Practica 6

SENBILIDAD BACTERIANA (CONTROL MICROBIOLGICO)

Lizmeth Caldern P.1, Elsa Domnguez L.1
Antonio J. Insignares 2
Universidad del Atlntico, Facultad de Qumica y Farmacia, Programa de Farmacia.
1
Estudiantes del Programa de Farmacia 2016-2.
2
Docente de la Facultad de Qumica y Farmacia.
RESUMEN

dependiendo
del
medio
de
cultivo,
cultivo
los
medios
del
propsito,
en
este
observar
casose
que
era
para
en
el
agar
nutritivo
la
identificar
las
particularidades
crecimiento
de
de
algunos
nutritivo.

Con la realizacin de esta prctica se estudi la manera en que actan algunos los
antibiticos sobre los microorganismos. Para el proceso de esta prctica se utiliz un
escobilln y se procedi a humedecerse con solucin salina, despus de realizar este
proceso se tom una muestra de una colonia con el asa previamente flameada y fra y se
procedi a sembrar la muestra y se tap la receptiva caja, luego de 4 minutos se
procedi a colocar los semidiscos.
Finalmente, despus de las 24 horas podemos observar la sensibilidad y resistencia
bacteriana a los respectivos antibiticos seleccionados.
PALABRAS CLAVES: Agar nutritivo, Cultivo de microorganismos, aislamiento.
INTRODUCCIN
La resistencia de las bacterias es el
principal obstculo para la eficacia
teraputica de los antibiticos, pues no
slo puede anular la accin curativa si se
manifiesta en el curso del tratamiento,
sino que tiene a la larga consecuencias
todava ms graves para el conjunto de
la poblacin, ya que provoca la
desaparicin de las cepas susceptibles y
la propagacin de las resistentes. Ese es
el motivo por el cual la determinacin de
la sensibilidad de las bacterias a los
antibiticos
haya
adquirido
tanta
importancia y sea indispensable para
hacer de los antibiticos un uso racional
y para preservar la eficacia de este grupo
tan valioso de agentes teraputicos.
Las pruebas de sensibilidad bacteriana
se llevan a cabo mediante el
antibiograma que sirve para medir la
sensibilidad de una cepa bacteriana a
uno o varios antibiticos. El estudio de la
sensibilidad a antimicrobianos de las
diferentes bacterias aisladas en muestras

biolgicas
tiene
2
objetivos
fundamentales: guiar al clnico en la
eleccin del mejor tratamiento individual,
y monitorizar la evolucin de la
resistencia bacteriana con objeto de
revisar el espectro del antimicrobiano y
poder
actualizar
los
tratamientos
empricos. Con un antibiograma se
pueden obtener resultados cualitativos
que indican si la bacteria es sensible o
resistente a un antibitico, o cuantitativos
que determinan la concentracin mnima
(CMI) de antimicrobiano que inhibe el
crecimiento bacteriano (en g/ ml o en
mg/l). Existen diferentes tcnicas de
laboratorio que permiten medir o calcular
de forma rutinaria, y de manera
semicuantitativa, las CIM (mtodos
manuales y mtodos automatizados o
semiautomatizados). Se puede realizar
mediante: Difusin en agar, Dilucin,
Mecanizados y Automatizados.

Lizmeth Caldern P., Elsa Domnguez L.

OBJETIVO GENERAL

Conocer y evaluar la accin de los

antibiticos sobre los microorganismos
utilizando el mtodo del antibiograma, el
cual consiste en discos de papel filtro
impregnados con distintos antibiticos.
OBJETIVOS ESPECIFICOS
1. Identificar si los microorganismos
tienen sensibilidad bacteriana al
antibitico elegido.
2. Evaluar
los
resultados
provenientes del antibiograma.
METODOLOGA
Para el desarrollo de la prctica, se
utiliz una muestra de una caja de Petri
con
colonias
de
pseudmonas
aeruginosa.
Materiales y equipos utilizados:
Caja de Petri con bacterias de
pseudmonas aeruginosa.
Cajas de Petri con agar MuelllerHinton o nutritivo
Escobilln de algodn estril
Sensidiscos para antibiograma
(oxacillina y bacitracina)
Mechero de alcohol.
Incubadora.
Cinta de enmascarar.
Marcador
Adecuamos el material entre el mechero
de para mantener las condiciones
aspticas y evitar contaminacin de
microorganismos presentes en el medio
ambiente.

Imagen 1: cajas petris entre el mechero e

inoculacin de la bacteria.

Procedimiento
Se humedeci el escobilln con solucin
salina.
Despus de tomar la muestra de la caja
Petri que contiene
la bacteria
pseudmonas aeruginosa, se estri el
medio en tres o cuatro direcciones
sobre la totalidad de la superficie del
agar para obtener un inculo uniforme y
esperaron cuatro minutos a que se
secara el inculo.
minutos despus de haber inoculado la
caja, se presionaron ligeramente los
sensidiscos para asegurar un contacto
con la superficie. Evitando
una
sobreposicin de las zonas de
inhibicin
con
una
distribucin
adecuada de los discos y con un lmite
no menos de 15 cm de los bordes de la
placa.
Por ltimo se invirti la caja y se incubo
el cultivo a 37 C por 24 horas.

Imagen2: distribucin de los discos en la

caja Petri

Lizmeth Caldern P., Elsa Domnguez L.

RESULTADOS
Despus de 24 horas se determin que
la bacteria fue resistente a ambos
antimicrobianos.

Imagen 3: resistencia de la bacteria a los

sensidiscos.

P. aeruginosa es una bacteria Gramnegativa, naturalmente resistente a una

gran cantidad de diferentes familias de
antibiticos. Una resistencia a oxacilina,
indica que la cepa es resistente a:
Penicilinas,
Amoxacilina/cido
clavulnico,
Ampicilina/Sulbactam,
Ticarcilina,
La bacitracina se indica en contra de
bacterias Gram positivas, especialmente
en heridas y mucosas, porque inhibe la
formacin de la pared celular de estos
microorganismos, por lo cual se nota en
la imagen que la bacteria es resistente a
este antibiotico
CONCLUSIN
Podemos concluir que el objetivo de la
prctica se obtuvo, el cual era conocer y.
evaluar Ia accin de los antibiticos
sobre los microorganismos utilizando el
mtodo del antibiograma, aunque
nuestro resultado fue negativo para
ambos antibiticos se evalu que la
bacteria es resistentes para antibioticos
de bacterias Gram-positivas.
ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE Y
PROFUNDIZACION
DE
CONOCIMIENTOS

R/ El dimetro de halo de inhibicin de la

bacteria p. aeruginosa para considerarse
sensible es de >21
Sobre que estructuras bacterianas
actan los sensidiscos.
R/ La oxacilina sdica (INN), es un
antibitico betalactmico, de espectro
reducido del grupo de las penicilinas, por
lo que se indica en el tratamiento de
infecciones causadas por bacterias Gram
positivas, en particular las especies de
estafilococos que suelen ser resistentes
a otras penicilinas.
Al
igual
que
otros
antibiticos
betalactmicos, la oxacilina acta
inhibiendo la sntesis de la pared celular
bacteriana. Evita la formacin de enlaces
cruzados entre las cadenas polimricas
de peptidoglicano lineal las cuales son un
componente importante de la pared
celular de las bacterias gram positivo.
La bacitracina es el nombre de un
antibitico producido por una mezcla de
polipptidos cclicos de sntesis no
ribosomal relacionados unos con los
otros y producidos por cepas de la
variedad Tracy de la bacteria Bacillus
subtilis aislado en 1945.
La
bacitracina
interfiere
con
la
desfosforilacin del C55-fosfato de
isoprenil, una molcula que transporta
los
elementos
estructurales
del
peptidoglicano en la membrana celular
bacteriana
BIBLIOGRAFA
Libro: M. Mercedes. Microbiologa.
UNAD. Bogota.1999. Pag 323-325
Manual: Daz, R., C. Gamazo e I.
Lpez-Goi. Manual prctico de
Microbiologa. 2VVEd.Masson, S.A.
Barcelona, 1999.
http://campus.usal.es/~micromed/Prac
ticas_odontologia/unidades/labv/LabM
icro/Antibiograma.html

Cul es el dimetro del halo para ser

considerado sensible?
Lizmeth Caldern P., Elsa Domnguez L.

 http://www.apcontinuada.com/es/elantibioigrama-interpretacion-delantibiograma/articulo/80000504/.

Tortora G; Funke B; Case C.

Introduccin a la microbiologa.
Novena edicin. Editorial medica
panamericana.

Lizmeth Caldern P., Elsa Domnguez L.