ANLISIS INSTRUMENTAL

Instituto Tecnolgico de
Chihuahua

Prctica #1 Curva de
calibracin

Daz Correa Leslie Alejandra.

Ros Mendoza Erika Roxana.

Holgun Marcela.

Equipo 1

ANLISIS INSTRUMENTAL

Resumen:
La curva de calibracin es una curva de referencia que se grafica a partir de estndares con
concentraciones conocidas para a partir de este sea posible realizar una cuantificacin de un
analito en una muestra problema.
El objetivo de la prctica es aprender a realizar una curva de calibracin correctamente y por
medio de esta conocer la concentracin de Mn en una muestra problema determinada.
Para esto se realizaron 5 estndares de 5, 10, 15, 20 y 25 ppm de Mn a partir de una solucin
intermedia de 100 ppm la cual se prepar de una solucin madre de 1000 ppm. Se coloc un
blanco y los cinco estndares (5, 10, 15, 20 y 25 ppm) y la muestra problema en celdas de cuarzo y
se llevaron al espectrofotmetro (HACHRR14000) para medir sus seales las cuales fueron 0,
0.040, 0.0113, 0.087, 0.092, 0.135 y 0.100 respectivamente. Se realiz tambin una correccin de
blancos en el cual se analizaron en el mismo instrumento una serie de 4 blancos.
Se rest el promedio de los blancos a las seales arrojadas por el instrumento para la correccin
del ruido y se descart el estndar de 10 ppm. Luego de esto se realiz una curva de calibracin y
una regresin lineal con los datos del blanco y los estndares y a partir de esto se obtuvo una la
ecuacin de la recta correspondiente a estos datos con lo cual se encontr la concentracin de la
muestra problema que fue de18.93 ppm de Mn, se calcularon los lmites de deteccin LD seal =
0.0642 LD concentracin = 1.126 que indican la seal y la concentracin mnimas detectables por el
instrumento. Tambin se calcularon los lmites de determinacin que son el intervalo til de
trabajo y la sensibilidad que es la pendiente de la curva de calibracin.
Y se concluy que en este tipo de anlisis se requiere mucha precisin al preparar los estndares
para que los resultados sean ms exactos, y la sensibilidad del mtodo es baja ya que hay muy
poca variacin en las seales con respecto a los cambios de concentracin.

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Abstract:
The calibration curve is a curve that is plotted reference from standards with known
concentrations to from this possible a quantification of an analyte in a test sample.
The target practice is to perform a learning curve calibration correctly and through this to
know the concentration of Mn in a sample given problem.
To this five standards of 5, 10, 15, 20 and 25 ppm Mn from intermediate 100 ppm solution
which was prepared in a 1000 ppm solution mother performed. a white and five standard
(5, 10, 15, 20 and 25 ppm) and the test sample in quartz cells was placed and took the
spectrophotometer (HACHRR14000) to measure their signals which were 0, 0.040, 0.0113,
0.087 , 0.092, 0.135 and 0.100 respectively. a correction of white in which a series of 4
targets were analyzed in the same instrument was also performed.
the average white subtracted signals dropped by the instrument for correcting the noise
and the standard of 10 ppm was discarded. After this a calibration curve and a linear
regression with target data and standards was made and from this an equation
corresponding to the data line so that the concentration of the test sample was found to
be obtained de18.93 ppm Mn, were calculated detection limits LD signal = 0.0642 LD
concentration = 1.126 indicating the minimum signal and concentration detectable by the
instrument. the determination limits are useful working range and sensitivity is the slope
of the calibration curve were also calculated.
And it was concluded that this type of analysis much precision is required in preparing the
standards for the results to be more accurate, and the sensitivity of the method is low
since there is very little variation in the signals with respect to changes in concentration.

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Introduccin:
La curva de calibracin es un mtodo
muy utilizado en qumica analtica
para determinar la concentracin de
una sustancia (analito) en una
muestra desconocida, sobre todo en
disoluciones. El mtodo se basa en la
relacin
proporcional
entre
la
concentracin y una determinada
seal
analtica
(propiedad).
Conociendo esta relacin, ser
posible conocer la concentracin en
una muestra dada mediante la
medida de esa seal. La relacin
concentracin seal se suele
representar en una grfica a la que se
le conoce como curva de calibracin
o curva de calibrado.
Se trata de una curva de referencia
construida con cantidades conocidas
de una sustancia que se utiliza para
determinar la cantidad de esta
sustancia presente en una muestra
incgnita.En muchas determinaciones
se cumple una relacin proporcional
entre la magnitud o intensidad de
color que da una reaccin y la
cantidad del reactivo que la
provoca.(1)
Una curva de calibracin es la
representacin grfica de una seal
que se mide en funcin de la
concentracin de un analito. La
calibracin incluye la seleccin de un
modelo para estimar los parmetros
que permitan determinar la linealidad
de esa curva y, en consecuencia, la
capacidad de un mtodo analtico

para obtener resultados que sean

directamente proporcionales a la
concentracin de un compuesto en
una
muestra,
dentro
de
un
determinado intervalo de trabajo. En
el procedimiento se compara una
propiedad del analito con la de
estndares
de
concentracin
conocida del mismo analito (o de
algn otro con propiedades muy
similares a ste). Para realizar la
comparacin se requiere utilizar
mtodos y equipos apropiados para
la resolucin del problema de
acuerdo al analito que se desee
determinar.
La elaboracin de una curva de
calibrado se puede dividir en dos
pasos:
preparacin
de
las
disoluciones patrn y obtencin de la
funcin
seal

concentracin
(construccin
de
la
curva
propiamente dicha). Una vez obtenida
la curva de calibracin se podr
utilizar para conocer la concentracin
de
analito
en
una
muestra
(2)
desconocida.
La etapa de calibracin analtica se
realiza mediante un modelo de lnea
recta que consiste en encontrar la
recta de calibrado que mejor ajuste a
una
serie
de
n
puntos
experimentales, donde cada punto se
encuentra definido por una variable
x
(variable
independiente,
generalmente
concentracin
del
analito de inters) y una variable y
(variable dependiente, generalmente
respuesta instrumental). La recta de
4

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calibrado se encuentra definida por

una ordenada al origen (b) y una
pendiente (m), mediante la ecuacin
y = mx + b . A partir de la curva de
calibracin
(conjunto
de
concentraciones que describen el
intervalo en el cual se deber
cuantificar el compuesto por analizar)
y a fin de asegurar que la recta
encontrada
con
los
puntos
experimentales
se
ajuste
correctamente al modelo matemtico
de la ecuacin se calculan los valores
de la ordenada al origen, la pendiente
y el coeficiente de determinacin.(3)

Metodologa:
Se lav el material requerido, esto
con el fin de evitar interferencias con
otras sustancias durante el anlisis
(Imagen 1).

Imagen 1.- Material lavado

Objetivo:
Generar una curva de calibracin
mediante la preparacin de una serie
de estndares que contengan al
analito
en
una
concentracin
conocida,
para
determinar
la
concentracin de manganeso (Mn)
presente en una muestra problema.
Se utilizaron 7 matraces aforados de
100mL, pipetas volumtricas de 5, 10,
20 y 25 mL, 2 pipetores, un vaso de
precipitado de 50mL, Gradilla,11
celdas de vidrio, 2 picetas. A dems
como reactivos
agua destilada,
KMnO4 y una muestra problema.
Todo esto fue medido en un
Espectrofotmetro (HACHRR14000).

Se prepar una solucin madre de

1000 ppm de KMnO4 (Imagen 2).

Imagen 2.- Permanganato de

potasio.

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A partir de la solucin madre de

KMnO4 de 1000 ppm (Imagen 3), se
prepara una solucin intermedia de
100 ppm aforada a 100 mL (Imagen
4).

Imagen 5.- Estndares de 5, 10, 15, 20 y 25

ppm.

Para la preparacin de los

estndares:

Imagen 3.- Vaso de precipitado

con 50 mL de KMnO4.

Imagen 4.- Preparacin de la

solucin intermedia de 100 ppm
aforada a 100mL.

A continuacin se prepar una serie

de estndares a partir de la solucin
intermedia de 100 ppm en diferentes
concentraciones de 5, 10, 15, 20 y 25
ppm, y se aforaron a 100 mL como se
muestra en la Imagen 5.

5 ppm.- Se utiliza 5 ml de
solucin intermedia con su
respectiva pipeta volumtrica,
esta se coloca en un matraz y
se afora con 100 ml de agua
destilada.
10 ppm.-Se utiliza 10 ml de
solucin intermedia con su
respectiva pipeta volumtrica,
esta se coloca en un matraz y
se afora con 100 ml de agua
destilada.
15 ppm.- Se utiliza 15 ml de
solucin intermedia con su
respectiva pipeta volumtrica,
esta se coloca en un matraz y
se afora con 100 ml de agua
destilada.
20 ppm.- Se utiliza 20 ml de
solucin intermedia con su
respectiva pipeta volumtrica,
esta se coloca en un matraz y
se afora con 100 ml de agua
destilada.

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25 ppm.- Se utiliza 25 ml de
solucin intermedia con su
respectiva pipeta volumtrica,
esta se coloca en un matraz y
se afora con 100 ml de agua
destilada.

seal, y a partir de este se determin

la concentracin de analito presente
en la muestra problema.

Clculos:

Al tener la serie de estndares

completos lo siguiente es vaciar cada
estndar en una celda hasta la altura
del medio crculo; precio a esto es
necesario enjuagar la celda dos
veces con el estndar respectivo.

Preparacin de la solucin
madre de 1000 ppm de KMnO4.

Se llenan 5 celdas con el blanco que

en este caso fue nicamente de agua
destilada.

PM kMnO4 = 158 mg/mol

Para preparar 1 Lt de solucin madre

de
1000
ppm
a
partir
de
Permanganato de potasio (KMnO4):

PM Mn = 54.93 mg/mol

Por otra parte, se llena otra celda con

la muestra problema.
A continuacin se muestra en la
Imagen 6 la gradilla con celdas ya
con los estndares, los blancos y la
muestra problema.

Se necesitan 2876 mg de KMnO4

para preparar un litro de solucin de
manganeso de 1000 ppm.

Preparacin de la solucin
intermedia de 100 ppm.
Imagen 6.- Gradilla con celdas.

Posteriormente
se
llevan
al
espectrofotmetro para realizar el
anlisis y obtener las seales
correspondientes.
Con los resultados dados por el
instrumento se realiza la curva de
calibracin que es un grfico que
permite la relacin concentracin

A partir de la solucin madre de

KMnO4 de 1000 ppm, se prepar una
solucin intermedia de 100 ppm. Para
esto se tom una alcuota de 10 mL
de la solucin madre de 1000 ppm y
se afor a 100 mL.
V1= (100 ppm)(100 ml) = 10 ml
1000 ppm

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Ya que se tiene preparada la solucin

intermedia, se agregan al matraz los
ml necesarios para obtener la
concentracin indicada para cada
patrn y se aforan 100 ml.

Para 5 ppm
V1= (5 ppm)(100 ml) = 5 ml.
100 ppm

Preparacin de estndares.
Para 10 ppm
En la Figura 1 se muestra la
concentracin con la cul prepar la
serie de patrones para llevar a cabo
el anlisis.

V1= (10 ppm)(100 ml) = 10ml.

100 ppm

Para 15 ppm
V1= (15 ppm)(100 ml) = 15 ml.
100 ppm

Para 20 ppm
V1= (20 ppm)(100 ml) = 20 ml.
100 ppm

Concentracin de Manganeso
(Mn) en 100 ml de aforo
Para preparar los estndares es
necesario conocer el volumen (V1) de
la solucin intermedia que cada
estndar
necesita
para
su
preparacin.
C1V1=C2V2
Despejando:

V1=C2V2/C1

Para 25 ppm
V1= (25 ppm)(100 ml) = 25ml.
100 ppm

Resultados:
En las siguientes tablas se muestra
las seales emitidas por los
estndares, los blancos y la muestra
problema.

Dnde:
C1= 100 ppm
C2= 5, 10, 15, 20 y 25 ppm.
V2= 100 ml
V1= Vara
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Lecturas obtenidas por el

espectrofotmetro por parte de
los estndares y la muestra
problema respectivamente
(Tabla A-1).

Blanco

Seal

0.036

0.017

0.001

Tabla A-1 Seales de los patrones y la

muestra problema emitidas por el
espectrofotmetro.

Concentracin
(ppm)
5
10
15
20
25
Muestra
problema

Promedio de los blancos:

Seal
0.040
0.113
0.087
0.092
0.135
0.100

Nota: Se prepararon 5 estndares,

pero se descart el estndar de 10
ppm ya que la seal emitida por el
mismo no se encontraba en el rango
de las seales de los dems
estndares, por lo que nicamente se
usaron los 4 puntos restantes.

Lecturas obtenidas por el

espectmetro por parte de los
blancos (Tabla A-2).
Tabla A-2 Seales de la serie de
blancos emitidas por el
espectrofotmetro

Desviacin estndar de los blancos:

Grfica Curva de calibracin

A continuacin se muestra de manera
grfica (Grfico 1) la informacin de
la Tabla A-1 ya con el promedio de
los blancos restados.

Curva de calibracion
y = 0.0045x + 0.0013

0.14
0.12
0.1
0.08
0.06
0.04
0.02
0
0

10

20

30

Grfico 1.- Curva de calibracin con las seales

obtenidas

ANLISIS INSTRUMENTAL

Seal de la muestra problema

Lmites de deteccin

y = 0.100 - .0135= 0.0865

Para calcular los lmites de deteccin

se debi sacar un promedio de las
seales de los blancos ( ) as como

m= 0.0045 (sensibilidad)
b= 0.0013
En el Grfico 1 se puede observar
que la seal de la muestra problema
se encuentra dentro de los lmites de
determinacin, por lo que se puede
realizar la cuantificacin.
A continuacin se
siguiente ecuacin:

muestra

la

tambin la desviacin estndar (

).

Seal mnima detectable por el

instrumento

y = mx + b
Dnde:

y = Seal
m = Pendiente
b = interseccin en y
x = concentracin
De la cual se despejara x para
conocer la concentracin de analito
(Mn) presente en la muestra
problema:

Esto nos indica que la seal mnima

detectable por el instrumento es de
0.0642 si tuviramos una muestra o
patrn cuyo analito emitiera una seal
menor a la antes mencionada
entonces este mtodo no sera el
adecuado para llevar a cabo tal
experimento.

Concentracin mnima
detectable por el instrumento
X= 18.93 de Mn presente en la
muestra problema.

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Esto nos indica que la concentracin

mnima detectable por el instrumento
es de 2.88 ppm si tuviramos una
muestra o patrn cuya concentracin
fuese menor a 2.88 ppm entonces
este mtodo no sera el adecuado
para llevar a cabo tal experimento.

estndar ms alto de la curva de

calibracin.

Lmites de cuantificacin

Lmites de determinacin
Los lmites de determinacin son el
intervalo til de trabajo de un mtodo
analtico. Estos lmites se pueden
identificar fcilmente en la curva de
calibracin (Grfico 1).
En base a concentracin:
En la curva de calibracin
(Grfico 1) se observa que el
intervalo que se puede realizar la
cuantificacin
en
base
a
concentracin es de 5 a 25 ppm.

Sensibilidad
Sensibilidad= m= 0.0045
Esto nos indica la capacidad del
instrumento de diferenciar pequeas
variaciones en la concentracin del
analito. Es decir que tanto cambia la
seal con un cambio pequeo en la
concentracin del analito, en este
caso se podra decir que el mtodo
es poco sensible ya que la pendiente
es muy pequea.

En base a seal:
En la curva de calibracin
(Grfico 1) se observa que el
intervalo que se puede realizar la
cuantificacin en base a seal es
de 0.02 a 0.12.
NOTA: Cuando una seal se
encuentra por debajo del estndar de
menor concentracin no se puede
realizar
una
cuantificacin,
ni
tampoco se pueden realizar clculos
por fuera de los lmites de
determinacin. Para poder realizar
anlisis cuantitativos, el resultado ya
sea en base a concentracin o a
seal, se debe encontrar entre los
valores del estndar ms bajo y el

Conclusin:
En conclusin la elaboracin de la
prctica de curva de calibracin
ayud a conocer la concentracin de
analito en la muestra problema el cual
no est exactamente entre los valores
de los estndares a los cuales les
corresponden las seales que estn
alrededor de la seal de la muestra
problema y esto se puede deber a
fallas al preparar los patrones sin
embargo es muy til y deja mucho
aprendizaje realizar este tipo de
prcticas ya que no solo se realiz la
curva de calibracin y la regresin
lineal sino que tambin se aprendi a
preparar soluciones patrn y se
11

ANLISIS INSTRUMENTAL

practic en el manejo del material de

laboratorio e instrumentos. Y se
puede
apreciar
que
en
la
experimentacin no siempre se
obtienen los resultados ideales que
obtenemos al hacer ejercicios en
papel.
Por otra parte nos damos cuenta este
mtodo tiene poca sensibilidad ya
que la pendiente es muy pequea y a
simple vista se puede observar que
las variaciones de seal son
pequeas con respecto a la variacin
en
la
concentracin
de
los
estandares.

Referencias:
1) Coto, C. (2016). Capitulo 3. Las
curvas de calibracion. [online]
Quimicaviva.qb.fcen.uba.ar. Available
at:
http://www.quimicaviva.qb.fcen.uba.ar
/contratapa/calibracion/calibracion.ht
m [Accessed 13 Sep. 2016].
2) Dozal, M. and Villanueva, M.
(2016). CURVAS DE CALIBRACIN
EN LOS MTODOS ANALTICOS.
[online] Available at:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/arch
ivero/Curvasdecalibracion_32644.pdf
[Accessed 13 Sep. 2016].
3) Palma, I. and Padial, M. (2014).
Qu es curiosoando.com?. [online]
Curiosoando. Available at:
https://curiosoando.com/que-escuriosoando-com [Accessed 13 Sep.
2016].

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