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Justificacin
El presente documento tiene como fin realizar una investigacin terica sobre los mtodos de
conteo bacterianos existentes, ya que es fundamental tener conocimiento previo sobre el tema
para que al momento de su ejecucin practica se posea conocimiento del que hacer, como
hacerlo y analizar su resultado, esto nos permitir reducir el margen de error de los datos
arrojados en las prcticas de siembra de cultivos bacterianos, lo cual nos llevara un anlisis
preciso de lo que se est investigando.
Objetivo General
Dar a conocer los diferentes mtodos tericos de conteo microbiano que existen, para
aplicarlo a la prctica en el laboratorio donde se estudiaran diferentes microorganismos,
utilizando los mtodos investigados, obtenidos de varias fuentes.
Objetivos Especficos
En qu casos se aplican
Marco Terico
El crecimiento de poblaciones se mide estimando los cambios en el nmero de las clulas, en
la cantidad de algn componente de las mismas (por ejemplo, protena) o en el peso total de las
clulas. Existen varios mtodos de contar el nmero de clulas o de determinar la masa celular,
adecuados para diferentes organismos o diferentes situaciones (Madigan, Martinko, & Parker,
2004, pg. 145)
1.2 Ridacount
Es una prueba de lmina con medio de listas para usar, diseadas para la deteccin
cuantitativa de microorganismos en alimentos y ambientes que consiste en una pelcula
deshidratada de medios generales o selectivos en las cuales se deposita 1 ml de muestra, la cual
rehidrata el medio, posee una cubierta transparente que evita la contaminacin indeseada. Este
producto est
3. Contadores Electrnicos
Se hace pasar un volumen conocido de la muestra con microorganismos a travs de un orificio
de 5 a 10 mm de dimetro, mediante manipulacin con una micropipeta de mercurio. La
resistencia elctrica a travs del orificio est normalizada y se altera cada vez que un
microorganismo pasa a travs de l. La modificacin de la resistencia se amplifica y se registra
electrnicamente (Olivas E. & Alarcon, 2004, pg. 30)
4. Mtodos Directos
4.1 Recuentos en Placa
El mtodo utilizado con ms frecuencia para la medicin de poblaciones bacterianas es el
recuento en placa, se basa en la suposicin de que cada bacteria crece y se divide para producir
una sola colonia. Esto no siempre es cierto porque las bacterias con frecuencia crecen unidas en
cadenas o como grumos. Por consiguiente, a menudo una colonia no se produce como resultado
de una nica bacteria sino de segmentos cortos de una cadena o de un agregado bacteriano. Para
reflejar esta realidad los recuentos en placa suelen informarse como unidades formadoras de
colonias (UFC). Cuando se realiza el recuento en placa es importante que crezca solo un nmero
limitado de colonias en la placa. Cuando hay demasiadas colonias algunas clulas se encuentran
apiadas y no pueden desarrollarse; esta situacin es causa de inexactitudes en el recuento. Para
asegurar que algunos recuentos estn dentro de estos lmites el inoculo original se diluye varias
veces en un proceso denominado dilucin seriada (fig. 5) (Tortora, Funke, & Case, 2007, pg.
178)
cerca de 50C, se vierte sobre la muestra, que luego se mezcla en el medio con una agitacin
suave de la placa. Cuando el agar se solidifica la placa se incuba. Con esta tcnica las colonias
crecern dentro del agar nutritivo as como en la superficie del agar (Tortora, Funke, & Case,
2007, pg. 178)
Figura 6. Mtodos para la preparacin de placas para el recuento. (a) Mtodo de placa vertida. (b) Mtodo
de la diseminacin en placa.
Fuente: Introduccin a la microbiologa
4.2 Filtracin
Cuando la cantidad de bacterias es muy baja, como en lagos y ros con corrientes
relativamente limpias, las bacterias se pueden contar con mtodos de filtracin. En esta tcnica
se hacen pasar al menos 100 ml de agua a travs de un filtro consistente en una membrana
delgada cuyos poros son demasiados pequeos como para permitir el paso de las bacterias
entonces son tamizadas y retenidas en la superficie del filtro. Este filtro se transfiere despus a
una placa de Petri que contiene una almohadilla embebida en un medio nutritivo lquido, donde
las colonias surgen de las bacterias presentes en la superficie del filtro. Este mtodo se aplica con
frecuencia para la deteccin y cuantificacin de bacterias coliformes, que son indicadoras de la
contaminacin fecal de los alimentos o el agua (Tortora, Funke, & Case, 2007, pg. 179)
5. Mtodos Indirectos
5.1 Conteo Turbidimetrico
En una suspensin microbiana la cantidad de clulas est directamente relacionada con la
turbiedad o densidad ptica de la misma e inversamente relacionada con la cantidad de luz que
pasa a travs de ella. Esto permite determinar con bastante exactitud la cantidad de
microorganismos en la suspensin mediante la determinacin de la turbiedad mediante un
nefelmetro o un espectrofotmetro (Olivas E. & Alarcon, 2004, pg. 30).
Tortora, Funke, & Case (2007) dicen que la absorbancia se utiliza para graficar el crecimiento
bacteriano. Cuando las bacterias estan en fase logaritmica de crecimiento o de declinacion la
representacion de la absorbancia frente al tiempo forma una linea recta. Para que puedan
visualizarse las primeras trazas de turbidez debe haber mas de un millon de celulas por mililitro y
se precisan de 10 a 100 millones por mililitro para que la sunpension se vuelva lo baste turbia
como para ser medida en un espectrofotometro (p.182).
Figura 8. Espectrofotmetro
Fuente: Wikipedia
Conclusiones
Actualmente se encuentran varios mtodos de conteo para cultivos de microorganismos,
puesto que sean venido requiriendo anlisis microbianos con el fin avanzar en temas como, la
inocuidad de los alimentos, la salud pblica, la industria y desde un tiempo para ac el manejo en
agricultura. En los mtodos de conteo se encuentran varias clasificaciones, segn, el tipo de
microorganismo, estructura, metabolismo, sntesis qumica, tamaos, crecimiento entre otras ms
y tambin se puede clasificar segn los mtodos, directos, indirectos, rpidos,
equipos,
fluorescencia y otros. Aunque todos pueden variar en las unidades medida tienen el mismo fin de
conocer la cantidad en unidades o en masa del microorganismo.
Bibliografa
Alonso Nore, L. X., & Poveda Sanches , J. A. (2008). ESTUDIO COMPARATIVO EN
TECNICAS DE RECUENTO RAPIDO EN EL MERCADO Y PLACAS PETRIFILM
3M PARA EL ANALISIS DE ALIMENTOS. BOGOTA, BOGOTA D.C, COLOMBIA.
Madigan, M., Martinko, J., & Parker, J. (2004). Brock: Biologia de los Microorganismos (10
ed.). Madrir, Espaa: Pearson .
Olivas E., E., & Alarcon, L. R. (2004). Manual de Practicas de Microbiologia Basica y
Microbiologia de Alimentos: Programa de Nutricion. Jurez, Chihuahua, Mexico:
Universidad Autnoma de Ciudad Jurez.
Olivas, E. (2004). Manual de Practicas de Microbiologia I, II y Parasitologia: Programa de
Medicina. Jurez, Chihuahua, Mexico: Universidad Autonoma de Ciudad Jurez .
Tortora, G., Funke, B., & Case, C. (2007). Introduccin a la Microbiologa (9 ed.). Buenos
Aires, Argentina: Panamericana.