Laspropiedadesmecnicasdeltendnsupraespinosohumano(SST)sonmuy

heterogneasypuedereflejarunaimportanterespuestadeadaptacinasu
entornodecargacompleja,multiaxial.
Sinembargo,estaspropiedadesfuncionalesseasocianconunaestructura
dependientedelaubicacinylacomposicinquenohansidocompletamente
aclarada.Porlotanto,elobjetivodeesteestudiofueparadeterminarlas
concentracionesdelostiposI,colgenoIIyIIIenseisregionesdistintasdela
SSTycompararloscambiosenlaconcentracindecolgenoentodaslas
regionesconloscambioslocalesenpropiedadesmecnica.Lahiptesisdequeel
contenidodecolgenodetipoIseraaltaalolargodeltendn,
colgenodetipoIIselimitaalasregionesdecargadecompresinydecolgeno
detipoIIIcontenidoseraaltaenlasregionesasociadasconeldao.Adems,la
hiptesisdequelasregionesdealtocontenidodecolgenotipoIIIse
corresponderaconlasregionesconbajomdulodetraccinyunabaja
gradodealineacindecolgeno.AunqueelcontenidodecolgenodetipoIIIno
fuesignificativamentemayorenregionesqueconfrecuenciasedaan,todaslas
otrashiptesisfueronapoyadospornuestrosresultados.Enparticular,detipoII
contenidoencolgenoeramsaltocercadelainsercin,mientrasqueel
colgenotipoIIIfueinversamentecorrelacionadoconelmdulodetendnyla
alineacindecolgeno.ElaumentomedidoencolgenotipoIIbajoelarco
coracoacromialproporcionaevidenciadelaadaptacinalacompresin
decargaenelsupraespinoso.Porotraparte,larelacinestructurafuncinentre
elcolgenodetipoIIIdecontenidoydelostendonesmecnicosestablecidosen
esteestudiodemuestraunmecanismodealteracin
propiedadesmecnicasenlostendonespatolgicosyproporcionaunaguapara
laidentificacinde
dianasteraputicasybiomarcadorespatologaespecfica.
Palabrasclave
Biomecnica,colgeno,ELISA,extracelular
matriz,hombro
Introduccin
Lostendonessontejidoestructuralydecomposicincomplejaquecontiene
principalmentedeagua,colgenoyproteoglicanos.
Elcolgenocomprendemsde80%delpesosecoeneltendn,
yformaunaredfibrilarestructuradojerrquicamente
alineadospredominantementealolargodeladireccindelacarga.Eltendn
supraespinoso(SST)esuntendnnicocon
unaaltasignificacinclnicacomoellesionadoconmayorfrecuencia

delostendonesdelmanguitorotador.Debidoalagranvariedadde
movimientodelhombro,suentesisoblicuaysuproximidad
alarcocoracoacromial,elsupraespinosoexperimentamltiples
detraccinaxial,compresinycargasdecorteinvivo.
Comoresultado,estetendndemuestraunheterogneo
distribucindeorientacionesdefibrillasdecolgenoyregionalmente
variandolaspropiedadesmecnicasanisotrpicasquehansido
biencaracterizado.
Anteriormentepusodemanifiestoquealigualquelaspropiedadesmecnicasy
orientacindecolgeno,lacomposicindeproteoglicanosenelsupraespinoso
varadeunareginaotrasegnfuncionallocales
demandas.Ladecorina,elproteoglicanomscomnen
tendn,eraomnipresenteentodoelsupraespinoso.Aggrecan,que
generalmenteseencuentraenloscartlagosyotrostejidosqueriencia
ENCEgrandesdeformacionescompresivas,seconcentrenel
regionesanterioryposteriordeltejidoquepasanentrela
arcocoracoacromialylacabezadelhmero.Estazonadetejido
cercadelainsercinhumeralsecreequeexperimentaralta
cargasdecompresininvivo.Finalmente,elcontenidodebiglicano,
unproteoglicanotpicamenteasociadoconlareparacinyremodelamiento
ING,fuealtaenelladoanteriordelsupraespinoso
.Sorprendentemente,elcontenidodebiglicanofuetambin
altaenlareginposteriorarticulacindeltendn.Sinembargo,
antesdelestudioactual,nosesabacmolosprincipales
formasdecolgenovaransegnlareginensupraespinosohumano.
Laformamsabundantedecolgenoeneltendnyelatravsdelcuerpoesde
tipoIColgenodetipoIfibrillasonestructurasrgidasqueproporcionanel
tendnconsumecnicodurabilidadyresistencia.Aligualqueelagrecano,
colgenotipoIIestpicamenteasociadoconlostejidosqueexperimentanla
compresincargasincluyendoplacadecrecimientoyelcartlagoarticular,donde
colgenotipoIIcomprendecasiel80%deltotaldecolgeno.Elcolgenodetipo
IItambinformafibrillasfuertes,peroestosfibrillassontpicamentems
pequeosendimetroquelasfibrillasdecolgenoIentendnyligamento.El
colgenodetipoIIestpicamentepresentarentendnsloenpequeas
cantidades,yesgeneralmenteconcentradocercadelainsercinsea.El
colgenoIIIesotrocolgenofibrilarquesiempreestasociadocon
colgenotipoITipoIIIfibrillasdecolgenosonmsdelgadas
fibrillasdetipoIyestnpresentesenaltasconcentraciones

enlapiel,vasossanguneosyotrostejidoscongrandesproporciones
fibrasdeelsticos.
Duranteelprocesodecuracineneltendn,unaorientadasalazarlaredinicial
delamayoradecolgenodetipoIII
estformadoenelsitiodelaherida.Coneltiempo,estagranulacin
tejidosesustituyeporunaredfuerte,mejoralineadodetipo
Icolgeno.Porlotanto,elcolgenodetipoIIIseasociageneralmente
coneltejidodelacicatrizylesiones.Adems,larelacindetipoIII/
colgenodetipoIeneltendnsehademostradoqueaumentacon
envejecimientoyelaumentodelapatologa.
MientrasqueelcontenidototaldecolgenotipoIyIIIenel
supraespinosohumanohasidoinvestigado,lasvariacionesespaciales
delostiposI,colgenoIIyIIIatravsdeladistinta
ynoseconocenregionesnicasdeestetendn.Entendn,
esparticularmentedifcilparaextraerprotenasycuando
xito,seobtienetpicamenteslounaparterepresentativa.
Porlotanto,losobjetivosdeesteestudiofueronestableceruna
protocoloeficienteparalaextraccindecolgenodetendn,didas
urelasdistribucionesregionalesdelostiposI,IIyIIIdecolgenoen
unnmerosuficientementegrandedesupraespinosohumanoutilizandoinmuno
ensayosqumicosyasociarestasmedicindecomposicin
tosconmedidasestructuralesymecnicas
realizadoenlasmismasmuestras.Lahiptesisdeque
TipodecontenidodecolgenoIseraomnipresenteentodoel
tendn,elcolgenotipoIIseramsaltocercadelainsercin
yelcontenidodecolgenotipoIIIseramsaltoenlaparteanterior
porcindeltendn,unaregincomnmenteasociadocon
dao(2).Porltimo,lahiptesisdequeelcolgenotipoIII
serainversamentecorrelacionanconelmdulodetraccinyelcolgeno
alineacin.
resultados
Aunquelaextraccinentanto4
Cy30
Cdiomuestras
consignosvisiblesdeladigestinconxito(esdecir,unalechosa
apariencia),digestina30
Csehaencontradoparaproducircasi

tresvecesmscolgenotipoIcomosemideporELISA
(Figura2).Laspruebasanterioresenunintervalodetemperaturascompatibles
preservacindelacadenaalfadelcolgenoalatemperaturamsalta
peronoalasplanteadasporencimade34
C(datosnomostrados).
Porlotanto,todaslasmuestrasutilizadasenelestudioseextrajerona
30
Cbajocontrolcuidadosodelatemperatura.Unsorprendentementealto
cantidaddecolgeno($25%)fueextradoutilizandoeldedospasos
protocolodelacombinacindecongelacinfresadoyunatemperaturamsalta
digestinconpepsina.
ComopartedeldesarrollodelcolgenoIIELISAtipo
severificlafiabilidaddelensayoparaunaampliagamade
concentracionesdecolgeno.Lacurvaestndarparalacostumbre
ELISAdetiposndwichparaelcolgenotipoIIInomostrsignosde
saturacinencualquieradelosanticuerpodedeteccinprobadoconcentracin
ciones(Figura3).Porlotanto,conelfindeevitaranticuerpomientrasquelos
residuos
quegaranticelasuficientesensibilidaddelensayo,todaslasmuestrasfueron
tendn
analizusandounadilucin1:1600(0,25mg/ml)delanticuerpo
concentrado.Lasensibilidaddelensayofuelinealatravsdela
gamade0,1y10,0mg/mL.
EntodaslasregionesdelaSSThumana,elcontenidodecolgenotipoII
fue18104vecesmayorqueenelbcepsyeltipoIII
contenidodecolgenofue49113vecesmayorqueenel
bceps(Tabla1).TantodetipoIycolgenotipoIIInolohizo
exhibirvariacionesespacialesestadsticamentesignificativas.Sinembargo,
tipoIIcontenidoencolgenofuemayorenelanteriorarticulary
regionesposteroconjuntosqueenlareginmedialdelabursitis.
ContenidodetipoIyelcolgenoIIencadareginnolohizo
correlacionarsignificativamente,yaseaconelmdulolinealocircular
varianza(Figura4).Porotrolado,unainversasignificativa
correlacindetipodecontenidodecolgenoIIIconunmdulolineal
seencontr,mientrasquelacorrelacindecolgenodetipoIIIcon
varianzacircularerafuertecorrelacinderango(Spearman
coeficienteder
s

0,83)yseacercalasignificacin(p=0,058)
(Figura5).
Discusin
Aunqueinvestigacionespreviashandeterminadoeltotalde
contenidodecolgenotipoIyIIIenelsupraespinosohumana
(24)ydelasvariacionesregionalesdetipoI,IIyIIIcolgenoenel
insercinhumeraldelhombrodeconejo(27),ennuestro
entender,esteestudiopresentalaprimeramedicincuantitativa
tosdelasvariacionesregionalesenlostiposI,IIyIIIdecolgeno
atravsdeseisregionesseparadasdelaSSThumano.Actuar
estasmediciones,unprotocoloespecializadoquepermiti
fuedesarrolladomejoradodeextraccindecolgenodetendn
yvalidado.Porincubacindelasmuestrasaunatemperaturamayor
(T30
C)queesconseguridadpordebajodelpuntodefusinintacta
colgeno(T
metro
39
C)ylassubunidadesdecolgenoresultantes
deladigestindepepsina(T
metro
32
C),pudimosconxito
extraertotalmentecasitresvecesmscolgenotipoIdela
establecidosprotocolosdetemperaturamsbaja.Sibienesposible
queesteprotocolopermitiladegradacindeunapequea
proporcindecolgenoenfragmentos,esevidenteapartirdela
altorendimientodecolgenoinmunognicadespusdelos30
LadigestinCque
elbeneficioadicionaldeaumentodelaextraccinaaltastemperaturas
compensadoestaprdidapotencial.
Figura4.Lasvariacionesregionalesde(a)TipoI,(b)IIy(c)IIIcolgenoenel
tendnsupraespinosohumano.Todoslosvaloressenormalizaronlosdatos
obtenidos
desdeeltendndelbceps.Elregionesconjuntosanterioryposteriorcontenan
nivelesmsaltosdecolgenodetipoIIdelareginbursalmedial.*p50.05/15
frenteMB.
Figura3.ElcolgenodetipoIIIELISAcurvaestndarparatresdiferentes
dilucionesdeanticuerpodedeteccin.Lacurvaestndarnosaturaren

dilucionesde1:800,1:1600o1:3200.ParaoptimizareltiempoELISA
laconservacindelosanticuerpos,todaslasmuestrasseanalizaronmedianteun
1:1600
dilucin.
Tabla1.ContenidodelostiposI,IIyIIIdecontenidoencadaregindelaSST
humano.
AB
MEGABYTE
PB
AJ
Todoslosvaloressenormalizaronporlosdatosobtenidosdeltendndel
bceps.Entodaslasregiones,tipodecontenidodecolgenoIIeraalmenos18
vecesmayorqueenel
bcepsyelcontenidodecolgenotipoIIIfuealmenos49vecesmayorqueenel
bceps.Losdatosserepresentancomomediana(Q1,Q3).
Audazy*indicanp50.05/15MBfrente.
DOI:10.3109/03008207.2013.847096
Colgenodeltendnsupraespinoso377
Comohiptesis,seencontrqueelcontenidodecolgenotipoI
paraexhibirsinvariacionesregionales.Aligualqueladecorina(lamayorparte
abundantesproteoglicanoseneltendn),colgenotipoI(lams
abundanteprotenaentendn)esubicuoenelSST.
Adems,losnivelesdecolgenotipoIenelSSTeran
similaresalosdetendndelbcepscomolodemuestra
normalizaronlosvalorescercanosa1(Figura4).Estoshallazgos
sugierenquelosnivelesdecolgenotipoIeneltendnnosonaltamente
sensiblealaquerodeaelentornomecnico.
Porotrolado,elcontenidodecolgenodetipoII,la
formapredominantedecolgenoenlostejidosqueexperimentanunaalta
cargasdecompresin,seencontrqueaumenteenelanteriorconjunta
yregionesposteroconjuntosconrelacinalabursitismedial
regiones.Estehallazgoesconsistenteconnuestrahiptesis,y
esprobableyaseadebidoalacargadecompresinentorno
enlasregionesAJyPJoasuproximidadalarticular
cartlagorecubrimientodelacabezahumeral.Curiosamente,entodo
regionesdelaSST,inclusolasporcionesmedialesqueexperimentan
cargasdetraccinsobretodo,elcontenidodecolgenodetipoIIfuemuchas
veces
mayorqueeneltendndelbceps.As,todaslasregionesdel

SSTpuedeexperimentarunciertogradodetensindecompresiny
contribuiraestaposibleadaptacin.
Sorprendentemente,elcolgenodetipoIIInoselocalizenel
porcionesanterioresdelSSTdondesesabequelaslgrimasparainiciar.
Dehecho,elcolgenotipoIIInopresentaningunaestadsticamente
variacionesespacialessignificativas.Estopodraserdebidoalhechode
quelostendonesprobadostodosellosprocedentesdedonantessinreportado
lesionesenelhombrooroturasvisiblesSST.Sinembargo,como
,tipodecontenidohipotticaIIIcolgenosecorrelacionfuertemente
conVAR,unavariablequedisminuyeconelaumentodelaalineacin.
Adems,elcolgenodetipoIIImostraronunasignificativainversa
correlacinconmdulolineal.Estosresultadosindicanque
elcolgenodetipoIIIenelSSThumanoseasociaconunabaja
gradodealineacinypropiedadesmecnicasdetraccininferiores
lazos,proporcionandounaimportanterelacinestructurafuncindirecta
relaparaestetejido.Unhallazgoadicionaldeesteestudio
eraqueelcolgenodetipoIIIentodaslasregionesdelaSSTeraalmenos
49vecesmayorqueenelmidsubstancetendndelbceps.Esta
resultadoesconsistenteconunestudioanterior(24)ysugiere
quelaremodelacinactivaenelSSTesmuchasvecesmayorque
eneltendndelbceps.
Laprincipallimitacindeesteestudioesquelaextraccin
decolgenoapartirdelostendonesensayadas,mientrasmseficienteque
protocolosestndar(Figura2),fueincompleta.Altorendimiento
extraccindecolgenoesunobstculoinherenteparacualquierinmuno
ensayoqumicodecolgenoapartirdeuntejidoconectivodenso.
Losresultadosdelaspruebaspreliminaressugierenque$25%decolgeno
apartirdetejidoscosechadosestabapresenteenelsobrenadante
despusdeladigestinconpepsinaycentrifugacin(nomostrado).
Sinembargo,estosdatosseobtuvieronusandounensayode
contenidohyroxyproline(28),queessensiblealcolgeno
fragmentosypuedesobreestimarlacantidaddeinmungeno
colgenoextrado.Deacuerdoconunpublicadopreviamente
protocolo,sloel1%delcolgenoenlasSSThumanosde
donantessanoserasolubleenpepsina(24).Paraproveer
datossignificativosapesardelbajorendimientodecolgeno,losresultados
fueron
normalizadopormedicioneseneltendndelbcepsmidsub
postura.Desderendimientodecolgenonoseesperaquevariarde

ubicacin,loquepermitirealizarcomparacionesvlidasentrelasregiones.
Losdatosobtenidosenestainvestigacindescribenel
distribucinregionaldelastresformasprincipalesdecolgeno
enelSSThumanosano.Estosresultadospuedenservircomouna
ladirectrizparalacomprensiny,posiblemente,eldiagnsticodebio
loscambiosqumicosqueocurrenenelestadopatolgico.por
ejemplo,daadooTSMdolorosaspuedentenerunaumento
tipoIIIcontenidodecolgenoenelladoanteriordondeundesgarroes
iniciando.Adems,esteestudioestableceunaasociacin
TipodecontenidodecolgenoIIIconmdulobajoyunabaja
gradodealineacin.Alteracionesdeltendnconelenvejecimiento,lesin
ypatologa,todolocualresultaenaumentodelosnivelesdetipo
ColgenoIII,puedeseratribuibleaestaestructurafuncin
relacin.
conclusiones
Conelfindecomprenderlasvariacionesdecomposicinenlossanos
SSThumanaasociadosconlasheterogeneidadesconocidosenlacarga
ambiente,laspropiedadesmecnicasylaalineacindecolgeno,
distribucionesregionalesdecolgenodetipoI,IIyIIIdecadaseis
regionesdistintasdeltejidosemidieronimmunochemi
camente.ContenidodecolgenotipoIyIIIfueronsimilaresentodos
regionesdeltendn,mientrasqueelcolgenotipoIIseconcentr
enlasregionescercanasalainsercindelpensamientodeexperimentargrandes
fuerzasdecompresininvivo.Porotraparte,elcolgenotipoIII
contenidosecorrelacioninversamenteconelmdulodetracciny
Figura5.(a)elcontenidodecolgenotipoIIIsecorrelacionasignificativamente
con
mdulolineal.(b)CorrelacindecontenidodecolgenotipoIIIyVAR
esfuerteyenfoquesimportancia.Todaslasotrascorrelacionesfuerondbiles
ynosignificativa.LosvaloresrepresentanlamedianaIQRparacadaregin.
r
s
deSpearmancoeficientedecorrelacinderangos.
378MRBuckleyetal.
ConectarTissueRes,2013;54(6):374379
Pgina 6

alineacindecolgeno,proporcionandounaestructurafuncindirecta
relacinparalaSST.Estosresultadosayudanaestablecerla
propiedadesdelneadebasedecomposicindelaSSTysaludable

proporcionarunaguaparalacomprensinyevaluacindepato
cambioslgicos.Conesteconocimientopodemosavanzarhacia
laidentificacindedianasteraputicasyquizsidentificarespecfica
eptoposdecolgenoqueestnrelacionadosconlapatologaSST.
Expresionesdegratitud
LosautoresagradecenaAkashKumar,SpencerySzczesny
LosdoctoresCharlesClark,SpencerLake,JenniferyKadlowec
DanielCortsparalascontribucionestcnicas,sugerenciastiles
ycontieneinteresantesconversaciones.
Declaracindeinters
Losautoresinformandeningnconflictodeintersyestnsolos
responsablesporelcontenidoylaredaccindeestedocumento.Esta
estudiofueapoyadoporelNIH/NIAMSyAR055598
AR055543S1.
Colgenodeltendnsupraespinoso379
Losderechosdeautordelainvestigacindeltejidoconectivoeslapropiedadde
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