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Submdulo:
3: Ejecuta Tcnicas de Identificacin de
Microorganismos con base en las normas
Reporte de prctica no. 5:
Prepara medios de cultivo (agar y caldos nutritivos) para aislar microorganismos
Profesor: QFB.
Integrantes de equipo:
Grado y Grupo:
Fecha de
entrega:
Ornelas
Mijangos
Jess Melesio
Apellido Paterno
Apellido Materno
Nombre(s)
3 ALV
Lunes, 19 de
Septiembre de 2016
Equipo:
Lugar de entrega:
5
Coatzacoalcos, Ver
Tcnica.
1.-Ponerse la bata de laboratorio perfectamente abotonada, colocarse los guantes estriles y
el cubrebocas.
2.-Limpiar el rea de trabajo inmediata que es la superficie de acero inoxidable de la mesa
con agua y detergente lquido, enjuagar y secar.
3.-Desinfectar el rea de trabajo con la solucin de cloruro de benzalconio y secar.
4.- Esterilizar el rea de trabajo con la flama del mechero de Bunsen.
5.-Utilizar estas normas de bioseguridad para todas las prcticas de microbiologa que se
realicen.
Preparacin de un medio de cultivo
Puesto que la mayora de los medios de cultivo se encuentran deshidratados, para su
preparacin ser necesaria la adicin de agua destilada o desmineralizada con un pH
prximo a 7. Para preparar el medio de cultivo se utiliza un erlenmeyer limpio y enjuagado
con agua destilada o desmineralizada. El volumen del erlenmeyer deber ser el doble del
volumen de medio de cultivo que queramos preparar.
Pasos a realizar:
1) Medio de cultivo
4) Aadir agua
destilada al matraz
3) 0.16 g necesarios
para preparar 20 ml
de caldo nutritivo
6) 20 ml de caldo
nutritivo
8) Se utiliza un
mechero bunsen para
esterilizar a un radio de
15 cm
Observaciones.
1) Tanto el caldo nutritivo como el agar tienen un tono de color amarillento.
2) Utilizamos una jeringa en lugar de una pipeta para aadir el caldo nutritivo a los tubos
de ensayo.
3) El agar es lquido a la temperatura de ebullicin y solidifica entre los 45-50C.
4) El caldo nutritivo no necesita calentarse.
5) Se coloc cinta testigo al material, este cambi de color al final del proceso de blanco
a negro.
6) El proceso de esterilizacin duro aproximadamente 1 hora
7) Al salir el material del autoclave, se dej enfriar alrededor de 20 minutos, para meterlo
al refrigerador.
8) La temperatura ideal a la que debe estar esta entre los 2-8C.
Clculos y resultados.
Caldo nutritivo
Agar nutritivo
8 g 1000 ml
x g 20 ml
23 g 1000 ml
x g 100 ml
8 20
=0.16 g
1000
23 100
=2.3 g
1000
Conclusin.
En esta prctica aprendimos a preparar caldo y agar nutritivos que son medios de cultivo,
adems que aprendimos a clasificar los medios de cultivo, segn: el estado fsico, la
naturaleza de sus constituyentes y los propsitos de uso.
De manera general se denomina medio de cultivo a cualquier material que presente una
adecuada combinacin de nutrientes para permitir el crecimiento o el incremento del nmero
de clulas de una poblacin microbiana.
En los Laboratorios de Microbiologa se utiliza una gran variedad de medios de cultivos para
mantener las cepas, aislar o identificar microorganismos con varias finalidades: determinar la
existencia de contaminacin de alimentos, medicamentos o cosmticos; diagnosticar alguna
enfermedad, elaboracin de vacunas bacterianas, etc.
Colonias Grandes, planas, blanquecinas, forma irregular, bordes lobulados, dan la apariencia
de estar secas, tambin se observa una protuberancia en el centro de las colonias lo cual les
da una apariencia de huevo estrellado.
Proteus mirabilis.
El genero Proteus es bien conocido por su amplia motilidad, esta se puede evidenciar en
medios nutritivos como agar sangre, agar nutritivo, agar BHI, entre otros. Se forman una
especie de ola alrededor de las colonias bacterianas y esta se desplaza de forma radial, a
este fenmeno se le llama efecto de swarming el cual es caracterstico de Proteus sp.
Colonias medianas, convexas, blanquecinas o translucidas, forma circular, bordes
redondeados hay presencia de swarming.
Enterococcus faecalis
E. faecalis es una bacteria inmvil, anaerobia facultativa y fermenta la glucosa sin producir
gas. No presenta una reaccin con la catalasa en presencia de perxido de hidrgeno,
puede producir una reaccin pseudocatalasa si se cultiva en agar sangre, sin embargo sta
es muy dbil. E. faecalispuede vivir en ambientes extremos que incluyen pH altamente
alcalino de 9,6 y elevadas concentraciones de sal.
Staphylococcus aureus
Los estafilococos crecen rpidamente en casi
todos los medios bacteriolgicos bajo
condiciones aerobias o microaeroflicas. Las
muestras clnicas principalmente se cultivan
en medios de agar enriquecidos con sangre
de carnero. Cuando se trata de una muestra
contaminada, debe ser inoculada primero en
agar Columbia adicionado con clistn y cido
nalidxico o alcohol fenil-etlico.
Agar nutritivo
Slido
Medios selectivos.
Caldo nutritivo
Lquido
Medios selectivos.
Referencias de informacin:
https://www.ecured.cu/Cultivo_de_microorganismos
Fecha de consulta: Domingo, 18 de Septiembre de 2016.
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/08_Tema_5_Cultivo
.pdf
Fecha de consulta: Domingo, 18 de Septiembre de 2016.
http://microbitosblog.com/2010/06/14/morfologia-colonial-bacteriana/
Fecha de consulta: Domingo, 18 de Septiembre de 2016.
http://perso.wanadoo.es/sergioram1/medios_de_cultivo.htm
Fecha de consulta: Domingo, 18 de Septiembre de 2016.
http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/065ssa13.html
Fecha de consulta: Domingo, 18 de Septiembre de 2016.
http://www.dibico.com/productos.php?t=med&m=d&IdCat=1
Fecha de consulta: Domingo, 18 de Septiembre de 2016.
http://www.dibico.com/fichast/1022.pdf
Fecha de consulta: Domingo, 18 de Septiembre de 2016.
http://www.dibico.com/fichast/1040.pdf
Fecha de consulta: Domingo, 18 de Septiembre de 2016.