UNIVERSIDAD AUTNOMA DEL ESTADO DE

MXICO

FACULTAD DE QUMICA
EVALUACIN DE LA TOXICIDAD DE EFLUENTES
PROVENIENTES
DE LA PRESA MADN EN BRANQUIAS DE Cyprinus carpio

QUE PARA OBTENER EL TTULO DE

QUMICA FARMACUTICA BILOGA

PRESENTA
ANALLELY CAMPOS ANZALDO

DIRECTOR
Dr. LEOBARDO MANUEL GMEZ OLIVN

DIRECTOR EXTERNO
M. en C.Q. EDGAR DAVID GONZLEZ GONZLEZ

TOLUCA, ESTADO DE MXICO 09 DE SEPTIEMBRE DE 2016

El presente trabajo fue realizado en el Laboratorio de

Toxicologa de la Facultad de Qumica de la
Universidad Autnoma del Estado de Mxico (UAEMx).

DEDICATORIAS
A Dios mi luz, mi gua, mi camino recorrido
siempre de tu mano ir.

A mis padres Claudia Anzaldo y Heriberto Campos

por su apoyo incondicional y el impulsarme a ser mejor
cada da, los amo, vamos por mas triunfos.

A mis hermanos Ivan Campos y Yeni Campos

por todo lo compartido a lo largo de esta vida, a mis abuelos,
tios, primos.

A mis amigos, aquellos que siempre me tendieron una mano,

su cario, regaos, llamadas de atencin inigualables
y edificantes sin duda alguna ya saben quines son.

A mis nazarenos, gracias por sus oraciones

y su eterna fraternidad.

AGRADECIMIENTOS

Al Departamento de Toxicologa de la Facultad de Qumica de la

Universidad Autnoma del Estado de Mxico mi alma Mater,

por el

apoyo prestado para la realizacin de esta tesis.

Mi agradecimiento y total admiracin al Dr. Leobardo Manuel Gmez
Olivn por sus consejos, enseanzas y sugerencias gracias por
conducirme hasta aqu.
Al M. C. Q. Edgar David Gonzlez Gonzlez por darme la oportunidad de
desarrollar este trabajo de investigacin y por esta hermosa amistad
tanto en lo personal como en lo profesional sin duda s, que nada es
casualidad.
A los revisores de esta tesis por su opinin acertada y sus correcciones
para detallar esta tesis y mejorarla para que en un futuro sirva de
prembulo para que por medio de la ciencia y la investigacin se pueda
mejorar la calidad de vida humana.

NDICE
PGINA
CONTENIDO
INDICE DE FIGURAS
INDICE DE TABLAS
RESUMEN
1. INTRODUCCIN

2.MARCO CONCEPTUAL
2.1. GENERALIDADES
2.1.1. CONTAMINACIN
2.1.1.1. Clasificacin
2.1.2. CONTAMINACIN DEL AGUA
2.1.2.1 Fuentes de contaminacin del agua
2.1.2.2 Contaminantes emergentes en el agua

2.1.3 TIPOS DE CONTAMINANTES EMERGENTES

PRIORITARIOS EN EL AGUA
2.1.3.1 Compuestos orgnicos
2.1.3.2 AGRCOLAS
2.1.3.2.1 Plaguicidas
2.1.3.3 PRODUCTOS FARMACUTICOS
2.1.3.4 SURFACTANTES
2.1.3.5 METALES PESADOS
2.1.4. BIOENSAYOS DE TOXICIDAD
2.1.5 BIOINDICADORES
2.1.5.1 Caractersticas para considerar a un organismo como
bioindicador.
2.1.5.2 Ventajas y desventajas de los organismos utilizados
como Bioindicadores

6
6
7

10
14
17
19
21
24
26
26

2.1.6. Cyprinus carpio

2.1.6.1 Clasificacin taxonmica
2.1.6.2. Caractersticas generales
2.1.6.3 Reproduccin

27
28
28
28

2.1.7 BIOMARCADORES

29

2.1.8. ESTRS OXIDATIVO

2.1.8.1 Especies Reactivas

31
31

Reactivas de Nitrgeno (ERNs)

de Oxigeno (EROs),

Especias

2.1.8.2 Sistemas antioxidantes

2.1.8.2.1. Superxido dismutasa (SOD)
2.1.8.2.2. Catalasa (CAT)
2.1.8.2.3. Glutatin peroxidasa (GPX)

33
35
35
36

2.1.9. DAO OXIDATIVO

2.1.9.1 Peroxidacin lipdica (LPO)
2.1.9.4.2. Oxidacin de las protenas
2.1.9.4.3 Oxidacin de cidos nucleicos
3. ANTECEDENTES
4. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
5. JUSTIFICACION
6. HIPTESIS

37

7. OBJETIVOS
7.1. OBJETIVO GENERAL
7.2. OBJETIVOS ESPECIFICOS

51

8.METODOLOGIA

52

8.1. DISEO METODOLGICO

8.1.1. Organismo de prueba (Cyprinus carpio)
8.1.2. Preparacin del medio sinttico
8.1.3.Caracterizacin geoclimtica, seleccin de sitios de
muestreo y colecta de agua
8.1.4. Determinacin de la toxicidad a travs de la evaluacin
del estrs oxidativo
8.1.4.2. Determinacin del grado de lipoperoxidacin (Mtodo
de Buege y Aust, 1978)
8.1.4.3. Determinacin del contenido de hidroperxidos
(Mtodo de Jiang et al. 1992)
8.1.4.4.Determinacin del contenido de protenas
carboniladas(Mtodo de Levine et al, 1990; Parvez y Raisuddin,
2005; Burcham, 2007)
8.1.4.5.Determinacin de la actividad de la superxido
dismutasa(Mtodo de Misra y Fridovich, 1972)
8.1.4.6. Determinacin de la actividad de la catalasa (Mtodo
de Radi et al, 1991)
8.1.4.7. Determinacin del contenido de protenas (Mtodo de
Bradford, 1976)
8.2.Anlisis estadstico

52
53
53
54

9. RESULTADOS
9.1 Determinacin del contenido de hidroperxidos
9.2 Determinacin del grado de lipoperoxidacin

58
58
59

40
48
49
50

55
55
56
56

56
56
57
57

9.3 Determinacin del contenido de protenas carboniladas

9.4 Determinacin de la actividad de la superxido dismutasa
9.5 Determinacin de la actividad de la catalasa

60
61
62

10. DISCUSIN DE RESULTADOS

63

11. CONCLUSIONES

70

12. BIBLIOGRAFA

71

NDICE DE FIGURAS
FIGU
RA
1
2
3
4
5
6
7
8
9

10
11
12
13
14
15
16

17

18

19

20

Fuentes de contaminacin
Distribucin de los plaguicidas en sistemas biticos y
abiticos
Esquema de un surfactante
Secuencia de posibles efectos biolgicos en la fauna
acutica sometida a la descarga de un contaminante
Cyprinus carpio
Principales especies reactivas de oxgeno y enzimas
antioxidantes
Reaccin de enzima Superxido Dismutasa
Reaccin de enzima Catalasa
Sitio de accin de las principales defensas antioxidantes
enzimticas y principales consecuencias toxicolgicas
del ataque de los radicales libres
Reaccin de enzima Glutatin Peroxidasa
Reaccin de enzima Glutatin Reductasa
Reacciones de peroxidacion lipdica
rea de preservacin y confinamiento de las especies
bioindicadoras
Presa Madn (puntos crticos y sitios de muestreo)
Sistemas utilizados para la prueba de toxicidad subletal
Contenido de hidroperxidos en Cyprinus carpio
expuesto al agua de los diferentes sitios de muestreo
(SM), de la presa Madn a las 12, 24, 48, 72 y 96 horas.
Grado de lipoperoxidacin en Cyprinus carpio expuesto
al agua de los diferentes sitios de muestreo (SM),de la
presa Madn a las 12, 24, 48, 72 y 96 horas
Contenido de protenas carboniladas en Cyprinus carpio
expuesto al agua de los diferentes sitios de muestreo
(SM), de la presa Madn a las 12, 24, 48, 72 y 96 horas
Actividad de la superxido dismutasa en Cyprinus carpio
expuesto al agua de los diferentes sitios de muestreo de
la presa Madn a las 12, 24, 48, 72 y 96 horas
Actividad de la catalasa en Cyprinus carpio expuesto al
agua de los diferentes sitios de muestreo (SM), de la
presa Madn a las 12, 24, 48, 72 y 96 horas

PGIN
A
8
12
18
25
28
32
35
35
36

36
37
38
53
54
55
58

59

60

61

62

NDICE DE TABLAS

TABLA
1
2
3
4
5

6
7

8
9
10
12

PGIN
A
Contaminantes, procesos y fuentes que afectan la
6
calidad del agua
Clasificacin de los plaguicidas segn su toxicidad
11
Clasificacin de los plaguicidas, segn la familia
13
qumica
Clases de contaminantes emergentes de tipo
16
farmacuticos
Criterios para la seleccin de pruebas biolgicas en
23
laboratorio para la evaluacin toxicolgica de
sustancias qumicas
Ventajas y desventajas del uso de las diversas
27
especies de bioindicadores
Biomarcadores de tiempo, tipo de respuesta, nivel de
30
organizacin biolgica al que pertenecen y sus niveles
de deteccin
Principales especies activas del oxgeno y de
32
nitrgeno relacionados con el estrs oxidativo
Tipos de antioxidantes y mecanismo de accin
34
Normas Oficiales Mexicanas, Cronologa
40
Curva tipo para la determinacin de protenas
57

RESUMEN
Durante muchos aos todos los recursos naturales eran considerados
disponibles para cualquier uso antrpico, sin tener en cuenta la calidad o
las necesidades de los mismos, sin embargo, en la actualidad el
crecimiento de la poblacin y el mal uso de stos se ha visto afectado
considerablemente, provocando as, su contaminacin. Como recurso
esencial se encuentra el agua, la cual, cubre ms del 70% de la
superficie del planeta. Las principales causas de su contaminacin son
los vertidos incontrolados de las aguas residuales urbanas e industriales,
muchas veces sin tratamiento, en ambientes

automatizados como

presas y plantas potabilizadoras. Algunos de los problemas potenciales

que puede provocar la contaminacin acutica en el ser humano son
procesos fisiolgicos anormales, disminucin de la capacidad de
reproduccin, aumentos de los casos de cncer, desarrollo de cepas
bacterianas con resistencia a los antibiticos, de igual modo, un
incremento significativo de la toxicidad de los compuestos presentes en
el medio ambiente por efectos sinrgicos.
La presa Madn (PM), ubicada en el municipio de Tlalnepantla, Estado de
Mxico, abastece de agua potable

a los municipios de Naucalpan y

Atizapn y se encuentra afectada debido a que sobre ella se descargan

desechos de uso domstico, industrial y agrcola, por lo cual es de suma
importancia realizar estudios de toxicidad sobre los organismos que se
desarrollan en este cuerpo de agua, como la carpa comn. Por lo que el

objetivo de este estudio fue evaluar la toxicidad inducida por los

principales contaminantes (AINEs y metales) presentes en agua de la PM
sobre Cyprinus carpio, a travs de biomarcadores de estrs oxidativo.
Para esto se evaluaron los siguientes biomarcadores de estrs oxidativo
en branquias: grado de lipoperoxidacin, contenido de hidroperxidos,
contenido de protenas carboniladas, y la actividad de las enzimas
antioxidantes superxido dismutasa y catalasa. En conclusin, los cinco
sitios de muestreo de la PM inducen estrs oxidativo en branquias de
Cyprinus

carpio,

sin

embargo,

los

cambios

encontrados

en

los

biomarcadores utilizados en el presente estudio muestran diferencias

entre los sitios de muestreo. Esto es probablemente debido a las
diferencias en las concentraciones de xenobiticos entre los diversos
sitios de muestreo.

1. INTRODUCCIN
En los ltimos aos, se han sintetizado ms de 11 millones de sustancias
qumicas,

la

mayora

no

tienen

ningn

uso

despus

de

su

descubrimiento. A este respecto, la Enviromental Protection Agency de

los Estados Unidos de Amrica

por sus siglas en ingls (EPA), y la

Organizacin Mundial de la Salud (OMS), mencionan que en los pases

industrializados

se

produjeron

sustancias qumicas en 1980,

comercialmente

cerca

de

80,000

los estudios sobre caractersticas

ambientales y toxicolgicas del elevado nmero de sustancias qumicas

en uso, no han tenido un aumento paralelo con el de las mismas
sustancias Hoy dia se dispone de datos completos sobre toxicologa del
tipo preclnica, clnica, ambiental y acutica sobre el comportamiento
ambiental de las sustancias; existen organismos que trabajan en estos
temas, sobre estudios sobre efectos adversos de sustancias qumicas
han reconocido el potencial de un nmero importante de sustancias para
contaminar el ambiente o causar daos diversos a los ecosistemas y a la
salud (Albert, 1997).
En esta rama con lo que respecta a estudios de
dentro de la cual los organismos a utilizar

toxicidad acutica,

pueden ser invertebrados,

bacterias y algas. El efecto observado a investigar

pueden ser: la

letalidad u otro efecto subletal (Riva, 1997)

Actualmente los planes de monitoreo de cuerpos de agua han reflejado
graves daos sobre la biota de los mismos, principalmente en los peces
que presentan una gran cantidad de mecanismos adaptativos a su
medio (Hinton, 1990; Domitrovic, 1997).
El uso de biomarcadores ha sido de gran importancia para mostrar el
dao causado en este caso sobre cuerpos de agua mediante el uso de
bioindicadores, por lo que es uno de los ms usados en este tipo de
estudios del tipo ambiental, el estrs oxidativo el cual forma parte de un
proceso

inducido

por

diversas

clases

de

contaminantes

como

mecanismo de toxicidad el cual ha sido un foco de inters en el campo

de la toxicologa acutica durante la ltima dcada. Numerosas
evidencias indican que muchos de estos agentes contaminantes al llegar
a cuerpos de agua pueden desencadenar el proceso anteriormente
citado en organismos que all habitan, y son responsables de efectos en
rganos

tejidos

Puntualmente, sobre

asociados

mutagnesis

carcinognesis.

el dao a tejidos de organismos utilizados en este

tipo de estudios, existen especies como Channa punctatus, donde se

identific a las branquias, como el rgano ms sensible a sufrir dao
oxidativo (Ochoa et al., 2008).
Bajo esta prospectiva, en Mxico los estudios de sustancias xenobiticas
que puedan tener un potencial txico para la biota dentro de los
sistemas acucolas

como las presas se han visto representados en

estudios, de los efluentes que provienen de diversas zonas y hacen de

ellos un foco de relevancia para su investigacin y el dao que se pueda
tener hacia este.
Ms all de su valor econmico y la sustentabilidad
juegan un rol muy

para el hombre,

importante dentro de los ecosistemas acuticos

debido al papel que desempean en las cadenas alimentarias y en la

actualidad han cobrado una importancia considerable en el monitoreo
de

su

ambiente

diagnsticos

acutico.

diferenciales

El
y

cual

ha

metodologas

aportado

innumerables

confiables

para

la

cuantificacin del impacto recibido por los organismos (Hinton, 1990;

Domitrovic, 1997).
Debido a esto es que se llevar a cabo la utilizacin de rganos como las
branquias de Cyprinus carpio como bioindicador debido a que factores
como su buen mantenimiento en el laboratorio, su fcil obtencin y su
abundancia en esta zona

presa Madin en 5 sitios utilizando al estrs

oxidativo como biomarcador de dao a este organismo de prueba.

2. MARCO CONCEPTUAL
2.1. GENERALIDADES
2.1.1. CONTAMINACIN
La contaminacin ambiental ha existido ya que es parte inherente a las
actividades del ser humano, sin embargo, en aos recientes se le ha
debido mayor atencin ya que ha aumentado la frecuencia y gravedad
de los incidentes de contaminacin en todo el mundo y cada da hay

ms pruebas de sus efectos adversos sobre el ambiente y la salud

(Albert, 1995).
La contaminacin es un cambio perjudicial en las caractersticas fsicas,
qumicas o biolgicas del aire, la tierra o el agua, que puede afectar
nocivamente la vida humana o la de especies beneficiosas (Odum,
1985).

2.1.1.1. Clasificacin
Las siguientes son las clasificaciones principales:
a POR EL PROCESO QUE LA CAUSA.
a Natural
b Antropognica
Si la contaminacin es el resultado en el cual los seres humanos no
participan y que por lo tanto no est bajo su control se le considera de
origen natural, si por el contrario es independiente de la naturaleza del
contaminante como resultado de las actividades humanas, dicho
contaminante se encuentra en un medio ajeno y por tanto en
concentraciones por arriba de las naturales se le considera una
contaminacin de origen antropognico. Las fuentes antropognicas
de la contaminacin son ms importantes como causas principales de
problemas en la salud pblica ya que su naturaleza y el tipo de
contaminantes que emiten son muy variados (Albert, 1995).

b POR EL TIPO DE CONTAMINANTE

Conforme a esta clasificacin los contaminantes pueden ser del tipo:
fsicos, qumicos o biolgicos.

Biolgica: Ocurre cuando un microorganismo se encuentra en

un sustrato al que no pertenece o bien, en uno al que s, pero
en concentracin que exceden a las naturales en ese sustrato.

Comnmente esta contaminacin se debe a deficiencias en los

servicios de saneamiento bsico como drenajes y sistemas de
tratamiento de aguas,

de bajo nivel de educacin o hbitos

higinicos incorrectos. En

los pases industrializados, la

contaminacin biolgica est bien controlada sin embargo en

muchos pases de Amrica Latina todava es motivo importante
de preocupacin y origina diversos problemas recurrentes de

salud pblica (Mancera, 2002).

Fsica: Se debe a la presencia en un sustrato determinado, de
formas

de

energa

que

sobrepasan

los

niveles

basales

respectivos en dicho sustrato, se presenta en ambientes

cerrados como abiertos. (Mancera, 2002).

Qumica: Se consideran como contaminantes qumicos, las
sustancias orgnicas e inorgnicas, naturales o sintticas que,
durante la fabricacin, manejo, transporte, almacenamiento,
uso y desecho, pueden ingresar al organismo en forma de
lquido, slido, aerosol, gas o vapor, con efectos irritantes,
corrosivos,
teratognicos,

asfixiantes,
narcticos,

cancergenos,
alrgicos

mutagnicos,
sistmicos,

en

condiciones que puedan alterar la salud de las personas

expuestas. La cantidad de sustancia absorbida por el organismo
se denomina dosis y est relacionada con la concentracin del
contaminante y el tiempo de exposicin (Mancera, 2002).
Dentro de esta se encuentran los contaminantes no degradables, esto
es materiales y venenos, como los recipientes de aluminio, las sales de
mercurio o sustancias qumicas de cadena larga, que no se degradan o
lo hacen lentamente de manera natural. Estos no solo se acumulan sino
que adems resultan a menudo magnificados biolgicamente a
medida que circulan los ciclos biogeoqumicos y a lo largo de las
cadenas de alimentos.

Esto significa que algunas sustancias a medida que pasan de un eslabn

a otro de la cadena se concentran en lugar de dispersarse (Atilio de la
Orden E, 2000).

Los contaminantes de degradacin lenta o persistente, aquellas

sustancias que se introducen en el medio ambiente y que necesitan
dcadas o incluso ms tiempo para degradarse como los plsticos; se
presentan los contaminantes degradables o no persistentes,
aquellos que se reducen a niveles aceptables mediante procesos
naturales, fsicos, qumicos y biolgicos (Bermdez M, 2010).
Dentro

de

esta

biodegradables,

categora

encontramos

los

contaminantes

que se metabolizan en compuestos qumicos

de

cadena larga haciendo estas ms sencillos por la accin de organismos

vivos, como las aguas negras domsticas, que se descomponen
rpidamente por medio de procesos naturales o en sistemas de
ingeniera (como las plantas de tratamiento), que refuerza la gran
capacidad de la naturaleza para descomponer y poner nuevamente en
circulacin al agua. Esta categora incluye aquellas sustancias para las
que existen mecanismos naturales de tratamiento de desechos (Atilio de
la Orden E, 2000).

a) POR LA ACTIVIDAD QUE LAS ORIGINA SECLASIFICAN EN:

Industriales
Mineras
Agropecuarias
Artesanales
Domesticas
Hospitalarias (Albert, 1995).

2.1.2 CONTAMINACIN DEL AGUA

El agua es un recurso natural escaso, indispensable para la vida humana

y el sostenimiento del medio ambiente, que, como consecuencia del
rpido desarrollo humano y econmico as como

del uso inadecuado

que se ha hecho de ella como medio de eliminacin, ha sufrido un

alarmante deterioro. La calidad del agua puede definirse como una
aptitud para los usos beneficiosos como bebida del hombre y de los
animales, para soporte de una vida marina sana, para riego de la tierra y
para recreacin. La materia extraa podr ser materia inerte, como los
compuestos

de

plomo

mercurio,

materia

viva,

como

los

microorganismos (Barcel et.al., 2003).

Segn la OMS el agua est contaminada cuando su composicin se haya
alterado de modo que no rene las condiciones necesarias para el uso al
que se le hubiera destinado, en su estado natural (Bermdez M, 2010).
La contaminacin del agua pone en peligro la salud pblica, complica y
encarece el abastecimiento del agua potable a las poblaciones y a la
industria, perjudica la actividad pesquera, la agricultura y anula el valor
esttico de los cursos superficiales (Atilio 2000).
2.1.2.1 Fuentes de contaminacin del agua
Tabla 1. Contaminantes, procesos y fuentes que afectan la calidad del agua
(Escobar, 2002).
Contaminantes y
procesos
Contaminantes
orgnicos
Nutrientes

Metales pesados

Contaminacin

Descripcin
Se descomponen en el agua y
disminuyen el oxgeno disuelto,
induciendo a la eutrofizacin
Incluyen principalmente fosfatos
y nitratos, su incremento en el
agua induce a una eutrofizacin.
Se
originan
de
desechos
humanos y animales, detergentes
y escorrenta de fertilizantes
agrcolas
Se
originan
principalmente
alrededor de centros industriales
y mineros. Tambin pueden
provenir de actividades militares
o a travs de lixiviados
Desechos no tratados, criaderos

Fuentes
Fuentes
domsticas,
humanos.

industriales,
asentamientos

Fuentes
Industriales,
agrcola.

domsticas,
escorrenta

Fuentes
mineras,
humanos,
militares.

industriales,
asentamientos
actividades

microbiolgica

Compuestos txicos
orgnicos

Qumicos traza y
compuestos
farmacuticos

Partculas
suspendidas

Desechos nucleares

Salinizacin

Acidificacin

de animales (E.coli, protistas,

amebas, entre otras.)
Qumicos industriales, dioxinas,
plsticos, pesticidas agrcolas,
hidrocarburos
de
petrleo,
hidrocarburos,
poli
cclicos
generados de la combustin de
petrleo. Compuestos orgnicos
persistentes (POP) como qumicos
disruptores
endocrinos,
cianotoxinas, compuestos rgano
estnnicos
de
pinturas
antinscrustantes
Desechos
hospitalarios,
son
sustancias
peligrosas
no
removidas necesariamente por
los tratamientos convencionales
y han sido reconocidos con
disruptores
endocrinos
y
carcinognicos
Pueden
ser
orgnicas
o
inorgnicas
y
se
originan
principalmente
de
prcticas
agrcolas y del cambio en el uso
de la tierra como deforestacin,
conversin de pendientes en
pastizales originando erosin
Incluye una gama amplia de radio
ncleos
utilizados
en
fines
pacficos

Se produce por la presencia de

sales en los suelos y drenajes
inadecuados. Tambin ocurre por
afloramiento de agua proveniente
de zonas altas, donde se riega
( lavado de sales)
Est relacionado con un pH bajo
del agua dado por la deposicin
sulfrica
producida
por
la
actividad industrial y por las
emisiones urbanas

Fuentes municipales

Fuentes industriales,
asentamientos humanos,
escorrenta agrcola.

Industria qumica y farmacia

Industria, asentamientos
humanos, escorrenta
agrcola y cambios en el uso
de la tierra.

Plantas nucleares, fall out

radioactivo,
ensayos
nucleares,
desechos
hospitalarios,
desechos
industriales.
Presencia de sales en los
suelos, la que aflora por
carecerse
de
un
buen
drenaje, irrigacin con agua
salobre, agua de yacimientos
secundarios de petrleo.
Fuentes
industriales
y
fuentes municipales.

2.1.2.2 Contaminantes emergentes en el agua

Los contaminantes emergentes corresponden en la mayora de los
casos a contaminantes no regulados, que pueden ser candidatos a

regulacin futura, dependiendo de investigaciones sobre sus efectos

potenciales en la salud y los datos de monitoreo con respecto a su
incidencia. La caracterstica de estos grupos de contaminantes es que
no necesitan persistir en el ambiente para causar efectos negativos,
puesto que sus altas tasas de transformacin/remocin se pueden
compensar por su introduccin continua en el ambiente. Para la mayora
de estos contaminantes emergentes, la incidencia, la contribucin de
riesgo y los datos ecotoxicolgicos, no estn disponibles. As que es
difcil predecir qu efectos de salud pueden tener en seres humanos y
organismos acuticos.

Las medidas legislativas que se han ido

adoptando progresivamente para evitar la contaminacin qumica del

agua y los riesgos que se derivan de ella han contribuido a paliar
parcialmente esta situacin. Sin embargo, la creciente demanda de agua
y el descubrimiento continuo de nuevos contaminantes potencialmente
peligrosos dejan clara la necesidad de seguir investigando en todas
aquellas reas que puedan contribuir a proteger la salud humana y la
del medio ambiente, conseguir un uso sostenible del agua y atenuar los
efectos de la sequias y el cambio climtico. La aparicin de elementos
"no deseables" y txicos, y la variacin en las concentraciones de los
constituyentes comunes, tiene su origen en el denominado "ciclo del
agua"(Figura 1). En alguna parte de este ciclo, en el cual confluyen
distintos compartimentos ambientales y actividades humanas, es donde
se produce la contaminacin del agua, o mejor dicho, la alteracin de su
calidad. De acuerdo con este ciclo, las principales vas de entrada de
contaminantes en el medio ambiente acutico son las aguas residuales,
entre las que se incluyen las urbanas, industriales, y las de origen
agrcola o ganadero. La prevalencia de una u otra depende en gran
medida del tipo de contaminacin de que se trate y del nivel de
depuracin o atenuacin natural (si existe) que experimentan (Barcel
et. al., 2007).

Figura. 1. Fuentes de contaminacin (Barcel et al., 2007).

2.1.3 TIPOS DE CONTAMINANTES EMERGENTES PRIORITARIOS

EN EL AGUA
El concepto de contaminante prioritario se introdujo por primera vez en
1977 en

la Clean Water Act de los Estados Unidos de Amrica (BNA,

1986). En este documento se consigui un listado inicial de 129

sustancias qumicas consideradas como contaminantes prioritarias en
agua. Este listado se elabor con base en el conocimiento confirmado de
la existencia de esas sustancias en efluentes, el medio ambiente
acutico y aguas para abastecimiento (Consuelo et al., 2004).
A continuacin se hace referencia a dichos contaminantes de manera
considerable y por el alto impacto que estos han tenido en ecosistemas
acuticos:

2.1.3.1 Compuestos orgnicos

La mayora de compuestos que contienen carbono son descritos como
orgnicos con algunas excepciones como el CO2 y el CO. El carbono tiene
la habilidad de formar una gran diversidad de compuestos orgnicos,

muchos de los cuales son base

para los organismos vivos. El

comportamiento de los compuestos orgnicos depende de su estructura,

tamao, forma molecular y presencia de grupos funcionales que
determinan su metabolismo y toxicidad, por esto es importante conocer
la estructura de los contaminantes para predecir su comportamiento en
el medio ambiente. Los contaminantes que a continuacin se describen
son

en

su

mayora

compuestos

sintetizados

por

el

hombre

(antropognicos), por lo cual han aparecido en el ambiente nicamente

en los dos ltimos siglos:
1.- Bifenilos policlorados (PCBs)
Son compuestos orgnicos obtenidos por sntesis qumica; son una
mezcla comercial de compuestos relacionados (congneres) utilizados
por sus propiedades fsicas. Son muy estables, generalmente lquidos
viscosos

no

reactivos,

de

baja

volatilidad

usados

como

fluidos

hidrulicos, aislantes enfriadores en transformadores, plastificantes y en

la fabricacin de papel copia sin carbn. Existen alrededor de 209
posibles congneres de PCB, y unos 120 de ellos estn presentes en
productos comerciales, tales como Aroclor 1254 ,Aroclor 1260 y Clofen
A60. Los dos ltimos dgitos en los nmeros se refieren al porcentaje de
cloro en la mezcla del PCB. Las mezclas de PCB tienen muy baja
solubilidad en agua y son altamente solubles en aceites y solventes
orgnicos de baja polaridad (liposolubles). La solubilidad en agua del
Aroclor 1254 y el Aroclor 1260 es 21 g/L y 2.7 g/L respectivamente. En
muchos pases el uso de los PCB est prohibido o muy restringido; estos
compuestos pueden llegar al medio acutico o ser transportados,
asociados el material particulado del aire. (Consuelo et al., 2004).
2.- Hidrocarburos Aromticos Policclicos (HAPs)
En el proceso de combustin de productos derivados del petrleo y el
carbn se forman como principales productos el dixido de carbono y el

agua y como subproductos de la pirlisis se forman los HAP, por esta

razn se pueden encontrar en suelos, sedimentos, agua dulce, agua
marina y la atmsfera. Los HAP han sido detectados en la atmsfera en
zonas urbanas y suburbanas, aunque las mayores concentraciones se
presentan

en

reas

urbanas

densamente

pobladas

en

zonas

industriales. La contribucin de HAP provenientes de fuentes naturales

es muy limitada, restringida prcticamente a la quema espontnea de
bosques

emisiones

volcnicas.

Las

fuentes

antropognicas

representan el principal proceso de emisin de HAP (Consuelo et al.,

2004).

2.1.3.2 AGRCOLAS
2.1.3.2.1 Plaguicidas
Los plaguicidas son sustancias o mezclas de sustancias destinadas a
prevenir, destruir, repeler o mitigar las plagas. Debido a la regulacin de
la cual han sido objeto, se han estudiado durante dcadas y, en
consecuencia, se tiene un razonable conocimiento sobre su presencia y
destino en el medio acutico. En los ltimos aos la preocupacin en
torno a estos productos se centra en los metabolitos, productos de
degradacin, que han sido en su mayor parte ignorados hasta la fecha y
que se ha visto que pueden ser ms txicos que los compuestos a partir
de los cuales se generan (Gerrdink RB et.al., 2002; Sinclair CJ et.al.,
2003; Kiolpin D et.al., 1998). En 1978, la Organizacin Mundial de la
Salud (OMS) estableci una clasificacin de los plaguicidas (tabla 2),
basada en su peligrosidad o grado de toxicidad aguda, definida esta
como la capacidad del plaguicida de producir un dao agudo a la salud a
travs de una o mltiples exposiciones, en un perodo de tiempo
relativamente corto:
Tabla 2. Clasificacin de los plaguicidas segn su toxicidad (OMS, 1993)
Clase
Clase IA

Toxicidad
Extremadamente

Ejemplos
Paratin, deldrin

Clase IB
Clase II

peligrosos
Altamente Peligrosos
Moderadamente

Eldrn, diclorvos
DDT, clordano

Clase III

peligrosos
Ligeramente peligrosos

Malatin

La contaminacin

por plaguicidas est dada fundamentalmente por

aplicaciones directas en los cultivos agrcolas, lavado inadecuado de

tanques contenedores, filtraciones en los depsitos de almacenamiento
y residuos descargados y dispuestos en el suelo, derrames accidentales,
el uso inadecuado de los mismos por parte de la poblacin, que
frecuentemente son empleados para contener agua y alimentos en los
hogares ante el desconocimiento de los efectos adversos que provocan
en la salud. La unin de estos factores provoca su distribucin en la
naturaleza. Los restos de estos plaguicidas se dispersan en el ambiente
y se convierten en contaminantes para los sistemas bitico (animales y
plantas principalmente) y abitico (suelo, aire y agua) amenazando su
estabilidad y representando un peligro de salud pblica (Fig.2). Factores
como sus propiedades fsicas y qumicas, el clima, las condiciones
geomorfolgicas de los suelos y las condiciones hidrogeolgicas y
meteorolgicas de las zonas, definen la ruta que siguen los mismos en el
ambiente (Del Puerto Rodrguez MA et al., 2014).

Figura 2.

Distribucin
de los plaguicidas en sistemas biticos y abiticos (Cremlyn R, 1990.)

Los plaguicidas constituyen impurezas que pueden llegar al hombre

directamente a travs del agua potable impartiendo olores y sabores

desagradables, an a bajas concentraciones y en forma indirecta a

travs de la cadena biolgica de los alimentos. Estas sustancias
qumicas pueden ser resistentes a la degradacin, y en consecuencia,
persistir por largos perodos de tiempo en las aguas subterrneas y
superficiales se incorporan a las aguas mediante diferentes mecanismos
de contaminacin, como son:

Por aplicacin directa a los cursos de agua, para el control de

plantas acuticas, insectos o peces indeseables.

Por infiltracin a los mantos de agua subterrneos o escurrimiento

superficial a ros, arroyos, lagos y embalses desde las zonas
agrcolas vecinas.

Por aplicacin area sobre el terreno.

Por descarga de aguas residuales de industrias productoras de

plaguicidas.

Por descargas provenientes del lavado de equipos empleados en la

mezcla y aplicacin de dichos productos, como puede ocurrir en
los aeropuertos de fumigacin area al regreso de los vuelos, en el
proceso de descontaminacin de los aviones y sus equipos de
aplicacin de plaguicidas (Del Puerto Rodrguez MA et al., 2014).

Son diversos los tipos de plaguicidas que en perodos prolongados,

desde mltiples fuentes y a dosis bajas, penetran al organismo
utilizando distintas vas. Las principales fuentes de exposicin en la
poblacin son los alimentos de origen vegetal (frutas, verduras,
cereales, leguminosas) o animal (carne bovina, porcina y sus derivados,
pescado, productos lcteos, huevo, etc.) (Lpez CL, 1993) y en menor
grado el agua, el aire, la tierra, la fauna y la flora contaminados.
Tambin lo son los productos industrializados de uso cotidiano que
contienen o son plaguicidas en s mismos y que afectan de manera
directa o indirecta al ser humano. Se afirma que no hay segmento
alguno de la poblacin general exento de la exposicin a estos

compuestos y a sus potenciales efectos nocivos sobre la salud. Es as,

como algunos de los plaguicidas son relevantes por el dao que causan
a la salud (tabla 3) por su gran demanda de uso y por considerarse
como contaminantes emergentes en aguas residuales (Al-Saleh

IA,

1994; Hill RH, 1995).

Tabla 3. Clasificacin de los plaguicidas, segn la familia qumica (Al-Saleh
IA, 1994; Hill RH, 1995).
Familia Qumica
Organoclorados
Organifosforados
Carbamatos
Tiocarbamatos
Piretroides
Derivados bipiridilos
Derivados de cido fenoxiactico
Derivados cloronitrofenlicos
Derivados de triazinas
Compuestos orgnicos del estao
Compuestos inorgnicos

Ejemplos
DDT, aldrn, endosulfn, endrn
Bromophos, diclorvos, malation
Carbaryl, methomyl, propoxur
Ditiocarbamato, mencozeb, maneb
Cypermetrin, fenvalerato, permetrn
Clormequat, diquat, paraquat
Dicloroprop, piclram, silvex
DNOC, dinoterb, dinocap
Atrazine, ametrym, desmetryn, simazine
Cyhexatin, dowco, plictrn
Arsnico pentxico, obpa, fosfito de
magnesio, cloruro de mercurio, selenio,

Compuestos de origen botnico

talio y fsforo blanco

Rotenona, nicotina, aceite de canola

Dentro de los principales se encuentran dos grupos predominantes que

impactan de manera considerable cuerpos de agua como son:

Plaguicidas organoclorados

Este es un grupo relativamente grande de insecticidas, con amplia

diversidad de estructuras, propiedades

y usos. Los tres principales

representados son el DDT (Dicloro Difenil Tricloroetano) y compuestos

relacionados,

ciclodienos

clorados

como

el

aldrin,

dieldrin

hexanoclorohexanos como el HCH (hexaclorociclohexano) y lindano. Los

pesticidas organoclorados son slidos estables, de presin de vapor
limitada, muy baja solubilidad en agua y alta lipoficidad. La mayora de
ellos son altamente persistentes en su forma original as como sus
metabolitos (Consuelo et al., 2004).

Plaguicidas organofosforados

Estos compuestos son steres orgnicos de cidos fosforosos. Muchos

insecticidas organofosforados

son lquidos de carcter lipoflico y de

baja volatilidad; otros son slidos. En general son menos estables que
los insecticidas organoclorados y se rompen ms fcilmente por agentes
qumicos o biolgicos, por lo que tienen un tiempo de vida en el
ambiente relativamente corto y la peligrosidad ambiental que ellos
representan est asociada con toxicidad aguda (Consuelo et al., 2004).
2.1.3.3 PRODUCTOS FARMACUTICOS
La presencia de productos qumicos farmacuticos en el medio acutico
ha sido reconocida como una preocupacin (Richardson ML et.al., 1985).
Las vas principales de productos farmacuticos en el medio ambiente
son a travs de la excrecin humana, la eliminacin de los productos no
utilizados (Poynton HC et al., 2009).
Una amplia gama de productos farmacuticos se ha detectado en aguas
superficiales y subterrneas, asociada con la eliminacin de las aguas
residuales (Bernes K, 2009; Prez S et al., 2007).
Estos residuos farmacuticos son transportados al ciclo del agua por
diferentes rutas: las plantas de tratamiento de aguas residuales actan
como una puerta de entrada de estos productos a los cuerpos de agua,
porque muchos de estos compuestos no son realmente retenidos en sus
procesos y, adems, porque muchos residuos farmacuticos veterinarios
son descargados directamente al ecosistema. Lo que ha despertado una
mayor preocupacin con respecto a estos frmacos ha sido el hallazgo
de

algunos

de

ellos

(como

el

ibuprofeno,

el

diclofenaco,

la

carbamazepina o el cido clofbrico) en aguas potables (Delgado S,

2011).
Segn las propiedades fsico-qumicas de los frmacos, sus metabolitos,
productos de degradacin, y las caractersticas de los suelos, estas
sustancias

pueden

llegar

alcanzar

las

aguas

subterrneas

contaminar los acuferos o bien quedar retenidas en el suelo y

acumularse pudiendo afectar al ecosistema y a los humanos a travs de

la cadena trfica ( Barcel et.al., 2007).
Una de las vas potenciales por la cual los frmacos ingresan al medio
ambiente ocurre despus de la fabricacin y uso de stos, por humanos
y animales. El empleo de frmacos resulta en el metabolismo de los
medicamentos y excrecin del mismo como metabolitos por orina y
heces.
Los frmacos de uso veterinario generalmente se excretan directamente
en el suelo. Los residuos humanos son tratados en las plantas de
tratamiento de aguas residuales (PTAR), siendo durante el tratamiento
que el frmaco pueda ser degradado va hidrlisis, oxidacin o
biodegradacin o pueden adsorberse a slidos durante el tratamiento de
las aguas residuales y ser aislados como slidos tratados. Las
concentraciones de los farmacuticos en efluentes y slidos tratados
dependen de la eficiencia en los procesos de remocin de las PTAR
(Williams, 2003).
Estos abarcan a un grupo diverso de compuestos como: farmacuticos,
drogas de abuso, productos de cuidado personal (PCP), esteroides y
hormonas, surfactantes, aditivos industriales, aditivos de gasolina y sus
productos de transformacin, entre otros (tabla 4) (Farr et al., 2008).
Se estima que un total de 170 compuestos farmacuticos se usan en
cantidades mayores a 1 tonelada por ao. Con el incremento de la
urbanizacin y las actividades comerciales asociadas a sta y el
incremento en la conciencia del cuidado personal y de la salud, se ha
convertido el uso de PCP como parte importante del estilo de vida de la
sociedad, lo que impone un riesgo elevado y es causa de contaminacin
de los cuerpos de agua (Ellis, 2006).

Tabla 4. Clases de contaminantes emergentes de tipo farmacuticos (Farr

et al., 2008).

Compuesto

Ejemplos

Drogas de abuso

Anfetaminas,
cocana,
tetrahidrocanabinol
Retardantes de flama
C10-C13
cloroalcanos,
hexabromociclodecano,
tris
(2cloroetil) fosfato.
Aditivos de gasolina
Dialquil ter, metil-t-butil ter
Agentes
y
aditivos Agentes quelantes (EDTA), sulfonatos
industriales
aromticos.
PCP
(Fragancias, Benzofenona,
N,N-dietiltoluamida,
repelentes de insectos, metilbencillindano, triclosan.
jabones, antimicrobianos,
agentes
protectores de
sol)
Frmacos (Analgsicos y Paracetamol,
cido
acetilsaliclico,
antiinflamatorios,
diclofenaco,
diazepam,
antimicrobianos de uso carbamazepina, iopamidol, iopromida,
humano
y
veterinario, bezafibrato.
antiepilpticos,
reguladores
de
lpidos
sanguneos,
antitumorales,
psiquitricos,
cardiovasculares, agentes
de contraste de rayos X)
Esteroides y hormonas
Dietilestilbestrol,
estradiol,
estriol,
estrona
Surfactantes
y
sus Alquilfenol etoxilatos, alquilfenoles
metabolitos
(nonilfenol y octilfenol), alquilfenol
carboxilatos
Nuevas clases
Nanomateriales,
1,4-dioxano,
productos
para
desinfeccin
de
piscinas.

Los efluentes y aguas superficiales son considerados compartimentos

primarios de concentracin debido a la solubilidad en agua de los
farmacuticos. Las aguas superficiales pueden tambin utilizarse como
fuente de agua potable, aunque generalmente existe un tratamiento
previo para remover trazas de compuestos orgnicos. Con un adecuado
tratamiento tecnolgico (por ejemplo: ozonizacin, carbn activado), la

eficiencia en la eliminacin de farmacuticos del agua potable y aguas

residuales sera significativa. El medio ambiente marino as como
estuarios pueden ser considerados con una exposicin por largos
perodos de farmacuticos persistentes (Farr et al., 2008; Williams,
2003).

2.1.3.4 SURFACTANTES
Entre los residuos ms comunes, derivados del uso domstico y la
industria, se encuentran los detergentes. Segn la Norma internacional
ISO 862-1984, Un detergente es un producto especialmente formulado
para la limpieza mediante un proceso que desarrolle fenmenos de
detergencia, entendido por detergencia al proceso por el cual las
suciedades son separadas del sustrato en que estaban retenidas y
puestas en estado de disolucin o dispersin. Un detergente est
formado por uno o varios surfactantes, que constituyen materia activa,
por un conjunto de componentes complementarios (coadyuvantes,
aditivos y auxiliares de presentacin). La palabra surfactante deriva del
trmino ingls Surface-active agent, debido a su capacidad para
concentrarse en las regiones de interfase, como por ejemplo: aire-agua,
aceite-agua y slido-lquido (Mndez Daz, 2008).
Poseen en su estructura qumica dos regiones claramente diferenciadas,
lo que les confiere el carcter dual caracterstico de todas las sustancias
anffilas (Fig. 3). Una es la porcin hidrfoba (o apolar), que presenta
afinidad

por

disolventes

orgnicos

apolares

corresponde

frecuentemente a una cadena hidrocarbonada, de tipo alquilo o alquil

benceno, de longitud variable. La otra es la porcin hidrfila (o
polar), caracterizada por mostrar atraccin hacia disolventes polares,
sobre todo agua y puede estar formada por tomos de oxgeno, azufre,
fosfato o nitrgeno, incluidos en grupos funcionales como alcoholes,

tioles, teres, steres, cidos, sulfatos, sulfonatos, fosfatos, amina,

amidas, etc. En disolventes polares como el agua, las molculas de
surfactante se distribuyen de manera que su concentracin en la
interfase lquido-gas y lquido-slido es mayor que en el interior de la
solucin, de manera que sus grupos polares quedan orientados hacia la
fase polar y los no polares o hidrfobos alejados de esta (Snchez Molina
L, 2006).

Figura 3. Esquema de un surfactante (Snchez Molina L, 2006).

Existen cuatro grandes grupos de agentes surfactantes o tensioactivos:

a) Tensioactivo aninico. Compuesto que posee uno o varios grupos
funcionales que se ionizan en disolucin acuosa originando iones
orgnicos con carga negativa.
b) Tensioactivo catinico. Compuesto que posee uno o varios grupos
funcionales que se ionizan en disolucin acuosa originando iones
orgnicos cargados positivamente.
c) Tensioactivo no inico. Compuesto que en disolucin acuosa no
origina iones. Su solubilidad en agua se debe a la presencia en su
molcula de grupos funcionales con una elevada afinidad para el
agua.
d) Tensioactivo anfotrico. Posee en su estructura molecular uno o
ms grupos funcionales que pueden ionizarse en disolucin
acuosa, confiriendo al compuesto carcter tensioactivo aninico o
catinico, segn
2006).

las condiciones del medio

(Snchez Molina L,

Los surfactantes entran a los cuerpos de agua residuales industriales y

domsticas, pueden existir en aguas superficiales en estados disueltos o
absorbidos, as como en la pelcula superficial de cuerpos de agua, por
su habilidad pronunciada de concentrar la interfase aire-agua o aguasedimento. Aunque los surfactantes no son altamente txicos pueden
afectar a la biota acutica. Los detergentes pueden impartir olor al agua
a concentraciones de 0.4 a 4 mg L -1 , y la clorinacin puede aumentar su
efecto, ya que los surfactantes son responsables de la formacin de
espumas en aguas superficiales. Otros contaminantes, incluyendo
patgenos, pueden concentrarse en la espuma la cual al formarse en
cuerpos de agua hace la aireacin difcil, disminuye los niveles de O 2,
reduce los procesos de autopurificacin y afecta de manera importante
(Martnez Martnez J, 1999).
El poder contaminante de los detergentes se manifiesta en los vegetales
acuticos principalmente favoreciendo el crecimiento de algas, la
cantidad de estas en una cierta extensin de agua, como un lago, puede
soportar depende de los elementos nutritivos inorgnicos que puede
proporcionar y la acumulacin de estos elementos depende de la
cantidad de sales que arrastren las diferentes corrientes de agua al lago.
Las algas crecen rpidamente cuando la cantidad de elementos
nutritivos es abundante y pueden llegar a cubrir la superficie del agua
con gruesas capas, y a medida que algunas algas mueren se convierten
en alimento de las bacterias. Como las bacterias consumen oxgeno para
descomponer a las algas, provocan que la disminucin de oxgeno llegue
a un nivel que es incapaz de soportar otras formas de vida, que es
indispensable para que no desaparezca el ecosistema, inhibiendo el
proceso de la fotosntesis originando la muerte de la flora y la fauna
acuticas. A los peces les

produce lesiones en las branquias,

dificultndoles la respiracin y provocndoles la muerte (Annimo,

2011).

2.1.3.5 METALES PESADOS

Los efectos de los metales que se encuentran en las aguas naturales,
potables y residuales sobre la salud humana, pueden ir desde el
intervalo de benficos, causantes de problemas, hasta txicos, esto es
dependiendo de su concentracin, por lo que su cuantificacin en
cuerpos de agua es importante. Algunos metales son esenciales, otros
pueden afectar adversamente a los consumidores de agua, sistemas de
tratamiento de aguas residuales y cuerpos receptores de agua (NMX-AA051,2001).
La contaminacin en aguas en especial por metales pesados, constituye
una de las ms peligrosas para los ecosistemas acuticos y las especies
presentes en ellos. Los peces tienen la capacidad de almacenar en su
organismo

una

concentracin

mayor

de

estos

compuestos

en

comparacin con la presente en el medio, por lo que son un indicador

importante de la contaminacin, pero tambin esto implica que su
consumo se puede convertir en un problema de salud para las
poblaciones que se alimentan de este recurso; los metales pesados
agrupan sustancias como cadmio y mercurio, principales contaminantes
dentro de este grupo de sustancias, adems de otras como cromo,
cobalto, cobre, molibdeno, nquel, plomo, estao, titanio, vanadio, zinc o
plata. stos constituyen un riesgo serio para el medio ambiente, ya que
son sustancias con una gran estabilidad qumica ante los procesos de
biodegradacin,

por

lo

que

los

seres

vivos

son

incapaces

de

metabolizarlos, generndose una contaminacin por bioacumulacin y

un efecto multiplicador en la concentracin del contaminante en la
cadena trfica. Alcanzan niveles altos de toxicidad y se absorben muy
eficientemente a travs de las membranas biolgicas por su elevada
afinidad qumica por el grupo sulfidrilo de las protenas. Adicionalmente,
las concentraciones en el medio suelen ser ms bajas que las
encontradas en los sedimentos, o en las especies de fauna y flora
presentes en los cuerpos de agua, por esto en ocasiones un nivel bajo

de contaminacin en la columna de agua no necesariamente indica

contaminacin baja. Los peces por representar varios niveles de la
cadena

alimenticia

acutica,

son

excelentes

indicadores

de

contaminacin por metales pesados, ya que pueden bioacumular y

biomagnificar a travs de ella altas concentraciones de estos elementos
(Mancera Rodrguez NJ et al., 2006).
La OMS, estableci que la mxima concentracin de iones de metales
pesados en el agua debe estar en un rango de 0.01-1 ppm, sin embargo,
en la actualidad se reportan concentraciones de iones de metales
pesados hasta de 450 ppm en los efluentes (Tejada Tovar C et al., 2015).
La accin txica de un metal puede generar:
-

Inhibicin de la respiracin celular

Interferir la actividad de los sistemas enzimticos
Irritacin o corrosin de epitelios
Desarrollar procesos cancergenos
Desequilibrio electroltico de los fluidos intra y extracelulares
(Consuelo et al., 2004).

2.1.4 BIOENSAYOS DE TOXICIDAD

La toxicidad es la capacidad de una sustancia de ejercer un efecto
nocivo sobre los organismos o

la biocenosis y el efecto generado

depender de la duracin y la frecuencia de exposicin al txico. Las

pruebas de toxicidad pueden ser de tipo agudo, o crnico, aunque en
general se definen de acuerdo con:
-

Duracin: corto, mediano o largo plazo

Renovacin del txico: esttico, renovacin peridica o de flujo

continuo
Objetivo de la prueba: control de calidad de efluentes, evaluacin
de

compuestos

especficos,

(Consuelo et al., 2004).

toxicidad

relativa,

sensibilidad

Los bioensayos son herramientas ampliamente utilizadas en el campo

de la Ecotoxicologa, la cual se ocupa del estudio del efecto y destino de
los agentes txicos de origen antropognico a los ecosistemas acucolas
y terrestres. Estas pruebas de toxicidad permiten realizar mediciones
experimentales del efecto de agentes qumicos o fsicos en sistemas
biolgicos,

estableciendo

relaciones

concentracin-respuesta

bajo

condiciones controladas en terreno o en laboratorio (Silva J et al., 2003).

Se clasifican describiendo de la siguiente manera:
a)

Ensayos de toxicidad aguda: Los ensayos de toxicidad aguda son

pruebas donde la exposicin se realiza en un periodo corto. Por lo
general, el periodo corto es de 24 a 48 horas, no obstante, puede
variar dependiendo de la especie evaluada, puesto que para un
vertebrado 72 horas siguen siendo un tiempo mucho menor que el
de su ciclo de vida normal, a diferencia de organismos como
bacterias, protistas, quienes pueden completar su ciclo de vida o

b)

reproducirse en menos de 24 horas (Camelo Martnez E, 2011)

Ensayos de toxicidad crnica: Los ensayos de toxicidad crnica son
pruebas que se realizan durante un periodo largo, por un tiempo en
el que la exposicin es considerada continua o repetida. Este tipo de
bioensayo se lleva a cabo especialmente para determinar la dosis
mxima que no presenta efectos txicos fuertes a exposiciones
constantes

para

reconocer

los

mecanismos

de

toxicidad

acumulativos, que complementan o contrastan, con los observados

para ensayos de toxicidad aguda. Estos bioensayos por lo general
comprenden

los

periodos

de

gestacin

para

hembras

de

espermatognesis para machos, as como tiempos pertinentes para

evaluar el crecimiento individual o el aumento en biomasa de las
c)

poblaciones de organismos (Camelo Martnez E, 2011).

Ensayos multi-especies

Como su nombre lo indica son pruebas que incluyen ms de una

especie, realizadas con el fin de evaluar las alteraciones producidas por

interacciones entre organismos y por la influencia del medio ambiente.

Acorde a la cantidad de variables incluidas dentro del ensayo estos se
pueden clasificar, tal como los describe Landis & Yu , en:
-

Microcosmos:

Incluye

un

nmero

reducido

de

especies,

usualmente mide interacciones predador-presa o de competencia

-

y se instala en condiciones de laboratorio.

Mesocosmos: Evala una mayor cantidad de especies y por ende
interacciones ms complejas, como cadenas trficas, por lo
general se instala en condiciones externas, es decir incluye

d)

variaciones climticas.
Estudios en campo: Pueden ser experimentales u observacionales,
incluye todos los niveles de organizacin biolgica y la totalidad de
variables temporales, climticas y espaciales que conforman los
ecosistemas, caractersticas que hacen que este nivel de estudio sea
difcil, costoso y controversial si se hace a nivel experimental, pero
que al mismo tiempo lo constituye en la evaluacin ms exacta de
los efectos generados por un agente en el ambiente (Camelo
Martnez E, 2011)

Existen criterios por medio de los cuales se podr realizar un bioensayo

para la evaluacin del dao por parte de las sustancias qumicas (Tabla
5) o el medio en el cual se encuentre para anlisis (Ramrez Romero et
al., 2008).

Tabla 5. Criterios para la seleccin de pruebas biolgicas en laboratorio para

la evaluacin toxicolgica de sustancias qumicas (Ramrez Romero et al.,
2008)

Factibilidad

Bajo costo
Materiales y reactivos disponibles en la localidad
Tiempo mximo de desarrollo, 5 das

De los
organismos

De
prueba

la

Procedimiento de prueba simple

Facilidad en evaluacin de la respuesta a medir
Fcil Obtencin
Fcil mantenimiento
Representacin ecolgica: De un grupo funcional
(productores primarios, herbvoros, carnvoros,
descomponedores), De un grupo taxonmico
(bacterias, peces, insectos, etc.), De una ruta de
exposicin
(drmica,
ingestin,
branquial,
combinadas etc.)
Con
informacin
sobre
su
sensibilidad
a
compuestos txicos (base de datos): Estadio ms
sensible, respuesta relevante a los compuestos
txicos, sensibilidad a bajas concentraciones,
sensibilidad a una amplia variedad de compuestos
txicos, sensibilidad no redundante con otras
especias, con informacin sobre su biologa.
Condiciones
presentes
en
los
ecosistemas
mexicanos (temperatura, salinidad, dureza etc.)
Concentraciones qumicas reales ( que se
presenten en el medio ambiente)
Tcnicamente seguros y no contaminantes
Posibilidad de ser estandarizada
Buena exactitud y precisin analticas
Aplicacin universal ( usos, ventajas y limitaciones)
Significado ecolgico de los resultados
Buenas prcticas de laboratorio: Validacin de la
salud de los organismos de prueba, requerimientos
mnimos de sobrevivencia/ reproduccin en
pruebas y testigos, edades o etapas de vida
requeridos al inicio de la prueba, comprobacin de
concentraciones nominales.

2.1.5 BIOINDICADORES

El uso de bioindicadores se coloca como una nueva herramienta para

conocer la calidad del agua, esto no quiere decir que desplace el mtodo
tradicional de los anlisis fisicoqumicos. Su uso simplifica en gran
medida las actividades de campo y laboratorio, ya que su aplicacin slo
requiere de la identificacin y cuantificacin de los organismos
basndose en ndices de diversidad ajustados a intervalos que califican
la calidad del agua. Un organismo se considera bioindicador siempre y
cuando se conozca el grado de tolerancia del mismo, no todos pueden
darnos informacin debido a sus hbitos alimentarios o a su ciclo de
vida. Por citar algunos organismos que pueden ser usados como
bioindicadores estn los moluscos, insectos, anlidos hirudneos, peces y
el plancton, tambin es importante considerar la abundancia con que se
les encuentra y la poca del ao; un indicador biolgico acutico se ha
considerado como aqul cuya presencia y abundancia sealan algn
proceso o estado del sistema en el cual habita, en especial si tales
fenmenos constituyen un problema de manejo del recurso hdrico. La
accin de un contaminante puede ser indirecta (cambios en el medio) o
directa (ingestin o impregnacin), (Mor Jaramillo R, 2011).
Como ejemplo, en la Fig. 4 se muestran los efectos sobre la fauna
acutica cuando es sometida a la descarga de una sustancia txica; a
medida que transcurre el tiempo se pasa de respuestas individuales u
organsmicas, (bioqumicas y fisiolgicas) a respuestas poblacionales,
comunitarias y

a nivel de ecosistema. Se puede que un indicador

biolgico ser aquel que logre soportar los efectos ocasionados por el
elemento perturbante, es decir que muestre algn tipo de respuesta
compensatoria o tolerante. Estas respuestas significan para la especie
mantener el funcionamiento normal a expensas de un gran gasto
metablico (Pinilla GA, 2000).

DESCARGA
Escala de tiempo

Reduccin
Superficie
Escape

(Anestsicos)

Cambio en la calidad del Agua

Precepcin por el Organismo

Inmediatas

Sensores
Sistema Neutral y Endocrino

Membrana Celular

Respuestas Bioqumicas:
Minutos
a das

Horas a
Semanas

Actividad enzimtica: nuevos ribosomas;

Alteracin en produccin de ADN, RNA,
Protenas y lpidos; activacin o supresin de
Vas metablicas asociadas a produccin de
Energa y biosntesis; alteraciones en las
Propiedades de las membranas; en la
Composicin inica de los fluidos y tejidos.
Respuestas Fisiolgicas:
Cambios en consumo de O 2, balance inico y
Osmtico, alimentacin, digestin, excrecin y asimilacin.

Das a
Meses

Consecuencias crnicas
Comportamiento fisiolgico alterado
Consecuencias crnicas
Crecimiento

Reproduccin
Biomasa
Reclutamiento
Impacto poblacional
Aos a
dcadas

Estructura y dinmica. Comunidad

Estructura y funcionamiento. Ecosistema

Figura 4. Secuencia de posibles efectos biolgicos en la fauna acutica
sometida a la descarga de un contaminante (Pinilla GA, 2000).

2.1.5.1 Caractersticas para considerar a un organismo como

bioindicador.
Cuando se habla de caractersticas ideales de un bioindicador se
observa que slo unos pocos podran llenar estrictamente estos
requerimientos por lo que se toman los criterios siguientes:
-

Son abundantes, de amplia distribucin y fciles de recolectar

Relativamente fciles de identificar, si se comparan con otros

grupos menores
Son sedentarios en su mayora y reflejan las condiciones locales
Poseen ciclos de vida largos
Son apreciables a simple vista
Se pueden mantener bajo condiciones de laboratorio
Varan poco genticamente
Responden rpidamente a los tensores ambientales (Roldn Prez
G, 1999)

A su vez, las especies tienen requerimientos fsicos, qumicos, de

estructura del hbitat y de relaciones con otras especies. A cada especie
o poblacin le corresponden determinados lmites de estas condiciones
ambientales entre las cuales los organismos pueden sobrevivir (lmites
mximos), crecer (intermedios) y reproducirse (lmites ms estrechos).
En general, cuando ms estoica sea la especie en cuestin, es decir,
cuando ms estrechos sean sus lmites de tolerancia, mayor ser su
utilidad como indicador ecolgico (Who, 2001).
2.1.5.2 Ventajas y desventajas de los organismos utilizados
como Bioindicadores
Prat, 1998 compara las ventajas y desventajas (Tabla 6)

de las

bacterias, protozoos, las algas, los macroinvertebrados, las macrofitas

( en trminos de biomasa) y los peces (Prat N, 1998).

Tabla 6. Ventajas y desventajas del uso de las diversas especies

de

bioindicadores (Prat N, 1998).

Organismo
Bacterias

Ventajas
Crecimiento rpido
Fcil cultivo

Desventajas
Incertidumbre
viabilidad
Tiempos
de
vida
cortos
Protozoos
Fcil muestreo
Problemas
de
Sistemas saprobios
taxonoma
Problemas deriva
Algas
Buena Eutrofia
No
indicadas
en
metales y pesticidas
Problemas
de
taxonoma
Macroinvertebrados Tienen vida larga
Muestreo cuantitativo
Indicadores sencillos
Grupos heterogneos
Macrfitas
Visibles
Cambios naturales
(biomasa)
Muestreo fcil
Poca variedad
Peces
Mucha informacin
Movilidad
Arriba de la red trfica Difcil muestreo
Las pruebas ecotoxicolgicas con peces son tradicionalmente empleadas
en muchas partes del mundo, ya que stos juegan un papel importante
dentro de la cadena alimenticia. Los peces consumen y controlan las
poblaciones de insectos, microcrustceos y algas, y permiten de esta
forma la recirculacin, remocin y resuspensin del material orgnico
dentro

del

ecosistema. Debido

su

gran

importancia,

se han

desarrollado una gran variedad de bioensayos que han empleado

especies de peces, que son sensibles a la presencia de determinados
agentes txicos. Los peces son organismos acuticos extremadamente
sensibles

la

perturbacin

ambiental,

siendo

afectados

crecimiento y en sus funciones reproductivas (Pinilla GA, 2000).

en

su

2.1.6. Cyprinus carpio

La carpa (Cyprinus carpio) es un pez (Fig.5) comnmente empleado en
cultivos comerciales y se ha propuesto como un organismo de prueba en
ensayos

toxicolgicos

por

su

importancia

econmica

amplia

distribucin geogrfica. Originaria de China y el este asitico. Especie de

inters comercial elevado. La capicultura, es muy importante, se halla
en la actualidad muy difundida;

es una especie ubicua e invasora, la

cual ha sido introducida en todos los continentes excepto en la

Antrtida. Habita cuerpos de agua con fondos arenosos o arcillosos. Es
muy resistente, por lo que compite por el alimento y el espacio con las
especies

nativas.

Tolera

condiciones

de

salinidad.

Los

adultos

generalmente prefieren aguas estancadas mientras que los juveniles

preferentemente en corrientes de agua. Toleran muy bien las aguas de
baja temperatura, disminuyendo su metabolismo y aletargndose en las
capas inferiores del estanque cuando las capas superiores estn
congeladas. Cuando las temperaturas son altas, debido a la escasa
concentracin de oxgeno disuelto en el agua, pueden volverse
agresivos, ya que la falta de oxgeno afecta el sistema nervioso del
animal (Garca Medina S,2009).
2.1.6.1 Clasificacin taxonmica
Familia: Cyprinidae
Orden: Cypryniformes
Clase: Actinoptergios (peces de aletas radiadas)
Gnero y especie: Cyprinus carpio
Nombre comn: Carpa comn (Garca Medina S,2009).

Figura. 5 Cyprinus

carpio (Garca Medina

S,2009).

2.1.6.2. Caractersticas generales

Puede

alcanzar una longitud hasta de 120cm, un peso mximo

publicado de 37.3Kg y tener una edad mxima comunicada de 20 aos.

El cuerpo robusto poco comprimido y ligeramente curvado en el vientre.
Cubierto de escamas gruesas aleta dorsal y anal con espina aserrada en
la parte anterior (caracterstica de sta especie), generalmente barbas
presentes, dientes farngeos, prospera en ros turbios grandes, resistente
y tolerante a una amplia variedad de condiciones. Pez omnvoro, con
predominancia bentfago, se alimenta de insectos acuticos crustceos,
anlidos, moluscos, semillas de mala hierba y rbol, del arroz salvaje, de
plantas

acuticas

algas;

principalmente

sedimentos. En estado salvaje es de color

por

la

cavadura

de

pardo grisceo. Tiene una

aleta con tres espinas dorsales y 4 barbillas (Aguilar Martnez J,2007).

2.1.6.3 Reproduccin
La poca de desove o freza empieza en marzo y acaba a principios de
julio poniendo huevos pegajosos en la vegetacin baja.

Ovparos, de

fcil reproduccin producen. Entre los 3 a 6 aos generan las puestas

ms numerosas, y a medida que pasan los aos, las puestas sern cada
vez menores. Los alevines recin nacidos permanecen ocultos entre las
races de las plantas, alimentndose de algas, microorganismos e
insectos. Una hembra de 47cm de longitud produce alrededor de
300,000 huevos (Aguilar Martnez J, 2007).

2.1.7 BIOMARCADORES

Los biomarcadores son parmetros cuya alteracin indica la exposicin

de los bioindicadores a contaminantes, sus efectos biolgicos o los
riesgos para los ecosistemas. Los biomarcadores funcionan a distintos
niveles:

molecular,

celular,

histolgico,

organismo,

poblacin,

de

comunidad o ecosistema (Tabla 7). Un biomarcador debe ser especfico

para un compuesto o tipo de compuestos, detectable en pequeas
cantidades de muestras, medible por tcnica barata, sencilla y
reproducible, asociado a una exposicin anterior, predictivo para un
estado de alteracin reversible. Por su significado los biomarcadores se
clasifican en tres tipos:
i)

De exposicin que indican la presencia de contaminantes,

metabolitos derivados de su biotransformacin o productos de su
reaccin con biomolculas; ii) de efecto que muestran cambios
bioqumicos tras la exposicin, y iii) de prediccin de riesgos
que predicen la posibilidad de una alteracin grave a nivel de
poblacin, comunidad o ecosistema. La estacionalidad de los
procesos fisiolgicos (reproduccin, desarrollo, etc.) y factores
ambientales

(nutrientes,

temperatura,

etc.)

condiciona

sus

respuestas (Vioque Fernndez A,2008).

Temprana: de horas a das; media: de das a semanas; tarda: de semanas a

meses/ aos.
Tabla 7. Biomarcadores de tiempo, tipo de respuesta, nivel de organizacin
biolgica al que pertenecen y sus niveles de deteccin (Vioque Fernndez A,
2008).
BIOMARCADOR
RESPUESTA
NIVEL DE
OCURRENCIA
NIVEL DE
1
BIOLGICA
ORGANIZACI
DETECCIN
N
Dao al DNA
Formacin de
Molecular
Temprana
Bajo
Aductos
Metabolitos
Xenobiticos
Molecular
Temprana
Bajo
Enzimas
Defensa contra
Temprana
Moderado
Antioxidantes
estrs
Molecular
oxidativo
Colinesterasa
Inhibicin
Molecular
Temprana
Moderado

Biosntesis de
Hemo
Otras
actividades/
relacin AMPATP/ relacin
RNA-DNA
Aberraciones
cromosmicas
Estabilidad
lisosomas/
necrosis/
genotoxocodad
Inmunosupresi
n/ Tumores
Inmunocompret
encia
Transformacin
celular
Fecundidad/
Comportamient
o
ndices de
condicin
Mortalidad de
individuos
Diversidad

enzimtica
Porfirianas

Molecular

Media

Moderado

Disfuncn
metablica

Molecular

Temprana

Moderado

DNA anormal

Subcelular

Alto

Homeostasis,
mortalidad
individual

Subcelular

Mediana/
tarda
Tarda

Homeostasis
mortalidad
individual
Fagocitosis

Celular

Tarda

Alto

Celular

Tarda

Alto

Necrosis/neopl
asia
Cambios en la
Reproduccin

Celular/ Tisular

Tarda

Alto

Organismo

Tarda

Alto

Variacin en
tasas de
crecimiento
Cambios en la
poblacin
Disminucin de
la diversidad

Organismo

Tarda

Alto

Poblacin

Tarda

Alto

Comunidad

Tarda

Alto

Alto

Por ltimo, es importante mencionar los criterios que se han de seguir

para la eleccin de un biomarcador. En primer lugar, el cambio biolgico
ha de deberse nicamente a la presencia de contaminantes, de ah que
sea necesario tener en cuenta la variabilidad debida a factores tales
como la poca del ao, el sexo o la temperatura a la hora de obtener
una buena medida. En segundo lugar, este cambio biolgico debe estar
relacionado con un efecto adverso de algn aspecto de la bioqumica o
fisiologa del animal, teniendo un tiempo de respuesta corto y abarcando
un rango que incluya tanto las condiciones ptimas como las letales
(Montero Torreiro MF, 2000).

2.1.8. ESTRS OXIDATIVO

El desbalance entre la generacin y la neutralizacin de las EROs por
mecanismos antioxidantes en un organismo se conoce como

estrs

oxidativo.
El metabolismo bsico en organismos aerobios envuelve la produccin
de radicales libres de oxgeno y especies reactivas no radicales (EROs).
Los organismos vivos usan los radicales libres y EROs tales como el
anin radical superxido (O2.-), perxido de hidrgeno (H2O2), radicales
perxilo (ROO.), xido de nitrgeno (NO.), entre otros. La produccin
regulada de radicales libres en organismos avanzados para mantener la
homeostasis redox es esencial mantener la salud fisiolgica de los
organismos. Durante este proceso metablico, una pequea proporcin
de radicales libres (2-3%) puede escapar del mecanismo antioxidante
del escudo protector causando daos oxidativos a los componentes
celulares.
Los radicales libres del oxgeno y nitrgeno son esenciales en el control
fisiolgico del funcionamiento celular en los sistemas biolgicos, y son
continuamente producidos en clulas vivas. (Aguilar Snchez J, 2009).
2.1.8.1

Especies

Reactivas

de

Oxigeno

(EROs),

Especias

Reactivas de Nitrgeno (ERNs)

La

toxicidad

del

oxgeno

se

denominados radicales libres

responsables

de

la

lesin

explica

por

la

produccin

de

los

del oxgeno, altamente reactivos y

e

incluso

de

la

muerte

celular

en

circunstancias patolgicas. Adems de las especies reactivas de oxigeno

(EROs), hay muchas otras molculas que pueden ser origen de especies
reactivas, como las derivadas del nitrgeno (Tabla 8) (Box Centeno,
2008).

Tabla 8. Principales especies activas del oxgeno y de nitrgeno relacionados

con el estrs oxidativo (Box Centeno, 2008).

ESPECIES REACTIVAS DE OXGENO

Radicales
O2- Anin Superxido
OH Radical Hidroxilo
HO2 Radical hidroxiperoxilo
ROO Radical peroxilo
RO Radical alcoxilo

No Radicales
H2O2 Perxido de Hidrogeno
1
O2 Oxigeno singulete

ESPECIES REACTIVAS DE
NITROGENO
NO Oxido ntrico
NO2-Dixido de nitrgeno

NOCl Hipoclorito
ONOO- Peroxinitrito
HNO2 Acido nitroso
NO+ Catin nitrosilo
N2O4Tetroxido de dinitrgeno
ONOO-Peroxinitrito
ONOOH Acido peroxinitroso
NO2+ Catin nitrilo
R-OONO Alquil- peroxinitritos
N2O3 Trixido de dinitrogeno

Debido a que las EROs se generan de forma continua, es esencial una

regeneracin

de

las

defensas

antioxidantes

para

mantener

la

homeostasis celular (Fig. 6) (Packer 1997).

Figura.6 Principales especies reactivas de oxgeno y enzimas antioxidantes

(Box Centeno, 2008)

En los seres vivos, en condiciones normales, las clulas metabolizan la

mayor parte del oxgeno, incluso el agua sin la formacin de
intermediarios txicos. Sin embargo una parte de este oxigeno genera
EROs mediante la adicin sucesiva de de electrones al oxigeno
molecular (Livingstone, 2001).
En las clulas sanas, las EROs son metabolizadas por las enzimas
antioxidantes especficos, entre los ms importantes de las cuales son la
catalasa (CAT), la glutatin peroxidasa ( GPX) , y la superxido
dismutasa (SOD ) (Ochoa DM et al., 2008 ; Aras et al, 2009).

La

actividad de estas enzimas junto con el dao ejercida por la peroxidacin

lipdica (LPO) se puede evaluar y cuantificado a travs de biomarcadores
que representan las respuestas a o alteraciones por exposicin a
contaminantes

en

varios

organizacional

niveles:

bioqumicos,

fisiolgicos, morfolgicos e histopatolgicos. La evaluacin en diferentes

niveles pueden proporcionar una evaluacin completa de los efectos de
xenobiticos en la vida silvestre, dando una visin general de una salud
en el ecosistema (Cazenave et al., 2009).
2.1.8.2 SISTEMAS ANTIOXIDANTES
Los

seres vivos disponen de un complejo sistema antioxidante que

incluye compuestos y enzimas antioxidantes de vital importancia para

eliminar las EROs y reducir el dao celular (Clarkson PM et al., 2000). El
sistema antioxidante est formado por antioxidantes endgenos

que

pueden ser enzimticos, no enzimticos y antioxidantes exgenos. Los

seres vivos generan EROs de forma continua, por lo que es necesaria la
permanente generacin de las enzimas antioxidantes para mantener la
homeostasis. Estos antioxidantes actan reduciendo las EROs, tanto en
espacios intracelulares como extracelulares. Los antioxidantes actan de
diferentes maneras reduciendo las EROs:

Reduciendo las concentraciones locales de oxgeno libre.

Quelando

prooxidantes.
Eliminando
las

transformndolas en sustancias menos activas.

Previniendo la formacin de radicales libres o evitando la

iones

metlicos
especies

inactivando

reactivas

sustancias

de

oxgeno

transformacin de las formas ms reactivas en formas ms

activas.
Reparando el dao oxidativo e incrementando la eliminacin de
molculas daadas.

Las enzimas antioxidantes (Tabla 9) son los principales responsables de

la transformacin de las EROs en especies no reactivas y la reparacin
de los posibles daos de la

oxidacin. Los enzimas antioxidantes

primarios encargados de eliminar un tipo concreto de ROS incluyen la

superxido dismutasa (SOD), glutatin peroxidasa (GPX) y la catalasa
(CAT). Es tambin muy importante la participacin de la glutatin
reductasa (GR) que es la responsable de regenerar la glutatin para que
pueda actuar la GPX (Box Centeno, 2008).
Tabla 9. Tipos de antioxidantes y mecanismo de accin (Reyes vila A, 2010).
Tipo de
Antioxidante
Primarios

Mecanismo de accin

Ejemplos

Previenen la formacin

*La GPX: Convierte al H2O2 y los

de

perxidos

nuevos

libres

(RL),

lipdicos

los

inofensivas.

convierten

en

*La enzima catalasa

molculas

menos

en

molculas

*La glutatin reductasa

perjudiciales antes de

*Protenas que se unen a ferritina y

que

tranferrina

reaccionen,

evitando

Secundarios

radicales

limitando

la

formacin

biodisponibilidad de Hierro para formar

de RL a partir de otras

el radical .OH e impide que acte como

molculas

catalizador de las reacciones fe Fenton

Capturan

la

los

RL

y Haber- Weiss
*Vitamina E o alfa tocoferol

evitando la reaccin en

*Vitamina C o cido ascrbico

cadena

*Beta caroteno

Terciarios

Reparan
biomolculas

las
daadas

por los RL

*Estrgenos
Enzimas
reparadoras
(endonucleasas,

del

ADN

exonucleasas).

La

metionina sulfxido reductasa.

2.1.8.2.1. Superxido dismutasa (SOD)

Esta enzima es la responsable de la detoxificacin del anin superxido.
Se trata de una metaloprotena ubica que cataliza la desproporcin del
anin superxido en perxido de hidrgeno y oxgeno molecular. Ejercen
un papel protector en las clulas de los organismos vivos. El anin
superxido es una especie muy txica generada intermediariamente o
como producto de descomposicin incompleta de oxgeno y agua. ste
llega al sitio activo a travs del que se llama mecanismo de gua
electrosttica (residuos de aminocidos cargados positivamente cerca
del sitio activo). La SOD existe en dos formas en la clula:
1. En la membrana mitocondrial la SOD est presente como una
estructura que contiene manganeso.
2. En el citoplasma, la cobre-zinc citoslica el cobre y el zinc son los
principales metales en la estructura de la SOD (Aguilar Snchez J.2009).
Existen evidencias de que la enzima SOD acta en el estado inicial de la
oxidacin. La presencia de esta en ambos lugares (mitocondria y
citoplasma) asegura que gran cantidad del superxido sea convertido en
perxido de hidrgeno (Fig. 7) (Box Centeno, 2008).
+
SOD H 2 O 2 +O 2
.+ 2 H
2O 2

Figura 7. Reaccin de enzima Superxido Dismutasa (Box Centeno, 2008).

2.1.8.2.2. Catalasa (CAT)

Es la enzima encargada de catalizar la descomposicin del perxido de
hidrgeno en agua y oxgeno molecular, de una manera independiente a
la glutatin (Fig. 8).
2 H 2 O
2 CATALASA 2 H 2 O+O 2

Figura 8. Reaccin de enzima Catalasa (Box Centeno, 2008).

Estas enzimas antioxidantes han sido propuestas como biomarcadores

de contaminacin medida por estrs oxidativo y su induccin como una
respuesta especifica ante la exposicin a contaminantes (Ochoa et al.,
2008).

Figura

9.

Sitio

de

accin

de

las

principales

defensas

enzimticas y principales consecuencias toxicolgicas

antioxidantes

del ataque de los

radicales libres (Ochoa et al., 2008).

2.1.8.2.3. Glutatin peroxidasa (GPX)

De naturaleza proteica es un miembro de la familia de las peroxidasas,
que se localizan en: citosol (eritrocitos), mitocondrias, lisosomas

(neutrfilos, macrfagos y otras clulas del sistema inmune). Posee la

capacidad antioxidante para destruir directamente las ERO, cataliza la
reduccin de H2O2 o de hidroperxidos orgnicos a lipoperxido (L-OOH)
(Lpez Coln RI, 2008 ). Es la responsable de la reduccin del perxido de
hidrgeno en agua y de hidroperxidos orgnicos a alcohol usando el
glutatin reducido (GSH)

como donador de electrones (Fig.10) (Box

Centeno, 2008).
2GSH + H 2 O 2
GPX GSSG+2 H 2 O

2GSH + ROOH GSSG+ ROH

Figura 10. Reaccin de enzima Glutatin Peroxidasa (Box Centeno, 2008).

La reaccin catalizada mediante la enzima glutatin peroxidasa usa

como sustrato

glutatin reducido (GSH) y se forma glutatin oxidado

(GSSG). Para que los

mecanismos de detoxificacin de ROS sigan

funcionando es necesario reciclar el GSSG y volver a tener GSH para

que la GPX pueda seguir eliminando H 2O2 y ROOH. La enzima encargada
de transformar el GSSG en GSH (Fig.11) es la glutatin reductasa que
cataliza la siguiente reaccin:
+
GSSG+ NADPH
GR 2GSH + NADP
Figura 11. Reaccin de enzima Glutatin Reductasa (Box Centeno, 2008).

2.1.9. Dao oxidativo

Dentro de las principales lesiones asociadas con el ataque de estos
radicales se encuentra la oxidacin de las membranas celulares
(lipoperoxidacin, oxidacin a protenas, oxidacin a cidos nuclecos y
alteracin del estatus celular redox (Ochoa et al., 2008).
2.1.9.1

Peroxidacin lipdica (LPO)

Se ha reportado como uno de los efectos de la accin toxica de

contaminantes ambientales, que conduce a perdida de funcin celular
bajo condiciones de estrs oxidativo.

La peroxidacion

lipidica puede

darse en los lpidos que se encuentran en la membrana celular, hecho

que puede alterar la cohesin, fluidez, permeabilidad y funcin
metablica, adems de conducir una inestabilidad de la membrana y
consecuente dao y muerte celular.
Dicho dao proviene de una reaccin en cadena cuyos productos
secundarios son capaces de inactivar enzimas, reaccionar con grupos
especficos de protenas e incluso interactuar con el ADN celular. Los
cidos grasos poliinsaturados (PUFA) son sustratos afines para la
peroxidacin lipdica y su susceptibilidad aumenta a medida que se
eleva el nmero de enlaces insaturados. La peroxidacin lipdica se inicia
por la sustraccin de un tomo de hidrogeno de un grupo metileno (CH2-) en el radical lipidico (L). Posteriormente se genera un dieno
conjugado que reacciona rpidamente con el O 2para dar origen a un
radical peroxilo (LOO) y se forma hidroperxido lipidico (LOOH) y un
nuevo L. Los hidroperxidos lipdicos pueden reaccionaron algunos
complejos de metales de transicin para dar origen a los radicales
alcoxilo (LO). Adicionalmente el LOOH puede ser descompuesto en
varias especies reactivas incluyendo aldehdos como el malondialdehdo
(MDA), alcanos, epxidos lipdicos y alcoholes, la mayora de los cuales
son txicos y mutgenos activos (Fig. 4). Los radicales peroxilo pueden
reaccionar con compuestos de hierro y sustraer tomos de hidrgeno
de otras fuentes como ADN y protenas para formar nuevamente el
producto primario de la oxidacin y de esta manera perpetuar la
reaccin (Ochoa et al., 2008).
LH + OH L + H2O Radical lipdico
L + O2 LOO Radical perxilo
LOO + LH L + LOOH Hidroperxido lipdico
LOOH + Fe2+ Fe3+ + OH + LO Radical alcxilo

LOO + Fe3+ Lpido-O2- + H + Fe2+

Figura 12. Reacciones de peroxidacion lipdica (Ochoa et al., 2008).

2.1.9.4.2. Oxidacin de las protenas

Las reacciones de oxidacin de las protenas resultan en la oxidacin de
las cadenas laterales de aminocidos particularmente con grupos tiol (S)
los cuales son transformados a disulfuros, cido sulfenlico y ciertos
aminocidos aromticos. Esto conduce a una alteracin en su estructura
y funcin como en los puentes de hidrgeno de la estructura secundara
de las protenas.
El OH puede remover protones de los grupos metileno de los
aminocidos llevando a la formacin de carbonilos los cuales tienden a
ligar aminas de las protenas o unirse covalentemente al ADN causando
un entrecruzamiento. La induccin de la formacin de grupos carbonilo
de las protenas en peces es identificada como un potencial biomarcador
de

estrs

oxidativo

que

permite

su

aplicacin

en

diversas

investigaciones (Ochoa et al., 2008).

2.1.9.4.3 Oxidacin de cidos nucleicos
Los cidos nucleicos son molculas ricas

en electrones que pueden

unirse covalentemente a contaminantes electroflicos conduciendo a la

oxidacin

fragmentacin

de

desoxirribosas,

ruptura

entrecruzamiento de las cadenas de ADN y modificacin de las bases

nitrogenadas (sitios apurnicos). La ms importante modificacin del
ADN despus del ataque por radicales libres

y ms usado como

biomarcador de estrs oxidativo y genotoxicidad en el organismo vivo

es el 8-hidroxi-2-deoxiguanosina (8-OHdG) (producto de la hidroxilacion
de la guanosina. Debido a su relativamente alta movilidad, los peces en
general se consideran los organismos ms viables para evaluar el efecto
de la contaminacin en los sistemas acuticos (van der Oost et. al,
2003 ) .

Tambin pueden generar una respuesta de estrs que involucra a todos

los niveles de la organizacin, desde el celular a la nivel individual y
poblacional (exposicin crnica) (Iwama , et al., 2004 ) .
El entendimiento de los mecanismos por los cuales el estrs oxidativo
genera sus efectos es un tema de gran importancia al momento de
identificar posibles biomarcadores que indiquen

los efectos de la

exposicin de los organismos acuticos ante contaminantes. Los efectos

agudos de estrs oxidativo pueden servir como una seal de alarma de
exposiciones

tempranas

al

contaminante

de

las

posibles

consecuencias que se relacionan con daos celulares posteriores

(Ochoa et al., 2008).

3. ANTECEDENTES
El conocimiento en el tratamiento de aguas es un tema que en ltimas
dcadas ha sido centro de mltiples investigaciones, con la finalidad de
preservar un recurso vital como lo es el agua.
La contaminacin de cuerpos de agua ha requerido la intervencin
humana para preservarla; un ejemplo es la creacin de plantas de
tratamiento en las zonas de descarga de las presas de almacenamiento.

La problemtica en torno a la contaminacin del agua ha conllevado al

establecimiento de legislacin desde aos remotos hasta la actualidad.
En Mxico se ha creado un marco normativo que se encarga de regular
las descargas de aguas residuales a los cuerpos receptores a travs de
las siguientes normas:
Tabla 10. Normas Oficiales Mexicanas, Cronologia

Fecha
Acontecimiento
Norma Oficial Mexicana NOM- Establece los lmites
001-Semarnat-1996

mximos

permisibles de contaminantes en
las descargas de aguas residuales

en aguas o bienes nacionales.

Norma Oficial Mexicana NOM- Establece los lmites mximos
002-Semarnat-1996

permisibles de contaminantes en
la descarga de aguas residuales a
los

sistemas

de

alcantarillado

urbano o municipal.
Norma Oficial Mexicana NOM- Establece los lmites
003-Semarnat-1997

mximos

permisibles de contaminantes para

las aguas residuales tratadas que

se resen en servicios pblicos.

Norma Oficial Mexicana NOM- Establece las especificaciones y
004-Semarnat-2001

lmites mximos permisibles de

contaminantes

en

bioslidos

para

aprovechamiento

lodos

y
su

disposicin

final.
La preocupacin por las descargas de las aguas residuales y sus efectos
al medio ambiente ha dado lugar a la promulgacin de leyes como la Ley
General del Equilibrio Ecolgico y la Proteccin al Ambiente publicada el
28 de enero de 1988 y la Ley de Aguas Nacionales publicada el 1 de

diciembre de 1992, que establecen la necesidad de prevenir y controlar

la contaminacin del agua y proteger los recursos hdricos.
En este mismo sentido, al inicio de cada nueva administracin del
Gobierno en Mxico, se formula un Programa Nacional Hdrico
alineado al Plan Nacional de Desarrollo, el Programa Nacional de
Infraestructura, y dems programas que busquen la preservacin y
aprovechamiento sustentable de los recursos hdricos.
No obstante, se foment el desarrollo de instrumentos legales,
econmicos y tecnolgicos que favorecieron y estimularon el reso del
agua residual tratada, especficamente en aquellas actividades en las
que no se requiere agua de primer uso
Conforme a lo descrito anteriormente y a la legislacin en la actualidad
ha sido necesaria la realizacin de estudios de impacto ambiental.
Hay enormes desafos en el suministro de agua de alta calidad a las
personas viven en megaciudades. Un ejemplo de esto se puede
encontrar en la Ciudad Mxico, donde 21.4 millones de personas viven
en una zona metropolitana de 8000 km2. Los requerimientos de agua
para la ciudad se estima en 70 m 3/s en promedio y tal demanda se
satisface utilizando tanto la superficie y el agua subterrnea tomada de
la cuenca de la Ciudad de Mxico, as como de otras cuencas
circundantes donde el agua de fuentes superficiales y subterrneas
tiene que cumplir con los 44 parmetros fsicoqumicos y biolgicos de
calidad establecidos por la ley con el fin de ser considerado apto para
consumo humano. Sin embargo, estas normas no incluyen el los
llamados microcontaminantes orgnicos, tales como las sustancias
farmacuticas activas, productos de cuidado personal, plastificantes, y
muchos otros cada da los productos de consumo, as como su potencial
degradacin

subproductos.

Estudios

de

monitoreo

previos

han

evidenciado la presencia de microcontaminantes orgnicos en aguas

superficiales y subterrneas en las inmediaciones reas urbanas (Loos et
al, 2009; Osenbrck et al., 2007; Vulliet, Cren-Oliv, 2011).

El ambiente acutico depende de los cuerpos de agua para realizar sus

ciclos biolgicos, sin embargo estos pueden almacenar contaminantes
cuyos efectos de tipo biolgicos, no siempre son observados en tiempos
cortos sino hasta que la poblacin es afectada o se producen cambios de
manera importante en el ecosistema.
Durante el ao 2008, Siemens y colaboradores, realizaron en el Valle del
Mezquital, Mxico dentro de los sistemas de riego de aguas residuales
utilizando de diversos sitios
mezclas de

seleccionados, empleando

slidos en los cuales se realiz la

de las aguas

el test sobre la

introduccin de concentraciones ambientales (EICs), de medicamentos

en

base

al

mtodo

de

cromatografa

lquida

acoplada

espectroscopia de masas considerando biotransformacin, volumen

de distribucin y

uso ms comn,

por personas que se encuentran

dentro del rea Metropolitana de la Ciudad de Mxico, dentro de la cual

se identificaron

concentraciones superiores al lmite de 1g/L de

timetoprima, eritromicina, naproxeno, ibuprofeno, y diclofenaco segn la

Administracin de medicamentos y alimentos (FDA).
Del mismo modo se encontraron concentraciones ms pequeas de
claritomicina, clindamicina, metoprolol, sulfasalazina, bezafibrato y
gemfibrozilo

tomando en cuenta sobre los

medicamentos con iones

aninicos de sustancias activas son mviles en los suelos arcillosos del

Valle

del

Mezquital

muestran

poca

eliminacin

durante

el

almacenamiento, mientras que los compuestos catinicos o neutros se

conservan de manera eficiente.
La acumulacin y el potencial de lixiviacin de algunos medicamentos
del tipo cidos (cido clofbrico, ibuprofeno, gemfibrozilo, naproxeno,
ketoprofeno,

diclofenaco

carbamazepina)

as

como

disruptores

endocrinos (4-nonilfenol, triclosan y bifenol A) son parte de un estudio

realizado en las aguas de irrigacin provenientes de aguas residuales
durante el 2010, en el Valle de Tula, Mxico por Gibson y colaboradores.
Como parte del estudio mencionado se realiz el muestreo de slidos de

caracterstica arcillosa en sitios seleccionados de manera especfica del

uso de la red de distribucin del agua de riego, mediante el uso de la
tcnica cromatografa lquida acoplada a
dando

conocer,

que

existen

bajas

espectroscopia de masas
concentraciones

de

los

medicamentos de acuerdo al lmite de deteccin, a excepcin de la

carbamazepina la cual se detect de manera considerable mostrando un
potencial de contaminar las aguas subterrneas, mencionando as
estudios de este tipo de aguas.
El uso de biomarcadores en el diagnstico de alteracin de ecosistemas
y la exposicin presenta ventajas que detectan efectos inducidos por
mezclas complejas de contaminantes as como fciles y econmicos,
uno de ellos corresponde al uso de biomarcadores de estrs oxidativo
llevando a cabo un monitoreo y caracterizacin de contaminantes en
cuerpos de agua, utilizando a los peces como bioindicadores mostrando
el dao producido nivel bioqumico, sobre rganos y tejidos de infinidad
de especies, reportados alrededor del mundo es una herramienta eficaz
y de calidad.
Estos se describen a continuacin:
En el ao de 1999 Ocampo, describe un biomarcador haciendo mencin
en su estudio al estrs oxidativo, el cual es evaluado por el aumento o
la

disminucin en algunas

modificaciones en las

variables

bioqumicas, as como

por

respuestas fisiolgicas y por la imagen de las

clulas y los tejidos. Los cambios en todos estos niveles de la

organizacin biolgica pueden indicar:
a) Lesiones de la clula
b) Prdida de la homeostasis
c) Mostrar una respuesta compensatoria debido a la excitacin, miedo o
dolor
d) Demostrar un aumento en la sntesis de protenas especficas de
efecto detoxificante

e) Indicar una funcin inmune alterada o deprimida; en este sentido, el

conocimiento de los mtodos de evaluacin de estas variables son de
primera importancia, sobre todo al relacionar los resultados con efectos
clnicos o con efectos reproductivos.
Por tanto vienen estudios relacionados con estrs oxidativo en peces,
denotando el estudio sobre tejidos los cuales proveen de gran ayuda en
el

uso

de

nuevas

legislaciones

que

ayuden

al

control

de

los

contaminantes encontrados .Desde un enfoque cientfico, las respuestas

del pez sujeto a investigacin se modifican significativamente cuando
existe uno o varios factores del mismo.
En 2008 Ochoa, hace un estudio mediante el cual se ha hallado que los
peces son organismos

sensibles ante los cambios provocados por

agentes inductores de estrs oxidativo. El

entendimiento de los

mecanismos por los cuales el estrs oxidativo genera sus efectos es un

tema de gran importancia.

Demostrando

las defensas antioxidantes

que protegen los sistemas celulares del estrs oxidativo inducido por
xenobiticos.
Peces de agua dulce expuestos a diferentes clases de contaminantes,
como insecticidas organofosforados (diclorvos, azinfosmetil), herbicidas
fenoxiaceticos (2,4-d), piretroides

(deltametrina) o hidrocarburos

aromticos policclicos (fenantreno), mostraron dao tisular por estrs

oxidativo en exposiciones crnicas, as como alteracin en la actividad
de las enzimas antioxidantes, con tendencia al aumento, principalmente
en hgado y branquias, en exposiciones agudas. No obstante, con altos
niveles de contaminacin
verse reducida.

Tomando

dismutasa (SOD), catalasa

la concentracin de dichas enzimas puede

a las enzimas antioxidantes
(CAT),glutatin oxidasa

superxido

(GX) y glutatin

peroxidasa (GPX) as como el dao a nivel de lipoperoxidacion e

hidroperxidos.
Comenzando por la enzimas antioxidantes como la SOD evaluando en
22 especies de peces del amazonas, en los que se encontr que los

niveles de actividad estuvieron cerca de 4 veces por debajo al

compararlos con resultados de estudios hechos en peces, estudios en
Cyprinus carpio y en Ictalurus nebulosus expuestos a concentraciones
subletales de diclorvos, un insecticida organofosforado, demostraron
aumentos en la actividad SOD durante una exposicin aguda en hgado,
corazn y msculo de ambas especies.
La

especie

Cephalus,

proveniente

del

ro

Douro

en

Portugal,

contaminado con una gran variedad de desechos industriales como zinc,

cobre, plomo, PCB, entre otros, se compararon con respecto a su
actividad antioxidante SOD y se encontr que Cephalus mostr con una
mayor actividad de esta enzima transformando ms eficientemente el
O2.
En tanto que se realizaron estudios con la enzima CAT su actividad ha
sido estudiada en diversas especies y muchos de los resultados para
Channa punctatus, Piaractus brachypomus y Oncorhynchus mykiss han
coincidido en el hecho de encontrar una deplecin de la actividad
cuando los ejemplares son expuestos a contaminantes en perodos
agudos; no obstante, su induccin tambin ha sido observada en peces
expuestos a vertientes de desechos industriales; es el caso de Channa
punctatus, Oreochro misniloticus y Cyprinus carpio durante periodos
crnicos de exposicin.
Dentro de los cuerpos de agua en Mxico se encuentran estudios por
medio de los cuales se lleva a cabo en muestras que de acuerdo a sus
caractersticas

muestran

un

decremento

incremento

de

las

concentraciones de acuerdo al tipo de contaminante correspondiente tal

es el caso de los medicamentos por medio de herramientas como el uso
de tcnicas cuantitativas, se han logrado encontrar concentraciones las
cuales nos abren un prembulo dentro del marco normativo para una
mejora en la regulacin de lo que llega a mares, ros, lagos, lagunas y
tambin en ambientes controlados como presas que llevan a plantas de
tratamiento.

Dichas sustancias toxicas han dado a lugar que existen estudios donde
se demuestran los diversos factores de donde provienen he de ah que,
uno de los cuerpos de agua estudiados ha sido presa Madn ubicada en
Tlalnepantla Estado de Mxico dentro de ella se han realizado estudios
del tipo ecotoxicolgicos por medio de los cuales se ha tratado de
encontrar niveles

cualitativos por medio del uso del biomarcador de

estrs oxidativo utilizando especies que se encuentran dentro de la biota

de la presa descrita.
Cyprinus carpio es una de las especies endmicas de dicho lugar
lo que,

por

en el ao 2010 Galar-Martinez y colaboradores, realizaron un

estudio dividiendo en 5 sitios de muestreo para la posterior recopilacin

de agua y sedimentos llevndose a cabo ensayos de toxicidad, incluida
la toxicidad aguda (letalidad) y ensayos de toxicidad subaguda. Los
biomarcadores utilizados en los ensayos fueron lipoperoxidacin (LPX) y
la actividad de las enzimas antioxidantes superxido dismutasa (SOD),
catalasa (CAT) y glutatin peroxidasa (GPX) en el hgado y el cerebro de
dicho organismo de prueba. Estos biomarcadores se evaluaron, es decir,
la carpa con la exposicin crnica in situ a los contaminantes del
yacimiento.
Los resultados muestran que los contaminantes en el agua y los
sedimentos de las diferentes estaciones de muestreo inducen estrs
oxidativo, siendo esta toxicidad ms evidente en las muestras de las
estaciones cercanas al punto de entrada del efluente del

Ro

Tlalnepantla.
Esto puede ser debido a niveles altos de contaminantes, as como el
hecho de que las caractersticas fisicoqumicas de las matrices pueden
favorecer su biodisponibilidad.
Asi mismo Gmez-Olivn y colaboradores,

en el ao 2012 evaluaron la

toxicidad provocada por los sedimentos enriquecidos con paracetamol

en la especie centinela Hyalella azteca mediante pruebas de estrs
oxidativo: lipoperoxidacin,

contenido de protenas carboniladas

actividad de las enzimas antioxidantes: superxido dismutasa, catalasa

y glutatin peroxidasa; los resultados mostraron que la lipoperoxidacin
y

el

contenido

de

protenas

carboniladas

se

incrementaron

significativamente, mientras que la superxido dismutasa, catalasa y

glutatin peroxidasa disminuyeron significativamente con respecto a las
controles.
Posteriormente Islas-Flores
potencial de
lipoperoxidacion

y colaboradores en 2013,

evaluaron el

estrs oxidativo (a travs de biomarcadores como

y actividad de las enzimas antioxidantes superxido

dismutasa, catalasa y glutatin peroxidasa) inducido por el diclofenaco

en cerebro, hgado,

branquias y sangre de

Cyprinus carpio;

los

resultados evidenciaron un aumento estadsticamente significativo de

la lipoperoxidacin en hgado y branquias

principalmente, as como

cambios significativos en la actividad de las enzimas

evaluadas

en

estos

rganos,

con

respecto

los

antioxidantes
controles.

En

consecuencia, la presencia de sustancias txicas en el ambiente provoca

alteraciones en las funciones vitales llevadas a cabo por las branquias y
las alteraciones en la estructura morfolgica de estos rganos ( Poleksic
y Mitrovic - Tutundzic , 1994 ).
Las tcnicas de medicin antes mencionadas

proveen de una

herramienta til para demostrar la presencia de factores causantes de

estrs y con ello su posible prevencin.
Muchas otras variables bioqumicas, fisiolgicas y reproductivas pueden
an coadyuvar ms en este campo de investigacin.
Se han proporcionado logros notables, pero an queda un largo camino
por recorrer. Se estima que aun el 40% de las aguas evaluadas por
estados de la Republica Mexicana todava no cumplen con los
estndares de calidad del agua, sobre todo debido a la contaminacin de
fuentes no puntuales.

4. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

De manera latente el agua siendo un recurso vital, el cual, se ha vuelto
un foco de atencin debido a que existen diversos sectores (social,
agropecuario e industrial), los cuales hacen uso del mismo, es por ello
que no es de extraar, que al paso de los aos y debido al incremento
demogrfico se ha hecho ms demandante el uso de este recurso.
Dicho esto y debido a la necesidad de la misma, se ha hecho uso de ella
de manera errnea con respecto a todo lo que implica su uso, abuso,
contaminacin, llevndola as a una falta de leyes que regulen dichos
estos aspectos.

En el caso de Mxico,
lleven

se ha buscado la realizacin de estudios que

implementar

mtodos

eficaces

contaminantes, que garanticen el riesgo mnimo

de

eliminacin

en los

de

cuerpos de

agua como es el caso de Presa Madn ubicada en Tlalnepantla, Estado de

Mxico, dentro de la cual se encuentra una planta potabilizadora, ella
abastece de agua

a diversos municipios la cual

aunque ya

se ha

evaluado el efecto txico, en diferentes bioindicadores como organismos

microinvertebrados,

y macroinvertebrados, la caracterizacin de la

toxicidad no ha sido suficiente.

Es por ello que en este estudio, se plantea caracterizar la toxicidad en
cinco sitios de muestreo seleccionados con respecto a la descarga,
utilizando como especie bioindicadora a Cyprinus carpio, empleando
biomarcadores de estrs oxidativo, para demostrar el efecto txico, as
como determinar la respuesta antioxidante del mismo.

5. JUSTIFICACION
Existen pocos estudios en Mxico referentes al impacto de los tipos de
descargas, sobre ecosistemas acuticos, es por ello que

como

consecuencia de esto no existe una legislacin que regule la descarga

de residuos.

Por lo que estudios del tipo ecotoxicolgicos,

haciendo

uso de

bioensayos arrojaran resultados donde se mostrara el dao producido

sobre Presa Madn ubicada sobre el rio Tlalnepantla, el pueblo de Madin
y los municipios de Naucalpan de Jurez, Atizapn de Zaragoza y
Tlalnepantla de Baz, Estado de Mxico;

utilizando bioindicadores a

diferentes niveles trficos los cuales se utilizaran para denotar el grado

de dao que se est produciendo sobre presa Madin.
Las especies acuticas son consideradas como buenos bioindicadores de
contaminacin ya que en estudios recientes dichas

especies son

capaces de bioconcentrar diversos tipos de contaminantes,

los cuales

al captar descargas domesticas de pobladores del Viejo y Nuevo Madin,

as como los desechos arrastrados por el cauce del rio Tlalnepantla ,
haciendo visible que a su alrededor se encuentran tiraderos de basura,
dando evidencia que la degradacin es perceptible por lo que dichos
factores que no tienen un control estn produciendo dao.
Investigaciones ya realizada en dicha presa ha encontrado metales
pesados y

frmacos en concentraciones traza, en especies como

Cyprinus carpio la cual es considerada de inters comercial haciendo

referencia que su consumo a largo plazo acarreara problemas de diversa
ndole. En tanto se llevar a cabo la exposicin de Cyprinus carpio al
agua proveniente de los diferentes sitios de muestreo de la presa Madin,
produciendo un efecto txico sobre las branquias de este organismo,
evaluado a travs del estrs oxidativo

el cual usara un mtodo por

medio del cual se emplearan datos qumicos como herramienta para

producir respuestas a

nivel biolgico, dando lugar a la obtencin de

datos que nos permitan divisar sus efectos, adems de daos

posteriores producidos en la actualidad sobre presa Madn.

6. HIPTESIS

Al llevar a cabo la exposicin de la especie de inters comercial Cyprinus

carpio al agua proveniente de los diferentes sitios de muestreo de la
presa Madn se producir un efecto txico sobre las branquias de este
organismo, evaluado a travs del estrs oxidativo.

7. OBJETIVOS

7.1. OBJETIVO GENERAL

Evaluar la toxicidad producida por los efluentes provenientes de la presa
Madn sobre Cyprinus carpio utilizando como biomarcador al estrs
oxidativo.

7.2 OBJETIVOS ESPECIFICOS

Evaluar el dao oxidativo producido por los efluentes provenientes
de la presa Madin, sobre

Cyprinus carpio utilizando el grado de

lipoperoxidacin, contenido de hidroperxidos y de protenas

carboniladas.
Evaluar la respuesta antioxidante producido por los efluentes
provenientes de la presa Madin sobre Cyprinus carpio utilizando la
actividad de las enzimas superxido dismutasa y catalasa.

8. METODOLOGIA

8.1 DISEO METODOLOGICO

Obtencin, aclimatacin y mantenimiento de

Cyprinus carpio
Obtencin de agua de los cinco sitios de
presa Madn

Exposicin a tiempos de 12,24,48, 72 y 96 h

Determinacin de la toxicidad inducida porlos
efluentes presentes en agua de la presa Madn
sobre Cyprinus carpio

Determinacin del estrs oxidativo

Actividad de la
superxido
dismutasa

ACTIVIDAD
ANTIOXIDANT
E

DAO A
BIOMOLCULAS

Grado de
lipoperoxidac
in

Contenido de
hidroperxido
s
Actividad de la
catalasa

Contenido de
protenas
carboniladas

8.1.1. Organismo de prueba (Cyprinus carpio)

Los organismos de prueba se obtuvieron del centro carpcola de
Tiacaque, Estado de Mxico y se trasladaron al Laboratorio de
Toxicologa Ambiental de la Facultad de Qumica de la Universidad
Autnoma del Estado de Mxico. Para la aclimatacin y mantenimiento
del organismo de prueba se distribuyeron en peceras de vidrio de 120 L
de capacidad en un medio sinttico (174 mg/L de NaHCO 3, 120 mg/L de
MgSO4, 8 mg/L de KCl y 120 mg/L CaSO4.2H2O) de pH 7.5-8.5, a
temperatura ambiente, con aireacin constante, fotoperiodos de luz y
oscuridad natural y alimentados cada tercer da con Purina MR para peces
(Domitrovic, 1997).

Figura 13. rea de preservacin y confinamiento de las especies

bioindicadoras

8.1.2. Preparacin del medio sinttico

Se disolvieron en 2.85 L de agua destilada (o desionizada) 120 mg/L de

MgSO4, 174 mg/L de NaHCO3, 8 mg/L de KCl en el orden descrito. Por
otra parte se agregaron 120 mg/L de CaSO4.2H2O a 150 mL de agua
destilada (o desionizada) en un matraz Erlenmeyer de 250 mL. Se coloc
la solucin a agitacin hasta que el CaSO 4 estuvo completamente
disuelto; se adicion a los 2.85 L de solucin preparados con
anterioridad y se mezclaron perfectamente. Para valorar la calidad del
agua reconstituida, se colocaron 10 carpas juveniles en una muestra
durante 24 h; al trmino de este tiempo no se registraron muertes, por
lo tanto, el agua pudo ser utilizada.
8.1.3.

Caracterizacin

geoclimtica,

seleccin

de

sitios

de

muestreo y colecta de agua

Para la caracterizacin geoclimtica y la seleccin de los sitios de
muestreo, en un estudio previo, se revis la informacin contenida en el
Plan de Desarrollo Urbano del Municipio de Atizapn de Zaragoza (20062012), as como la Carta Urbana, y mapas hidrolgicos de la zona. As
mismo, se realizaron dos visitas al lugar y se recorri el embalse a fin de
observar fsicamente los sitios con mayor problemtica. Dentro de estos
ltimos, se identificaron a los poblados de Nuevo y Viejo Madn, dado
que sus descargas son vertidas directamente a la presa, la planta
potabilizadora y la entrada del ro Tlalnepantla, ya que es el afluente
principal y arrastra desechos desde la Zona Esmeralda. Los sitios
seleccionados fueron: 1) descarga del poblado de Viejo Madn, 2)
descarga del poblado de Nuevo Madn, 3) brazo lateral del embalse, 4)
cortina (sitio cercano a la planta potabilizadora) y 5) afluente o entrada
al embalse del ro Tlalnepantla. El agua fue colectada mediante botellas
de cierre automtico y colocada en frascos de plstico previamente
lavados con cido ntrico, con el fin de evitar contaminacin cruzada y
trasladarla al laboratorio para su tratamiento.

Figura 14. Presa Madn (puntos crticos y sitios de muestreo)

8.1.4. Determinacin de la toxicidad a travs de la evaluacin

del estrs oxidativo
Para el estudio de la toxicidad subletal se emplearon peceras de vidrio
de 40 L de capacidad, que contenan agua proveniente de la presa
Madn; en cada sistema de prueba (incluyendo al testigo) se colocaron
seis organismos. El tiempo de exposicin fue de 96 h; despus del cual,
se sacrific a las carpas y se realiz la diseccin en un bao de hielo
para obtener las branquias, las cuales se pesaron, se homogenizaron en
2 mL de PBS (pH 7.3) y se centrifugaron a 12500 rpm y 4C durante 15
min para la obtencin del sobrenadante. Las pruebas bioqumicas se
realizaron con el sobrenadante, excepto al evaluar el grado de
lipoperoxidacin, donde se us el homogenizado. El ensayo se realiz
por triplicado.

Figura 15. Sistemas utilizados para la prueba de toxicidad

subletal
8.1.4.2. Determinacin del grado de lipoperoxidacin (Mtodo de
Buege y Aust, 1978)
A 100 L de la muestra (sin centrifugar) se le aadi solucin reguladora
tris-HCl 150 mM (pH 7.4) hasta completar 1 mL y se le adicionaron 2 mL
de TCA-TBA (cido tiobarbitrico al 0.375% en cido tricoloroactico al
15%), despus se indujo un choque trmico (con ayuda de un bao
mara) en agua a ebullicin. Se incub a 37C por 30 min. Concluido este
tiempo, se centrifug a 3500 rpm durante 10 min y se determin la
absorbancia a 535 nm. Los resultados se expresaron en mmol de
malondialdehdo/mg de protenas/g de tejido, usando el coeficiente de
extincin molar (CEM) de 1.56 X 105 M-1 cm-1.
8.1.4.3. Determinacin del contenido de hidroperxidos (Mtodo
de Jiang et al. 1992)
A 100L de la muestra (previamente desproteinizada con cido
tricoloroactico al 10%) se le agregaron 900 L de mezcla de reaccin
(FeSO4 0.25 mM, H2SO4 25 mM, naranja de xilenol 0.1 mM e
hidroxitoluenobutilado 4 mM en metanol al 90%). Se incub a
temperatura ambiente durante 60 min. La absorbancia se determin a

560nm. Los resultados se expresaron en nmol de hidroperxido de

cumeno (CHP)/mg de protenas/g de tejido, usando el CEM de 4.3 X 10 4
M-1 cm-1.
8.1.4.4.

Determinacin

del

contenido

de

protenas

carboniladas(Mtodo de Levine et al, 1990; Parvez y Raisuddin, 2005;

Burcham, 2007). A 100 L del sobrenadante se le adicionaron 150 L de
2,4-dinitrofenilhidrazina (DNPH) 10 mM en HCl

2M. Se incub a

temperatura ambiente durante 1 h en oscuridad. Despus de la

incubacin se le adicionaron 500 L de cido tricloroactico al 20% y se
dej reposar durante 15 min a 4C. El precipitado se centrifug a 11000
rpm durante 5 min. El botn se lav varias veces con etanol-acetato de
etilo 1:1 y posteriormente se disolvi en 1 mL de una solucin 6 M de
guanidina (pH 2.3) y se incub a 37C durante 30 min. La absorbancia
se determin a 366 nm. Los resultados se expresaron en mmol de
carbonilos reactivos (C=O)/mg de protenas/g de tejido, utilizando el
CEM de 21000 M-1 cm-1.
8.1.4.5.

Determinacin

de

la

actividad

de

la

superxido

dismutasa(Mtodo de Misra y Fridovich, 1972)

Se colocaron 40 L del homogenizado en una celda de cuarzo y se
adicionaron 260 L de solucin amortiguadora de carbonatos (carbonato
de sodio 50 mM y EDTA 0.1 mM) a pH 10.2. Posteriormente se agregaron
200 L de adrenalina 30 mM y se determin la absorbancia a 480 nm a
los 30 s y 5 min. Los resultados se expresaron en mmol de SOD/mg de
protenas/g de tejido, usando el CEM de 21 M-1 cm-1.
8.1.4.6. Determinacin de la actividad de la catalasa (Mtodo de
Radi et al, 1991)
20 L del sobrenadante fueron colocados en una celda de cuarzo, se le
agregaron 280 L de solucin amortiguadora de aislamiento (sucrosa 0.3
M, EDTA 1 mM, HEPES 5 mM y KH 2PO4 5 mM) y 200 L de una solucin

de H2O2 20 mM. Posteriormente se realizaron las lecturas de absorbancia

a 240 nm, a los 0 y 60 s. Los resultados se expresaron en mmol de
H2O2/mg de protenas/g de tejido, usando el CEM de 0.043 mM-1 cm-1.
8.1.4.7. Determinacin del contenido de protenas (Mtodo de
Bradford, 1976)
A 25 L del sobrenadante se le agregaron 75 L de agua desionizada y
2.5 mL del reactivo de Bradford (0.05 g de azul de Cummassi, 25 mL de
etanol al 96% y 50 mL de H3PO4 en 500 mL de agua desionizada). Se
agitaron los tubos, se dejaron reposar por 5 min y a continuacin se
determin la absorbancia a 595 nm. Los resultados se extrapolaron en
una curva estndar de albmina (ver Tabla 2).
Tabla 11. Curva tipo para la determinacin de protenas

Tubo

Albmina

Agua desionizada

1
2
3
4
5
Blanco

(L) *
10
25
50
75
100
0

(L)
90
75
50
25
0
100

* de una solucin de 1 g/mL

8.2 Anlisis estadstico

Los datos obtenidos en las determinaciones fueron sometidos a un

anlisis de varianza unifactorial (ANOVA) y las diferencias de las medias
de cada grupo fueron comparadas contra el testigo correspondiente,
utilizando el mtodo de Bonferroni para comparaciones mltiples contra
un testigo, con una p0.05.

9. RESULTADOS
Los sitios de muestreo se describen en la figura 14, nicamente se
denotaron como SM1, SM2, SM3, SM4 y SM5 respectivamente.
9.1 Determinacin del contenido de hidroperxidos
La concentracin de hidroperxido de cumeno (CHP) generada en el
testigo y en los organismos expuestos a los efluentes provenientes de la
presa Madn se muestra en la Figura 16. De manera general se puede
observar que no hay diferencias significativas con respecto al testigo (P
< 0.05).

Figura 16. Contenido de hidroperxidos en Cyprinus carpio expuesto al agua

de los diferentes sitios de muestreo (SM), de la presa Madn a las 12, 24, 48,
72 y 96 horas.

* diferencia estadsticamente significativa con respecto al testigo.

Pruebas de ANOVA y Bonferroni (P < 0.05)

9.2 Determinacin del grado de lipoperoxidacin

La concentracin de malondialdehdo (MDA) generada en el testigo y en
los organismos expuestos a los efluentes provenientes de la presa Madn
se muestra en la figura 17. De manera general se puede observar un
incremento en el SM1 de 87% a las 96h de exposicin de igual modo en
el SM4 se muestra un porcentaje de 113% a las 12h, con respecto al
testigo (P < 0.05).

Figura 17. Grado de lipoperoxidacin en Cyprinus carpio expuesto al agua de

los diferentes sitios de muestreo (SM),de la presa Madn a las 12, 24, 48, 72 y
96 horas.

* diferencia estadsticamente significativa con respecto al testigo.

Pruebas de ANOVA y Bonferroni (P < 0.05)

9.3 Determinacin del contenido de protenas carboniladas

La oxidacin de protenas generada en el testigo y en los organismos
expuestos a los efluentes provenientes de la presa Madn se muestra en
la figura 18. De manera general se puede observar un incremento en el
SM2 a periodo de exposicin de 12h mostrando un porcentaje de 165%,
en el SM3 se muestran dos porcentajes significativos a la exposicin de
24h el porcentaje es de 68% y de 72h es de 102%, con respecto al
testigo (P < 0.05).

Figura 18. Contenido de protenas carboniladas en Cyprinus carpio expuesto

al agua de los diferentes sitios de muestreo (SM), de la presa Madn a las 12,
24, 48, 72 y 96 horas

* diferencia estadsticamente significativa con respecto al testigo.

Pruebas de ANOVA y Bonferroni (P < 0.05).

9.4 Determinacin de la actividad de la superxido dismutasa

En la figura 19, se presenta la actividad de la superxido dismutasa
originada en el testigo y en los organismos expuestos a los efluentes
provenientes de la presa Madn. De manera general se puede observar
un decremento en Sm4 a un tiempo de exposicin de 48h mostrando un
porcentaje de 75.4% y en el SM5 a las 24h con un porcentaje de
75.66%, con respecto al testigo (P < 0.05).

Figura 19. Actividad de la superxido dismutasa en Cyprinus carpio expuesto

al agua de los diferentes sitios de muestreo de la presa Madn a las 12, 24,
48, 72 y 96 horas

* diferencia estadsticamente significativa con respecto al testigo.

Pruebas de ANOVA y Bonferroni (P < 0.05).

9.5 Determinacin de la actividad de la catalasa

En la figura 20 se presenta la actividad de la catalasa originada en el
testigo y en los organismos expuestos a los efluentes provenientes de la
presa Madn se muestran en la figura 20. De manera general se pueden
observar incrementos en SM1 a las 96h con porcentaje de 386%, en el
SM2 a un periodo de exposicin de 72h muestra porcentaje de 165%, en

el SM3 a las 48h se denota un porcentaje de 138%, en el SM4 a un

periodo de 96h se muestra un incremento del 961%, por ltimo en el
SM5 se muestran a periodos de 48 y 96h con porcentajes de 135 y 287%
con respecto al testigo (P < 0.05).

Figura 20. Actividad de la catalasa en Cyprinus carpio expuesto al agua de los

diferentes sitios de muestreo (SM), de la presa Madn a las 12, 24, 48, 72 y
96 horas

* diferencia estadsticamente significativa con respecto al testigo.

Pruebas de ANOVA y Bonferroni (P < 0.05)

10. DISCUSION DE RESULTADOS

Las especies reactivas del oxgeno (EROs) son una parte poco envidiable
de la vida aerbica. Su concentracin en estado estacionario es un
equilibrio entre la produccin y la eliminacin, proporcionan cierto nivel
de ROS en estado estacionario, son parcialmente formas reducidas de
oxgeno atmosfrico (O2). Siendo tpicamente el resultado de la
excitacin del O2 para formar oxgeno singulete (O21) o de la
transferencia de uno, dos o tres electrones al O 2 para formar,
respectivamente, un radical superxido (O 2-), perxido de hidrgeno
(H2O2) o un radical hidroxilo (HO). En contraste con el oxgeno
atmosfrico, las EROs son capaces de oxidar sin restricciones diversos
componentes celulares y puede conducir a la destruccin oxidativa de la
clula (Mittler, 2002). La dinmica del equilibrio puede ser perturbado
conduciendo al aumento del nivel de EROs y el dao a los componentes
celulares, llamndolo as estrs oxidativo (Lushchak, 2011).
Existen diversos estudios que comprueban que los frmacos pueden
generar estrs oxidativo en especies acuticas el cual ha sido utilizado
en estudios de toxicidad subletal para la comprobacin del dao a nivel
molecular.
Cyprinus carpio es una especie endmica de la presa Madn que, debido
a su naturaleza,

soporta condiciones de temperaturas bajas, tolera

condiciones crticas de oxgeno, altos niveles de pH, amonaco, nitratos,

nitritos y fosfatos (Galar Martnez et.al, 2010).
El aparato branquial de la especie Cyprinus carpio, est constituido por
cuatro pares de holobranquias localizadas en el interior de las cavidades
operculares derecha e izquierda. Los filamentos branquiales estn
tapizados por una gran variedad de clulas, siendo las mas abundantes
las clulas epiteliales de revestimiento, las clulas mucosas as como

tambin denominadas clulas ricas en mitocondrias o ionocitos (Pastor

et.al., 2008).

La oxidacin de los lpidos es el enfoque analtico utilizado ms

comnmente en el campo de la investigacin de los radicales libres,
debido

que muchos

organismos,

especialmente

los

acuticos,

contienen altas cantidades de lpidos con residuos de cidos grasos

poliinsaturados, un sustrato para la oxidacin (Lushchak , 2011).
Varios productos de la peroxidacin de lpidos se utilizan comnmente, y
probablemente, la evaluacin de los niveles de malondialdehdo ocupa
una primera posicin. Lo ms frecuente es que se mide con el cido
tiobarbitrico (Lushchak y Semchyshyn , 2012). Este mtodo no es
especfico, porque el cido tiobarbitrico reacciona tambin con muchos
tipos de compuestos, tales como diferentes aldehdos, aminocidos y
carbohidratos, sin embargo, se aplica el mtodo general para la
evaluacin

de

la

peroxidacin

lipdica

en

diversos

organismos

(Lushchak , 2011) .
Por tanto, durante la LPX, en los cidos grasos poliinsaturados los
dobles enlaces reaccionan con las especies reactivas de oxgeno (EROs),
en particular el radical hidroxilo (HO) y el peroxinitrito (ONOO-), a
travs de un mecanismo de reaccin en cadena. Esto permite la
formacin de hidroperxidos que se degradan a productos de bajo peso
molecular, incluyendo malondialdehdo (MDA). Como puede verse en la
Fig. 16 existe un aumento en el contenido de hidroperxidos (HPC) en el
SM1. Adems, de un incremento del grado de lipoperoxidacin en los
SM1 y SM2, que se muestra en la Fig. 17.

El aumento de la produccin del radical anin superxido es el probable

responsable de los aumentos en LPX y HPC en carpas expuestas al agua
de los distintos sitios de muestreo.
El hierro (Fe), cataliza la reaccin del anin superxido con perxido de
hidrgeno para producir radicales hidroxilo por medio de la reaccin de
Fenton.
Existen diferentes mecanismos que se han propuesto como el medio a
travs del cual induce la formacin de EROs, por ejemplo, el aluminio
(Al)

desplaza

al

hierro

(Fe)

aumentando as de manera

presente

en

intracelular el

diversas

biomolculas,

contenido de Fe y la

promocin de la reaccin de Fenton. Este metal tambin es capaz de

daar la mitocondria y afectar directamente el transporte de electrones
en la cadena respiratoria, En ambos de los casos, la produccin de EROs
se incrementa, lo que explica los aumentos en LPX y HPC en este
estudio.
En contraste, los aumentos en la LPX y el HPC observados en las Figs. 16
y 17 pueden deberse al hecho de que las concentraciones de metales
son superiores a los establecidos por la

norma mexicana sobre los

niveles permisibles de metales pesados para la proteccin de la vida

acutica y el consumo humano (NOM-001-ECOL1996 y NOM-127-SSA11994, respectivamente) y a la presencia de antiinflamatorios no
esteoideos

(diclofenaco,

ibuprofeno

naproxeno)

reportados

por

Gonzlez- Gonzlez et al. 2014 en un estudio previo.

El biomarcador de la peroxidacin de lpidos (LPX) se asocia con el estrs
oxidativo, que resulta de la oxidacin de los lpidos poliinsaturados
debido a la inhibicin de la COX-2 (mecanismo de accin de los AINEs) o
la proliferacin de peroxisomas, donde ocurre la oxidacin.

Aunque el diclofenaco acta principalmente mediante la inhibicin de las

enzimas de la ciclooxigenasa, se ha demostrado que el mecanismo de
diclofenaco inducido por lesin mitocondrial parece implicado en la
generacin de EROs, que resulta en el estrs oxidativo (Gmez- Lechn
et al., 2003).
Sin embargo, la sobreregulacin de las transcripciones de antioxidantes
en los organismos contaminados con frecuencia se confirma por el
aumento de la actividad enzimtica en el hgado, no en las branquias
(Bilbao et al, 2010; Nahrgang et al, 2010b; Regoli et al, 2011b). Esta
discrepancia del tejido dependiente, recientemente

ha demostrado

tambin para el itinerario de biotransformacin; una marcada induccin

de la transcripcin de la fase I y genes de fase II (CYP1A, GST, UGT) se
observ en el hgado y branquias de anguilas expuestas a una mezcla
del complejo PAH , mientras que la actividad de la Etoxiresorufina-Odietilasa (EROD) cataltico mostr una potenciacin similar slo en el
hgado (Regoli et al., 2011b). La capacidad de respuesta molecular y
bioqumica difiere dentro de estos tejidos se ha relacionado con su
diferente capacidad metablica y la maquinaria celular: en comparacin
con el hgado, las branquias tienen una menor capacidad para convertir
una seal transcripcional mucho mayor en la sntesis de protenas,
debido a esto es el contenido ms limitado en trminos de los ribosomas
y retculo endoplsmico.
Adems, un mecanismo de compensacin para el agotamiento de un
antioxidante puede ser representado por la induccin de otra defensa:
de particular relevancia es la mejora de la transcripcin y cataltica de
las enzimas GPX bajo desafo oxidativo grave, cuando la catalasa puede
ser inhibida y tejidos se vuelven crticamente dependiente de GPX para
eliminacin de H2O2 (Regoli et al., 2011a, b).

La formacin de grupos carbonilo resulta de la oxidacin directa de

cadenas laterales de aminocidos por metales o EROs, as como de la
modificacin de protenas por derivados de la oxidacin productos
secundarios, tales como productos de la LPX.
El oxidante peroxinitrito se sabe que induce la oxidacin de protenas y
la nitracin en ausencia de GSH, provocando de este modo la disfuncin
mitocondrial y llevando eventualmente a un dao irreversible y la
prdida severa de trifosfato de adenosina celular.
Los niveles de protenas carboniladas fueron significativamente mayores
dentro del estudio ya que, indica que los peces sostienen estrs
oxidativo como resultado de la exposicin a los metales.
Los metales son conocidos por inducir directamente la formacin de
carbonilos de protenas por medio de reacciones de oxidacin metlica,
las EROs y ERNs pueden eliminar los protones de los grupos metileno en
los aminocidos que conducen a la formacin de carbonilos que tienden
a ligar aminas protecas y tambin inducir dao a los centros
nucleoflicos, oxidacin del grupo sulfhidrilo, disminucin disulfuro, la
fragmentacin del pptido, de modificacin de la grupos proteicos , y la
nitracin de protenas. Estas modificaciones conducen a una prdida de
funcin de la protena.
Las branquias son conocidas igualmente por efectuar el metabolismo
oxidativo de muchos agentes txicos, promoviendo as la produccin de
la ROS responsable de LPX en el presente estudio
De acuerdo con Zelikoff y Wang (1996), los radicales hidroxilo libres y
perxido de hidrgeno, ambos EROs, lo que podra tener efectos

negativos e inducir estrs oxidativo en los organismos. Del mismo modo,

Mittler (2002) tambin indic que la actividad de CAT y SOD aumenta
para eliminar el aumento de EROs, a fin de mantener la produccin de
stas en una concentracin de estado estable en clulas y tejidos.
Adems, los resultados sugieren que los efluentes tambin contienen
compuestos

que

pueden

inhibir

componentes

en

las

enzimas

antioxidantes, por ejemplo, SOD y GST. Las correlaciones entre los

marcadores biolgicos de estrs oxidativo y la genotoxicidad sugieren
que los efectos observados se debieron a los contaminantes que
presentan potencial estrs oxidativo que tambin puede inducir
genotoxicidad.
La SOD es el primer mecanismo en la defensa antioxidante y la principal
enzima responsable de la compensacin de los efectos de ROS, en
particular el ion superxido, que se convierte en perxido de hidrgeno
por SOD con H2O2 es secuestrado posteriormente y degradado a H 2O por
la enzima CAT y GPX respectivamente.
Los aumentos en la actividad de SOD en branquias, fueron inducidos por
liberacin del radical anin superxido.
Como se dijo anteriormente, la actividad SOD aument en el presente
estudio en C. carpio expuesta a metales y AINEs, los principales
contaminantes en la presa Madn, lo que conduce a aumento de la
formacin de perxido de hidrgeno, que puede actuar como una seal
para la bioactivacin de la enzima CAT para convertir este de radicales
libres altamente txicos a compuestos menos txicos.
Inicialmente, pensamos que la prdida de iones de contaminantes
inducida puede ser debido a un mayor estrs oxidativo que podra

causar daos en los tejidos y aumento de la permeabilidad de iones. Sin

embargo, los resultados de dos experimentos argumentan en contra de
esta hiptesis. En primer lugar, la expresin de catalasa y COX-17, dos
enzimas se asocian con un aumento del estrs oxidativo (Craig et al.,
2007).
La Fig. 20 muestra que la actividad CAT aument en SM1, SM2, SM4 y
SM5, estos aumentos pueden ser atribuidas a la capacidad antioxidante
de los organismos para compensar el dao oxidativo debido a H 2O2. Sin
embargo este resultado indica que esta enzima es incapaz de
compensar el dao inducido por EROs.
Los resultados de catalasa para peces expuestos a los productos de
fotodegradacin en diclofenaco mostraron un aumento significativo, lo
que est de acuerdo con el aumento observado en LPX (contenido de
MDA). En efecto, los resultados de LPO son compatibles con el estrs
oxidativo, que afecta a las membranas celulares, lo que fue ms
pronunciado en los organismos expuestos a los subproductos de fotlisis
de diclofenaco. Sin embargo, no se registraron cambios de SOD en los
peces expuestos al diclofenaco irradiado. Otros estudios tambin estn
en conformidad con la toxicidad potencial del diclofenaco, donde los
efectos sobre el retraso del crecimiento en el pez cebra expuestos a
diclofenaco Van de Brandhof y Montforts (2010) una concentracin de
N1.5 mg L-1 as como Hallare et al., (2004) mostraron un retraso en el
momento de la eclosin del pez cebra expuesta (1 y 2 mg de diclofenaco
L-1) y Ferrari et al. (2003) observaron una NOEC de 10 das (a las 4 mg
L-1) de la misma especie (Schwaiger et al., 2004) demostraron que los
efectos a largo plazo como resultado una concentracin sin efecto
observado (LOEC), de 1 a 5 mg de diclofenaco L-1 en la trucha arcoiris.
Por otra parte, los estudios de Hoeger et al. (2005) demostraron que los
residuos de diclofenaco tienen el potencial de afectar adversamente a

varios

tejidos

(branquias

riones)

en

la

trucha

marrn

en

concentraciones cercanas a las que se encuentran habitualmente en

aguas superficiales. Adems, Gonzlez-Rey y Bebianno (2014) hicieron
un estudio con

mejillones expuestos (Mytilus galloprovincialis) a

concentraciones relevantes de diclofenaco (250 ng L-1) por ms de 15

das, que muestran la induccin de la SOD en las branquias y el aumento
de las actividades de CAT y LPO en las glndulas digestivas respecto con
el medio de mejillones, pero los niveles de GST permanecieron sin
cambios. Por lo tanto, los diferentes estudios sugieren que la toxicidad
diclofenaco puede diferir con la especie, tiempo de exposicin y de la
etapa del ciclo de vida.

11. CONCLUSIONES
1.- De acuerdo al estudio existe un dao oxidativo en los

sitios de

muestreo de manera irreversible en branquias de la especie Cyprinus

carpio los cuales se describen a continuacin:
Lipoperoxidacin: Sobre la descarga del poblado de Viejo Madn (SM1),
se muestra un aumento as como en la cortina (sitio cercano a la planta
potabilizadora, SM4).
Protenas Carboniladas: Se encuentra reflejado un aumento significativo
sobre la descarga del poblado del Nuevo Madn (SM2) y sobre el brazo
lateral del embalse (SM3).

2.- De acuerdo al estudio se vio reflejado una modificacin en

las

enzimas antioxidantes estudiadas en los siguientes sitios de muestreo

en branquias de la especie Cyprinus carpio dentro de los cuales existe
un decremento de la enzima superxido dismutasa

en cortina (sitio

cercano a la planta potabilizadora) (SM4) y en el afluente o entrada al

embalse del ro Tlalnepantla (SM5).
En tanto existe un aumento de catalasa y se da sobre los cinco sitios de
muestreo como respuesta al dao oxidativo.
1) Descarga del poblado de Viejo Madn, 2) Descarga del poblado de
Nuevo Madn, 3) brazo lateral del embalse, 4) cortina (sitio cercano a la
planta potabilizadora) y 5) afluente o entrada al embalse del ro
Tlalnepantla.

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