INTRODUCCIN

La esterilizacin es un proceso a travs del que se logra la destruccin total de

los microrganismos viables, incluidas las esporas (microorganismos ms
resistentes al calor, as como a los agentes qumicos y radiaciones) presentes
en un determinado material.
Se considera que un objeto es estril cuando ha sido sometido a los diversos
procesos de esterilizacin y valida todos los controles realizados en el proceso.
Este procedimiento es de gran utilidad dentro del campo farmacutico ya que
existen muchos procesos que requieren la utilizacin de materiales estriles.
Entre stos podemos destacar.

La esterilizacin de equipos quirrgicos y otros materiales de uso mdico con

el propsito de reducir el riesgo de infecciones en pacientes.

El acondicionamiento del material (pipetas, tubos, placas de Petri, pinzas,

etc.) que va a ser utilizado en los laboratorios de microbiologa.

La preparacin de medios de cultivo que sern empleados con diferentes

propsitos (cultivo de microorganismos, control del ambiente, equipos o
personal, anlisis microbiolgico de medicamentos, cosmticos, alimentos,
etc.)

La descontaminacin de material utilizado.

Son mltiples los medios y sistemas de esterilizacin, la cual se puede conseguir

mediante procedimientos fsicos y qumicos.
Mtodos fsicos de esterilizacin
Mtodos qumicos de esterilizacin
Para ellos es importante recalcar definiciones previas

 Esterilizacin: Proceso que destruye toda forma de vida microbiana. Un

objeto estril est libre de microorganismos vivos.
Desinfeccin: Es la destruccin, inactivacin o remocin de aquellos
microorganismos que pueden causar infeccin u ocasionar otros efectos
indeseables, esto no implica necesariamente esterilizacin
Desinfectante: Agente usualmente qumico que mata las formas de
crecimiento de los microorganismos, pero no necesariamente las esporas.

Esterilizacin por mtodos fsicos:

Calor:
Acta por desnaturalizacin de protenas y contribuye a la fusin de lpidos de
membranas.

Calor hmedo
La desnaturalizacin y coagulacin se facilita en presencia de agua pues se
rompen los puentes de hidrgeno entre los grupos C = O----HN que
constituye la estructura secundaria y se agrega (tambin mediante puente de
hidrgeno) una molcula de agua a cada extremo de esas uniones rotas. Las
protenas en soluciones ms diluidas coagulan a menor temperatura que las
concentradas.
Esterilizar exclusivamente en calor hmedo: medios de cultivos, recipientes
contaminados, material de goma, y todo elemento que no resista las altas
temperaturas del calor seco.

Autoclave:
La autoclave utiliza vapor a presin superior a la normal. As, la temperatura
del vapor de agua asciende a 121C. El vapor saturado penetra en los
recipientes tomando contacto con los microorganismos a destruir, all se
condensa liberando calor. El calentamiento es rpido por la gran cantidad de
calor latente del vapor de agua, que libera al condensarse sobre la superficie
del objeto.

 Calor seco
Deshidrata

las

bacterias,

virus,

etc.

facilita

la

coagulacin

desnaturalizacin de las protenas. Se requieren mayores temperaturas para

producir dao irreversible (muerte). Se acepta que el calor seco acte
oxidando los constituyentes intracelulares.
En el proceso de esterilizacin son prioritarios los procesos oxidativos y de
fusin de membranas por sobre la desnaturalizacin. Resulta lento por la
menor eficacia del calor seco y por la lentitud del transporte del calor
(conveccin y radiacin).

Horno Pasteur o estufa Poupinel:

Este mtodo se basa en el calentamiento del interior de un aparato de acero
inoxidable, en el que se eleva la temperatura. Por energa elctrica que
controla un termostato. En el interior se coloca el material limpio y seco en
unas bandejas a dsticas alturas.

Flameado

Esta tecnica tiene por objetivo hacer pasar el material por la llama de un
mechero de tipo Bunsen hasta lograr su incandescencia.
Se acostumbra a usar en los laboratorios de microbiologia, para esterilizar
asas de siembra, tubos de vidrio o pipetas, mediante la aplicacin directa de
la llama.

Incineracin
Es una forma de destruir la carga microbiana por combustion. Ma que como
medio de esterilizacion, se utiliza para eliminacion de residuos biopeligrosos
mediante su combustion en hornos crematorios o incineradores de
caracteristicas especiales.

Radiaciones Ionizantes: Radiaciones ionizantes son aquellas radiaciones

con energa suficiente para ionizar la materia, extrayendo los electrones de sus
estados ligados al tomo.
Las radiaciones ionizantes pueden provenir de sustancias radiactivas, que
emiten dichas radiaciones de forma espontnea, o de generadores artificiales,
tales como los generadores de Rayos X y los aceleradores de partculas.
Las procedentes de fuentes de radiaciones ionizantes que se encuentran en la
corteza terrquea de forma natural, pueden clasificarse como compuesta por
partculas alfa, beta, rayos gamma o rayos X. Tambin se pueden producir
fotones ionizantes cuando una partcula cargada que posee una energa cintica
dada, es acelerada (ya sea de forma positiva o negativa), produciendo radiacin
de frenado, tambin llamada bremsstrahlung, o de radiacin sincrotrn por
ejemplo (hacer incidir electrones acelerados por una diferencia de potencial
sobre un medio denso como tungsteno, plomo o hierro es el mecanismo habitual
para producir rayos X). Otras radiaciones ionizantes naturales pueden ser los
neutrones o los muones.
Las radiaciones ionizantes interaccionan con la materia viva, produciendo
diversos efectos. Del estudio de esta interaccin y de sus efectos se encarga la
radiobiologa.
Tienen gran penetrabilidad y se las utiliza para esterilizar materiales
termolbiles (termosensibles) como jeringas descartables, sondas, etc. Se
utilizan a escala industrial por sus costos.

En este tipo de radiaciones tenemos:

Rayos gamma. Son radiaciones ionizantes que se usan en la industria de

artculos mdicos, odontolgicos y farmacuticos. Se caracterizan por una
alta energa y gran penetracin. Es un mtodo costoso.

Rayos beta. Se usan principalmente en la industria. Su poder de penetracin

es menor que el de las radiaciones gamma

Rayos ultravioleta. Son radiaciones no ionizantes. No tienen efecto

esterilizante sobre algunos microorganismos. Son de baja energa y escasa
penetracin. Su accin es superficial y se usan para mantener una baja tasa
de microorganismos en el quirfano y para mantener estril el instrumental
una vez que ha sido ya esterilizado.

Ondas Supersnicas (microondas odontolgico): Las vibraciones

sonoras de alta frecuencia, dentro del espectro audible alto y ultrasnico (201000 KC) proporcionan una tcnica til para la ruptura de las clulas. Este
aparato est formado por un foco emisor de alta frecuencia que causa
vibraciones en las molculas de los microorganismos. Dichas vibraciones se
transforman, por friccin interna, en calor y de esta forma se altera y se desactiva
todo tipo de estructura viva. El instrumental se coloca en un contenedor cubierto
por bolitas de vidrio humedecidas con un lquido (ortobencil paraclorofenato de
sodio). El tiempo de esterilizacin es de 90 segundos.

Aunque las vibraciones son letales para muchos miembros de la poblacin

bacteriana expuesta quedan numerosos sobrevivientes, por lo que carece de
valor prctico en la esterilizacin y desinfeccin. Se usa una frecuencia superior
15.000 vibraciones por segundo, o tiene valor prctico en hospital

Filtracin: Es un proceso que impide el paso de microorganismos de un

ambiente a otro. Se utiliza en la industria farmacutica, en soluciones
termolbiles que no pueden sufrir la accin del calor. Actualmente este mtodo
se usa en los compresores de aire que utilizan filtros coalescentes que filtran
partculas hasta 0,001 ?m (99,9 % de pureza).

Ebullicin: se pueden usar 2 tipos de lquidos: agua y aceite

Agua en ebullicin. El agua hierve a 100C, este sistema ofrece todas las
garantas de esterilizacin siempre y

cuando se cumpla el tiempo

en que el material debe permanecer en ebullicin, para lograr la muerte de

las bacterias,

no as las de las esporas que an siguen resistentes. Aqu

por supuesto no se puede esterilizar gasas, artculos de

papel

(conos) etc. Tiempo de ebullicin establecido: 20 minutos.

Aceite en ebullicin. Para esto se utiliza un aceite especial voltil,
aprovechando la ventaja de que el aceite hierve a

una temperatura

mayor que la del agua, la que puede llegar a 300C. Desde luego, no hace
falta que hierva, basta

con mantener el instrumental a 130C Tiempo

de ebullicin establecido: 20 minutos

Microesferas de vidrio (esterilizadora de bolitas): Este tipo de

esterilizacin se realiza con un equipo que contiene un recipiente con
microesferas de vidrio que son calentadas elctricamente y que pueden ser
sustituidas por sal comn o arena. Se usa para esterilizar instrumental pequeo
de Endodoncia, conos de papel o bolillas de algodn, que se introducen en el
compartimiento durante 15 a 20 segundos a temperatura de 250 C. Su uso es
cuestionado.

ESTERILIZACIN POR MTODOS QUMICOS:

AGENTES QUMICOS
Esta tipo de esterilizacin se utiliza para algunos instrumentos muy delicados,
cuyo temple y filo conviene proteger del calor. Los productos qumicos que se
utilizan son bactericidas o desinfectantes. Tales productos, en unos casos
destruyen la bacteria, actuando como desinfectantes y en otros impiden su
desarrollo por lo que se denominan antispticos.
La eficiencia de estos bactericidas est en razn directa de la concentracin del
producto, del tiempo que el instrumento permanezca dentro de ellos y de su
prolija limpieza, ya que la sangre, as como los detritos adheridos al instrumento
demoran y anulan la accin del agente qumico que se utilice.
Otros esterilizantes son las
soluciones qumicas que
tienen,

por

propiedades

si

mismas,

bactericidas,

tales como: alcohol, agua

oxigenada,

fenol,

timol,

yodo, solucin de formol,

solucin

de

hipoclorito,

permanganato de potasio,
bicloruro de mercurio, etc.,
estos son bactericidas que
se usan puros o en solucin
acuosa o alcohlica. Esta
esterilizacin tambin se llama esterilizacin en fro.
Instrumentos que se esterilizan con estos medios qumicos:
* Fresas
* Bistures
* Agujas
* Instrumentos de Endodoncia.

xido de etileno: es un poderoso agente esterilizante gaseoso de accin

lenta, inflamable cuando aparece en concentraciones iguales o superiores al 3
%, y altamente txico cuando es ingerido o inhalado (mutgeno y carcingeno).
Se utiliza en la industria de productos mdicos y odontolgicos para esterilizar
productos termolbiles como plstico,

drogas, equipamiento electrnico,

etc. La razn de su uso es la capacidad que tiene de esterilizar a temperatura

ambiente.
Su poder de penetracin es alto. A este gas son permeables el polietileno, el
nailon y el celofn, por lo que se usan

como embalajes. Se emplea en

cmaras parecidas a autoclave.

Su mecanismo de accin es la alquilacin de la pared celular del
microorganismo
Tiempo de esterilizacin vara entre 10 a 16 h a temperatura ambiente (25
C).
Depende de variables como el vaco que se produce, la humedad, la
concentracin del gas y la temperatura. La

esterilizacin puede

ser vlida hasta 5 aos, si el embalaje se ha mantenido intacto. Todos los

artculos debern

airearse por 6 h despus de una esterilizacin.

Etapas en la esterilizacin con xido de

etileno
* Acondicionamiento y humidificacin.
* Ingreso del gas.
* Exposicin al gas.
* Evacuacin.
* Aireacin.
Ventajas del xido de etileno:
* Alta capacidad de penetracin.
* No daa materiales sensibles al calor.
* Largo tiempo de validez de esterilizacin.
Desventajas del xido de etileno:
* Necesita de un largo ciclo

* Elevado poder txico e inflamable

* Es un mtodo muy costoso.

Plasma de perxido de hidrgeno. El plasma es el cuarto estado de la

materia no slido, no lquido, no gaseoso. Consiste en un conjunto de iones,
electrones y partculas atmicas neutras que se produce mediante temperaturas
altsimas o fuertes campos electromagnticos. Es un mtodo reciente de
esterilizacin rpida, a baja temperatura, baja humedad y sin residuos txicos
pues sus residuos finales son oxgeno y agua).
* Mecanismo de accin: Los radicales libres, producto de la ionizacin del gas
por la presencia del campo magntico, interactan con las membranas celulares,
las enzimas o los cidos nucleicos y destruyen los microorganismos.
* Etapas del ciclo de esterilizacin por plasma
a. Disminucin de la presin
de la cmara a 300 mm Hg
(vaco) y aumento de la
temperatura hasta 50 C
b. Inyeccin del perxido de
hidrgeno
cmara

dentro
y

su

de

la

posterior

evaporacin.
c. Difusin del gas a toda la
cmara por un tiempo fijo
d.

Ionizacin

mediante

el

del

gas
campo

electromagntico
e. Ventilacin de la carga
con aire filtrado.
Con este mtodo es posible
esterilizar instrumental sensible a la humedad, equipos electrnicos, material
cortante, instrumentos delicados e incluso cargas con diferentes productos
(vidrio, metal, plsticos). El mayor inconveniente es el costo del equipamiento.

Este mtodo usa perxido de hidrgeno como precursor de plasma. El plasma

que est considerado como un cuarto estado de la materia diferente al lquido,
slido y gaseoso, est compuesto por iones reactivos, electrones y partculas
atmicas neutras. El perxido de hidrgeno en su fase plasma tiene propiedades
esterilizantes a bajas temperaturas (50C).

El equipo esterilizador opera

mediante la inyeccin de perxido de hidrgeno al 58% y por medio de emisin

de energa de radiofrecuencia crea un campo electromagntico en la cmara
generando plasma. En este estado se produce la esterilizacin. Posteriormente
se corta la radiofrecuencia y se vuelve a la presin atmosfrica por la
introduccin de aire filtrado.

Esterilizacin por formaldehido (formol). El formaldehdo es un agente

qumico con alto poder microbicida. Acta por alquilacin De la pared celular de
los microorganismos. No es explosivo ni inflamable en concentraciones Usadas
como esterilizante. Para la esterilizacin existe como solucin de formalina o
como Hidrato polimrico (para formaldehdo). El formaldehdo es un alrgeno
potente con un olor penetrante e irritante a muy bajas concentraciones. En forma
de solucin, el formaldehdo est presente como monohidrato, glicol de metileno
(CH2(OH)2) y una serie de polioximetileno de bajo peso molecular, que aumenta
con el aumento de concentracin del formaldehdo. El paraformaldehdo es una
mezcla de glicoles de polioximetileno que contiene un 90 - 99% de formaldehdo
con un equilibrio de agua libre y combinada. El para formaldehdo se vaporiza
gradualmente,

generando

gas

de

formaldehdo

monomrico.

Esta

despolimerizacin se acelera aumentando la temperatura. Existen varios tipos

de esterilizadores con formaldehdo. Los ms antiguos que emplean tabletas de
para formaldehdo, las que se vaporizan con el calor; otros que emplean 60 cc
de solucin de formaldehdo al 36% y los equipos aparecidos recientemente que
utilizan aprox. 1.300 cc de solucin de formaldehdo al 2%. El tiempo que demora
el ciclo de esterilizacin, depende de la temperatura con la cual se est
esterilizando. Esta puede ir de 2 a 4 horas aproximadamente.

La esterilizacin con formaldehdo se realiza en autoclaves a temperaturas entre

50 y 80C. En la esterilizacin a temperaturas entre 50 y 60 C existe el peligro
de formacin de para formaldehdo.
La esterilizacin se produce por accin del
formaldehdo

en

presencia

de

vapor

saturado. La concentracin del gas y la

humedad relativa son crticas y difciles de
mantener durante el ciclo de esterilizacin.
Como la esterilizacin se produce a bajas
temperaturas, cuando la presin del vapor
baja, el vapor se condensa, arruinando y
disminuyendo la cantidad de formaldehdo
disponible para actuar. Existen estudios
que demuestran que la temperatura es
crtica en esterilizacin con formaldehdo, y que a concentraciones de 14 mg/l y
temperaturas de 65C o menos, hay una notable reduccin de la inactivacin de
los microorganismos (Honey 1984). Por esta razn, la esterilizacin con
temperaturas bajo 65 C ha sido cuestionada

Soluciones qumicas (esterilizacin en fro): El uso de soluciones

salinas para la esterilizacin consiste en la inmersin del instrumental en
desinfectantes de alto nivel, los cuales tienen accin bactericida, virucida,
fungicida y esporicida.
* Las soluciones qumicas conocidas como esterilizantes son:
a. Glutaraldehdo al 2 % (10 h)
b. Formaldehdo al 38 % (18 h) = formol
c. Perxido de hidrgeno al 6 %
d. cido paractico del 0,2 al 30 %
f. La esterilizacin qumica, en frio o tambin llamada desinfeccin es un proceso
difcil de operar, que requiere cuidados especiales de manipulacin y almacenaje
del instrumental. El recipiente plstico empleado donde se realiza la misma debe
permanecer cerrado durante todo el ciclo de esterilizacin; y una vez completado

el ciclo, los instrumentos deben ser retirados de la solucin con una pinza estril;
lavados en abundante agua destilada esterilizada; para eliminar los residuos de
la sustancia qumica esterilizante y secados con compresas o toallas
esterilizadas; procedindose a su

almacenaje en recipientes previamente

esterilizados.
Ventaja principal del mtodo:
* Tienen accin bactericida, virucida, fungicida y esporicida.
* Permiten la esterilizacin de materiales termosensibles.
Desventajas del mtodo:
* Largo tiempo de exposicin a los agentes esterilizantes
* Corrosin de los instrumentos
* Toxicidad de las soluciones empleadas
* Costo elevado
* Dificultad operacional.