y representa un tipo de
exploracin bsica para el estudio de los pacientes en los que se sospecha una
alteracin enceflica producida por lesin o enfermedad cerebral o por
perturbacioes en el estado general del individuo.
OBJETIVOS
En esta prctica se pretende conseguir los siguientes objetivos:

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1. Comprobar la existencia de actividad bio-elctrica a nivel del cerebro e iniciarse


en las tcnicas del registro electroencefalogrfico.
2. Analizar las principales caractersticas del electroencefalograma normal, en el
adulto.
3. Verificar la importancia y utilidad del electroencefalograma para el diagnstico
y evaluacin de diversos estados patolgicos.
4. Observar la realizacin de las principales pruebas de estimulacin empleadas en
el estudio funcional del sistema nervioso central, comprobando los cambios
inducidos en los potenciales espontneos y la aparicin de diversos tipos de
potenciales evocados.
MATERIAL
El componente bsico del sistema de exploracin es el electroencefalografo,
aparato capaz de detectar, ampliar y registrar las diferencias de potencial existentes
entre dos puntos de la superficie o del interior del crneo o bien entre uno de estos
puntos y un punto o electrodo de referencia. El electroencefalgrafo consta,
esencialmente de los siguientes elementos:
1.
Electrodos de registro
La actividad elctrica del cerebro se explora a nivel del cuero cabelludo por medio
de electrodos metlicos, habitualmente de plata.
2.
Sistema de amplificacin
Los dbiles potenciales recogidos por los electrodos son amplificados por un
dispositivo que, con un mnimo de distorsin, incrementa considerablemente el
tamao de las seales elctricas. Debido a su pequea intensidad, los potenciales
bioelctricos cerebrales podran ser fcilmente eclipsados por potenciales
procedentes de otras fuentes, como la red de suministro elctrico, otros aparatos
elctricos contiguos, potenciales originados a nivel de los msculos del propio
individuo explorado, etc. Con objeto de superar estas limitaciones, el sistema de
amplificacin est provisto de una serie de circuitos que aumentan las seales que
muestran una diferencia de potencial a nivel de los dos electrodos de registro (no
hay coincidencia de fase entre las seales de entrada), al paso que atenan las
seales elctricas que, con relacin a tierra, presentan el mismo potencial en ambos
electrodos (hay coincidencia de fase en las seales de entrada, dado que ambas
proceden de la misma fuente).
3.
Sistema de filtrado de frecuencias
La frecuencia de las ondas correspondientes a la actividad elctrica cerebral puede
oscilar entre 0.5 y 45 ciclos por segundo. Con objeto de eliminar las interferencias
no deseables, el aparato dispone de un sistema de filtrado que permite solamente el
paso de un espectro de frecuencias comprendidas entre 1 y 35 c/s.
4.
Sistema de inscripcin
Las seales recogidas a nivel del cuero cabelludo y elaboradas por el aparato pasal,
finalmente, a travs de un sistema de galvanmetros, los cuales, de acuerdo con el
potencial recibido, oscilan en grado variable; las oscilaciones o cambios
experimentados por los galvanmetros son transmitidos a sendas plumillas de
inscripcin que se mueven sobre un papel o cinta de registro. El papel de registro se
desplaza a una velocidad constante, prefijada, siendo las velocidades ms utilizadas
en la prctica las de 15 y 30 mm/seg.
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

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PROCEDIMIENTO
Preparacin para el registro
Para que el registro electroencefalogrfico sea de utilidad, es preciso evitar que la
persona que hay que explorar lleve muchas horas sin haber ingerido alimento, dado
que la hipoglucemia relativa puede modificar el patrn encefalogrfico normal.
Asimismo, la exploracin electroencefalogrfica puede ser poco fiable si el sujeto
se halla bajo fuerte tensin mental o emocional, o bien bajo los efectos de sedantes
o tranquilizantes.
Con objeto de evitar artefactos y facilitar el contacto entre el metal y los tejidos, la
piel subyacente al lugar de la aplicacin de cada uno de los electrodos se limpia por
medio de un disolvente de las grasas, con lo cual se arrastra la materia sebcea;
para mejorar la conduccin elctrica se coloca una pequea cantidad de pasta
conductora (constituida habitualmente por una suspensin o gel que contiene
cloruro sdico o potsico) entre la superficie del electrodo y la piel ya limpia. Los
electrodos se mantienen en posicin por medio de un casquete o de una serie de
cintas de goma aplicadas sobre el crneo.
Disposicin de los electrodos
El nmero de electrodos empleados y su colocacin varan en funcin del tipo de
exploracin clnica planteada, as como del propio criterio personal. No obstante,
tiende a seguir una normativa establecida internacionalmente, de manera que pueda
explorarse simtricamente todas las reas cerebrales (fig. 56).
Sobre la superficie cerebral pueden colocarse hasta 32 electrodos distintos, si bien
los utilizados en la exploracin clnica son, habitualmente, los siguientes:
Dos frontales (FPl y FP2)
Dos temporales (T3 y T4)
Dos occipitales (C3 y C4)
Uno a nivel del vrtex (CZ)
El lbulo de la oreja, el cartlago de la nariz o la protuberancia mastoidea son
puntos adecuados para la colocacin de electrodos de referencia.
De acuerdo con el montaje y conexin de los electrodos pueden obtenerse los
siguientes tipos de registro:
1. Registro o derivaciones monopolares en cuyo caso se registra el potencial
elctrico de una zona en relacin con un punto comn indiferente que recibe el
nombre de electrodo de referencia.
2. Registros o derivaciones bipolares obtenidas cuando se registra la diferencia de
potencial existente entre dos electrodos situados en dos zonas bioelctricamente
activas.
OBSERVACION
Si bien esta prctica se centra fundamentalmente en torno al estudio del registro
encefalogrfico de un adulto en estado de vigilia, se analizarn tambin las
caractersticas del EEG durante el sueo.
Vigilia
El estudio de la actividad elctrica cerebral registrada a travs del cuero cabelludo
en un sujeto adulto revela la existencia, en estado de vigilia, de un continuo
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

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aspectro de frecuencias comprendido entre los 4-5 c/s y los 40-45 c/s, frecuencias
que se suceden e intercalan de forma gradual y continua.
La divisin de este espectro de frecuencias, permite distinguir los siguientes tipos
de ritmos electroencefalogrficos (tabla 19 y fig.57)
Ritmo alfa (8-13 c/s)
Se obsesrva nicamente cuando el sujeto est en reposo, inactivo mentalmente y
con los prpados cerrados.
Predomina especialmente en las regiones occipital y frontal, si bien en algunos
adultos se observa en todas las reas.
Ritmo

Frecuencia

Voltaje (ciclos / segundo)

Beta
Alfa
Theta
Delta

14 - 25
8 - 13
4 -7
0.5- 3

5 - 20
10- 150
10- 200
50- 300

(microvoltios)

Se organiza en forma de husos sinusoidales que pueden sufrir oscilaciones de amplitud


(voltaje).
De acuerdo con su distribucin e incidencia, refleja el grado de maduracin neuronal
alcanzado por el individuo.
En muchos mamferos se observa un ritmo parecido, siendo en general ms rpido que
en el hombre.
Ritmo beta (14-25 c/s)
Ms irregular que el ritmo alfa en frecuencia y amplitud, es un ritmo asociado a la
presencia de actividad psicofsica.
En condiciones fisiolgicas se localiza con preferencia en las regiones rolndicocentrales (reas premotoras y sensitivas); raramente difunde a las dems reas
cerebrales, salvo en el caso de administracin de ciertos frmacos.
Corresponde a un ritmo inmaduro, que se observa especialmente en los nios hasta la
edad de 5-7 aos tambin, durante el sueo, en el adulto. Progresivamente, a medida
que el individuo madura, va siendo sustituido por el ritmo alfa.
Se localiza fundamentalmente a nivel de las regiones occipital y, sobre todo, temporal.
La persistencia de ritmo theta a nivel temporal puede observarse en cierto nmero de
adultos jvenes sin que se considere indefectiblemente como patolgica, aunque s
como signo de un moderado dficit madurativo.
Ritmo delta (0,5-3 c/s)
Representa, fundamentalmente, un ritmo de sueo tanto en el adulto como en el nio.
Su aparicin durante el estado de vigilia traduce, casi siempre, una situacin
patolgica.
El electroencefalograma normal, en condiciones de vigilia, en un individuo en reposo,
relajado y con los ojos cerrados, muestra un ritmo alfa, de distribucin algo asimtrica,
que se observa de manera ms marcada en las regiones occipital y parietal. Las
correspondientes ondas muestran oscilaciones espontneas en su amplitud y
desaparecen rpidamente cuando el individuo abre los ojos o fija su atencin en alguna

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

cosa. En los registros correspondientes a la regin frontal se pueden apreciar, adems,


ondas de mayor frecuencia y menor amplitud, correspondientes al ritmo beta.
Sueo
La iniciacin del perodo de somnolencia va asociada a la desaparicin del ritmo alfa,
que es sustituido por frecuencias ms lentas, es decir, por ondas de menor frecuencia y
mediana amplitud.
El sueo moderadamente profundo puede reconocerse por la presencia de ondas de
mayor amplitud, cuyas frecuencias oscilan entre 1 y 4 c/s. Intercalado entre estas
ondas, aparecen los denominados husos de sueos compuestos por ondas repetitivas,
que tienen una frecuencia de 9-13 c/s; duran de 0,5 a 5 segundos y aparecen a
intervalos de 5-15 segundos. Por lo general, tanto los husos como las ondas lentas
tienen una distribucin topogrfica ms extensa que las del sueo ligero.
El sueo profundo se caracteriza por una actividad lenta de 0,5 a 2 c/s y de gran
amplitud (ondas delta); dichas ondas aparecen, por lo general, sincrnicamente en
todas las regiones de la cubierta craneal.
Las ondas lentas del sueo son a veces reemplazadas por otras parecidas a las del
perodo de vigilia; sin embargo, el sueo no slo no se interrumpe, sino que incluso
est elevado el umbral necesario para conseguir despertar al individuo por medio de
estmulos sensoriales. Debido a estas caractersticas, este perodo recibe el nombre de
sueo paradjico; durante este perodo se producen movimientos errticos de los ojos,
lo que ha motivado que se le denomine tambin fase de sueo con movimientos
rpidos de los ojos o sueo REM (rapid eye movements). Parece que en esta etapa
tienen lugar los fenmenos onricos (ensueos)(fig.58).
Pruebas de estimulacin
1.
Apertura y cierre de los ojos
Por medio del simple mecanismo de abrir los ojos se observa que el ritmo alfa,
caracterstico del registro encefalogrfico del adulto en estado vigil y con los ojos
cerrados, desaparece del trazado, siendo reemplazado por un tipo de actividad
irregular, desincronizada, de bajo voltaje. Este fenmeno recibe el nombre de respuesta
de paro, bloqueo alfa o desincronizacin del trazado. Este tipo de respuesta puede
obtenerse, incluso con los ojos cerrados, por medio de la estimulacin ambiental o
verbal, o cuando se exige un esfuerzo mental por parte del sujeto explorado (p.ej., la
realizacin de una pequea operacin aritmtica). La persistencia del ritmo alfa al abrir
los ojos indica un ritmo anmalo, un dficit en la integracin neuronal o una falta
importante de visin (fig. 59).
2.
Hiperpnea
El aumento de la frecuencia y de la profundidad de los movimientos respiratorios
durante un perodo de unos 3 minutos da lugar a una alcalosis respiratoria y,
secundariamente, a una reduccin del flujo sanguneo cerebral, lo que conlleva,
paradjicamente, una hipoxia del tejido cerebral y un aumento de la excitabilidad
neuronal. Esta prueba es particularmente importante porque permite descubrir, sobre
un trazado aparentemente normal, alteracione de tipo epilptico o anomalas de
carcter focal o difuso.
3.

Estimulacin sensorial

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

La aplicacin de estmulos sensoriales (acsticos, visuales, etc.) da lugar a la aparicin


de un tipo de actividad elctrica provocada, caracterizada por la presencia de
potenciales de frecuencia inferior a los observados en condiciones espontneas. As, a
los 20-30 mseg de la aplicacin de un estmulo luminoso intenso, en forma de destellos
de luz, se observan cambios en el patrn electroencefalogrfico correspondiente a la
regin occipital, apareciendo un tipo de potenciales que reciben el nombre de
"potenciales evocados". El patrn de distribucin de este tipo de ondas es similar en
todos los individuos y alcanza su mayor amplitud en las regiones frontal posterior y
parietal anterior, reducindose de intensidad a medida que se aleja de estos puntos.
En este tipo de respuestas se observa el fenmeno de la habituacin; la aplicacin
repetida de un mismo tipo de estmulo, a intervalos de varios segundos, va seguida de
una reduccin rpida y progresiva en la amplitud de los potenciales evocados hasta
llegar a su casi total extincin. Cuando ms largo es el intervalo entre estmulos, mayor
es la probabilidad de obtener una respuesta adecuada.
El registro de los potenciales evocados en respuesta a diversos tipos de estmulos
(luminosos, sonoros, mecnicos, gustativos, olfativos, etc.) permite comprobar: a) El
adecuado funcionamiento del correspondiente rgano sensorial, b) La existencia de
alteraciones en la transmisin de la informacin sensorial hacia los centros superiores,
cerebrales. As, si los potenciales evocados en respuestas a un estmulo luminoso se
hallan presentes en uno de los hemisferios, pero no en el otro, hay que pensar en la
existencia de una lesin que impide la normal comunicacin entre el tlamo y el lbulo
occipital del lado que muestra la alteracin, c) La existencia de un estado de
irritabilidad o excitabilidad anormal, manifestada por una diseminacin de la respuesta
elctrica a la totalidad de la corteza cerebral, con aparicin de ondas anmalas.
Aplicaciones clnicas del registro electroencefalogrfico
El electroencefalograma puede estar alterado en una gran diversidad de situaciones o
enfermedades que comprometen el estado funcional del sistema nervioso central. La
valoracin de los cambios observados debe hacerse en relacin con la historia clnica
del paciente. En este sentido, el registro electroencefalogrfico, adems de su
importancia como elemento diagnstico, es tambin til como exploracin indicativa
para valorar la evolucin y el grado de afectacin del sistema nervioso central en
diversos procesos patolgicos.
El registro electroencefalogrfico ms llamativo corresponde a aquel en el cual no se
observa, en absoluto, ondas u oscilaciones, apareciendo una lnea isoelctrica, plana,
expresin de silencio elctrico cerebral. En estas circunstancias, la actividad elctrica
de la corteza cerebral, registrada sobre el cuero cabelludo, muestra un potencial
inferior a los 2 uV o no existe en absoluto; habitualmente va asociada a hipoxia o
isquemia cerebral. Si este tipo de registro persiste por espacio de 6 horas o ms, el
individuo est en coma irreversible y clnicamente muerto, aunque las funciones
vegetativas se mantengan de manera asistida.
Durante las crisis convulsivas que acompaan el ataque epilptico (grand mal y petit
mal) aparecen notables alteraciones en el electroencefalograma (fig.60 y 61). En los
ataques de petit mal, que corresponden a perodos o fases o "ausencias", caracterizados
por la prdida momentnea de la capacidad para reaccionar, aparecen descargas
difusas, rtmicas, con una morfologa mixta, compuesta por dobletes que se
superponen a ondas redondeadas, lentas (morfologa puntas/onda). Las crisis
convulsivas del grand mal corresponden a ataques epilpticos en los cuales aparecen
tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

Prcticas de Fisiologa

convulsiones generalizadas, con contracciones tnico-clnicas,precedidas por un


"aura"; en estos casos el registro electroencefalogrfico muestra una gran cantidad de
puntas rtmicas, generalizadas, con una frecuencia de descarga superior a las asociadas
con el petit mal. Es importante tener en cuenta que, durante los perodos entre crisis,
un porcentaje importante de los pacientes (entre el 20 y el 40%) muestran un registro
electroencefalogrfico prcticamente normal.
Las crsis epilpticas se caracterizan por ser espontneas, episdicas, recurrentes y
paroxisticas. En la epilepsia existe un foco, un conjunto de neuronas, cuya
despolarizacin sincrnica determina la aparicin de una serie de ondas agudas, o
puntas, en el electroencefalograma. Diversos factores pueden provocar crsis
convulsivas parecidas a las del ataque epilptico, que, a diferencia de estas ltimas,
remiten espontneamente al no existir un mecanismo que las perpete.
En un 90% de los pacientes con tumores cerebrales aparecen alteraciones
electroencefalogrficas, cuyas caractersticas dependen del tipo y localizacin del
tumor. La existencia de un electroencefalograma normal y de un scanning normal
excluye la presencia de un tumor, o un absceso, supratentorial. El registro
electroencefalogrfico es anormal en casi todos aquellos casos en los que existe alguna
reduccin o limitacin en el grado de conciencia. En general, cuanto mayor es la
afectacin de la conciencia, ms alterado se halla el electroencefalograma.

tor: Blgo. Victor Carbajal Z.

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