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87
INTRODUCCIN
Enzimas y vitaminas
88
Nombre
xido-reductasas
II
Transferasas
III
Hidrolasas
IV
Liasas
Isomerasas
VI
Ligasas
Enzimas y vitaminas
2+
Cit b Fe
3+
+ Cit c Fe
89
3+
Cit b Fe
2+
+ Cit c Fe
COOH
I
CH2
+
I
+ FAD
CH2
I
COOH
COOH
I
CH
II
CH
I
COOH
Succinato
deshidrogenasa
A. succnico
FADH2
A. fumrico
Glucosa + ATP
Glucosa-6-fosfato + ADP
Glucoquinasa
NH2 - CO - NH2
H2O
CO2 + 2NH3
Ureasa
Dependiendo del tipo de enlace que rompan, las enzimas hidrolticas reciben distintos
nombres: Esterasas, si rompen enlaces de tipo ster; glucosidasas, si rompen enlaces
glucosdicos; peptidasas, si rompen enlaces peptdicos; lipasas, si rompen molculas lipdicas,
etc..
3.4.- Clase IV. Liasas
Catalizan reacciones de ruptura o de formacin de compuestos sin que intervenga el
agua. Un ejemplo lo tenemos en la reaccin de la figura 5.7.
Enzimas y vitaminas
90
COOH
I
CH2
I
CO
I
CH3
CO2
Acetoacetato
descarboxilasa
cido acetoactico
CH3
I
CO
I
CH3
Acetona
Gliceraldehdo-3-fosfato
Dihidroxiacetona-fosfato
Figura 5.8.- Transformacin de un compuesto en otro sin que cambie su frmula emprica.
COOH
I
CH2
I
CH2
I
CH-NH2
I
COOH
cido
glutmico
NH3
ATP
ADP + Pi
Glutamina
sintetasa
Amonaco
CO-NH2
I
CH2
I
CH2
I
CH-NH2
I
COOH
Glutamina
Figura 5.9.- La energa utilizada en la reaccin es la que se desprende al romper la molcula de ATP. Uno de los
tomos de hidrgeno del amonaco junto con el OH del grupo carboxilo del A. glutmico, forman agua que se utiliza
para hidrolizar la molcula de ATP que desprender energa necesaria para unir el grupo NH2 al grupo CO terminal
del . glutmico.
Enzimas y vitaminas
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formen o se rompan enlaces para originar el producto P. Dicho estado activado se encuentra
en la cima de una barrera de energa que separa al sustrato A del producto P.
Figura 5.10.- Diagrama de energa para una reaccin qumica no catalizada y catalizada.
Hay dos mtodos generales mediante los cuales puede acelerarse la velocidad de una
reaccin qumica. El primero consiste en aumentar la temperatura, lo que provoca un
incremento del movimiento trmico y de la energa que, a su vez, induce a un mayor nmero de
molculas para que alcancen el estado de activacin, acelerando, de este modo, la velocidad
de la reaccin. En este sentido, se ha comprobado que, en muchas reacciones, la velocidad se
duplica por cada 10C de aumento en la temperatura. El segundo mtodo consiste en aumentar
la velocidad de la reaccin adicionando un catalizador que se combina con los reaccionantes
de modo transitorio, producindose, como consecuencia de esa unin, un estado de transicin
de menor energa de activacin que el correspondiente a la reaccin no catalizada. Los
catalizadores, pues, aceleran las reacciones qumicas porque disminuyen la energa de
activacin. Cuando la reaccin termina se recupera el catalizador libre. En la tabla de la figura
5.11, se muestra la energa de activacin para la descomposicin del perxido de hidrgeno en
ausencia o presencia de un catalizador.
Enzimas y vitaminas
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Condiciones
G Kcal/mol
Sin catalizar
18
13
Figura 5.12.- Efecto de la concentracin de sustrato sobre la velocidad de una reaccin catalizada enzimticamente.
Enzimas y vitaminas
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K2
ES E + P
K-1
K-2
[1], como
[4]
[5]
KM =
K-1 + K2
([ET] - [ES]) [S]
=
K1
[ES]
[6]
94
Enzimas y vitaminas
[7]
[8]
[10]
Vmax [S]
Vi =
KM + [S]
[11]
Vmax [S]
Vmax
= ; resolvemos y..
2
KM + [S]
KM + [S] = 2 [S]
Enzimas y vitaminas
95
KM = [S]
La KM nos va a indicar la afinidad que tiene la enzima por el sustrato, de forma que
si la KM es baja la afinidad ser alta y viceversa.
La ecuacin de Michaelis-Menten es poco til si queremos determinar la velocidad
mxima de una reaccin ya que sta nunca se va a alcanzar. Por la misma razn es difcil
determinar la KM. Para evitar esto, Lineweaver y Burk transformaron la ecuacin de
Michaelis-Menten utilizando los inversos de ambos trminos, consiguiendo, de esta manera,
una ecuacin similar a la de una recta. Al representar grficamente dicha ecuacin se pueden
hallar los valores de la velocidad mxima y la KM.
1
KM + [S]
=
V
Vmax [S]
Resolvemos y nos queda la ecuacin de Lineweaver-Burk (figura 5.15); ecuacin
matemtica explcita del tipo y = ax + b, cuya representacin se muestra en la figura 5.16.
1
KM
1
1
= +
V
Vmax [S]
Vmax
Figura 5.15.- Ecuacin de Lineweaver-Burk.
Enzimas y vitaminas
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realiza su unin al centro activo de la enzima. Este ltimo grupo es el grupo determinante de
la posicin. Por otro lado la enzima, en su centro activo, posee un centro orientador y un
centro cataltico. Cuando se forma el complejo enzima-sustrato el centro orientador se une
con el grupo determinante de la posicin del sustrato y permite que el centro cataltico
ataque al enlace susceptible (figura 5.17).
Enzima
Sustrato
Centro orientador
Centro cataltico
Enlace susceptible
Sin embargo, realmente el centro activo, aunque de antemano posee una cierta
complementariedad con el centro reactivo del sustrato, slo se adapta totalmente a l al
ponerse en contacto. El proceso sera comparable a como se adapta un guante de ltex de
cirujano a la mano. El guante vaco tiene una forma parecida a la de la mano, pero no la forma
exacta de la mano de la persona que va a usarlo, la cual se adquiere una vez puesto en la
mano.
Esta complementariedad entre el centro activo de la enzima y el centro reactivo del
sustrato determina la especificidad de la enzima, ya que la actividad de la enzima slo ser
posible cuando el sustrato se pueda unir con ella y lo haga con una orientacin ptima para
que se produzca la accin cataltica.
4.3.- Factores que influyen en la velocidad de las reacciones enzimticas
La accin de las enzimas en las reacciones catalizadas por ellas est influida por la
actuacin de distintos factores que afectan a las relaciones entre enzima y sustrato, as como a
las condiciones del medio en el que se desarrollan (pH y temperatura).
La velocidad de una reaccin enzimtica vara al variar la concentracin de la enzima y
del sustrato, y es modificada por las condiciones del medio.
Enzimas y vitaminas
4.3.1.- Influencia de
concentracin de la enzima
97
la
Enzimas y vitaminas
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L-Treonina
E1
-oxobutrico
E2
-acetohidroxibutrico
E3
,-Dihidroxi,-metil valerinico
E4
-oxo--metil valerinico
E5
L-Isoleucina
E1 : Treonin desaminasa.
Es la enzima alostrica de esta secuencia
multienzimtica
Enzimas y vitaminas
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Enzimas y vitaminas
100
Vmax (figura 5.23). El ejemplo clsico de este tipo de inhibicin lo constituye la inhibicin de la
enzima succinato deshidrogenasa por accin del malonato o del oxalacetato (figura 5.24).
Figura 5.23.- Inhibicin competitiva. En trazo negro la grfica de la reaccin en ausencia de inhibidor. En
trazo rojo la grfica de la reaccin en presencia de inhibidor. Obsrvese que en ambos casos la Vmax permanece
constante, lo que vara es la KM.
A
COO
I
CH2
I
Succinato
deshidrogenasa
CH2
I
COO
Succinato
B
COO
I
CH
II
CH
I
COO
Fumarato
COO
I
CH2
II
CO
I
COO
COO
I
CH2
I
COO
Malonato
Oxalacetato
Enzimas y vitaminas
101
ESI
Figura 5.25.- Inhibicin acompetitiva. En trazo negro la grfica de la reaccin en ausencia del inhibidor. En
trazo rojo la grfica de la reaccin en presencia del inhibidor.
Enzimas y vitaminas
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Figura 5.26.- Inhibicin no competitiva. En trazo negro la grfica de la reaccin en ausencia del inhibidor. En
trazo rojo la grfica de la reaccin en presencia del inhibidor.
Forma activa
ICH2COOH
E - S - CH2COOH
. iodoactico
IH
Forma inactiva
Parmetros
KM
KM/Vmax
Vmax
Competitiva
Modifica
Modifica
No modifica
Acompetitiva
Modifica
No modifica
Modifica
No competitiva
No modifica
Modifica
Modifica
Enzimas y vitaminas
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7.- VITAMINAS
Los animales necesitan disponer de dos tipos de principios nutritivos, de carcter
orgnico y de carcter inorgnico.
Los primeros se necesitan en cantidades grandes y son imprescindibles para cubrir sus
necesidades energticas y para ser utilizados como fuente de carbono. Tambin se precisan
aminocidos, necesarios para la sntesis de protenas y de otros compuestos nitrogenados.
Los segundos son necesarios para el adecuado crecimiento, funcionamiento y
reproduccin de los animales, a este grupo se les conoce como vitaminas y se diferencian del
primer grupo en que se necesitan en muy pequeas cantidades, si bien su falta produce
trastornos fisiolgicos que se conocen como enfermedades nutritivas carenciales y que son
fcilmente previsibles y curables con la administracin del principio ausente. Este tipo de
enfermedades se conocen desde hace ms de 200 aos.
Un ejemplo es el escorbuto, enfermedad que atacaba, fundamentalmente, a los
marineros ya que en su dieta no figuraban las frutas frescas ni las hortalizas. Esta enfermedad
comenz a curarse cuando los mdicos de la armada britnica descubrieron que desapareca
suministrando zumo de lima en la dieta. Despus se descubri que era producida por la falta de
vitamina C, cido ascrbico, aislada por primera vez en 1930.
Para que un compuesto sea considerado vitamina, para una especie determinada, no
debe poder sintetizarse en su metabolismo, por lo que deben obtenerse a partir de los
alimentos, a veces como provitaminas, es decir, molculas que el metabolismo transforma
posteriormente en vitaminas. Existen algunas excepciones como la vitamina C, que es
necesaria en los humanos pero es sintetizada por la mayora de los animales a partir de la
glucosa.
Las vitaminas son sustancias lbiles, ya que se alteran con mucha facilidad por los
cambios de temperatura y por los almacenamientos prolongados.
Actualmente se define vitamina como toda sustancia vital, necesaria en trazas para
la funcin celular normal, que hay que tomar, previamente elaborada, en la dieta
alimenticia.
La palabra vitamina se debe a que la primera de ellas que se identific fue la vitamina
B1 denominada tiamina, en cuya composicin aparece un grupo funcional amino.
Aunque la mayora de ellas no llevan grupos amino, el nombre se ha conservado
genricamente.
En la actualidad se conocen todas las vitaminas y se sabe tambin que realizan
funciones como componentes de las enzimas y coenzimas, funciones que debern ser
encuadradas dentro de los procesos catalticos de las clulas.
8.- CLASIFICACIN DE LAS VITAMINAS
8.1.- Vitaminas hidrosolubles
Reciben este nombre por ser solubles en agua y, por lo tanto, en los lquidos
corporales. Presentan una elevada capacidad de difusin.
Su exceso no provoca trastornos ya que se disuelven en la sangre, la cual las
transporta hasta el rin, donde son filtradas y eliminadas por la orina. Slo causan problemas
por defecto.
Las principales, as como sus funciones en el metabolismo, se recogen en la tabla de la
figura 5.29.
Enzimas y vitaminas
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Vit.
FORMA ACTIVA
TIPO DE REACCIN
Descarboxilaciones
xido-reducciones
HIDROSOLUBLES
Tiamina
B1
Riboflavina
B2
PP
xido-reducciones
cido pantotnico
Coenzima-A
Fosfato de piridoxol
Transferencia de aminos
Biocitina
Transferencia de CO2
cido ascrbico
Hidroxilaciones
Niacina
W
Piridoxol
B6
Biotina
H
Cobalamina
B12
cido ascrbico
C
Figura 5.29.- Principales vitaminas hidrosolubles. (*) - CH3 - COO-. (**) - CH (NH2) - COO-.
Vit. A
Ciclo visual
Vit. D
Vit. E
Vit. K
Sntesis de protrombina
2+
______________________________
1.- Defina enzima, centro activo, coenzima, inhibidor y catlisis. [2]. (2004)
2.- Describa el proceso de catlisis enzimtica [15]. (2001)
Enzimas y vitaminas
105
3.- Defina qu es una enzima [04]. Explique la influencia del pH [08] y de la temperatura [08] sobre la
actividad enzimtica. (2004, 2006).
4.- La catalasa es una enzima que transforma el perxido de hidrgeno en oxgeno y agua. Si en un tubo
de ensayo introducimos catalasa y le aadimos agua oxigenada se produce la emisin de burbujas de
oxgeno. Si al mismo tubo de ensayo se le aaden unas gotas de acido clorhdrico se interrumpe la
emisin. Proponga una explicacin razonada para este hecho [1].
5.- En un ensayo enzimtico se produjo, accidentalmente, una elevacin brusca de la temperatura y se
detuvo la actividad enzimtica. Al bajar la temperatura se recupero la actividad enzimtica. Explique
razonadamente este hecho. [1]. (2004).
6.- En una reaccin qumica en la que una sustancia A se transforma en una sustancia B, se liberan 10
kcal/mol de sustrato. Cunta energa se liberara se la reaccin estuviese catalizada por una enzima?
[1]. Razone la respuesta. (2003, 2005, 2006)
7.- En relacin con la figura adjunta, conteste
las siguientes cuestiones:
a) Qu representa la grfica? [02]. Describa el
comportamiento de ambas enzimas [08].
b) La enzima A cataliza la transformacin del
sustrato X en el producto Y. La enzima B cataliza
la transformacin del sustrato X en el producto Z.
Cul de los dos productos se formar en mayor
cantidad a 40 C? [05]. Y a 70 C? [05].
Razone ambas respuestas. (2005).
8.- Para preparar yogur casero se mezcla bien una cantidad de leche con un poco de yogur y se
mantiene a 35-40 C durante unas ocho horas. Qu pasara si por error se mantuviera la mezcla ocho
horas a 0 C? [03]. Obtendramos yogur si empleamos leche previamente esterilizada? [04]. Y si se
esteriliza el yogur antes de aadirlo a la leche? [03]. Razone las respuestas. (2006).
9.- Al investigar el efecto de la temperatura sobre la velocidad de una reaccin enzimtica se obtuvo la
siguiente tabla:
Temperatura en C
Velocidad (mg producto/segundo)
10
05
15
09
20
14
25
20
30
27
35
33
40
37
45
36
50
23
55
09
60
00
Proponga una explicacin razonada de los resultados registrados en la misma [1]. (2006).
10.- Al medir, a una determinada temperatura y pH, la actividad de una reaccin enzimtica nos
encontramos que durante la situacin fisiolgica A, esta actividad vale 250 moles x min-1 x mg protena-1,
mientras que durante la situacin fisiolgica B vale el doble midindola a la misma temperatura y pH.
Explique las posibles razones que han podido ocasionar este cambio y justifique la respuesta [1]. (2001).
11.- Explique cul es la funcin de las enzimas [06] y qu se entiende por apoenzima [03], coenzima
[03] y centro activo [03]. (2001)
106
Enzimas y vitaminas
12.- La ingestin de metanol (HCH2OH) es muy peligrosa porque el metanol, aunque en s mismo no es
txico, experimenta dentro del organismo una transformacin enzimtica. La intoxicacin por metanol
puede combatirse haciendo que la persona afectada tome mucho etanol (CH3CH2OH), una sustancia
parecida al metanol. Indique una posible causa del efecto protector que el etanol ejerce sobre la
intoxicacin por metanol [1]. (2001)
13.- La grfica muestra la actividad de tres enzimas, pepsina, fosfatasa alcalina y papana, con respecto
a las variaciones de pH.. A la vista de la
grfica, conteste las siguientes cuestiones:
a) Explique qu representa esta grfica
(03). Indique los valores aproximados de pH
para los cuales dos enzimas tienen la
misma velocidad de reaccin (04). Para
valores de mxima acidez, cul es el
enzima con mayor actividad cataltica?.
(03).
b) Si el pH de la sangre fuera de 75, indique
qu enzimas podran presentar actividad
cataltica en el plasma sanguneo (04).
Explique el comportamiento de cada enzima
en funcin del pH (06). (2002).
14.- A la vista de la grfica, conteste las
siguientes cuestiones: (la grfica
representa la velocidad de una reaccin
enzimtica con respecto a la
concentracin de sustrato)
a) Explique qu representa esta grfica
(05). Por qu la velocidad de la reaccin
aumenta al principio de la curva, al
aumentar la concentracin de sustrato?
(05).
b) Por qu la velocidad de la reaccin
permanece prcticamente constante a
partir de una determinada concentracin
de sustrato? (05). Qu ocurrir si
aumenta la concentracin de enzima? (05). (2002)
15.- Enumere tres factores que influyan en la actividad enzimtica [03]. Explique detalladamente dos de
ellos [12]. (2003, 2006 y 2008) En el 2006 y 2008 modifica las puntuaciones parciales, adjudicando
[06] y [14] respectivamente.
16.- Defina: enzima, centro activo, coenzima, inhibidor y energa de activacin (2). (2007).
17.- Explique razonadamente cmo afectan la temperatura, el pH y la concentracin de sustrato a la
actividad de las enzimas (15). Describa los tipos de inhibicin enzimtica (05). (2007).
18.- En algunas ocasiones, cuando se almacenan patatas en condiciones de humedad, la parte del
tubrculo que ha estado en contacto con el agua presenta cierto sabor dulce. Explique razonadamente el
hecho describiendo el proceso bioqumico que podra haber ocurrido [1]. (2002).
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