TEMA 1.

INTRODUCCIN A LA
BIOTECNOLOGA MICROBIANA
3. Desarrollo histrico de la Biotecnologa.
Fue entre el 6000 y 5000 a.C. en Mesopotamia donde hay referencias de
produccin de alimentos como cerveza y pan por los sumerios (inicio de la
agricultura y ganadera).
La produccin de cerveza era tan importante que en el cdigo de
Hammurabi (rey Babilonio del siglo XVIII a.C.), estn escritas las penas
para quin perjudicara la cerveza. La ventaja de los alimentos fermentados
es que se conservan mucho ms. Por ejemplo, el queso y el yogur se
conservan durante mucho ms tiempo que otros productos lcteos como la
leche.
En el 4000 a.C los egipcios utilizaban levaduras en la fabricacin del pan y
tambin elaboraban vino, queso y cerveza. Reflejaban estos procesos, por
ejemplo, en estatuillas de madera encontradas en tumbas.
5000-3000 a.C. Todas las civilizaciones han aprendido a usar los
microorganismos de una forma u otra. Las tribus de Papa Nueva Guinea
emplean unos rboles, en los que hay micorrizas, haba un proceso de
simbiosis de Rhizobium con las plantas, y el suelo se llenaba de nitrgeno
porque son microorganismos fijadores de nitrgeno. Eran demostraciones
empricas (no se saba para qu serva).

Fijacin Biolgica de Nitrgeno en

Papa Nueva Guinea. Cultivo de
Casuarina oligodon, rotacin de
cultivos con leguminosas.

Ndulos de actinorrizas. Simbiosis de Frankia con plantas leosas.

1500 a.C Primeras descripciones de guerras bacteriolgicas por los hititas.
Los guerreros dejaban ovejas y les transmitan infecciones (por Francisella
tularensis) para debilitar a las personas que estaban dentro de la ciudad. En
la ciudad de Kaffa tiraron cdaveres con la peste por catapultas con lo que
infectaron a la poblacin tras la muralla.
Clostridium botulinum. Otra aplicacin btox. Toxina botulnica. Relajacin
muscular y, por tanto, quita arrugas.
1665. Hasta ahora las aplicaciones eran empricas, no se saba que los
microorganismos eran los responsables. Robert Hooke fue el primero en
identificar a los microorganismos (cuerpos fructferos de hongos), junto con
Van Leeuwenhoek (1680, bacterias).

En 1780, Jenner empieza un programa de vacunacin.

La microbiologa se convierte en una disciplina cientfica

Dos siglos despus (1861-3), con Pasteur, la microbiologa se convierte en
una disciplina cientfica. Refuta la generacin espontnea, descubre la
pasteurizacin: observ la transformacin de la materia orgnica, en unas
reacciones haba productos alcohlicos y en otras no. Se observ que en
algunos caldos haba microorganismos y en otros no. Lo que predominaba
entonces era la teora de la generacin espontnea. Pasteur descubri que
eran los microorganismos los que llevaban a cabo esas transformaciones.
Tambin llev a cabo los primeros experimentos cientficos de vacunacin.
Jenner no fue el primero que lo observ, pero fue el que ms xito tuvo. Las
personas que trabajaban con ganado vacuno no sufran la viruela (ya est
erradicada). Eran observaciones empricas.
En 1865 Leyes de la herencia de Mendel.
En 1876, Koch hace observaciones que empiezan a poner de manifiesto que
los microorganismos son la causa de las enfermedades. Descubre que el
carbunco est causado por B. anthracis. Qu causa las hernias?
Helicobacter pylori es la causa de las hernias. Antes se deca que como

consecuencia del ambiente cido apareca esta bacteria, pero se demostr

que sta era la causa de ese ambiente.

Aplicaciones biotecnolgicas de los microorganismos

A finales del siglo XIX ya empiezan a haber aplicaciones biotecnolgicas de
los microorganismos: en 1881 empieza la produccin microbiolgica del
cido lctico, en 1897, Buchner demuestra la fermentacin acelular por
enzimas (origen de la bioqumica). Cuando se supo que los microorganismos
eran los agentes causantes de las enfermedades, se pens en buscar
compuestos que mataran a esos microorganismos (concepto de bala
mgica). Esas balas mgicas tenan que acabar con los microorganismos
sin tener consecuencias demasiado graves para el hombre.
En 1902, Enrlich y Hata desarrollan salvarsn para el tratamiento de la
sfilis.
Durante la 1 Guerra Mundial, Chaim Weizmann puso a punto la
fermentacin de acetona-butanol, que se usaba para fabricar plsticos y
explosivos (ya que se vieron limitados para producir armamento). Y Carl
Neuberg, la fermentacin del glicerol, tambin para explosivos (potenci la
ruta metablica de la levadura). Patente de preparado enzimtico para
detergentes.

Comienza la era de los antibiticos

En 1928, Alexander Fleming descubre la penicilina: haba un moho que tena
Penicilium y ah se inhiba el crecimiento de la bacteria (Staphilococcus).
Algunos hongos como Aspergillus eran capaces de producir cido ctrico por
fermentacin.
La penicilina se produca a gran escala en EEUU. Desembarco de
Normanda, la 1 vez que se llevaban antibiticos para la guerra.
Streptomyces, especialmente Actinomicetos (examen) qu son? NO son
hongos. Son BACTERIAS Gram + del suelo. El trmino miceto: hace
referencia a micelio, crecimiento filamentoso.
En 1936, algunos hongos como Aspergillus eran capaces de producir cido
ctrico por fermentacin.
En 1940-41, purificacin de la penicilina por Florey y Chain. Primeros
ensayos en ratones.
En 1944, produccin industrial de la penicilina. Waksman descubre la
estreptomicina: se vio que bacterias del suelo eran muy ricas en la
produccin de antibiticos.

Por qu la penicilina fue tan exitosa? No es txica para las personas

(adems de no tener resistencias). Antibitico: sustancia producida por
microorganismos que ataca a otros microorganismos, algunos son txicos.
Muchos se pueden utilizar como anti-tumorales.
Por qu la penicilina no es txica? Son -lactmicos, actan sobre el
peptidoglicano de la pared de las bacterias, que no estn presentes en
humanos, por lo que la toxicidad era muy baja. Todas estas manipulaciones
se hacan con escasos conocimientos del ADN.

Descubrimiento de las bases de la herencia gentica

En 1945, Avery, McLeod y McCarty demuestran que el DNA contiene el
material gentico.
En 1953 Watson y Crick descubren la estructura del DNA.
En 1957 se detecta Corynebacterium glutamicum, productor de glutamato.
Glutamato: cocina oriental. Ahora se produce exclusivamente por
fermentacin de microorganismos.
En 1961, se empiezan a utilizar proteasas alcalinas para detergentes.
En 1972-3, Berg, Cohen, Chang y Boyer, Ingeniera Gentica con enzimas de
restriccin.

Reconocimiento de la diversidad de microorganismos.

Microorganismos no cultivables
Durante todos estos aos, gran parte de la microbiologa ha estado basada
en la siembra de microorganismos y comparacin de caracteres.
En el ao 1977 hubo un descubrimiento importantsimo: Woese fue el
primero en hacer un rbol filogentico universal basado en el ARN
ribosmico 16S que permiti dar una visin global de los organismos que
hay en la tierra y los dividi en bacterias, arqueas y eucariotas. Esto supuso
una revolucin.

Modificacin gentica de organismos. Produccin heterloga

de protenas.
El descubrimiento de las enzimas de restriccin ha permitido la modificacin
gentica de organismos y la produccin heterloga de protenas.
En el 79, se comercializa la insulina (clonacin y expresin). Antes se
sacaba de cerdos y vacas y, la hormona del crecimiento, de cadveres. La
ventaja de la produccin de insulina es que se puede producir a gran escala
(baja el precio) y que reduces el riesgo de infeccin y de transmisin de
patgenos (ya que se conocen menos las enfermedades de los animales).
En el 81 primer ratn transgnico.
En el 82 se comercializa la insulina humana producida por E.coli.
En 1983 Mullins desarroll la tcnica de la PCR e hizo la patente. La primera
enzima que se utiliz fue Taq (extrada de Thermus acuaticus), que soporta
altas temperaturas y que descubierta por Brock, en Yellowstone. Aisl
bacterias que crecieran a altas temperaturas. Patent y multimillonario. Por
ejemplo los descubridores de los anticuerpos monoclonales no los
patentaron. La patente espaola que ms dinero ha dado al CSIC pertenece
a Margarita Salas.
En el 87 se empezaron a generar plantas de tabaco modificadas
genticamente.
En el 94 se comercializan tomates modificados genticamente para la
alimentacin humana.

Secuenciacin genmica
Un campo que est adquiriendo gran inters es la secuenciacin de
Haemophilus influenzae (1995).
En 1996 tuvo lugar la secuenciacin del genoma de Saccharomyces
cerevisiae y de la arquea Methanococcus jannaschii. Adems naci la oveja
Dolly, el primer mamfero clonado.
En 1998 se logr la secuenciacin del genoma de Caenorhabditis elegans.

Secuenciacin del genoma de organismos superiores

En 2001 hubo un primer borrador del genoma humano.
En 2002, secuencia genmica del arroz, primera planta comestible
(Arabidopsis thaliana en 2000).
En 2003 se publica la secuencia completa del genoma humano. Era un
borrador, y se hizo porque los datos pblicos no se pueden patentar (ese era
el objetivo, que no se patentara).

Aprovechamiento de la biodiversidad no cultivable

Durante mucho tiempo el nico conocimiento de microbiologa era aquel
que se obtena con microorganismos cultivables, pero con ese tipo de
aproximacin solo podemos conocer aquellos microorganismos que crecen
en el laboratorio (1-10% de todos los presentes) por lo que es una limitacin
enorme. Una aproximacin para aprovechar eso es la metagenmica, es
decir, analizar el ADN que se obtiene de una determinada muestra.
Este tipo de informacin metagenmica tiene una gran incidencia en
aspectos de la salud humana. El estudio de genes sin cultivar esos
microorganismos supone conocer microorganismos que nunca han sido

cultivados. Se estn descubriendo muchos microorganismos que no estn

presentes en el hombre pero que no se conocan porque no se podan
cultivar. Se est considerando al hombre como un ecosistema en el que los
microorganismos afectan a la salud, en algunos casos para bien y otros
para mal.

2004. secuenciacin de
genomas ambientales.
Metagenmica pata
detectar nuevas
enzimas.
Microbioma humano y salud. Cada vez hay ms datos que nos dicen que
la composicin de la microflora est relacionada con la tendencia a
engordar, puede haber una relacin clara. Se ha observado que personas
con tendencia a engordar tienen ms concentracin de bacterias Gram +.
Trasplante fecal, que consiste en coger las heces de un individuo sano e
introducirlas en un individuo enfermo, es decir, trasplantar la flora de una
persona a otra para renovar la flora de sta. Se est utilizando mucho con
Clostridium difficile, que est en el intestino de los individuos, pero en
tratamientos prolongados con antibiticos se producen infecciones por esta.
Con el trasplante fecal parece que esto no pasa, est al lmite de la
legalidad, todava no se conocen los microorganismos beneficiosos y los que
no por lo que se mezclan y se inoculan y parece que tienen un efecto
beneficioso para la salud.

Creacin de organismos nuevos. Biologa sinttica

Biologa sinttica: creacin de organismos nuevos, cuyo genoma sea
sinttico de manera que controlemos de forma precisa todos los genes que
se expresan en ese organismo. Es importante desde el punto de vista
biotecnolgico. Desde el punto de vista de protenas recombinantes, si
queremos expresar la insulina, manipulando un microorganismo, es muy
complicado porque algn elemento de la ruta puede intervenir en otra. Por
ello, debemos conocer todas las rutas existentes. El organismo necesita un
estado energtico para la sntesis de antibiticos. Si manipulamos un
microorganismo para que produzca taxol (antitumoral) si tiene muchos

pasos la ruta es muy difcil, puede intervenir en otro proceso. Por lo que se
busca tener el menor nmero de genes posibles.
2010. Mycoplasma mycoides JCVI-syn1.0, primer microorganismo cultivable
con material gentico sinttico. Se pens en introducir todo el cromosoma
pequeo de un organismo en un organismo sintetizado en el laboratorio.
En el caso de eucariotas, en 2014, se consigui una levadora en el que uno
de los cromosomas era totalmente sinttico (el cromosoma 3). Fue en
distintas fases de construccin en las que se est tratando de generar
cromosomas sintticos.
2014. Escherichia coli con cdigo gentico extendido. Se ha conseguido
construir un microorganismo que tenga un alfabeto gentico, es decir que
incorpore bases nuevas. Se ha conseguido reproducir en el laboratorio en
cepas de E.coli, en su DNA adems de tener las 4 bases caractersticas,
tiene bases distintas, en teora se conseguira metiendo 2 nucletidos ms,
es decir, 6 en total. Si aumentamos el nmero de pares de bases
aumentamos la posibilidad de tener codones distintos y por tanto la
posibilidad de que incorporen elementos distintos.