Retrovirus

TEMAS DE BACTERIOLOGA Y VIROLOGA MDICA
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Retrovirus y VIH
N. Cordeiro, R. Taroco
Introduccin e importancia
La familia Retroviridae es una de las familias ms interesantes y complejas de los virus animales.
El trmino retro significa hacia atrs, y el nombre hace referencia a que estos virus tienen un
modo inverso de replicar el cido nucleico. Los retrovirus son virus con un genoma constituido
por ARN, pero se replican por medio de un ADN intermediario usando la enzima transcriptasa
inversa (o reversa). Los retrovirus son interesantes por varias razones:
1. Fueron los primeros en que se demostr la capacidad para causar cncer habindose
estudiado ampliamente por sus caractersticas carcinognicas.
2. Un grupo de retrovirus, el causante del SIDA, aunque se conoce solo desde los primeros
aos de la dcada de 1980, ha llegado a representar uno de los mayores problemas de
salud pblica.
3. El genoma de los retrovirus puede integrarse especficamente en el genoma del hospedador
gracias al ADN intermediario, proceso que est siendo estudiado.
Taxonoma y clasificacin
Esta familia viral ha sido dividida en tres subfamilias.
La primera, Oncovirinae, comprende los siguientes grupos: C, B y D; y un grupo sin nombre
donde se encuentra el virus de la leucemia humana de clulas T (o linfotrpico): VLTH-I
y VLTH-II. Todos ellos son virus oncognicos, producen leucemias, linfomas, tumores
mamarios y neuronales.
La segunda, Lentivirinae, comprende el grupo de los virus Visna y el VIH. Se parecen a los
anteriores en lo que se refiere a su morfologa, a la naturaleza de su genoma y a la posesin
de una transcriptasa reversa, pero no transforman clulas. El nombre de la subfamilia
alude al largo perodo de incubacin que transcurre entre la infeccin y la enfermedad
clnica, que puede incluso superar los 10 aos.
La tercera, Spumavirinae, comprende los virus espumantes los cuales se encuentran
en cultivo de clulas de rin que degeneran de forma espontnea y que provocan la
formacin de clulas gigantes vacuoladas y multinucleadas, con un aspecto muy caracterstico.
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Generalidades morfolgicas de los retrovirus

Comprende una gran cantidad de virus que se caracterizan por presentar una morfologa
comn, un genoma constituido por dos molculas idnticas de ARN de polaridad positiva,
y por poseer una transcriptasa reversa. Los virus de la familia Retroviridae se caracterizan por
ser partculas envueltas, con un dimetro entre 80 y 120 nm, que contienen nucleocpside
enrollada dentro de una cubierta probablemente icosadrica. La envoltura contiene glicoprotenas vricas (espculas) y es adquirida al brotar por gemacin a travs de la membrana
plasmtica de la clula husped. Existen varias protenas en la cubierta de los virus y siete
protenas internas tpicas, cuatro estructurales y tres enzimticas. Las protenas con actividad
enzimtica (codificadas por el gen pol) que se encuentran dentro de la partcula vrica son, la
transcriptasa inversa, una endonucleasa de ADN (integrasa) y una proteasa. El virin tambin
contiene molculas especficas de ARNt celular que se usan en la replicacin.
Caractersticas y replicacin del genoma de los retrovirus

El genoma de los retrovirus contiene dos copias de ARN monocatenario de polaridad positiva.
El extremo 5 del ARN presenta cap y el extremo 3 esta poliadenilado, de modo que el ARN
es capaz de actuar directamente como ARNm, aunque no es usado como tal.
Todos los retrovirus contienen los siguientes genes y en el mismo orden:
gag: que codifica protenas estructurales internas (antgeno especifico de grupo).
pol: que codifica la transcriptasa inversa, la proteasa y la integrasa.
env: que codifica las protenas de la envoltura.
REPLICACIN
La replicacin de los retrovirus es iniciada por la unin de las espculas a protenas receptoras
especficas de la superficie celular. La presencia de receptores para el virus es el determinante
inicial del tropismo para tejidos y huspedes concretos.
El proceso global de replicacin del virus se puede resumir en los siguientes pasos: entrada
a la clula, transcripcin inversa, integracin del ADNc (ADN copia) viral en el genoma
hospedador, transcripcin del ADN vrico originando la formacin de ARNm vricos y el
ARN de la progenie, encapsidacin en el citoplasma y por ultimo, la gemacin de viriones
con envoltura, con la consiguiente liberacin de la clula.
La transcriptasa inversa es en esencia una ADN polimerasa que convierte el ARN viral
en una copia de ADN lineal y monocatenario en el citoplasma de la clula husped. Esta
enzima muestra tres actividades enzimticas: 1) sntesis de ADN usando como molde el
ARN viral, 2) sntesis de ADN usando como molde ADN, y 3) actividad de ribonucleasa H
(degrada la cadena de ARN de un hbrido ARN:ADN). Como todas las ADN polimerasas,
la transcriptasa inversa necesita un cebador, que en los retrovirus es un ARN de transferencia
especfico (ARNt) de origen celular.
Usando el ARNt como cebador, se transcribe a ADN un centenar de nucletidos cercanos
al extremo 5 del ARN viral, all el proceso de transcripcin se detiene. Para copiar el resto
del ARN viral (que representa la mayor parte), se emplea un mecanismo distinto. Primero se
eliminan secuencias terminales redundantes del extremo 5 de la molcula de ARN por medio
de la ribonucleasa H. Esto conduce a la formacin de un pequeo ADN monocatenario que
es complementario al segmento de ARN que esta en el otro extremo del ARN vrico (3).
Este pequeo trozo de ADN hbrida luego el otro extremo de la molcula de ARN (3) donde
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continua la copia de las secuencias del ARN vrico (cambio de plantilla), as se crea una
cadena negativa de ADN. Aqu vuelve a actuar la ribonucleasa H y elimina toda la cadena
positiva de ARN, excepto un pequeo fragmento usado como cebador que es eliminado luego
de sintetizarse un pequeo segmento de ADN de polaridad positiva complementario, aqu
vuelve a actuar la transcriptasa inversa y se termina de sintetizar la cadena de ADN bicatenario
con largas repeticiones terminales (LTRs) en cada extremo. Estas LTRs contienen promotores
transcripcionales y estn relacionadas con el proceso de integracin (figura 1).
La integracin del genoma viral puede ocurrir en cualquier zona del ADN celular (que
una vez integrado se denomina provirus) pasa a ser un elemento gentico estable. As, el
provirus puede expresarse o permanecer en un estado latente y no expresarse.
Si se activan los promotores en la LTR adecuada, se transcribe el ADN proviral integrado formndose transcriptos que pueden ser encapsidados en partculas vricas o pueden
ser procesados y traducidos a protenas vrales. Cuando las protenas vricas se acumulan en
suficiente cantidad, tiene lugar el ensamblaje de la nucleocpside que luego se mueven hacia la
membrana citoplasmtica para la constitucin final de las partculas vricas con envoltura.
Patogenia de los retrovirus

La mayora de los retrovirus afectan a un espectro de huspedes y especies muy limitado. El
espectro restringido de huspedes y el tropismo tisular limitado han dificultado la consecucin de sistemas celulares apropiados para su cultivo. La capacidad para integrarse en los
cromosomas y permanecer all, dificulta su deteccin, estudio y tratamiento. Sin embargo,
los retrovirus han proporcionado un instrumento fundamental para la biologa molecular y
han permitido el anlisis del crecimiento y la diferenciacin de las clulas y de la oncognesis
a travs del estudio de los oncogenes vricos.
Aunque no todos los retrovirus causan cncer, son muy comunes los retrovirus tumorales. Algunos conocidos virus tumorales causan sarcomas o leucemia aguda y poseen un alto
potencial oncognico. La infeccin con uno de estos virus puede originar transformacin
celular y la formacin de tumores. Se cree que estos retrovirus poseen un gen transformante u
oncogn que codifica una protena responsable de la transformacin celular. Este gen codifica
una fosfoprotena que posee actividad de protena quinasa, estas catalizan la fosforilacin de
protenas, mecanismo que regula la actividad de las protenas. En las clulas normales se han
encontrado genes similares, los protooncogenes, lo que sugiere que estos genes son importantes
en el crecimiento celular. Los retrovirus son capaces de incorporar esas secuencias normales,
que luego se alteran o se expresan de modo anormal. En consecuencia, los retrovirus son
agentes mediante los cuales tales genes se transfieren de clula a clula.
Un retrovirus importante, el VIH causante del SIDA, es un retrovirus no tumoral.
VIH - Virus de la inmunodeficiencia humana

INTRODUCCIN
El virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) produce una infeccin/enfermedad (SIDA:

sndrome de inmunodeficiencia adquirida) que se caracteriza por una inmunodepresin progresiva que sin acciones teraputicas y preventivas puede llegar a ser fatal, que conduce al desarrollo de infecciones oportunistas, neoplasias secundarias y manifestaciones neurolgicas.
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Figura 1. Esquema de la transcripcin inversa del genoma retroviral. a) Sntesis de la

hebra de ADN de polaridad negativa. El retrovirus provee la hebra de ARN de polaridad positiva
y el primer constituido por un ARNt incluido en el virus, se hibridiza al sitio de unin en el ARN
retroviral. La transcriptasa reversa comienza la sntesis de la hebra de ADN de polaridad negativa; al llegar al extremo de la hebra molde se genera una fuerte seal de terminacin. La regin
5 terminal del ARN es degradada y la regin R de la hebra de ADN de polaridad negativa se
aparea con el extremo 3 de la segunda hebra del ARN retroviral (primer salto) y la transcriptasa
inversa continua la sntesis de la hebra de ADN (-). b) Sntesis de la hebra de ADN de polaridad
positiva. En una primera instancia se remueve el primer de ARNt. El ARN es degradado, dejando
algunos fragmentos que serviran de cebadores para la sntesis de ADN. Comienza la sntesis de
la hebra de ADN de polaridad positiva. La hebra de ADN (+) es transferida al extremo opuesto
de la hebra de polaridad negativa (segundo salto) y se completa la sntesis de la hebra de ADN
(+). Una vez finalizada esta etapa se termina de sintetizar la hebra de ADN (-).
b)
a)
R U5
U3
R
3
3
R U5
U3
R
3
3
5
5
3
3
3
3
3
3
5
3
3
5
5
5
3
3
5
5
3
3
5
5
3
A comienzos de los aos ochenta, en 1981, se descubri que un nmero inusual de

varones homosexuales, haitianos, adictos a la herona y hemoflicos, moran por infecciones
oportunistas habitualmente benignas. Sus sntomas definieron una enfermedad, el SIDA. Hoy
el SIDA no se limita a esos grupos y representa una epidemia sin precedentes de deficiencia
inmunolgica para la salud mundial.
En Paris en 1983 Montagnier y colaboradores aislaron el virus de la inmunodeficiencia
humana (VIH-1) a partir de cultivos de linfocitos T activados, provenientes de una biopsia
de un ndulo linftico de un paciente con poliadenopatas y SIDA.
Desde su aparicin hasta la actualidad la enfermedad se ha diseminado mundialmente,
siendo considerada una pandemia, y su mortalidad sigue siendo de 100% a pesar de los avances
farmacolgicos, por lo que el SIDA se ha convertido en un problema mundial.
Hasta la fecha se han descubierto dos tipos de virus: VIH-1 y VIH-2, este ltimo, se
encuentra sobre todo en algunos pases africanos y parece estar ms relacionado con los
virus de la inmunodeficiencia simiana, adems parece ser miembro de una familia diferente
de lentivirus.
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EPIDEMIOLOGA
El primer caso de SIDA fue descrito en Estados Unidos, pero en la actualidad el numero
de pacientes infectados con VIH se concentra principalmente en los pases pobres (95%) y
se encuentra en aumento, estimndose que ocurren unas 14.000 infecciones diarias a nivel
mundial. Segn datos de la organizacin mundial de la salud (OMS), a fines del 2003 la cifra
aproximada de personas infectadas por VIH es de 40 millones, siendo el frica subsahariana
la regin ms afectada (figura 2).
La terapia antirretroviral (administrada en nuestro pas en el servicio de pacientes infectocontagiosos del Instituto de Higiene) disponible en los pases industrializados de Amrica
del Norte, Europa occidental y el Pacifico, ha disminuido la progresin de la enfermedad, las
muertes y la transmisin vertical; aun as el nmero de nuevas infecciones se ha mantenido
constante. Los casos de VIH/SIDA continan diseminndose por todas las regiones del mundo
en diferentes proporciones.
Se ha demostrado que existe un periodo de incubacin desde la primoinfeccin por el
virus y el desarrollo del SIDA, que vara en general desde 1 a 15 aos.
El virus VIH-1, es el ms ampliamente estudiado y es el que est ms distribuido a nivel
mundial. Posee una tasa aproximadamente de 100 % de presentar enfermedad clnica. El
ser humano y el chimpanc son las nicas dos especies conocidas donde el VIH produce
infeccin crnica.
Infeccin por VIH en Uruguay: la epidemia de VIH/SIDA es de baja prevalencia, ya que
afecta a menos del 1% de la poblacin en general (0,45%). Es una epidemia concentrada en
poblaciones vulnerables. Segn informaciones brindadas por el ministerio de salud pblica
(ao 2005) el nmero de nuevos infectados por da se ha duplicado, al igual que el nmero
de casos reportados.
Predomina la transmisin sexual (71%) sobre la sangunea (25,4%), seguida de la perinatal
(3,6%). Existe adems un porcentaje de casos en los que no se ha determinado la forma de
transmisin. Dentro de la transmisin sexual predominan los heterosexuales (casi el 90%
en 2004 y 2005) incluyendo la prostitucin fememina (3,2%). Le siguen los homosexuales
(28,5%) y luego los bisexules (17,4%). La transmisin sangunea predomina entre usuarios
de drogas intravenosas (96,8%).
Con respecto a la distribucin por sexos, el porcentaje acumulado de casos de SIDA es de
66,5% correspondiente a hombres y 33,5% a mujeres. A pesar de ello, en cuanto a los casos
de HIV se ha visto en los ltimos aos un aumento en el nmero de casos correspondientes al
sexo femenino ( 44% de los casos reportados en 2005) siendo esta por lo tanto una poblacin
mas susceptible respecto a los aos anteriores.
La incidencia de infecciones por VIH en 2005 fue de 576 casos y la de SIDA en el mismo
perodo de 300 casos.
TRANSMISIN DEL VIH
Ocurre en situaciones que facilitan el intercambio de sangre o lquidos orgnicos que contienen el virus o clulas infectadas por este. Entonces las principales vas de transmisin son: el
contacto sexual, la inoculacin parenteral y el pasaje vertical madre-hijo. Se definen grupos
de alto riesgo de adquirir la infeccin:
Varones homosexuales o bisexuales, actualmente la transmisin en este grupo esta en
regresin.
Usuarios de drogas intravenosas.
Usuarios de drogas no intravenosas (inhalatorias).
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Figura 2. Distribucin mundial de adultos y nios infectados por VIH. Las cifras estimadas fueron obtenidas por la OMS y publicadas en Actualizacin de la epidemia del SIDA,
diciembre del 2003. El total aproximado de personas afectadas se calcula entre 34 y 46 millones
de personas.
Hemoflicos.
Receptores de sangre y hemoderivados no hemoflicos.
Contactos heterosexuales de los miembros de otros grupos de riesgo (constituyendo el
10% de los enfermos).
La transmisin sexual es la principal forma de infeccin en el mundo, responsable de
aproximadamente el 75% de todos los casos. La velocidad de propagacin por esta va es
superior a cualquiera de las otras, y es mxima en las parejas femeninas de drogadictos por va
intravenosa, lo que hace que aumente muy rpidamente el nmero de mujeres con SIDA. El
virus viaja en el semen, libre y dentro de los linfocitos; adems se encuentra en las secreciones
vaginales y en las clulas de la mucosa cervical de las mujeres infectadas. Es bien demostrada
la transmisin de varn a varn y de varn a mujer, pero la infeccin desde la mujer al varn depende mas que nada del tipo de virus y de su virulencia. Normalmente se estima que
el riesgo de transmitir VIH de hombre a mujer durante el acto sexual duplica el riesgo de
transmitir el virus de mujer a hombre. El virus se transmite de dos formas: 1) a travs de las
clulas de Langerhans (clulas dendrticas) de la mucosa y 2) por la inoculacin directa en
los vasos sanguneos rotos por traumatismos, este ltimo es el que interviene en las relaciones
sexuales anales, por el que los varones homosexuales fueron en un principio los principales
infectados. La coexistencia de otras enfermedades de transmisin sexual, principalmente las
asociadas a ulceraciones genitales, favorece la infeccin. Son de especial importancia la sfilis,
el chancro blando y el herpes. En estas enfermedades que cursan con inflamacin genital se
produce mayor concentracin del virus en el semen.
La transmisin parenteral se produce principalmente en los usuarios de drogas intra-
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venosas, cuando estos comparten jeringas, agujas y otros objetos contaminados con sangre
infectada. La infeccin a travs de transfusiones es muy rara (fue prcticamente eliminada),
y el riesgo de que as ocurra es muy bajo gracias a tres medidas de salud: el anlisis de los
anticuerpos anti-VIH en la sangre y plasma donados, el tratamiento con calor de los concentrados de factores de coagulacin, y la deteccin selectiva de donantes a partir de sus
antecedentes. Aun as existe un riesgo muy pequeo de infeccin a travs de sangre negativa
para los anticuerpos anti-VIH, porque la persona se infect muy recientemente y todava no
ha desarrollado los anticuerpos (perodo ventana). Actualmente otras metodologas contribuyen a disminuir este perodo.
La transmisin madre-hijo es la causa ms importante de SIDA peditrico. Son tres las
vas de transmisin: 1) dentro del tero, mediante propagacin transplacentaria, 2) durante
el parto, a travs del canal del parto infectado y 3) despus del nacimiento, por ingestin de
leche materna. El riesgo de transmisin vertical se puede reducir con el estudio serolgico
de VIH durante los controles del embarazo y con el tratamiento oportuno de las madres.
Entre el 10 y el 35% de los nios nacidos de madres infectadas no tratadas desarrollan la
infeccin. La misma puede ocurrir intratero y entonces el desarrollo de SIDA y la muerte
ocurren en los primeros aos; si la infeccin es perinatal la instalacin del SIDA se retrasa.
En el Uruguay la incidencia de la transmisin vertical del VIH ha descendido desde un 28%
(1995) hasta un 2% (2002).
La infeccin por el VIH no puede transmitirse por contactos personales casuales, tampoco
se ha demostrado que pueda hacerse a travs de la picadura de insectos.
TAXONOMA Y CLASIFICACIN
El VIH es un virus perteneciente a la familia Retroviridae. Dentro de esta se ubica en la

subfamilia lentivirinae. En esta familia estn tambin: el virus de inmunodeficiencia felina, el
virus de inmunodeficiencia de los simios, el virus visna de las ovejas y el virus de la anemia
infecciosa equina.
Se han aislado dos formas genticamente diferentes: VIH-1 y VIH-2. Aunque son distintos,
poseen antgenos comunes, pero existen pruebas especificas para detectarlos a ambos.
Basndose en diferencias en el gen env se ha dividido al VIH-1 en tres grupos: M, O (u
outlier) y N (o no M/no O). El grupo M a su vez se divide en distintos subtipos que van de
A-L; por otra parte el VIH-2 se divide en cinco subtipos (A-E). El grupo M es el responsable
de la pandemia SIDA, mientras que el grupo O est restringido a unos pocos pases del frica
occidental.
MORFOLOGA VIRAL
Es un virin esfrico de 100-200 nm de dimetro, contiene una nucleocpside electrondensa

en forma de cono, rodeado de una bicapa lipdica que proviene de la membrana de la clula
husped, donde se insertan 80 espculas (protenas virales) constituidas cada una por varias
molculas de gp120 (glicoprotena externa) unida no covalentemente a una protena integral de la membrana, gp41. Estas dos glucoprotenas virales son esenciales para que el virus
infecte las clulas.
El ncleo del virus contiene: la protena de la cpside, p24 (p26 en VIH-2); la protena
p7/p9 de la nucleocpside; dos copias de ARN; y tres enzimas virales (proteasa, transcriptasa
inversa e integrasa). La protena p24 es el antgeno ms fcil de detectar y son los anticuerpos
contra l, los que se utilizan para el diagnostico de infeccin por VIH por medio de ELISA.
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Figura 3. Morfologa y estructura del VIH. La partcula viral envuelta contiene dos cadenas
idnticas de ARN, ARN polimerasa, integrasa y dos ARNt emparejados base a base con el
genoma dentro del core. Este se encuentra rodeado por protenas y una bicapa lipdica.
Abreviaturas: TM, protena transmembrana; MA, matriz; CA, cpside; NC, nucleocpside; SU,
subunidad
4-'P
35'P
.#,%/
-!P
#!P
")#!0!
,)0$)#!
!2.
4RANSCRIPTASA
INVERSA
.#PP
Este ncleo viral esta rodeado por una matriz proteica p17 (p16 en VIH-2) por debajo de la
membrana lipdica (figura 3).
GENOMA VIRAL
Est constituido por dos molculas de ARN de cadena simple de 9400 pares de bases, unidas
por enlaces no covalentes. Los clsicos genes estructurales gag, pol, y env codifican protenas
precursoras que sern divididas luego por la proteasa en protenas maduras (figura 4). Sobre
esta proteasa actan frmacos muy efectivos, que la inhiben e impiden el ensamblaje viral.
El precursor gag es clivado en cuatro protenas:
a) p17-18 para el VIH-1 y p16 para el VIH-2;
b) una protena mayor, parte de la capside, p24-25 en el VIH-1 y p26 en el VIH-2;
c) la protena de la nucleocpside p7 que adems promueve la dimerizacin y encapsidacin del ARN.
d) por ultimo una protena p6 cuya funcin esta en estudio. Se sabe que aquellas partculas
virales mutantes que carecen de esta protena tienen un defecto en el ensamblaje de
las partculas virales hijas.
El gen pol se divide en: la proteasa que cliva los productos de gag y pol; la transcriptasa
reversa y la integrasa.
El gen env codifica las glicoprotenas de envoltura, que sern sintetizadas como un gran
precursor que luego es clivado dejando una protena transmembrana (gp41). En esta
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Figura 4. Transcripcin y traduccin del genoma retroviral (VLTH-1). Nomenclatura: MA,

matriz; CA, cpside; NC, nucleocpside; PR, proteasa; SU, componente superficial; TM, componente transmembrana; N, extermo aminoterminal; C, extremo carboxiterminal; p, protena; Pr,
poliprotena precursora; gp, glicoprotena; gPr, poliprotena precursora glicosilada.
molcula en su parte externa posee el sitio de unin para la molcula CD4 (gp120).
Pero esta protena posee adems otros sitios importantes para la infectividad del virus, el
mas conocido es el V3 loop o bucle, que es el principal eptope neutralizante y sitio que
promueve otros eventos aun luego de la unin al receptor CD4. Esta glicoprotena transmembrana fija el complejo glicoproteico a la membrana viral y tiene un sitio hidrofbico,
el cual promueve la fusin de las membranas celulares.
El genoma del VIH contiene adems otros genes: tat, rev, vif, nef, vpr y vpu, encargados de
la regulacin de la sntesis y de la organizacin de las partculas virales infecciosas:
La protena Tat acta aumentando 1000 veces la transcripcin de los genes virales, lo
que favorece la replicacin del virus.
La protena Rev tiene su efecto a nivel postranscripcional, regulando el transporte de
ARNm desde el ncleo al citoplasma.
El gen vpu parece ser fundamental para la gemacin del virus desde las clulas infectadas.
Podra interferir con la unin intracelular del precursor env con CD4.
El gen vif es importante para la creacin de virus libre con capacidad de infectar otras
clulas.
El gen vpr facilita la infeccin de las clulas que no estn en divisin (por ej.: macrfagos)
y detiene el ciclo celular en fase G2, con esto incrementa al mximo la proteccin del
virus.
La protena Nef parece ser necesaria para el desarrollo de la infeccin progresiva, producira
la apoptosis de algunas clulas y una regulacin en baja de las molculas del complejo
mayor de histocompatibilidad (MHC) de clase I en las clulas infectadas por el VIH. La
disminucin de estas molculas podra evitar el reconocimiento y la lisis de las clulas
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diana infectadas por el VIH. En consecuencia Nef podra ayudar a superar la resistencia
inmunitaria frente a la infeccin por VIH.
En conclusin, los productos de los genes reguladores son vitales para la patogenicidad del
virus y de ah su importancia para el desarrollo de agentes que puedan bloquear la accin de
dichos genes. El anlisis molecular de los diferentes virus aislados demuestra que existe una
gran variabilidad en algunas partes de su genoma. La mayora de esas variaciones se agrupan
en determinadas regiones de la envoltura glucoproteica. Dado que la respuesta inmune se
desarrolla contra la envoltura del VIH, esta variabilidad supone un problema para el desarrollo
de una vacuna nica.
SNTESIS E INTEGRACIN DEL ADN VIRAL
Luego de ingresar a la clula las dos molculas de ARN son transcriptas en forma reversa en
una molcula lineal de ADN de doble cadena. La cadena positiva de ADN tiene dos sitios de
origen distintos para su sntesis, en lugar de uno. En todos los retrovirus la cadena positiva es
determinada por una secuencia de polipurinas localizadas en 5 en la regin U3 de regiones
de regulacin (long terminal repeat o LTR). El VIH tiene una segunda regin en el centro de
su genoma que se utiliza como sitio de origen adicional, este sitio parece mejorar el proceso
de transcripcin reversa. Luego de la sntesis en el citoplasma el ADN viral es transportado al
ncleo y se integra a la cedula husped, esta reaccin es mediada por una integrasa codificada
por un sector del ADN viral. Cuando ocurre la activacin y divisin de la clula husped el
ADN viral se duplica y comienzan a expresarse las protenas virales.
REGULACIN DE LA EXPRESIN GNICA
La regin LTR del VIH contiene promotores virales activos que para su transcripcin requieren la presencia de activadores celulares. La protena Tat es requerida para la transcripcin y
se une a una parte de la regin R del LTR (TAR: transactivating response element o elemento
transactivador de respuesta) y junto con los activadores transcripcionales de origen celular
(SP-1, NF-B) promueven el inicio de la transcripcin y la elongacin del transcripto. De
esta manera aparecen en la infeccin aguda tres clases de transcriptos: molculas de ARN
que producen las protenas gag y pol; molculas para las glicoprotenas de envoltura; y molculas para las protenas reguladoras. El sistema Rev controla la exportacin citoplasmtica y
estabilidad de estos transcriptos.
VARIABILIDAD GENTICA
El alto grado de variabilidad gentica del VIH es una de sus caractersticas ms relevantes.
La regin ms variable del genoma es la que codifica para las glicoprotenas de envoltura. La
regin mas conservada es la de los genes gag y pol. Esta variabilidad se debe a la existencia
de la transcriptasa reversa, esta enzima no tiene la capacidad de corregir errores durante la
retrotranscripcin. Gracias a esta variabilidad el virus escapa a la respuesta inmune antiviral.
Las glicoprotenas de envoltura evaden el sistema inmune porque se originan en regiones
hipervariables.
MECANISMOS DE PATOGENICIDAD
En las personas infectadas con el VIH es habitual la observacin de distintas anormalidades

inmunolgicas:
severa linfopenia, principalmente de clulas T CD4 +,
reacciones de hipersensibilidad cutnea retardada disminuidas o ausentes,
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perdida de la funcin citotxica de las clulas natural killer (NK),

funcin anormal de los monocitos,
hipergammaglobulinemia policlonal.
La molcula CD4 sirve como receptor del VIH, es por ello que el virus no solo infecta a
los linfocitos T CD4 +, sino a otras clulas que tambin expresan este receptor, como monocitos de sangre perifrica, precursores de clulas T de la medula sea y el timo, y macrfagos
tisulares: entre ellos estn las clulas dendrticas foliculares de los ganglios linfticos y la piel,
las clulas de Langerhans del timo y las clulas microgliales en el cerebro.
Este virus reduce la capacidad funcional global (disminucin de funcin y de nmero) de
los linfocitos T perifricos y de las clulas presentadoras de antgeno, e inhibe la produccin
y maduracin de los precursores de la medula. Por tanto, la patogenicidad el VIH se debe
a su afinidad por las clulas CD4+ que lleva a una disminucin de las respuestas inmunes
normales del husped, luego, a la destruccin de la inmunidad, y finalmente, a la muerte por
infecciones oportunistas.
ENTRADA A LA CLULA
La infeccin se inicia cuando una partcula viral completa encuentra una clula con receptor
CD4. La glicoprotena gp120 se une fuertemente a este receptor. Actualmente se sabe que es
necesaria la presencia de otro correceptor para mediar la fusin del virus a la clula, son los
denominados receptores para quemoquinas. Las quemoquinas son pptidos pequeos, con
funcin quimiotactica para las clulas que intervienen habitualmente en los mecanismos de
defensa: neutrofilos, macrfagos, linfocitos. En presencia de un proceso inflamatorio, estas
clulas son atradas hacia el foco de infeccin o injuria, por medio de sustancias solubles:
las quemoquinas. Estas clulas presentan en su superficie receptores para quemoquinas, los
cuales a su vez son correceptores para el VIH. Por lo tanto, no es suficiente la presencia en
la superficie de un receptor CD4 que se una a la gp120, sino que para que la clula sea infectada por el VIH, tambin debe expresar un correceptor al que se unir la gp41, produciendo
entonces la fusin del virus y la clula.
Existen dos tipos de correceptores, presentes en tipos distintos de clulas:
CXCR-4: se encuentra en los linfocitos T
CCR-5: se encuentra en monocitos y macrfagos
Por este motivo diferentes cepas de VIH pueden afectar predominantemente a los linfocitos o macrfagos, de acuerdo al correceptor que utilicen. De este modo las glicoprotenas
de membrana - gp120 y gp41 - se unen al receptor CD4 y al correceptor - CXCR4 o CCR5
respectivamente, y as se produce la fusin. Una vez producida esta fusin se liberan dentro
del citoplasma las dos copias de ARN viral y las enzimas transcriptasa inversa e integrasa.
CICLO VIRAL
Una vez dentro de la clula el VIH comienza su ciclo:

1. Retrotranscripcin: en el citoplasma celular la enzima transcriptasa inversa convierte en
ARN viral en ADNc. Muchas drogas (AZT, ddC, ddI) actan a este nivel interfiriendo
con esta enzima.
2. Integracin: el ADN viral as formado migra hacia el ncleo donde es integrado al ADN
celular con la ayuda de la integrasa. Una vez incorporado el genoma celular el ADN viral
pasa a llamarse provirus. El virus VIH puede permanecer sin multiplicarse en una clula
porque en ella su replicacin se vio restringida. Estas clulas infectadas sern activadas
luego por diferentes citoquinas, entre ellas el factor de necrosis tumoral (TNF) y la
460
interleuquina 6 (IL-6), dando lugar a la formacin de la progenie viral lo que lleva a la

muerte de las clulas T infectadas y a la fusin con otras clulas no infectadas para formar
clulas gigantes multinucleadas. Las clulas T infectadas y lisadas liberan gran cantidad
de partculas virales que infectaran a las clulas vecinas, pero adems se libera la protena
de envoltura externa, soluble, que es capaz de unirse a la molcula CD4 de otras clulas
y hacerlas vulnerables a la lisis por el complemento y a la toxicidad celular dependiente
de anticuerpos (ADCC). Por lo tanto cuando un linfocito se pone en contacto con su
antgeno, es estimulado y se activa, as comienza a duplicar su ADN y el material gentico
viral integrado a su genoma.
3. Transcripcin: para la produccin de nuevos virus se necesita de ARN mensajero, sintetizado en el proceso de transcripcin utilizando enzimas de origen celular. Los genes virales
controlan este proceso a travs de, por ejemplo, el gen tat. Otras infecciones por organismos
tales como Mycobacterium tuberculosis pueden acelerar el proceso de transcripcin.
4. Traduccin: el ARNm procesado en el ncleo es transportado al citoplasma, aqu el gen
rev es critico, sin la protena rev no existiran protenas estructurales. En el citoplasma el
ARNm, utilizando la maquinaria de sntesis proteica celular, sintetiza las largas cadenas
de protenas y enzimas virales.
5. Ensamblaje y brotacin: las protenas del core, las enzimas y el ARN se ubican debajo de la
membrana celular, mientras que las protenas de envoltura viral se agregan a la membrana
celular. Esto da origen a formas virales inmaduras (no infecciosas an) que surgen de la
superficie celular adquiriendo una envoltura que incluye protenas virales y celulares.
Las largas cadenas proteicas que conforman esta partcula viral inmadura son clivadas
en pequeas estructuras por una enzima viral, proteasa. Existen drogas inhibidoras de la
proteasa como saquinavir, titonavir, indinavir, nelfinavir, que interfieren en este paso del
ciclo viral. De este paso resulta una partcula viral infecciosa.
Luego, al momento de la activacin del linfocito, el material viral se multiplica y tiene
lugar la liberacin de la progenie viral por dos mecanismos posibles:
Nuevas generaciones de partculas infectivas por gemacin (figura 5).
Se acumulan partculas virales en el interior de la clula infectada, producindose la
destruccin de sta, liberndose al exterior esas partculas virales, la mayora de las cuales
son defectivas ya que carecen de la cubierta necesaria.
EVENTOS DE LA INFECCIN
La va sexual implica la entrada del virus a travs de las mucosas: orofarngea, genital y anal.
La efectividad de la transmisin es mayor si es por va parenteral. En las superficies mucosas,
adems de las clulas epiteliales se encuentran las clulas de Langerhans; las mismas tienen
funcin de clulas presentadoras de antgenos (CPA). A nivel de las submucosas tambin se
hallan presentes clulas de Langerhans y macrfagos.
Las partculas virales que viajan en las secreciones vaginales o en el semen, atraviesan
la barrera mucosa (con mayor facilidad si est lesionada, si bien esto no constituye un factor
limitante) y se encuentran en la mucosa o la submucosa con las CPA. Estas clulas reconocen
a la partcula viral como extraa, la incorporan a su superficie o la procesan por medio de
fagocitosis, procesando tambin los antgenos virales para ser presentados a los linfocitos. El
macrfago es incapaz de destruir a la partcula viral. Se limita a procesarla, y en el interior
de un macrfago es posible encontrar innumerables partculas virales. Tambin a este nivel
la partcula viral puede encontrarse adems con los linfocitos CD4+. Por lo tanto, el virus
una vez atravesada la barrera mucosa puede: a) quedar dentro de un macrfago, b) ser pre-
461
Figura 5. Ciclo replicativo del VIH. A) Vista general. B) Transcripcin reversa. Durante
este paso el ARN viral es retrotranscripto en ADN de doble cadena y las secuencias terminales son parcialmente duplicadas de modo tal que lleva a la formacin de regiones
de regulacin (LTR) compuestos por las regiones U3-R-U5. C) Organizacin del genoma
proviral del VIH-1 y VIH-2. El genoma codifica para protenas estructurales y enzimas que
son empaquetadas en la progenie viral (recuadros rayados) y para protenas reguladoras
o accesorias (recuadros lisos).
Virion
Envelope
Nucleocapsid
Adsorption
to receptor
B
RNA
A
Maduration
Penetration
and uncoatig
R U5
U3 R
LRNA
Reverse transcription
Capsid
ensamby
Traslation
Pre - Integration
complex
DNA
U3 R U5
U3 R U5
Provirus
Integration
Budding
Transcription
HIV-1
5 LTR
rev
tat
vif
gag
pol
3 LTR
nef
env
vpr
vpu
HIV-2
5 LTR
vif
gag
rev
tat
pol
3 LTR
nef
env
vpx
vpr
sentado a los linfocitos CD4 por las CPA, o c) adherirse directamente a los linfocitos CD4+
y comenzar a multiplicarse en su interior.
Posteriormente, los linfocitos CD4+ y los macrfagos con las partculas virales en su
interior, o las partculas virales libres, se dirigen hacia los ganglios linfticos regionales. En
los centros germinales de estos ganglios regionales se encuentran otras clulas con un papel
fundamental en la patogenia del VIH: las clulas foliculares dendrticas. Estas tienen en su
superficie numerosas proyecciones digitiformes con receptores CD4, a los cuales se unirn
las partculas virales libres de la circulacin, atrapando de esta manera innumerables virus.
Estos son presentados por estas clulas a todos los linfocitos que, circulando por la linfa o la
sangre, pasan por dichos ganglios, siendo as infectados. De ese modo, a partir del ganglio
regional el virus se disemina a todo el organismo, a todos los tejidos con clulas que tengan
receptores y correceptores que las hagan pasibles de ser infectadas, multiplicando de esta
462
manera la infeccin. Las partculas virales se diseminan por todo el organismo, sembrando
varios rganos, particularmente rganos linfoides como ndulos linfoides, bazo, amgdalas
y adenoides. Si bien tiene una diseminacin sistmica, el blanco fundamental del VIH es el
sistema inmune y dentro de ste, los linfocitos CD4+.
Una vez en la sangre, se producen los eventos tempranos de la infeccin por el VIH. En
esta etapa temprana, se puede detectar gran cantidad de partculas virales a nivel plasmtico.
Esto se expresa como carga viral, y en esta etapa temprana de la infeccin puede llegar a 10
millones o ms de partculas por ml de plasma (107/ml). Estas partculas tienen una corta
vida media libre en el plasma (aproximadamente unos 10-15 minutos). Los linfocitos CD4
que estn produciendo virus tienen una vida media de 1-2 das. La partcula viral, una vez
liberada al plasma, tiene que buscar nuevas clulas con receptores CD4 para poder infectar
y continuar su ciclo de replicacin viral.
En esta fase aguda el nmero de clulas CD4+ en la circulacin decrece en 20 a 40%,
quizs por muerte celular o por dejar la circulacin y dirigirse a los rganos linfoides para
preparar la respuesta inmune.
Dos a cuatro semanas luego de la exposicin, cerca del 70% de las personas sufren sntomas
similares a una gripe (sndrome retroviral agudo). El sistema inmune enfrenta la infeccin
mediante las clulas T killer y los anticuerpos producidos por los linfocitos B, logrando una
reduccin dramtica de los niveles de virus.
En el momento inicial de la infeccin existen muchas partculas libres en plasma. Pero en
un periodo de dos a tres meses se van generando una serie de respuestas por parte del sistema
inmune del husped, producindose de manera espontnea una drstica cada de la carga viral,
sin que medie un tratamiento antiviral. Este nivel de carga viral (setpoint) vara de individuo a
individuo y es predictivo de la evolucin clnica a largo plazo. Los mismos permanecen bajos
(dependiendo del sistema inmune de cada individuo) durante un largo periodo de tiempo, que
puede llegar a 10 aos o ms. En determinado momento, la carga viral plasmtica comienza
a aumentar nuevamente, coincidiendo con la etapa clnica de SIDA.
A esta fase temprana le sigue el perodo de infeccin activa inaparente, no obstante lo cual
no significa que no haya replicacin viral. Si bien la carga viral cae, y no existen sntomas, la
replicacin viral contina permanentemente. Se establece un equilibrio, por el cual habra una
produccin y destruccin de 10 billones de partculas virales por da, as como una produccin
y destruccin de 2 billones de linfocitos CD4 por da. Este equilibrio se mantiene aproximadamente por 10 aos (dependiendo de la carga viral inicial o setpoint, el estado inmunolgico
de la persona infectada, entre otros). Durante este perodo la replicacin viral no tiene lugar
a nivel sanguneo, la misma se da en los tejidos linfoides profundos: los ganglios linfticos y
el tejido linfoide asociado a las mucosas (gastrointestinal, respiratoria, etc.)
Perodo de enfermedad clnica: existen variaciones en el perodo de infeccin sin clnica
de enfermedad, distintos factores influyen en la progresin hacia la enfermedad: edad, diferencias genticas entre los individuos, la virulencia de las diferentes cepas y la coinfeccin con
otros microorganismos. La existencia de mutaciones en los correceptores puede influenciar
el curso evolutivo hacia la enfermedad. Por ejemplo una mutacin especfica en una de las
dos copias del gen del correceptor CCR5 tiene como resultado un curso ms lento hacia la
enfermedad.
Varios estudios demuestran que los individuos con alta carga viral circulante (setpoint)
desarrollan ms rpidamente los sntomas de SIDA y mueren.
Las drogas utilizadas para prevenir o tratar las infecciones asociadas al SIDA han permitido
prolongar y mejorar la calidad de vida. Las combinaciones de drogas que incluyen un inhibidor
463
Cuadro 1. Enfermedades indicadoras de Sndrome de Inmunodeficiencia Adquirida

(SIDA)*
Infecciones oportunistas
Protozoos
Hongos
Virus
Bacterias
Toxoplasmosis cerebral
Criptosporidiasis con diarrea
Isosporidiasis con diarrea
Candidiasis esofgica, traqueal y pulmonar
Neumonia por Pneumocystis carinii
Criptococosis extrapulmonar
Histoplasmosis diseminada
Coccidiomicosis diseminada
Enfermedad por citomegalovirus
Infeccin peristente o diseminada por virus
de Herpes simple
Leucoencefalopata multifocal progresiva
Infeccin diseminada por miembros del
complejo Mycobacterium avium
Infecciones por micobacterias atpicas
Tuberculosis extrapulmonar
Septicemia recurrente por Salmonella sp
Infecciones por micobacterias atpicas
Tuberculosis extrapulmonar
Septicemia recurrente por Salmonella sp.
Infecciones mltiples o recurrentes por bacterias piognicas
Neoplasias Oportunistas
Sarcoma de Kaposi
Linfoma primario del cerebro
Otros linfomas no Hodgkin
Otros
Sndrome de caquexia por VIH
Encefalopata por VIH
Neumonia Intersticial linfoide
de la proteasa con dos inhibidores de la transcriptasa reversa, reducen la carga viral a niveles
muy bajos y retrasan la progresin de la enfermedad por perodos muy prolongados.
Se considera afectados de SIDA a los pacientes infectados por el VIH que presentan
alguna de las 26 complicaciones (infecciones o enfermedades diagnosticas de estadio SIDA
- entre ellas la tuberculosis y/o candidiasis esofgica) o que tienen un conteo de linfocitos
CD4+ inferior a 200/L. Queda clara entonces la importancia clnica de la cifra de linfocitos
CD4+, independientemente de la existencia o no, de manifestaciones clnicas.
Cuando el paciente alcanza el estadio clnico de SIDA, aparecen infecciones oportunistas
caractersticas y neoplasias asociados a dicha patologa (cuadro 1).
Los monocitos y macrfagos infectados por el virus, y relativamente resistentes a la muerte celular, viajan por todo el cuerpo llevando el VIH a varios rganos especialmente a los
pulmones y al cerebro; 40 a 50% de las personas infectadas con VIH frecuentemente tienen
manifestaciones neurolgicas. La clula microglial y el macrfago son las clulas del cerebro
infectadas por el VIH de manera habitual, pero tambin pueden infectarse las neuronas y
las clulas gliales. La liberacin de sustancias neurotxicas o factores quimiotcticos por los
monocitos y las clulas microgliales favorecen el desarrollo de respuestas inflamatorias en
464
el cerebro. Tambin es probable que exista un efecto citoptico directo del virus sobre las
neuronas dando lugar a cuadros como la encefalopata o complejo de demencia del SIDA.
Paradjicamente, aunque el VIH causa inmunodeficiencia, el curso de la enfermedad
esta caracterizado por la hiperactivacin del sistema inmune con consecuencias negativas.
La activacin crnica del sistema inmune durante la enfermedad puede resultar en una
estimulacin masiva de las clulas B, perdiendo stas la habilidad de producir anticuerpos
contra otros patgenos. Esta activacin crnica lleva tambin a la apoptosis (o muerte celular
programada) y al aumento en la produccin de citoquinas que no solo estimulan la replicacin
del VIH, sino que tambin tiene efectos perjudiciales.
RESPUESTA INMUNE
La misma es iniciada por la inmunidad mediada por clulas. La respuesta humoral contra las
protenas virales ms importantes (Gag, Pol, Env) aparece entre tres semanas y tres meses
luego de la exposicin viral. Posee dos componentes:
a) Componente celular:
Respuesta de los linfocitos T CD8+ citotxicos que reconocen en la superficie de
la clula infectada la presencia de partculas virales unidas a molculas del complejo
mayor de histocompatibilidad (CMH) de tipo I; estos linfocitos liberan entonces enzimas contenidas en sus grnulos (por ej.: perforinas), que determinan la destruccin
de la clula por un efecto citoltico directo.
Los linfocitos T CD8+ pueden actuar tambin por otro mecanismo, liberando mediadores o linfoquinas (quemoquinas), sustancias solubles con funcin quimiotctica,
que atraen al foco nuevas clulas defensivas; pero estas quemoquinas se unen tambin
a los receptores para quemoquinas presentes en las clulas pasibles de ser infectadas,
bloqueando la fusin de nuevas partculas virales a estas clulas.
Los linfocitos T CD4+ reconocen a su vez las partculas virales procesadas por las
CPA y presentadas en conjunto a molculas MHC de tipo II, produciendo as linfoquinas que se unen a sus receptores (de quemoquinas) bloqueando tambin la unin
de nuevos virus a clulas, pero sobre todo la funcin principal del linfocito T helper
es potenciar (por medio de sus citoquinas estimuladoras) la respuesta de los linfocitos
T CD8+, ya que ellos son el principal efector de la respuesta inmune.
b) Componente humoral:
La misma est dada por los linfocitos B, los cuales reconocen en las CPA la presencia
de sustancias antignicas y reaccionan activndose, transformndose en plasmocitos y
produciendo anticuerpos anti-VIH. Si bien el sistema inmune es capaz de montar una
respuesta de tipo humoral, se ve abrumado por la rapidez con la que el virus, producto
de su variabilidad antignica, continuamente elabora partculas virales hijas capaces
de evadir la neutralizacin. Se da as un ciclo de neutralizacin seguido por la creacin
de mutantes de escape, en el cual el suero, en un punto temporal determinado, puede
neutralizar el virus circulante contemporneo, pero no al virus aislado en un momento
ulterior. Este fenmeno condiciona, hoy en da, el desarrollo de una vacuna efectiva
contra el VIH. No obstante se producen anticuerpos neutralizantes que pueden ser
especficos de tipo (especficos para un aislamiento viral determinado) o pueden ser
especficos de grupo (capaces de abarcar una gama mayor de aislamientos virales). La
mayora de estos anticuerpos reconocen la regin V3 de la protena gp120, pudiendo
impedir el clivaje y cambio conformacional (en el interior de gp120) necesarios para
el ingreso del virin para la formacin de sincicios. Los anticuerpos neutralizantes
465
especficos de grupo reconocen epitopos internos de gp41, y epitopos localizados cerca

de la unin de esta protena con gp120. Cabe mencionar que adems se elaboran
anticuerpos contra las dems protenas virales.
La produccin de anticuerpos puede detectarse de dos a ocho semanas despus de la
infeccin, luego de la declinacin de la viremia inicial. La seroconversin se inicia con
la respuesta IgM anti protena Gag; la respuesta IgG se produce entre la primera semana
y la 41. En tal sentido, los primeros marcadores serolgicos en ser evidenciados son
IgG anti-p24 e IgG anti-gp120, seguido de IgG anti-gp41. Se ha visto que durante los
primeros meses de la infeccin existe un aumento en el ttulo de anticuerpos anti-p24
en simultneo a una disminucin en el nivel de antgeno p24. Luego de este tiempo el
ttulo de tales anticuerpos permanece estable, invirtindose esta relacin durante la
ltima etapa de la enfermedad (caen los niveles de IgG anti-p24 y suben los de p24)
(figura 6).
Como se mencion anteriormente, luego de la infeccin aguda por VIH sigue una fase de
infeccin activa inaparente con una duracin de entre 1 y 15 aos, en la cual los pacientes
permanecen asintomticos pero con una declinacin lenta y progresiva de su sistema inmune.
Aquellas funciones dependientes de las clulas T CD4+ son las primeras en verse afectadas.
Despus de este perodo el sistema inmune, que hasta ese momento haba sido capaz de
equilibrar la produccin y destruccin de las partculas virales, fracasa y ya no logra contener
la replicacin viral, se dispara nuevamente la carga viral y comienzan las manifestaciones de
la etapa SIDA. Las mismas aparecen cuando los linfocitos disminuyen por debajo de 200 por
mm3 (siendo el valor normal: 500-750 por mm3, aproximadamente).
Figura 6. Curso cronolgico y fases de la enfermedad por VIH. Las diferentes fases de
la enfermedad por VIH estn definidas en funcin de los niveles de clulas T CD4+ y la
ocurrencia de enfermedades oportunistas.
466
La perdida progresiva de linfocitos T CD4+ (calculada entre 60 y 70 linfocitos CD4+

por mm3 por ao), puede atribuirse a una variedad de mecanismos, entre ellos:
Muerte celular directa: los virus se multiplican en su interior dando lugar a grandes progenies
virales que al liberarse por gemacin destruyen la clula.
Formacin de sincicios: las clulas infectadas son capaces de fusionarse con otras clulas
infectadas y adems con clulas no infectadas, formando de este modo clulas gigantes
denominadas sincicios.
Apoptosis: la presencia de material gentico y protenas virales activan el mecanismo
apopttico del linfocito T CD4+. Por otra parte, clulas no infectadas tambin pueden
sufrir este proceso por seales inapropiadas recibidas a partir de clulas infectadas.
Observadores inocentes: los linfocitos T CD4+ con partculas virales en su superficie son
atacados por los linfocitos T CD8.
Anergia: se ha observado en cultivos celulares que existira alguna seal del VIH capaz
de inhibir a las clulas T CD4+ impidiendo futuras respuestas a la estimulacin inmunitaria.
Dao a los precursores celulares: algunos estudios sugieren que el virus destruye precursores
celulares con funciones inmunes especiales, as como tambin, partes de mdula sea y
de timo necesarias para el desarrollo de tales clulas.
La presencia de hbridos genmicos virales de ADN/ARN resulta txica para el linfocito.
MTODOS DE ESTUDIO
El diagnstico de la infeccin por VIH tiene distintos objetivos, uno de ellos es el diagnstico
per se de personas que se sospechan pueden estar infectadas y requieren de atencin mdica,
consejo no directivo y educacin sanitaria respecto a su estado. Otro de los objetivos del
diagnstico de VIH es la seguridad en las transfusiones, productos hemoderivados y donaciones de rganos. Finalmente, otros objetivos del diagnstico de la infeccin por VIH, son
la aplicacin de programas de vigilancia serolgica de esta infeccin (estudios de incidencia
y prevalencia, tendencias en grupos poblacionales, etc.) o en programas de investigacin
clnica, farmacolgica, virolgica e inmunolgica.
El mtodo ms comnmente empleado para el diagnstico de laboratorio de la infeccin
por VIH se basa en tcnicas serolgicas que detectan anticuerpos del virus en el suero de las
personas infectadas. En este sentido, se dispone de reactivos para pruebas que pueden ser
automatizadas, total o parcialmente, y aplicarse paralelamente a un gran nmero de sueros.
Estas pruebas utilizadas para el diagnstico de una persona individualizada, reciben el nombre
de pruebas de diagnstico de la infeccin por VIH, pero tambin pueden utilizarse como un
instrumento para desechar o rechazar productos sanguneos o biolgicos contaminados, en
cuyo caso se denominan de cribado. Conviene subrayar, que la estrategia a emplear en el
cribado rutinario es distinta a la utilizada para el diagnstico individualizado de la infeccin
por VIH. De forma conceptual, se denominan pruebas diagnsticas a las que se emplean de
forma individualizada en el suero de una persona y pruebas de cribado (o tamizaje) cuando
se aplican a un conjunto de muestras y su finalidad no es la diagnstica.
Ensayos serolgicos de tamizaje
Enzimoinmunoanlisis (EIA). La deteccin de anticuerpos anti-VIH con tcnicas de EIA es
el mtodo ms empleado en la actualidad existiendo distintos principios en la deteccin de
los anticuerpos (ELISA indirecto, competitivo, sandwich y captura). La mayora de los
467
ensayos aprobados emplean antgenos de VIH inmovilizados capaces de fijar anticuerpos

IgG a partir del suero de un paciente.
La sensibilidad del ELISA oscila entre un 93 a un 100%, pudiendo presentarse resultados
falsos negativos durante la infeccin primaria, en pacientes inmunosuprimidos, o por
errores de procesamiento (rotulado y manipulacin). Por otro lado, la especificidad de
esta tcnica es del 99%; los resultados falsos positivos se presentan por error humano o
enfermedades autoinmunes entre otras.
Los ensayos de primera generacin utilizan lisado viral obtenido a partir de lneas celulares de linfocitos T humanos. Poseen, sin embargo, una gran capacidad de captacin de
cualquier tipo de anticuerpos anti-VIH presente en la muestra. Las pruebas de segunda y
tercera generacin utilizan como Ag protenas recombinantes (PR) o pptidos sintticos
(PS). Son muy sensibles y los resultados son ms reproducibles, al utilizar un antgeno ms
normalizado y purificado. Actualmente, las pruebas de cuarta generacin reconocen no
solo los anticuerpos sealados anteriormente sino tambin antgeno p24 viral, permitiendo
acortar el perodo ventana.
Existen reactivos comercializados con los antgenos y formatos citados para la deteccin
de anticuerpos anti-VIH-1 y anticuerpos anti-VIH-1 +2. Para la deteccin especfica de
anticuerpos anti-VIH-2 solamente se dispone de EIA con pptidos sintticos o lisado viral
y formato indirecto. La confirmacin de infeccin por VIH-2 se realiza con Western Blot
y PCR especfica.
Aglutinacin. Estas pruebas estn basadas en la aglutinacin de antgenos de VIH que
previamente han sido fijados a partculas capaces de aglutinarse en presencia de suero
que contenga anticuerpos anti-VIH.
Este tipo de pruebas comenzaron a desarrollarse a mediados de los aos 80 como alternativa
a los EIA. Pueden utilizar partculas de gelatina o partculas de ltex, y como antgenos,
lisados virales, pptidos sintticos o protenas recombinantes. Son tcnicas de manejo muy
sencillo, rpidas, de lectura visual, apenas requieren instrumentacin y pueden adaptarse
a un gran nmero de sueros. Su sensibilidad parece comparable al EIA, pero su grado
de especificidad es mucho menor. Estas tcnicas son las indicadas para ser utilizadas en
laboratorios con escasa dotacin instrumental o con un manejo reducido en cuanto al
nmero de muestras.
Pruebas de EIA de membrana (Dot-Blot). En estas pruebas los anticuerpos anti-VIH son
detectados mediante un mtodo inmunoenzimtico. El antgeno, compuesto por protenas recombinantes o pptidos sintticos de uno o ambos virus, est fijado a tiras de
nitrocelulosa. La mayora de las pruebas rpidas de deteccin de anticuerpos emplean
este principio. Tienen lectura visual y no requieren instrumentacin; su sensibilidad y
especificidad an no estn suficientemente evaluadas. Su ventaja y principal indicacin
es la posibilidad de identificacin entre los dos tipos de virus, y su mayor inconveniente
(en pases como el nuestro) es su elevado costo.
Pruebas fluorimtricas. Han sido las ltimas en incorporarse a la oferta diagnstica (a partir
de 1990). Los antgenos especficos estn ligados a micropartculas y el indicador de la
reaccin es un fluorocromo que acta como sustrato. La fluorescencia emitida durante
la reaccin es medida por un fluormetro. Tiene por tanto lectura objetiva y requiere un
nivel de instrumentacin similar a las tcnicas de EIA. Dada su reciente introduccin
en el mercado, hay poca experiencia y aunque la posibilidad de automatizacin y el
procesamiento de gran nmero de muestras son muy ventajosas, es necesario estudiar su
sensibilidad y valorar el costo de su incorporacin de forma rutinaria.
468
Pruebas de confirmacin
Dada las implicancias clnicas y sociales de un resultado falso positivo, las pruebas serolgicas
deben ser confirmadas empleando tcnicas con fundamentos distintos y ms especficos.
Por lo general, se utilizan para la confirmacin de sueros positivos, pero en determinados
casos pueden emplearse tambin para continuar el estudio en casos dudosos, dada su mayor
sensibilidad en muchos casos.
Existen diferentes pruebas de confirmacin, entre ellas, las ms utilizadas son las basadas
en la inmunoelectrotransferencia o Western Blot (WB), la inmunofluorescencia indirecta
(IFI) y la radioinmunoprecipitacin (RIPA).
Western Blot: tcnica de inmunoelectrotransferencia, permite una discriminacin puntual
de anticuerpos frente a las distintas protenas del virus. Las tiras de nitrocelulosa en las que
se han transferido los antgenos virales contienen, generalmente, casi todas las protenas
estructurales del VIH y algunas protenas precursoras de aquellas. La tcnica consiste en
la incubacin de una de esas tiras con el suero problema durante un tiempo que oscila
entre 2 a 4 horas y hasta 18 horas, tras lo cual se revela la presencia de anticuerpos frente
a las diferentes protenas del virus mediante reacciones inmunoenzimticas distintas,
dependiendo del fabricante. El resultado es la aparicin de bandas coloreadas de mayor
o menor intensidad, en el lugar de la tira de nitrocelulosa en el que estn situadas las
protenas del VIH contra las cuales existen anticuerpos en el suero problema. Se identificarn, por su posicin en la tira segn peso molecular, comparndolas con el control
positivo, las bandas especificas de reactividad (gp160, gp120, p66, p55, p51, etc.).
Existen distintos criterios de positividad para el Western Blot. El propuesto por la OMS
resulta el ms sensible cuando se manejan sueros de muy variada procedencia poblacional.
Adoptando este criterio un suero es considerado positivo cuando presenta reactividad
al menos frente a dos de los siguientes 3 antgenos virales: p24, gp120 y gp4l. El criterio
propuesto por el CDC (el utilizado en nuestro pas) indica que un suero es positivo
cuando presenta reactividad frente a p24 ms alguna de las glucoprotenas de superficie
(gp160/120, gp41). Los sueros negativos no debern mostrar reactividad frente a ninguna
de las protenas presentes en la tira. Finalmente los sueros se denominan indeterminados
por Western Blot cuando, existiendo reactividad frente a una o ms protenas, no cumple
el criterio de positividad adoptado (figura 7).
Con el Western Blot pueden darse falsos negativos, posibilidad que debe tenerse en
cuenta en individuos con factores de riesgo, o signos de infeccin por VIH, y en casos de
exposicin reciente al virus. Se han descrito ensayos indeterminados por Western Blot
en personas con factor reumatoideo, lupus eritematoso sistmico (LES), bilirrubinemias
elevadas, anticuerpos contra el sistema HLA, en pacientes hemodializados, y otras causas.
En otros casos la indeterminacin en el Western Blot de VIH-1 puede ser causada por
una infeccin causada por VIH-2 u otros retrovirus (VLTH-I, VLTH-II).
En aquellos sueros indeterminados, el seguimiento debe prolongarse durante al menos 6
meses para verificar si existe un cambio en el patrn de anticuerpos, hacia la positividad,
o por el contrario, hacia la desaparicin de las bandas detectadas inicialmente. Las personas con resultados persistentemente indeterminados al cabo de 6 meses, en ausencia
de factores de riego, sntomas o hallazgos clnicos compatibles con la infeccin por VIH,
deben considerarse negativas para anticuerpos anti-VIH. Sin embargo, no deberan donar sangre, plasma, semen u rganos y debern ser informadas correctamente sobre el
significado de su situacin.
Inmunofluorescencia indirecta: la confirmacin por esta tcnica est basada en la demos-
469
Figura 7. Ejemplo de un Western blot para un suero positivo (a). La segunda tira corresponde a un individuo sano que exhibe una reaccin dbil para gp160 y para p24. La tira
C, corresponde a una segunda muestra tomada del mismo individuo, y muestra el mismo
patrn. Esto arroja un resultado indeterminado que debe seguir siendo evaluado hasta la
aparicin de mas bandas, o la desaparicin de las existentes.
gp160
gp120
p66
p55
gp41
p32
p24
p17
IgG
control
tracin de anticuerpos frente a clulas infectadas por VIH, los resultados slo pueden
expresarse como positivos o negativos. Como antgenos son empleados linfocitos humanos
infectados y fijados sobre portaobjetos. Las clulas infectadas expresan gran cantidad
de antgenos correspondientes a distintos momentos de la infeccin celular, por lo que
esta tcnica detecta todo tipo de anticuerpos anti-VIH. Las diluciones seriadas del suero
problema nos permiten expresar los resultados indicando el ttulo obtenido.
Tcnica de radioinmunoprecipitacin: consiste en la demostracin de la existencia de anticuerpos anti-VIH en el suero en estudio, que en presencia de protenas vrales marcadas
radioactivamente conduce a la formacin de innunocomplejos. Es la tcnica de referencia.
La elaboracin del antgeno requiere condiciones de alta seguridad, ya que se realiza mediante cultivo del virus en lneas celulares de linfocitos humanos y su posterior marcaje
radioactivo. Los complejos protena viral-anticuerpo especfico son separados por tcnicas
electroforticas segn su peso molecular y se ponen en evidencia mediante la impresin
del marcaje radioactivo en una placa fotogrfica. Se trata de una tcnica muy compleja
y de difcil implementacin.
Deteccin de Ag p24: este antgeno puede detectarse en suero o plasma durante la fase aguda
de la infeccin primaria por VIH y durante la fase SIDA. El antgeno p24 es detectable
solamente en el 4% de los adultos asintomticos. En la poblacin adulta es una tcnica
de baja sensibilidad (hasta un 60%), y la presencia de p24 es indicativa de la replicacin
activa del virus.
La deteccin de este antgeno puede utilizarse para el diagnstico de infeccin por VIH
en lactantes nacidos de madres VIH positivas. La sensibilidad de esta tcnica para esta
franja etaria vara entre un 50 a un 75%, siendo aun ms baja para nios menores a 6
meses de vida.
470
PCR: La amplificacin genmica por reaccin en cadena de la polimerasa, demuestra la

existencia de parte del genoma viral a partir de muestras de sangre perifrica. Se trata de
una tcnica de elevada sensibilidad y especificidad (95 y 98%, respectivamente) que provee
un diagnstico ms rpido y precoz de la infeccin por VIH en determinadas situaciones:
recin nacidos de madres infectadas por VIH (sensibilidad: 75 a 97%), demostracin de
infecciones por VIH-2 con serologa no concluyente, deteccin de mutaciones especficas
asociadas a la resistencia a los antivricos.
Aislamiento viral: el aislamiento del VIH sigue siendo hoy en da una tcnica de referencia,
su empleo queda restringido a laboratorios bien equipados. Supone el cultivo del virus a
partir de muestras clnicas que contengan partculas virales libres o clulas infectadas. El
aislamiento es obligado cuando se pretende establecer el fenotipo de VIH, la actividad
in vitro de antivirales y puede servir de referencia de la carga viral presente en la muestra
del paciente. Requiere el cocultivo de linfocitos de sangre perifrica del paciente con
linfocitos de un donante no infectado, junto con la adicin de IL-2 para favorecer el crecimiento de clulas T. El cultivo permite detectar incluso el virus latente. Es caracterstico
la observacin de formacin de sincicios y citlisis.
Deteccin y cuantificacin de ARN viral: se trata de tcnicas con una sensibilidad muy
alta a la hora de determinar infecciones agudas. Si bien no tienen indicaciones para su
uso como herramienta diagnstica en la poblacin adulta, son herramientas sumamente
tiles para el seguimiento del tratamiento antirretroviral, y para el diagnstico en recin
nacidos de madres portadoras de VIH. Esto radica en que los recin nacidos presentan
en su sangre hasta los seis meses de vida IgG maternos, por lo que los ensayos serolgicos
podran arrojar falsos positivos. Por otra los ttulos de IgM en esta poblacin son sumamente bajos.
El diagnstico de neonatos y lactantes debe basarse en la deteccin de antgenos. En tal
sentido, los ensayos de PCR de ADN proviral y de cultivo de clulas mononucleares de sangre perifrica son los mtodos ms sensibles para la determinacin de la infeccin por VIH,
alcanzando un 50% durante el primer mes de vida y cerca del 100% en lactantes mayores de
6 meses. Los resultados positivos deben confirmarse mediante un segundo ensayo (RT-PCR),
realizado con una segunda muestra obtenida posteriormente
PREVENCIN Y CONTROL
Anualmente se destinan unos 500 millones de dlares a la investigacin de vacunas eficaces

contra el VIH, habindose evaluado desde 1987 hasta el presente unas 30 vacunas candidatas.
Varios han sido los enfoques para las posibles vacunas, habindose abarcado una amplia gama
de estrategias para el desarrollo de las mismas (vacunas a virus entero inactivado, a virus vivo
atenuado, vacunas compuestas por pptidos de envoltura recombinantes, pptidos sintticos,
protenas internas, cidos nucleicos, entre otras). Estas han demostrado ser seguras y bien
toleradas, y casi todas han producido una respuesta inmune especfica contra el VIH con
diversos grados de xitos y fracasos.
Hoy en da existen dos de estas vacunas en ensayos de eficacia de fase III, una de ellas en
Estados Unidos, basada en el subtipo (B) circulante en esa regin; la otra, en evaluacin en
Tailandia, se basa en los subtipos que circulan en dicho pas (B y E). Ambas vacunas estaran
dirigidas contra la glicoprotena de envoltura gp120.
El desarrollo de una vacuna eficaz se ha visto impedido por la importante variacin
genotpica del VIH junto con su elevada tasa de mutacin y recombinacin experimentado
durante el proceso de replicacin. A esto debe sumrsele la actual falta de comprensin de
471
los parmetros crticos de inmunidad que podran proteger contra la infeccin o la enfermedad por VIH (o ambas). Con respecto a lo anterior, debe contemplarse adems la poblacin
de seropositivos para VIH; el objetivo de la vacunacin en estas personas es la induccin
de una respuesta inmune tal que detenga la progresin de la enfermedad; esta rama de la
investigacin ha cobrado un inters renovado a partir del advenimiento de la terapia antirretroviral depositndose cifradas esperanzas en que la combinacin de esta terapia junto a
una vacuna de este tipo sea capaz de controlar eficazmente tanto la replicacin viral como
su diseminacin.
De momento no existe vacuna disponible para la inmunizacin activa y al alcance de la
poblacin con riesgo de contagio por el VIH-1; probablemente requerir an varios aos de
estudios y en la actualidad la posibilidad real de obtener una vacuna efectiva parece todava
bastante alejada. El nico camino eficiente para la prevencin es la educacin acerca de las
vas de transmisin, el uso sistemtico de anlisis de la sangre en los bancos de sangre y el
uso de preservativo en las relaciones sexuales.
En ausencia de una vacuna, la prevencin de la infeccin por el VIH-1 debe basarse en
evitar su transmisin. Por tanto, debe aconsejarse a las personas que mantienen relaciones
homosexuales o heterosexuales mltiples que reduzcan el nmero de parejas y que eviten la
exposicin de su mucosa oral o genital a la sangre, semen, saliva y secreciones vaginales. La
correcta utilizacin de preservativos y espermicidas puede evitar la infeccin por el VIH-1 y
otras enfermedades de transmisin sexual. Debe aconsejarse a los drogadictos que no compartan las agujas y jeringuillas.
Tratamiento antirretroviral
El tratamiento de la infeccin por el virus de la inmunodeficiencia humana se basa en una combinacin de varias drogas. Habitualmente se emplean dos inhibidores de la retrotranscriptasa
anlogos de nuclesidos (AZT, ddI o didanosina, lamivudina, entre otros) con un inhibidor
de la proteasa (nelfinavir, saquinavir, indinavir), logrando una supresin impresionante en la
replicacin viral, tanto en nivel como en duracin. Otras combinaciones incluyen dos inhibidores de la proteasa ms un inhibidor de la retrotranscriptasa anlogo de nuclesidos, o tres
inhibidores de dicha enzima de igual caracterstica. Todas estas han producido una supresin
viral potente en estudios preliminares. La eficacia de las mismas est dadas por la potencia
global de la combinacin: aquellas combinaciones que logren una mayor reduccin en la
carga viral tienen mayor probabilidad de producir beneficios ms duraderos. Por otro lado, los
mejores resultados se han obtenido en individuos que a los que no se les haya administrado
antirretrovirales previamente y que presentan recuentos de clulas T CD4+ ms elevados.
No existe acuerdo sobre cuando debe iniciarse el tratamiento antirretroviral (TARV)
en pacientes con infeccin crnica por VIH. Aquellos pacientes que presenten menos de
200 CD4/l debern iniciar dicho tratamiento, cualquiera sea la carga viral que presenten.
El problema mayor se presenta con los pacientes que tienen entre 200 y 350 CD4/l. Existe
fuerte evidencia de que deben tratarse todos los pacientes con menos de 350 CD4/l o
cargas virales mayores a las 50.000 copias (medidas por ensayos como PCR o bDNA), ya
que valores ubicados entre 30.000 y 100.000 copias son indicadores de un mal pronstico.
De todos modos, los frmacos en una combinacin determinada deben ser administrados
simultneamente ya que el agregado secuencial de los mismos durante un periodo prolongado
aumenta la probabilidad del desarrollo de resistencia. Es importante que el paciente acepte y
cumpla estrictamente con el esquema de dosificacin. En este sentido, la evaluacin clnica
regular del paciente junto con el recuento de clulas T CD+ y la determinacin de la carga
472
viral, son de suma importancia a la hora de evaluar un tratamiento en curso y la posterior

determinacin de cambiar o no la teraputica. Entre las diferentes causas que pueden motivar
dicho cambio se encuentran:
1. Una mala respuesta virolgica temprana a la teraputica (evidenciada por una pobre
reduccin en la carga viral en un periodo de dos meses).
2. Un aumento significativo de la carga viral luego de un mnimo, no correlacionado a una
causa corregible.
3. La disminucin contina del conteo de clulas T CD4+.
4. El deterioro clnico del paciente bajo tratamiento con un rgimen estable.
Prevencin de la transmisin vertical: embarazo
Debe aconsejarse a aquellas mujeres infectadas por el VIH-1 que eviten el embarazo, ya
que es posible la transmisin de la infeccin al feto en al menos el 10-30% de los casos. La
administracin de zidovudina a partir de las semanas 14-34 del embarazo y en el perodo del
parto, y en el recin nacido durante las seis primeras semanas de vida, reduce la tasa de transmisin maternofetal a menos del 8% y se tolera muy bien. La combinacin del tratamiento
con AZT y cesrea ha disminuido la transmisin vertical del VIH-1 a menos del 2%. En los
pases desarrollados las madres deberan evitar la lactancia ya que la enfermedad se contagia
tambin por esta va.
Profilaxis postexposicin
Para el caso concreto del personal sanitario, el riesgo de infeccin es del 0,2-0,5% en caso
de pinchazo o herida accidental con una aguja u otro objeto contaminado con sangre, y
prcticamente nulo si slo ha existido un contacto accidental de sangre u otras secreciones
contaminadas con la piel y las mucosas intactas. No obstante, y dado que las consecuencias
fsicas, morales, sociales y econmicas de adquirir una infeccin por VIH-1 a travs de un
accidente laboral pueden ser irreparables, debe recomendarse el tratamiento triple con AZT o
d4T, 3TC e indinavir o nelfinavir (siempre que no se hayan administrado al paciente fuente)
tras la exposicin percutnea (pinchazo) o mucosa con sangre contaminada. El tratamiento
debe instaurarse lo antes posible (menos de cuatro horas) y debe administrarse durante al
menos cuatro semanas.
Precauciones universales
Es obligatorio la aplicacin de precauciones universales (aplicables a todos los pacientes)
cuando se manipula sangre o determinados productos biolgicos considerados peligrosos
(lquido pericrdico, pleural, peritoneal, articular y cefalorraqudeo, adems del semen y las
secreciones vaginales) y al efectuar cualquier maniobra invasiva. Por tanto, el personal sanitario
deber utilizar mtodos de barrera (guantes y, si es necesario, mascarilla, protectores oculares y
batas) y adoptar precauciones para evitar la produccin de heridas por agujas, bistures u otros
instrumentos punzantes en el transcurso de su empleo o limpieza. El descarte de tales elementos
debe realizarse en recipientes de paredes rgidas a fin de evitar cortes y pinchaduras.
Esterilizacin del instrumental sanitario
Los mtodos habituales de esterilizacin (por ej. autoclave, xido nitroso) y desinfeccin
(por ej. germicidas, leja, jabones) son adecuados para esterilizar el instrumental sanitario o
efectuar una desinfeccin ambiental. Estos virus son rpidamente inactivados por detergentes
y desinfectantes efectivos contra otros virus envueltos. Se recomienda el uso de hipoclorito
473
de sodio en una concentracin de 5.000 ppm para superficies contaminadas, pudindose

emplear concentraciones ms elevadas (10.000 ppm) cuando se trabaje con preparados y/o
cultivos virales.
Virus linfotrpicos humanos y otros retrovirus oncognicos

INTRODUCCIN
Los oncovirus fueron denominados originalmente virus ARN tumorales y han sido asociados
con leucemias, sarcomas y linfomas en muchos animales diferentes. No son citolticos. Los
miembros de la subfamilia se distinguen por el mecanismo de transformacin celular y, en
consecuencia, por la duracin del periodo entre la infeccin y el desarrollo de enfermedad.
Un gran grupo de oncovirus, los virus causantes de sarcoma y leucemias agudas, tienen
incorporados en sus genomas genes celulares (protooncogenes) que codifican factores de
crecimiento, como hormonas de crecimiento, receptores de hormonas de crecimiento,
proteincinasas, protenas de unin al GTP y protenas de unin al ADN nuclear. Estos
virus pueden causar transformacin y son altamente oncognicos. Se han identificado por
lo menos 35 oncogenes virales diferentes. Las mutaciones de los protooncogenes celulares
originales presentes en el oncogn viral, o la sobreproduccin del oncogn, favorecen la
transformacin de las clulas infectadas. La incorporacin del oncogn en muchos de esos
virus sustituye secuencias codificadoras para los genes gag, pol o env, de forma que tales virus
son defectuosos y requieren de virus facilitadores para su replicacin. Es frecuente que los
virus permanezcan dentro del husped (virus endgenos) y sean transmitidos verticalmente
a travs de clulas germinales.
PATOGENIA
Los virus de leucemia, incluyendo el VLTH-1 pueden replicarse de modo eficaz pero no pueden
transformar las clulas in vitro. Causan cncer despus de un perodo de latencia largo, de al
menos 30 aos. El virus puede favorecer la proliferacin de las clulas por dos mecanismos.
En primer lugar, el virus puede activar su expresin mediante integracin prxima y yuxtaposicin de la secuencia de los genes facilitadores y promotores vricos de la regin LTR a
la regin de los genes que controlan el crecimiento celular. En segundo lugar, se produce un
regulador de la transcripcin (tax), capaz de activar los promotores de la regin LTR y genes
celulares especficos (como genes de linfocinas y controladores de crecimiento, por ej.: IL-2
y GM-CSF) para favorecer la proliferacin de la clula. El crecimiento celular incontrolado
puede ser suficiente para inducir transformacin neoplsica, y adems puede favorecer otras
aberraciones genticas a lo largo de un perodo prolongado. Estos virus se asocian tambin
con trastornos neurolgicos no neoplsicos y otras enfermedades.
Entre los oncovirus humanos se incluyen VLTH-1, VLTH-2 y VLTH-5, pero solo el
VLTH-1 ha sido asociado de modo inequvoco con alguna enfermedad.
VLTH-1 (VIRUS LINFOTRPICO HUMANO DE CLULAS T TIPO I)
El aislamiento original de este virus se hizo a partir de clulas leucmicas de pacientes con
formas agresivas de carcinomas de clulas T. Este virus causa leucemia linfoctica aguda de
clulas T del adulto (LLTA) y la paraparesia espstica tropical, una enfermedad neurolgica
no oncognica que presenta un cuadro similar al producido por la esclerosis mltiple. Adems,
474
se han descrito otras tres condiciones asociadas con la infeccin por VLTH-1: uvetis por
VLTH-1, dermatitis infecciosa asociado a VLTH-1 y artropata asociada a VLTH-1
Caractersticas estructurales
El virus linfotrpico humano de clulas T, tipos I y II, es un miembro de la subfamilia Oncovirinae, y es un tpico exponente de retrovirus de clase C. Tanto VLTH-I como VLTH-II
poseen una organizacin genmica similar (gag, pro/pol, env, p, flanqueados por repeticiones terminales largas o LTR) y presenta una homologa del 60% a nivel de sus secuencias
nucleotdicas.
El gen gag codifica para las protenas estructurales p19, p24, y p15. Los genes pro/pol codifican para la proteasa y la transcriptasa reversa, respectivamente. El gen env codifica para las
protenas transmembrana y las glucoprotenas de la envoltura gp21 y gp46. El gen p codifica
para las protenas reguladoras Tax y Rex y otros tres marcos abiertos de lectura.
Epidemiologa
Las regiones inmunodominantes de las protenas estructurales y ciertas regiones de los genes
reguladores son la base para la diferenciacin de VLTH-I y II.
Si bien el genoma de estos virus se encuentra bastante conservado, existe una mayor
divergencia en lo referente a las LTR; esta diferencia ha sido explotada mediante RFLP (polimorfismos en el largo de fragmentos de restriccin) para la separacin del VLTH-I en tres
subtipos (denominados cosmopolita, africano y melanesio, cada uno relacionado al origen
geogrfico del virus). Otras herramientas de biologa molecular han permitido subdividir al
subtipo cosmopolita en subtipos designados A-D. Los estudios virolgicos han confirmado
la presencia de VLTH-1 en las clulas T de los pacientes seropositivos para los anticuerpos
anti-VLTH-1. La comparacin de los virus aislados en Estados Unidos, Japn, el Caribe e
Israel ha demostrado que son iguales sobre la base de la homologa de cidos nucleicos. Se
han identificado reas endmicas de infeccin por VLTH-1 en Asia, frica, Medio Oriente,
Europa y el Hemisferio Occidental.
Del mismo modo, VLTH-II ha sido dividido en dos subtipos, IIa y IIb, que no parecen tener
una distribucin geogrfica determinada, aunque s se asocian a determinadas poblaciones de
riesgo. En este sentido, el subtipo IIa se halla frecuentemente asociado a usuarios de drogas
intravenosas a lo largo de todo el mundo, mientras que el subtipo IIb se halla presente en
indios americanos.
Transmisin
El VLTH-1 permanece asociado con las clulas y se contagia por trasfusin de sangre, relaciones
sexuales o alimentacin mamaria. Se ha sugerido la transmisin sexual (mayor probabilidad
de VLTH-1 positivas en mujeres de hombres infectados, habindose detectado linfocitos
portando el virus en el semen). Se han hallado linfocitos infectados por el VLTH-1 en la leche
de mujeres con anticuerpos contra el virus. Adems, se han detectado clulas infectadas en
la sangre del cordn umbilical de recin nacidos de mujeres infectadas, hecho que sugiere de
manera contundente que la infeccin podra ocurrir intratero. Tambin se ha demostrado
que la transmisin se produce por va parenteral.
Ciclo del virus
Entra al torrente sanguneo e infecta los linfocitos T helper CD4+ y otros linfocitos implicados en la hipersensibilidad retardada. Esas clulas T tienden a residir en la piel, lo que
475
contribuye a los sntomas de LLTA. El VLTH es competente para la replicacin y los genes
gag, pol y env son transcriptos, traducidos y procesados de una manera muy similar al VIH,
aunque su regulacin es diferente. Adems de su accin sobre los genes virales, la protena
tax, transactiva los genes celulares para el factor de crecimiento de las clulas T, IL-2 y sus
receptores, lo que activa el crecimiento de la clula infectada.
El virus puede permanecer latente o multiplicarse con lentitud durante muchos aos,
pero tambin puede inducir proliferacin de clones particulares de clulas T. Aunque esta
proliferacin de clulas T habitualmente es de origen policlonal, la leucemia linfoctica de
clula T del adulto (LLTA) causada por el VLTH-1 suele ser monoclonal. En las clulas con
crecimiento estimulado por VLTH se acumulan aberraciones cromosmicas y reordenamientos
del gen que codifica para el receptor beta del antgeno de las clulas T, lo que favorece la
transformacin leucmica.
Clnica
La mayor parte de las infecciones ocurren mas tarde en la vida y casi todos los individuos
infectados permanecen asintomticos de por vida, y la incidencia acumulativa de las formas
de leucemia de clulas T del adulto se produce aproximadamente en el 4% de los infectados.
Aproximadamente 1 de cada 20 personas desarrollan leucemia a los largo de un perodo
variable entre 10-50 aos.
La LLTA por el VLTH-1 es una neoplasia de las clulas T helper CD4+ con curso
agudo o crnico. Los linfocitos malignos han sido denominados clulas en flor porque son
pleomrficos y contienen ncleos lobulados. Adems de una cifra alta de leucocitos, esta
forma de LLTA se caracteriza por lesiones cutneas similares a otras leucemias. La LLTA
aguda suele conducir a la muerte en menos de un ao desde el momento del diagnostico,
independientemente del tratamiento.
Mtodos diagnsticos
Se ha implementado el monitoreo en bancos de sangre para evitar la transmisin de VLTH-1
y 2 por transfusin. Dicho monitoreo emplea mtodos indirectos para deteccin anticuerpos
especficos en suero y plasma.
La respuesta inmunolgica est dada principalmente contra ciertas regiones altamente
inmunognicas de las protenas codificadas por los genes gag y env. Habitualmente se emplean
EIA como el ELISA para el tamizaje (screening) primario de los distintos sueros. Estos ensayos
son simples y sensibles y estn preparados a partir de lisados de clulas infectadas por VLTH-1.
Las pruebas confirmatorias se realizan mediante WB. Estos ensayos serolgicos, sin embargo,
no son capaces de discernir entre una infeccin presente o pasada. La deteccin directa del
virus en fluidos corporales puede realizarse mediante ensayos para protenas o cidos nucleicos
virales, como ELISA de captura para antgenos virales (usualmente productos del gen gag),
hibridacin de cidos nucleicos (Southern Blot) con sondas marcadas o PCR. Esta ltima
se ha convertido en el mtodo de referencia para la determinacin de infecciones presentes,
validando ensayos serolgicos, diferenciando entre infecciones por VLTH-1 y VLTH-2.
En la poblacin peditrica el diagnstico se realiza mediante PCR; esta herramienta es
de suma utilidad ya que los ensayos serolgicos no son indicadores confiables de infeccin
debido a la transferencia pasiva de anticuerpos maternos.
Tratamiento, prevencin y control
No se conoce tratamiento eficaz contra la infeccin por el VLTH-1. Es probable que el AZT
476
y otros inhibidores de la transcriptasa inversa sean efectivos contra el VLTH-1, pero se necesitan estudios controlados para demostrar el beneficio de estas terapias. Los medios para
limitar la diseminacin del virus son los mismos descritos para el VIH: precauciones sexuales,
deteccin del suministro de sangre y la divulgacin de los riesgos y enfermedades potenciales,
contribuirn a bloquear la transmisin del virus.
Es muy difcil controlar la infeccin de origen materno en los nios. En un futuro prximo probablemente se instituyan procedimientos de despistaje o screening habituales para el
virus en la sangre donada. Hasta el momento se han reportado en el Uruguay dos casos por
el VLTH-1.
RETROVIRUS ENDGENOS
Diferentes retrovirus estn integrados y forman parte de los cromosomas de humanos y

animales. En las personas se pueden detectar secuencias provirales completas y parciales,
con secuencias de genes similares a las del VLTH, el virus de tumor mamario del ratn
(MMTV) y otros retrovirus. Estos virus endgenos carecen generalmente de capacidad para
multiplicarse, debido a deleciones, insercin de codones de terminacin o escasa eficacia de
la transcripcin. Las secuencias de retrovirus pueden constituir hasta el 0,1% del genoma
humano. Esas secuencias pueden proporcionar sitios de integracin para otros retrovirus o
cumplir alguna funcin desconocida.
Bibliografa
Abbas, A. K.; Lichtman, A. H.; Pober, J. S. Congenital and Acquired Immunodeficiencies. Cap. 21 in Cellular
and Molecular Immunology, 3rd Edit. 1997.
Dezzutti, C. S.; Lal, R. B. Human T-Cell Lymphotropic Virus Types I and II. Cap. 64 in Manual of clinical
microbiology (Murray, P.; Baron, J. E.; Pfaller, M. A.; Tenover, F. C.; Yolken, R. H.) 7th Edit. 1999.
Gayle, H. D.; Hill, G. L. Global Impact of Human Immunodeficiency Virus and AIDS. Clinical Microbiology
Reviews. Vol. 14, pp. 327-335. 2001.
Gutierrez, S. Infeccin por VIH y SIDA en Pediatra. Monografas del Instituto de Higiene. N 2. Virus y
Virologa Mdica en Uruguay. 2002.
Haynes, B. F.; Palker, T. J. Retrovirus Humanos. Cap. 77 in Zinsser, Microbiologa (Joklik, W. K.; Willet, H.
P.; Amos, D. B.; Wilfert, C. M.) 20 Ed. 1997.
Janeway, C. A.; Travers, P.; Walport, M.; Kapra, J. D. Immunobiology: The Immune System in Health and
Disease. 4th Edit. 1999. Cap. 11, pp. 440-455.
Lewin, B. Retroviruses and Retroposons. Cap. 19 in Genes VI, 1997.
Mandell, G. L.; Bennett, J. E.; Dolin, R. Sndrome de Inmunodeficiencia Adquirida. Seccin O (Caps. 104-
Murray, P.; Kobayashi, G. S.; Pfaller, M. A.; Rosenthal, K. Retrovirus. Cap. 67 in Microbiologa Mdica, 2
117) in Enfermedades Infecciosas: Principios y Prctica. Vol. 1, 5 Ed. 2002.

Edicin; 1997.
Ruchansky, D. Vigilancia Molecular del VIH. Monografas del Instituto de Higiene. N 2. Virus y Virologa
Mdica en Uruguay. 2002.
Serra, M. Programa Nacional de SIDA 2002. MSP. Monografas del Instituto de Higiene. N 2. Virus y
Virologa Mdica en Uruguay. 2002.
Schpbach, J. Human Immunodeficiency Viruses. Cap. 63 in Manual of clinical microbiology (Murray, P.;
Baron, J. E.; Pfaller, M. A.; Tenover, F. C.; Yolken, R. H.) 7th Edit. 1999.
UNAIDS/ 03.39E. AIDS Epidemic Update. Joint United Nations Programme on VIH/AIDS (UNAIDS), World
Health Organization (WHO). Dec. 2003.

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Diferentes retrovirus estn integrados y forman parte de los cromosomas de humanos y

Lewin, B. Retroviruses and Retroposons. Cap. 19 in Genes VI, 1997.

117) in Enfermedades Infecciosas: Principios y Prctica. Vol. 1, 5 Ed. 2002.

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