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MESOFILOS
AEROBIOS MESOFILOS
RECUENTO DE MICROORGANISMOS.
Los anlisis microbiolgicos de aguas y alimentos, estn destinados a la bsqueda de agentes
infecciosos o toxignicos o de indicadores de una contaminacin no admisible, de modo que se
asegure la calidad higinico-sanitaria de los mismos. Aunque los microorganismos ms importantes en
cuanto a la salud pblica son aquellos que desarrollan patologas, tales como Salmonella,
Staphylococcus aureus, Psedomonas aeruginosa, etc., existe un grupo de microorganismos de
especial relevancia higinico-sanitaria, los llamados "indicadores". Estos microorganismos no son
necesariamente patgenos, y su presencia se relaciona con la existencia de contaminacin, avisando
de la posible existencia de patgenos y otros microorganismos que pueden alterar el producto. Estos
microorganismos "indicadores" se analizan de forma rutinaria, y de hecho, en la legislacin se
considera su anlisis como un parmetro de calidad microbiolgica.
El inters de la determinacin de estos grupos indicadores se centra en la biodiversidad que los
diferentes hbitats pueden presentar. Cada entorno se caracteriza por albergar determinadas
asociaciones microbianas, entre las que se pueden incluir especies patgenas. Dichas especies no
siempre resultan detectables de forma sencilla, por lo que en numerosas ocasiones se determinan de
forma indirecta a travs de otras especies o grupos pertenecientes a la misma asociacin.
RECUENTO DE AEROBIOS MESOFILOS
En este grupo se incluyen todas las bacterias, mohos y levaduras capaces de desarrollarse a 30 C en
las condiciones establecidas. En este recuento se estima la microflora total sin especificar tipos de
microorganismos. Refleja la calidad sanitaria de un alimento, las condiciones de manipulacin, las
condiciones higinicas de la materia prima. Un recuento bajo de aerobios mesfilos no implica o no
asegura la ausencia de patgenos o sus toxinas, de la misma manera un recuento elevado no
significa presencia de flora patgena. Ahora bien, salvo en alimentos obtenidos por fermentacin, no
son recomendables recuentos elevados.
Un recuento elevado puede significar:
- Excesiva contaminacin de la materia prima
- Deficiente manipulacin durante el proceso de elaboracin
- La posibilidad de que existan patgenos, pues estos son mesfilos
- La inmediata alteracin del producto
El recuento de mesfilos nos indica las condiciones de salubridad de algunos alimentos
4.2. LUNA, G. Manual Operativo de anlisis microbiolgico para alimentos universidad de Pamplona
1998.
5. CONTENIDO:
5.1. FUNDAMENTO: Es el mtodo comnmente utilizado para determinar el nmero de clulas
viables o de unidades formadoras de colonias (ufc) en un alimento, e incluye todos los gneros
aerobios y facultativos que crecen en medios simples a una temperatura entre 20 y 45 C.
5.2.
DEFINICIONES:
5.2.1. Agar plate count (agar peptona de casena glucosa extracto de levadura) medio simple que
permite el crecimiento de muchos microorganismos el cual contiene peptona de casena extracto de
levaduras, D glucosa y agar.
5.2.2. Microorganismo viable: son aquellos microorganismos que tienen la propiedad de poder
reproducirse, en el caso de las bacterias de formar colonias.
5.2.3. UFC: Unidades formadoras de colonias.
5.3. CONDICIONES GENERALES: Los microorganismos aerobios mesfilos se consideran como
indicador del grado de contaminacin de los alimentos en cualquier etapa del proceso de produccin,
permite tambin obtener informacin sobre la alteracin incipiente de los alimentos y su probable vida
til.
5.4.
MATERIALES Y REACTIVOS:
5.4.1. Gradillas
5.4.2. Tubos de ensayo tapa rosca
5.4.3. Bolsas plsticas estriles
5.4.4. Agua peptonada al 0.1% estril.
5.4.5. Agar Plate Count
5.4.6. Cajas de petri estriles
5.4.7. Instrumentos para preparar las muestras: Cuchillos, Tenedores, Pinzas, Tijeras, Cucharas,
esptulas, Sacabocados, Morteros con sus respectivos pistilos etc. Previamente esterilizados.
5.5.
EQUIPOS:
5.5.1. Refrigerador
5.5.2. Contador de colonias
5.5.3. Incubadora a 35C +/- 2C.
5.5.4. Lo necesario para la preparacin y dilucin de los homogenizados de los alimentos.
5.6.
PROCEDIMIENTO:
5.6.1.
Desinfectar con alcohol al 75% el sitio por donde se vaya a extraer la muestra.
5.6.1.3.
5.6.1.4.
5.6.1.5. Pesar 11 gramos de la muestra en balanza analtica si es slida, sobre un papel graff estril
o medir 11 mililitros si es lquida en recipiente estril.
5.6.1.6.
5.6.1.7.
Aadir al recipiente de dilucin que contiene 99 ml de agua peptonada para obtener la
dilucin de 101.
5.6.1.8.
5.6.1.9.
Preparar la dilucin 10 2 trasfiriendo 1 ml de la dilucin 10 1 a un tubo de ensayo que
contiene 9 ml de agua peptonada, agitar cuidadosamente.
5.6.1.10. Preparar la dilucin 10 3 trasfiriendo 1 ml de la dilucin 10 2 a un tubo de ensayo que
contiene 9 ml de agua peptonada, agitar cuidadosamente.
5.6.1.11. Transferir por duplicado alcuotas de 1 ml de cada una de las diluciones consecutivas en
cajas de petri estriles.
5.6.1.12. Verter en las cajas de petri, 15 ml de agar plate count fundido y mantenido a 45C
5.6.1.13. Mezclar el inoculo con el medio de cultivo fundido. No debe transcurrir ms de 20 minutos
entre la realizacin de las diluciones y el vertido del medio. La manera ms indicada de mezclar el
inoculo con el medio es la siguiente:
Mover la caja de arriba hacia abajo 5 veces
Rotar la caja cinco veces en el sentido de las agujas del reloj
Mover la caja 5 veces haciendo Angulo recto sobre el movimiento
Rotar la caja cinco veces en el sentido contrario de las agujas del reloj.
5.6.1.14. Hacer control de esterilidad del medio de cultivo incubando una caja que contenga Agar
plate count.
5.6.1.15. Hacer control de esterilidad del agua peptonada 0.1 % incubando una caja que contenga 1
ml de agua peptonada y agar plate count.
5.6.1.16. Una vez solidificado el medio de cultivo, invertir las placas e incubarlas a 35C +/- 2C
durante 48 horas.
5.6.1.17. Clculo e interpretacin de los resultados.
5.8 ANEXOS:
N.A
RESULTADO
Pudimos observar en el laboratorio en la muestra de leche en polvo despus de tres das que no hubo
presencia de microorganismos aerobios mesofilos en determinado alimento.
<1*1000 = <1000ufc/gr o ml
ANALISIS DE RESULTADOS